HEMATOLOGIA- PARREÑO

7/28/2019 HEMATOLOGIA- PARREO

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UNIVERSIDADNACIONALMAYOR DESANMARCOS

FACULTAD DE FARMACIA Y BIOQUMICA

2013

Hematologa: Recuento

de Glbulos RojosAnlisis Clnico I

AN L I S I S C L I N I C O I

Profesor Responsable: Q.F. Dr. Juan Parreo TipnAlumna: Fiorella Yahaira Prez Guerrero

Cdigo: 08040106

Ao de Estudio: Quinto

Semestre Acadmico: 2013-I

Da de Laboratorio: Jueves de 10:00 am 14:00pm


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I. INTRODUCCIN

Los glbulos rojos son las clulas sanguneas que contienen en su interior lahemoglobina; y son los principales portadores de oxgeno a las clulas y tejidosdel cuerpo, es por ello que presentan una forma bicncava para adaptarse auna mayor superficie de intercambio de oxgeno por dixido de carbono en lostejidos. Existen muchos factores necesario para su produccin de gbulos rojoscomo: la Vitamina B12, el Acido flico y el Hierro.Una disminucin de los valores normales de glbulos rojos puede deberse a lapresencia de Anemias, Cncer, Enfermedades sistmicas, Hemorragias, Fibrosisde mdula sea o alteraciones en la dieta diaria; mientras que valoresaumentados pueden deberse a Enfermedades pulmonares crnicas,Cardiopatas, Altitud o Poliglobulia de diferentes causas.

Es por ello que en la presente prctica se conocern los diferente mtodospara determinar el conteo de glbulos rojos; un examen que nos ayuda adiagnosticar si un paciente tiene anemia o polisitemia, estos resultadosdependern mucho de el nmero de eritrocitos que hay por milmetro cbicode sangre.


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II. OBJETIVOS

Conocer el mtodo y procedimiento adecuado para el recuento deglbulos rojos.

Demostrar la factibilidad y eciencia de la cmara de Neubauer en elconteo de Glbulos Rojo. Conocer y comprender el fundamento del manejo de la cmara de

Neubauer y la pipeta de Thoma. Conocer las caractersticas morfolgicas de los Glbulo Rojos. Determinar cuantitativamente el nmero de eritrocitos por mm 3 de sangre

total.


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III. MARCO TERICO

III.1. Hematologa

Es el estudio de la sangre y sus componentes celulares. Ya los antiguosgriegos haban reconocido la importancia de la sangre, pero recin conla investigacin del microscopio lo cientficos pudieron descubrir queestaba formada por varios componentes. Herfilo descubri laimportancia de diagnosticar el pulso; es decir, la sangre que fluye atravs de las arterias entre el ao 500 y el 250 a.C.La sangre transporta las sustancias a travs de todo el organismo,estando compuesta bsicamente por dos partes: la porcin lquidadenominada plasma y las clulas que viajan en el plasma.

El plasma constituye hasta el 55% del volumen sanguneo y estcompuesto por el 91.5% de agua y 8.5% de solutos disueltos. Entre lossolutos se puede mencionar las protenas plasmticas, como laalbumina, la globulina y el fibringeno, y otros como las vitaminas,enzimas, hormona y electrolitos.Por su parte las clulas de la sangre comprenden los glbulos rojos, losglbulos blancos y las plaquetas. Los glbulos rojos tambin conocidoscomo eritrocitos representan casi el 99% de las clulas del plasma,siendo las responsables del transporte de oxigeno por todo el cuerpo ycontienen una sustancia denominada Hemoglobina (Hb), que fija lamolcula de oxigeno para permitir su transporte a travs de la corrientesangunea y hacia el interior de las clulas donde se libera.

Componentes de la sangre


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III.2. HematimetraEs la exploracin complementaria bsica de todo servicio de urgencia,que estudia la cuantificacin y evaluacin de los distintos gruposcelulares (hemates, plaquetas, leucocitos, etc) y nos permite detectaralteraciones cuantitativas de estas.

La cantidad de hemates puede ofrecer datos de salud o de la presenciade una anemia, enfermedades generales, o diferentes tipos de cncer.Como los hemates son los encargados de transportar la hemoglobina(protena que porta el oxgeno a los tejidos), su disminucin producecansancio y sensacin de fatiga.Uno de los estudios ms conocidos es el Hemograma.

III.3. Hemograma y Hemograma completo

Son dos pruebas principales que se realizan para evaluar la sangre y lasclulas de la sangre en los pacientes quirrgicos: el hemograma, queabarca el recuento de eritrocitos, el recuento de glbulos blancos, lahemoglobina (Hb), el hematocrito (Hct), los ndices hematimtricos y elrecuento de plaquetas; y el hemograma completo que comprende losdatos del hemograma y el recuento diferencial de glbulos blancos. Elhemograma completo es una prueba estndar que se solicita a todos lospacientes quirrgicos. Este estudio se suele emplear en el periodointraoperatorio para determinar las modificaciones del estadohemodinmico del paciente.

Hemograma

Recuento de Eritrocitos. Recuento de Glbulos

Blancos. Hemoglobina (Hb) Hematocrito (Hct).

ndices Hematimtrico. Recuento de Plaquetas

Hemograma Completo

Hemograma Recuento diferencial de

Glbulos Blancos

Hemograma Completo


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A. Recuento de Glbulos Rojos

Los glbulos rojos se forman enla medula sea a partir de una

nica clula madre progenitoramediante un proceso demaduracin especfico que es laeritropoyesis. Despus deabandonar la mdula sea, elglbulo rojo pasa a circulacindonde vive unos 120 das yluego es eliminado de lacirculacin por los macrfagosdel bazo y la mdula sea. Estos

glbulos rojos son los quellevan el oxgeno a todo elorganismo.

El RBC es la cantidad de glbulos rojos que son producidos en unas 20gotas de sangre o 1 milmetro cbico (1mm3). Los niveles normales deRBC fluctan entre 4.5 y 6.1 millones por milmetro cbico para loshombres, y entre 4.0 y 5.3 millones para las mujeres. El RBC se puedeencontrar disminuido en algunos tipos de anemias, mientras quetambin se pueden encontrar valores aumentados en pacientes

talasmicos, policitemia vera, poliglobulias por estados dedeshidratacin como los que se producen en pacientes quemados y enancianos. Tambin existe una poliglobulia fisiolgica en los recinnacidos y en individuos que viven en altitudes elevada.

B. HematocritoEs otra forma de medir el recuento de glbulos rojos y es el porcentajede glbulos rojos dentro del nmero total de clulas sanguneas en elorganismo. Los valores normales fluctan entre 40 y 54% para loshombres y 37 y 47% para las mujeres. Los valores del hematcritoindican la densidad de la sangre as como su capacidad para llevaroxgeno. Un hematocrito bajo es otro indicador de anemia.

C. HemoglobinaEs una protena presente en los glbulos rojos que lleva el oxgeno alorganismo. Los niveles normales de hemoglobina son de 12 a 16 gramospor decilitro (g/dl) en las mujeres y de 14 a 18 g/dl en los hombres.

RGR


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III.4. Anormalidades : Anemia y Policitemia

DEFINICIN:Concentracin baja dehemoglobina en la sangre. Puedeacompaarse de otros parmetrosalterados, como disminucin delnmero de glbulos rojos, odisminucin del hematocrito.

CAUSAS:Deficiencia de hierro CONSECUENCIAS:Cuando existeanemia severa, los tejidos y rganosdel organismo no reciben suficienteoxgeno, la persona se sientecansada, su pulso esta acelerado,tolera mal el esfuerzo ytiene sensacin de falta de aire .

Anemia

DEFINICIN:Trastorno en el cualaumenta el hematocrito.

CAUSAS:Aumento del nmero deeritrocitospor volumen sanguneo.

CONSECUENCIAS:cefaleas, vrtigo,alteraciones visuales y confusinmental.Policitemia


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IV. MTODO OPERATORIO

HemogramaDeterminacin: Recuento de Glbulos RojosMtodo: Mtodo SistemticoTcnica: Dilucin con cmara de NeubauerMuestra: SangreCantidad: 0.5LPaciente: Varn de 23 aos de edad

Recuento de Glbulos Rojos

Fundamento:

Se fundamenta en la dilucin de sangre en el lquido de Gower que nospermite observar claramente los hemates, luego esta dilucin se coloca en unacmara de Neubauer con la ayuda de una pipeta automtica o pipeta Pasteur yse cuentan en el microscopio a un objetivo de 40x para calcular el nmero deglbulos rojos por mm3.

Todo mtodo manual de recuento celular incluye 3 fases:

Dilucin de la sangre Muestreo de la sangre diluida en un volumen Recuento de clulas en ese volumen

Recuento deGlbulos Rojos


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Pipeta de Thoma para glbulos rojos(perla roja)

Tubos de ensayo Cubrehematimetro Boquilla Equipo para venopuncion Algodn Vial

Papel Filtro

MATERIALES

Alcohol al 70% Diluyente de glbulos

rojos: Lquido de Gower Anticoagulante

REACTIVOS

Microscopio

Hemocitmetro: Cmara deNeubauer

EQUIPOS


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PROCEDIMIENTO

Toma de sangre Se practica puncin venosa. La sangre es recogida en un vial con

anticoagulante.

Recoleccin de muestra Colocar el tubo de plstico y la boquilla para aspirar

en la pipeta. Llenar la pipeta de Thoma con 0.5 L de sangre.

Dilucin de la sangre Introducir la pipeta de Thoma en el frasquito que

contiene el diluyente (Gower) y llenar de lquido dedilucin hasta la marca de 101 (dilucin de 1/200).

Limpiar la punta con papel filtro.

Muestreo de la sangre diluida en unvolumen Se hace rotar manualmente de 2 a 3 minutos. Descartar 3 a 4 gotas del tallo

Recuento de clulas en ese volumen Colocar una gota pequea cerca de un extremo de

la cmara para que por capilaridad se lleneexactamente.

Hacer el recuento con objetivo de 40x


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V. RESULTADOS

Margen Superiorizquierdo:

105 hemates

Margen Superiorderecho:

110 hemates

Margen Inferiorizquierdo:

88 hemates

Margen Inferiorderecho:

76 hemates

Centro: 97 hematesTOTAL (N): 476 hemates

Clculos:

Valores de Referencia:

Recuento

Frmula (hemates /mm 3) = N x 10 x 200 x 400

80

Hemates /mm 3 = 476 x 10 x 200 x 400 = 4, 760,000 Hemates /mm3

80


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VI. DISCUSIN

Como se sabe los eritrocitos o glbulos rojos son clulas de color amarillento,con la forma de un disco bicncavo, sin ncleo y contienen un pigmentollamado hemoglobina que les otorga su caracterstico color; lo que se realizen la prctica es determinar que mtodo es el ms sencillo y eficiente para elrecuento de este nmero de eritrocitos presentes en 1 mm 3 de sangre y ver sise encuentra dentro de los valores normales respectivos. Para ellos esnecesario comentar la gran importancia durante todo el proceso, uno de elloses la funcin que cumple el lquido de Gower, como medio de disolucin, yaque no solamente debe de diluir los eritrocitos hasta cifras legibles, sino quetambin permita identificarlos y que destruya otros elementos celulares que noson de inters en este momento. En general se puede usar cualquier solucinisotnica como diluyente un ejemplo es la Solucin salina de NaCl al 0.9%.Tambin es muy importante observar que en la cmara de Neubauer las reas

de recuento de eritrocitos y linfocitos son diferentes. Los glbulos rojos secuentan en las reas coloreadas de rojo, mientras que los glbulos blancos secuentan en las reas coloreadas de azul.Para realizar el conteo se enfoca con el objetivo 40x, y se localiza el cuadrocentral con el condensador bajo y luz dbil. Para proceder al recuento, que selleva a cabo en los cuadrados pequeos del retculo marcado en color rojo,contando las clulas en cada cuadro, en barrido o fila.Hoy en da tambin existen mtodos automatizados que aceleran los procesosde determinacin de glbulos rojo; sin embargo no suelen ser tan seguros paraciertos tipos de anormalidades de hemates.


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VII. CONCLUSIN

El mtodo sistemtico con la cmara de Neubauer para el conteo deGlbulos Rojo es el mtodo ms rpido y preciso, empleado hoy en da enla gran mayora de laboratorios de anlisis.

El mtodo sistemtico nos permiti determinar la cantidad de Eritrocitospor milmetro cbico de sangre.

Los eritrocitos o glbulos rojos son clulas de color amarillento, con laforma de un disco bicncavo, sin ncleo

Para nuestro paciente varn de 23 aos de edad se encontr un total de4, 760,000 Hemates /mm 3 de sangre.


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VIII. CUESTIONARIO1. Cul es el fundamento del proceso de la hematimetra?

La Hematimetra se basa en cuantificar yevaluar diferentes grupos celulares, losglbulos rojos (hemates), los glbulosblancos (leucocitos), las plaquetas, elcontenido de hemoglobina, y otrosparmetros relacionados con sucantidad, forma y contenido.

Los principios generales de este recuentose basan en 2 puntos bsicos, los cualesconsisten:

Primero escoger un lquido de dilucin, que no solamente diluya loseritrocitos hasta cifras legibles, sino que tambin permitaidentificarlos y que destruya otros elementos celulares que en esemomento no nos interesen.

Segundo utilizar equipos automatizados o microscopio a 40x quenos proporcionen las lecturas del nmero de eritrocitos por mm 3.

2. Cul es la composicin qumica de los lquidos de dilucinutilizados en Hematimetra?

Lquido deDilucin Componentes Cantidad

Soluciones deGower

Sulfato de sodio(Na2SO4)

12,5 g

cido acticoglacial

33,3 mL

Agua destilada c.s.p 200 mL

Solucin salina Cloruro de Sodio(NaCl)0.9%

Liquido deHayem

Cloruro de Sodio(NaCl)

5g

Sulfato de sodio(Na2SO4)

2.5g

Cloruro deMagnesio(MgCl2)

2.5g

Agua destilada c.s.p 1L


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3. Explique mediante un esquema el retculo de Thomas.

Conteo de Glbulos Rojos


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4. Explique la frmula utilizada en el recuento de los GlbuloRojos?

Con la cmara de NEUBAUER: La Superficie de 1 cuadrado grande es igual(1/20 mm de lado)

Volumen de un cuadrado grande (1/10 mm de profundidad)

Si contamos "a" glbulos rojos en "n" cuadrados pequeos, el nmero deglbulos por cuadrado ser a/n.

Si la sangre se diluy a 1/200, habr que multiplicar el valor por 200respectivamente.

FRMULA:

El volumen de sangre en el cual se han contado las clulas resultade multiplicar la profundidad de la cmara (V) por el factor dedilucin (FD), la superficie de los cuadrados (S) y el nmero decuadrados contados (X).

Profundidad de la cmara (V)

Superficie de los cuadrados (S)

Factor de dilucin (FD)

Nmero de cuadrados contados (X)


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Si en un volumen 1/4000 mm 3 hay a/n glbulos rojos, en 1 mm 3 habr Y.Luego:

Reemplazado en nuestra Frmula

Donde: aes el nmero de glbulos rojo encontrado.

5. Cul es el fundamento de los mtodos automatizados para elrecuento de hemates? Seale los inconvenientes de estosequipos

EQUIPO AUTOMATIZADO DE CONTAJE CELULAR

El "Cell Coulter" de la empresa Beckman-Coulter. Es un equipo de contajecelular que se basa en la medida de los cambios en la resistencia elctricaque se producen cuando una partcula no conductora en suspensin en unelectrolito atraviesa un pequeo orificio.

En la imagen podemos observar una pequea abertura entre los electrodoses la zona sensible a travs de la que pasan las partculas que seencuentran en suspensin. Cuando una partcula atraviesa el orificiodesplaza su propio volumen de electrolito. El volumen desplazado esmedido como un pulso de voltaje. La altura de cada pulso es proporcionalal volumen de la partcula. Controlando la cantidad de la suspensin quecircula a travs del orificio es posible contar y medir el tamao de las


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partculas. Es posible contar y medir varios miles de partculas por segundo,independientemente de su forma, color y densidad.

En la unidad de Citometra de flujo y Microscopia Confocal de los ServiciosCientfico-Tcnicos de la Universidad de Barcelona se dispone de

contadores celulares. Sin embargo, es posible determinar la densidadcelular empleando mtodos ms sencillos. Nos basta con una cmara decontaje celular, por ej. la cmara de Neubauer, y un microscopio. Unacmara de contaje celular es un dispositivo en el que se coloca unamuestra de la suspensin a medir. El dispositivo presenta unas seales quedeterminan un volumen conocido (x microlitros). Al contar bajo elmicroscopio el nmero de partculas presentes en ese volumen se puededeterminar la densidad de partculas en la suspensin de origen.


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IX. BIBLIOGRAFA

1. Joanna Kotcher Fuller. Instrumentacin quirrgica: teora, tcnicas y

procedimientos. 4 Edicin. Editorial Mdica Panamericana. Madrid,Espaa 2007. Pg. 428-430

2. Mara Muoz Zambrano, Cecilia Morn Cortijo. Manual deprocedimientos de laboratorio en tcnicas bsicas de hematologa. 1Edicin. Instituto Nacional de Salud (INS). Lima, Per. 2005. Pg. 33-35

3. Jagner Hinostroza Inga. Conteo de Glbulos Rojos medianteProcesamiento de Imgenes y Redes Neuronales. 2006 PDF Disponibleen [http://www.wiphala.net/courses/research/ST235/2006-II/groups/proposal12.pdf]

4. Francisco Cullar Ambrosi,Francisco Falabella Falabella. Hematologia. 6Edicin. Editorial CIB. Bogot, Colombia. 2004. Pg. 14-16
http://www.wiphala.net/courses/research/ST235/2006-II/groups/proposal12.pdfhttp://www.wiphala.net/courses/research/ST235/2006-II/groups/proposal12.pdfhttp://www.wiphala.net/courses/research/ST235/2006-II/groups/proposal12.pdfhttp://www.wiphala.net/courses/research/ST235/2006-II/groups/proposal12.pdf

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