Facultad de ciencias de la salud

Carrera Profesional de Tecnología Médica

Especialidad de Laboratorio Clínico

TEMA:

CURSO : INMUNOLOGIA

DOCENTE : LIC. TM.CAMILO

ALUMNA : CAROLYN SOTO TRELLES

LUZ MARGARITA RIMACHI QUISPE

OSCAR CRUZ VILLLACORTA

CICLO : VI

CD

(MOLECULAS DE DIFERENCIACION)

CUSCO-PER

INTRODUCCIÓN

El desarrollo de una respuesta inmune humoral requiere la selección, activación y expansión clonal de linfocitos B individuales provistos de un receptor antígeno-específico (BCR: "B cell receptor") anclado en su membrana plasmática.

Esta habilidad de un individuo para responder virtualmente a cualquier antígeno, depende de la capacidad del sistema inmune para generar un repertorio muy grande de linfocitos, cada uno de los cuales expresa un receptor específico para un epítopo antigénico particular. Por otra parte, la naturaleza clonal del reconocimiento antigénico, constituye un elemento esencial de la respuesta inmune, puesto que aún cuando el sistema inmune puede reconocer una gran variedad de antígenosdistintos, sólo aquellos clones linfocitarios con la especificidad apropiada para un epítopo del antígeno particular, serán expandidos por división celular.

El receptor de un linfocito B (BCR) es uncomplejo glicoproteico transmembrana que incluye una inmunoglobulina (Ig) de membrana propia de cada linfocito y responsable del reconocimiento específico del antígeno. Cuando un individuo es expuesto a un antígeno extraño, sólo aquellos linfocitos cuyo BCR es capaz de reconocer un epítopo antigénico, serán activados y expandidos para diferenciarse en linfocitos B de memoria o en células plasmáticas productoras de anticuerpos.

Las células plasmáticas producen Sin título--generalmente sólo un tipo de anticuerpo y éste siempre corresponde a la forma secretada o soluble de la Ig de membrana del linfocito B del cual deriva la célula plasmática. La forma de membrana de una Ig es un componente estructural y funcional del receptor BCR; su forma soluble o secretada constituye en cambio un anticuerpo, que conserva la especificidad por el antígeno y es además responsable de la función efectora de larespuesta inmune humoral: neutralización del antígeno, reclutamiento y activación de fagocitos, activación del sistema del complemento, reclutamiento y activación de células NK, macrófagos y otras células capaces de realizar citotoxicidad dependiente de anticuerpos.

La expresión de un receptor BCR responsable de la iniciación de una respuesta inmune contra diversos agentes infecciosos y otros antígenos, es uno de los eventos cruciales en el desarrollo de los linfocitos B. Durante este proceso, receptores antígeno-específicos únicos, son expresados por linfocitos individuales

después del reordenamiento regulado de segmentos génicos para cadenas livianas y pesadas de una inmunoglobulina. La naturaleza azarosa del reordenamiento génico, acoplado a la mayor complejidad que se consigue con el apareamiento de cadenas pesadas y livianas crea una increíble diversidad en el repertorio linfocitario B. Aunque tal diversidad permite el reconocimiento de un gran número de proteínas extrañas, la independencia antigénica del reordenamiento génico inevitablemente conduce a la generación de linfocitos B autorreactivos. Para evitar la autoinmunidad inducida por la eventual activación de estas células autorreactivas, el sistema inmune debe poner en marcha mecanismos que le permitan inducir tolerancia a antígenos propios.

Entre estos mecanismos se encuentran la eliminación por apoptosis de las células autorreactivas (deleción clonal), la inhibición de su actividad (anergia clonal), o la edición de su receptor mediante un reordenamiento secundario de segmentos génicos para cadenas livianas, lo que conduce a modificar la especificidad del BCR autorreactivo.

Linfocitos B apropiadamente activados proliferan y luego diferencian en células plasmáticas o en células B de memoria. Durante este proceso de diferenciación los linfocitos B expresan estrategias únicas que llevan a diversificar aun más elrepertorio de receptores BCR: (i) hipermutación somática que conduce a un aumento de la afinidad del receptor por su epítopo antigénico, recombinación o reordenamiento génico, que conduce al “switching isotípico” o cambio de clase dela inmunoglobulina del BCR en linfocitos B de memoria, y (iii) reordenamientos génicos secundarios, que conducen a la edición del receptor.

En el presente capítulo se describe la estructura y función del receptor linfocitario B (BCR), las características estructurales y funcionales de las distintas clases de inmunoglobulina y los mecanismos genéticos que explican su diversidad y heterogeneidad: recombinación V(D)J, hipermutación, reordenamiento de clase y edición del receptor.

ESTRUCTURA DE LOS ANTÍGENOS DE MEMBRANA

Las proteínas de membrana se clasifican en cuatro grupos, dependiendo de la orientación de la molécula en la membrana plasmática o de su unión a ella.

2.1. Proteínas de transmembrana tipo I Las proteínas de transmembrana tipo I tienen el extremo carboxilo en el interior de la célula y el extremo amino en el exterior de la misma. Generalmente estas proteínas tienen una secuencia señal en el extremo amino, la que es removida luego que la molécula entra al retículo endoplásmico. Posteriormente, si presenta sitios de glicosilación, puede ser glicosilada en el aparato de Golgi y expresada en la superficie celular. La mayoría de las moléculas CD son glicoproteínas de transmembrana tipo I. Estas proteínas generalmente participan como receptores de superficie celular y/o ligandos. Varias de ellas pertenecen a la superfamilia de las inmunoglobulinas (SFIg), como por ejemplo las moléculas CD2, CD4, CD8 y CD19. Las proteínas de transmembrana tipo I, generalmente presentan un dominio de transmembrana de aproximadamente 25 aminoácidos hidrofóbicos, seguido por un grupo de aminoácidos básicos. Estos aminoácidos con carga positiva permiten la unión de estas proteínas a las cargas negativas de los fosfolípidos aniónicos ubicados en la capa interna de la membrana celular. El dominio de transmembrana no contiene algunos aminoácidos como arginina, asparragina, ácido aspártico, ácido glutámico, glutamina, histidina o lisina, excepto cuando está asociado con el dominio de transmembrana de otras proteínas de membrana, formando un complejo multimérico. Por ejemplo, las proteínas del complejo CD3 y las dos proteínas del TCR.

2.2. Proteínas de transmembrana tipo II Las proteínas de transmembrana tipo II tienen una orientación opuesta a las proteínas de transmembrana tipo I. El extremo amino se encuentra en el interior de la célula y el extremo carboxilo en el exterior de la misma Entre las moléculas CD que presentan esta estructura se encuentran CD10, CD13, CD23 y CD26.Estas proteínas a menudo presentan secuencias señal para dominios de transmembrana que no han sido removidas lo que permite su remoción y liberación de la superficiecelular. Así, estas proteínas se pueden comportar tanto como antígenos de superficie y proteínas plasmáticas.

2.3. Proteínas de transmembrana tipo III Las proteínas de transmembrana tipo III cruzan la membrana celular más de una vez, pudiendo presentar el extremo carboxilo en el interior de la célula y el extremo amino en el exterior de la misma, o bien ambos extremos en el interior de la célula (figura 46-3). Entre las moléculas CD que presentan esta estructura están: CD9, CD20,CD36, CD37, CD53, CD63 y CD81. La característica de cruzar más de una vez la membrana, permite a estas proteínas formar canales a través de la bicapa lipídica, para transportede iones o moléculas pequeñas. Un subgrupo de este tipo de proteínas de transmembrana es la denominada “tetra-span family” las cuales se caracterizan por cruzar cuatro veces la membrana y presentar ambos extremos de la molécula hacia el interior de la célula. Un ejemplo de esta familia de moléculas es el CD9.

2.4. Proteínas unidas a glicofosfatidilinositol Este tipo de proteínas está totamente expuesto en el exterior de la célula y se une a la bicapa lipídica a través de una unión covalente (vía un oligosacárido específico) a fosfatidilinositol ubicado en la cara externa de la membrana. A esta unión se le llama glicofosfatidilinositol (figura 46-4). Entre las proteínas que presentan esta estructura se encuentran las moléculas CD14, CD24, CD48, CD58 y CD87. Inmediatamente después de finalizada la síntesis roteica, la proteína precursora permanece unida a la membrana del retículo endoplásmico a través de una secuencia de 15-20 aminoácidos hidrofóbicos en su extremo carboxilo mientras que el resto de la proteína se ubica en el lumen del organelo. Inmediatamente, una enzima corta la proteína liberándola del segmento hidrofóbico unido a la membrana mientras que el nuevo extremo carboxilo se une a un grupo amino de una molécula GPI previamente formada.

3. MOLÉCULAS CD ASOCIADAS A LÍNEAS CELULARES Una de las utilidades de las moléculas CD ha sido el reconocimiento del linaje celular y el estadio madurativo de las células hematopoyéticas, particularmente de los leucocitos. Así por ejemplo el antígeno CD3 identifica a los LT, CD20 a los LB, CD66 de los granulocitos y CD61 a lasplaquetas. Sin embargo, la mayoría de los antígenos son expresados en diferente cantidad por varios tipos de células; para la identificación de algunos tipos celulares se requiere la identificación de dos o más antígenos, lo que actualmente se realiza por citometría de flujo. En el estudio de las leucemias agudas, linfomas, e inmunodeficiencias, es particularmente importanteconocer la línea celular afectada. Además de las moléculas CD asociadas, preferentemente, a ciertas líneas celulares en particular, se han identificado moléculas CD asociadas a la activación de LB, LT y plaquetas.

3.1. Moléculas CD expresadas principalmente en "stem cells"

Molécula CD34. La molécula CD34 es el principal marcador utilizado en el reconocimiento de las células progenitoras hematopoyéticas o “stem cells”. Se trata de una sialoglicoproteína de transmembrana de 105-120 kDa (reducida). Forma parte de la familia “cell surface mucin” junto a las moléculas CD43 y CD68. La molécula CD34 es potencialmente adhesiva y probablemente interactúa con CD62E (E-selectina) y CD62L (Lselectina). Las “stem cells” representan un pequeño porcentaje de las células de la médula ósea y sangre periférica. También se encuentran en el hígado fetal. Actualmente, estas células son utilizadas en trasplantes las cuales son obtenidas a partir de sangre periférica, realizando leucoféresis y seleccionando las células CD34+.

3.2. Moléculas CD expresadas principalmente en linfocitos B

Molécula CD10. La molécula CD10, también conocida como CALLA (“common acute lymphocytic leukemia antigen”) tiene un peso molecular de 10 kDa y es miembro de una familia de peptidasas de superficie celular.

Molécula CD19. La molécula CD19 es una glicoproteína de transmembrana tipo I de 95 kDa (reducida). Es miembro de la SFIg; los dos dominios extracelulares que presenta son del tipo inmunoglobulinas. Su expresión está restringida a las células B normales y neoplásicas. Se expresa desde el estadio de célula pre-B a célula plasmática. e asocia no covalentemente con CD21, CD81 y Leu-3, formando un complejo que en forma independiente del BCR participa en la transducción de señales.

Molécula CD20. La molécula CD20 se encuentra en todas las células B y en algunos precursores de LT. Es una fosfoproteína que se expresa en tres isoformas (33, 35 y 37 kDa) como consecuencia de una diferente fosforilación de las serinas ytreoninas existentes en los extremos de la molécula. Esta molécula presenta cuatro dominios transmembrana y los extremos amino y carboxilo se encuentran en el citoplasma. A pesar de su disposición en la membrana, esta molécula no integra la familia "tetra-spans". Su estructura sugiere que podría actuar como canal iónico, particularmente de Ca2+.

Molécula CD21. La molécula CD21 se expresa en una subpoblación de células B. Es una glicoproteína de transmembrana tipo I (140 kDa) que presenta 15 ó 16

dominios de 60-70 aminoácidos (extracelular), seguido por un dominio de transmembrana y 34 aminoácidos intracitoplasmáticos. La molécula CD21 es el receptor de los fragmentos C3d (CR2), C3dg e iC3b del complemento. A tráves de un dominio de unión diferente actúa como receptor del virus Epstein- Barr. Es miembro de la familia génica de reguladores de la activación del complemento, integrada también por las moléculas CD35, CD46 y CD55. También participa como ligando de CD23. Junto con CD19, CD81 y Leu-3, forma parte de un complejo que transduce señales al interior de los LB.

Molécula CD22. La molécula CD22 es una glicoproteína de transmembrana tipo I de 140 kDa.Es miembro de la familia sialoadhesina (sialoadhesina, CD33, glicoproteína asociada a mielina). Se conocen dos isoformas; la forma tiene siete dominios tipo Ig dos más que la forma y una cola citoplasmática 23 aminoácidos más larga que la forma. La molécula CD22 se expresa en una subpoblación de las células B y actúa como una molécula de adhesión con capacidad de unión para ácido siálico de carbohidratos que presentan por ejemplo las moléculas CD45RO, CDw75 y CDw76.

Molécula CD23. La molécula CD23 es una glicoproteína de transmembrana tipo II de 45-50kDa (reducida). Dado que presenta hacia su extremo carboxilo un dominio tipo lectina, pertenece a la familia de lectinas dependiente de calcio, al igual que las moléculas CD69, CD72 y CD94. La molécula CD23 se expresa en una subpoblación de LB. Existen dos formas, FcRIIa y FcRIIb las que difieren sólo en el extremo amino. Continuamente el CD23 está siendo liberado de la superficie celular como un polipéptido de 33 kDa que se ha visto actúa como factor de crecimiento de LB.

Molécula CD24. La molécula CD24 es una glicoproteína unida a GPI. Tiene aproximadamente 42 kDa (reducida) y está marcadamente glicosilada. Se expresa en células B (desde célula pre-B hasta célula plasmática) y en granulocitos. Varias proteínas unidas a la membrana a través de ProteínasI, entre ellas CD24, se han encontrado asociadas con proteínas tirosinas kinasas, fundamentales en la transducción de señales y activación celular.

Molécula CD40. La molécula CD40 es una glicoproteína de transmembrana tipo I de 44-48 kDa (reducida). Integra la familia de receptores TNF/NGF (factor de crecimiento de nervio), al igual que las moléculas CD27, CD30, CD95, CD120a y CD120b. El dominio extracelular presenta cuatro repeticiones ricas en cisteina. Es contrareceptor de CD40L (CD154) que se expresa en los LT activados, por lo que

está involucrada en la interacción LB-LT durante el cambio de clase de inmunoglobulinas.

Molécula CD72. La molécula CD72 es una proteína de transmembrana tipo II que tiene la estructura de un homodímero de 39 y 42 kDa (reducida). Junto con las moléculas CD23, CD69 y CD94 integra la familia de lectinas dependiente de calcio. Puede actuar como ligando de la molécula CD5 expresada en todos los LT y en una subpoblación de LB. Se expresa en todos los estadios madurativos de las células B, excepto en las células plasmáticas.

Molécula CD80. La molécula CD80 es una proteína de transmembrana tipo I de 60 kDa (reducida). La región extracelular consiste en un dominio tipo variable y un dominio tipo constante de Ig; la cola citoplasmática presenta 16 aminoácidos. Se expresa en LB en reposo y activados, monocitos, células dendríticas y LT activados. Actúa como ligando de moléculas accesorias de LT, como son CD28 y CTLA-4 (CD152), regulando así el desarrollo de la respuesta inmune.

3.3. Moléculas CD expresadas principalmenten linfocitos T Molécula CD3. La molécula CD3 es un heteropentámero formado por las cadenas y que se encuentra asociado al TCR Se expresa exclusivamente en las células T. La mayoría de los anticuerpos CD3 reconocen la cadena del complejo CD3.

Molécula CD2. La molécula CD2 es una glicoproteína de transmembrana tipo I de 50 kDa. La región extracelular consiste en un dominio tipo variable y un dominio tipo constante de Ig; presenta una larga cola citoplasmática rica en prolina y aminoácidos básicos. La molécula CD2 se expresa en todas las células T incluyendo timocitos inmaduros y células de memoria. Además, se expresa en una subpoblación de células NK.

CD2 es el receptor que une eritrocitos de cordero alrededor de los LT formando las denominadas rosetas E, fenómeno que dio origen a uno de los primeros métodos utilizados para reconocer y aislar linfocitos T. Es una molécula de adhesión que se une a las moléculas CD58 (LFA-3), CD48 y probablemente CD59. Participa en la transducción de señales en las células T, representando una vía alternativa de activación de estas células.

Molécula CD4. La molécula CD4 es una licoproteína tipo I de 59 kDa (reducida) que pertenece a la superfamilia génica de las Ig. La región extracelular presenta cuatro dominios tipo Ig y el segmento intracitoplasmático tiene un dominio que une la tirosina kinasa. La molécula CD4 se expresa en una subpoblación de células T, la mayoría LTh. También puede expresarse en bajas concentraciones en

monocitos y macrófagos. Las moléculas CD4 de los LTh se unen a regiones no polimórficas de las moléculas MHC clase II, estabilizando la interacción entre las células T CD4+ y las células presentadoras de antígenos (CPA). La molécula CD4 además es el ligando para la gp120 del virus de la inmunodeficiencia humana (VIH).

Molécula CD5. La molécula CD5 es una glicoproteína de transmembrana tipo I de 67 kDa (reducida). Al igual que la molécula CD6 pertenece a la "scavenger receptor family". La región extracelular consiste en tres dominios "scavenger receptor" ricos en cisteína. La molécula CD5 se expresa en las células Ty en una población de LB asociada a enfermedades autoinmunes.

Molécula CD7. La molécula CD7 es una glicoproteína de transmembrana tipo I de 40 kDa (reducida). La región extracelular consiste en un dominio tipo Ig, seguido hacia la membrana de una región O-glicosilada. La molécula CD7 se expresa en una subpoblación de LT inmaduros que corresponden a precursores pretímicos en la médula ósea.

Molécula CD8. La molécula CD8 es un homodímero o heterodímero CD8b unido por un puente disulfuro. La región extracelular (amino terminal) presenta un dominio tipo Ig separado del dominio transmembrana por una región bisagra. El segmento citoplasmático de la cadena presenta un dominio para unión de la tirosina kinasa p56lck. La molécula CD8 se expresa en una subpoblación de las células T, los LTc, y se une a las moléculas MHC clase I de las células blanco, estabilizando la interacción celular.

Molécula CD27. La molécula CD27 es una proteína de transmembrana tipo I de 55 kDa (reducida) que forma homodímeros unidos por puentes disulfuro.Es miembro de la familia de receptores TNF/NGF, al igual que las moléculas CD30, CD40, CD95,CD120a y CD120b. El segmento extracelular presenta dos regiones ricas en cisteína.La molécula CD27 es ligando para la molécula CD70 que pertenece a la familia TNF (CD30L, CD40L, CD70 y CD95L; L, ligando). Se ha propuesto que esta interacción CD27/CD70 podría ser importante en la regulación de los LT y en facilitar la diferenciación a LTc. Se expresa en una subpoblación de células T maduras y de timocitos.

Molécula CD28. La molécula CD28 es una glicoproteína de transmembrana tipo I de 44 kDa (reducida) que forma homodímeros por puentes disulfuro. Presenta en la región extracelular un dominio tipo Ig, por lo que pertenece a la SFIg. Se expresa en una subpoblación de linfocitos T. Esta molécula participa como ligando

de las moléculas CD80, CD86 y B7-3. Es una de las moléculas que participan como señales coestimuladoras en la activación de células T.

3.4. Moléculas CD expresadas principalmente en células NK Molécula CD16. La molécula CD16 también llamada FcRIIIa es una proteína de transmembrana tipo I de 50-65 kDa (reducida). E extracelular presenta dos dominios tipo Ig. Actúa como receptor de baja afinidad para IgG. También se expresa en monocitos activados y granulocitos. Presenta cinco dominios tipo Ig y dos dominios tipo fibronectina tipo III. Actúa como una molécula de adhesión homotípica. Tambiense expresa en LT activados.

Molécula CD57. La molécula CD57 tiene estructurade carbohidrato, probablemente unida a varias proteínas y lípidos. Tiene un peso molecular de 110 kDa (reducida). Se expresa también en LT y una subpoblación de LB.

3.5. MOLÉCULAS CD EXPRESADAS PRINCIPALMENTE EN GRANULOCITOS

Molécula CD66. La molécula CD66 es una fosfoproteína de aproximadamente 220 kDa (reducida) marcadamente glicosilada. Integra la familia génica de antígeno carcinoembrionario (ACE). El segmento extracelular presenta cuatro dominios tipo inmunoglobulina, uno variable y tres constantes. Como consecuencia de un procesamiento (“splicing”) alternativo del Mrna se obtienen varias isoformas (CD66a - CD66e). La molécula CD66 presenta características de una molécula de adhesión y puede unirse a bacterias.

3.6. MOLÉCULAS CD EXPRESADAS PRINCIPALMENTE EN MONOCITOS-MACRÓFAGOS Molécula CD11b. Las moléculas CD11b tienen un peso molecular de 170 kDa y estructuralmente son proteínas de transmembrana tipo I. Además de las células monocito-macrófagos, se expresa en las células NK. Junto con CD18 forma una molécula de adhesión (CR3) de la familia de las Integrinas.

Molécula CD14. La molécula CD14 tiene 53-55 kDa y se une a la membrana a través de GPI. Además de los monocitos y macrófagos se expresa en neutrófilos, algunos linfocitos B y células dendríticas.

Molécula CD64. La molécula CD64 tiene 75 kDa y estructuralmente corresponde a una proteína de transmembrana tipo I. Pertenece a la SFIg y se expresa en monocitos, macrófagos y neutrófilosactivados. Su función es la de actuar como receptor de alta afinidad de IgG .

Molécula CD68. La molécula CD68 es una proteína de transmembrana de 110 kDA (reducida) y que se encuentra marcadamente glicosilada. Junto a las moléculas CD34 y CD43 integran la familia “cell surface mucin”. Además, al igual que las moléculas CD107a y CD107b características de plaquetas activadas. La molécula CD68 es una proteína asociada a lisosomas, que se traslada a la membrana celular durante la activación.

Molécula CD91. La molécula CD91 es una glicoproteína que sufre una ruptura en el aparato de Golgi en dos cadenas polipeptídicas, la cadena (85 kDa) y la cadena (515 kDa), las cuales no están unidas covalentemente. La cadena presenta varias copias de varios tipos de dominios: rico en cisteína, factor de crecimiento epidermal y repeticiones de YWTD. Actúa como receptor de varias moléculas, entre otras 2-macroglobulina y activadores del plasminógeno.

3.7. MOLÉCULAS CD EXPRESADAS PRINCIPALMENTE EN PLAQUETASMolécula CD41. La molécula CD41, también llamada GPIIb (GP: glicoproteína), es un heterodímero de 140 kDa formado por proteínas de transmembrana. El heterodímero (cadena 120 kDa y cadena 22 kDa), unido por puente disulfuro, se origina en una ruptura postraduccional de la proteína. La molécula CD41 forma un complejo dependiente de calcio con la molécula CD61 (GPIIIa). Este complejo une proteínas adhesivas importantes en la hemostasia: fibrinógeno, factor von Willebrand y fibronectina.

Molécula CD42a. La molécula CD42a, también denominada GPIX, es una glicoproteína de transmembrana de 23 kDa (reducida). Esta molécula forma una complejo no covalente (complejo CD42) con las moléculas CD42a y CD 42b (unidas covalentemente forman la GPIb) o con la molécula CD42d (GPV). La molécula CD42a se expresa sólo en las plaquetas. El complejo CD42 es responsable de la unión al factor von Willebrand.

Molécula CD42b. La molécula CD42b (GPIb-) es una proteína de transmembrana de 135 kDa. En su extremo amino presenta el sitio de unión para el factor von Willebrand. Unida covalentementea la molécula CD42c (GPIb-) forma la GPIb. La molécula CD42b se expresa sólo en las plaquetas.

Molécula CD42c. La molécula CD42c (GPIb) es una glicoproteína de transmembrana de 22 kDa. Al unirse covalentemente a la molécula CD42b (GPIb) forma la GPIb. La molécula CD42c se expresa sólo en las plaquetas.

Molécula CD42d. La molécula CD42d, también denominada GPV es una proteína de transmembrana de 85 kDa (reducida) que al igual que la molécula CD42a (GPIX) se puede unir a la GPIb (CD42b-CD42c) y formar el complejo CD42. Lamolécula CD42d se expresa sólo en las plaquetas.Molécula CD51. La molécula CD51, también llamada cadena del receptor de vitronectina (VnR) es un heterodímero de 125 y 25 kDa (reducida) unido por puente disulfuro. El heterodímero se produce por ruptura postraduccional de la glicoproteína. Puede asociarse no covalentemente con las integrinas 1 (CD29), 3 (CD61) El complejo une vitronectina, fibronectina y colágeno tipo I; el complejo (GPIIb-IIIa) une vitronectina, fibronectina, fibrinógeno, factor von Willebrand, trombospondina, osteopontina y colágeno; el complejo une vitronectina y une fibrinógeno.

Molécula CD61. La molécula CD61, también denominada cadena de las integrinas y GPIIIa, es una glicoproteína de transmembrana tipo I de 110 kDa (reducida). La molécula CD61 se puede asociar a la molécula CD41 (GPIIb) formando un complejo dependiente de calcio (GPIIb-IIIa) y con la molécula CD51 (integrina v) formando el receptor de vitronectina

4. FAMILIAS DE MOLÉCULAS CDLas moléculas CD se pueden agrupar independientemente de los anticuerpos monoclonales que las reconocen, en base a su estructura molecular y/o función. Así, se han descrito entre otras, las siguientes familias:

Superfamilia de las Ig. Estas moléculas se caracterizan por presentar en la región extracelular, uno o más dominios tipo Ig. Entre otras moléculas, integran esta familia: CD4, CD8, CD28, CD54 y CD64.

Familia de las lectinas. Las moléculas de esta familia presentan en la región extracelular uno o más dominios tipo lectina. Integran esta familia las moléculas CD23, CD69, CD72 y CD94. "Tetra-span family". Estas moléculas presentan cuatro dominios transmembrana y ambos extremos, amino y carboxilo, están en el interior de la célula. Integran esta familia las moléculas CD9, CD37, CD53, CD63, CD81 y CD82. "Scanaver receptor family". Las moléculas deesta familia se caracterizan por presentar en la región extracelular tres dominios ricos en cisteína. Entre otras moléculas, se incluyen en esta familia las moléculas CD5 y CD6.

Familia de receptores de TNF y NGF. Esta familia la integran CD27, CD30, CD40, CD95,CD120a, CD120b.

Familia de reguladores del complemento. Forman esta familia las moléculas CD21, CD35, CD46 y CD55.

Superfamilia rodopsina. Las moléculas de esta familia se caracterizan por presentar siete dominios de transmembrana y unirse a proteínas que unen GTP. Las moléculas CD incluidas en la familia rodopsina son CD88, CDw128a y CDw128b.

Familia “cell surface mucin”. Estas moléculas se caracterizan por ser proteínas de transmembrana tipo I que están marcadamente O-sialitizadas (ácido sialico). Son miembros de esta familia las moléculas CD34, CD43 y CD68

Familia sialoadhesina. Las moléculas que integran esta familia son: sialoadhesina, CD33 y gp asociada a mielina.

5. ALGUNAS APLICACIONES DE LA NOMENCLATURA CD EN INMUNOLOGÍAEl advenimiento de la nomenclatura CD, gracias al desarrollo de los anticuerpos monoclonales y técnicas de la citometría de flujo, la inmunohistoquímica y la biología molecular, se ha acompañado de una acelerada aplicación de estos marcadores en el campo de la investigación básica y la inmunología clínica. Como se describió antes, desde un punto de vista conceptual, la expresión de estas moléculas en células del sistema inmune se puede resumir en la presencia de moléculas de linaje (línea celular), de activación y de madurez.

Las moléculas de linaje son aquellas que definen en forma mayoritaria y ocasionalmente excluyente, un tipo celular; por ejemplo CD4 para LT “helper” y CD8 para LT citotóxicos. Estas moléculas pueden aparecer en algún momento deldesarrollo y a su vez cumplen funciones biológicas definidas, pueden compartirse con otras células (ej. CD4 expresada en macrófagos/monocitos) si bien con expresión más baja o en un fenotipo morfológico o inmune muy distinto.

Las moléculas de activación suelen expresarse frente a estimulación celular y no en forma excluyente de un tipo celular (ej. CD25, CD38, CD71). Algunas de estas moléculas suelen disminuir su expresión en la superficie celular frente a un estado de activación celular ya que son escindidas y pueden detectarse en forma soluble(ej. moléculas de adhesión como la L-selectina (CD62L), o CD23 en linfocitos B.

Existe finalmente un conjunto de moléculas que se expresan mayoritariamente durante algunas etapas del desarrollo de las células inmunes, lo que ayuda a definir estadios de madurez celular (ej. CD10, CD34). Sin embargo, debido al

estado biológico de las células inmaduras, es factible detectar con mayor frecuencia o intensidad algunos marcadores de activación (ej. CD71).Finalmente, existen moléculas CD que se asocian a la respuesta inmune específica y son expresadas en los linfocitos, y aquellas que participan en la inflamación, fundamentalmente expresadas en granulocitos, monocitos/macrófagos y células endoteliales.Algunos usos de las moléculas CD en clínica son los siguientes:

SÍNDROME DE LA INMUNODEFICIENCIA ADQUIRIDA (SIDA). Uno de los elementos clásicos en el diagnóstico y seguimiento de pacientes con SIDA ha sido la cuantificación de LT CD4+ y LT CD8+. Los valores absolutos de estas subpoblaciones al igual que su relación o índice CD4/CD8, han sidoutilizados en la determinación de conductas terapéuticas como inicio de tratamiento antirretroviral o profilaxis antibiótica.

Sin embargo, estudios de seguimiento de series grandes de pacientes han detectado que estos valores en ocasiones anticipan lo suficiente para ser útiles.Durante los últimos años, al ir dilucidándose la patogenia del SIDA donde la activación inmune ha sido revelada como factor esencial en la progresión de la enfermedad, se han detectado cambios precoces en la expresión de marcadoresde activación linfocitarios en adultos y niños infectados por VIH (Ej. CD38 y HLA-DR en LT CD8+ y CD62L y CD23 en linfocitos B, disminución de expresión de CD25 en LT CD4+ cambio de expresión de CD45RA a CD45RO tanto en LT CD4+ y LT CD8+) (tabla 46-2).

INMUNODEFICIENCIAS PRIMARIAS.El uso de las moléculas CD ha permitido clasificar en forma más precisa las diversas inmunodeficiencias primarias, tanto celulares como humorales. La asociación entre la presencia o ausencia de alguna molécula CD ha permitido en ocasiones dilucidar la función de tal molécula, si ésta se desconocía, o bien si ésta se conocía, explicar el mecanismo subyacente de una inmunodeficiencia en particular Superfamilia de las inmunoglobulinas. Los receptores de adhesión que pertenecen a esta superfamilia comprenden un grupo importante de glucoproteínas de membrana que poseen regiones o dominios estructurales semejantes a los de las inmunoglobulinas. A esta superfamilia pertenecen moléculas con función y distribución celular muy diversa. Muchas de ellas se expresan en linfocitos e incluyen los receptores para el antígeno de los linfocitos B y T (TCR), el complejo CD3 asociado a TCR, moléculas HLA clases I y II, CD4, CD8, CD22 y CD28.

Todas ellas están involucradas en la respuesta y el reconocimiento inmunes.La superfamilia de las inmunoglobulinas también incluye múltiples moléculas de adhesión celular, como CD2, LFA-3 (CD58), ICAM-1 (CD54), ICAM-2, ICAM-3 (CD50), VCAM-1 y CD31.La molécula CD2 posee dos dominios de tipo inmunoglobulina y se expresa en todos los linfocitos T y en la mayor parte de las células NK. Cuando CD2 se une a su ligando principal (LFA-3) cambia su conformación y envía señales de activación celular. CD59 es también un ligando fisiológico de CD2. LFA-3, que también posee dos dominios de tipo inmunoglobulina, se expresa tanto en células de origen hematopoyético como no hematopoyético. Existen diversas isoformas de LFA-3 dependiendo de su tipo de anclaje a la membrana, las cuales parecen tener una afinidad similar por CD2. Los expresión de CD2 y LFA-3 aumenta durante la activación de los linfocitos T.

Tres miembros de la superfamilia de las inmunoglobulinas, ICAM-1, 2 y 3, actúan como ligandos para la integrina leucocitaria LFA-1. Estas tres moléculas contienen cinco, dos y cinco dominios de tipo inmunoglobulina, respectivamente. ICAM-1 es una molécula inducible en la superficie de las células endoteliales activadas, células epiteliales, macrófagos y linfocitos activados. ICAM-2 se expresa de forma constitutiva en el endotelio y en la mayoría de los leucocitos, mientras que ICAM-3 se restringe a células de origen hematopoyético (monocitos, linfocitos y neutrófilos). ICAM-3 participa en las interacciones interleucocitarias que son esenciales en la iniciación de la respuesta inmune. VCAM-1 se expresa en células endoteliales activadas in vivo e in vitro y sus principales ligandos son las integrinasVLA-4 y a4b7. VCAM-1 participa en la adhesión de linfocitos,monocitos y eosinófilos a endotelios activados. Dicha molécula de adhesión se caracteriza por la presencia de un número variable de dominios tipo inmunoglobulina. La forma predominante de VCAM-1 en el endotelio contiene siete dominios, pero también se han descrito formas con seis, ocho e incluso una forma con tres dominios, específica de tejidos inflamadosy anclada a la membrana por una unión de tipo fosfatidilinositol.

Todas estas isoformas están codificadas por un gen único y se generan por un mecanismo de ajuste o procesamiento (splicing) alternativo del mRNA correspondiente. VCAM-1 también se expresa en células dendríticas, ciertos macrófagos, sinoviocitos y en precursores de células de músculo estriado.

Se ha encontrado que la interacción de VCAM-1 con VLA-4 es esencial en la unión de leucocitos a endotelio, en la respuesta inmune e inflamatoria, en la unión de precursores hematopoyéticos a la estroma de médula ósea y en la diferenciación muscular.

FAMILIA DE LAS INTEGRINASDentro de esta familia se incluyen receptores para componentes de la matriz extracelular y receptores implicados en la adhesión intercelular que desempeñan un papel esencial en la regulación de la adhesión y la migración celular.

El término integrina refleja la capacidad de dichas moléculas para conectar el medio extracelular con el medio intracelular, generando señales en ambos sentidos. De este modo, la interacción de las integrinas con sus ligandos transmite señales intracelulares que conducen a cambios en la morfología celular y en la expresión de determinados genes e incluso a la puesta en marcha de procesos de proliferación celular. Por otra parte, el estado de activación celular puede regular la actividad funcional de estos receptores, como la afinidad de la unión a sus ligandos.

Desde el punto de vista de su estructura, las integrinas son heterodímeros compuestos por dos cadenas polipeptídicas de membrana, denominadas a y b, que están asociadas de forma no covalente. El hecho de que una subunidad b pueda asociarse a subunidades a diferentes ha permitido clasificar las integrinas en varias subfamilias: a) b1, que comprende al heterodímero avb1 y a las moléculas VLA (very late activation antigens), compuestas por una subunidad b1común y una de nueve subunidades a diferentes (b1/a1-a9); b) b2 o integrinas específicas leucocitarias, formadas por una subunidad b2 común y una de tres subunidades a diferentes (b2/aH, am, aX); c) subfamilia b3 o citoadhesinas (b3/aIIb, av), y d) subfamilia b7, de expresión restringida a leucocitos (b7/a4, aE).

La descripción reciente de otras subunidades b (b4-b8) llevará sin duda a nuevas clasificaciones.

En la actualidad, esta familia de receptores está constituida por, al menos, 22 heterodímeros a-b diferentes. El sitio de unión al ligando está formado por regiones de las cadenas a y b, y la interacción receptor-ligando depende habitualmente de la presencia de Ca2+ y Mg2+. La propiedad de asociarse una cadena b a más de una cadena a diferente, y viceversa, confiere a esta familia de receptores un mecanismo de generación de diversidad que permite interaccionar con múltiples ligandos.

Las subunidades a son glucoproteínas transmembrana de un tamaño variable de 120-180 kD, con una región extracelular en la que la porción N-terminal contiene siete dominios homólogos de aproximadamente 60 aminoácidos. La porción citoplasmática posee entre 15 y 35 residuos.

Las diferentes subunidades b son glucoproteínas transmembrana de 90-110 kD con dominios extracelulares, porción citoplasmática y dominio intracelular. Algunos rasgos estructurales destacables en las cadenas b son la presencia de: a) regiones muy conservadas en la mitad del dominio extracelular, posiblemente implicadas en la interacción con el ligando; b) cinco dominios ricos en cisteínas cercanos a la zona de inserción con la membrana, y c) secuencias de fosforilaciónen tirosinas o en serinas/treoninas en las regiones citoplasmáticas.

La región citoplasmática de las cadenas b interacciona con componentes del citosqueleto y puede estar implicada en la generación de señales intracelulares. En las cadenas a y b opera un mecanismo de generación de diversidad molecularmediante un ayuste (splicing) alternativo de sus mRNA que da origen a isoformas que contienen dominios citoplasmáticos distintos.

DISTRIBUCIÓN Y FUNCIÓNSubfamilia b1. La cadena b1 común puede encontrarse asociada a 9 cadenas a diferentes. Con la excepción de los neutrófilos, todas las células del organismo expresan en su membrana una o más integrinas b1. VLA-1 y VLA-2 son indetectables en los linfocitos B, linfocitos T no activados y timocitos, pero se expresan en bajos niveles en monocitos y linfocitos T activados. VLA-6 está ausente en los linfocitos B y presente en los monocitos y existen bajos niveles en timocitos y linfocitos T. Los receptores para fibronectina VLA-3, VLA-4 y VLA-5 se expresan de forma variable en los leucocitos. VLA-4 se expresa de forma homogénea en los monocitos, timocitos y linfocitos B, y de modo heterogéneo en los linfocitos T. Algo similar ocurre con VLA-5, cuya expresión no es uniforme en los linfocitos, presenta niveles medios en monocitos y está prácticamente ausente en timocitos y linfocitos B.

Los heterodímeros VLA funcionan como receptores de componentes de la matriz extracelular. Este reconocimiento es múltiple, de modo que la mayoría de las integrinas b1 pueden interaccionar con más de un ligando extracelular, y la especificidad de la interacción receptor-ligando depende del tipo celular que expresa la integrina. A modo de ejemplo, la integrina VLA-2 puede actuar como receptor para laminina o para colágeno en diferentes tipos celulares. Por otra parte, un mismo componente de la matriz puede unirse a varias integrinas.Así, la laminina es un ligando para VLA-1, VLA-2, VLA-3, VLA-6 y VLA-7; el colágeno para VLA-1, VLA-2, VLA-3, y la fibronectina para VLA-3, VLA-4, VLA-5 y avb1.

La interacción de las diferentes integrinas b1 con proteínas de la matriz puede realizarse compitiendo por el mismo sitio, sitios que solapan, o bien sitios distintos.

Esto último es lo que sucede con la interacción de VLA-4 y VLA-5 con fibronectina,o de VLA-1 y VLA-6 con laminina. Determinadas integrinas b1, como es el caso de VLA-4, pueden también actuar en interacciones intercelulares. Como se ha expuesto previamente, VLA-4 se une a VCAM-1 y participa así en la unión de linfocitos, monocitos y eosinófilos a células endoteliales activadas. VLA-4 también

está implicado en fenómenos de agregación leucocitaria, en la actividad citotóxica de los linfocitos T y en la diferenciación del músculo esquelético.

Subfamilia b2. La expresión de las integrinas, LFA-1 (aLb2), Mac-1 (aMb2) y p150,95 (aXb2), que han sido codificadas como los antígenos de diferenciación CD11a, CD11b y CD11c/CD18,está restringida a leucocitos. LFA-1 (CD11a/CD18) está presente en los linfocitos, células NK, monocitos y granulocitos. La expresión de Mac-1 (CD11b/CD18) y p150,95 (CD11c/CD18) está más restringida a células de linaje mieloide y células NK, aunque ambas están también presentes en ciertas leucemias B. Además, p150,95 puede encontrarse en células dendríticas, ciertas clonas de células T citotóxicas y en linfocitos B activados. LFA-1 participa en los fenómenos de citotoxicidad mediada por linfocitos T y células NK, citotoxicidad dependiente de anticuerpo mediada por macrófagos y granulocitos, y en la respuesta proliferativa de los linfocitos T y B. En todas estas funciones, LFA-1 interviene mediante su interacción con al menos uno de sus tres ligandos celulares conocidos: ICAM-1, ICAM-2 e ICAM-3, todos ellos miembros de la superfamilia de las inmunoglobulinas.

Las interacciones de LFA-1 con ICAM-1 e ICAM-2 en la superficie de las células endoteliales pueden facilitar los procesos de extravasación leucocitaria, mientras que la interacción de LFA-1 con ICAM- 3 y también ICAM-1 es importante en interacciones entre leucocitos, como actividad citotóxica y cooperación T-T, T-B y T-APC.Las integrinas Mac-1 y p150,95 también intervienen en la interacción de monocitos y granulocitos con el endotelio. Mac-1 también puede interaccionar con el ligando ICAM-1 y participa en los fenómenos de agregación y quimiotaxis de neutrófilos y monocitos. Mac-1 es también un receptor de complemento (CR3) y participa en la fagocitosis de partículas o agentes infecciosos opsonizados con C3bi. Mac-1 se une al factor X de la coagulación y, al igual que p150,95, interacciona con fibrinógeno.

Subfamilia b3. La integrina aIIbb3 (gpIIb-IIIa) es la proteína más abundante de la superficie plaquetaria y funciona como receptor de fibrinógeno, aunque también puede unirse a fibronectina, factor de Von Willebrand y trombospondina. Su unión al fibrinógeno sólo ocurre tras la activación de las plaquetas y es responsable de la agregación plaquetaria. El receptor de vitronectina (avb3) se expresa en las plaquetas y células endoteliales y en la mayoría de las células mesenquimales.

Además de unir vitronectina, puede interaccionar con varios ligandos como fibrinógeno, trombospondina y factor de Von Willebrand.

La subunidad av puede encontrarse asociada de forma alternativa con otras cadenas b diferentes, como b1, b3, b5, b6 y b8, dando lugar a heterodímeros con funciones diferentes y con capacidad para unir otros ligandos.

Subfamilia b7. Los dos miembros de esta familia, a4b7 y aEb7, se expresan selectivamente en leucocitos, en particular en los linfocitos que se localizan en el tejido linfoide asociado a mucosa intestinal. La integrina a4b7 se expresa en subpoblaciones de linfocitos T y en todos los linfocitos B de la sangre.

Dicha integrina dirige la migración de linfocitos a placas de Peyer, donde interacciona con el ligando MadCAM-1 expresado por endotelios de vénulas post capilares a4b7 interacciona también con fibronectina y VCAM-1, los dos ligandos conocidos de VLA-4 (a4b1).

Otras integrinas. En los últimos años se han descubierto nuevas asociaciones ab, que aumentan considerablemente la diversidad molecular y funcional de las integrinas Por ejemplo, la cadena b4 se asocia a a6, actúa como receptor de laminina en células epiteliales y es un componente de los hemidesmosomas.

Regulación de la expresión y la función de las integrinasDurante los procesos de activación y diferenciación leucocitarias se producen cambios en la biosíntesis y la expresión celular de las integrinas; de este modo, las células pueden variar sus capacidades adherentes dependiendo de los nivelesde expresión en el repertorio de integrinas. Las células mieloides activadas aumentan considerablemente su contenido de Mac-1 y p150,95 al efectuar una translocación y fusión con la membrana plasmática de gránulos intracelularesque contienen almacenadas estas integrinas.

De forma análoga, los linfocitos T activados expresan un mayor número de moléculas LFA-1 y VLA-4, y en el curso de una activación prolongada se induce la expresión de VLA-1 y VLA-2. Igualmente, las células T memoria expresan mayores niveles de LFA-1, VLA-4, VLA-5 y VLA-6 que las células T que no han estado en contacto con su antígeno correspondiente. Este hecho puede explicar los patrones diferentes de recirculación y tráfico que presentan ambas subpoblaciones de linfocitos T, así como las diferencias en su interacción con las proteínas de matriz y con las células endoteliales.

Las células pueden también modular la afinidad de la interacción de las integrinas con sus ligandos. Los procesos de activación celular aumentan la afinidad de las integrinas, como se ha demostrado en varias de las integrinas de las subfamilias

b1, b2 y b3. La naturaleza bioquímica de las reacciones moleculares que regulan la afinidad de las integrinas por sus ligandos aún no están claramente establecidas. Es posible que la fosforilación de las regiones citoplasmáticas de las cadenas b regule dicha actividad, así como la interacción de las integrinas con componentes del citosqueleto (talina y a-actinina).

Por otra parte, la interacción de las integrinas b1 y b2 con sus ligandos correspondientes proporciona señales accesorias de activación a los linfocitos T. Por tanto, existe una colaboración sinérgica entre integrinas y el complejo TCR-CD3 que es importante para la regulación adecuada de la respuesta inmune. Las señales intracelulares que aparecen modificadas por la interacción de las integrinas con sus ligandos incluyen los niveles de Ca2+ y de AMP cíclico y la actividad del antiportador Na+/H+. En monocitos, la interacción de las integrinas b1 con sus ligandos actúa como una señal primaria que regula la expresión de diferentes genes, entre ellos los de varias citocinas implicadas en la inflamación.

La activación de tirosincinasas también puede estar involucrada en las vías de señalización a través de integrinas. Se han identificado varios sustratos de dichas enzimas en proteínas del citosqueleto e, incluso, en otras tirosincinasas localizadas en los contactos focales de adhesión celular.

RECEPTOR ANTIGÉNICO DE LAS CÉLULAS T

Concepto. Los linfocitos B reconocen antígenos libres o solubles mediante su receptor antigénico de superficie (que es una inmunoglobulina). En el caso de los linfocitos T, el antígeno es primero degradado y procesado en el interior de las células presentadoras de antígeno (APC). Por último, los fragmentos procesados son expuestos en la superficie de la célula presentadora, en el seno de una molécula del complejo principal de histocompatibilidad (MHC de clase I o de clase II) (véase sistema HLA). El linfocito T, a través de su receptor específico (TCR), sólo reconoce dichos fragmentos cuando se asocian a una molécula MHC en la membrana de una APC.

Además del TCR, las células T expresan en su membrana determinadas proteínas de superficie, denominadas colectivamente moléculas accesorias, cuya función principal es estabilizar la interacción inicial entre la célula T y la célula presentadora (como CD4, CD8, CD2). Esta interacción inicial facilita el posteriorreconocimiento del antígeno por el TCR.

Asociado a las dos proteínas polimórficas que constituyen el TCR se encuentra un grupo de proteínas monomórficas denominado en conjunto CD3, que forman así el complejo TCR-CD3. Las cadenas CD3 son imprescindibles para la transmisión de la señal de reconocimiento antigénico al interior celular, estando probablemente implicadas en las interacciones del TCR con las moléculas accesorias antes citadas.

Cuando ocurre el reconocimiento entre el TCR y la molécula MHC que lleva el antígeno, se desencadena una cascada de reacciones bioquímicas en el citoplasma de la célula T, que origina el proceso de activación, estando también implicadas en estas reacciones las moléculas accesorias.

Si, por el contrario, no se produce dicho reconocimiento, ambos tipos celulares (linfocito T y célula presentadora) se separan sin cambios.

ESTRUCTURA PROTEICA DEL COMPLEJO TCR-CD3El complejo TCR-CD3 consta de dos partes bien diferenciadas, tanto estructural como funcionalmente.

TCR. Heterodímero con un peso total de 86 kD cuyas dos cadenas polipeptídicas, denominadas a y b, están unidas covalentemente por puentes disulfuro. Es la porción específica del receptor, por lo tanto polimórfica, y en ella se da la variación clonotípica que permite el reconocimiento de más de 1015 antígenos diferentes (es decir, cada linfocito T tiene un TCR único e irrepetible). Existe un isotipo del TCR que se encuentra en una pequeña subpoblación (inferior al 5%) de célulasT y está formado por cadenas g y d en lugar de a y b.

Este heterodímero tiene una estructura similar al TCR a-b, y su función biológica aún no está claramente determinada.

CD3. Es la porción invariable del complejo y está formado por, al menos, cuatro proteínas unidas no covalentemente, denominadas g, d, e y z.

CADENAS POLIMÓRFICAS (TCR)Existe una gran similitud entre la estructura de las inmunoglobulinas y las cadenas a y b del TCR. Ambas cadenas polipeptídicas constan de una región variable (V), una región constante (C) y una región de unión (J, del inglés joining) situada entre las dos anteriores. La cadena b tiene, además de las regiones V, J y C, una región de diversidad (D) situada entre V y J.La región variable de las cadenas a y b está formada por 102-119 aminoácidos y contiene dos cisteínas implicadas en puentes disulfuro intracatenario. Es en esta

región V, junto con la región J (y con la D en el caso de las cadenas b), donde reside la variación clonotípica del TCR.

La región C de ambas cadenas tiene 138-179 aminoácidos, formando tres dominios diferenciados:

1. Un gran dominio extracelular que contiene tres cisteínas (dos de ellas forman un puente intracatenario, y la tercera está implicada en la unión de las cadenas a y b).

2. Un pequeño dominio transmembrana, con estructura en a-hélice, donde destaca la presencia de aminoácidos con carga positiva probablemente implicados en las interacciones con las cadenas CD3 (cuyos aminoácidos transmembrana están cargados negativamente).

3. Un tercer dominio, de sólo cinco aminoácidos que forma la región citoplasmática. El receptor g-d se expresa en una población minoritaria de linfocitos T periféricos que, en su mayoria, carecen de las moléculas de superficie CD4 y CD8 (también se encuentra en una pequeña proporción de timocitos y en linfocitos del epitelio intestinal). La estructura de este heterodímero, de 75- 110 kD, es análoga al TCR a-b. La cadena g está formada por una región V, una región J y una región C (en cuyo dominio transmembrana aparece un residuo con carga positiva). La cadena d consta de una región V, una región D, una región J y una región C, con dos residuos con carga positiva en el dominio transmembrana.

CADENAS MONOMÓRFICAS (CD3)Asociadas al TCR hay al menos cuatro cadenas monomórficas: CD3 g, de 25-28 kD; CD3 d, de 20 kD, CD3 e, de 20 kD y CD3 z, de 16 kD.

Las cadenas CD3 g, CD3 d (ambas glucosiladas) y CD3 e (no glucosilada) guardan una gran homología genética y estructural entre sí. Las tres cadenas están formadas por una región extracelular, con un puente disulfuro que forma un dominio característico de la superfamilia de las inmunoglobulinas, una región transmembrana, con un residuo cargado negativamente implicado en la interacción con el TCR, y una región citoplasmática, de 44-81 aminoácidos, de tamaño suficiente para transducir señales al interior celular (en este dominio citoplasmático de las cadenas CD3 g y CD3 d aparecen residuos de serina susceptibles de fosforilación).

La cadena CD3 z se asocia al TCR en forma de homodímero zz. Tiene una estructura distinta de las otras proteínas CD3, ya que su dominio extracelular consta únicamente de 9 aminoácidos, mientras que el dominio intracelular está formado por 112 aminoácidos y tiene seis tirosinas que se fosforilan cuando el receptor de la célula T se activa.

Dicha fosforilación está implicada en la transducción de la señal de activación.

GENÉTICA: CADENAS POLIMÓRFICASAl igual que ocurre con las inmunoglobulinas, los genes que codifican las cadenas del TCR están formados por la unión de elementos génicos separados que codifican para las regiones V, D, J y C. El reordenamiento génico (proceso mediante el cual se genera la gran diversidad de receptores antigénicos), tanto de las inmunoglobulinas como del TCR, es dependiente de la presencia de secuencias de ADN específicas adyacentes a los segmentos génicos que se reordenan.

El gen TCR b se encuentra localizado en el cromosoma 7. Contiene dos secuencias intercambiables, C b1 y C b2, que codifican el dominio C. Cada una de estas secuencias lleva asociada 6-7 segmentos J y un segmento D. A continuación de estos dos grupos de genes C-J-D se localizan 25-30 elementos génicos que codifican para la región V.

RECEPTOR DE LINFOCITOS B (BCR):

ESTRUCTURA Y FUNCIÓN El receptor de los linfocitos B (BCR) es generado somáticamente durante la diferenciación linfocitaria, lo cual permite que cada célula B esté provista de un receptor único que no está codificado en el DNA germinal y no está predestinado a reconocer un antígeno extraño particular.El repertorio linfocitario es generado al azar y, los linfocitos B cuyo receptor es capaz de reconocer un epítopo antigénico particular serán seleccionados para su proliferación y expansión clonal. La interacción BCR-antígeno inicia la transducción de señales bioquímicas que conducen a la activación, proliferación y diferenciación linfocitaria; además gatillan la internalización endocítica del complejo y el procesamiento y presentación de fragmentos antigénicos a linfocitosT-antígeno específicos, en aquellos casos en que el desarrollo de respuesta inmune requiere de colaboración de linfocitos T "helper" (LTh).

El BCR es un complejo glicoproteico heterooligomérico transmembrana, que incluye dos subunidades, estructural y funcionalmente distintas y no covalentemente unidas entre sí.

La primera subunidad corresponde a una inmunoglobulina (Ig) de membrana, que actúa como receptor clonotípico propio de cada linfocito y responsable del reconocimiento específico del antígeno. La segunda subunidad, denominada complejo accesorio Ig-α/Ig-β, es invariante o (conservado) en todos los linfocitos B y, responsable del transporte y expresión del receptor clonotípico en la membrana y de la transducción de señales de activación, luego de la interacción BCR-antígeno.

Las células poco diferenciadas (pro-B) expresan el enzima Tdt .

Los linfocitos B desde etapas de diferenciación tempranas expresan moléculas HLA de clase II que sólo existen además en células presentadoras de antígenos.

También, en todas las etapas del proceso de diferenciación se expresa CD 19 , que es el mejor marcador del linaje B.

En la tercera etapa madurativa (pre-B) se comienza a expresar la Inmunoglobulina en superficie, aunque sólo se completa en la ultima etapa de diferenciación (célula B inmadura), con la expresión de IgM e IgD en superficie

Es también en esta última etapa de diferenciación donde se aprecia la expresión de CD 20 que se pierde en el paso a células plasmáticas Los linfocitos B inmaduros y maduros expresan CD21 que es a la vez receptor para complemento y para el virus de Epstein-Barr (EBV).

Las moléculas CD19 y CD20 son importantes en la proliferación y activación de los linfocitos B. Por último, en los linfocitos B activados se enciende la expresión de la proteína CD38 (marcador de estado de activación que también tienen los linfocitos T activados).

Otra molécula accesoria fundamental en los linfocitos B es CD40, puesto que cuando esta molécula se une a su ligando, da señales al linfocito B para que cambie de isotipo en su Inmunoglobulina.