海洋沉积物中磷分级提取 生物可利用磷估算
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海洋沉积物中磷分级提取 生物可利用磷估算. 实验八. 一、目的要求. 掌握海洋沉积物中磷分级提取方法 掌握海洋沉积物中生物可利用磷估算. 二、方法概述. TP = IP+OP. 潜在的生物可利用颗粒磷，在一定条件能进入水体被生物利用. 二、方法概述. 分离、定量海洋沉积物中各种形态磷→化学试剂提取法。 基于给定提取剂对某一结合形式磷选择性的操作性定义 方法要求：磷含量＞ 0.005% ，精密度 4% 。. 二、方法概述. 用 MgCl 2 、 NaOH 和 HCl 三步提取，估算沉积物中磷生物可利用性。 - PowerPoint PPT Presentation
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实验八
海洋沉积物中磷分级提取生物可利用磷估算
一、目的要求
• 掌握海洋沉积物中磷分级提取方法• 掌握海洋沉积物中生物可利用磷估算
磷灰石磷（AIP）：Ca-P
无机磷（PI）P总
有机磷（PO）非磷灰石磷（NAIP）：(Fe + Al)-P
以C-O-P键结合的磷
以C-P键结合的磷
指磷酸钙等天然碎屑成因的无机磷
指除了AIP外，所有其它无机磷，主要包括颗粒表面松散吸附的无机磷，吸附在水合氧化物表面的无机磷，以及磷酸铁铝，磷铝石等矿物态磷
TPIP
OP
二、方法概述TP = IP+OP
潜在的生物可利用颗粒磷，在一定条件能进入水体被生物利用
二、方法概述• 分离、定量海洋沉积物中各种形态磷→化学
试剂提取法。• 基于给定提取剂对某一结合形式磷选择性的
操作性定义• 方法要求：磷含量＞ 0.005% ，精密度 4% 。
二、方法概述
• 用MgCl2、 NaOH和 HCl 三步提取，估算沉积物中磷生物可利用性。
• 第一步 MgCl2 提取：①悬浮物中浮游植物细胞内磷；②吸附于悬浮颗粒物中水合氧化物表面的磷。（ NAIP ）
• 第二步 NaOH 提取：①颗粒物中被 Fe、 Al水合氧化物吸附磷；②铁铝磷酸盐（ Fe-P、Al-P ）。（ NAIP ）
• 第三步 HCl 提取：磷灰石磷（生物难利用）
三、实验内容•（平行 3 份，空白 1 份）•称约 40mg沉积物→ 50mL具塞比色管→ 40mL H2O→5mL5% K2S2O8+0.83mL 6mol/L H2SO4→盖塞→保鲜袋包扎瓶口→高压消化 0.5h（ 105℃）→冷却室温→定容 50mL→加混合试剂 5mL→5cm比色皿 880nm波长→测定吸光值
•注意：比色前静置 5 分钟，比色时以防沉淀物上浮影响吸光值，可用吸管移取溶液
高压锅在 406 ：注意熟悉使用高压锅
1. 总磷测定
颗粒物样品50mg
上清液15ml定容至50ml测定MgCl2－P
上清液15ml定容至50ml测定NaOH－P
上清液5ml定容至50ml测定HCl－P
0.1mol/LNaOH20ml 振荡8h 离心
1.0 mol/LHCl 20ml 振荡1h 离心
1.0 mol/LMgCl2 20ml 振荡2h 离心
残渣
残渣
残渣
弃去 注意熟悉使用振荡器和离心机
振荡器：506
离心机：507
三、实验内容2 、分级提取平行3份空白1份
•①MgCl2提取相：•振荡 2h离心（ 4500r/m）后→上清液 15mL→定容 50mL→与工作曲线步骤同。
• 所有提取步骤的残渣处理：•20ml蒸馏水分次洗涤三角瓶后→离心管→搅动→离心→弃上清夜→下一步提取液分次转移→原三角瓶
三、实验内容2 、分级提取
• ② NaoH提取相：•振荡 8h离心后→上清液 15mL→酚酞 1d→1mol/LHCl 几 d pH＝ 7→定容至 50mL→与工作曲线步骤同。
•③HCl提取相：•振荡 1h离心后→ 5mL→10mol/LNaOH 约 0.8mL调 pH＝ 7→定容50mL→与工作曲线步骤同。
2 、分级提取 三、实验内容
3. 钼蓝法测定磷•① 磷标准使用溶液： 移取浓度为 8.000µmol/mL的贮备液 1.00毫升，稀释成 100毫升，使含磷为 0.0800µmol/mL。有效期为一周。
三、实验内容
•② 混合试剂配制： 按序量取 100mL 6 mol/l硫酸、40mL 3％钼酸铵溶液、 40mL 5.4％抗坏血酸溶液和 20mL0.136％酒石酸氧锑钾溶液于烧杯中，每加一种溶液均要混匀，盛于试剂瓶中。
有效时间为 6 小时，临使用前适量配制。
三、实验内容3. 钼蓝法测定磷
•③ 磷标准工作曲线制作•移取磷标准使用液0 、 0.50、 1.00、 1.50、 2.00、2.50mL于 50mL比色管中。
•用蒸馏水稀释到刻度，加入混合试剂5mL，混匀。
•10min后以蒸馏水为参比 ，测吸光值。（如溶液温度小于 15℃时需放置 20min ）
3. 钼蓝法测定磷 三、实验内容
•① 2 人一组•② 每组做一个站位（北部湾沉积物样品）•③ 每个站位 总磷平行测定 3 份（空白 1 份） 磷分级提取平行测定 3 份（空白 1 份）
四、数据处理1 、实验要求
2 、数据处理
四、数据处理
① 计算样品总磷含量（ mg/Kg）
② 计算样品各提取相磷的含量（ mg/Kg）
③ 估算样品中生物可利用磷的含量（ mg/Kg ）
要求写出计算过程和填写表 1 。
表 1. 沉积物中不同形式磷的分析记录表
序号 样重（ g ） 总磷含量PT (mg/kg)
样重（ g ）
MgCl2-P
(mg/kg)NaOH-P(mg/kg)
HCl-P(mg/kg)
1
2
3
平均
四、数据处理
