Unbiased stereology
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Unbiased STEREOLOGY for biological research 16 | 01 | 2013
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Introducción a las técnicas estereologicas usando sistemas de microscopía
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Unbiased STEREOLOGY for biological research
16 | 01 | 2013
UNBIASED STEREOLOGYEstereología "imparcial"
« La estereología es un set de métodos diseñados
para asegurar un análisis cuantitativo riguroso del
tamaño, forma y número de objetos de interés »
➲ Volumen (3
dimensiones)
➲ Superficie (2
dimensiones)
➲ Largo (1 dimensiones)
➲ Número (0dimensiones)
La estereología apunta a recrear o estimar las propiedades de objetos geométricos en el espacio
UNBIASED STEREOLOGY¿Por qué "imparcial“?
UNBIASED STEREOLOGYDiferentes métodos
Model - Based Stereology Usa modelos basados en las propiedades geométricas de los objetos
Desing - Based Stereology Las sondas y esquemas de muestreo son diseñados, por lo que los métodos son independientes del tamaño, forma, orientación y distribución espacial del objeto.
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☑
Usa métodos de aproximación que solo funcionan si los modelos realmente representan al objeto.
Todo objeto tiene la misma probabilidad de ser muestreado
No se asume sobre el tamaño, forma, orientación o distribución del objeto muestreado
➲
➲
CRITERIOS
Punto único de conteo
Muestreo
Unbiased Counting Frame
❶
❷
❸
CRITERIOSMuestreo
CRITERIOSMuestreo
La retina del ojo es un buen ejemplo, ya que las células de ganglio retinal no se distribuyen de forma uniforme sobre la retina.
Random independent samples
Uniform random systematic samples
CRITERIOSMedición: Punto único de conteo
CRITERIOSMedición: The Unbiased Counting Frame
Una partícula es contada si y sólo si:
Está completamente dentro del cuadro de conteo
Cruza una linea verde pero no una roja
☑
☑
Línea de inclusión
Línea de exclusión
CRITERIOSUn ejemplo…
CRITERIOSThe Unbiased Counting Frame: ¿Cómo funciona?
CRITERIOSThe Unbiased Counting Frame: ¿Cómo funciona?
La célula de Purkinje mostrada en este ejemplo es contada en el UCF n°3 y solo en este UCF, ya que toca al menos una de las líneas de exclusión de los UCF n° 1, 2 y 4.
CRITERIOSMedición: The Optical Disector
Di-sector = dos secciones
CRITERIOSThe Guard Zones
VENTAJASLo que ofrece el método
Datos 3D “reales” Los valores obtenidos se relacionan con un punto en el espacio
Exacto Y por lo tanto imparcial
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☑
Preciso Lo que aumenta la eficiencia del proceso
Simple Fácil de aplicar en la práctica
☑
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APLICACIONESLa estereología puede usarse para estimar
Una población de células
Tamaño celular
Volumen de una región específica de un órgano
Fracción de área
Superficie
Largo de fibra
Etc…
STEREO INVESTIGATORPermite hacer estimaciones:
Área dentro de un contorno trazado
Volumen, luego de medir el grosor de una muestra histológica
Conteo de poblaciones
!!El programa facilita el muestreo sistemático
Permite el uso de cuadros de conteo y calcula las zonas de
protección
Posee diversas sondas para análisis locales y globales
Además:
![ML-SM-050, Rev. 1 · [20] Howard, V. and Reed, M.G., Unbiased Stereology: Three-dimensional Measurement in Microscopy, 2nd Ed., Garland Science, New York, 2005 ... [20] Howard, V.](https://static.fdocuments.net/doc/165x107/5b3ef3887f8b9a51528b7fb4/ml-sm-050-rev-1-20-howard-v-and-reed-mg-unbiased-stereology-three-dimensional.jpg)
