1

BAB I

PENDAHULUAN

1.1. Latar Belakang

Agama Islam memerintahkan umatnya untuk makan makanan yang halal.

Halal saja tidak cukup, namun juga harus baik. Sebagaimana firman Allah SWT

berfirman dalam surat Al-Maidah ayat 88:

Artinya: Dan makanlah makanan yang halal lagi baik dari apa yang Allah

telah rezekikan kepadamu, dan bertakwalah kepada Allah yang

kamu beriman kepada-Nya.

Ayat diatas menjelaskan bahwa ada dua kriteria makanan yang harus

dikonsumsi, yaitu halal dan baik. Halal yang dimaksud adalah dalam

mendapatkan makanan, dilakukan dengan cara-cara yang diperbolehkan dalam

Agama Islam. Seperti tidak dengan membunuh melainkan dengan menyembelih

dengan menyebut nama Allah. Sedangkan baik yang dimaksud adalah makanan

yang bisa menyehatkan tubuh dan tidak mengandung zat-zat yang

membahayakan tubuh.

Makanan yang menyehatkan tubuh, ditinjau dari sudut pemenuhan

kebutuhan gizi yaitu makanan yang sesuai dengan kecukupan kebutuhan gizi.

Selain itu, makanan yang diolah secara baik dengan media baik serta dengan

bahan campuran yang baik dan menggunakan bahan penolong yang baik juga.

Dalam bahasa sederhana adalah makanan yang bergizi, higienis, dan tidak

beracun (Erniwati, 2010).

Pada masa yang serba canggih seperti saat ini, seiring dengan kemajuan

teknologi manusia dapat mempelajari manfaat ciptaan Allah dengan mudah.

Tidak terkecuali dalam bidang pengolahan bahan makanan agar manusia

mendapatkan makanan yang bermanfaat bagi tubuh dalam bentuk yang beraneka

2

ragam. Misalnya pemanfaatan berbagai bakteri menguntungkan atau bakteri

asam laktat dalam pembuatan makanan maupun minuman probiotik (Erniwati,

2010).

Salah satu contoh minuman probiotik yang bermanfaat bagi tubuh adalah

yoghurt. Menurut Winarno (1993) dalam bukunya, mendefinisikan yoghurt

merupakan produk hasil fermentasi susu. Yoghurt merupakan hasil fermentasi

susu dengan penambahan kultur bakteri campuran, misalnya Lactobacillus

bulgaricus dan Streptococcus thermophilus. Kedua bakteri tersebut termasuk

dalam kelompok bakteri asam laktat. Tidak harus dua bakteri tersebut, namun

bisa menggunakan bakteri penghasil asam laktat yang lain. Bakteri asam laktat

yang terlibat dalam fermentasi makanan dapat menghasilkan asam sehingga

dapat menurunkan pH di lingkungan sekitar bakteri tersebut tumbuh. Hal ini

dapat menyebabkan bakteri lain sulit untuk tumbuh (Lee dan Lucey, 2010).

Dalam pembuatan yoghurt dapat dilakukan diversifikasi kultur Bakteri

Asam Laktat (BAL) yang bersifat probiotik seperti L. acidophilus, Lactobacillus

bulgaricus dan Streptococcus thermophiles. Penambahan bakteri probiotik pada

yoghurt, sangat potensial untuk meningkatkan kualitas produk dan status

kesehatan. Yoghurt bisa menyediakan kondisi ideal bagi pertumbuhan bakteri

probiotik dan bagi sistem pencernaan manusia (Nizori, 2010).

Menurut Hutabarat (2010) perbedaan kandungan bakteri asam laktat

dalam yoghurt menunjukkan kemungkinan perbedaan potensi bakteriosin setiap

produk sebagai antibakteri. Antibakteri dari bakteri asam laktat terbukti sangat

efektif menghambat banyak bakteri yang merugikan terutama dalam saluran

pencernaan. Salah satu pengahambatan bakteri yang merugikan adalah mengubah

molekul protein dan asam nukleat. Hidup suatu sel bergantung pada

terpeliharanya molekul protein dan asam nukleat dalam keadaan alamiahnya.

Suatu antibakteri dapat mengubah keadaan ini dengan mendenaturasikan protein

dan asam nukleat sehingga merusak sel tanpa dapat diperbaiki lagi. Salah satu

antibakteri yang bekerja dengan cara mendenaturasi protein. Denaturasi protein

dapat dipengaruhi oleh beberapa factor, salah satunya adalah pH. Bakteri Asam

3

Laktat (BAL) yang terdapat pada yoghurt akan menghasilkan asam laktat.

Dengan adanya asam laktat maka pH pada yoghurt akan mengalami penurunan.

Jika pH mengalami penurunan, maka akan secara tidak langsung akan

mendenaturasikan protein dan asam nukleat sehingga sel akan rusak (Pelczar,

2008).

Peranan bakteri asam laktat sebagai bakteri probiotik sangat ditentukan

oleh sifatnya yaitu tetap dalam keadaan hidup sejak dikonsumsi hingga mencapai

usus manusia. Tidak semua bakteri asam laktat mempunyai sifat demikian. Pada

umumnya bakteri asam laktat yang berasal dari saluran pencernaan manusia

seperti Lactobacillus acidophilus, Lactobacillus casei Shirota, Bifidobacterium

bifidum, Lactobacillus gasseri, dan Lactobacillus reuteri dapat berperan sebagai

probiotik yang baik. Sedangkan Streptococcus thermophilus, Lactobacillus

bulgaricus, Lactococcus lactis, Latococcus cremoris, dan Lactococcus

diacetylactis merupakan kultur fermentasi produk susu yang tidak dapat

mencapai usus manusia dalam keadaan hidup (Setyoningsih, 2004).

Yoghurt biasanya dibuat dengan menggunakan bahan dasar susu sapi,

namun demikian jenis susu nabati seperti susu kedelai dapat dijadikan pengganti

susu sapi karena perbandingan mutu keduanya hampir sama. Yoghurt yang

berasal dari susu kedelai dikenal dengan istilah soyghurt (Winarno,1993).

Sedangkan miyoghurt merupakan yoghurt yang berasal dari santan kelapa.

Pengolahan santan menjadi yoghurt juga merupakan salah satu usaha

penganekaragaman produk santan terutama bagi masyarakat yang sangat

menyukai produk-produk probiotik. Selain itu, tingginya produksi kelapa di

Indonesia merupakan potensi yang sangat besar untuk mengolah santan menjadi

yoghurt (Santoso, 2009).

Bakteri patogen merupakan bakteri merugikan yang dapat menyebabkan

berbagai macam penyakit dan infeksi bagi manusia. Salah satu contohnya adalah

bakteri Salmonella thypi. Kemampuan patogenitas Salmonella thypi adalah

menginfeksi saluran pencernaan. Diare merupakan salah satu dari dua penyakit

4

yang menyebabkan angka kematian anak yaitu mencapai 29% diseluruh dunia,

atau terhitung sebanyak lebih dari 2 juta anak setiap tahun (WHO, 2013).

Di Indonesia, kasus diare merupakan penyebab kedua terbesar kematian

anak setelah kasus malnutrisi dengan total kematiannya mencapai 31,4%. Bakteri

penyebab diare diantaranya adalah Salmonella thypi dan Shigella dysenteriae.

Menurut WHO Salmonella thypi merupakan salah satu penyakit yang

disebabkan infeksi bakteri melalui makanan (Karlina, 2010).

Yoghurt yang dibuat dari bahan dasar yang berbeda diduga memiliki

aktivitas antibakteri yang berbeda pula, sehingga hal perlu untuk diteliti lebih

lanjut. Oleh karena itu, penelitian ini dilakukan untuk menguji aktivitas senyawa

antibakteri dalam soyghurt dan miyoghurt terhadap bakteri Salmonella thypi

secara in vitro.

1.2. Rumusan Masalah

Berdasarkan latar belakang diatas, didapatkan rumusan masalah sebagai

berikut:

1. Apakah ada aktivitas antibakteri pada soyghurt dan miyoghurt dalam

menghambat pertumbuhan bakteri Salmonella thypi?

2. Seperti apa perbandingan aktivitas antibakteri antara soyghurt dan

miyoghurt terhadap bakteri Salmonella thypi?

1.3. Tujuan

Berdasarkan rumusan masalah diatas, maka tujuan dari penelitian ini adalah:

1. Untuk mengetahui efek aktivitas antibakteri dari soyghurt dan miyoghurt

terhadap bakteri Salmonella thypi

2. Untuk mengetahui seperti apa perbandingan aktivitas antibakteri antara

soyghurt atau miyoghurt terhadap bakteri Salmonella thypi

1.4. Manfaat

Penelitian ini diharapkan dapat memberikan beberapa manfaat, diantaranya:

5

1. Memberikan informasi kepada publik bahwa soyghurt dan miyoghurt

dapat digunakan sebagai minuman probiotik untuk menjaga kesehatan

saluran pencernaan dari bakteri patogen.

2. Memberikan informasi kepada produsen dan masyarakat mengenai potensi

kelapa yang bisa dijadikan minuman fermentasi.

3. Memberikan sumbangan ilmu pengetahuan khususnya di bidang

mikrobiologi pangan dengan memberikan informasi tentang antibakteri

yang dihasilkan bakteri asam laktat pada soyghurt dan miyoghurt.

4. Dapat menjadi bahan pengetahuan dan acuan bagi peneliti selanjutnya

untuk meneliti lebih dalam di bidang mikrobiologi pangan

1.5.Hipotesis

Hipotesis dari penelitian ini adalah terdapat efek antibakteri dari soyghurt dan

miyoghurt dengan penambahan kultur Lactobacillus bulgaricus, Lactobacillus

acidophilus dan Lactobacillus casei terhadap Salmonella thypi.

1.6. Batasan Masalah

Batasan masalah pada penelitian ini adalah sebagai berikut:

1. Sampel yang digunakan adalah soyghurt dan miyoghurt

2. Soyghurt yang dibuat berasal dari kedelai (Glicin max) dan miyoghurt

yang dibuat berasal dari santan kelapa (Cocos nucifera)

3. Bakteri starter yang digunakan adalah Lactobacillus bulgaricus,

Lactobacillus acidophilus dan Lactobacillus casei

4. Bakteri uji adalah Salmonella thypi

6

BAB II

TINJAUAN PUSTAKA

2.1. Antibakteri

Antibakteri adalah suatu senyawa yang dihasilkan oleh suatu mikroorganisme

dan dalam konsentrasi kecil mampu menghambat bahkan membunuh proses

kehidupan bateri. Berdasarkan sifat toksisitas selektif, ada antibakteri yang bersifat

menghambat pertumbuhan bakteri yang dikenal sebagai bakteriostatik, dan ada yang

bersifat membunuh bakteri dikenal sebagai bakterisidal (Jawetz , 2005).

Aktivitas senyawa antibakteri dipengaruhi oleh pH, suhu stabilitas senyawa

tersebut, jumlah bakteri yang ada, lamanya inkubasi, dan aktivitas metabolisme

bakteri. Setiap jenis antibakteri memiliki meknisme tersendiri dalam menghambat

pertumbuhan antibakteri. Mekanisme kerja antibakteri adalah sebagai berikut (Pelczar

dan Chan, 2008):

a) Merusak dinding sel

Bakteri memiliki lapisan luar yang kaku disebut dinding sel yang dapat

mempertahankan bentuk bakteri dan melindungi membran protoplasma di bawahnya.

Struktur dinding sel dapat dirusak dengan cara menghambat pembentukannya atau

mengubahnya setelah selesai terbentuk. Antibiotik yang bekerja dengan mekanisme

ini di antaranya adalah penisilin.

b) Mengubah permeabilitas sel

Membran sitoplasma mempertahankan bahan tertentu di dalam sel serta

mengatur aliran keluar masuknya bahan lain. Membran memelihara integritas

komponen seluler. Kerusakan pada membran ini akan mengakibatkan terhambatnya

pertumbuhan sel atau matinya sel. Polimiksin bekerja dengan merusak struktur

dinding sel dalam kemudian antibiotik tersebut bergabung dengan membran sel

7

sehingga menyebabkan disorientasi komponen lipoprotein serta mencegah

berfungsinya membran sebagai perintang osmotic.

c) Mengubah molekul protein dan asam nukleat

Hidup suatu sel bergantung pada terpeliharanya molekul protein dan

asam nukleat dalam keadaan alamiahnya. Suatu antibakteri dapat mengubah keadaan

ini dengan mendenaturasikan protein dan asam nukleat sehingga merusak sel tanpa

dapat diperbaiki lagi. Salah satu antibakteri yang bekerja dengan cara mendenaturasi

protein dan merusak membran sel adalah senyawa turunan fenolik.

d) Menghambat sintesis asam nukleat dan protein

DNA, RNA, dan protein memegang peranan sangat penting di dalam proses

kehidupan normal sel. Hal ini berarti bahwa gangguan apapun yang terjadi pada

pembentukan atau pada fungsi zat-zat tersebut dapat mengakibatkan kerusakan total

pada sel. Tetrasiklin merupakan salah satu antibiotik yang dapat menghambat sintesis

protein dengan cara menghalangi terikatnya RNA pada ribosom, selama

pemanjangan rantai peptide.

2.2. Yoghurt

Yoghurt adalah produk fermentasi susu yang bersifat semi padat. Selain

dibuat dari susu segar, yoghurt juga dapat dibuat dari susu skim (susu tanpa lemak)

yang dilarutkan dalam air dengan perbandingan tertentu tergantung pada kekentalan

produk yang diinginkan. Selain dari susu hewani, belakangan yoghurt juga dapat

dibuat dengan susu nabati (susu kacang-kacangan). Sebagai contoh, yoghurt dapat

dibuat dari kacang kedelai yang sangat populer dengan sebutan "soyghurt". Dan baru-

baru ini dikembangkan yoghurt dari santan kelapa yang disebut "miyoghurt"

(Handayani, 2006).

Yoghurt dibuat melalui proses fermentasi yang melibatkan dua jenis bakteri

yang bersahabat dengan tubuh kita. Keduanya adalah Streptococcus thermophilus

8

dan Lactobacillus bulgaricus. Para pakar gizi menyatakan, kedua bakteri tersebut

tergolong dalam bakteri asam laktat karena mampu menguraikan laktosa menjadi

asam laktat. Kehadiran asam laktat ini yang kemudian membuat yoghurt berasa asam.

Yoghurt ternyata dipercaya manfaatnya oleh berbagai bangsa di dunia. Bangsa India

meyakini yoghurt sebagai obat perut yang mujarab. Susu asam ini mampu meredakan

gangguan pencernaan yang umum dan mengembalikan keseimbangan tubuh

(Herawati, 2010).

2.2.1. Soyghurt

Soyghurt merupakan produk fermentasi susu kedelai dengan menggunakan

bakteri Streptococcus thermophillus dan Lactobacillus bulgaricus yang telah umum

dipakai dalam proses pembuatan yoghurt. Streptococcus thermophillus dan

Lactobacillus bulgaricus merupakan spesies mikroba yang esensial dan aktif dalam

hubungan simbiotik. Selain sebagai makanan, produk yang dibuat dari susu ini

dianggap sebagai produk yang dapat membantu pencernaan, mencegah diare,

mencegah peningkatan kadar kolesterol darah yang terlalu tinggi, bahkan dinyatakan

dapat membantu melawan kanker. Yoghurt dikonsumsi karena kesegarannya, aroma

dan teksturnya yang khas (Herawati, 2010).

Fermentasi dapat menimbulkan citarasa baru dan membentuk tekstur beberapa

makanan sehingga mampu memperbaiki penerimaan produk kedelai. Sewaktu

fermentasi akan terbentuk asam-asam organik yang menimbulkan citarasa khas pada

soyghurt. Hal penting yang harus diperhatikan dalam pembuatan soyghurt adalah

jenis karbohidrat dalam susu kedelai sangat berbeda dengan karbohidrat yang

terdapat pada susu sapi. Karbohidrat yang ada pada susu kedelai terdiri golongan

oligosakarida, yaitu rafinosa dan stakiosa dengan kandungan gula yang dapat

dimanfaatkan oleh mikroorganisme yang berperan dalam proses pembuatan soyghurt

sangat terbatas, oleh karena itu perlu dilakukan penambahan sumber gula yang lain.

Apabila susu kedelai langsung diinokulasi tanpa penambahan gula tidak akan

menghasilkan soyghurt yang berkualitas baik hal ini ditandai dengan masih tingginya

9

nilai pH dan tidak terjadi penggumpalan protein. Sumber gula yang dapat

ditambahkan adalah sukrosa, laktosa, glukosa atau fruktosa. Jenis gula yang berbeda

akan menghasilkan asam-asam organik yang berbeda yang pada akhirnya akan

menyebabkan terjadinya perbedaan kualitas soyghurt yang dihasilkan. Hasil

metabolisme karbohidrat (gula) berupa asam-asam organik akan mempengaruhi

citarasa dan ikut menentukan kualitas yoghurt ( Rahman dkk, 1992 ).

2.2.2. Miyoghurt

Dewasa ini minuman fermentasi yoghurt telah banyak dikonsumsi diberbagai

Negara didunia. Yoghurt dapat dibuat dari kacang kedelai yang sangat populer

dengan sebutan soyghurt. Yoghurt juga dapat dibuat dari santan kelapa, yaitu yang

disebut dengan miyoghurt. Sedangkan produk Yoghurt yang dibuat dari buah-

buahan dikenal dengan fruitghurt (Sumantri, 2004).

Yoghurt dengan bahan baku santan kelapa ini dikenal dengan istilah

niyoghurt. Pembuatan niyoghurt santan yaitu susu skim, dan gula pasir dipasteurisasi

dengan cara memanaskannya hingga suhu 70oC sambil diaduk pada penangas air.

Setelah suhu pasteurisasi dicapai, suhu dipertahankan selama 30 menit tanpa

pengadukan. Santan kelapa didinginkan sampai suhu 45oC dengan cara direndam

dalam air yang ditambahkan es batu. Kemudian santan dituang ke dalam gelas

plastik, ditambah karagenan sebanyak 0,1%, dan diinokulasi starter Streptococcus

thermophillus dan Lactobacillus bulgaricus sebanyak 2% dari total campuran dengan

perbandingan sesuai dengan perlakuan. Selanjutnya, santan yang telah diinokulasi

starter diinkubasi pada suhu 43oC selama 5 jam. Kemudian niyoghurt disimpan dalam

lemari pendingin pada suhu 4oC (Yunita, 2011).

Berdasarkan SNI (Standar Nasional Indonesia) untuk yoghurt dapat dilihat

pada tabel berikut :

10

2.3. Manfaat Yoghurt

Manfaat yoghurt yang diuraikan dr. Carmen M. Siagian, MS, Bagian Ilmu

Gizi Fakultas Kedokteran, Universitas Kristen Indonesia, Jakarta, diantaranya adalah

(Kelana, 2008):

1. Membantu penderita lactose intolerance

Laktosa susu dalam yoghurt sudah dipecah oleh bakteri baik Lactobacillus

bulgaricus melalui proses fermentasi, sehingga mudah diserap tubuh. Oleh karena itu

yoghurt sangat disarankan sebagai pengganti susu bagi anak yang tidak mampu

mencerna laktosa dengan baik. Yoghurt yang diminum oleh anak, tidak menyebabkan

diare pada anak tersebut.

2. Degradasi kolesterol

Penelitian pada beberapa orang yang mengonsumsi yoghurt secara teratur dalam

jumlah dan waktu tertentu ternyata menunjukkan jumlah kolesterol dalam serum

darahnya menurun. Mekanisme penurunan kolesterol ini bisa terjadi karena bakteri

11

asam laktat yang ada dalam yoghurt dapat mendegradasi kolesterol menjadi

coprostanol. Coprostanol ini merupakan zat yang tak dapat diserap oleh usus. Berkat

yoghurt, coprostanol dan sisa kolesterol dikeluarkan bersama-sama tinja. Dengan

kata lain, jumlah kolesterol yang diserap tubuhpun menjadi rendah. Sebuah laporan

mengenai hal ini memaparkan bahwa penurunan kolesterol oleh bakteri Lactobacillus

dapat mencapai kisaran 27 38 persen.

3. Menghambat bakteri patogen

Pada sebuah penelitian dilaporkan bahwa Lactobacillus casei yang digunakan dalam

pembuatan yoghurt campuran susu skim dan susu kedelai, terbukti mampu

membunuh bakteri E. coli. Bakteri ini merupakan kuman yang terdapat saluran cerna.

Meski dalam jumlah kecil, bakteri ini sebenarnya tidak menimbulkan penyakit,

namun bila berlebihan dapat memunculkan dampak tidak sehat. Sementara dengan

adanya Lactobacillus casei, bakteri E. coli tidak bisa hidup karena Lactobacillus

casei yang merupakan bakteri baik menghasilkan suatu zat yang dapat menghambat

racun yang diproduksi E coli.

4. Menetralisir antibiotik

Mengonsumsi antibiotik secara oral akan mengakibatkan keseimbangan flora di

saluran cerna pasien menjadi terganggu. Walaupun antibiotik berfungsi untuk

mematikan kuman, namun antibiotik tidak bisa membedakan kuman yang perlu

dibunuh dan yang tidak perlu dimusnahkan. Karena dalam saluran cerna harus

terdapat kuman guna menjaga keseimbangan flora usus. Oleh karena itu, yoghurt

dapat dikonsumsi untuk menetralisir efek samping antibiotik.

5. Antikanker saluran cerna

Kanker saluran cerna banyak terjadi di usus besar. Penyebabnya antara lain terjadinya

ketidakseimbangan di saluran cerna, sehingga menghasilkan penumpukan berbagai

zat yang seharusnya terbuang. Bakteri-bakteri yang berperan dalam yoghurt dapat

mengubah zat-zat prekarsinogenik (zat-zat pemicu kanker) yang ada dalam saluran

pencernaan, sehingga mampu menghambat terjadinya kanker

12

6. Mencegah jantung koroner

Yoghurt mengandung bakteri baik yang tidak menimbulkan penyakit, yakni

Lactobacillus bulgaricus dan Streptococcus thermophilus. Bakteri tersebut itulah

yang kemudian diberi media berupa susu. Selama proses fermentasi susu dalam

pembuatan yoghurt, bakteri Lactobacillus bulgaricus dan Streptococcus thermophilus

akan tumbuh dan menjadi besar. Saat itulah kedua jenis bakteri tersebut akan

meningkatkan mutu protein yang terkandung dalam asam amino susu, misalnya

histidin yang baik bagi pertumbuhan anak. Selain itu, dalam proses fermentasi, kedua

jenis bakteri tersebut akan menghasilkan asam folat dan vitamin B kompleks.

Berbagai penelitian mengungkap bahwa kedua vitamin ini berguna mencegah

munculnya penyakit jantung koroner.

2.4. Bakteri Lactobacillus

Lactobacillus merupakan salah satu genus bakteri asam laktat yang paling

banyak dijumpai pada saluran gastrointestinal baik pada manusia maupun pada

hewan. Pada usus halus, jumlahnya dapat mencapai 106-107 sel/g, sedangkan pada

usus besar jumlahnya berkisar antara 1010 1011 sel/g (Hassan, 2006).

Bakteri asam laktat didefinisikan sebagai kelompok bakteri yang membentuk

asam laktat, baik sebagai satu-satunya produk maupun sebagai produk utama pada

metabolisme karbohidrat. Beberapa ciri yang dimiliki oleh bakteri asam laktat adalah

termasuk dalam Gram positif, tidak membentuk spora, berbentuk bulat atau batang,

dan pada umumnya tidak memiliki katalase. Bakteri asam laktat banyak ditemukan

pada produk makanan olahan, baik produk hewani seperti daging dan ikan yang

difermentasi, susu fermentasi, maupun pada produk nabati seperti fermentasi sayuran

dan buah-buahan, serta silase. Selain itu bakteri asam laktat juga banyak terdapat

pada organ dalam makhluk hidup, seperti pada saluran pembuangan, jalur genital,

jalur intestin, maupun jalur respiratori pada manusia dan hewan (Hassan, 2006).

13

2.4.1. Bakteri Lactobacillus bulgaricus

Lactobacillus bulgaricus adalah sejenis bakteri yang berperan dalam

pembentukan yogurt. Bakteri ini pertama kali diidentifikasikan oleh seorang dokter

asal Bulgaria bernama Stamen Grigorov, pada tahun 1905. Oleh karena itu

dinamakan menurut Bulgaria (Wikipedia, 2013).

Bakteri ini hidup dari "memakan" laktosa (gula susu) dan mengeluarkan asam

laktat. Asam ini sekaligus mengawetkan susu dan mendegradasi laktosa (gula susu)

sehingga orang yang tidak toleran terhadap susu murni dapat mengonsumsi yogurt

tanpa mendapat masalah kesehatan (Wikipedia, 2013).

Lactobacillus bulgaricus melakukan fermentasi susu sehingga membentuk

yoghurt. Bakteri ini sering disebut sebagai bakteri asam laktat karena mengubah

glukosa dalam susu menjadi asam laktat melalui proses fermentasi homolactic. Dalam

proses fermentasi tersebut bakteri ini juga merombak laktosa dalam susu menjadi

gula yang lebih sederhana (glukosa). Setelah itu dalam proses ini 85-90% dari gula

dimanfaatkan akan diubah menjadi asam laktat. Bakteri ini menghasilkan ATP

dengan melalui proses fosforilasi nonoksidatif. Selain itu dalam yoghurt terdapat

pengaroma yang berasal dari Asetaldehid yang dihasilkan Lactobacillus bulgaricus

(Firmansyah, 2009).

2.4.2. Bakteri Lactobacillus acidophilus

Lactobacillus acidophilus adalah bakteri dari genus Lactobacillus. Seperti

namanya, bakteri ini menyukai lingkungan asam dan bertanggung jawab mengubah

laktosa menjadi asam laktat. L. acidophilus umumnya tumbuh dalam kondisi pH

rendah (pH 4 5) dan pada suhu berkisar 25-35 derajat Celcius. Banyak strain L.

acidophilus merupakan probiotik alami yang berarti mereka bermanfaat bagi

organisme inangnya. Bakteri ini hadir dalam organ-organ tertentu dari manusia dan

hewan, terutama di mulut, saluran pencernaan, dan vagina. L. acidophilus membantu

14

tubuh melawan penyebab penyakit patogen sehingga disebut juga sebagai sistem

kekebalan tubuh kedua (Anonim, 2014).

Menurut penelitian, L. acidophilus memproduksi laktase, vitamin K, dan zat

anti-mikroba. Keberadaan L. acidophilus dalam tubuh membantu menjaga kondisi

asam, sehingga mencegah infeksi mikroba. Mengingat berbagai manfaat kesehatan

yang dimilikinya, L. acidophilus digunakan dalam produk susu serta untuk tujuan

terapeutik. Produk susu yang paling sering menggunakan L. acidophilus adalah susu

acidophilus manis dan yoghurt (Anonim, 2014).

Susu acidophilus dibuat dengan inokulasi L. acidophilus pada susu kemudian

difermentasi selama satu hari. Setelah fermentasi, susu berubah menjadi dadih yang

mengandung laktosa dalam jumlah minimum. Lactobacillus acidophilus juga

digunakan untuk mengobati berbagai penyakit seperti infeksi saluran kemih (ISK),

bacterial vaginosis (BV), dan diare (Anonim, 2014).

2.4.3. Bakteri Lactobacillus casei

Lactobacillus casei adalah bakteri Gram-positif, anaerob, tidak memiliki alat

gerak, tidak menghasilkan spora, berbentuk batang dan menjadi salah satu bakteri

yang berperan penting dalam pencernaan. Lactobacillus adalah bakteri yang bisa

memecah protein, karbohidrat, dan lemak dalam makanan, dan menolong penyerapan

elemen penting dan nutrisi seperti mineral, asam amino, dan vitamin yang dibutuhkan

manusia dan hewan untuk bertahan hidup (Evillya, 2010).

Bakteri ini berukuran 0,7 1,1 x 2,0 4,0 m dan merupakan bakteri yang

penting dalam pembentukan asam laktat. Seperti bakteri asam laktat lain,

Lactobacillus casei toleran terhadap asam, tidak bisa mensintesis perfirin, dan

melakukan fermentasi dengan asam laktat sebagai metabolit akhir yang utama.

Bakteri ini membentuk gerombolan dan merupakan bagian dari spesies

heterofermentatif fakultatif, dimana bakteri ini memproduksi asam laktat dari gula

heksosa dengan jalur Embden-Meyerlhof dan dari pentose dengan jalur 6-

15

fosfoglukonat, fosfoketolase. Pertumbuhan Lactobacillus casei pada suhu 15oC, dan

membutuhkan riboflavin, asam folat, kalsium pantotenat, dan faktor pertumbuhan

lain. Lactobacillus casei adalah spesies yang mudah beradaptasi, dan bisa diisolasi

dari produk ternak segar dan fermentasi, produk pangan segar dan fermentasi. Dari

segi industrial, Lactobacillus casei mempunyai peran dalam probiotik manusia, kultur

starter pemroduksi asam untuk fermentasi susu, dan kultur khas untuk intensifikasi

dan akselerasi perkembangan rasa dalam varietas keju yang dibubuhi bakteri (Evillya,

2010).

Lactobacillus casei ditemukan dalam susu fermentasi dan memiliki sifat

bermanfaat bagi kesehatan manusia. Saluran pencernaan manusia terdiri dari

Lactobacillus casei; flora alami yang mencegah berlebihnya suatu bakteri asam laktat

yang tidak sengaja tertelan dan tinggal di salura pencernaan. Lactobacillus casei

dapat mengurangi diare dan membantu memodifikasi mikroflora dalam tubuh.

Lactobacillus casei menghasilkan DL-asam laktat dan amilase yang melengkapi

pertumbuhan Lactobacillus acidophilus (Anonim, 2011).

Sebagian besar Lactobacillus casei strain dapat memfermentasi galaktosa,

glukosa, fruktosa, manosa, manitol, N-asetilglukosamin, dan tagatose. Kemampuan

untuk memfermentasi laktosa kurang umum pada strain yang diisolasi dari bahan

nabati dibandingkan pada yang berasal dari keju dan saluran pencernaan manusia

(Cai, 2007).

Lactobacillus casei adalah penghasil asam laktat, diperoleh dengan fermentasi

glukosa dan pembentukan laktat. Asam laktat merupakan asam hidroksi yang dapat

diproduksi secara kimia dari asetaldehida dan hidrogen sianida atau dengan

fermentasi mikroba. Hal ini digunakan untuk berbagai proses industri seperti kimia

dan produksi biologis asam organik, penggunaan sebagai penyedap dalam makanan,

pembuatan kosmetik, dan produksi plastik biodegradable (Chan, 2003).

Lactobacillus casei adalah spesies yang mudah beradaptasi, dan bisa diisolasi

dari produk ternak segar dan fermentasi, produk pangan segar dan fermentasi. Dari

segi industrial, Lactobacillus casei mempunyai peran dalam probiotik manusia, kultur

16

starter pemroduksi asam untuk fermentasi susu, dan kultur khas untuk intensifikasi

dan akselerasi perkembangan rasa dalam varietas keju yang dibubuhi bakteri (Krisno,

2011).

Lactobacillus casei diduga dapat mengontrol organisme yang dapat

menimbulkan efek toksik di dalam saluran pencernaan manusia, diantaranya yaitu

Escherichia coli. Lactobacillus casei adalah suatu jasad renik jenis temporer

penghasil asam laktat, Lactobacillus casei dapat ditemukan di mulut dan di usus

manusia. Selain itu bakteri Lactobacillus casei dapat menghalangi pertumbuhan H.

pylori, dan membantu microflora di usus besar (Krisno, 2011).

2.4.4. Bakteri Salmonella typhi

Bentuk batang, gram negatif, bergerk dengan flagel peritrich, mudah tumbuh

pada perbenihan biasa dan tumbuh baik pada perbenihan yang mengandung empedu.

Sebagian besar Salmonella sp bersifat patogen pada binatang dan merupakan sumber

infeksi bagi manusia. Binatang itu antara lain tikus, ternak, anjing, kucing, di alam

bebas Salmonella dapat tahan hidup lama dalam air, tanah atau pada bahan makanan

(Suhenik, 2010).

Pada manusia menimbulkan penyakit Typhus abdominalis. Masa inkubasinya

antara 7-14 hari. Gejalanya berupa demam dengan suhu tinggi 40oC, terutama sore

hari, seringkali meracau dan gelisah. Penderita sangat lemah dan apatis, beberapa

penderita mengalami diare, tetapi umumnya mengalami konstipasi atau tidak bisa

buang air besar. Bakterinya masuk kedalam aliran darah pada penyakit yang berat

dapat terjadi perforasi usus dan peritonitis. Angka kematian kurang lebih 25%

(Suhenik, 2010).

Melalui makanan dan minuman yang terkontaminasi oleh bakteri, hal ini

dapat terjadi antara lain (Suhenik, 2010):

a) Melalui air untuk kepentingan rumah tangga ynag tidak memenuhi syarat kesehatan

b) Daging, telur, susu yang berasal dari hewan sakit yang dimasak kurang matang

17

c) Makanan dan minuman berhubungan dengan binatang yang mengandung bakteri

Salmonella typhi, seperti lalat, tikus, kucing dan ayam

2.5. Peranan Bakteri Asam Laktat Sebagai Antibakteri Terhadap Salmonella typhi

Bakteri asam laktat adalah kelompok bakteri yang mampu mengubah

karbohidrat menjadi asam laktat. Efek bakterisidal dari asam laktat berkaitan dengan

penurunan pH lingkungan menjadi 3 sampai 4,5 sehingga pertumbuhan bakteri lain

termasuk bakteri pembusuk akan terhambat. BAL merupakan jenis bakteri yang

umumnya menguntungkan. Secara umum,bakteri asam laktat merupakan food-grade

organisms. Bakteri tersebut dapat memberikan citarasa pada makanan, menghambat

bakteri pembusuk pada makanan dan juga dapat menghambat bakteri patogen. Salah

satu sifat penting dari bakteri asam laktat adalah mampu menghasilkan senyawa

antimikroba bakteriosin. Bakteriosin merupakan produk metabolit sekunder bakteri

asam laktat yang mempunyai kesamaan kerja seperti antibiotik, yaitu mampu

menghambat pertumbuhan beberapa bakteri tertentu (Delfahedah, 2013).

Keberadaan BAL pada yoghurt sebagai probiotik berpotensi dalam

meningkatkan fungsi fisiologis usus, mikroflora usus yang berperan dalam

mengoptimalkan kondisi kesehatan tubuh. Keberadaan bakteri probiotik dapat

mencegah pertumbuhan bakteri patogen seperti Salmonella sp. dan Escherichia

coli. E. coli merupakan penyebab penyakit diare, sedangkan Salmonella typhi

merupakan bakteri patogen pada manusia yang menyebabkan penyakit tifus (Yani,

2010).

Secara umum BAL didefinisikan sebagai kelompok bakteri Gram positif,

tidak menghasilkan spora, berbentuk bulat atau batang. Beberapa jenis bakteri asam

laktat ada yang digolongkan ke dalam bakteri probiotik, seperti Lactobacillus,

Lactococcus, Leuconostoc, dan Streptococcus. Bakteri asam laktat yang digolongkan

ke dalam probiotik harus memiliki aktifitas antimikroba terhadap beberapa

18

mikroorganisme tertentu, toleran terhadap asam lambung, dan tidak berbahaya (Sari,

2013).

2.6. Metode Uji Antimikroba

Pada uji antibakteri diukur respon pertumbuhan populasi bakteri terhadap agen

antibakteri. Tujuan assay antibakteri (termasuk antibiotik dan substansi antibakteri

nonantibiotik, misalnya fenol, bisfenol, aldehid) adalah untuk menentukan potensi

dan kontrol kualitas selama proses produksi senyawa antibakteri di pabrik, untuk

menentukan farmakokinetika obat pada hewan atau manusia, dan untuk memonitor

kemoterapi obat. Kegunaan uji antibakteri adalah diperolehnya suatu sistem

pengobatan yang efektif dan efisien. Terdapat bermacam-macam metode uji

antibakteri seperti yang dijelaskan berikut ini (Pratiwi, 2008):

1) Metode Disc Diffusion (Tes Kirby & Bauer)

Metode ini untuk menentukan aktivitas agen antibakteri. Piringan yang berisi

agen antibakteri diletakkan pada media agar yang telah ditanami bakteri yang akan

berdifusi pada media agar tersebut. Area jernih mengindikasikan adanya hambatan

pertumbuhan bakteri oleh agen antibakteri pada permukaan media agar.

2) Metode E-Test

Metode E-Test digunakan untuk mengestimasi MIC (Minimum Inhibitory

Concentration) atau KHM (Konsentrasi Hambat Minimum) yaitu konsentrasi

minimal suatu agen antibakteri untuk dapat menghambat pertumbuhan

mikroorganisme.

Pada metode ini digunakan strip plastik yang mengandung agen antibakteri

dari kadar terendah hingga tertinggi dan diletakkan pada permukaan media agar yang

telah ditanami bakteri. Pengamatan dilakukan pada area jernih yang ditimbulkannya

yang menunjukkan kadar agen antibakteri yang menghambat pertumbuhan bakteri

pada media agar.

19

3) Ditch Plate Technique

Pada metode ini sampel uji berupa agen antibakteri yang diletakkan pada parit

yang dibuat dengan cara memotong media agar dalam cawan petri pada bagian

tengah secara membujur dan mikroba uji (maksimum 6 macam) digoreskan ke arah

parit yang berisi agen antibakteri.

4) Cup Plate Technique

Metode ini serupa dengan metode Disc Diffusion, dimana dibuat sumur pada

media agar yang telah ditanami dengan bakteri dan pada sumur tersebut diberi agen

antibakteri yang akan diuji.

5) Gradient Plate Technique

Pada metode ini konsentrasi agen antibakteri pada media agar secara teoritis

bervariasi dari nol hingga maksimal. Media agar dicairkan dan larutan uji

ditambahkan. Campuran kemudian dituang ke dalam cawan petri dan diletakkan

dalam posisi miring.

Plate diinkubasi selama 24 jam untuk memungkinkan agen antibakteri

berdifusi dan permukaan media mengering. Bakteri uji (maksimum 6 macam)

digoreskan pada arah mulai dari konsentrasi tinggi ke rendah. Hasil diperhitungkan

sebagai panjang total pertumbuhan bakteri maksimum yang mungkin dibandingkan

dengan panjang pertumbuhan hasil goresan.

Jika: X= panjang total pertumbuhan bakteri yang mungkin

Y= panjang pertumbuhan actual

C= konsentrasi agen antibakteri pada total volume media mg/ml atau g/ml

maka konsentrasi hambatan adalah [(X.Y)]:C mg/ml atau g/ml.

Yang perlu diperhatikan adalah dari hasil perbandingan yang didapat dari

lingkungan padat dan cair, faktor difusi agen antibakteri dapat mempengaruhi

keseluruhan hasil pada media padat.

20

6) Metode Dilusi Cair / Broth Dilution Test

Metode ini mengukur MIC (Minimum Inhibitory Concentration) atau KHM

(Konsentrasi Hambat Minimum) dan MBC (Minimum Bactericidal Concentration)

atau KBM (Kadar Bunuh Minimum). Cara yang dilakukan adalah dengan membuat

seri pengenceran agen antibakteri pada medium cair yang ditambahkan dengan

bakteri uji. Larutan uji agen antibakteri pada kadar terkecil yang terlihat jernih tanpa

adanya pertumbuhan bakteri uji ditetapkan sebagai KHM. Larutan yang ditetapkan

sebagai KHM tersebut selanjutnya dikultur ulang pada media cair tanpa penambahan

bakteri uji ataupun agen antibakteri dan diinkubasi selama 18-24 jam. Media cair

yang tetap terlihat jernih setelah inkubasi ditetapkan sebagai KBM.

7) Metode Dilusi Padat / Solid Dilution Test

Metode ini serupa dengan metode difusi cair namun menggunakan media

padat (solid). Keuntungan metode ini adalah satu konsentrasi agen antibakteri yang

diuji dapat digunakan untuk menguji beberapa bakteri uji.

21

BAB III

METODE PENELITIAN

3.1. Desain Penelitian

Rancangan penelitian perbandingan efek antibakteri soyghurt dan miyoghurt

dengan penambahan kultur Lactobacillus bulgaricus, Lactobacillus acidophilus

dan Lactobacillus casei terhadap Salmonella typhi ini menggunakan RAL

(Rancangan Acak Lengkap) factorial dengan tiga kali ulangan. Soyghurt dan

miyoghurt dibuat dengan menggunakan kultur Lactobacillus bulgaricus,

Lactobacillus acidophilus dan Lactobacillus casei. Aktivitas antibakteri soyghurt

dan miyoghurt diujikan terhadap Salmonella typhi. Supernatan yang diuji adalah

supernatan soyghurt dan supernatan miyoghurt. Kemampuan penghambatan

supernatan soyghurt dan miyoghurt terhadap bakteri uji dapat dilihat melalui

terbentuknya clear zone pada uji aktivitas antibakteri.

3.2. Waktu dan Tempat

Penelitian dilakukan pada bulan Februari-April 2015 di Laboratorium

Mikrobiologi Jurusan Biologi Fakultas Sains dan Teknologi Universitas Islam

Negeri Maulana Malik Ibrahim Malang.

3.3. Alat dan Bahan

3.3.1. Alat

Alat dan bahan yang digunakan yaitu:

Erlenmeyer

Cawan petri

Mikropipet

Tip

Bunsen

Gelas objek

Korek api

Pipet tetes

Laminar air flow

Mikroskop

Incubator

Autoklaf

22

Oven

Kertas label

Jarum ose

Kompor pemanas

Fortex

Mixer

Blender

Saringan

Mesin penggiling

Sentrifuge

3.3.2. Bahan

Bahan yang digunakan yaitu:

Kedelai (Glicin max)

Kelapa (Coccus nucifera)

Kultur Lactobacillus bulgaricus, Lactobacillus acidophilus,

Lactobacillus casei,dan Salmonella typhi

Media MRS

Media NB

Larutan NaHCO3 0,25%

Larutan NaOH 1N

Gula pasir

Susu skim

Aquades

3.4. Cara Kerja

3.4.1. Pembuatan Kultur Kerja

Langkah-langkah yang dilakukan adalah:

23

1. Diperbanyak masing-masing kultur murni bakteri Lactobacillus

bulgaricus, Lactobacillus acidophilus dan Lactobacillus casei dengan

cara satu ose kultur murni diinokulasikan ke dalam medium MRS agar

2. Diinkubasi pada suhu 370C untuk L. casei dan L. acidophilus sedangkan

300C untuk Lactobacillus bulgaricus selama 48 jam dan siap digunakan

dalam pembuatan starter yang disebut kultur kerja, sedangkan sisanya

disimpan pada suhu 40C sebagai kultur stok (Setioningsih, 2004)

3. Dikultivasi bakteri Salmonella typhi dalam media NB dan dihitung

menggunakan metode hitungan cawan (Fitrianarni, 2014).

3.4.2. Pembuatan Starter

Langkah-langkah dalam pembuatan starter yaitu:

1. Diinokulasi 5 mL MRS Broth yang telah steril dengan satu ose kultur

kerja lalu diinkubasi pada suhu 370 C untuk L. casei dan L. acidophilus,

300C untuk Lactobacillus bulgaricus selama 48 jam sehingga diperoleh

kultur cair masing-masing bakteri

2. Diinokulasi masing-masing kultur cair tersebut sebanyak 1% ke dalam

larutan susu skim 10% yang telah steril dan diinkubasi pada suhu 370C

untuk L. casei dan L. acidophilus, 300C untuk Lactobacillus bulgaricus

selama 48 jam sehingga diperoleh starter induk

3. Dibuat starter siap pakai dengan cara 1% starter induk diinokulasikan pada

larutan susu skim 10% dan glukosa 3% selama 24 jam pada suhu 370C

untuk L. casei dan L. acidophilus, 300C untuk Lactobacillus bulgaricus

Bakteri di hitung dengan metode standard plate count (Setioningsih,

2004).

3.4.3. Pembuatan Susu Kedelai

Langkah-langkah dalam pembuatan susu kedelai:

1. Direndam kedelai selama 8 jam

24

2. Direbus pada suhu 90-1000C selama 15 menit

3. Dibuang kulitnya (bleaching)

4. Direndam dalam larutan NaHCO3 (0,25%) selama 30 menit, ditiriskan dan

dicuci kembali

5. Digiling Kedelai dengan penambahan air 1:5

6. Disaring dengan kain penyaring sehingga diperoleh cairan menyerupai

susu dan dididihkan selama 15 menit (Setioningsih, 2004).

3.4.4. Pembuatan Soyghurt

Langkah-langkah dalam pembuatan soyghurt:

1. Ditambah susu kedelai sebanyak 100 ml dengan gula pasir 25 gram dan

susu skim cair dengan konsentrasi 10 % dari bahan baku

2. Dipanaskan susu diatas kompor mencapai suhu 85oC-90oC selama 15

menit sambil diaduk

3. Didinginkan sampai suhu mencapai 43o-45oC

4. Dimasukkan inokulasi starter (Lactobacillus bulgaricus, Lactobacillus

acidophilus dan Lactobacillus casei) yaitu plain pada suhu tersebut

sebanyak 10 % dari volume bahan baku, diaduk merata

5. Dimasukkan hasil tersebut kedalam cup, dan kemudian ditutup rapat.

6. Diinkubasi pada suhu 39oC dengan waktu fermentasi 24 jam (Herawati,

2010).

3.4.5. Pembuatan Santan Kelapa

Langkah-langkah pembuatan santan kelapa:

1. Santan diperoleh dari perasan kelapa parut dan air dengan perbandingan

1:2 (b/v),

25

2. Dihomogenisasi dengan menggunakan blender dan dilengkapi dengan

saringan.

3. Diperoleh hasil perasan santan (Yunita, 2011).

3.4.6. Pembuatan Miyoghurt

Langkah-langkah pembuatan miyoghurt yaitu:

1. Dipasteurisasi santan, susu skim, dan gula pasir dengan cara

memanaskannya hingga suhu 70oC sambil diaduk

2. Setelah suhu pasteurisasi dicapai, dipertahankan suhu selama 30 menit

tanpa pengadukan

3. Didinginkan santan kelapa sampai suhu 45oC dengan cara direndam dalam

air yang ditambahkan es batu

4. Dituang santan ke dalam gelas plastik, ditambah karagenan sebanyak

0,1%, dan diinokulasi starter Lactobacillus bulgaricus, Lactobacillus

acidophilus dan Lactobacillus casei sebanyak 10% dari total campuran

dengan perbandingan sesuai dengan perlakuan

5. Diinkubasi pada suhu 43oC selama 24 jam (Yunita, 2011).

3.4.7. Uji Antimikroba

Langkah-langkah uji antimikroba:

1. Uji aktivitas antibakteri dilakukan dengan metode pour plate bakteri

Salmonella typhi berumur 24 jam. Bakteri uji dimasukkan ke dalam cawan

petri dengan menggunakan syringe sebanyak 1 ml kemudian ditambahkan

media MRS bersuhu 400C sebanyak 20 ml. Setelah agar dalam cawan

mengeras, dibuat lubang menggunakan tabung durham berdiameter 5mm.

Jumlah sumuran dalam satu cawan sebanyak 5 sumuran (Najmuddin,

2006).

26

2. Supernatan yang diuji adalah supernatan soyghurt dan supernatan

miyoghurt. Masing-masing supernatan diuji dengan tiga kali pengulangan.

3. Kontrol positif berupa cawan yang hanya berisi supernatan soyghurt dan

miyoghurt steril yang telah disentrifugasi. Kontrol negatif berupa cawan

yang hanya berisi bakteri Salmonella typhi.

4. Pengujian supernatan yoghurt terhadap mikroba uji:

a. Tiap 10 ml sampel yogurt dimasukkan kedalam tabung reaksi 20

ml. kemudian sampel disentrifugasi dengan kecepatan 4000 rpm

selama 15 menit sehingga suprernatan dan endapan terpisah,

supernatan di ambil untuk di uji.

b. Selanjutnya 50L sampel dimasukkan kedalam sumur yang telah

dilubangi dengan diameter 5 mm pada media uji dengan

menggunakan mikropipet.

5. Cawan diinkubasi pada suhu 37oC selama 24 jam

6. Zona hambat yang terbentuk diamati dan diukur menggunakan jangka

sorong (Fitrianarni, 2014).

3.5. Variabel Penelitian

a) Variabel bebas dalam penelitian ini adalah antibakteri soyghurt dan

miyoghurt dengan penambahan kultur Lactobacillus bulgaricus,

Lactobacillus acidophilus dan Lactobacillus casei.

b) Variabel terikat dalam penelitian ini adalah clear zone bakteri Salmonella

typhi.

c) Variabel kontrol ada 2 yaitu kontrol positif dan kontrol negative. Kontrol

positif berupa cawan yang hanya berisi supernatan soyghurt dan miyoghurt

27

steril yang telah disentrifugasi. Kontrol negatif berupa cawan yang hanya

berisi bakteri Salmonella typhi.

3.6. Analisis Data

Data berupa rata-rata diameter clear zone dan diuji normalitasnya dengan

menggunakan Uji Kolmogorov-Smirnov. Data dianalisis dengan menggunakan Uji

Analisis Ragam (Analysis of variance / ANOVA) jika hasil yang didapatkan

terdistribusi normal. Hasil Uji ANOVA dilanjutkan dengan uji Duncans untuk

membandingkan hasil yang diperoleh dari tiap-tiap perlakuan (Fitrianarni, 2014).

28

DAFTAR PUSTAKA

Anonim, 2011. http://Karakteristik Lactobacillus Casei _ Sir Ossiris Home Site.htm.

Diakses pada 28 April 2014 pukul 12:19 WIB

Anonim, 2014. http://Manfaat & Efek Samping Lactobacillus acidophilus _

Amazine.htm. Diakses pada 28 April 2014 pukul 12:19 WIB

Cai H, Rodriguez BT, Zhang W, Broadbent JR, and Steele JL. 2007. Genotypic And

Penotypic Characterization of Lactobacillus casei Strains Isolated From

Different Ecological Niches Suggest Frequent Recombination And Niche

Specificity. Microbiology. Vol. 153. Hal: 2655-2665

Chan B, Bonilla L, and Velazquez AC. 2003. Using Banana to Generate Lactic Acid

Thorugh Batch Process Fermentation. Applied Microbiology Biotechnology.

Vol. 63. Hal: 147-152

Delfahedah. dkk. 2013. Isolasi, Karakterisasi dan Identifikasi DNA Bakteri Asam

Laktat (BAL) yang Berpotensi sebagai Antimikroba dari Fermentasi Kakao

Varietas Hibrid (Trinitario). Jurnal Kimia Unand. Vol. 2. No. 2. Hal: 1-11

Erniwati. 2010. Isolasi Dan Identifikasi Bakteri Asam Laktat pada Susu Kambing

Segar. Skripsi. Jurusan Biologi Fakultas Sains Dan Teknologi Universitas Islam

Negeri Maulana Malik Ibrahim Malang

Evillya, 2010. Lactobacillus casei.http://heartfoods.Wordpress.com/2011/06/23/.

lactobacillus_casei. Diakses pada 28 April 2014 pukul 12:19 WIB

Firmansyah, M. 2009. Tugas Mikrobiologi Lingkungan. http:// my white green Maret

2009.htm. Diakses pada 28 April 2014 pukul 12:19 WIB

Fitrianarni. dkk. 2014. Aktivitas Antibakteri Yoghurt Susu Sapi dan Yoghurt Susu Kedelai

terhadap Shigella dysenteriae secara In Vitro. Lentera Bio. Vol. 3. No. 1. Hal : 97102

29

Handayani, Faras. 2006. Aneka Khasiat Yoghurt.

http://www.mailarchive.com/milisnakit@news.gramediamajalah.com. Diakses

pada 28 April 2014 pukul 12:19 WIB

Hassan, Zahirotul Hikmah. 2006. Isolasi Lactobacillus, Bakteri Asam Laktat dari

Feses dan Organ Saluran Pencernaan Ayam. Seminar Nasional Teknologi

Peternakan dan Veteriner

Herawati, Dewi Astuti dan D. Andang Arif Wibawa. 2010. Pengaruh Konsentrasi

Susu Skim dan Waktu Fermentasi Terhadap Hasil Pembuatan Soyghurt. Jurnal

Ilmiah Teknik Lingkungan Vol.1 No. 2. Hal: 48-58

Jawetz, E., Melnick, J.L., dan Adelberg, E.A. 2005. Mikrobiologi Kedokteran.

Jakarta: Salemba Medika

Karlina, I. 2010. Diare Penyebab Kedua Terbesar Kematian Anak Indonesia, Diare

Dapat Diobati Dengan Air Perasan Sawo Mentah. UMY News. Di peroleh

dari http://www.umy.ac.id

Kelana, Jaka. 2008. Manfaat Yoghurt.

http://sehatituindah.wordpress.com/2008/09/24/manfaatyoghurt/. Diakses pada

tanggal 28 April 2014 pukul 12:19 WIB

Krisno, 2011. Pemanfaatan bakteri lactobacillus casei dalam upaya menjaga

kesehatan pencernaan manusia.

http://aguskrisnoblog.wordpress.com/2011/01/11/pemanfaatan-bakteri-

lactobacillus-casei-dalam-upaya-menjaga-kesehatan-pencernaan-manusia.htm.

Diakses pada 28 April 2014 pukul 12:19 WIB

Lee WJ & JA Lucey. 2010. Formation and Physical Properties of Yoghurt. Asian-

Aust. J. Anim.Sci. Vol. 23. No. 9. Hal :1127-1136

30

Najmuddin, A. 2006. Aktivitas Antimikroba Yogurt Probiotik Dari Susu Kambing

Saanen Dan Pesa (Persilangan Peranakan Etawah Dan Saanen) Selama

Penyimpanan.Skripsi Fakultas Peternakan Institut Pertanian Bogor.Bogor.

Nizori. dkk. 2010. Pembuatan Soyghurt Sinbiotik Sebagai Makanan Fungsional

dengan Penambahan Kultur Campuran Streptococus thermophillus,

Lactobacillus bulgaricus dan Lactobacillus acidophilus. J. Tek. Ind. Pert. Vol.

18. No. 1. Hal: 28-33

Pelczar, Michael dan E.S.C. Chan. 2008. Dasar-Dasar Mikrobiologi. Jakarta: UI

press

Pratiwi, S. 2008. Mikrobiologi Farmasi. Jakarta : Erlangga

Rahman, A. dkk. 1992. Teknologi Fermentasi Susu. Direktorat Jendral Pendidikan

tinggi: PAU pangan dan Gizi Institut Pertanian Bogor

Santoso. 2009. Susu & Yoghurt Kedelai. Laboratorium Kimia Pangan Faperta UWG

Sari.dkk. 2013. Isolasi, Karakterisasi, dan Identifikasi DNA Bakteri Asam Laktat (BAL)

yang Berpotensi Sebagai Antimikroba dari Fermentasi Markisa Kuning (Passiflora

edulis var. flavicarpa). Jurnal Kimia Unand. Vol. 2. No. 2. Hal: 1-11

Setioningsih, Eti dan Ratna Setyaningsih. 2004. Pembuatan Minuman Probiotik dari Susu

Kedelai dengan Inokulum Lactobacillus casei, Lactobacillus plantarum, dan

Lactobacillus acidophilus. Bioteknologi. Vol. 1. No. 1. Hal: 1-6

Standar Nasional Indonesia. Dewan Standardisasi Nasional. 1992. SNI Yoghurt (

SNI 01 2981-1992. 1992 ). Dewan Standardisasi Nasional : Jakarta

Suhenik. 2010. Salmonella Typhi. http://mikrobiologi Salmonella Typhi.htm.

Diakses pada tanggal 28 April 2014 pukul 12:19 WIB

Sumantri, Indro. 2004. Pemanfaatan Mangga Lewat Masak Menjadi Fruitghurt

Dengan Mikroorganisma Lactobacillus bulgaricus. Prosiding Seminar

Nasional Rekayasa Kimia dan Proses

31

WHO. 2013. Ending preventable deaths from pneumonia and diarrhoea by 2025.

http://www.who.int/maternal_child_adolescent/news_events/news/2013/gappd_

launch/en/index.html. Diakses pada tanggal 28 April 2014 pukul 12:19 WIB

Wikipedia, 2013. Lactobacillus bulgaricus. http:// Lactobacillus bulgaricus.htm.

Diakses pada tanggal 28 April 2014 pukul 12:19 WIB

Winarno. 1993. Pangan (Gizi, Teknologi dan Konsumen). Jakarta: Gramedia Pustaka

Yani. dkk. 2010. Isolasi dan Seleksi Bakteri Asam Laktat dari Yoghurt Produksi Industri

Rumah Tangga Di Pekanbaru yang Bersifat Antibakteri Terhadap Escherichia coli

dan Salmonella typhi. Jurusan Biologi Fakultas Matematika dan Ilmu Pengetahuan

Alam Universitas Binawidya Pekanbaru

Yunita, Dewi, dkk. 2011. Pembuatan Niyoghurt dengan Perbedaan Perbandingan

Streptococcus thermophilus dan Lactobacillus bulgaricus Serta Perubahan

Mutunya Selama Penyimpanan. Jurnal Teknologi Pertanian Vol. 12 No. 2. Hal:

83-90

32

PROPOSAL SKRIPSI

PERBANDINGAN EFEK ANTIBAKTERI DENGAN MENGGUNAKAN

METODE DIFUSI SUMUR AGAR (CUP PLATE TECHNIQUE) SOYGHURT

DAN MIYOGHURT DENGAN PENAMBAHAN KULTUR Lactobacillus

bulgaricus, Lactobacillus acidophilus DAN Lactobacillus casei TERHADAP

Salmonella typhi SECARA IN VITRO

Oleh :

RIZA NURHERMI N.

11620022

JURUSAN BIOLOGI

FAKULTAS SAINS DAN TEKNOLOGI

UNIVERSITAS ISLAM NEGERI (UIN) MAULANA MALIK IBRAHIM

MALANG

2014