metode kromatografi

8/20/2019 metode kromatografi

1/33

05/03/16

KELOMPOK V :1. Rahmadini Anwar 13104120062. Arika Sari 13104110163. Widia Gu !iani S"am 13104110#6

$u%a M&!'d& Kr'ma!'%ra(


2/33

)'n E*+han%& ,hr'ma!'%ra-h"


3/33

Kromatografi Pertukaranion

Proses penukaran ionyang biasanya terjadipada kromatografi cair-padat, dapat digunakan

un!uk pemisahan

&n"awa i'nik danm&/i a!kan r&ak ikimia da/am

-&mi ahann"a. Fasadiam yg digunakan

umumnya berupa resinpenukar ion.


4/33

&ni Kr'ma!'%ra( P&r!ukaran)'n


5/33

Kr'ma!'%ra( P&r!ukaranKa!i'n

05/03/16

i/a m'/&ku/ -& i(k "an% diin%inkan&rmua!an -' i!i dan k'/'m kr'ma!'%ra(

"an% di%unakan &rmua!an n&%a!i K'/'m "an% di%unakan ia an"a &ru-ama!rik d&k !ran "an% m&n%andun% %u%ukar 'k i/ 5, 25, 25, 2SO 35 dan 5O5, 2 ,OO57 Laru!an -&n"an%%a u8&r7 "an% di%unakanda/am i !&m ini ada/ah a am i!ra! a am/ak!a! a am a &!a! a am ma/'na! u8&rMES dan ' a!.


6/33

Kr'ma!'%ra( P&r!ukaranAni'n

05/03/16

i/a m'/&ku/ -& i(k "an% diin%inkan&rmua!an n&%a!i dan k'/'m kr'ma!'%ra(

"an% di%unakan &rmua!an -' i!i K'/'m "an% di%unakan ia an"a &ru-ama!rik d&k !ran "an% m&n%andun% %u%u59 : , 3 73 59: , 2 ; 72 dan


7/33

/an>u!an... R& in m&n%andun% ka!i'n akan di-&r!ukarkan d&n%anka!i'n A da/am /aru!an. Ka!i'nA dan akan !&rdi u ikar&na -&r &daan k'n &n!ra i

an!ara r& in dan /aru!an R&ak i -&r!ukaran i'n :

A R5 R5A P&r!ukaran i'n akan

&r/an% un% am-aik& &!im an%an di+a-ai

05/03/16


8/33

S"ara!5 "ara! R& inM&nuru! a &! 1##47 "ara!5 "ara! da ar

a%i ua!u r& in "an% &r%una ada/ah:R& in i!u haru +uku- !&ran%kai i/an%

&hin%%a k&/aru!ann"a "an% da-a! dia aikan.

R& in i!u haru +uku- hidr'(/ik un!ukm&mun%kinkan di u i i'n5i'n m&/a/ui !ruk!urn"ad&n%an /a>u "an% !&rukur (ni!&7 dan &r%una.

R& in haru m&n%%unakan +uku- an"ak

%u%u -&nukar i'n "an% da-a! di+a-ai dan haru!a i/ kimiawi.R& in "an% &dan% m&n%&m an% haru /& ih

& ar ra-a!ann"a dari-ada air.03/05/16


9/33

M&kani m& )'n E*+han%&


10/33

K'm-'n&n Kr'ma!'%ra( P&nukar)'n

a a -ada! &rmua!an a!au ma!rika a +air "an% m&n%andun% m'/&ku/ "an% &r &da mua!an dari ma!rikaru!an &/u&n 7 d&n%an mua!an &r &da un!uk m&n+&%ah in!&rak in!ara a a +air dan -ada!'m-a "an% &r un% i un!uk m&nd'r'n% &/u&n! dan am-&/ !&r & u!a uk k& da/am k'/'m

n>&k!'r !&m-a! m&ma ukkan am-&/ dan k&mudian am-&/ da-a!idi !ri u ikan ma uk k& da/am k'/'m

K'/'m -&mi ah i'n &r un% i un!uk m&mi ahkan i'n5i'n "an% adada/am am-&/&!&k!'r "an% &r un% i m&m a+a i'n "an% /&wa! k& da/am d&!&k!'r.

R&k'rd&r da!a &r un% i un!uk m&r&kam dan m&n%'/ah da!a "an% ma


11/33

P&nukar )'n

05/03/16

P&nukar i'ndi &im an%kan'/&h +'un!&ri'n

,'un!&ri'nini/ah "an% akandi-&r!ukarkand&n%an i'n /aindari /aru!an


12/33

?a a @iam R& in P&nukar )'n7 R& in

P'/im&r 'r%anik a!au an'r%anik "an%di%unakan & a%ai -&nukar ka!i'n a!au ani'ndari a a /aru!an.

R& in -&nukar i'n umumn"a &r &n!uk u!iran%&/ "an% !&rdiri dari 17 >arin%an -'/im&r 27%u%u un% i'na/ i'nik m&/&ka! >arin%an 37+'un!&ri'n dan 47 -&/aru!. S!ruk!ur mum

P'/"m&r a+k 'n& !idak !&r/i a! da/am ika!an Gu%u un% i'na/B i i ak!i m&m &n!uk

k'm-/&k ani'n a!au ka!i'n


13/33

&rda arkan -ada k& &radaan %u%u an/a i/n"aC r& in -&nukar i'n da-a! &+ara /ua

dik/a i(ka ikan da/am &m-a! %'/'n%an "akni :R& in -&nukar ka!i'n &r i a! a am kua!

m&n%andun% %u%u an SO 37.R& in -&nukar ka!i'n &r i a! a am /&mah

m&n%andun% %u%u an


14/33

Lan>u!an....

Gu%u un% i'na/ &n=&na : @i u/ 'na i & a%ai -&nukarka!i'n

@ik/'rina i & a%ai -&nukarani'n

Resin Organik


15/33

Si/ika! SiO47 A/umin' i/ika! Dir+'nium $in5-h' -ha!&

Resin Anorganik


16/33

P&n%%unaaan R& in P&nukar)'n

05/03/16

n!uk m&n%hi/an%kan i'n

M&n%k'n &n!ra ikan k'm-'n&n &rkadark&+i/ P&mi ahan a am5a am amin'

Untuk menghilangkan ion-ion keseluruhannya, air tersebutdapat dialirkan melalui penukar kation, kemudian melalui

penukaran anion


17/33

05/03/16

?ak!'r -&n!in% da/am -&mi/ihan r& in -&nukari'n :

1. Ka-a i!a -&nukar2. S&/&k!i(!a3. kuran -ar!ik&/ dan di !ri u i ukuran

4. S!a i/i!a kimia dan ( ika;. R&%&n&ra i


18/33

K& &!im an%an

05/03/16

n!uk -&r!ukaran i'n di!&ra-kan hukum ak ima a un!uk m&m-&r'/&h k& &!im an%an :

Pada aa! k& &!im an%an :

dimana K k'&( i&n &/&k!iFi!a m'/ar + k'n &n!ra i k'n &n!ra i m'/ar -&nukar i'n


19/33

APL)KAS)

05/03/16

A. Wa!&r S' !&nin% Wa!&r ' !&nin%

d&n%an -&r!ukaran i'nm&/i a!kan -&nukarka!i'n di mana r&ak i

&riku! !&r>adi un!ukm&n%%an!ikan i'nka/ ium d&n%an i'nna!rium.


20/33

. @&min&ra/i a iPada /an%kah

-&r!ama r& in-&nukar ka!i'n 7un!uk i'n ka!i'n

&-&r!i K ,a29a . Pada /an%kahk&dua r& in -&nukarani'n O 57 &-&r!ii'n ,/5 PO425. )'n5i'n

hidr'%&n danhidr'k i/ "an% ma ukk& air &r%a un%m&m &n!uk air

05/03/16


21/33

05/03/16

,. @&!'k i(ka i Air Lim ah dan @aur /an%

R& in ama! &r-'!&n i da/am -&n%'/ahan air/im ah k'n!aminan a!au -'/u!an &ra+un

&-&r!i /'%am5/'%am &ra!.@&n%an d&mikian -r' & "an% !&r>adi ada/ah-&n%am i/an &n"awa &r aha"a "an% da-a!didaur u/an% dan diha i/kan air "an% & amin&ra/ "an% da-a! di%unakan k&m a/i.


22/33

K'/'m Kr'ma!'%ra( P&r!ukaran)'n Ska/a & ar

05/03/16


23/33

Vid&' Kr'ma!'%ra(

03/05/16


24/33

urna/

05/03/16


25/33

05/03/16


26/33

P&ra/a!an

05/03/16

Alat Fungsi/!ima!& 3000*2

+hr'ma!'%ra-h dua/ +hann&/7Li uid ,hr'ma!'%ra-h

i' +'m-a!i /& /i uid+hr'ma!'%ra-h

Li uid ,hr'ma!'%ra-h

Wa!&r 2H6# i'+'m-a!i /&/i uid +hr'ma!'%ra-h

Li uid ,hr'ma!'%ra-h

@ua/ !&rnar" /'w -r& ur&mi+r'5%radi&n! -um-

P'm-a

V5Vi @&!&+!'r @&!&k!'r

A%i/&n! 1100 +hr'ma!'%ra-h Li uid ,hr'ma!'%ra-h@i'n&* ,hr'm&/&'n ' !war&F&r i'n 6.I

S' !war& dan & a%ai-&n%'n!r'/ in !rum&n /ain


27/33

Ma!&ria/ K'/'m

05/03/16

Pi-&ra=in& dih"dr'+h/'rid&h"dra!&

imida='/&


28/33

K'/'m

05/03/16

Pr'Pa+ W,J510 +a!i'n&*+han%& +'/umn

2;0mm 4.0mm 10m7

S&-a* An!i 'di* 9P10,'/umn 2;0mm 4.6mm10m7

M& & i k ?


29/33

M&m-&r ia-kan ?a aG&rak

05/03/16

Laru!an u8&r

Laru!an "an% -&ka! 1# 2 mM $ri a & 12 0mM -i-&ra=in& dan 22 0 mM imida='/&

! "ideionisasi dalam air

! "ipisahkan men#adi $

a/i u'! a/i u'!

! "itambahkan dengan air deionisasi sampai %0&dari 'olume akhir yang dibutuhkan

! "ititrasi dengan p( yang tepat dengan 10) )aO(! Air deionisasi ditambahkan untuk men#adikan

'olume yang diperlukan

?a a %&rak"isaring dengan penyaring 0,$ *m nylonsebelum digunakan+erdiri dari %,6m +ris base, 6,0mpipera ine, 11,0m imida ole dengan p( 6

atau %?a a %&rak A dan


30/33

K'ndi i kr'ma!'%ra(

03/05/16

am-&/! "i.airkan sampai konsentrasi 1 mg ml -1

pada asa gerak! "ipisahkan sebagai autosample! Autosample disimpan pada suhu 5 3 o

k'/'m

! "imasukkan pada o'en sampai suhu 30 o! "iin#eksikan 20 * bu er p( 6! "imasukkan sampel monoklonal antibodi! "iin#eksikan bu er p( %,5! "imasukkan in#eksi kosong dengan urutan

yang ditentukan

kr'ma!'%ram


31/33

Kr'ma!'%ram

03/05/16


32/33

a i/

05/03/16

Pada -&n&/i!ian ini m&!'d& kr'ma!'%ra( -&nukar i'n "an%&d&rhana dan k&!ahanan %radi&n - &rada arkan mu/!i

-r'duk di-&r/iha!kan ahwa & uai di%unakan un!uk/an%kah Fa/ida i !andar -ada indu !ri. P&n%u>ian m&!'d& inid&n%an -&ra/a!an /ain dan k'/'m "an% &r &da

m&n%indika ikan m&!'d& ini m&mi/iki k&!ahanan "an% !in%%id&n%an &+ara i%ni(kan &rkuran%n"a r& ik' di andin%kanm&!'d& /ain !&rhada- am-&/ "an% !&r a!a . K&!&/i!ianm&!'d& ini da/am m&m andin%kan an%a! m&n%un!un%kanun!uk m&!'d& h&!&r'%&ni!a . P&r ia-an am-&/ da/amm&!'d& ini &d&rhana k'/'m dan -&ra/a!an &dan% di!&/i!i/& ih /an>u! un!uk m&n%uran%i wak!u -&n&/i!ian. M&!'d&mu/!i -r'duk ini da-a! di%unakan d&n%an !&kn'/'%i !in%%iun!uk m&m-r' & da/am ka/a & ar.


33/33

05/03/16

$hank 'u

metode kromatografi

Documents

Transcript of metode kromatografi