Marcadores inmunológicos en el

diagnóstico y prevención

de la Diabetes Autoinmune tipo 1A

Bioq. Eduardo L. Paesani

Esp. en Química Clínica

DIABETES: clasificación

Diabetes tipo 1 - Inmunomediada

- Idiopática

Diabetes tipo 2 - Insulinorresistencia

Otros tipos específicos

de Diabetes

- Defectos genéticos

- Enf. Páncreas exócr.

- Endocrinopatías

- Inducida por drogas

Diabetes Gestacional - Intolerancia

durante el embarazo

• PROCESO ÓRGANO ESPECÍFICO

• DESTRUCCIÓN DE CÉLULAS BETA

• PRESENCIA DE AUTOANTICUERPOS

• PRODUCTOS DE CÉLULAS T AUTO REACTIVAS

• ALTERACIONES ANATÓMICAS Y FUNCIONALES

DEL PÁNCREAS

DIABETES MELLITUS TIPO 1 A

HISTORIA NATURAL DE LA DMT1

FASES DE LA DESTRUCCIÓN DE CÉLULAS BETA

1) SUSCEPTIBILIDAD GENÉTICA

2) POSITIVIDAD EN AUTOANTICUERPOS

3) RESPUESTA ANORMAL DE INSULINA EN IVGTT

4) INTOLERANCIA A LA GLUCOSA EN OGTT

5) DIABETES CLÍNICA

SUSCEPTIBILIDAD GENÉTICA

Genes dentro del CMH

Alelos de HLA DR3 y/o DR4: ND 40%

DM 95%

DR4: DQB1*0302 Alto riesgo

DQB1*0301 Riesgo moderado

DQB - posición 57 - val, ser, ala DMT1

- asp Asoc. Negativa

Genes fuera del CMH:

Polimorfismo del gen de la Insulina

Diabetes autoinmune latente en adultos

LADA

• DMT1 LENTAMENTE PROGRESIVA CON FENOTIPO DE DMT2

• MAYORES DE 30 AÑOS

• POSITIVIDAD PARA AL MENOS UN ANTICUERPO ANTI ISLOTE

• NO REQUIEREN TRATAMIENTO CON INSULINA EN LOS PRIMEROS 6 MESES

• GENÉTICA INTERMEDIA ENTRE DMT1 Y DMT2

Cascada de eventos inmunes de

la DMT1

PROT. ANTIG.

FACTORES

C.P.A

LTh

Células beta

Conjunción de factores

que aumentan daño celular

LTcAc

INSULITIS

C’

APCLTc

LTh

IL-1

Celulas Beta

Ags

Autoanticuerpos anti islote como

marcadores de diabetes autoinmune

1970- ICA© - ICSA(s)

1980- IAA

Receptor de Insulina

64 KDa

Carboxipeptidasa H

1990- GAD

51 KDa

Aromatic aa decarboxilasa

30 KDa (quimiotripsina)

DNA Topoisomerasa II

Glima 38

Glut 2

Glicolípidos

GM2-1 gangliósidos de islote

IA-2

IA-2Beta

ICA 69

38KDa específico de islote

Proinsulina

52 KDa insulinoma

Autoanticuerpos utilizados como

marcadores de autoinmunidad en DMT1a

• ICA anti citoplasma de célula de islote

• GADA anti decarboxilasa del A. Glutamico

• IA-2As (ICA-512 y IA-2c)

• IAA anti insulina

• ZnT8

ICAs

• Método: IFI

• Policlonales ( células a,b,g,d)

• Reconocen: sialoglicoconj., GAD y IA-2

• Marcadores de autoinmunidad, no de etiología

• 70% caucásicos - 4/10 africanos

• Declinan después del dx

• DMT2 ICA + = LADA

• Ausentes en DMT2 pediátrica

IAAs

• 1º Antígeno específico contra la célula Beta

• Reacción cruzada con Ac. Anti Insulina

exógena

• DR4

• * 90% < 5 años

* 71% 5 -10 años

* 50% 10-15 años

• aparecen en otras enfermedades autoinmunes (Graves, Hashimoto,Addison ,etc)

GADAs

• No específicos de células Beta ni de islotes

• Correlacionan positivamente con la edad

• más positivos en LADA

• Asociados a DQ Beta 1*0201

IA-2As

• IA-2 familia de protein-tirosin-fosfatasa

• No específico de células Beta

• Ensayos: molécula entera ó fracciones

( IA-2c e ICA 512)

• marcadores de riesgo a corto plazo

(aparecen después de GADA)

Transportador de Zn específico de la

membrana del gránulo secretor de Insulina de

la Célula β (ZnT8)

ZnT8

• Transporta Zn del citosol al gránulo

• Se requiere para cristalización y liberación de

insulina

• Alta concentración del ARNm en islote

• Autoantígeno en DMT1

• Un polimorfismo (tript 325 – Arg) de su gen

incrementa el riesgo de DMT2

• Influye en almacenamiento de insulina y homeostasis

de glucosa in vivo

El Ac ZnT8 está asociado a DMT1 juvenil y es también marcador de LADA

Presente en adultos < 50 años y raro en > 60 años

Identificó un 1,4% adicional de pacientes previamente clasificados como no autoinmunes

El uso de GADA, IA-2 y ZnT8 en combinación permitiría estratificar por fenotipo clínico

Autoanticuerpos:aplicación clínica

• Distinguir DMT1 de DMT2 en niños

• Identificar adultos con DMT2 con AA y

progresan a insulinodependencia

• Screening de no diabéticos donantes de

páncreas o riñón

• Screening de DMG con riesgo de progresar

a DMT1

Sensibilidad de autoanticuerpos

• ICA 67,0 %

• IAA 36.7 %

• GADA 74.6 %

• ICA 512 63.4 %

Especificidad: 100%

Sensibilidad combinada de autoanticuerpos

ICA-512

GADA

ICA

IAA

GADA

ICA-512

GADA

IAA

87.3 % 89.8 % 91.1 %

GADA+IA2A+IAA+ZnT8A= 98,2% de detección de autoinmunidad

Combinación de autoAc en pacientes con LADA

A mayor número de anticuerpos:

Severidad de la insulinodeficienciaCaracterísticas de DMT1:

Edad de presentaciónGlucemia y HbA1cPrevalencia de ATPOIMC

Prevención de DMT1

- Hacer screening en dos ocasiones: - antes de los 5 años

- después de la pubertad

- con fines predictivos la selección de marcadores debe

tener en cuenta el grupo etáreo

- una combinación de dos ó tres marcadores permite estudios

de predicción ejecutables en nuestro medio

- la ausencia de autoanticuerpos no excluye DMT1

- Es potencialmente valorable predecir la DMT1 porque:

1) el tratamiento temprano preserva la célula beta

2) prevee la cetoacidosis

PREDI-C-DIABPredicción de Diabetes tipo 1 en Argentina

OBJETIVOS:Identificar individuos con alto riesgo de desarrollar DMT1 mediante la determinación de marcadores genéticos HLA y autoanticuerpos en familiares sanos de primer grado de diabéticos tipo 1 y evaluar su prevalencia.

RESULTADOS:AUTOANTICUERPOS PREVALENCIA

ICA 3,8 %GADA 4.9 %IA2-A 10.1%IAA 3.1 %

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Nº de AA positivos PREVALENCIA• 1 13,2%• 2 2,4 %• 3 0,3 %• 4 0,7 %

1+2+3+4 16.6%

Desde el punto de vista asistencial los individuos con autoanticuerpos positivos, deberían ser evaluados periódicamente con el IIVGT, para evaluar el grado de compromiso de la secreción de insulina.Grosembacher L.A. y colab. Premio Escudero SAD 2000