Informe Micro Alimentos

UNIVERSIDAD NACIONAL DE FRONTERA CARRERA PROFESIONAL DE INGENIERIA DE INDUSTRIAS ALIMENTARIAS

“Año de la Consolidación del Mar de Grau”

Ingeniería de Industrias Alimentarias

DOCENTE:

TATIANA BUSTAMANTE VILCHEZ

INTEGRANTES:

FARFÁN GIRON LUZ CLARITA

HERRERA GAVILÁN GRECIA XIOMARA

SAAVEDRA GUTIERREZ JHOAAM ALEXIS

VALDIVIEZO MEDINA LIZBETH MARJORIE

CURSO:

MICROBIOLOGIA DE LOS ALIMENTOS

TEMA:

INFORME DEL LABORATORIO 1

2016


INFORME DEL LABORATORIO Nº1

RECONOCIMIENTO DE MATERIALES Y EQUIPOS, MEDIDAS DE BIOSEGURIDAD Y TINCION DE GRAM

MaterialesTUBOS DE ENSAYOConsiste en un pequeño tubo cilíndrico de vidrio con un extremo abierto y el otro cerrado y redondeado, que se utiliza en los laboratorios para contener pequeñas muestras líquidas o sólidas, para realizar reacciones químicas en pequeña escala

GRADILLAUna gradilla es una herramienta que forma parte del material de laboratorio y es utilizada para sostener y almacenar gran cantidad de tubos de ensayo.

MATRAZ DE ERLENMEYERSe utiliza para el armado de aparatos de destilación o para hacer reaccionar sustancias que necesitan un largo calentamiento. También sirve para contener líquidos que deben ser conservados durante mucho tiempo.

ASA BACTERIOLÓGICASe emplea para transportar pequeño volumen que contiene microorganismos en suspensión desde la solución de trabajo también llamada “solución madre” al medio de cultivo (sólido o líquido).

PORTAOBJETOSLamina de vidrio rectangular de color transparente utilizada para almacenar muestras y objetos con el fin de observarlas bajo el microscopio.


PISETA CON AGUA DESTILADALa Piseta es un recipiente cilíndrico sellado con tapa rosca, el cual posee un pequeño tubo con una abertura capaz de entregar agua o cualquier liquido que se encuentre contenido en su interior, en pequeñas cantidades.

CRISOL DE PORCELANA

El crisol de porcelana es un material de laboratorio utilizado principalmente para calentar, fundir, quemar, y calcinar sustancias. La porcelana le permite resistir altas temperaturas.

VASOS DE PRECIPITADO

Un vaso de precipitado tiene forma cilíndrica y posee un fondo plano. Se encuentran en varias capacidades.

Se encuentran graduados. Pero no calibrados, esto provoca que la graduación sea inexacta.

Son de vidrio y de plástico (Cuando están hechos de vidrio se utiliza un tipo de material mucho más resistente que el convencional denominado pyrex).

GOTEROEl gotero es un instrumento de laboratorio, el cual se usa para trasvasar pequeñas cantidades de líquido vertiéndolo gota a gota.

Es un tubo hueco terminado en su parte inferior en forma cónica y cerrada por la parte superior por una perilla o dedal de goma.

Se utilizan los goteros para añadir reactivos, líquidos indicadores o pequeñas cantidades de producto de un recipiente a otro.


SOPORTE UNIVERSALEs un instrumento que se usa en el laboratorio para realizar montajes con los diversos materiales y obtener sistemas de medición o de diversas funciones.

También sirve para fijar los equipos y utensilios mediante pinzas.

El soporte universal Suele ser de metal, constituido por una larga varilla enroscada en una base.

Equipos

AUTOCLAVEUna autoclave es un recipiente de presión metálico de paredes gruesas con un cierre hermético que permite trabajar a alta presión para realizar una reacción industrial, una cocción o una esterilización con vapor de agua.

INCUBADORAUna incubadora es un dispositivo que sirve para mantener y hacer crecer cultivos microbiológicos o cultivos celulares. La incubadora mantiene la temperatura, la humedad y otras condiciones en grado óptimo.

PLANCHA CALENTADORAUna placa calefactora es un pequeño aparato de sobremesa, portátil y autónomo, que posee uno o más elementos de calefacción eléctrica, y que se emplea para calentar recipientes con líquidos de forma controlada.


NORMAS DE SEGURIDAD EN EL LABORATORIO DE MICROBIOLOGÍA

Los laboratorios de microbiología constituyen ambientes de trabajo especiales, que pueden presentar riesgos de enfermedades infecciosas para las personas que se encuentren en o cerca de ellos. El trabajo diario en el laboratorio es un trabajo de grupo, en donde la actitud de cada uno de los integrantes ante las prácticas, así como el entrenamiento que posean en las técnicas requeridas para el manejo de material contaminado, determinan su propia seguridad, así como la de sus compañeros y la de la colectividad en general.

Es por ello que antes de comenzar con las actividades prácticas, todas las personas involucradas (estudiantes y profesores) tenemos la obligación de conocer cuáles son las normas de seguridad a seguir en el laboratorio de manera tal, que el trabajo se realice con un riesgo mínimo de exposición, tanto para las personas que lo ejecutan como para el medio ambiente.

PRINCIPIOS DE BIOSEGURIDAD Bioseguridad

La seguridad biológica o bioseguridad, es la aplicación del conocimiento, de las técnicas y de los equipos necesarios para prevenir la exposición del personal, del área de laboratorio y del medio ambiente a agentes potencialmente infecciosos o biopeligrosos.

Agentes Biopeligrosos

Son todos aquellos agentes biológicos y materiales que son potencialmente peligrosos para los seres humanos, los animales y las plantas. Entre ellos podemos citar: bacterias, virus, hongos, parásitos, productos recombinantes, alérgenos, priones, etc.

Riesgo Microbiológico

El Riesgo Microbiológico se encuentra presente cada vez que se realiza una actividad práctica en el Laboratorio, donde se requiera la manipulación de cultivos de microorganismos, los cuales pueden alcanzar concentraciones muy elevadas y pueden llegar a provocar una infección si no son manipulados adecuadamente.


Vías de Infección

Los microorganismos pueden ingresar al organismo a través de: la boca, los pulmones, la piel (intacta o lesionada), la conjuntiva, etc. Las vías de contaminación más frecuentes en el laboratorio se dan a través de:

La boca

Comer, beber y fumar en el laboratorio.

Realizar transferencias con pipetas sin utilizar ningún tipo de protección.

Transferencia indirecta de microorganismos a través de los dedos o utensilios contaminados (lápices, bolígrafos, etc.).

La piel

Inoculación accidental con una aguja hipodérmica u otros instrumentos punzantes o de vidrio.

Cortaduras o rasguños.

Los ojos

Salpicaduras de materiales infecciosos. Transferencia indirecta de microorganismos a través de los dedos contaminados.

Los pulmones

Inhalación de microorganismos transportados por el aire (aerosoles).

En los Laboratorios de Microbiología de la Facultad de ingeniería de industrias alimentarias estamos seguros que comprendiendo y teniendo conocimiento de todos estos posibles riesgos, aprendiendo y ejecutando las técnicas adecuadas, contribuiremos con una parte importante e integral del proceso de educación, así como también a reducir el número de accidentes en el laboratorio y en futuras actividades fuera de él.

PRINCIPALES NORMAS DE SEGURIDAD EN EL LABORATORIO


• Entrar al laboratorio en forma ordenada, dejar las carteras, libros y otros objetos personales en el lugar que se les indique para tal fin.

• Llevar puesta la bata de laboratorio en todo momento. La misma debe permanecer completamente cerrada.

• Limpiar y desinfectar las superficies de trabajo, antes de comenzar y al finalizar la sesión práctica.

• Lavar las manos con agua y jabón antes de realizar las actividades programadas, antes de salir del laboratorio y siempre después de manejar materiales que se sabe o se sospecha que son contaminantes.

• Trabajar cerca del mesón, adoptando una buena postura y estando físicamente cómodo. • Llevar un calzado apropiado, preferiblemente cerrado y de suela antideslizante en las áreas de laboratorio.

• Evitar llevar en el laboratorio, accesorios que podrían ser fuente de contaminación (por ejemplo joyas).

• Recoger el cabello largo.

• Evitar desplazamientos innecesarios, movimientos bruscos. Hablar sólo lo indispensable.

• No comer, beber, fumar, almacenar comida, objetos personales o utensilios, aplicarse cosméticos ni ponerse o quitarse lentes de contacto en ningún área del laboratorio.

• Conocer el manejo de todos los equipos y reactivos a emplear antes de iniciar las actividades indicadas en la práctica. Si usted tiene alguna duda, diríjase al profesor.

• Mantener el área de trabajo ordenada, libre de libros, cuadernos u objetos personales, exceptuando aquellos equipos y materiales necesarios para la realización del trabajo práctico.

• Tener cuidado con el alcohol cuando manipule el mechero. Nunca debe dejar éste desatendido.

• Regresar los reactivos y equipos empleados (microscopio, mechero, etc.), limpios y de manera ordenada a su respectivo lugar una vez finalizada la actividad. Reporte cualquier daño de los mismos al profesor.

• Colocar los materiales de vidrio contaminados en los recipientes dispuestos para tal fin, por ejemplo: las pipetas en los pipeteros, tubos y placas de Petri en las ollas de desecho, etc.

• No usar ningún reactivo que no esté debidamente identificado, verificar las etiquetas de los mismos y estar seguro de cómo emplearlo.


• No devolver sustancias a sus envases originales.

• Emplear la propipeta al medir líquidos. Está rigurosamente prohibido pipetear con la boca. De igual manera las pipetas tendrán tapones de algodón para reducir la contaminación de estos dispositivos de pipeteo.

• Realizar solamente aquellas actividades indicadas por el profesor, no llevar a cabo experimentos no autorizados.

• Reportar inmediatamente cualquier accidente al profesor (derrame de material contaminado, heridas, quemaduras, etc.), ninguno puede ser catalogado como menor.

• Reducir al mínimo la formación de aerosoles durante la realización de cualquier trabajo práctico.

• Extremar las precauciones cuando se utilicen agujas y jeringas para evitar la inoculación accidental y la generación de aerosoles durante su manipulación y desecho.

• Emplear técnicas asépticas para el manejo de cultivos de microorganismos.

MEDIDAS EN CASO DE EMERGENCIA

A continuación mencionaremos los pasos que se deben seguir en caso de que ocurran los siguientes accidentes:

• Derrame de material biológico sobre el cuerpo:

Remover la ropa inmediatamente. Lavar vigorosamente el área expuesta con agua y jabón por un minuto. Reportar el incidente al profesor. Buscar atención médica si es necesario. La ropa contaminada debe ser colocada en una solución desinfectante antes de ser lavada.

• Salpicaduras en los ojos con materiales biopeligrosos:

Lavar inmediatamente el globo ocular e interior de la superficie del párpado con abundante agua durante 15 minutos aproximadamente. Abrir el ojo para asegurar efectivamente el lavado, comenzando por los párpados. Reportar el incidente al profesor. Buscar atención médica inmediatamente.

• Cortadas menores y heridas por pinchazo:

Lavar vigorosamente la herida con agua y jabón por varios minutos. Aplicar un antiséptico adecuado Reportar el incidente al profesor. Buscar atención médica inmediatamente.


• En el caso de derrames:

Reportar el incidente al profesor. Colocarse guantes y cubrir con papel absorbente el área del derrame. Verter un desinfectante adecuado y dejar actuar por el tiempo necesario. Retirar el material absorbente junto al material roto y colocarlos en un recipiente para residuos contaminados o bolsa de desechos, la cual debe esterilizarse junto con los guantes utilizados. Limpiar y desinfectar nuevamente el área empleando nuevas toallas de papel y desinfectante. Lavarse las manos con abundante agua y jabón

Tinción Gram1. Se esteriliza el asa bacteriológica en el mechero para evitar cualquier tipo

de contaminación y se extrae un poco de muestra (cultivo de microorganismos) del tubo de ensayo.

2. La muestra extraida se coloca sobre una lámina y se agrega una gota de solución salina o suero fisiológico.

3. Se vuelve a esterilizar el asa bacteriológica para mezclar la muestra con la solucion salina,posteriormente se flamea la lámina con una distancia próxima al mechero hasta que el contenido este seco.

4. Se agrega el colorante Cristal Violeta por 1 minuto,cuando la muestra este coloreada se enjuaga con agua destilada.

5. Despues se agrega Lugol por 1 minuto,transcurrido este tiempo se enjuaga nuevamente con agua destilada.

6. Se agrega Alcohol Cetona para decolorar por un tiempo de 5 segundos y empleando agua destilada se procede a enjuagar.

7. Por ultimo se agrega Safranina y la muestra queda lista para poder observarse en el microscopio con el objetivo de 10x, 40x y si se desea observar con un objetivo de 100x se agrega una gota de Aceite de Inmersión.


OBSERVACIÒN

Salmonella sp

Bacilus cereus

Vibrio sp.


RESULTADOSMediante la práctica se logró reconocer los distintos materiales y equipos de laboratorio asi como su uso y su correcta manipulación.

A través de las instrucciones brindadas por nuestra docente del curso de microbiología de los alimentos se adquirieron los conocimientos sobre medidas de bioseguridad, normas en el laboratorio con la finalidad de reducir los accidentes.

Asimismo se comprendió y practicó el procedimiento de la tinción gram en tres muestras distintas de microorganismos como se detalla a continuación:

Muestra Microorganismo Tinción Genero

1 Salmonella sp Rojo Gram -

2 Bacillus cereus Violeta Gram +

3 Vibrio sp Rojo violáceo No se pudo identificar

Resultados obtenidos en la primera practica de laboratorio.

Nota: En la tercera muestra no se pudo identificar el género del microorganismo

DISCUSIÓN

De acuerdo con las bibliografías se estudió el tipo de género de cada uno de los microorganismos analizados en la práctica, identificándose que dos tercios de los resultados coincidieron con las teorías descritas por los autores, en los casos de salmonella sp (gram- rojo) y bacillus cereus(gram+ violeta).

Sin embargo, la última especie analizada Vibrio sp presentó tinción roja violácea generando una dificultad en su identificación de género, esto pudo verse afectado por un exceso del colorante cristal violeta en el procedimiento de la tinción gram.


Cuestionario¿Cómo limpiar el lente de un microscopio?

La lente de un microscopio es algo muy delicado de limpiar y no es aconsejable quitarla del microscopio para ser lavada. La lente del microscopio pertenece a uno de los tres elementos más importantes que forman los microscopios y permite un aumento de los objetos que se pretenden observar mediante filtros llamados "de antigel subsecuente".

Para limpiar la lente de un microscopio seguiremos los siguientes pasos:

Coge el papel limpia lente que podrás encontrar en tiendas especializadas o en distribuidores de material de laboratorio

No toques nunca la lente del microscopio con las yemas de los dedos ya que la huellas digitales puede influir en la visibilidad del microscopio. Cuando se secan las huellas dactilares en la lente es muy complicado quitarlas y se debe de hacer con agua destilada.

Con el papel limpia lentes humedece el papel con éter.Frota el papel limpia lentes, bañado en éter sobre la lente del microscopio haciendo movimientos circulares.

El aceite de cedro que queda sobre la lente frontal del objetivo de inmersión debe quitarse inmediatamente después de finalizada la observación.

Para ello se puede pasar el papel "limpia lente" impregnado con una gota de xilol (derivado del benceno).

Para guardarlo se acostumbra colocar el objetivo de menor aumento sobre la platina y bajado hasta el tope; el condensador debe estar en su posición más baja.

Para evitar que tropiece con alguno de los objetivos. Guarda en lugares secos, para evitar que la humedad favorezca la formación de hongos. Ciertos ácidos y otras sustancias químicas que producen emanaciones fuertes, deben mantenerse alejados del microscopio.


Anexos


BIBLIOGRAFÍA

• Organización Mundial de la Salud. Manual de Bioseguridad en el Laboratorio. Ginebra: OMS; 2005

• Biosafety in Microbiological and Biomedical Laboratories. CDC/NIH. U.S. Department of Health and Human Services, Public Health Cervices (4ª ed.).

• Washington; 1999. Mahon, Conni and Manuselis, George. Textbook of Diagnostic Microbiology. Second edition. USA: W.B. Saunders Company; 2000.

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