BIODISPONIBILIDAD

YNIVELES DE MEDICAMENTO

CILIA ROJASBacterióloga PROGENIKA BIOPHARMA GRIFOLS

BIODISPONIBILIDAD Y NIVELES DE ACS

• Las terapias con fármacos biológicos han supuesto una granalternativa en el tratamiento de enfermedades inflamatorias crónicas,como la artritis reumatoide, espondiloartritis, enfermedad inflamatoriaintestinal y psoriasis entre otras.

• Sin embargo, algunos pacientes no responden satisfactoriamente omuestran una falta de eficacia tras tratamientos prolongados.

• La pérdida de respuesta puede explicarse por la inmunogenicidad delfármaco, es decir, el paciente crea anticuerpos contra el fármaco queneutralizan su efecto.

BIODISPONIBILIDAD Y NIVELES DE ACS

• La respuesta al tratamiento se realiza en base a variables clínicasrelacionadas con el proceso de la enfermedad.

• En muchos casos se hace un uso ciego y no personalizado de fármacosmuy costosos.

• La administración de fármacos biológicos debe ir siempre acompañadade un estrecho control de la respuesta del paciente a la terapia, paravalorar su eficacia y si fuera necesario modificar la pauta.

ANTICUERPOS MONOCLONALES

INMUNOLOGÍA

Dr. Manuel Palacios

BIODISPONIBILIDAD Y NIVELES DE ACS

Definir y unificar los métodos de evaluación de respuesta.

• Es imprescindible la inclusión de variables biológicas como la

biodisponibilidad e inmunogenicidad de los medicamentos.

BIODISPONIBILIDADNiveles séricos de fármaco biológico

INMUNOGENICIDADNiveles séricos de anticuerpos antifármacos biológicos

NIVELES DE MEDICAMENTOS Y ACS

BIODISPONIBILIDAD Y NIVELES DE ACS

Laboratorio Clínico:

Determinaciones de Niveles séricos de fármaco

Niveles de anticuerpos.

Permite una monitorización sensible y específica de los niveles

circulantes de cada fármaco y de su inmunogenicidad, de manera

que el médico pueda evaluar estas variables para llevar a cabo un

seguimiento más estrecho de la respuesta del paciente al

tratamiento y tomar las decisiones terapéuticas correspondientes.

BIODISPONIBILIDAD Y NIVELES DE ACS

• Los análisis están desarrollados en tecnología ELISA, lo que permite ofrecerresultados en un corto periodo de tiempo.

• Los ensayos y productos son validados siguiendo guías de validación demétodos bioanalíticos de FDA y guías CLSI correspondientes dirigidas a lavalidación de productos para diagnóstico.

PROGENIKA BIOPHARMA GRIFOLS

NIVELES DE ACS

➢Los pozos se suministran recubiertos con el medicamento.

➢El ensayo utiliza los dos brazos de las IgG de tipo 1, 2 y 3 para entrecruzar

el medicamento unido a la placa .

➢Se añaden los calibradores , controles y muestras de los pacientes

➢Los acs presentes se unan al medicamento pre-inmovilizado.

➢ La fracción de muestra no unida se lava.

➢ Se añade conjugado a HRP, a cada pocillo.

➢Una segunda incubación permite que el conjugado se una a los acs que

se han unido a los pozos.

➢Tras lavar el conjugado no unido, la actividad enzimática se mide mediante

un sustrato cromogénico .

➢El color obtenido es proporcional a la cantidad de acs presentes en la

muestra del paciente.

NIVELES DE FARMACO

Este ensayo utiliza anticuerpos monoclonales humanos que permiten la

detección específica del fármaco.

Mide la biodisponibilidad : la fracción de fármaco libre en la circulación .

Principio del Test

✓ Es un ELISA sandwich en formato de 96 pocillos .

✓ Las tiras ELISA se suministran pre-tapizadas con un anticuerpo monoclonal

humano anti- fármaco.

NIVELES DE FARMACO

PROCEDIMIENTO

➢ Se añaden calibradores , controles y las muestras a los pozos.

➢ El fármaco presente en las muestras se une a los acs anti –fármaco.

➢ La fracción de muestra no unida se lava, y se añade un segundo

anticuerpo monoclonal conjugado a HRP a cada pocillo.

➢ Una segunda incubación permite que el acs anti-fármaco conjugado a

HRP se una al fármaco pegado a los pocillos.

➢ Tras lavar el exceso de ac anti-fármaco conjugado a HRP, la actividad del

enzima se mide mediante un sustrato cromogénico .

➢ La señal obtenida es proporcional a la cantidad de fármaco presente en la

muestra del paciente.

BIODISPONIBILIDAD Y NIVELES DE ACS

Análisis Tipo muestra Volumen requerido

Concentración de infliximab circulante y anticuerpos anti-infliximab Suero 300 µl

Concentración de adalimumab circulante y anticuerpos anti-adalimumab Suero 300 µl

Concentración de etanercept circulante y anticuerpos anti-etanercept Suero 300 µl

Concentración de rituximab circulante y anticuerpos anti-rituximab Suero 300 µl

Concentración de golimumab circulante y anticuerpos anti-golimumab Suero 300 µl

Concentración de tocilizumab circulante y anticuerpos anti-tocilizumab Suero 300 µl

Concentración de ustekinumab circulante y anticuerpos anti-ustekinumab Suero 300 µl

INTERPRETACION DE RESULTADOS

• El cálculo e interpretación de resultados se realiza de manera

completamente automática mediante la aplicación online.

• El usuario tan sólo tiene que introducir los datos obtenidos del lector de

placas en la aplicación de cada kit para obtener de manera inmediata y

automática el resultado del paciente.

• No es necesario la instalación ni configuración de ningún software en el

equipo del usuario.

RECOMENDACIONES

✓ Extraer las muestras antes de la administración del fármaco (niveles valle).

✓ Los kits han sido validado con muestras de suero.

✓ Las muestras de suero utilizadas en este ensayo deben ser tomadas

siguiendo técnicas estándar de laboratorio.

✓ Los sueros hemolizados no afectan a los resultados del test. No se han

estudiado sueros con alto contenido lipídico.

✓ Para la obtención del suero se pueden emplear tubos con gel separador .

RECOMENDACIONES

Se han validado las siguientes condiciones de almacenamiento de

muestras de suero.

✓ Los sueros pueden ser almacenados o transportados a temperatura

ambiente (20-25ºC) hasta un máximo de 2 días.

✓ Los sueros pueden almacenarse a 2-8ºC hasta un máximo de 5 días.

En el caso de no procesar el suero antes de 5 días, congelarlo a -20ºC o

inferior.

✓ Si se emplea suero congelado, homogeneizarlo completamente antes del

análisis.

✓ Evitar ciclos de congelación y descongelación.

giftsanimados.org

PARA RECORDAR….

• Permite al especialista reconocer de una manera objetiva las pérdidasde respuesta y acelerar la toma de decisiones terapéuticas para cadapaciente, asegurando una correcta terapia, ahorrando tiempo y gastoinnecesario en terapias ineficaces.

• Todo ello redundará en una mejor calidad asistencial al paciente

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