L/O/G/O

Metode UjiVITAMIN LARUT AIR (B1, B2, B3,B5 dan B6)

Metode UjiVITAMIN LARUT AIR (B1, B2, B3,B5 dan B6)

Oleh:Mohamad Syahrul

RamdaniNIM.B1010081

Pengertian VitaminPengertian Vitamin

• Vitamin adalah zat-zat organik kompleks yang dibutuhkan dalam jumlah sangat kecil dan pada umumnya tidak dapat dibentuk oleh tubuh. (Muchtadi)

• Suatu molekul organik yang sangat diperlukan tubuh untuk proses metabolisme dan pertumbuhan yang normal. (Winarno)

Klasifikasi VitaminKlasifikasi Vitamin

• Vitamin Larut Air (B,C)• Vitamin Larut lemak (A,D,E,K)• Perbedannya:

Vit.Larut lemak Vit.Larut air Larut dalam lemak dan pelarut lemak Larut dalam air Dapat disimpan dalam tubuh (bila berlebih) Disimpan dalam jumlah sedikit (tidak disimpan) Diekresikan kedalam asam empedu (jumlah sedikit)

Diekresikan ke dalam urine

Gejala defisiensi lambat munculnya Gejala defisiensi cepat terlihat Diserap oleh usus dan diteruskan kedalam system limfatik

Diserap oleh usus dan diteruskan ke dalam system aliran darah

Macam-macam Vitamin B (B-kompleks)Macam-macam Vitamin B (B-kompleks)

• B1 (Thiamin)• B2 (Riboflavin)• B3 (Niasin)• B5 (Asam pantotenat)• B6 (Piridoksin)• B7 (Biotin)• B9 (Asam Folat)• B12 (Sianokobalamin)

Analisis kadar Vitamin Larut airAnalisis kadar Vitamin Larut air

Beberapa metode:• Spektrofotometri (UV)• Kromatografi Cair Kinerja Tinggi (KCKT)• Proksimat (Vit.C)• Mikrobiologi

Prinsip penetapan vitamin sama, akan tetapi metode ekstraksinya berbeda tergantung dari bahan yang dianalisis. Masalah dalam analisis vitamin bukan lagi pada metode penetapannya melainkan pada prosedur ekstraksinya.

Prinsip metodePrinsip metode

• Spektrofotometri dan HPLC

Ekstraksi gugus kromofor (rangkap terkonjugasi) dlm vitamin yang diserap sinar UV.

• Proksimat

Reaksi vitamin dengan reagent yang dititrasi dengan I2.• Mikrobiologi

Kecepatan pertumbuhan m.o yang diatur dengan kadar vitamin. Pertumbuhan diukur dengan turbidimeter.

Ekstraksi Vitamin Larut dalam airEkstraksi Vitamin Larut dalam air

• Contoh dihancurkan sehalus mungkin• Dilakukan ekstraksi enzimatik

menggunakan enzym amylolytic dan proteolytic

Flow chart Vitamin B1,B2,B3,B5 dan B6

Ditimbang 5-10 gram

+50 ml HCl 0.1N

Diinkubasi 1000 C ; 30 menit

didinginkan

Inject HPLC

Dihimpitkan ke labu, disaring

Di-adjust pH 4.5

Sumber: SNI 3751:2009

Sampel yg sudah

dihaluskan

• Column C18 dengan fase MeOH-H20

• FG: NaHexan sulfanic acid:NaHeptan Sulfanic acid:As.Asetat:Methanol:Air

• Flow: 1 ml/menit• Det: UV dengan ʎ=254 nm• Vol inject: 20 ul

Sumber: SNI 3751:2009

Flow chart Vitamin B1,B2,B3,B5 dan B6

Ditimbang x gram

+60 ml HCl 0.1N tutup alumunium

Diinkubasi 1210 C ; 30 menit

didinginkan

Inject HPLCDihimpitkan

ddH2O+saring

dinginkan, pindahkan ke labu

Diinkubasi 45-50 0 C;3 jam

+5ml 10%Takadiastase

Sumber: ASEAN Manual of Nutrient Analysis Mahidol University, Thailand

Terima KasihTerima Kasih