TOXIINFECTII ALIMENTARE PRODUSE DE AEROMONAS HYDROPHILA

8/2/2019 TOXIINFECTII ALIMENTARE PRODUSE DE AEROMONAS HYDROPHILA

1/36

TOXIINFECTII ALIMENTARE PRODUSE DEAEROMONAS HYDROPHILA

INTRODUCERE

Dup anul 1980 a aprut un interes tiinific deosebit de mare fa de bacteriile din genulAeromonas ca germeni patogeni pentru om i animale. O mare parte din acest interes se datorete asocieriiacestor bacterii cu bolile gastrointestinale la oameni. Specii de Aeromonas productoare de enterotoxine s-au izolat de la un numr mare de copii cu diaree i s-au adus numeroase dovezi care sugereaz c acestebacterii trebuie s fie considerate ca ageni patogeni enterici. n afara acestui interes, au aprut i alteaspecte de importan crescnd referitoare la taxonomia complicat a genului i la factorii de virulen careopereaz n infeciile umane i animale. Ca urmare, numrul de publicaii tiinifice asupra genului a crescutenorm i s-au inut trei simpozioane internaionale asupra genurilorAeromonas i Plesiomonas, ultimul fiindcel din septembrie 1990, inut la Helsingor n Danemarca. Cu aceste ocazii s-a subliniat interesulmicrobiologic i medical asupra genului Aeromonas pe o baz global, ceea ce explic progreselenregistrate n perioada imediat urmtoare asupra acestui subiect. Multe din lucrrile aprute s-au referit laA.hydrophila, un microorganism mult timp controversat. Dei n prezent este unanim acceptat c unii membriai acestei specii au potenial patogen, exist nc unele semne de ntrebare asupra rolului lor ca ageni

patogeni primari. De asemenea, au existat i exist nc dezacorduri asupra speciaiei i biotiprii pentruidentificarea tulpinilor patogene i asupra naturii enterotoxinei produse de acestea.

Cel mai mare impact asupra cercetrilor asupra speciilor de Aeromonas provine din asociaiaepidemiologic posibil a acestora cu gastroenterita bacterian a omului. Dei rolul aeromonadelor capatogeni gastrointestinali este oarecum nc controversat, dovezile aduse arat c cel puin unele tulpinisunt implicate n boala diareic. Alte aspecte de interes major pentru genul Aeromonas se refer laidentificarea de noi specii, la grupele patogene i la factorii de virulen asociai cu anumite sindroameclinice.

n concluzie la cele de mai sus, pe baza numeroaselor dovezi, trebuie reinut cA. hydrophila esteconsiderat astzi un agent patogen de origine alimentar, care se izoleaz frecvent din fecalele bolnavilorcu diaree i din o varietate de alimente. O parte din mbolnvirile produse de aceast bacterie au aspect detoxiinfecie alimentar.

ETIOLOGIE

Dei toxiinfecia alimentar pe care o descriem n acest capitol este considerat a fi provocat despeciaA. hydrophila,n realitate aceast mbolnvire poate fi cauzat i de alte specii de Aeromonas,nprimul rnd deA. sobria.Aceste specii mobile sunt nrudite genetic i constituie grupaA. hydrophila. Dinaceast cauz, n material se vor face referiri i la alte specii dectA. hydrophila.

TAXONOMIE, CARACTERE MORFOLOGICE, CULTURALE l BIOCHIMICE

Aeromonas hydrophila ( A.h.) face parte din genul Aeromonas, familia Vibrionaceae. GenulAeromonas

este format din bacterii cu form de bacili Gram negativi, lungi de 1-4,4

i groi de 0,4-1,

oxidaz i catalaz pozitivi, facultativ anaerobi. Majoritatea speciilor i subspeciilor sunt mobile i au unsingur flagel polar. Reduc nitraii, fermenteaz anaerob multe monozaharide, dizaharide, glicozide i uniialcooli zaharai, cum sunt D-manitolul i glicerolul. Rareori produc acid din pentoze, metilpentoze,trizaharide i compui necarbohidrai ( m-inositol). Rezist la 10 i 150 mcg vibriostatic 0/129. Au cerinenutritive simple i nu necesit NaCI pentru cretere; din contra, concentraiile de NaCI mai mari de 6-7 % leinhib dezvoltarea. Produc multe enzime extracelulare ca toxine citolitice, proteaze, nucleaze, lipaze,sulfataze, lecitinaz, chitinaz, amilaz i stafolisin. Unele specii sunt patogene pentru om i pete.Coninutul ADN-ului n G + C este de 57-63 mol %. Specia tip este A. hydrophila.

1


2/36

n prezent exist 14 specii n genulAeromonas, ultima fiind A. allosaccharophila. Cel puin 9 dinaceste specii au fost implicate n mbolnviri ale omului, nainte de sistematica molecular, numeroase speciierau denumiteA. hydrophila care, n realitate, astzi reprezint fenospecii. Speciile descrise n ultimul timpsunt genospecii i ele sunt definite pe baza analizei de hibridare ADN-ADN, dei unele au fost propuse pebaza datelor furnizate de secvena 16 S ARNr. Majoritatea tulpinilor dintr-o genospecie au omologie de ADN

de 70-100 %. Analiza comparativ a secvenelor 16 S ARNr ntre speciile deAeromonas arat o identitatede > 98 %.n scopuri practice, pentru lucrrile de rutin, toate speciile din genulAeromonas sunt mprite n

dou grupe distincte. Prima grup cuprinde o singur specie imobil i psihrotrof, A. salmonicida.Aceastspecie este omogen din punct de vedere serologic, parazit strict n condiii naturale, puternic patogenpentru pete, care nu se dezvolt la 37C i nu este patogen pentru om. A doua grup cuprindeaeromonade mobile care, pe baza caracterelor biochimice i a asemnrilor ADN, au fost clasificate n treispecii: A. hydrohila, A. caviae i A. sobria. n cadrul acestei grupe exist cel puin 12 grupe de hibridare.Determinarea grupelor de hibridare nu se poate face n laboratoarele de rutin, motiv pentru care toatespeciile mobile sunt denumiteA. hydrophila sau specii din grupaA. hydrophila.

n realitate, grupaA. hydrophila este extrem de heterogen n privina proprietilor biochimice,structurale i genetice. nc din 1981 s-a recunoscut c, dei biochimic se pot distinge 4 grupe, numitefenospecii, din punct de vedere genetic ( asemnarea secvenelor polinucleotidice ) exist n cadrul fiecreia

din fenospeciileA. hydrophila, A. sobria, A. caviae cte 5-7 grupe de hibridare ( HG) distincte. n felul acesta, pe msur ce studiile fenotipice i genotipice se extind, apar nume noi deaeromonade caA. schubertii, izolat dintr-un material clinic de la om, cuprinde tulpini manitol negative i estencadrat n HG 12;A. eucrenophila, biochimic asemntoare cu A. caviae i este ncadrat n HG 6; A.jandaei, izolat att din materiale clinice ct i din mediul nconjurtor, este asemntoare cuA. sobria, darzaharoz negativ.

Pe baza numeroaselor investigaii genetice i epidemiologice s-au caracterizat HG la un numr de271 tulpini izolate din fecalele de om i s-a stabilit c 85 % din acestea fac parte din urmtoarele grupe dehibridare ( HG ): 1 ( A. hydrophila ), 4 ( A caviae ) i 8 ( genospeciaA. veroniibiotip sobria, fenospecia Asobria ). Din restul de 15 %, 2/3 aparin HG 5 ( A media ). n laboratoarele de rutin, identificarea speciilorse face pe baza criteriilor din tabelul 1.

Speciile din genul Aeromonas au cerine nutritive minime i se dezvolt bine pe mediile nutritiveobinuite cu pH 4-10, la temperaturi de 20C-30C, fiind mai tolerante la condiii acide cnd sunt cultivate la

28C dect la 4C. Unele specii nu se dezvolt la 37C, altele se dezvolt i la 38C-41C. Temperaturaminim de dezvoltare este 0C-5C, fiind microorganisme psihrotrofe. Pe suprafaa mediilor solide formeazcolonii de mrime medie, alb-gri, semitransparente, netede, lucioase. Nu se dezvolt n medii cuconcentraii mari de clorur de sodiu, spre deosebire de vibrioni. n mediile cu 6 % NaCI se dezvolt numai2,5 % din tulpini. Sunt sensibile la 2,5 u.i. penicilin/ml.

PATOGENITATE

Dei majoritatea lucrrilor asupra speciilor deAeromonas, efectuate n ultimul timp, s-au concentratasupra aspectelor de identificare a factorilor de virulen sau asupra mecanismelor care acioneaz ninfeciile umane i animale, numai stratul S de la A salmonicida a fost fr echivoc legat de patogenitatea

acestei specii care provoac infecii serioase la peti, n special Salmonidae. Majoritatea celorlali factori devirulen produi de speciile de Aeromonas, au fost asociai cu patogenitatea pentru om, prin deducie. nplus, deoarece n prezent nu exist nici un animal de experien la care s se reproduc fr dubiugastroenterita cu Aeromonas, studierea rolului produselor ca enterotoxina, hemolizinele i adesinele ndiaree trebuie s atepte gsirea unui model dorit. n ciuda acestor deficiene, s-au fcut progresesubstaniale privind identificarea unui numr de caractere structurale, enzimatice i celulare care par sjoace un rol important n procesele infecioase intestinale i extraintestinale la om i animale.

EPIDEMIOLOGIE

2


3/36

EPISOADE CU CARACTERE DE T.I.A., REZERVOARE SI SURSE DE INFECIE

A. hydrophila produce n mod obinuit cazuri sporadice de gastroenterit i foarte rar episoadeextinse. Pn nu de mult, dei era acceptat unanim existena toxiinfeciilor alimentare produse de A.hydrophila, nu era raportat nici o izbucnire cu cazuri numeroase, bine documentat i confirmat pe deplinprin investigaii de laborator, dei, se pare, c cel puin dou asemenea episoade au existat ca urmare a

consumului de stridii. Neraportarea episoadelor de t.i.a. produse deA. hydrophila

se explic n principal prinaceea c clinicienii nu acordau semnificaie enteropatogen acestei bacterii i n consecin, nu fceauinvestigaii n scopul izolrii i caracterizrii ei. Dup stabilirea indubitabil a rolului Aeromonas spp. nproducerea gastroenteritei la om, episoadele de t.i.a. au nceput s fie studiate i n direcia izolrii iidentificrii acestor bacterii, iar literatura de specialitate a publicat deja cteva izbucniri de t.i.a. produse de A.hydrophila.

n 1990, Tanaka si col. au descris un episod aprut la un grup de copii din oraul Inuyama dinprefectura Aichi. Bolnavii prezentau ca semne principale durerile abdominale i diareea. Din fecalele a 3copii s-a izolatA. hydrophila,ca i din alimentele rmase, sursa de ap i de la buctari. Autorii au consideratc sursa primar de contaminare a constituit-o apa prin care s-au contaminat alimentele consumate i careau stat la originea mbolnvirilor. Din cele 9 izolate de A. hydrophila studiate, 5 nu fermentau zaharoza iaparineau serogrupelor 0:22 sau 0:23. Celelalte 4 tulpini care nu fermentau zaharoza aparineau serogrupei0:16. Toate cele 9 tulpini erau rezistente la ampicilina, eritromicin i cefaloridin.

Krovaceksi col. au raportat n 1995 un episod de t.i.a cuA. hydrophila,

aprut n Suedia la 27persoane care au consumat un aliment specific suedez " landgang " ( un amestec de crevei cu maionez ),pate de ficat, unc, crnai i salat de legume, cumprat de la un magazin alimentar. Din cele 27 depersoane, 22 s-au mbolnvit dup 20-34 ore de la ingerarea alimentului i prezentau diaree acut sver,dureri abdominale, dureri de cap, febr i vomitri. O persoan i-a pierdut cunotina. Semnele au durat, nmedie, 2 zile. Din celelalte 5 persoane, dou s-au mbolnvit a doua zi cu semne asemntoare. Examenulbacteriologic al alimentelor rmase a dus la izolareaA. hydrophila din creveii cu maionez, carnaii afumai,pateul de ficat i unca fiart, cu o densitate de 106-107 celule/g aliment. Din salat i maionez nu s-a izolat

A. hydrophila. Investigarea profilelor de virulen a tulpinilor deA. hydrophila au demonstrat capacitatea lorde a produce hemolizin p, citotoxine, toxine citotonice, enterotoxine, aderen i invazie pentru culturile decelule intestinale umane.

Gastroenterita cu Aeromonas este produs numai de speciile mobile i n primul rnd de A.hydrophila. Nia lor natural este reprezentat de apa dulce, cu excepia celor termale, apa din estuare i

cea a mrilor i oceanelor deschise. Ele pot fi gsite de asemenea, n sol i pe multe produse agricole.Densitatea lor este mai mare n apele curgtoare i uor saline. Nu s-au gsit n ape cu salinitatea > 15 %. ncondiii de laborator,A. hydrophila nu a putut fi cultivat n medii cu concentraii de NaCI mai mari de 6-7 %.Aceast specie bacterian nu supravieuiete n rezervoarele acvatice cu pH mai mic de 5,2 sau mai marede 9,8 i la temperaturi mai mici de 4C sau mai mari de 45C. Numrul de aeromonade din mediile acvaticeeste mai mare vara cnd temperatura apei este > 20C. Unele tulpini rezist n apa clorinat.

Aeromonadele se gsesc deseori n coninutul tubului digestiv al vieuitoarelor din apelecontaminate: peti, reptile, broate, molute, amfibii.

Animalele de ferm sntoase pot purta aceste bacterii la nivelul tubului digestiv n proporie depeste 10 %, constituind o surs important de contaminare a apei i diferitelor produse alimentare de origineanimal.

Alimentele de origine animal sunt contaminate frecvent cu aeromonade. Contaminarea lor se facen principal prin apa de splare. Din anchetele fcute de diverse colective, a rezultat c aproape toate

alimentele crude de origine animal sunt contaminate cu aeromonade, acestea fcnd parte din flora deputrefacie obinuit. Fiind bacterii psihrotrofe, ele se pot multiplica la temperatura de refrigerare i fac partedin asociaia microbian care produce alterarea crnurilor refrigerate.

Procesele termice care se aplic alimentelor n timpul prelucrrii i gtirii sunt suficiente pentru a ledistruge, aeromonadele avnd o termosensibilitate mai mare dect a tuturor celorlalte bacteriienteropatogene nesporogene.

UNELE ASPECTE LEGATE DE IMPLICAREAAEROMONAS SPP. N PRODUCEREAGASTROENTERITEI LA OM

3


4/36

Mult timp A. hydrophila a fost considerat un patogen oportunist pentru gazdele cu rezitenaorganismului sczut. Aceasta s-a datorat i faptului cA. hydrophila nu se identifica totdeauna corect ireputaiei c avea o virulen sczut, ceea ce a fcut pe clinicieni s nu o ia n consideraie, chiar cnd eracorect identificat. n ultimul timp acest mod de gndire a specialitilor s-a schimbat i aceast speciebacterian este considerat capabil s produc gastroenterit acut la om, uneori cu o frecven maimare dect ali germeni patogeni enterici. Multe investigaii au artat c A. hydrophila se izoleaz mai

frecvent din scaunele diareice dect din cele normale; 1,1 % n probele de fecale diareice i 0 % n probelede fecale nediareice sau 10,2 % la copiii cu diaree din Australia fa de 0,6 % la cei fr diaree. Dup alicercettori, nu ar fi diferene semnificative ntre frecvena acestei bacterii la persoanele cu diaree fa de celefr diaree. Totui, la persoanele sntoase numrul de celule bacteriene din fecale este mult mai mic.Prezena unui numr mare deAeromonas spp. n fecale este de cele mai multe ori nsoit de diaree la copiii btrni.

Pentru a verifica dac sursa de provenien a tulpinilor influeneaz patogenitatea lor, Krovacek sicol. au studiat comparativ factorii de virulen la mai multe tulpini de A. hydrophila izolate din aceeai zongeografic ( sudul Italiei), dar din dou surse diferite: sedimente marine i fecale de la oameni cu diaree.Toate tulpinile au fost caracterizate referitor la urmtorii factori de virulen: producerea de citotoxine, toxinecitotonice, hemolizine, factori dermonecrotici i capacitatea de a adera " in vitro " la celulele intestinale de om.Rezultatele au demonstrat c toate tulpinile produceau toi sau numai unii din factorii de virulen implicai nmbolnvirile date deA. hydrophila, indiferent de sursa lor de provenien.

Cel mai mare numr de mbolnviri se nregistreaz la copiii sub 7 ani i la adulii peste 60 de ani.Exist fluctuaii sezoniere ale cazurilor de gastroenterit cuAeromonas spp., vara i toamna nregistrndu-se mai multe cazuri.

Dovezile epidemiologice i clinice de care dispunem arat c speciile deAeromonas sunt ntr-adevrenteropatogene, n ciuda faptului c nu sunt satisfcute toate postulatele lui Koch. n ciuda acestorargumente majore, cercetrile din ultimul timp au mbogit cunotinele referitoare la diferite aspecte alegastroenteritei produse de aeromonade, cunotine care vor ajuta la stabilirea membrilor acestui grup debacterii ca ageni etiologici ai bolii diareice.

Studiile genetice fcute pe un numr mare de izolate de Aeromonas din fecalele persoanelor cugastroenterita arat predominana grupelor genetice ( HG ) 1 ( A. hydrophila ), 4 ( A. caviae ) i 8 ( A.veroniibiotip sobria ).

Dovezile cele mai puternice care susin implicarea etiologic a speciilor de Aeromonas nproducerea gastroenteritei, au fost aduse recent i ele se refer la rspunsurile imune specifice ale

pacienilor infectai, fa de diferitele activiti structurale sau enzimatice ale tulpinii omoloage implicate.Aceste rspunsuri imune s-au putut pune n eviden prin unele teste imunologice ca ELISA, imunoblot iseroneutralizarea.

ntr-o perioad de timp s-a presupus c tulburrile gastrointestinale produse deAeromonas spp. sedatoresc aminelor ce se formeaz n alimentele asupra crora ele acioneaz. Rezultatele cercetrilor fcutede Berqann au infirmat aceast presupunere. Verificnd 50 de tulpini de Aeromonas mobile i imobile( hydrophila, sobria, caviae i salmonicida ) asupra capacitii lor de a produce amine toxice ( histamina,triptamina i tiramina ), el a constatat c aceste tulpini nu produceau histamina i triptamina, iar cantitatea detiramina produs nu avea relevan pentru igiena alimentelor dect parial.

Travis si Washington consider c aeromonadele izolate din scaunele diareice nu sunt totdeaunacauza mbolnvirii i deci, nu totdeauna au semnificaie clinic. Ele pot fi: 1) cauza primar a infeciei; 2)cauza secundar a infeciei, cnd se consider bacterii oportuniste; 3) fr legtur cauzal cu boala, eleaprnd numai colonizate n intestinul gazdei; 4) cu rol de intermediar:Aeromonas ar fi putut fi cauza iniial

a bolii dar nu pot fi exclui ali ageni patogeni. Dup unii cercettori majoritatea ( 14 din 15 ) tulpinilor izolatedin scaune diareice fac parte din categoria prim, adic sunt ageni ai infeciilor primare.

MANIFESTRI CLINICE

Perioada de incubaie este de 20-34 ore, rareori 72 de ore. T.i.a. produs de A. hydrophila i A.sobria se manifest ca o gastroenterit care poate fi de dou tipuri. Unul din tipuri, care este i cel obinuit, seaseamn cu holera i se caracterizeaz prin diaree apoas i uoar febr. La copiii mai mici de doi ani

4


5/36

apar i vomitrile. Cel de al doilea tip se manifest ca o boal disenteriform caracterizat prin scaune cumucus i snge. Ele reprezint aproximativ 25 % din cazurile de gastroenterit produse deAeromonas.

La cazurile de gastroenterit produs deA. hydrophila, aprute ntr-o perioad de 18 luni la copiiidin Australia, Aqqer si col. au constatat urmtoarele simptome n ordinea frecvenei: diaree apoas (100 % ),febr mai mare de 38C ( 55 % ), crampe abdominale ( 35 % ), vomitri ( 25 % ). La 50 % din bolnavi duratabolii era mai mare de 10 zile. Tanaka si col., descriind un episod de t.i.a. cu Aeromonas n Japonia,

menioneaz c simptomele cele mai frecvente erau durerile abdominale i diareea, iar Krowacek si col. auconstatat la cele 27 de cazuri dintr-o izbucnire de t.i.a. din Suedia, urmtoarele simptome mai frecvente:diareea acut, durerile abdominale, durerile de cap, febra i vomitrile, iar n cazuri izolate pierdereacunotinei. Majoritatea semnelor s-au meninut timp de dou zile.

De reinut c prin comparaie cu alte t.i.a., cele produse de Aeromonas au o evoluie mai lung,simptomele disprnd dup mai multe zile, iar refacerea complet a bolnavilor dureaz, n multe cazuri, 2-3sptmni.

Dup cum s-a menionat mai sus, speciile de Aeromonas pot produce i infecii extraintestinale casepticemii, meningite, infecii localizate (rni), infecii ale tractului urinar sau ale aparatului respirator. ncazurile de septicemii i meningite, n afar de febr i frisoane severe, apar i hipotensiunea arterial,durerile abdominale, greurile, vomitrile. Cazurile de septicemie apar, de regul, la persoaneleimunocompromise, n special la cei cu leucemie sau ciroz. Sursa deAeromonas pentru septicemii sau alteinfecii la distan, o reprezint tractul gastrointestinal al pacienilor contaminai prin ingerarea alimentelor i

apei.

DIAGNOSTIC

DIAGNOSTICUL CLINIC

Diagnosticul nu se poate pune numai pe baza manifestrilor clinice, dar acestea trebuie s nuexclud gastroenterit produs deAeromonas spp. De aceea, n asemenea cazuri, trebuie recoltate probede fecale de la bolnavi i probe de alimente suspecte a sta la originea mbolnvirilor i trimise n timpul celmai scurt la laborator, n condiii de refrigerare. n adresa de nsoire a probelor de laborator se va cere sse fac examene i pentru izolarea i identificarea speciilor deAeromonas.

TRATAMENT - PREVENIRE

Tratamentul n gastroenterita produs de A. hydrophila este simptomatic n cazurile uoare iconst n principal din rehidratarea organismului prin soluii cloruro-sodice glucozate. n cazurile grave, cufebr i cu evoluie prelungit se intervine cu antibiotice, dintre care aminoglicosidele, cefalosporinele degeneraia a doua, chinonele i unele substane pe baz de beta-lactam s-au dovedit mai eficace.

Deoarece numeroase tulpini de A. hydrophila sunt psihrotrofe, pstrarea alimentelor n starerefrigerat nu reprezint un mijloc de a preveni mbolnvirea consumatorilor. Aceast specie bacterian itoxinele elaborate de ea sunt foarte sensibile la cldur i de aceea, cea mai eficient msur de a evitambolnvirile de origine alimentar produse deA. hydrophila este tratarea termic corect a alimentelor crude

n timpul prelucrrii i nainte de consum.

TOXIINFECII ALIMENTARE PRODUSE DE CAMPYLOBACTER JEJUNI

ISTORIC I IMPORTAN

Istoricul bacteriei Campylobacter jejuni numit la nceput Vibrio fetus a nceput n 1909cnd Favden i Stockman au descris primele avorturi la ovine produse de un agent vibrionic. n

5


6/36

1913, aceiai cercettori au raportat avorturi la bovine i ovine de origine vibrionic n Irlanda irile de Jos. Din avortoni s-a izolat o bacterie studiat, confirmat i denumit de Tavlor n 1918Vibrio fetus.

n 1946 n Anglia s-au semnalat primele cazuri de gastroenterit acut campilobacterian la357 din 6.019 deinui din aceiai nchisoare. Agentul cauzal transmis prin lapte a fost izolat dinfecalele a 31 de bolnavi din cei 71 examinai. Neputnd fi subcultivat, bacteria nu s-a studiat

complet. n 1947 Vibrio fetus s-a identificat n sngele unei femei gravide cu semne de grip i care,dup cinci sptmni de boal, a nscut un copil imatur. Din placent s-a izolat Vibrio fetus.n 1957, Kinq a observat c ntre campilobacteriile termotolerante, capabile s se dezvolte la

42C, i producerea gastroenteritei acute la om este o corelaie strns. Pe baza termotoleranei, ea adifereniat aceste campilobacterii de Vibrio fetus, numindu-le " related vibrios ", datorit asemnriilor morfologice, n acelai an vibrionii microaerofili au fost implicai ca ageni ai hepatitei psrilor,boal caracterizat prin mortalitate redus, morbiditate mare i scderea ouatului. n 1959 Florent aseparat pe criterii patogenice i biochimice specia Vibrio fetus n cele dou subspecii: V fetussubsp. venerealis care producea avort venerian la rumegtoare i V fetus subsp. intestinalis careproducea avort nevenerian. n 1963 Sebald i Veron au propus pentru aceti germeni un nou gendenumit Campylobacter, diferit de genul Vibrio,pe baza coninutului diferit n moli de guanin icitozin a ADN, ca i a capacitii de a nu fermenta hidraii de carbon. Totui, definirea complet aacestui gen a fost fcut de Veron i Chatelain n 1973 i de Smibert n 1974, care au descris pentru

prima dat specia Campylobacter jejuni.n anii urmtori s-au pus la punct o serie de metode i tehnici de izolare, cu ajutorul croraButzler si col, au examinat 900 probe de fecale recoltate de la aduli i copii cu enterit, reuind sizoleze C. jejuni de la 52 ( 4 % ). n paralel, s-au fcut ncercri de izolare a acestei bacterii dinfecalele persoanelor sntoase. Bacteria a fost gsit n 1,3 % probe de fecale de la cele 1.000 proberecoltate de la persoanele clinic sntoase.Un pas important n privina cultivrii C. jejuni a fcut n 1977 Skirow care, folosind tehnicastrierii directe a probelor de fecale pe suprafaa agarului nutritiv cu snge i cu adaus devancomicin, polimixin i trimetoprim, a reuit s izoleze C. jejuni din 57 ( 7,1 % ) din cele 803probe de fecale recoltatede la persoane cu diaree. Cele 194 probe de fecale recoltate de la persoanesntoase au fost negative.

Interesul clinicienilor i specialitilor pentru aceast bacterie a crescut enorm odat cedovezile epidemiologice au artat implicarea ei n numeroase episoade de toxiinfecie alimentar.

Deoarece C. jejuni este un comensal n intestinul animalelor cu snge cald, produsele alimentare deorigine animal pot fi deseori contaminate cu aceast bacterie, devenind o surs important deinfecie. Mult timp s-a considerat c numai laptele i carnea de pasre ar reprezenta sursa deinfecie pentru om. n prezent este stabilit c i produsele alimentare provenite de la alte specii deanimale pot fi contaminate cu C. jejuni i pot avea rol n epidemiologia gastroenteriteicampilobacteriene acute a omului.

Datorit rolului important al C. jejuni n producerea gastroenteritei acute la om, cu caracterepidemiologic de toxiinfecie alimentar, Comitetul de experi FAO/OMS asupra securitiialimentelor a inclus aceast bacterie pe lista agenilor care produc boli de origine alimentar.Experii Organizaiei Mondiale a Sntii reunii la Moscova n 1984 au subliniat faptul c " nu vafi posibil s se neleag pe deplin relaia dintre infeciile umane i animale cu Campylobacterfrintensificarea cercetrilor n acest domeniu i c specialitii care lucreaz n sectorul sntiipublice veterinare trebuie s contribuie mai mult la prevenirea i combaterea acestor infecii la om

". n ultimele dou decenii s-a cunoscut adevratul rol al C. jejuni n infeciile omului, careeste ngrijortor. Pe baza studiilor clinice, epidemiologice i de laborator, C. jejuni este consideratacum a fi una din cele mai frecvente cauze a infeciilor gastro-intestinale umane n multe ri alelumii. n SUA, aceast bacterie depete speciile de Salmonella n producerea bolilor gastro-intestinale, n anumite state i perioade, numrul anual de mbolnviri produse de C. jejuni depind2 milioane.

De civa ani s-a stabilit c infeciile umane produse de C. jejuni sunt deseori asociate cusindromul Guillain-Barre, ceea ce a sporit i mai mult interesul cercettorilor pentru studierea lor ipentru gsirea unor mijloace profilactice eficiente. Acest interes explic apariia n ultimii ani a unui

6


7/36

numr enorm de publicaii de specialitate cu acest subiect, probabil neegalat de alte boli.n ara noastr dr. Rusu mpreun cu o serie de colaboratori din Institutul Cantacuzino i din

Spitalul " V. Babe " din Bucureti au studiat mai muli ani aceast bacterie i infeciile pe care leproduce. Asemenea studii au fcut i ali specialiti, dar ntr-o msur mai mic.

ETIOLOGIE l PATOGENIETAXONOMIE, PROPRIETI CULTURALE, BIOCHIMICE SI ANTIGENICE

Taxonomia genului Campylobacter a fost mult discutat i revizuit n ultima decad. Lanceput n acest gen erau incluse numai dou specii: C. fetus i C. bubulus. In prezent genulCampylobacter cuprinde mai mult de 20 de specii i subspecii cunoscute n privina ecologiei icapacitii lor patogene.

n clasificarea actual, campilobacteriile sunt grupate, pe baza omologiei ARNr, mpreuncu ali taxoni negrupai n familii, n superfamilia VI a clasei de proteobacterii. GenurileCampylobacter i Arcobacter sunt ncadrate n familia Campylobacteriaceae. GenulCampylabactercuprinde bacterii Gram negative, cu form de bastonae subiri, curbate, n S sauspiral, groase de 0,2-0,5 m i lungi de 0,5-5 m, microaerofile, mobile datorit prezenei unui

flagel polar care determin o micare n vril (naintare prin nurubare ) caracteristic, n culturilevechi, bacteria devine cocoid, imobil i necultivabil. Nu fermenteaz i nu oxideaz hidratii decarbon i au ADN-ul cu un coninut de G + C de 29-36 moli %. Sunt oxidaz pozitive, reducnitraii, nu hidrolizeaz gelatina i ureea i dau reacia VP i RM negative. Se pot dezvolta la 25C-43C.

Prezena sau absena catalazei permite separarea genului n:Specii catalaz pozitive, din care menionm cteva cu importan patogen mai mare:Campylobacter fetus cu dou subspecii:a) fetus, dup clasificarea francez sau intestinalis, dup clasificarea american,

considerat taxonul tip al genului i purtat la nivelul intestinului rumegtoarelor la care produceavortul sporadic, iar la om infecii sistemice cu septicemii, artrite, meningite, meningoencefalite,avorturi, n special la persoanele imunodeficitare sau cu antecedente de alcoolism, cu ciroz, diabetsau cardiopatii.

b) venerealis, cu habitatul natural n mucoasa genital a bovinelor, i care este agentulmajor al sterilitii enzootice i al avortului la bovine.Campylobacter jejuni este specia dominant a genului prin semnificaia sa sanitar pentru

om, fiind responsabil de 85-90 % din cazurile de gastroenterit acut campilobacterian la om, cucaracter epidemiologic de toxiinfecie alimentar, iar uneori este implicat i n infeciile urinare.Este larg rspndit la psri i mamifere ( porci, bovine, oi, cini, pisici i mai rar la roztoare ).

Campylobacter coli considerat mult timp o variant biochimic a C. jejuni, a fost separatca specie distinct pe baza hibridizrii ADN. Aceast specie este implicat n 5-15 % din cazurile deenterit campilobacterian la om. Ea este gzduit n intestinul diferitelor animale, dar gazda eiobinuit este porcul. Se dezvolt mai repede pe mediile de cultur i trece mai lent n formecocoide. C. coli se deosebete fenotipic de C. jejuni pebaza hidrolizei hipuratului, negativ la primaspecie i pozitiv la a doua.

Campylobacter lari (laridis) se gsete, n principal, pe carcasele, pipotele i ficaii depasre. Ea produce enterite la om i psri. Se aseamn cu C. colipentru c se poate dezvolta la30C i nu hidrolizeaz hipuratul.

Specii catalaz negative:Campylobacter sputorum cu 3 subspecii ( sputorum, bubulus i mucosalis), cu toleran

mai mare fa de oxigen, capabile s reduc nitraii i s produc H2S.Campylobacter concisus care produce gingivite i periodontite la om.

Campylobacteriile catalaz pozitive se mpart n dou grupe n funcie de comportarea lor

7


8/36

fa de temperatur:- specii care se dezvolt la 25C, dar nu i la 42C. Ex.: C. fetus.- specii care se dezvolt la 42C, dar nu i la 25C, numite campilobacterii termotolerante i

care sunt principalii ageni ai gastroenteritelor umane. Campilobacteriile termotolerante includ maimulte specii dintre care cele mai importante sunt: C. jejuni, C. coli, C. lari, C. upsaliensis, C.hyoilei, C. hyointestinalis i C. showae. Pentru igiena alimentar dou specii sunt cele mai

importante: C. jejuni i C. coli.n legtur cu taxonomia campilobacteriilor trebuie menionat c ea nu trebuie consideratdefinitiv pentru c este posibil apariia unor noi specii sau subspecii sau, unele specii sausubspecii ncadrate n prezent n genul Campylobacter,pe baza metodelor moderne de taxonomie, sfie distribuite n alte grupe taxonomice i invers. Un asemenea exemplu este Helicobacter pylori,mult timp considerat C. pylori.

Speciile catalaz pozitive din cadrul genului produc avort, infertilitate i disenterie laanimale i enterit i bacteremie la om. Dintre acestea, speciile termotolerate sunt implicate cel maides n mbolnvirile omului, sursa de infecie fiind, de obicei, diferite alimente de origine animal.

INFLUENA DIFERIILOR FACTORI ASUPRA CRETERII SI SUPRAVIEUIRII C.

JEJUNI

Atmosfera de incubare sau pstrare. Natura microaerofil i capnofil (le place C0 2) acampilobacteriilor trebuie avut n vedere la cultivarea lor. Compoziia optim a atmosferei decultivare este: 5 % 02, 10 % C02 i 85 % N2.

n bulionul Brucella cu 0,01 % bisulfit de sodiu, C. jejuni a supravieuit la 4C cel mai multntr-o atmosfer de 100 % N2. Datorit sensibilitii mari a bacteriei fa de 02, unii autori recomandca probele de lapte din care urmeaz s se recupereze bacteria, s se pstreze ntr-o atmosfer cucantitatea redus de 02.

Supravieuirea C. jejuni n diferite alimente depinde de atmosfera n care acestea sepstreaz. n pachetele vacuumate sau n cele n care s-a asigurat o atmosfer de 20 % C02 i 80 %N2 sau 5 % 02, 10 % C02 i 85 % N2, bacteria a supravieuit aceeai perioad de timp. Nu s-auobservat diferene n privina supravieuirii C. jejuni n carnea de pasre n pungi de clorur de

polivinil permeabile la oxigen sau n pachete vacuumate, dei supravieuirea n crnurile roii a fostde mai lung durat n pachetele vacuumate. C. jejuni supravieuiete mai mult timp n carneatocat de vit inut ntr-o atmosfer de 100 % N2 dect ntr-una cu 80 % C02 i 20 % N2 sau 5 %02, 10 % C02 i 85 % N2.

Temperatura optim de dezvoltare a C. jejuni este 42C-45C, inactivarea ei ncepnd de la48C. D48 este de 7,2-12,8 minute, iar D55 = 0,74-1 minut, n lapte rezistena acestei bacterii esteoarecum mai mare. n laptele crud cu 106 celule/ml, D60 = 80 secunde, iar D55 = 30 minute. n carneatocat de vit, contaminat cu 106 celule/g, D60 = 6-10 minute, iar n carnea tocat de pui, D49 = 20minute i D57 = 45 secunde. Aceste date furnizate de diferii autori, arat c C. jejuni este o bacteriefoarte termosensibil i c procedeele obinuite care se aplic la pregtirea alimentelor suntsuficient de eficiente pentru a o distruge ( 69 ). Aceast bacterie se poate multiplica i la temperaturaminim de 30C, dar moare mai repede dac este pstrat la 25C dect la 30C. Ea se inactiveaz n17 zile la 4C n carnea de pasre, iar la 23C n aceeai perioad de timp numrul de celule

bacteriene scade cu 2,5-5 log10. n general, refrigerarea reprezint o temperatur de conservarepentru perioade scurte de timp a C.jejuniprezent n crnuri, iar congelarea dup o reducere iniialde 1-3 log10 o conserv 2-3 luni. De reinut c nglobarea probelor de alimente n mediul de transportCary-Blair, cu meninerea la 4C, asigur supravieuirea bacteriei pn la examinare. Este posibil cacelulele rmase viabile i infectante dup congelare, s devin necultivabile, datorit stresrii isensibilizrii lor fa de polimixina B n timpul incubrii la 42C.

Clorura de sodiu si aw. C.jejuni este destul de sensibil fa de clorura de sodiu, bulionulBrucella cu 2 % NaCI fiind bactericid la temperatura de 30C-35C. Clorura de sodiu se pare ceste mai activ la temperaturile mai mici, dect la cele optime de dezvoltare. Concentraia de 0,5 %clorur de sodiu este convenabil cultivrii acestei bacterii.

8


9/36

De asemenea, campilobacteriile sunt destul de sensibile la uscare i pstrare la temperaturacamerei. ntr-un produs deshidratat, stocat la 25C, sunt distruse 107 celule/g n 24 ore, pe cndstocarea la 4C ntr-o atmosfer cu < 14 % UR asigur supravieuirea bacteriei cel puin 6sptmni. Deci, dei C. jejuni este sensibil la uscare, totui, n condiii de refrigerare, n produseuscate rmne viabil mai multe sptmni.

Aciditatea si pH-ul. C. jejuni n mediile de cultur are un pH optim de dezvoltare de 6,5-

7,5, dar poate crete i la pH = 5,5-8,5. Este omort n substraturile cu pH mai mic de 3,5-4,5, nfuncie de temperatur. La aceleai valori de pH, moare mai repede la 42C dect la 4C. La 37C,C. jejuni se poate multiplica n crnurile cu pH ridicat ( 6,4 ), dar nu i n cele cu pH normal( 5,8 ). Imersarea carcaselor de pasre n ap cu 0,5 % acid acetic sau lactic a determinat reducereanumrului de C. jejuni cu 0,8 log10 mai mult dect imersarea numai n ap de 50C.

Componentele alimentelor, desinfectantii si iradierea. n laptele crud de vac C. jejunisupravieuiete 3 sptmni la 4C i 3 zile la 25C. Aceast supravieuire se datoreste n mareparte aciunii tamponante i protectoare a laptelui. n laptele ecremat fiert la 60C moare ntr-unminut, iar n brnzeturi nu se dezvolt datorit aciditii i concentraiei mari de sare.

n carne C. jejuni ar trebui s nu se multiplice datorit n principal pH-ului nefavorabil imicroflorei concurente. Totui, deseori, n crnurile inute la temperaturi nalte ( 35C- 42C ) s-auobservat multiplicri ale bacteriei pn la densiti de 107 / g, n 8 ore de meninere la 42C numrulde celule bacteriene crescnd cu 2 log10. Trebuie subliniat faptul c unele crnuri sunt frecvent

contaminate cu C. jejuni, cum sunt carcasele de pasre la care nivelul de contaminare atinge deseorivalori de 105 / g. n asemenea crnuri pstrate la refrigerare sau congelare, bacteria supravieuietecteva sptmni sau luni i reprezint o surs important de contaminare a omului. O serie desubstane care se adaug crnurilor n procesul de prelucrare, inhib sau omoar campilobacteriile:acidul ascorbic 0,05 %, diferite condimente ( usturoi, nucoar ).

n produsele de ou C. jejunipoate supravieui timp diferit n funcie de componente. Ea sedezvolt mai bine n glbenuul de ou dect n amestecul de ou integral, iar n albu, datoritconalbuminei, moare n timp scurt. D42 este de aproximativ 24 ore n albu. Albuul inhibmobilitatea bacteriei n 6 ore la 42C.

C. jejuni este foarte sensibil la o serie de desinfectani ca hipocloritul de sodiu ( nsoluiile cu 5 ppm, concentraii de 107 celule/ml sunt distruse n 15 minute ), compuii fenolici 0,15%, compuii de amoniu cuaternar, etanol 70 %, glutaraldehid 0,125 %, monocloramin (1 ppmomoar 99 % din celulele bacteriene din ap dup un contact de 15 minute). Dintre aceste

desinfectante, clorinarea apei din bazinele de prercire i-a gsit aplicarea practic n uneleabatoare din rile dezvoltate pentru distrugerea campilobacteriilor de pe suprafaa carcaselor depasre.

C. jejuni este la fel de sensibil sau mai sensibil dect salmonelele la aciunea razelor gamacare au o valoare de reducere zecimal egal cu 32 krad, ceea ce este de zece ori mai puin dect dozacare se aplic n mod obinuit, n unele ri, n procedeele de iradiere a produselor de carne.

FACTORII l MECANISMELE DE PATOGENITATE. INFECIAEXPERIMENTAL

Factorii de virulentCapacitatea patogen a C. jejuni variaz de la tulpin la tulpin i este determinat de maimuli factori legai de bacterie sau de gazd. Unii cercettori au demonstrat c, n cazul unor tulpini,doza minim infectant pentru om este de 500 celule, iar n alte cazuri aceast doz este mult maimare, n funcie de o serie de factori de virulen.

a. Producerea de toxine. Diferenele simptomelor clinice produse de diferite tulpini de C.jejuni depind de toxinele pe care le produc. n prezent se cunoate c aceast specie bacterianproduce o enterotoxina asemntoare cu enterotoxina holeric. Aproximativ 75 % din tulpinileizolate din materiale clinice produc aceast toxin, n timp ce tulpinile izolate de la purttoriiasimptomatici nu o produc sau o produc ntr-o proporie redus. S-a demonstrat de asemenea, c

9


10/36

tulpinile izolate din probe de la pacieni cu diaree de tip secretor provoac acumulare de lichid nansa ligaturat de obolan, iar cele izolate din cazuri de diaree hemoragic produc citotoxin pentrucelulele Vero i HeLa, dar nu i acumulare de lichid n ansa ligaturat de obolan. Enterotoxinaasemntoare cu cea holeric este citotoxic i pentru celulele Y-1 de suprarenale de oarece i acestefect poate fi neutralizat de serul de iepure antitoxin holeric. Exist corelaii ntre virulena " invitro " a tulpinilor de C. jejuni iproducerea de enterotoxina solubil. Filtratele culturilor pasate pe

oareci sunt foarte citotoxice pentru celulele Vero, n timp ce filtratele culturilor tulpinilor originaleau o toxicitate slab, ceea ce demonstreaz c n timpul pasrii pe animale are loc o sporire aactivitii genelor care codific toxina sau o selecie a celor productoare de toxin. Enterotoxinaprodus de C. jejuni este neutralizat de antiserurile cu LT sau CT, ceea ce arat asemnarea eiantigenic cu acestea.

Enterotoxina C. jejuni este o protein mare cu o greutate molecular de 60.000- 70.000,termolabil, care se inactiveaz ntr-o or la 56C, ca i la pH 2 i 8 i numai parial la pH 4.Activitatea ei se pierde n timp de o lun la 4C.

C. jejuni este capabil s invadeze direct mucoasa intestinal la pacienii cu enterithemoragic, ca i celulele HeLa n care, dup ptrundere, se multiplic. Puterea invaziv pentrucelulele HeLa este mai accentuat la tulpinile izolate de la bolnavi, dect la cele izolate din ap.

Citotoxin este o alt toxin produs de C. jejuni i ea provoac efecte citopatice pentrucelulele renale de bovine, ovariene de hamster chinezesc, Vero i HeLa. Ea se gsete n

preparatele de culturi sonicate, fr celule, i eliberarea ei crete cnd celulele bacteriene se trateazcu polimixin B, nainte de centrifugare i filtrare. Citotoxina este sensibil la tripsin i este maitolerant fa de cldur dect enterotoxina. Ea nu poate fi neutralizat de serul de iepure antitoxinaShiga sau anti-LT.

Endotoxina reprezentat de lipopolizaharidele (LPS) din peretele celular este un factorendotoxic important care contribuie la virulena bacteriei. LPS C. jejuni conin glucoza, galactoz,L-glicero-D-manoz-heptoz, glucozamin, galactozamin, acid gras 3-hidroxi-tetradecanoic i acid2-cheto-3-deoxioctonic. LPS unor tulpini de C. jejuni au aceiai lipid A ca determinani antigenici,ca regiunea corului LPS ale numeroaselor bacterii Gram-negative. Regiunea cu lipida A este parteatoxic a endotoxinei.

b. Patogenitatea C. jejuni depinde, cel puin n parte, de structura supra feei celulare format,n principal, de LPS i OMP. Aceste dou componente celulare servesc ca interfa ntre bacterie icelula gazd i ajut bacteria s nving mecanismele de aprare a gazdei. LPS i OMP sunt

implicate n aderena i invazia bacteriei n celula gazd, fenomene n care microcapsula bacterian,ca factor antifagocitar, ar juca un rol important n infecia cu unele specii sau subspecii deCampylobacter, cum este C. fetus.

Rspunsul fagocitar al macrofagelor fa de C. jejuni s-a descris recent i el poate constituiun alt factor implicat n patogeneza acestei bacterii. Supravieuirea C. jejuni n macrofage estesocotit un determinant important pentru patogenitate. Ea supravieuiete mult timp n monociteledin sngele periferic, fenomen socotit ca o evaziune fagocitar. Fagocitoza i supravieuireaintracelular timp de 6-7 zile contribuie la virulena C. jejuni. Folosind procedee dechemoiluminescen, Hyde si col. au constatat un rspuns fagocitar crescut fa de tulpinile de C.jejuni care se pasau pe oareci i care aveau o virulen ridicat. n plus, izolatele din probe cliniceumane produceau rspunsuri fagocitare mai mari dect izolatele de origine alimentar. Aceasta s-arputea datora modificrilor proteinelor din membrana celulei microbiene sau altor transformri careau loc n timpul infeciei cu C.jejuni i pasrii acesteia pe animale.

c. Folosirea fierului de ctre C. jejuni este socotit n prezent, ca i ncazul altor bacterii Gram-negative, ca un factor important de virulen. Compuii proteici produi de bacteriile care leag fierul sunt numii, n general, siderofori.Proteinele bacteriene au capaciti mai mari de a lega fierul dect cele produsede gazde. Producerea toxinei de ctre C. jejuni este sporit cnd fierul este nexces. Tulpinile care nu produc nivele detectabile de toxin, devin productoarede toxin dac se cultiv pe medii suplimentate cu fier. Aceast constatare a determinat pe uniicercettori s considere c fierul este un element cheie n patogeneza acestei specii bacteriene.Factorii de virulen, menionai mai sus, pot fi codificai prin informaia genetic prezent nplasmide. Din C. jejuni s-au izolat mai multe plasmide, dar numai dou caracteristici ale acestei

10


11/36

bacterii sunt mediate de plasmide: rezistena fa de tetraciclin i, n anumite condiii, producereaenterotoxinei. Nu s-a constatat nici o omologie ADN ntre plasmidele C. jejuni i sondele geniceale subunitilor Ai B ale CT sau gena care codific LT laE. coli. n acelai timp s-a constatat cnumai 61 % din tulpinile de C. jejuni enterotoxigene posedau ADN plasmidic specific, ceea ce aratc producerea enterotoxinei la multe tulpini poate fi codificat de gene cromozomice. La tulpini deC. fetus netoxigene s-a reuit s se transfere proprietatea de a produce enterotoxina, odat cu

transferul rezistenei la tetraciclin, iar transconjugatele de C. fetus au fost capabile s transfereplasmidele PGK 103 i PGK 104 la o tulpin netoxigen de C. jejuni, fcndu-o rezistent latetraciclin i productoare de enterotoxina.Mecanismele de patogenitate

Dei mecanismele de patogenitate a C. jejuni nu sunt pe deplin cunoscute, totui n ultimadecad s-au fcut progrese importante pentru nelegerea corect a factorilor de virulen, aa cums-a artat mai sus. Mecanismele prin care C. jejunipoate provoca infecia au fost presupuse pe bazadatelor studiilor fcute asupra diferitelor sindroame clinice, aseamntoare cu cele produse de altebacterii enteropatogene. Izolarea C. jejuni din snge i din alte esuturi extraintestinale, ca i dinfecale, arat c aceast bacterie nu este un patogen oportunist. Ca i alte bacterii enteropatogene, C.jejuni produce boala prin diferite mecanisme. Unul din mecanismele enterotoxigene const dincolonizarea bacteriei n intestinul subire, multiplicarea pe suprafaa mucoasei intestinale ielaborarea enterotoxinei. Aceast toxin determin un aflux de lichid i de electrolii, urmat de

apariia diareei apoase.O alt cale de producere a bolii este procesul invaziv prin care bacteria ptrunde n pereteleintestinului subire i al colonului. Dup aceast ptrundere, bacteria se multiplic intracelular idisemineaz n i n afara mucoasei, dar leziunea rmne superficial. Poriunea terminal aileonului i colonul sunt cel mai des afectate, iar scaunele, n aceste cazuri, sunt adesea hemoragicei conin leucocite. Leziunile constau din infiltrate inflamatorii n lamina propria i din abcese ncriptele mucoasei, asemntoare cu cele din shigeloz i salmoneloz. Dup infecia cu C. jejuniapar n serul sanguin titruri mari de anticorpi Ig G i Ig M, ceea ce arat contactul intim alcomponenilor celulari ai bacteriei cu sistemul imun extraintestinal.

Variaia simptomelor n enterita campilobacterian se datoreaz diferitelor mecanisme princare diferite tulpini de C. jejuni produc boala. Instalarea unei infecii enterice depinde deseori decapacitatea bacteriei de a coloniza mucoasa intestinal. C. jejuni este capabil s colonizeze masiv is se multiplice n intestinul omului, dup cum arat numrul mare de asemenea bacterii n fecalele

diareice.Mucusul intestinal care acoper ca un gel mucoasa, reprezint o barier de ptrundere amajoritii patogenilor enterici, dar campilobacteriile fiind foarte mobile, subiri i spiralate, suntcapabile s penetreze aceast matrice vscoas i s colonizeze mucoasa intestinal. Colonizareaeste uurat i de stimuli chemotactici, prin mrirea mobilitii bacteriilor selectate. Se pare c C.jejuni se ataeaz de esutul intestinal prin colonizarea mucusului i nu prin aderen. Capacitateaacestei specii de a coloniza mucoasa intestinal pe calea mucusului se consider ca un factor depatogenitate important.

De asemenea, se consider c adezinele flagelare ajut ataarea C. jejuni de liniile celulareepiteliale, ataare care este inhibat prin diferite tratamente i substane: L-fucoza, glucoza, N-acetilglucozamina, N-acetil-galactozamina i sorbitolul, enzimele proteolitice, glutaraldehida (2,5

%), D-manoza.O mare importan s-a acordat n ultimii ani apariiei, dup infeciile cu C. jejuni, a unorsechele postinfecioase de artrite reactive i a sindromului Guillain-Barre (GBS). GBS este o boalautoimun care se manifest ca o neuropatie periferic caracterizat prin paralizie ascendent sau cao neuropatie axonal motorie acut. Se presupune c el apare ca un rezultat al producerii de ctreorganismele infectate cu C. jejuni, a anticorpilor fa de lipopolizaharidele din structura nveliuluibacteriei, care, printr-un mecanism de mimetism molecular, reacioneaz ncruciat cu gangliozidelesau alte structuri prezente n nervii periferici. Un rol similar ar ndeplini i flagelina, proteinaimunodominant. Gangliozida GM1 poate fi o int pentru aceti anticorpi, dei ar putea fi implicatei alte gangliozide. Anticorpii i/sau rspunsurile imune mediate celular produc demielinizarea

11


12/36

inflamatorie sau degenerarea axonal sau a nervilor sau pe ambele i ntrerup neurotransmisia.

EPIDEMIOLOGIE

INCIDENA l UNELE PARTICULARITI EPIDEMIOLOGICE

Incidena enteritei produse de C. jejuni a fost mult timp subapreciat, afirmaie care estevalabil, n mare msur i astzi, datorit dificultilor de izolare a acestei bacterii sau neraportriituturor cazurilor de boal. n multe ri n curs de dezvoltare bolile diareice nu se diagnostic i prinexamene de laborator pentru precizarea agentului cauzal. Studiile fcute n rile dezvoltate lapacieni cu boli diareice, prin examene culturale ale probelor de fecale, au stabilit c C.jejuni estebacteria patogen cel mai frecvent izolat. ntr-adevr, numrul de izolri ale acestei bacterii dinmbolnvirile diareice depete, deseori, n anumite zone geografice, numrul total de mbolnviriproduse de Salmonella, Shigella iE. coli 0157 : H7. n ciuda importanei i frecvenei acestei bacteriin producerea tulburrilor gastrointestinale, laboratoarele din cele mai multe spitale nu executlucrri de izolare a ei de la bolnavi, din cauza dificultilor tehnice. n anii 1977-1985, proporiacelor mai frecvente bacterii enteropatogene izolate din cazurile de diaree la om din cteva ridezvoltate din America de Nord i Europa a fost dominat de Campylobacter(tabelul 3 ).

Din rapoartele CDC Atlanta, incidena anual a infeciilor cu C. jejuni n SUA este de 5-6

persoane la 1.000.000 de locuitori, dar, dac se are n vedere c nu toate mbolnvirile produse deaceast bacterie se cerceteaz i deci nu se raporteaz, aceast inciden ar fi de aproximativ 1.000de cazuri la 100.000 de locuitori. Prin sistemul de supraveghere actual instituit de CDC, se estimeazc dintr-un episod de 1.000 de cazuri se detecteaz numai unul. Pe baza acestor date, se apreciaz cnumrul anual de infecii simptomatice cu C. jejuni n SUA este de aproximativ 2.500.000. Acestnumr foarte mare de mbolnviri trebuie luat n consideraie cnd se judec frecvena sindromuluiGuillain-Barre consecutiv infeciilor cu C. jejuni. De reinut c ntr-o aciune de supravegherenaional a campusurilor universitare din SUA, C. jejuni s-a izolat de 10 i 46 de ori mai frecventdect Salmonella i respectiv Shigella.

Procentul de izolri ale celor mai frecvente bacterii enteropatogene din probele de fecalerecoltate de la persoane cu diareeTabelul 3

Bacteria enteropatogen ara:SUA Canada Suedia Anglia Scoia

Campylobacter 4,6 2,1 10,6 13,9 8,7

Salmonella 2,3 1,8 7,2 4,3 2,5

Shigella 1,0 1,0 3,5 3,9 6,7

n Romnia, infeciile cu C. jejuni la om sunt bine cunoscute i sunt investigate la unelespitale cu laboratoare dotate corespunztor.

Incidena bolii se pare c este ceva mai mare la masculi dect la femele. Dei infeciile potapare n orice anotimp al anului, exist unele vrfuri vara i la nceputul toamnei. Se pot mbolnvipersoanele de orice vrst. n rile dezvoltate ratele cele mai mari de mbolnvire se nregistreaz

la copiii sub un an i la persoanele de 15-30 de ani.Infecia prezint unele particulariti epidemiologice n rile n curs de dezvoltare :- existena unui procent mare de persoane sntoase, asimptomatice, purttoare intestinale

de C. jejuni. n rile dezvoltate nu exist persoane sntoase purttoare sau procentul lor estenesemnificativ;

- infeciile cu C. jejuni evolueaz deseori ca infecii mixte, asociate cu alte bacterii, virusurisau protozoare patogene. Proporia infeciilor mixte raportate n China este de 20 %, iar nBangladesh, 59 %;

- infecia se ntlnete mai des la copii. Odat cu vrsta, infeciile sunt mai rar nsoite desemne de boal, iar la aduli aproape c nu exist. Aceasta arat c, odat cu vrsta, datorit

12


13/36

contactului repetat cu bacteria ca urmare a existenei surselor de infecie numeroase, oameniidobndesc n mod progresiv imunitatea specific.

n rile dezvoltate boala apare, n primul rnd, datorit consumului de alimente de origineanimal provenite de la animale infectate sau purttoare sau de alimente contaminate ncruciat ntimpul prelucrrii i manipulrii i, ntr-o msur mult mai redus, prin alimentele manipulateneigienic i prin apa contaminat prin fecalele animalelor i oamenilor i netratat corespunztor.

Enterita campilobacterian apare uneori sub forma de boal diareic a turitilor. Eaintereseaz persoane din rile dezvoltate care cltoresc n ri subdezvoltate i n care existnumeroase surse de infecie i standarde precare de igien.

MODUL DE TRANSMITERE l SURSELE DE INFECIE

C. jejuni poate face parte din microflora intestinal obinuit a multor specii de animaledomestice i slbatice, ca i a animalelor de apartament sau agrement. Din cauza acestor rezervoareextinse, C. jejuni poate contamina apele de suprafa i solul. Transmiterea ia om are loc priningestia alimentelor de origine animal contaminate i a apei contaminate, netratat, sau princontactul direct cu animalele infectate, n special cu cele de apartament. Foarte rar infecia se poatetransmite de la om la om.

Episoadele extinse de enterit cu C. jejuni se datoreaz, n mod obinuit, ingerrii de lapte

nepasteurizat sau apei contaminate i numai rareori ingerrii crnii de pasre sau de alte alimente.Din contra, cazurile endemice izolate, au ca surs de infecie ingerarea de carne de pasre nproporie de 50-70 % din toate cazurile endemice, care reprezint > 95 % din toate cazurile deenterit campilobacterian.

Laptele nepasteurizat este, de departe, alimentul cel mai des incriminat n episoadele detoxiinfecie alimentar cu Campylobacter. Deoarece laptele comasat este distribuit la un numr marede persoane i bacteria difuzeaz uniform n produs, consumul lui determin apariia episoadelorcu numr foarte mare de cazuri. n afara laptelui crud de vac, trebuie reinut c i laptele altorspecii, cum este capra, poate reprezenta surs de infecie cu C. jejuni. Contaminarea laptelui se faceuneori pe calea ugerului cu infecii campilobacteriene.

Dei laptele crud este raportat ca vehicolul cel mai frecvent al episoadelor de enterit cuCampylobacter, rezultatele numeroaselor aciuni de supraveghere au scos n eviden c primulvehicul de transmitere a enteritei cu C.jejuni de origine alimentar este carnea de pasre. Episoadeleasociate cu carnea de pasre, foarte rar cuprind un numr mare de mbolnviri, asemntor cu celeproduse prin consumul laptelui. Din aceast cauz, numrul infeciilor atribuite consumului crniide pasre contaminate este mic. Aproape toate carcasele de pasre proaspete, refrigerate sauconglate sunt contaminate cu C. jejuni la nivele de circa 105 celule/g de carcas. Frecvena inivelul contaminrii explic de ce carnea de pasre constituie sursa cea mai important pentruinfecia de origine alimentar la om. C. jejuni nu se multiplic pe carne, din contra, datorit unorfactori nefavorabili, numrul ei scade. De asemenea, numrul acestei bacterii scade mult n timpulrefrigerrii i congelrii, dar celulele care supravieuiesc procesului de congelare rmn viabile iinfectante mai multe luni.

Crnurile roii sunt mai rar implicate n toxiinfeciile alimentare campilobacteriene la om.Totui literatura de specialitate semnaleaz mbolnviri prin consum de ficat i carne de vit i deporc, subtratate termic. Astfel, n Japonia, n 1980, a aprut un episod de enterit cu Campylobacter

la o coal cu 2.500 de copii din care s-au mbolnvit 800, dup consumul de carne de porc, iar la ounitate militar din Marea Britanie, n 1981, s-au mbolnvit 54 de persoane n urma consumuluide hamburgeri cruzi.

Alte alimente pot sta, de asemenea, la originea infeciilor cu C. jejuni. Sunt citate cazuri det.i.a. campilobacteriene prin consum de alimente (prjituri) preparate i manipulate de purttoriasimptomatici.

Apa de but a stat deseori la originea episoadelor de enterit campilobacterian. Ocaracteristic a acestor episoade de origine hidric este numrul mare de cazuri pe episod. Astfel, ndou episoade aprute n 1981 n Suedia i n 1982 n SUA, n urma consumului de ap netratatcorespunztor, au fost implicate > 4.000 de persoane. n 1978 n Bennington, un ora cu 10.000 de

13


14/36

locuitori, s-au mbolnvit 2.000 de persoane de enterit campilobacterian prin consumul apei dinreeaua oraului, contaminat n timpul unor lucrri de modernizare, prin fecalele animalelordomestice i slbatice.

C. jejuni triete ca un comensal n tractul intestinal al multor animale cu snge cald,domestice i slbatice, care trebuie cosiderate surse de infecie pentru om i rezervoare ale bacterieiprin care se contamineaz alimentele i apa de suprafa. Pisicile i cinii de apartament pot fi surse

de infecie direct i indirect pentru om, dei nu se cunosc riscurile epidemiologice ale cohabitriiomului cu aceste animale.Psrile de ferm sunt purttoare i excretoare de C. jejuni n proporie de 91-100 %,

bovinele, 43 %, cinii de curte, 49 %. La purcei, proporia de purttori este de 80-88 %, dar se parec, n cele mai multe cazuri, ei poart specia C. coli. Omul este un purttor rar ( 1,6 % ) i de scurtdurat. Multe mamifere i psri slbatice sunt, de asemenea, purttoare de C. jejuni, reprezentndun rezervor natural important. Un procent foarte mare de purttori s-a gsit la pescrui i ciori, nspecial la cele care au acces la deeurile din zonele urbane i la psrile acvatice migratoare.Frecvena mare a acestei bacterii n intestinul psrilor este legat de caracterul ei termotolerant ide temperatura corporal a psrilor mai mare dect aceea a mamiferelor. Se poate spune c pentrunumeroase specii de psri, C. jejuni face parte din microflora intestinal normal, densitatea ei fiinddeseori de 104-107 celule/g fecale.

Mutele din fermele de psri i porci sunt frecvent purttori i vectori de C. jejuni,putnd

juca un rol important n transmiterea indirect a bolii prin contaminarea alimentelor. Exist uneledate care dovedesc c molutele pot vehicula aceast bacterie.Crnurile roii pot fi contaminate uneori cu aceast bacterie. n Marea Britanie din 4.933

probe de crnuri roii recoltate din reeaua comercial, 1 % au fost contaminate cu C. jejuni. Cuocazia altor investigaii, fcute n aceeai ar, proporia de contaminare a fost de 30,6 % la carneade oaie, 10,5 % la cea de vit i 6 % la cea de porc. Procentul de contaminare era mai mare la probelede carne recoltate n abatoare, imediat dup tierea animalelor, dect la probele recoltate din reeauacomercial, ceea ce arat c C. jejuni ajuns pe crnuri nu se multiplic, din contra, numrul ei scaden mod progresiv, odat cu prelungirea duratei de stocare. n SUA, examinndu-se prin metodesensibile, cu faz de mbogire, 1.800 probe de crnuri roii, s-au detectat C. jejuni i C. coli la 5% din acestea. C. coli s-a izolat numai din crnurile de porc.

Carnea de pasre este contaminat cu C. jejuni ntr-o proporie mult mai mare, datoritprocentului foarte mare de purttori intestinali i procesului de tiere i de obinere a carcaselor,

care determin contaminarea acestora prin fecale. Numrul de celule bacteriene vii de pe suprafaacarcaselor se reduce, dar nu dispare, n timpul stocrii n condiii de refrigerare sau congelare.Dei laptele crud este implicat n provocarea mai multor episoade extinse de enterit cu C.

jejuni cu alur de toxiinfecie alimentar, totui aceast bacterie se izoleaz foarte rar din laptelecrud: n Olanda nu s-a detectat n 400 de probe, iar n SUA procentul de izolri a fost de 0,9-1,5.

Campilobacteriile termotolerante s-au gsit i pe legumele proaspete aduse n piee imagazine.

MANIFESTRI CLINICE

Toxiinfecia alimentar produs de C. jejuni se manifest din punct de vedere clinic i

anatomopatologic ca o enterit, enterocolit sau gastroenterit acut.Perioada de incubaie obinuit este de 1-3 zile, dar poate fi i de o sptmn sau mailung. Durata perioadei de incubaie este, de regul, direct proporional cu numrul de bacteriiingerate i invers proporional cu scderea rezistenei organismului infectat. Aceti doi factoriexplic faptul c la unele persoane doza minim infectant este de 500 celule bacteriene, iar la altelede 106.

Semnele prodromale sunt, n mod obinuit, nespecifice i constau din dureri de cap,mialgii, frisoane i febr, uneori mai mare de 40C. Dup 24 de ore de la apariia semnelorprodromale se instaleaz manifestarea clinic major care const dintr-o boal diareic acut,nsoit, deseori, de crampe abdominale acute i de febr. Fecalele devin repede lichide, urt

14


15/36

mirositoare i apoi apoase, iar numrul de scaune pe zi n perioada de vrf a bolii, este de 8 sauchiar 20. n a doua sau a treia zi de boal poate s apar snge proaspt n fecale, numeroaseleucocite polimorfonucleare i mucus. Scaunele pot cpta o tent biliar sau, uneori, devinsanguinolente. n unele cazuri durerile abdominale sunt aa de pronunate nct boala se poateconfunda cu apendicita acut. Apogeul bolii este atins la 24-48 ore de la apariia semnelor care potdispare n decurs de o sptmn, dar disconfortul abdominal poate persista mai multe zile. La

pacienii netratai pot apare recidive la 20 % din cazuri.Boala diareic ce nsoete infecia cu C. jejuni este considerat un proces inflamator dincauza exprimrii predominante a febrei i a simptomelor specifice, ca i din cauza scaunelor careconin leucocite polimorfonucleare i snge. Colonoscopia i biopsia pun n eviden o colitinflamatorie difuz i o enterit. Aceste semne clinice i modificrile anatomice nsoite decreterea titrurilor de anticorpi fa de C. jejuni n serul bolnavilor demonstreaz natura invaziv aagentului cauzal. Fecalele conin un numr foarte mare de celule de C. jejuni, ceea ce face posibil calaboratoarele clinice s pun diagnosticul foarte precoce pe baza examenului microscopic n contrastde faz direct al probelor proaspete de fecale.

Infecia tipic cu C. jejuni se manifest prin enterocolit acut cu dureri abdominale, diareehemoragic, inflamarea stratului lamina propria i abcese criptice. n cele mai multe cazuri boala seremite fr tratament, alteori este nevoie de o terapie cu eritromicin. Rareori enterocolit cucampilobacterii se complic cu hemoragii gastrointestinale masive n segmentele inferioare ale

tractului intestinal, ulcere ale mucoasei ileonului sau valvulei ileocecale sau printr-o infecie aapendicelui.C. jejuni poate provoca i infecii extraintestinale care se pot manifesta ca pancreatit,

colecistit, cistit, avort. S-au descris, de asemenea, cazuri de bacteremii, n special la persoaneleimunosupresate, cu diseminri la distan. Infecia se poate complica dup cteva zile de evoluie.Complicaiile au caracter nesupurativ i alergic: artrit reactiv la persoanele cu antigen dehistocompatibilitate HLA-B 27 ( human leukocyte antigen), sindrom Reiter, miocardit,meningoencefalit.

De civa ani numeroi cercettori, prin rezultatele investigailor lor, au demonstrat c ntreinfeciile cu C. jejuni i apariia sindromului Guillain-Barre (GBS) exist legturi de cauzalitate.Aceasta a determinat i organizarea unui simpozion la Bethesda, Maryland, n 26-27 august 1996,n care aceast tem s-a dezbtut pe larg i s-au prezentat mai multe lucrri, ale cror constatri iconcluzii se vor prezenta, pe scurt, n cele ce urmeaz.

GBS este o neuropatie periferic caracterizat prin paralizie ascendent, manifestat, n principal, prin slbiciunea, pareza i chiar paralizia membrelor, ca urmare a demielinizriiinflamatorii i degenerrii axonilor. Din cauza scderii numrului de cazuri de poliomielit, GBS adevenit cea mai obinuit cauz a paraliziei neuromusculare acute, care afecteaz anual 1-2persoane la 100.000 locuitori n multe pri ale lumii.

n nordul Chinei, n timpul verii se raporteaz numeroase episoade de GBS, care evolueazca neuropatie axonal motorie acut. Asemenea mbolnviri se raporteaz, de asemenea, n modmai frecvent n Mexic, Spania i Coreea. Dei acest sindrom afectaz ambele vrste, el este maifrecvent la masculi i incidena lui crete odat cu vrsta. Simptomele specifice ncep cu slbirea idisestezia picioarelor, care apoi difuzeaz la brae i corp. Boala are un mers progresiv timp de 4sptmni, cnd atinge un platou. n timp ce majoritatea pacienilor (a 70 %) se remit complet, unelecazuri cu vtmri neurologice severe ireversibile au nevoie de respiraie artificial de durat ( 25% ) sau se termin cu moartea ( 10 % ).

La circa 2/3 din cazuri, GBS este precedat, cu mai multe zile sau sptmni, de infeciiintestinale sau respiratorii acute. Dei tulburrile respiratorii preced cel mai des simptomelespecifice, cel mai frecvent microorganism izolat de la pacienii cu GBS este C. jejuni ( 41 % ),ceea ce a determinat pe muli autori s fac o legtur cauzal ntre enterita produs de aceastbacterie i GBS. Mecanismul apariiei sindromului ar consta, n esen, n producerea de ctreorganismul infectat a anticorpilor fa de lipopolizaharidele C. jejuni, care, datorit mimetismuluimolecular, reacioneaz ncruciat cu gangliozidele, n special cu GM-1, sau alte structurimoleculare prezente n nervii periferici. Anticorpii i/sau rspunsurile imune mediate celular ar produce degenerarea nervilor sau ntreruperea neurotransmisiei. Pe baza acestui mecanism

15


16/36

patogenic, GBS este considerat rezultatul unei boli autoimune.Gastroenterita campilobacterian la om, n afar de C. jejuni,poate fi produs i de speciile

nrudite: C. coli, C. laridis, C. upsaliensis, C. butzleri. C. cotise izoleaz de la 3,2 % din bolnaviicu enterit, iarC. laridisprovoac diaree sau crampe abdominale severe.

C. fetus produce la om, de regul, mbolnviri cu manifestri extraintestinale: septicemii,meningite, abcese, infecii vasculare i chiar avorturi. Infeciile intereseaz persoanele

imunodeficitare, debilitate, btrne, C. fetus fiind considerat pentru om un agent patogen oportunist.Transmiterea bacteriei la om se face pe cale alimentar.

DIAGNOSTIC

DIAGNOSTIC CLINIC

Diagnosticul clinic nu este posibil, tabloul de enterit, enterocolit sau gastroenterocolitbacterian neavnd nimic caracteristic. Manifestrile clinice coroborate cu datele epidemiologicepot contribui la fixarea unui diagnostic prezumtiv, care orienteaz pe clinician ctre examenul delaborator.

Diagnosticul diferenial se face fa de celelalte enterocolite acute, dizenteria, colita

ulceroas, boala Crohn. O problem de diagnostic aprut n ultimii ani este aceea a sindromuluiGuillain-Barre, care, dup diagnosticare pe baza semnelor clinice neurologice, trebuie investigatasupra legturii lui cu enterit produs de C.jejuni.

TRATAMENT l PREVENIRE

Formele uoare i medii de boal nu necesit o terapie antimicrobian specific, vindecareasurvenind n mod spontan dup cteva zile de diet alimentar i de tratament simptomatic:reechilibrare hidroelectrolitic i administrare de spasmolitice. Tratamentul antimicrobian, deseori,este rezervat pentru persoanele imunocompromise, copii i btrni cu forme prelungite, severe, cudiaree sau febr. Antibioticul preferat este n mod curent eritromicina, dar ca alternativ se pot folosifluorochinolonele i tetraciclinele. Antibioticele se folosesc n mod obligatoriu n cazul infeciilorsistemice, produse, n principal, de C.fetus ( intestinalis).

Dei C.jejuni este o bacterie fragil care se inactiveaz prin majoritatea procedeelor folositen mod obinuit pentru distrugerea agenilor enteropatogeni din alimente, ea continu s fie cauzaunui numr enorm de cazuri de gastroenterit acut de origine alimentar. Aceast discrepan seexplic prin contaminarea ncruciat a produselor gata de consum prin cele crude. Aplicareacorect a proceselor de prelucrare a produselor alimentare, evitarea contaminrilor ncruciate i oeducaie sanitar corespunztoare a consumatorilor vor evita aceste mbolnviri de tip alimentar.ntruct rezervorul principal pentru aceast bacterie l reprezint animalele, oamenii vor acordaatenie contactului cu acestea sau cu produsele lor.

Experii Organizaiei Mondiale a Sntii reunii la Moscova n 1984, considerndgastroenterita acut cu C. jejuni a omului, pe lng o boal de origine alimentar i o zoonoz, au

considerat necesar, ca pn la gsirea unor mijloace de imunizare activ a animalelor receptive, srecomande urmtoarele msuri pentru evitarea mbolnvirii omului:a. Creterea animalelor n condiii ct mai igienice i desinfecia sistematic a

adposturilor. Aceast msur, dei nu previne n totalitate diseminarea bacteriei eliminatpermanent prin fecale, reduce totui, n mare msur riscul extinderii infeciei.

b. Crearea de ferme de animale libere de Campylobacterar fi o msur foarte eficient, darfoarte greu de realizat n condiiile actuale, din care cauz ea rmne de domeniul idealului.

c. Respectarea tehnologiilor i a msurilor de igien n timpul tierii animalelor i alprelucrrii crnii rezultate, n aa fel nct s se evite contaminarea carcaselor cu coninut intestinal

16


17/36

i contaminrile ncruciate. Refrigerarea rapid a carcaselor i eliminarea excesului de umiditatedin atmosfera de depozitare, prin uscarea suprafeei carcaselor, reduc gradul de contaminare aacestora cu campilobacterii cu mai mult de 2 log10.

d. Lactizarea crnurilor obinute n abatoare contribuie n mare msur la decontaminarealor.

e. Iradierea crnurilor.

f. Pasteurizarea corect a laptelui i aplicarea tratamentelor termice prevzute n tehnologiilede fabricaie pentru toate preparatele din carne.Numeroase publicaii arat c expunerile repetate la C. jejuni au ca rezultat dobndirea

imunitii, ceea ce explic, de altfel, de ce mbolnvirile produse de aceast bacterie apar mai rar lapersoanele mai vrstnice. Excreia cronic a C. jejuni la persoanele deficitare n Ig A sugereaz rolulimportant al Ig A i imunitii umorale pentru prevenirea infeciilor campilobacteriene. Rspunsulimun dup infecii este de scurt durat.

Din cauza frecvenei mari a gastroenteritei acute produse de C. jejuni, urmat n multecazuri de sechele postinfecioase ca artrita reactiv i sindromul Guillain-Barre, n ultimii ani s-ancercat s se prepare un vaccin contra acestei infecii. Succesele au fost limitate din cauzacunoaterii incomplete a patogenezei C. jejuni i a lipsei unui antigen protector constant. Totui, s-areuit prepararea unui vaccin din celule ntregi omorte, care s-a dovedit eficient pentru animalele deexperien i care se afl ntr-o faz incipient de testare pe voluntari.

TOXIINFECTII ALIMENTARE PRODUSE DEESCHERICHIACOLI. GENERALITI

ISTORIC, INCIDEN, RSPNDIRE

Rolul bacterieiEscherichia coli, cunoscut mult timp sub numele generic de bacilul coli saucolibacil, n producerea toxiinfeciilor alimentare la om a fost n decursul timpului unul din cele maicontroversate. Unii cercettori au privit cu mult rezerv incriminarea acestei bacterii, att deubicvitare i prezente n mod natural n numr foarte mare n tubul digestiv al omului i animalelor

cu snge cald, n declanarea toxiinfeciilor alimentare. Din acest motiv cazurile de mbolnviri laom n care se izola din alimente numai E coli, au fost raportate mult timp ca toxiinfecii alimentarecu etiologie necunoscut. Aa se face c, dei destul de frecvente n realitate, episoadele detoxiinfecie alimentar colibacilar au fost foarte rar raportate de literatura de specialitate.

Escherichia coli a constituit totui, un germene foarte important i luat n consideraie demicrobiologia alimentar nc de la nceputurile ei, aceast bacterie fiind considerat indicatorulsanitar cel mai frecvent folosit pentru aprecierea contaminrii fecale a alimentelor. Interpretareaigienic a prezenei bacteriei n alimente i ap a suferit modificri pe msur ce s-au obinut noidate. La nceput a existat tendina de a considera ca indicator al contaminrii fecale a alimentelor iapei numai speciaE. coli. Treptat, datele cercetrilor fcute au reliefat c i speciile din genurileEnterobacter i Klebsiella sunt frecvent prezente n fecalele omului i animalelor i ca atare, s-a

propus ca i aceste bacterii, prezente pe alimente i n ap, s fie considerate ca indicator alcontaminrii fecale. Totui, numrul bacteriilor din genurile Enterobacteri Klebsiella n fecaleleomului i animalelor este mult mai mic, iar prezena lor mult mai rar, comparativ cu a E. coli. E.coli este specia Gram-negativ al crui numr n fecale este de 100.000-1.000.000 ori mai maredect cel al speciilor deEnterobacter, Klebsiella i al altor specii Gram-negative. Aceasta nseamnc n cazul unei contaminri fecale a unui aliment, E. coli are anse de a fi detectat de 100.000-1.000.000 mai mari dect celelalte specii bacteriene. Acesta este motivul principal pentru care nprezent exist o quasi unanimitate n a consideraE. coli indicatorul cel mai sensibil i cel mai fidel

17


18/36

al contaminrii fecale a alimentelor i apei. Comitetul American Naional pentru CriteriileMicrobiologice la Alimente (NACMCF), pe baza celor mai recente date, considerEschehchia coligenerice ( biotipul I) ca indicator igienico-sanitar principal pentru verificarea contaminrii fecale acarcaselor animalelor de mcelrie i ale psrilor, obinute n abatoare.Dac, aa cum s-a artat mai sus, Escherichia coli generic este folosit pe o scar larg ca

indicator sanitar pentru ap i alimente, aceasta nu nseamn c trebuie acordat mai puinnsemntate tulpinilor patogene ale acestei specii, care produc tulburri digestive, n special la copiiimici, manifestate prin dispepsii, diaree, i care mbrac uneori aspectul de toxiinfecii alimentare cecuprind colectiviti cu numr mare de cazuri. Asemenea tulburri sunt produse de tulpinilepatogene deE. coli i la animalele tinere ca vieii, purceii, mieii, puii de gin, etc. Considerat lanceput numai ca un germene patogen oportunist, aceast specie de bacterie este n prezentapreciat ca unul din cei mai frecveni ageni enterici la om i animale. nc din 1893, Jensen ademonstrat c unele tulpini administrate pe cale oral la vieii tineri, produc diaree. Ulterior, Smith,Little i Orcutt (1922, 1925) i ali numeroi autori au confirmat etiologia colibacilar a diareeivieilor i a altor specii de animale, iar n anul 1940 Lodenkmper a artat posibilitatea tulpinilorpatogene animale de a se transmite la om prin alimente de origine animal, n principal prin carne ilapte. n Germania n 1933, Schubert i David au descris una din primele toxiinfecii alimentare produse de Escherichia coli, aprut ntr-o unitate militar n urma consumului de brnzacontaminat, iar Kathe la Congresul de microbiologie din 1937 a comunicat observaiile sale asupraunui numr de trei izbucniri aprute n Germania.Toxiinfeciile alimentare produse deE. coli sunt prezente n toate rile, dar raportarea lor de ctrerile n curs de dezvoltare nu se face dect foarte rar, fie din cauz c ele nu se diagnostic, fie cn aceste ri nu s-a instituit obligativitatea raportrii lor.Semnificaia specieiEscherichia colipentru sntatea public i pentru igiena alimentar a crescutenorm n ultimii ani datorit identificrii serotipului 0157 : H7 ca agent al unor mbolnviri grave laom. Semnificaia patogen pentru om a acestui serotip este mult mai mare dect a celorlalte,datorit faptului c se poate multiplica rapid n intestinul omului, elaboreaz mai multe toxine carelezeaz grav mucoasa intestinal i alte organe, provocnd pe lng colit sau enterocolithemoragic, sindromul hemolitic i uremie i purpura trombotic trombocitopenic, cu urmri dincele mai grave. Omul se poate mbolnvi i n cazurile n care inger odat cu alimentele un numrfoarte mic de celule bacteriene, doza minim infectant fiind mai mic dect n cazul majoritiiserotipurilor de salmonele. E. coli 0157 : H7 nu se gsete n tubul digestiv al oamenilor sntoi. Eaeste purtat uneori de bovinele sntoase, considerate ca principal rezervor natural. Ele o potelimina prin fecale cu care se poate contamina carnea lor n timpul operaiunilor de tiere, sau alteproduse.n prezent este stabilit c boala diareic produs de E. coli non 0157 : H7 este frecvent n rile n cursde dezvoltare ca urmare a deficienelor de igien general i alimentar, i foarte rar n riledezvoltate. n rile dezvoltate se semnaleaz ns mai des mbolnvirile produse de serotipul 0 157 :H7. Neraportarea acestor mbolnviri de ctre rile n curs de dezvoltare se poate datora i unorfactori subiectivi. Serotipurile de E. coli non 0157 : H7 sunt mult mai implicate n mbolnvirilediareice nealimentare, sporadice i ntlnite cu preponderen la copiii sugari sau n primii ani devia i deci nu au, de cele mai multe ori, caracter de toxiinfecie alimentar.

CARACTERELE GENERALE ALE SPECIEIESCHERICHIA COLI

18


19/36

Escherichia coli a fost izolat i descris prima dat n 1885 de pediatrul german TheodorEscherich care a demonstrat existena ei ca musafir obinuit al intestinului copilului. Pentru a marcaacest tropism i frecvena izolrii sale, autorul a numit-oBacterium coli commune, ceea ce se poatetraduce prin " bacterie obinuit a colonului ". n 1919, Castelani i Chalmers i dau numele sudefinitiv de Escherichia coli, ca un omagiu adus lui Escherich. Genul Escherichia a devenit apoi

genul tip pentru familia Enterobacteriaceae, iar Escherichia coli specia tip a acestui gen,ubicvitar, cu multiple faete i care formeaz taxonul bacterian cel mai studiat i, probabil,organismul viu cel mai bine cunoscut, ntr-adevr, aceast specie constituie astzi principalulmicroorganism de studiu n cercetrile fundamentale de biochimie, genetic bacterian i debiologie molecular. Curnd dup descrierea sa, i s-a atribuit rapid un rol de agent patogenoportunist, cu circulaie mare n natur, ntlnit la toate animalele cu snge cald i om, patogen saunu, asociat sau nu cu entiti patologice specifice. Capacitatea sa de adaptare, puin obinuit, s-aatribuit dobndirii de noi genofori (plasmide), bacteriofagilor, elementelor transposabile, caracterulsu ubicvitar favoriznd apariia de tulpini cu proprieti noi, nsoite uneori de dobndirea unornsuiri patogene de oportunist, ca i de apariia n natur a numeroaselor serotipuri.Pn nu de mult se credea c genulEscherichia conine o singur specie:E. coli. Astzi este stabilitc acest gen cuprinde cinci specii:E. coli, E. blattae, E. fergusoni, E. hermani iE. vulneris.

Escherichia coli este un bacil sau cocobacil Gram negativ, aerob i facultativ anaerob,polimorf, colorat frecvent bipolar, cu dimensiuni de 2 - 6 /1,1 - 1,5 microni, nesporulat, necapsulat,mobil, datorit unui bogat aparat ciliar dispus peritrich, sau imobil. Tulpinile fimbriate sunthemaglutinante. S-au identificat dou tipuri fimbriale. Tulpinile cu fimbrii de tip 1 sunt manozsensibile i mai omogene antigenic, iar cele cu fimbrii de tip 2 sunt manoz rezistente i se ca-racterizeaz printr-o diversitate antigenic mai mare. Dup cunotinele actuale, fimbriile manozrezistente ndeplinesc funcia unor factori de patogenitate. Multe tulpini au plasmide F, celulele lorfiind prevzute cu pil de sex, detectabil serologic sau cu ajutorul fagilor sexuali.Se dezvolt bine n mediile uzuale (bulion i agar nutritiv) la temperatura optim de 37C. Culturade 24 ore n bulion produce o turbiditate intens, uneori inel la suprafa, iar n culturi mai vechi,depozit abundent, neaderent. Pe suprafaa agarului nutritiv formeaz colonii de 2-6 mm diametru,opace, nepigmentate, uor bombate, de tip S. Culturile degaj miros amoniacal-fecaloid.

Proprietile biochimice cele mai generale sunt fermentarea glucozei, lactozei, trehalozei,manitei, producerea de lizin-decarboxilaz. n aceast privin sunt unele excepii. De exemplu,tulpinile enteroinvazive sunt lactoz i lizindecarboxilaz negative. Aceasta arat c prin metodelecare se aplic curent n laboratoare pentru detectarea E. coli din alimente i ap, unele tulpini rmnnedepistate.

Pe baza structurii antigenice, tulpinile deE. coli s-au mprit n grupe i serotipuri. Grupeles-au format pe baza structurii antigenice somatice. ntre structura antigenic somatic ipatogenitatea tulpinilor pentru om i diferite specii de animale exist relaii strnse, de aceea nlucrrile de diagnostic este suficient determinarea grupei " O " creia aparin tulpinile izolate.Pentru serotipizare, reacia cea mai adecvat este seroaglutinarea, dar pentru identificareaantigenelor fimbriale i " B " se poate aplica i reacia de seroprecipitare n gel.

Habitatul obinuit al E. coli este tubul digestiv al omului i animalelor cu snge cald. Eareprezint microflora dominant a intestinului gros i are un rol important n meninerea uneifiziologii normale a acestuia. Din intestin se elimin n mediul exterior odat cu fecalele prin carese pot contamina solul, apa, alimentele. Supravieuirea ei n mediul exterior este, de regul, de duratscurt, de aceea prezena ei n sol, ap, alimente sau alte produse i obiecte, se interpreteaz ca ocontaminare fecal de dat recent i ca o prezen potenial a unor germeni patogeni.

19


20/36

Este suficient de sensibil la cldur, dar nglobat n substraturi proteice sau grsime poaterezista timp de 1 or la 55C i 15-20 minute la 60C. Din aceast cauz, pentru a fi distrus dinsubstraturile alimentare n care se afl, acestea trebuie tratate termic la nivele mai mari de 60C,prin procedee termice care s fie echivalente cel puin cu cele aplicate pentru pasteurizare: 30minute la 63C n cazul pasteurizrii joase a laptelui, minimum 2-5 secunde n pasteurizarea nalt

a laptelui, n aparate cu plci, 10-15 minute la 68C-70C n cazul diferitelor preparate de carne. Nuse dezvolt i este omort n medii cu 400 ppm nitrit de sodiu sau cu concentraii de clorur desodiu mai mari de 8 %, ca i n produsele lactate fermentate cu pH 5,0 sau mai mic. n brnzeturilela care pH-ul crete ca urmare a dezvoltrii mucegaiurilor ( Camembert), E. coli i reia activitateai se poate multiplica pn la valori de 105-106 celule /1 g produs.

E.coli este sensibil fa de aciunea substanelor desinfectante obinuite n concentraiilefolosite n practica curent, motiv pentru care ea se folosete pentru verificarea eficieneioperaiunilor de splare i desinfecie aplicate n ntreprinderile de industrie alimentar i nadposturile de animale. Antibioticele cele mai active asupra ei sunt streptomicina, cloramfenicolul,aureomicina.

n contrast cu majoritatea bacteriilor Gram pozitive i o parte din cele Gram negative,rezist la aciunea unor colorani i substane care se folosesc obinuit la prepararea unor medii dembogire sau de izolare, cum sunt verdele briliant, verdele malachit, cristalul violet, selenitul,tetrationatul, desoxicolatul, srurile biliare, .a.

GRUPAREA TULPINILOR DEESCHERICHIA COLI

n decursul timpului s-au fcut numeroase ncercri de a pune oarecare ordine nmultitudinea de tulpini de E. coli implicate n producerea diareelor omului i animalelor. Pentruaceasta s-au folosit numeroase criterii la ndemn n etapa dat. Cel mai des s-au folosit criteriilebiochimice i serologice, dar acestea nu au dat satisfacie deplin, mai ales dup acumularea unordate noi i numeroase legate de biologia i structura molecular sau de genetica bacterian. Odat cuacumularea acestor date moderne i cunoaterea mecanismelor moleculare de patogenitate caredifer de la serogrup la serogrup, legate de structura antigenic, multitudinea de tulpini a fostrepartizat n patru grupe principale.I. Grupa de tulpini de Escherichia coli ENTEROPATOGENE = EPEC iEPEC-like, cu urmtoarele proprieti caracteristice:nu produc enterotoxine LT i ST,nu prezint invazivitate de tip " Shigella ",au capacitatea de a se ataa de microvilozitile intestinale i de a le distruge,- nu produc sau produc n cantitate redus, toxine Shiga-like.II. Grupa de tulpini de Escherichia coli ENTEROTOXINOGENE = ETECi ETEC-like, cu urmtoarele proprieti caracteristice:ader de enterocite prin fimbrii ( CFA / l-IV ),produc enterotoxine ST i / sau LT.III. Grupa de tulpini de Escherichia coli ENTEROINVAZIVE = EIEC iEIEC-Iike, cu urmtoarele proprieti caracteristice:- posed plasmid de virulen (= 140 Mda ),- invadeaz i se multiplic n celulele epiteliale intestinale i n culturilecelulare,dau testul Sereny pozitiv ( inoculare conjunctival la cobai),

20


21/36

sunt, de regul, imobile, lactoz negative, lizin decarboxilaz negative. IV. Grupa de tulpini deEscherichia coli ENTEROHEMORAGICE = = EHEC i EHEC-like, cuurmtoarele proprieti caracteristice:produc cantiti mari de toxine Shiga-like,se ataeaz de microvilozitile intestinale i le distrug,

posed plasmid de virulen (= 60 Mda ).Milon susine c siglele EPEC, ETEC, EIEC i EHEC trebuie s fie rezervate tulpinilor deorigine uman. Nomenclatura tulpinilor de E. coli izolate de la animale cu sindroame diareice nueste nc stabilit n privina apartenenei lor la diferite grupe. Totui, n general, tulpinile izolate dela animale au proprieti foarte asemntoare cu tulpinile umane ncadrate n cele patru grupe de maisus. Pentru a marca originea neuman i posedarea unui ansamblu de factori de virulen careevoc una din grupele umane, tulpinile animale se vorclasifica i desemna prin siglele folositepentru grupele umane urmate de cuvntul englez " like " (asemntor cu). Astfel, grupele de tulpinianimale vor fi definite ca EPEC-like, ETEC-like, EIEC-Iike, EHEC-like.

Doyle vorbind despre implicarea tulpinilor patogene deE. coli n producerea toxiinfeciiloralimentare arat rolul purttorilor umani i animali n contaminarea alimentelor i apei potabile.Purttorii umani simptomatici i asimptomatici reprezint rezervorul principal pentru EPEC, EIECi ETEC patogene pentru om. Aceste bacterii sunt prezente n tubul digestiv al purttorilor iexcretate prin fecale. Persoanele purttoare care prelucreaz i manipuleaz alimentele i care au oigien personal precar, contamineaz alimentele n timpul operaiunilor pe care le fac i vin ncontact direct cu acestea. De asemenea, purttorii umani pot contamina cu fecalele lor sursele deap, n mod indirect, prin apele de canal. Apa contaminat pe aceast cale poate infecta directoamenii sau alimentele la splarea crora se folosete. Apele uzate, de scurgere, umane pot deasemenea contamina legumele i cerealele la irigarea sau fertilizarea crora se folosesc.Principalul rezervor pentru EHEC l reprezint bovinele i ntr-o msur mai mic alte specii deanimale. Ele poart aceast bacterie la nivelul tractului intestinal de unde o elimin, odat cufecalele, n mediul ambiant, contaminndu-l. Alimentele crude de origine animal, n specialcarnea, carnea tocat, laptele se contamineaz prin fecale n timpul tierii i mulsului.

ASPECTE GENERALE ALE PATOGENITIIE. COLI

Necunoaterea sau cunoaterea insuficient a mecanismelor de patogenitate ca i lipsa unorcriterii precise n aprecierea patogenitii tulpinilor deE. coli au impus mult timp o rezerv aproapegeneral a specialitilor asupra etiologiei colibacilare a unor toxiinfecii alimentare. Lipsa devirulen sau virulena ndoielnic pentru oarece a tulpinilor izolate din alimentele incriminate ide la bolnavi, au reprezentat de asemenea un argument n plus de a contesta originea colibacilar aacestor mbolnviri. Treptat au nceput s se aduc dovezi c unele tulpini implicate ntoxiinfeciile alimentare produc toxine care, inoculate i.p. la oarece, sunt capabile s-lmbolnveasc i s determine manifestri nete de intoxicaie ca somnolena, apatia, inapetena imoartea dup 20-24 de ore.Mai trziu s-au adus dovezi c patogenitatea altor tulpini este determinat de virulen i decapacitatea de invazie.Unele caractere aleE. colipatogen productoare de toxiinfecii alimentareTabelul 1

21


22/36

Grupa de E.coli

Rezervorulcunoscut sau

presupus

Surse de contaminare aalimentelor

Alimente implicate ntoxiinfeciile alimentare

EPEC omul Prelucrtorii imanipulatorii de alimenteApele de canal

Carnea de porc, apa, nlocuitoride cafea

EIEC omul Brnza Brie, Camembert,salata, apa, conserve deSalmonidae

ETEC omul Brnza Brie, carnea decurc, maioneza, preparatede restaurant, cofetrie,ap

EHEC vacile de lapte i alteanimale

Fecalele de bovine i dealte animale, utilaje,lptarii

Carnea tocat de vit,laptele nepasteurizat,salata

Pentru demonstrarea enteropatogenitii tulpinilor deE. coli se folosesc mai multe metode, din caremenionm:

testul ansei ligaturate, care, se pare, n prezent este cel mai frecvent folosit n laboratoarele cudotare modest,inocularea la oarecii sugari,inocularea culturilor celulare,hemaglutinarea, efectul hemaglutinant fiind determinat de prezena pililor i corelndu-se cuexistena antigenelor fimbriale.Pentru alte proprieti patogene, cu valoare relativ, se folosesc i alte criterii, cum sunt:activitatea hemolitic fa de hematiile de cal, tulpinile patogene fiind, de regul, hemolitice,colicinogenia i colicinosensibilitatea, tulpinile izolate din procese patologice fiind mai descolicinogene dect cele provenite din mediile naturale.Mecanismele patogenitii tulpinilor de E. coliprezentate succint n acest capitol au mai mult o

valoare istoric i explic, n mare msur i n mod simplist, modul de apariie i de manifestare ainfeciilor colibacilare la om i animale i mai puin pe cel al declanrii toxiinfeciilor alimentare.

TIA PRODUSE DE E. COLI DIN GRUPA EPEC

EPIDEMIOLOGIEn anii 1950 episoadele de diaree infantil erau relativ frecvente

TOXIINFECTII ALIMENTARE PRODUSE DE AEROMONAS HYDROPHILA

Documents

Transcript of TOXIINFECTII ALIMENTARE PRODUSE DE AEROMONAS HYDROPHILA