Teku¦çine

44
tike tekućine ne funkcije: a)Zaštita fetusa i dozvoljavanje njegove pok b)Uloga u različitim biohemijskim procesima u slična plazma dijalizatu barem na početku aza-razmjena rastvorenih substanci izmedju fetusa i jena amnionska tekućina-fetus te amnionska tekućina-plazma majke) izmjena volumena tekućine svaka 2-3 sata

description

biochem

Transcript of Teku¦çine

  • Karakteristike tekuine

    Ima osnovne funkcije:

    a)Zatita fetusa i dozvoljavanje njegove pokretnosti

    b)Uloga u razliitim biohemijskim procesima

    Po sastavu slina plazma dijalizatu barem na poetku

    Kasnija faza-razmjena rastvorenih substanci izmedju fetusa i okruenja (razmjena amnionska tekuina-fetus te amnionska tekuina-plazma majke)

    Kompletna izmjena volumena tekuine svaka 2-3 sata

  • Volumen tekuine

    25-50 mL pri 12 nedjelja gestacije

    1100-1500 mL 36 nedjelja gestacije

    Poveana koliina tekuine (hidroamnio) asocira se padom fetalnog gutanja i indicija kongenitalnog defekta

    Smanjena koliina amnionske tekuine-oligohidroamnio se javlja kod Kongenitalnih malformacija

  • SKUPLJANJE TEKUINE

    Transabdominalno ili vaginalno u sklopu pregleda ultrazvukom

    Preferiran ovaj oblik jer vaginalna je asocirana sa poveanim rizikom za infekciju

    Kada raditi amniocentezu!

    14-18 nedjelja starost majke 35 godina ili vie jedan od roditelja ima poznate hromozomalne abnormalnosti ve roeno dijete sa hromozomalnim nedostacima ve roeno dijete sa defektom neuralne cijevi roditelj nosioc metabolike mane povean AFP kod majke

    20-42 nedjelje Ispitivanje fetalnog distresa(Rh ili druga izoimunizacija) Infekcija Ispitivanje zrelosti plua

  • Nain skupljanja:

    Aseptina tehnika ,sterilna igla,aseptino procesuiranje

    Aspiriranje 10-20 ml amnionske tekuine u sterilne epruvete(obino 3) (Razlog kontaminacija krvlju)

    Pakiranje u folijom obloene epruvete (sprijeavanje fotooksidacije bilirubina)

    Transport uzoraka

    elijske kulture, studije na kromozomima-sobna temperaturaAnaliza fosfolipida- +4 stepena,transport na leduOdloen rad-prethodno centrifugiranje uzorakaBrzina: 140 g za elije500 g za fosfolipide1500-2000g za spektrofotometriju

  • Fizikalni pregled tekuine

    1.Boja (bezbojna ili blijedo uta boja)Jaka uta-bilirubinZelena-mekonij(mukusu slian materijal koji nastaje kao posljedica progutane amnionske tekuineI intestinalnih sekreta.Biliverdin je odgovoran za ovu boju.

    2.Zamuenje

    Blago zamuena obino,malo u ranoj trudnoi

  • HEMIJSKI PREGLED TEKUINE

    Kod oekivanja prijevremenog porodaIli poeljan je zbog komplikacija trudnoe

    Evaluacija funkcionalnog statusa plua

    Najee obolenje respiratorni distres sindrom

    Neodgovarajua produkcija surfaktanata na povrini alveola kod novoroeneta

    Korelacija izmeu zrelosti plua i kocentracije fosfolipida u amnionskoj tekuini

    3 tipa fosfolipida se testiraju: lecitin(fosfatidilholin) sfingomijelin fosfatidil glicerol

  • Odnos lecitin/sfingomijelin i fosfatidil glicerol

    Lecitin osnovni surfaktant Sfingomijelin nepoznata uloga

    Do 33 nedjelje fetalni sistem plua producira podjednake koliine i lecitina i Sfingomijelina

    34-36 nedjelja gestacije-koncentracija sfingomijelina opada, a lecitina raste

    L/s odnos bitam

    L/S manji od 2 nezrela pluaVei ili jednak 2 sve u redu

    Fosfatidil glicerol detektabilan iza 35 nedjelje gestacije

    Parametar bitan kod kompliciranih trudnoa(DM)(Trudnice sa DM, LS vei od 2, a nema PGa-znaajan broj djece razvije RDS Ako je prisutan,nema rizikaNaini detekcije: Tankoslojna hromatografija

  • Indeks stabilnosti pjene

    Ispitivanje fizikalnih i funkcionalnih karakteristika tekuine

    Ako su surfaktanti prisutni---stvori se pjena nakon mijeanja sa Etanolom, formiranje stabilnih mjehuria

    esto se koristi(Mijeanje jednakih volumena tenosti sa razliitim volumenima etanola,nakon toga mijeanje)Opseg koncentracija etanola 0,43-0,55

    FSI vei od 0,48 koreliza sa zrelou plua

    Mekonij problem kod interpretacije

  • Test fluorescentne polarizacije

    Mjerenje mikroviskoziteta tekuine Viskoznost proporcionalna koliini prisutnih surfaktanata Rezultat u odnosu na albumin

    Princip detekcije: Fluorofor se pomijea sa amnionskom tekuinom i asocira se sa Albuminima i lipozomima surfaktanata(agregati fosfolipida)Fluorofori sa albuminom nemaju takvu sposobnost rotacije kao oni asociranisa lipozomima surfaktanta

    Princip testa: Koliina emitirane polarizirane fluorescentne svjetlosti je u direktnom odnosuSa sa sastavom surfaktanata prisutnih u amnionskoj tekuini(albumini nepromijenjeni)Albumin interni standard u treem trimestru konmstantno prisutan

    Mjeri se odnosi surfaktant albuminOpseg: 0-160 mg/g.Vrijednosti ispod 40- nezrela pluaVee od 70 zrela pluaAko je niska razina surfakatnata-visoka fluorescentna polarizacijaDanas najbolja procjena: ispitivanje zrelosti plua+ gestacioni period za fetus)Koristiti tehnike filtriranja , ne centrifugiranja(uklanja fosfolipide)

  • Broj lamelarnih tjeeca

    Skladitenje surfaktanta u lamelarnim tjelecimaLue se od 20-24 nedjelje gestacijeTrei trimestar prisutni 50000-200000 po mikrolitru.

    Hematoloki brojai Koliina uzorka 0,5 mL, ne kota puno

    Centrifugiran uzorak-LBC 35000 zrelo, korelacija sa L/S vee od 2,prisustvo PGaKada je LBC ispod, kompletan profil se savjetuje

  • Bilirubin u amnionskoj tekuini

    Prisutan kod hemolize

    Normalan skan tekuine (350-580 nm),prava linija sa padom absornanceBilirubn max 450 nm

    Rast bilrubina, absorbanca na 450 nm rasteVie zonaI-normalni rezultatiII-srednja hemolizaIII-ozbiljna hemoliza

    Uzorci kontaminirani sa krvlju nisu akceptabilni zbog interferenci izazvanihabsorpcijom oksihemoglobina na 412 nm i 540 nm.

    Veliina kontaminacije utvrdjuje se raunanjem razlike u absorpciji na 412 nm.Uzorci sa mekonijumom nisu akceptabilni (apsorbcija 350 i 400nm)Lano niske vrijednosti za bilirubin

  • SINOVIJALNA TEKUINA

  • Predstavlja tekuinu koja ispunjava upljine izmedju zglobovaDobiva se artrocentezom-perkutana procedura punkcije koja se koristiza dobivanje sinovijalne tekuine

    Stvara se ultrafiltracijom plazme preko sinovijalnih membrana i putemSekrecije iz sinoviocita

    Sinoviociti su elije sinovijalne membrane-dva tipa postoje

    Tip koji fagocitira i tip koji lui hijaluronsku kiselinu

    Koncentracije mokrane kiseline i glukoze identine na razini plazme i sinovijalnetekuine

  • Karakteristike normalne sinovijalne tekuineFizikalni pregled

    Ukupni volumen 0,1-3,5 mlBoja blijedo utaBistrina bistarViskoznost visoka-formira lance 3 do 6 cm dugakeNema spontanog stvaranja ugruka

    Hemijski pregled:

    Glukoza kao plazmaMokrana kisleina kao plazmaUkupni proteini 1-3 g/100 mlLaktata 9-33 mg/100mlHijaluronat 0,3-0,4 g/dl

  • Zahtjevi za analizu

    Fizikalni pregled: oko 1 mLBoja, bistrina, viskoznost

    Mikroskopski pregledUkupno 2-5 ml natrijum heparinaCitoloke studije: 5-50 ml natrijum heparina

    Hemijski pregled: 1.3 mL

    Mikrobioloke analize 10 ml

  • Mikroskopski pregled (normalna tekuina):

    Broj eritrocita ispod 2000 elija na mikrolitarBroj leukocita ispod 200Monociti i makrofage 60%Limfociti 30%Neutrofili 10%Kristali nisu prisutni

    Klasifikacija klasinih poremeaja:

    Artritis-neinflamatorni,inflamatorni,septiki, hemoragikiLab.pokazatelji samo aproksimativniSeptiki artritis(prisustvo mikroorganizama)Kristalni sinovitis(prisutni kristali)

  • Klasifikacija sinovijalne tekuine na osnovu nalaza

    Test N NI I S H neinf inf sept hemorag

    Volumen 3,5 > 3,5 >3,5 >3,5Boja bl uta uta bijelouta utozelena crvenosmedjaViskoznost visoka visoka niska niska opadaBroj leukocita 75% >25% Glukoza kao plazma kao plazma manja od plaz manja od pl kao plazmaKultura neg neg neg poz neg

    Obolenja - osteoartritis kristalni sinovitis bakt.infekcija trauma osteohondritis giht,pseudogijt gljivice obol.krvi traumatski artrit reumatoidni artritis mikobakterije tumor neuroartropatija sistemski lupus erith

  • Viskoznost

    Visoka u odnosu na vodu zbog visoke koncentracije hijaluronske kiseline

    Stanje inflamacije: depolimerizacija pod djelovanjem hijaluronidaze-neutrofili

    Kapljica tekuine se posmatra kada se ista izbaci iz epruvete. Stvara se ue 3-6 cm dugako prije razbijanja

    Viskoznost niska kada doe ranije do cijepanja ili se stvore diskretne kapljice Poput vode.

    Stvaranje ugruka

    Spontano stvaranje znai prisustvo fibrinogenaPatoloki procesi uzrokuju oteenje na razini sinovijalne membrane,kontaminacija krvljuRijeenje: dio krvi uvijek dodati antikoagulans natrijum heparijn

  • Mikroskopska ispitivanja-hemacitometar

    Rade se na dobro promijeanoj tekuini

    Zamuena tekuina se mora razrijediti sa fiziolokom tekuinom,nikako sa sretnom kis. (stvaraju se mucinski ugruci sa sietnom kisleinom)

    Uzorci sa visokom viskoznou-dilucija sa puferom za hijalurinidazu- redukcija viskoznosti

    Identifikacija kristala

    Natrijum urat monohidrat-gihtni artritisKalcijum pirofosfat dihidrat-pseudogihtHolesterolhronini reumatoidni artritisHidroksiapatit-artropatije asocirane sa hidroksiapatitomKortikosteroidi-prethodna intraantrikularna injekcija

  • Hemijski pregled sinovijalne tekuine

    Nekorisna analiza koncentracije mokrane kiseline

    Korisna glukoza-procesuiranje uzorka odmah

    Proteini-normalan uzorak koncentracije 33% one iz plazme

    Rast proteina posljedica promjene permeabilnosti sinov.membrane ili posljedica poveane sinteze .

    Poveani proteini samo indikacija inflamatornog procesa- Ne rade se rutinski

    Laktat ?????

    Kulture elija-svjei uzorci

  • Pleuralna, perikardijalna i peritonealna tekuina

    Serozna tekuina-tekuina slina po svom sastavu serumu Ascites-velika akumulacija serozne tekuine u peitonealnojupljini

    Efuzija-akumulacija tekuine u tjelesnoj upljini kao rezultatPatolokih procesaEksudat-efuzija izazvana poveanom permeabilnouKapilara ili smanjenom limfatikom apsorbcijomTransudat-tip efzije izazvan rastom hidrostatskog pritiska ili padom plazmaOnhotskog pritiska

    Paracenteza- perkutana punkcija koja se koristi za uklanjanjetekuine iz tjelesne upljine

  • Organi okrueni adekvatnim upljinama

    Serozne membrane na povrini

    Prostori izmeu membrana ispunjeni tekuinom

    Serozne tekuine stvaraju se ultrafiltracijom plazme u parietalnoj membrani absorpcijom na visceralnoj membrani

    Faktori koji utjeu na stvaranje tekuine:

    1:permeabilnost kapilara2.hidrostatski pritisak u kapilarama3.onhotski pritisak(proteini)4.apsorbcija putem limfe

  • Hidrostatski pritisak stvaranje plazma ultrafiltrata u upljini

    Plazma proeini se suprotstavljaju ovome

    Regulacija brzine stvaranja ultrafiltrata-permeabilnost endotela kapilara

    Uloga limfe-uklanja tekuinu iz upljine putem apsobcije

    Paracenteza=perkutana punkcija tjelesne upljine koja slui za aspiraciju tekuine

    Toracenteza-hirurki zahvat (punkcija u pleuralnu upljinu-pleuralna tekuina)

    Peritoneocenteza(abdominalna paracenteza)-za skupljanje peritonealne i perikardijalne tekuine

    ASCITES-efuzija peritonealne upljine

  • ANALIZA SEROZNIH TEKUINA

    Fizikalni pregled: izgled,boja

    Mikroskopski: citologija 25-50 ml natrijum heparin 10-20 ml EDTADiferencirano brojanje elija: 5-8 ml EDTA ili natrij heparin

    Hemijski pregled: glukoza (3-5 ml puna krv) proteini,LDH, amilaza, trigliceridi,drugi pH pleuralne tekuine ( 1-3 ml heparin)

    Mikrobioloki: Gram i acd fast sojevi( 10-20 ml natrijum heparina)

  • KLASIFIKACIJA EFUZIJATransudati-izaziva ih obino sistemsko obolenje,neinflamatorni karakter,

    Eksudati-posljedica inflamatornog procesa

  • Parametar Transudati Eksudati

    Uzrok rast k-pritiska rast kap.permeab. pad onh.pr pad limfatike aps.

    Fiz.pregled bistar,blijedo ut zamuen,varira

    SPONTANO GRUANJE NE VARIRA,ESTO DA

    Mikroskopski pregled

    Leukociti ispod 1000 pleuralna vie od 1000-pleural

    ispod 300 peritonealna vie od 500 periton dominiraju mononuklearne neutrofili dominirajuHemijski pregled

    Glukoza isto kao serum manja ili ista kao seProteini manji od 50% serum vei od 50% serumOdnos ukupni pr/tek:serum manje od 0,5 vie od 0,5LDH manje od 60% serum vie od 60% serunOdnos enzim tekuina/serum manji od 0,6 vei od 0,6

  • Lights Kriteriji za eksudateTekuina je eksudat ako zadovoljava jedan od tri kriterija : 1. Pleural tenost LDH/serum LDH > 0.62. Pleuralna tenost/serum protein > 0.53. Pleuralna tenost LDH > gornji limit normalne serum LDHAko su sva tri negativna, tekuina je transudat.

  • UZROCI NASTANKA TEKUINA

    Pleuralni Perikardijalni Peritonelani

    Transudati

    Pad krv tlaka infekcije pad hidrost.pr Kongestivno obolenje srca infarkt miokarda,aneurizme pad onh.pr

    Pad onh.pritiska neoplazme(kancer metastaze) hepatalna cirozaHepatalna ciroza hemoragija.trauma, terpija nefrotski sindrom antikoagulansimaNefrotski sindrom

  • EKSUDATI

    Pleuralni perikardijalni peritonelani

    Poveana permeabilnost sistemska obolenja pove.kap.permeabInfekcije sistemski lupus infekcijeNeoplazme(plua, metastatski) reumatoidni artritis neoplazme(jetra)Sistemska oboleja pankreatitiGI obolenja(pankreatit) uremija

    Smanjena limfatika apsorbcija smanjena limfatika apsorbcijaNeoplazme(limfom) neoplazme(limfom)Trauma traumahirururki zahvat tuberkuloza

  • Vrijednost hemijskih testova

    Amilaza-amilaza serozne tekuine 1,5-2 puta va od one seruma je indicijaPatologijeEfuzije-pankreatit, ruptura ezofagusa, metastaska obolenja

    Trigliceridi-efuzije sa hilusom neoplazmePrisutni hilomikroni

    pH

    Abnormalno niske pH vrijednosti za efuzije parapneumonia

    pH 7,3 karakteristian

    pH manji od ovog, mora se raditi drenaa uz terapiju antibioticima

    Ve od 7,3 samo je dovoljno dati antibiotike

    CEA-CEA+citologija-identifikacija malihnih efuzija

  • CEREBROSPINALNA TEKUINAKupa mozak i kimenu modinu

    Selektivna sekrecija iz plazme,nije ultrafiltrat

    Ukupni volumen tekuine 85-150 ml

    Neonatusi- (10-60ml )

    Uloge:titi mozak i kimenu modinu slui za transport i razmjenu hranjljivih sastojaka

    Hemijske analize od pomoi: glukoza,proteini, laktat

    Uzorak.- Punkcija izmeu treeg i etvrtog lumbalnog meuprostora

    Uz kontrolu pritiska 20 ml se moe izvui

  • Indikacije i kontraindikacije za lumbalnu punkcijuIndikacije

    Infekcije-meningitis encefalitis absces mozga

    Krvarenja-subarahnoidno intracerebralnoNeuroloka oboleja-multipla skleroza Guiilan-Barr sindrom

    Maligniteti: Leukemija,limfom.kancer sa metastazamaTumor: mozak,kimena modinaTretmani: Hemoterapija, anestetici, radiografski kontrasti, terapija antibioticima

    Kontraindikacije: Septicemija, Sstemske infekcije, Lokalizirana lumbalna infekcija

  • Temperatura procesuiranja.

    Hemijski pregled epruveta 1 -15 do 30 stupnjeva

    Mikrobioloke analize epruveta 2 19-26 stupnjeva

    Citologija-epruveta 3 2-8 supnjeva

  • Fizikalni pregled

    Bistra, bezbojna tekuina, slina viskoznost vode

    Povean viskozitet-adenokarcinomi(mucin luei tumori)

    Stvara ugruke, prisustvo fibrinogena(kompromitovana barijera)

    Najei uzrok trauma ili rast proteina u likvoru(Froin sindrom)., tuberklozni meningitis

    Pleocitoza-rast broja elija u likvoruZamuenje likvora:

    Leukociti vie od 200 elija/ulEritrociti vie od 400 elija/ulMikroorganizmi, rasts proteina-zamuen uzorak

  • Ksantohromija- asocira se sa boleu

    uta boja likvora, ali i ljubiasta,naranasta,.utaPink supernanatant-oksHbuti-bilirubinNaranasti-mjeavina ova dvaBraun.svaranej methemoglobina

    Uzroci ksantohromije:

    Hemoragija, subarahnoidna ili intracerebralnaHiperbilirubinmijaVisok karoten ili proteini vei od 150 mg/100 ml uzrok ksantohromijeMeningealni melanomNormalan neonatustrauma

  • Uzroci pleocitozeDomintan tip elija uzroci infekcije neinfektivni uzroci

    Neutrofili meningitis hemoragija bakterijski subarahnoidni rani vrusni,tuberkulozni intracerebralni

    cerebralni apsces

    Limfociti meningitis multipla skleroza sve vrste zloupotreba lijekova

    infekcije parazitima

    Plazma elije tuberkuloza i sifilisni meningitis isto kao gore

    Eozonofili infekcije paraziti,gljivice alergijske reak

  • Makrofage Tuberkulozni meningitis absces mozga Fungalni kontuzija infarkt kontaminacija krvi nakon punkcije intratekalni lijekovi iradijacija mozga

    Maligne elije leukemija limfomTumorske elije tumori CNS-a meduloblastomi karcinom sa metastazama

  • HEMIJSKI PREGLED

    Proteini

    80 % porijeklo transport plazma proteina kroz endotel kapilaraOstatak-intratekalna sinteza

    Koncentriranje likvora pa elektroforeza(80-100puta)

    Frakcije: transtiretin(prealbumin), albumin+ transferin Ig takoer

    Ukupni proteini-starost individue+ mjesto uzimanja uzorka Vee koncentracije iz lumbalng dijelaUkupni proteini-150-450 mg/L

    vani za utvrivanje Integriteta membrane,indicija patolokih procesa na nivou CNS-a

  • Rast koncentracije:

    1.Kontaminacija uzoraka sa perifernom krvlju u toku punkcije

    2.Primjene na nivou razmjene(kapilare)

    3.smanjen reapsorbcija u vensku krv

    4.poveana sinteza u CNS-u

    Pad koncentracije:

    1.Poveana reapsorbcija kroz arahnoidne viluse,rast intrakranijalnog tlaka

    2.Gubitak tekuine uzrokovan traumom ili invazivnim procedurama

    Odreivanje: dominiraju turbidimetrijske metode

  • Albumin

    Sav albumin u CSF-u je rezultat prolaska preko km barijereReferentni protein za utvrdjivanje permeabilnosti barijere

    CSF/serum albumin indeks= Albumin CSF (mg/100 ml)/ albumin serum g /100 ml)

    Odnos manji od 9 je normalan9-14 minimalno oteenje membrane15 do 100 srednje do ozbiljno oteenje barijereVee od 1oo-slom barijere

    IgGNormalno prisutan u malim koliinamaPatoloka stanja-poveana sinteza u CNSu,povean transport iz plazmeCSF IgG indeks=IgG CSF(mg/dl) x albumin serum g/dL / I gG serum x albumin CSF

  • Nefelometrija

    Tipina vrijednost za indeks= 0,30-0,70

    Vee vrijednosti-vea intratekalna sinteza

    Manje vrijednosti-kompromitirana barijera90 % pacijenta sa multiplom sklerozom indeks vei od 0,70-osjetljiv pokazatelj

    Druga obolenja mogu takoe uzrokovati promjene ovog indeksa

    Rezultati elektroforeze

    Transiretin,albumin, 2 zone transferina,blage zone alfa 1 antitripsina i IgG

    Drugi transferin tau-beta 2 region,sinteza CNS

    Difrencijacija rinoreje od otoreje(isputanje likvora kroz nos ili ui)

  • Detekcija oligoklonalnih zona u gama regiji

    Prisustvo u CSF-u, bez prisustva u serumu-indicija MS-aNema korelacije sa fazom bolesti niti progresijom

    Druga obolenja: neurosigfilis, bakterijski meningitis,,virusni meningitis

    Mijelin bazini protein

    Mijelin-okruuje aksone i

    30% sastavljeno od proteina,jedan MBP

    MS-degradacija mijelnskih nizova, oslobaanje proteina u CSF-RIA

    Korsiti se praenje toka bolesti MS

  • Glukoza

    CSF plazma glukoza omjer= 0,6

    Rast glukoze CSF-nema vei znaaj

    Pad (ispod 40 mg/dl)-hipoglikemina stanja,meningitis, infiltracija sa metatatskimIli primarnim tumorima

    Uzroci:

    Defektivan transport du membrane

    Poveana glikoliza u CSFLaktat

    Povean hipoksija ili smanjena oksigenacija mozga(Hemoragija, hidrocefalus,cerebralna arterioskleroza, traumatsko oteenje mozga ,Edem, meningitis)

    Virusni meningitis-25-30 mg/dl,sve druge forme vie of 35 mg/dl

    *Voda i rastvarai se razmjenjuju izmeu fetusa i medija preko mehanizama: Criejvne apsorbcije nakon gutanja od amnionske tekuine od strane samog fetusa2)kapilarne razmjene na nivou plunog sistema i preko fetalnog uriniranja..U ranoj fazi gestacije transudat prolazi kroz kou fetusa i malo doprinosi volumenu tekuine.Zbog fetalne respiracije in utero,fetalni pulmonarni surfaktanti koje proizvode elije alveolarnog epitelija fetalnih plua se miejaju i mogu biti evaluirani iz amnionske tekuine.U kasnijoj fazi trudnoe .voda i elektroliti iz fetusa bivaju zamjenjeni sa metabolikim produktima tipa ureje i kreatinina i mokrane kisleine.