1Pekerti

Sub Pokok bahasanSub Pokok bahasan

2Pekerti

1. Prinsip kerja alat

2. Manfaat

3. Komponen

4. Kromatogram

5. Keunggulan KCKT

Prinsip kerja alatPrinsip kerja alat

KCKT adalah alat untuk memisahkan campuran zat sekaligus untuk menetapkan kadarnya

Prinsip pemisahan berdasarkan perbedaan polaritas

Alat pemisahan tercanggih dan terpopuler pada 20 tahun terakhir

3Pekerti

Manfaat Manfaat

4Pekerti

Komponen Komponen

5Pekerti

Tempat injeksi (Injection valve)

Tempat injeksi (Injection valve)

Load system

6Pekerti

Fase diam (stationary phase /

column)

Fase diam (stationary phase /

column)Macam: Fase normal

contoh: porous silica Fase terbalik (RP)

contoh: C18 Lichrospher

7Pekerti

Guard column

Penggantian kolomPenggantian kolom

Kinerja sudah jelek, menghasilkan data yang tidak valid

Nilai pemisahan (resolusi) < 2

8Pekerti

9KCKT 2010

Ukuran partikel fase diamUkuran partikel fase diam

Fase gerak (mobile phase)Fase gerak (mobile phase)Solvent Index

PolarityEluotropic Values UV Cut

off (nm)Alumina C18 Silica

Hexane 0,1 0,01 - 0,00 195

Cyclohexane 0,2 0,04 - - 200

Toluene 2,4 0,29 - 0,22 284

Tetrahydrofuram 4,0 0,45 3,7 0,53 212

Chloroform 4,1 0,40 - 0,26 245

Ethyl acetate 4,4 0,58 - 0,48 256

Acetone 5,1 0,56 8,8 0,53 330

Methanol 5,1 0,95 1,0 0,7 205

Acetonitrile 5,8 0,65 3,1 0,52 190

Dimetilformamide 6,4 - 7,6 - 268

Dimethylsulfoxide 7,2 0,62 - - 268

Water 10,2 - - - 190 10Snyder dkk., 1997

Kecepatan alir (flow rate)

Pekerti 11

It is important to use the correct flow rate for your KCKT column

Tehnik elusi1. Isokratik

komposisi dan kecepatan alir fase gerak tetap selama proses analisis

2. Gradien

komposisi dan kecepatan alir fase gerak dapat dirubah selama proses analisis

Pekerti 12

kromatogramkromatogram

13Pekerti

Tipe kromatogramTipe kromatogram

14Pekerti

X

√

Optimasi

Pekerti 15

Keunggulan KCKT

16 Pekerti

Literatur

Ahuja,S.and Dong,M.W.,2005, Handbook of Pharmaceutical Analysis by HPLC, volume 6, Separation Science and Technology, Elsevier Academic Press, Amsterdam.

Snyder, L.R., Kirkland, J.J., and Glajch, 1997, Practical HPLC Method Development, Second Edition, John

Wiley & Sons Inc., New York.

18Pekerti

TERIMA KASIH

DEMIKIAN,