GENSKA TEHNOLOGIJA - Vedežvedez.dzs.si/datoteke/genetika4.pdf · GENSKA TEHNOLOGIJA 4 Delovanje...

8
GENSKA TEHNOLOGIJA 1 Pridobivanje človeškega inzulina s pomočjo transgenih bakterij. Iz človeške celice izoliramo gen za inzulin in ga vstavimo v plazmid, ki smo ga prej izolirali iz bakterije in mu vstavili marker (npr. gen za rezistenco na določen antibiotik). Marker potrebujemo zato, da prepoznamo bakterije, ki so rekombinantni plazmid sprejele. Gensko spremenjene bakterije gojimo v fermentorjih. Bakterije izdelujejo človeški inzulin in ga izločajo v medij. Po določenem času medij prefiltriramo in iz njega izoliramo inzulin.

Transcript of GENSKA TEHNOLOGIJA - Vedežvedez.dzs.si/datoteke/genetika4.pdf · GENSKA TEHNOLOGIJA 4 Delovanje...

Page 1: GENSKA TEHNOLOGIJA - Vedežvedez.dzs.si/datoteke/genetika4.pdf · GENSKA TEHNOLOGIJA 4 Delovanje restrikcijskih encimov. V prikazanem primeru restriktaza Eco R1 prekine verigo DNK,

GENSKA TEHNOLOGIJA

1

Pridobivanje človeškega inzulina s pomočjo transgenihbakterij. Iz človeške celice izoliramo gen za inzulin in gavstavimo v plazmid, ki smo ga prej izolirali iz bakterijein mu vstavili marker (npr. gen za rezistenco na določenantibiotik). Marker potrebujemo zato, da prepoznamobakterije, ki so rekombinantni plazmid sprejele. Genskospremenjene bakterije gojimo v fermentorjih. Bakterijeizdelujejo človeški inzulin in ga izločajo v medij. Podoločenem času medij prefiltriramo in iz njegaizoliramo inzulin.

Page 2: GENSKA TEHNOLOGIJA - Vedežvedez.dzs.si/datoteke/genetika4.pdf · GENSKA TEHNOLOGIJA 4 Delovanje restrikcijskih encimov. V prikazanem primeru restriktaza Eco R1 prekine verigo DNK,

GENSKA TEHNOLOGIJA

2

Izdelava gensko spremenjene rastline, odporne (rezistentne) na herbicid.

Page 3: GENSKA TEHNOLOGIJA - Vedežvedez.dzs.si/datoteke/genetika4.pdf · GENSKA TEHNOLOGIJA 4 Delovanje restrikcijskih encimov. V prikazanem primeru restriktaza Eco R1 prekine verigo DNK,

GENSKA TEHNOLOGIJA

3

Izdelava FlavrSavr paradižnika.Levi del slike prikazuje običajno pot sinteze encima. Kodogena veriga DNK se prepiše, nastane mRNK in ponjeni informaciji encim.Desni del slike (v kombinaciji z levim) pa prikazuje pot, ki so jo ubrali genski inženirji. Poleg gena, ki kodiraencim poligalakturonazo, so vstavili »obrnjeni« gen, na podlagi katerega je nastala »obrnjena« mRNK. Ker sehkrati prepisujeta oba gena, nastajata hkrati tudi obe mRNK. Ker sta komplementarni, se lahko povežeta vdvoverižno RNK, ki pa se ne more prevesti in zato encim ne nastane.

Page 4: GENSKA TEHNOLOGIJA - Vedežvedez.dzs.si/datoteke/genetika4.pdf · GENSKA TEHNOLOGIJA 4 Delovanje restrikcijskih encimov. V prikazanem primeru restriktaza Eco R1 prekine verigo DNK,

GENSKA TEHNOLOGIJA

4

Delovanje restrikcijskih encimov.V prikazanem primeru restriktaza Eco R1 prekine verigo DNK, kadarkoli naleti na zaporedje TTAA. Prekine na spuščico označenih mestih: …GTTAA→ C in C→AATTG … Na prekinjenih mestih ostanejo kratki, enoverižnikonci, ki jim rečemo »lepljivi« konci.

Page 5: GENSKA TEHNOLOGIJA - Vedežvedez.dzs.si/datoteke/genetika4.pdf · GENSKA TEHNOLOGIJA 4 Delovanje restrikcijskih encimov. V prikazanem primeru restriktaza Eco R1 prekine verigo DNK,

bakterijski plazmid

človeški kromosom

gen za inzulin

Z istim encimom iz kromosoma izrežemo gen za inzulin in razpremo plazmid.

Zaradi komplementarnihlepljivih koncev lahko združimo gen in plazmid.

plazmid

gen za inzulin

plazmidnainformacija

celičnainformacija

Razrez z istim encimom.

Zaradi lepljivihkoncev se informacije lahko združijo.

Zlepljenje z ligazo.

GENSKA TEHNOLOGIJA

5

Izdelava rekombinantne DNK.Bakterijski plazmid in človeški kromosom, ki vsebuje gen za inzulin, razrežemo z istim restrikcijskim encimom.Tako dobimo DNK, ki ima enake »lepljive« konce ne glede na izvor. V razklenjeni plazmid vstavimo gen zainzulin. Lepljiva konca plazmida in gena za inzulin sta komplementarna, zato ju DNK-ligaza lahko poveže.

Page 6: GENSKA TEHNOLOGIJA - Vedežvedez.dzs.si/datoteke/genetika4.pdf · GENSKA TEHNOLOGIJA 4 Delovanje restrikcijskih encimov. V prikazanem primeru restriktaza Eco R1 prekine verigo DNK,

GENSKA TEHNOLOGIJA

6

Pomnoževanje DNK s pomočjo bakterij

Page 7: GENSKA TEHNOLOGIJA - Vedežvedez.dzs.si/datoteke/genetika4.pdf · GENSKA TEHNOLOGIJA 4 Delovanje restrikcijskih encimov. V prikazanem primeru restriktaza Eco R1 prekine verigo DNK,

GENSKA TEHNOLOGIJA

7

Reproduktivno in terapevtsko kloniranje

Page 8: GENSKA TEHNOLOGIJA - Vedežvedez.dzs.si/datoteke/genetika4.pdf · GENSKA TEHNOLOGIJA 4 Delovanje restrikcijskih encimov. V prikazanem primeru restriktaza Eco R1 prekine verigo DNK,

GENSKA TEHNOLOGIJA

8

Kloniranje ovce Dolly