03_Structura_celulei
-
Upload
cezar-iulian-balan -
Category
Documents
-
view
221 -
download
3
description
Transcript of 03_Structura_celulei
-
1Celula unitatea vie fundamental a oricrui organism
ca ntregul organism celula exprim caracteristicile de baz ale vieii folosete nutrienii din mediu pt a obine energie
poate crete; se poate reproduce
rspunde la stimulii din mediu lumin
cldur/frig
substane chimice
poate suferi mutaii genetice supravieuire
apariie de noi specii etc.
Celula prima form de via de pe Pmnt
celula primitiv asemntoare cu cele mai simple bacterii de azi
celula fr sistemul complex de membrane procariot
celula cu membran nuclear i reticul endoplasmic eucariot
virusurile evoluie regresiv cteva gene protejate de un nveli proteic
fr/puine enzime proprii
depind de metabolismul energetic al celulei gazd Perete rigid absent; Fr perete rigid prezent
AbsentMicare amoeboid
Facultative (cili sau flageli)Facultative (cili)Organe de locomoie
PrezenteAbsenteMitocondrii
Prezent, organizare caracteristicAbsent; mezozomiReticul endoplasmic
PrezeniAbseniCureni citoplasmatici
FrecventRar i de tip particularnmulire sexuat
Indirect (mitoz sau cariokinez)Direct (amitoz)Diviziune
> 1, nr. constant pentru specieUnic, molecul circular ADN, haploid
Cromozom
PrezentAbsentMembrana nuclear
Tipic, cu nucleolPrimitiv, netipic (nucleoid)Nucleu
Rigid: chitin (fungi), celuloz (alge verzi, plante superioare), absent (celule animale)
Rigid: mucocomplexPerete celular
Fungi, alge verzi, protozoare, plante, animale superioare
Bacterii., Alge albastreOrganisme
Celula eucariotCelula procariot
Celula n medicin
important cunoaterea structurii i nelegerea diferenelor de structur i metabolism a diferitelor tipuri de celule
diferitelor categorii de microorganisme
explicarea fenomenelor patologiceexplicarea efectelor terapiei medicamentoase
chemoterapia distruge microorganismelechemoterapia nu distruge celula uman sntoas
microorganisme
celulare
PROCARIOTE
archaea
bacteria
cyanobacteria
EUCARIOTE
algae
protozoa
fungi
acelulare
viroizi
prioni
virusuri
-
2EUCARIOTE
PROCARIOTESTRUCTURA I MORFOLOGIA FUNGILOR
I PROTOZOARELOR
EUCARIOTE EU adevrat
CARYO nucleu ADN-ul celular este
nconjurat de membran nuclear
Dimensiuni 10-30 m de 10 ori mai
mari dect
celula procariot
A typical eucaryotic animal cell. ( BJ, Wood DL: Memmlers The Human Body in Health and Disease, 9th ed. Philadelphia, Lippincott Williams & Wilkins, 2000.)
Cross-section through a yeast cell, showing the nucleus (N) with nuclear pores (P), mitochondrion (M), and vacuole (V). The cytoplasm is surrounded by the cell membrane. The thick outer portion is the cell wall. (Lechavalier HA, Pramer D:The Microbes. Philadelphia, JB Lippincott, 1970.)
EUCARIOTE membrana celulara membrana celular=membrana plasmatic=membran citoplasmic
mozaic format din proteine i fosfolipide
structur i funcie similar tuturor membranelor prezente n celulele eucariote
Rol separ componentele celulei de mediul extern
regleaz schimburile dintre celul i mediul extern (permeabilitate selectiv)
EUCARIOTE - nucleul comanda central a celulei
unific, controleaz i integreaz funciile celulei
are 3 componente:
membran nuclear strbtut de pori prin care pot trece molecule relativ mari
nucleoplasm matrice gelatinoas, tip de protoplasm
EUCARIOTE - nucleul cromozomi
suspendai n nucleoplasm
molecule liniare de ADN i proteine
genele localizate de-a lungul moleculei de ADN (genom=genotip)
codific proteine
rARN sintetizat n nucleol intr n compoziia ribozomilor
tARN
caracteristice pt fiecare specie:
numrul i compoziia cromozomilor
numrul genelor de pe fiecare cromozom
-
3EUCARIOTE citoplasma (citosol) semifluid, gelatinoas
conine: granule de stocare
reticul endoplasmic
ribozomi
complex Golgi
mitocondrii
lizozomi, etc.
aici au loc majoritatea reaciilor metabolice
EUCARIOTE reticul endoplasmic sistem de membrane interconectate i aranjate s
formeze un sistem de transport alctuit din: tubuli
saci plai
ME: reticul endoplasmic rugos ribozomi ataai de partea
extern a membranelor
reticul endoplasmic neted nu are ribozomi ataai
EUCARIOTE - ribozomi 18-22 nm alctuii din ARN ribozomal i proteine
rol n sinteza proteinelor eseniale
aglomerri de ribozomi poliribozomi (polisomi) legai printr-o molecul de mARN.
fiecare ribozom alctuit din: subunitate mare 60S
subunitate mic 40S
produi n nucleol transportai n citoplasm legai prin mARN iniiaz sinteza de proteine
unii ribozomi de 80S
EUCARIOTE - ribozomi majoritatea proteinelor eliberate de reticolul
endoplasmatic nu sunt mature trec n complexul Golgi maturare exercitarea funciei caracteristice.
S unitate Svedberg
40S, 60S, 80S coeficieni de sedimentare
Dr. Usanee Anukool, CMB-AMS, CMU
EUCARIOTE complex Golgi comunic cu reticolul endoplasmic
completeaz transformarea proteinelor nou formate n proteine mature, funcionale i mpachetarea lor n vezicule: depozitate n celul
excretate din celul exocitoz/secreie
EUCARIOTE lizozomi si peroxizomi lizozomi:
vezicule mici derivate din complexul Golgi
1 m conin lizozim i enzime digestive
descompun materialul strin ptruns n celul fagocitoz
intervin i n distrugerea celulelor deteriorate autoliz
peroxizomi vezicule ncojurate de mebran unde se produce i se
descompune H2O2 n H2O i O2.
conin catalaz
prezeni n aproape toate celulele eucariote
predomin n hepatocitul mamiferelor
-
4EUCARIOTE - mitocondria fabrica de energie
0,5 1 m; lungime 7 m aici are loc respiraia celular sinteza moleculelor de ATP
nr. mitocondrii / celul variaz
! Mitocondria i cloroplastul provin din bacterii care au convieuit cu celule eucariote
EUCARIOTE - plastid la celulele plantelor
organit n care se produce energie
structuri inconjurate de membran
conin pigmeni fotosintetici
sediul fotosintezei conversia energiei luminoase n energie chimic CO2 i H2O carbohidrai i oxigen
energie luminoas
energie stocat n leg.chimice
EUCARIOTE - plastid
cloroplast un tip de plastid
conine pigment fotosintetic verde clorofil prezent n:
celulele plantelor algelor
EUCARIOTE - citoschelet sistem de fibre alctuit din:
microtubuli concavi, subiri, formi din subuniti proteice = tubulin
microfilamente de actin
filamente intermediare
rol: structural: rigiditate, form
diviziune celular
contractilitate
motilitate etc.
EUCARIOTE perete celular structur simpl
celuloz n alge, plante
pectin
lignin
chitin fungi, exoschelet crabi, exoschelet crbu
sruri minerale n alge
rol: rigiditate
form
protecie
EUCARIOTE flageli organite de locomoie
celula eucariot imobil
mobil spermatozoid
protozoare flagelate
1 sau mai muli / celul
imprim micare de rsucire
-
5EUCARIOTE cili organite de locomoie
n raport cu flagelii sunt mai: muli
scuri
subiri
celula eucariot mobil prin cili celule ale organismului uman: celula ciliat tract respirator
protozoare ciliate
imprim micare coordonat, ritmic
Structura i morfologia celulei bacteriene
PROCARIOTE de 10 ori mai mic fa de celula eucariot
structur simpl citoplasma
1 cromozom
ribozomi
alte particule
nu are sistem de mebrane interne
membrana citoplasmatic
perete celular
capsul, flageli, pili, spor
PROCARIOTE
elemente obligatorii membrana citoplasmatic
citoplasma
material nuclear
perete
elemente facultative
PROCARIOTE
elemente obligatorii perete
membrana citoplasmatic
citoplasma
material nuclear
elemente facultative capsul
flageli
pili
spor
PROCARIOTE perete bacterian
Grosime 15 35 nm; alctuit din proteine, lipide, hidrai de carbon
Format din:
- strat bazal= mucopeptid = mucocomplex = peptidoglican = murein
* reea - macromolecule lungi, polizaharidice paralele
Acid N-acetilmuramic
N-acetilglucozamina (! Lizozim)
- legate prin puni transversale polipeptidice Tetrapeptid D i L-aminoacizi ataat la acidul N-acetilmuramic
Pentapeptid puni ntre tetrapeptide (!penicilina)
-
6STRUCTURA PEPTIDOGLICANULUI PROCARIOTE perete bacterian
- stratul structurilor speciale:
bacterii Gram-pozitive (20%) polizaharide, acizi teichoici, MPZ
bacterii Gram-negative (80%) lipopolizaharide = endotoxine + lipoproteine
(complex glucido-lipido-polipeptidic)
bacterii acido-alcoolo-rezistente acid micolic, ceruri, proteine GM mic
Bacterial cell walls. (A) A portion of the Gram-positive bacterium, Bacillus fastidious;note the cell walls thick peptidoglycan layer, beneath which can be seen the cell membrane.(B) The Gram-negative bacterium, Enterobacter aerogenes; both the cell membrane andthe outer membrane are visible along some sections of the cell wall. (A: Volk WA, et al.:Essentials of Medical Microbiology, 5th ed. Philadelphia, Lippincott-Raven, 1996.)
PROCARIOTE perete bacterian rolul peretelui bacterian
susine mecanic celula bacterian menine forma bacteriei asigur protecia celulei bacteriene intervine n procesele de osmoz i difuziune este sediul
unor antigene somatice receptorilor specifici pentru bacteriofagi
particip la diviziunea bacteriei imprim caracterele de tinctorialitate ale
celulei bacteriene
-
7COLORAIA GRAM
PROCARIOTE membrana citoplasmatica
structur similar cu cea a eucariotelorflexibil, foarte subire, vizibil la MEalctuit dup modelul mozaicului fluid:
dou straturi de molecule fosfolipidice cu extremitile hidrofobe spre interior i cu cele hidrofile spre exteriorntre moleculele de fosfolipide se gsesc proteine
Invaginare - mezozomi: sistem membranos intracelular cu rol n respiraie, diviziune etc.
PROCARIOTE membrana citoplasmatica
Rolul membranei citoplasmatice:
regleaz presiunea osmotic
controleaz procesele de difuzie pasiv
controleaz procesele de difuzie catalizate enzimatic
conine enzime ale metabolismului respirator
intervine n creterea i diviziunea bacteriei
este locul de sintez al endotoxinelor
PROCARIOTE citoplasma sistem coloidal complex: proteine, glucide, lipide, ap,
minerale
structur granular:
ribozomi 15 nm; izolai sau ca reticul endoplasmatic; rol esenial n biosinteza proteinelor celulare
granulaii de volutin (corpusculi Babe-Ernst, granulaii metacromatice) polimetafosfai
granulaii (incluzii) de glicogen, amidon, lipide etc.
vacuole conin diferite substane n soluii nvelite de membran lipoproteic = tonoplast
conine mari cantiti de ARN citoplasma intens bazofil
PROCARIOTE material nuclear
nu este delimitat de o membran difereniat
nu are nucleosol
alctuit dintr-un unic cromozom haploid
format dintr-o unic molecul de ADN dublu helicat, nchis circular
coordoneaz toat activitatea celulei
capabil de autoreplicare
diviziunea nucleului precede diviziunea citoplasmei i a peretelui - bacterii cu 2-4 nuclei ce apar ca gheme (sculuri) de forme diferite ocupnd cam 1/10 din volumul bacteriei = bacterii pe cale de diviziune
PROCARIOTE material nuclear
cromozomul bacterian are 850 6500 gene codificante pt: enzime
proteine
rARN
tARN
-
8PROCARIOTE material nuclear extracromosomal
plasmide molecule mici de ADN dc, circular
libere n citoplasm / integrate n cromozom
conin 10 sute de gene
prezente n celula fungic
celula bacterian
1 plasmid
multiple copii ale aceluiai plasmid
mai multe tipuri de plasmide
atenie!! plastid
organit citoplasmatic prezent n unele celule eucariote alge, plante
sediul fotosintezei
plasmid mic molecul de ADN extracromozomal
prezente n majoritatea bacteriilor
PROCARIOTE capsula
capsul substan gelatinoas, mucoid la exteriorul celulei
bacteriene, bine delimitat, vizibil la microscop
microcapsul (slime layer; glycocalix) substan gelatinoas, mucoid la exteriorul celulei
bacteriene, n strat subire, evideniabil doar prin metode chimice
PROCARIOTE capsula
se formeaz n organismul gazd pe medii n condiii optime colonii M lucioase, mucoase, confluente
compoziie n funcie de specie n general polizaharide polipeptide Bacillus anthracis
substane capsulare diferite chimic la aceeai specie tulpini diferite difereniere serologic
PROCARIOTE capsula
ROL: asociat cu patogenitatea tulpinii - factor al virulenei
protector fa de factori nocivi (fagocitoza, desicaia)
de adezin (permite aderarea unor bacterii)
barier protectoare fa de bacteriofagi
conine substane cu specificitate antigenic de specie sau de tip (ag. K)
PROCARIOTE capsula
EVIDENIERE:
coloraie negativ cu tu de China, colargol
coloraii speciale (Hiss)
reacia de umflare a capsulei (Neufeld) cu seruri
polivalente i monovalente anti-capsulare
-
9Coloraia MANEVAL pentru capsul Coloraia MANEVAL pentru capsul corpul bacterian n corpul bacterian n rou, materialul capsular clar (necoloratrou, materialul capsular clar (necolorat))
Streptococcus pneumoniae (x 1000)
Klebsiella pneumoniae (x 1000)
Capsula bacterian Capsula bacterian coloraie negativcoloraie negativ
Streptococcus pneumoniae
Capsule stain. The capsule stain is an example of a negative staining technique.The bacterial cells and the background stain, but the capsules do not. The capsules are seenas unstained halos around the bacterial cells.
PROCARIOTE flageli
organe de locomoie
subiri, fine, alungite, neramificate, flexibile, sinuoase
alctuii din flagelin protein complex similar cu miozina muscular
reprezint antigenul flagelar H
pornesc din citoplasma bacteriei, din corpusculul bazal
PROCARIOTE flageli1. Corpuscul bazal
situat n citoplasm imediat sub membrana citoplasmatic
alctuit din 2 discuri M i P la bacterii
Gram-pozitive
4 discuri M, S, P, L la bacterii Gram-negative
2. Crlig
3. Filament flagelar
PROCARIOTE flageli
peritrich amphitrich
lophotrichmonotrich
PROCARIOTE flageli
-
10
PROCARIOTE flageli PROCARIOTE pili (fimbrii)
formaiuni filamentoase, rigide, pericelular
prezente la unele bacterii Gram-negative
excepional la bacterii Gram-pozitive (Streptococcus mutans)
mai scurte i mai subiri dect flagelii
nu au rol n mobilitate
originea n membrana citoplasmatic
alctuite din subuniti proteice - pilin
PROCARIOTE pili (fimbrii)
pili de sex (de conjugare) 0-4 buci / celul;
codificai de plasmide
fimbrii de adeziune 10-30 buci / celul;
codificate de gene de pe cromozom
fimbrii comune 50-400 buci / celul
PROCARIOTE pili (fimbrii)
Proteus vulgaris cell, possessing numerous short, straight pili and several longer, curved flagella; the cell is undergoing binary fission. (Volk WA, et al.: Essentials of Medical Microbiology, 5th ed. Philadelphia, Lippincott-Raven, 1996.)
PROCARIOTE spor (endospor)
format n unele bacterii
form de rezisten / supravieuire
celul vegetativ endospor
sporulare copia cromozomului + cantitate mic de citoplasm
nconjurate de un nveli proteic gros
sporulare
germinare
PROCARIOTE spor (endospor)
rezisteni la cldur
frig
uscciune
substane chimice
supravieuiesc ani de zile n praf, pe sol
rezist la fierbere, la aciunea dezinfectantelor
se evideniaz cu coloraii speciale sau la ME
-
11
PROCARIOTE spor (endospor)
Spor central, sferic, mai mic dect corpul bacterian
Spor central, ovalar, mai mare dect corpul bacterian
Spor subterminal, ovalar, mai mare dect corpul bacterian
Spor terminal, sferic, mai mare dect corpul bacterian
BacillusBacillus anthracisanthracis coloraie pentru coloraie pentru spori (x 1000)spori (x 1000)
Viroizi
Prioni
Virusuri
Viroizi Caractere morfostructurale
ME: formaiuni liniare sau bastonae
lungime < 50 nm; diametru 2,5 nm
sunt molecule unice de acid nucleic: ARN, m.c., nchis covalent, circular
240 375 nucleotide
nu au capsid
Viroizi Localizare
nucleoli / nucleoplasm cloroplaste
Replicare probabil n nucleu dependent de enzimele celulei gazd n absena unui virus helper (dif. de v. defective) ARN-ul viroizilor nu are capaciti codificante (absena
aparent a sintezelor) ARN-ul viroizilor funcioneaz i ca enzim - ribozima
-
12
Viroizi boli ale plantelor superioare
boala tuberculilor fuziformi ai cartofului
boli ale citricelor
nanismul i marmorarea crizantemelor
boli ale palmierului de cocos, ale roiilor etc.
vizualizare hibridizare in situ
scanare cu laser
ME de baleiaj
Prioni - generaliti
ageni infecioi de natur proteic (PrPsc)
proteine anormale, infecioase
proteinaceous infectious particle
Henry Prusiner (1982) - 1997 premiul Nobel
structuri proteice, transmisibile i infecioase se multiplic!! anuleaz dogma central
a biologiei moleculare
induc boli ale SNC la om i animale encefalopatii spongiforme transmisibile (EST)
Prioni - multiplicare
proteine capabile de autoreplicare, n absena acidului nucleic
fac parte din grupul autofoldaze sau chaperone
Prioni - Compoziie chimic, structur
Prion-proteina (PrPsc din scrapie sau PrPcj din BCJ)
este produsul de clivaj al proteinei precursor (PrPc)
protein normal de 33 35 kDa
glicoprotein secretat la suprafaa membranei plasmatice a tuturor
celulelor din organism
cantitate mare pe suprafaa neuronilor
Prioni - Compoziie chimic, structur
rolul proteinei precursor (PrPc)
interacioneaz cu receptorii de acetilcolin
n memorie
codific i conserv informaia
n reglarea somnului
protecie n stress-ul oxidativ
trofic pentru celulele Purkinje
Prioni - Compoziie chimic, structur
proteina precursor (PrPc) normal
compus din 254 aa
devine funcional dup
modificri chimice
modificri conformaionale
-
13
Prioni - Compoziie chimic, structur
proteina precursor (PrPc) normal
modificri chimice (7 modificri)
1. clivarea peptidului semnal N-terminal (cu 22 aa)
2. modificarea reziduului de arginin la nivelul
codonului 25
3. .
4. .Glicozilarea oligozaharidelor linkate de
asparagin la nivelul codonilor 181 i 198
Prioni - Compoziie chimic, structur
proteina precursor (PrPc) normal
modificri chimice (7 modificri)
5. .
6. .
7. ndeprtarea peptidului hidrofob C-terminal (cu
20 aa) i fixarea, n schimb, a unui
glicozilfosfatidilinozitol
Formarea unui inel cu o legtur disulfidic
prin care se unesc dou reziduuri de cistein
de la nivelul codonilor 179 i 214
Prioni - Compoziie chimic, structur
proteina precursor (PrPc) normal
modificri conformaionale
replierea proteinei configuraie secundar -helix
surs de energie (rol de enzim) chiar PrPc care catalizeaz
propria mpturire: rol de autofoldaz=protein chaperone
Prioni - Compoziie chimic, structur
proteina precursor (PrPc) normal
(Anca-Michaela Israil-Biologie molecular,prezent i perspective)
Prioni - Compoziie chimic, structur
Prion-proteina (PrPsc) - anormal
protein anormal
greutate molecular 21 30 kDa
izolat din plcile amiloide cerebrale
morfologic structuri filamentoase
scrapie associated filaments SAF
Prioni - Compoziie chimic, structur
Prion-proteina (PrPsc) - anormal
compus tot din 254 aa
codificat de acelai ORF (open reading frame)
are acelai semnal peptidic format din 22 aa
diferite modificrile posttranslaionale chimice i
conformaionale
-
14
Prioni - Compoziie chimic, structur
Prion-proteina (PrPsc) - anormal
modificri chimice (8 modificri)
1. clivarea peptidului semnal N-terminal (cu 22 aa)
(identic)
2. modificarea reziduului de arginin la nivelul
codonului 25 (identic)
3. .
4. .
Glicozilarea oligozaharidelor linkate de asparagin
la nivelul codonilor 181 i 198 rezult 400 forme
diferite de proteine prionice
? difer ologozaharidele linkate n cele 2 proteine??
Prioni - Compoziie chimic, structur
Prion-proteina (PrPsc) - anormal
modificri chimice (8 modificri)
5. .
6. .Formarea unui inel cu o legtur disulfidic
prin care se unesc dou reziduuri de cistein
de la nivelul codonilor 179 i 214 - n
interiorul inelului , la nivelul codonului 189
se evideniaz o substituire de aminoacid
? rol n modificarea timpului de incubaie n scrapie??
Prioni - Compoziie chimic, structur
Prion-proteina (PrPsc) - anormal
modificri chimice (8 modificri)
7. ndeprtarea peptidului hidrofob C-terminal (cu
20 aa) i fixarea, n schimb, a unui
glicozilfosfatidilinozitol
8. Modificri la nivelul reziduului de arginin
corespunztor codonului 37
Prioni - Compoziie chimic, structur
Prion-proteina (PrPsc) anormal
modificri chimice (8 modificri)
Determin alte diferene posttranslaionale i de
metabolism diferite fenotipuri de boli prionice
Prioni - aspecte genetice sinteza proteinei prionice codificat genetic
expresia PrPc umane
codificat de gena PRNP
situat pe braul scurt al cromozomului 20
cadru deschis de citire (ORF) 253 codoni (759 nucleotide)
mutaii punctiforme i inserii n codonii PRNP susceptibilitate la encefalopatii spongiforme:
codonii 200, 210, 232 BCJ
codonii 117, 198, 217 BGSS
codonii 129, 178 IFF
Prioni - Compoziie chimic, structur
Prion-proteina (PrPsc) - anormal
modificri conformaionale
replierea proteinei configuraie secundar -plisat (-sheets)
izoform proteic cu structur i funcionalitate anormal
-
15
Prioni - Compoziie chimic, structur
PrPsc = prion proteina anormal din scrapie
PrPc = prion proteina normal celular
alctuite din 250 aa
cele 2 proteine sunt izoforme
structura primar asemntoare
structura secundar difer:
PrPc tip -helix
PrPsc tip -plisat
Prioni - aciunea agenilor fizici i chimici
PrPsc rezistent fa de: proteaze
nucleaze DN-aze
RN-aze
ageni inactivatori ai acizilor nucleici radiaii ionizante
UV cu lungimi de und 254-280 nm
ageni chimici aldehide
hidroxilamina etc.
Prioni - aciunea agenilor fizici i chimici
PrPsc parial inactivat de: cldur 1000C
fenol
clor
hidroxid de Na
Prioni - aciunea agenilor fizici i chimici
rezistena PrPsc:
expresia alterrilor sale conformaionale deficiene de
transport la suprafaa celulei i de catabolizare
acumulare anormal n substana cerebral, formare de
agregate fibrilare, dezorganizarea substanei cerebrale
Prioni - aciunea agenilor fizici i chimici
(Anca-Michaela Israil-Biologie molecular,prezent i perspective)
Prioni boli prionice
LA OM:
kuru
boala Creutzfeld-Jacob (BCJ) boala Gerstmann-Strussler-Scheincker (BGSS) varianta Creutzfeld-Jacob (v. BCJ) insomnia fatal familial (IFF)
-
16
Prioni boli prionice
LA ANIMALE:
scrapie encefalita transmisibil a curcilor encefalita spongiform bovin (boala vacilor nebune) encefalita degenerativ a felinelor (pisici domestice) boala cronic caectizant a cervideelor encefalopatia ugulatelor exotice: nyala, antilopa african n captivitate
Prioni Caracterele bolilor prionice
Clinic
perioada de incubaie lung: 2 luni-30 ani
simptomatologie neurologic
evoluie lent, progresiv: luni-ani
fatal
Prioni Caracterele bolilor prionice
Histopatologic leziuni cerebrale degenerative
vacuolizare progresiv a
corpilor neuronali
dendritelor
axonilor proliferare astrocitar excesiv
status spongious al materiei cenuii
detectare de structuri tubo-veziculare n prelungirile sinaptice
Prioni Caracterele bolilor prioniceExist sub forme interconvertibile de bastoane, complexe
proteice cu lipid-detergent i lipozomi
(Anca-Michaela Israil-Biologie molecular,prezent i perspective)
Prioni Caracterele bolilor prionice
Rspuns imun ABSENT!!
gazda este imunocompetent fa de alte antigene!!
sistemul imun nu se mobilizeaz fa de prioni!!
tratamentul cu imunomodulatoare sau imunosupresoare nu modific evoluia bolii!!
Prioni Caracterele bolilor prionice
Rspuns imun n boala natural
absena sintezei anticorpilor specifici
absena rspunsului celular specific
absena oricror modificri calitative, cantitative
sau funcionale ale limfocitelor T i B
absena oricror modificri ale interleukinelor
-
17
Prioni
izolare de PrPsc din creierul pacienilor i
animalelor bolnave
transmitere intraspecie sau interspecii, cu
material infecios cerebral
Prioni cultivare - boala experimental
animale cimpanzei
maimue
oareci
hamsteri
nurci
pisici
oi
bividee etc.
inoculare i.cerebral
i.peritoneal
subcutan
digestiv
necesar specificitate de specie a
proteinelor prionice
adaptarea agentului prin pasaje repetate
suspensii de creier de la bolnavii de kurufiltrate acelulare de la bolnavi cu BCJ
reprodus boala dup laten de 1 an
Prioni cultivare substraturi celulare
culturi de explanturi de creier inoculare cu ageni
kuru i BCJ infective 70 25 zile
lichidele de cultur inoculate la cimpanzei - boal
Prioni patogeneza aspecte clinice
poarta de intrare
oral
canibalism ritual
hrana bovinelor
fin de carne de oi, capre insuficient prelucrat termic
parenteral
injecii cu preparate contaminate
transfuzii
intervenii chirurgicale
transplant de organe etc.
Prioni patogeneza aspecte clinice
cale de diseminare nu este cert
replicare n ggl regionali ci limfatice ci
sanguine (trombocite infectate?) esut
reticulo-endotelial
centripet pe cale nervoas la roztoare
Prioni patogeneza aspecte clinice
cale de eliminare nu este cert
prioni la om
n snge i urin
n creier i cornee
-
18
Prioni patogeneza aspecte clinice
caracteristicile comune ale encefalopatiei
spongiforme:
caracter heredo-familial
transmitere vertical
predispoziie genetic
tablou clinic neurologic cu demen:
dezorientare, scderea memoriei, tulburri ale
intelectului i judecii
Prioni patogeneza aspecte clinice
debut
la 65 ani
oboseal, anxietate,
confuzie
perioada de stare
mioclonii, ataxie
cerebeloas
simptome piramidale
simptome
extrapiramidale
demen progresiv
supravieuire
6 -12 luni
evoluie
fatal
diagnostic
EEG caracteristic
Western-blot PrPsc
ex. histopatologic creier
degenerri neuronale
vacuolizri
acumulare de amiloid
Boala Creuzfeld Boala Creuzfeld JacobJacob
Prioni patogeneza aspecte clinice
cunoscut din sec. 18; frecven 1/1.000.000/an n lume
debut la 60 ani
Simptome:
pierderea treptat a strii de echilibru
pierderea treptat a capacitii de deplasare
pierderea memoriei
stare de confuzie
dezorientare
demen
sfrit letal
Boala Boala CreuzfeldCreuzfeld JacobJacobPrioni patogeneza aspecte clinice
3 mecanisme de producere aBCJ
infecie lent
infecie sporadic
alterare genetic
Boala Boala CreuzfeldCreuzfeld JacobJacob
Prioni patogeneza aspecte clinice
3 mecanisme de producere a BCJ
infecie lent
1. infecii conjugale transmitere orizontal??
2. infecii n raport cu profesiunea:
mcelari:
familie cu 9 membrii 3 mcelari toi cu BCJ transmitere prin soluie de
continuitate?? (sngele este infecios nainte de apar.simpt)
fermieri:
3 cazuri de fermieri proprietari de animale cu ESB
personal medical:
oftalmologi, ORL-iti, neurochirurgi, ortopezi, anatomo-patologi
Boala Creuzfeld Boala Creuzfeld JacobJacob
Prioni patogeneza aspecte clinice
3 mecanisme de producere a BCJ
infecie lent
contaminare iatrogen
80 cazuri pn n prezent
transplant de cornee, de timpan
implantare de electrozi intracerebrali insuficient sterilizai
instrumentar chirurgical sterilizat prin metode clasice
administrare de hormon pituitar de cretere preparat din esut hipofizar recoltat de la cadavru
1973-1985, Frana- 100.000 hipofize prelevate 41 cazuri
Anglia 17 cazuri
SUA - 15 cazuri
transfuzie de snge Australia femei cu tratament cu hormoni gonadotropi n antecedente ulterior donatoare de snge
vaccinare cu vaccin antirabic preparat din esut cerebral de animal infectat
Boala Boala CreuzfeldCreuzfeld JacobJacob
-
19
Prioni patogeneza aspecte clinice
3 mecanisme de producere aBCJ
infecie sporadic
mecanism necunoscut
1994 Anglia 53 cazuri vrste peste 75 ani
1994 Germania 115 cazuri vrsta medie 66 ani
1996 Anglia 10 cazuri noi variant BCJ 19-41 ani
Boala Creuzfeld Boala Creuzfeld JacobJacob
Prioni patogeneza aspecte clinice
3 mecanisme de producere aBCJ
alterare genetic
10-15% din cazuri
pn n 1996 100 familii cu asemenea cazuri
legtur ntre unele mutaii de pe cromozomul 20 i boal
Boala Creuzfeld Boala Creuzfeld JacobJacob
Prioni patogeneza aspecte clinice
debut
la 45 50 ani
mai frecvent n Japonia
are caracter ereditar familial (form genetic a bolii)
variant a BCJ
simptomatologie similar cu BCJ
domin
ataxia spino-cerebeloas
demena
Boala Boala GerstmannGerstmann--StrStrusslerussler--ScheinckerScheincker
Prioni patogeneza aspecte clinice
descris n 1992 (Medori R.) 1994: 14 cazuri n Italia, Frana, Anglia, SUA debut
la 35-60 ani; evoluie
7-12 luni
caracter familial-ereditar: 29 cazuri ntr-o familie pe 5 generaii
Insomnia fatal familialInsomnia fatal familial
Prioni patogeneza aspecte clinice
simptome: tulburri de ritm circadian; pierderea total a somnului; tulburri vegetative:
HTA, tahicardie, hipertermie etc. alterarea progresiv a ateniei; disfagie; tulburri de echilibru; mioclonii; confuzie; halucinaii; crize epileptiforme.
Insomnia fatal familialInsomnia fatal familial
Prioni patogeneza aspecte clinice
evoluie 13 luni
diagnostic histopatologic
atrofia selectiv a talamusului, n lipsa plcilor amiloide nucleu anterior talamic
nucleu talamic medio-dorsal
Insomnia fatal familialInsomnia fatal familial
-
20
Prioni patogeneza aspecte clinice
descris n 1996
diferene: debut la 29 ani
evoluie - 1 an
predomin simptome psihiatrice, demen final
fr modificri EEG caracteristice
cauze posibile: transmitere de la bovine consum de carne de vit
infectat cu prioni (140 cazuri confirmate n Anglia)infectate prin consum de pulbere de concentrate
de carne din oi cu scrapie
Varianta nou a BCJVarianta nou a BCJ
Prioni patogeneza aspecte clinice
1957 Gajdusek - la triburile din Papua-Noua Guinee canibalism ritual
femeile i copiii - consum de creier de la rudele decedate
clinic ataxie cerebeloas (kuru = tremurturi) rigiditate caexie progresiv
evoluie letal
Boala kuruBoala kuru
Prioni dg. laborator pp:
biopsii de esut cerebral (!! risc mare) ganglioni spinali nervi periferici snge l.c.r.
evidenierea PrPsc doar la conc. de 106 particule /gr. esut cerebral !! deja infecia a depit faza asimptomatic
Prioni dg. laboratorevidenierea plcilor amiloide
biopsie cerebral + ex. histopatologic ! risc de rezultat fals negativ (zon neafectat)
ex. imuno-histo-chimic cu Ac. monoclonali ggl. spinali, ggl. mezenterici, nervi periferici
Western-blot LCR, snge, derivate din plasm, material bioptic
PET-blot preparate fixate cu formol
detecteaz conc. mici de PrPsc, n faze incipiente
PCR, hibridizri, ELISA
Prioni dg. laborator Dg. de certitudine
postmortem evidenierea leziunilor histopatologice
cerebrale
Prioni epidemiologie incidena bolii subevaluat
nu are raportare obligatorie
dg. de certitudine nu se practic ntotdeauna
incidena anual 1 -2 cazuri la 1 milion
rata medie a mortalitii 0,09 31 cazuri la 1 milion
raport brbai / femei 1,05 / 1
-
21
Prioni epidemiologie rezervor de infecie pt cazurile umane:
omul animale??? (insuficient cunoscut)
transmitere pt. BCJ iatrogen
cu hormon pituitar de cretere (hipofiza cadavru infectat) transplant de cornee sau dura mater implantare de electrozi insuficient sterilizai transfuzii de snge de la femei tratate anterior cu hormon
gonadotrop vaccinare cu vaccin antirabic din esut cerebral infectat
Prioni epidemiologie transmitere pt. BCJ
caracter profesional contact cu esut sau snge contaminat
mcelari
personal medical
neurochirurgi
oftalmologi
anatomopatologi
Prioni epidemiologie
transmitere pt. BCJ oral
boala kuru
canibalism
produse alimentare de la animale infectate???
Prioni profilaxie reducerea transmiterii encefalopatiilor spongiforme
transmisibile: exclus de la donare
persoana cu antecedente familiale de boli prionice
persoana cu antecedente de tratament cu hormon hipofizar
manipulare atent a esuturilor i organelor creier
snge
lcr
Prioni profilaxie reducerea transmiterii encefalopatiilor spongiforme
transmisibile: sterilizarea instrumentarului
cldur: autoclavare de 2 ori la 134C cte 1h; 138C cte 18 min;
ageni chimici hipoclorit de Na 5 - 25% - 1h;
NaOH (1N 2N) 1h urmat de autoclavare la 121C 30 min.
incinerare esuturi, organe contaminate
piese histopatologice tratare cu formol apoi cu acid formic 96% - 1h (nu inactiveaz
complet agentul prionic!!)
Prioni profilaxie
reducerea transmiterii encefalopatiilor spongiforme transmisibile:
interzis consum carne animal bolnav
interzis fina de oase carne n hrana animalelor
arderea animalelor bolnave
-
22
Prioni pentru viitor
elucidarea naturii prionilor
aprofundarea aspectelor genetice
patogenezei
inter-relaiilor cu encefalopatia spongiform a animalelor
identificarea aspectelor epidemiologice care contribuie la apariia encefalopatiei spongiforme i ntreruperea acestora
Virusuri - definiie
Virion = virus = corpuscul elementar = corpuscul viral
unitatea viral, morfofuncional, complet, intact, infecioas, cu diametrul cuprins ntre 18-400 nm, capabil s infecteze bacterii, plante, animale, omul
Se gsesc extracelular: nainte de a infecta celula gazd
dup ce s-au asamblat i au fost eliberai din celula n care s-au multiplicat
Virusuri - dimensiune Extrem de mici
18 30 nm (Parvoviridae, Picornaviridae)
V. hepatitei A, v. poliomielitei
40 80 nm
rotavirus, v. rubeolos, v. hepatitei B, v. hepatitei C
90 200 nm
V. herpetic, v. rujeolos, v. respirator sinciial, v. rabic
300 - 450 nm (Poxviridae)
V. variolic
peste 900 nm lungime, diametru 80 nm (Filoviridae)
Caractere generale ale virusurilor Dimensiuni extrem de mici
Nu pot fi vzute la microscopul optic
Se evideniaz la microscopul electronic
Sunt filtrabile prin filtre bacteriologice
Au un singur tip de acid nucleic ARN (ribovirusuri) sau
ADN (dezoxiribovirusuri)
Au structur extrem de simpl
Caractere generale ale virusurilor Parazitism avansat
Nu au enzime proprii
Dependen cvasitotal de enzimele i mainria replicativ a gazdei
Se multiplic doar n interiorul unei celule vii
VIRUS VEGETATIV particula viral aflat n celul, deficitar n unele aspecte ale replicrii
PROVIRUS genom viral integrat n cromozomul celulei gazd, multiplicndu-se sincron cu acesta
-
23
Morfologia virusurilor sferic
v.gripal, v.herpetic, adenovirus, v. polio
cilindric, bastona v. mozaicului tutunului, fagi
paralelipiped v. variolic, v. vaccinia
cartu v. rabic
filamentos v. Ebola
sferic cu coad bacteriofag
Structura virusurilor I. genom viral
II. capsida
III. nveli viral
GENOMUL VIRAL
este alctuit dintr-o molecul de acid nucleic viral
FIE ARN RIBOVIRUSURI
FIE ADN DEZOXIRIBOVIRUSURI
poart informaia genetic necesar replicrii
determin capacitatea infectiv a virusului.
MRIMEA GENOMULUI VIRAL apreciat n funcie de:
unitatea de mas molecular DALTON
nr. de nucleotide sau perechi de nucleotide din structurile mono- sau bicatenare KILOBAZA
Dalton unitate de msur egal cu 10.000 pe scara greutilor atomice??
Kilobaza unitate egal cu:
1.000 nucleotide pt str. monocatenare (kb)
1.000 perechi de nucleotide pt. str. bicatenare (kbp)
MRIMEA GENOMULUI VIRAL
diferit de la o familie la alta referitor la:
greutatea molecular
1,5 x 106 Da Parvovirus
15 x 106 Da Poxvirus
numrul de nucleotide
5-7 kb - Papovavirus
231 kbp - Herpesvirus
compoziia n baze
-
24
MRIMEA GENOMULUI VIRAL nr. de gene cuprins n genom
9 structuri genice - HIV 12 structuri genice - v. gripal 240 structuri genice - v. vaccinia
nr. de proteine codificate dependent de mrimea genomului 250 proteine - v. vaccinia 200 proteine - v. herpetic 2 6 proteine - Parvoviridae 4 proteine - Picornavirus
STRUCTURA GENOMULUI VIRAL virusuri ARN
1. m.c. liniar: pies unic
picornavirus, VHA
2. m.c. divizat 8 molec liniare inegale ARN
v.gripal
3. m.c. cu 3 str. circulare bunyavirus
4. d.c. cu 10-12 segm. separate reovirus
5. m.c. cu 2 segmente inegale arenavirus
6. m.c. diploid: 2 molec. identice ARN legate
necovalent
retrovirusuri
VHA
v.gripal
reovirus
STRUCTURA GENOMULUI VIRAL
virusuri ADN1. m.c. liniar:
parvovirus
2. m.c. circular fag X 174
3. d.c. cu secvene terminale repetitive adenovirus, herpesvirus
4. d.c. cu extremiti nchise covalent v. vaccinia
5. d.c. circular, nchise necovalent, cu extremiti m.c. hepadnavirus
6. d.c. circular, nchise covalent i suprarsucite SV40, polyomavirus
FUNCIILE GENOMULUI conine ntreaga informaie genetic viral
asigur infectivitatea viral
este capabil de autoreplicare n absena celorlali
constitueni virali
excepie: ARN viral izolat, m.c., sens negativ (virusuri cu
genom divizat othomyxovirus)
CAPSIDA complex de structuri proteice care mbrac acidul
nucleic viral
are arhitectur i compoziie specifice fiecrui tip
viral
CAPSIDA
aspecte caracteristice ale morfogenezei capsidei virale:
nr. mic de gene din genomul viral nu permite
sintez de polipeptide cu diversitate mare
!! uniti structurale similare, grupate repetitiv, dup
modele geometrice similare, avantajoase capside cu
structuri foarte complexe
-
25
CAPSIDA
aspecte caracteristice ale morfogenezei capsidei virale: resurse limitate: cpii multiple sintetizate de o singur
gen ntre subunitile proteice capsidale interaciuni
puternice realizeaz ansambluri stabile care - mbrac genomul viral
- asigur integritatea genomului viral
TIPURI DE SIMETRIE ALE ARHITECTURII CAPSIDALE
cubic icosaedric
helicoidal
binar, helicoidal-icosaedric
CAPSIDE CU SIMETRIE CUBIC ICOSAEDRIC
particula viral are form sferic sau contur hexagonal
virusuri ARN sau ADN
virusuri cu sau fr anvelop
cea mai eficient aranjare - maxim de volum cu minim de material
capsomerele nu sunt echivalente cu subunitile chimice de construcie capsomere alctuite din 5, 6 subuniti chimice
CAPSIDE CU SIMETRIE CUBIC ICOSAEDRIC
capsomerele organizate n jurul unor axe perpendiculare caracteristice simetriei cubice icosaedru
poliedru cu:
20 fee triunghiuri echilaterale
30 muchii
12 vrfuri (vertex), orientate dup axe de simetrie rotaional de tip 2/3/5
CAPSIDE CU SIMETRIE CUBIC ICOSAEDRIC
vertex reunete 5 fee PENTONPENTONPENTONPENTON
fiecare fa 5 subuniti proteice PENTAMERIPENTAMERIPENTAMERIPENTAMERI
muchii i fee HEXONIHEXONIHEXONIHEXONI
alctuii din 6 subuniti proteice - HEXAMERIHEXAMERIHEXAMERIHEXAMERI
* numrul capsomerelor specific pt. fiecare virus* pentone ntotdeauna 12; variaz nr. de hexonevirusuri ADN parvovirus 32 capsomere; herpesvirus 162 virusuri ARN picornavirus 32 capsomere; reovirus 92
CAPSIDE CU SIMETRIE CUBIC ICOSAEDRIC
* numrul capsomerelor specific pt. fiecare virus* pentone ntotdeauna 12; variaz nr. de hexone
virusuri ADN parvovirus 32 capsomere; herpesvirus 162
virusuri ARN picornavirus 32 capsomere; reovirus 92
-
26
CAPSIDE CU SIMETRIE CUBIC ICOSAEDRIC CAPSIDE CU SIMETRIE CUBIC ICOSAEDRIC
CAPSIDE CU SIMETRIE CUBIC ICOSAEDRIC
Herpes nucleocapsid showing pentons at the vertices of the icosahedronZhou et al. Baylor College of Medicine Reference: Z. H. Zhou, B.V.V Prasad, J. Jakana, F.R. Rixon, W. Chiu Baylor College of Medicine, Journal of Molecular Biology
CAPSIDE CU SIMETRIE CUBIC ICOSAEDRIC
enterovirus
adenovirusherpesvirus
poliovirus
CAPSIDE CU SIMETRIE HELICOIDAL
particula viral are form tubular, flexibil sau
rigid, de lungimi i diametre variabile
virusuri ARN
virusuri cu sau fr anvelop
capsomerele
subuniti chimice identice
aezate repetat pe spira acidului nucleic printr-o micare
de rotaie n jurul unui ax + translaie paralel cu acelai
ax
CAPSIDE CU SIMETRIE HELICOIDAL
Disc de subuniti alturate
Cretere n spiral Structur viral cilindric
Nucleocapsida tubular cu gol axial
-
27
CAPSIDE CU SIMETRIE HELICOIDAL
Virusuri fr anvelop form flexibil aspect de bastona v.mozaicului tutunului
CAPSIDE CU SIMETRIE HELICOIDAL
Virusuri cu anvelop: ntreaga structur rigid
form sferic structura tubular ncolcit n interiorul virionului
spir regulat v.gripal
ghem neregulat v.paragripal
de cartu structura tubular orientat n spire strnse, paralele v.rabic
Orthomyxoviridae Paramyxoviridae Rhabdoviridae
v. rabic
influenzavirus
parainfluenzavirus
Capside cu simetrie binar, icosaedric-helicoidal
Bacteriofagi
Cap
simetrie icosaedric
Coada
simetrie helicoidal
Simetrie complex
-corpi laterali
nveli viral
-membran extern acoperit de tubuli
nucleoid viral
ADN viral cu proteine asociate
Funciile capsidei virale protejeaz genomul de aciunea factorilor externi, de
nucleazele celulare;
asigur forma virionului;
fixeaz virionii nuzi de receptorii celulari specifici;
subunitile structurale ale capsidei sunt antigene care induc formarea i reacioneaz cu anticorpii neutralizani.
-
28
nveliul viral peplos, anvelop
deriv din membranele celulei gazd: din membrana plasmatic
v. gripal,
v. paragripal,
retrovirusuri
din membrana nuclear
herpesvirus
Rolul nveliului viral protejeaz nucleocapsida;
intervine n iniierea ciclului infectant prin recunoaterea i ataarea v. de receptorii celulari;
intervine n procesul de asamblare a noilor particule virale;
intervine n activiti specific virale (hemaglutinare, hemadsorbie, hemoliz, fuziunea membranelor celulare);
Structura nveliului extern structuri derivate din celula gazd:
dublu strat lipidic constituit, n proporii diferite,
de fosfolipide, colesterol, glicolipide
Structura nveliului extern structuri proprii virale (codificate de v.:
Proteina M
Spiculi
Hemaglutinine
Neuraminidaze
Profactori de fuziune
Proteina M (matrix)
prezent la toate v. nvelite (excepie bunyavirus)
situat pe faa intern a nveliului viral
Funcii:
menine integritatea nveliului viral;
rol n asamblarea virionilor i eliberarea lor prin nmugurire;
implicat n transportul ionilor de H
-
29
Spiculii
de natur glicoproteic se afl pe suprafaa nveliului viral
n structura lor au fost identificate 3 zone: Zona de ancorare, situat pe faa intern a nveliului viral,
de natur peptidic;
Zona medie care strbate stratul bilipidic al nveliului extern, format din lanuri polipeptidice;
Zona extern, situat deasupra nveliului extern, alctuit din glicolipide.
Spiculii
Hemaglutininele prezente la v. nvelite:
Orthomyxovirus
Paramyxovirus
Rhabdovirus etc.
bastonae prismatice cu baza triunghiular
nr. spiculilor de HA variaz n funcie de virus
funcii: recunoatere receptori celulari, ataare i penetrare virus n
celul;
induc rspuns imun (antc. hemaglutinoinhibani)
rol n hemaglutinarea hematiilor i n hemadsorbie.
Spiculii
Neuraminidazele prezente la orthomyxovirus, paramyxovirus
Glicoproteine ancorate n dublul strat lipidic
Funcii:
faciliteaz ptrunderea virusului n celula gazd prin
scindarea acidului sialic din glicoproteinele suprafeei
celulare
intervin n procesul de ieire a noilor particule din celul
Spiculii
Profactorul de fuziune poate fi situat pe nveliul viral sau pe alte structuri ale
nveliului
prezent la herpes virus, VRS, paramyxovirus
form inactiv
Glicoprotein
Funcii: fuziunea nveliului viral cu membrana celular favoriznd
penetrarea virusului n celula gazd;
fuziunea membranelor celulare determinnd apariia de sinciii;
diseminarea infeciei;
producerea hemolizei.
Alte componente asociate virionului
Enzimele virale Sinteza de proteine-enzime codificate de virus este restrns
(nr. mic de gene din genomul v.)
Sunt proteine Structurale - n nveliul viral
rol interrelaie cu celula gazd Nestructurale - asociate nucleocapsidei
rol
replicarea genomului viral
sinteza de proteine virale
Cele mai importante enzime virale
Transcriptaze virale/replicaze
ARN-polimeraze ARN dependente la v. ARN m.c. de sens negativ
paramyxovirus, rhabdovirus, orthomyxovirus
ARN-polimeraze virale ADN dependente transcrierea ADN n ARNm
poxvirus
ADN-polimeraze virale ADN dependenteherpesvirus
-
30
Cele mai importante enzime virale Reverstranscriptaze
prezente la retrovirusuri, hepadnavirusuri
ADN-polimeraz ARN dependent transcrie genomul ARN n ADN
ADN-polimeraz ADN dependent
integrazintegreaz ADN proviral n ADN celular
numai la retrovirusuri
Cele mai importante enzime virale Endonucleaze
cliveaz catenele acizilor nucleici
prezente la: v. ARN: v. gripal; v. ADN: poxvirus
integreaz genomul viral n ADN celular la v. cu potenial oncogen
SV40, adenovirusuri
Enzime necesare transcrierii i modificrilor ARNm
poliadenilat-polimeraze; metiltransferaze etc.
prezente la: poxvirus; reovirus
Cele mai importante enzime virale
Proteinkinaze, Timidinkinaze, Dezoxicitindezaminaze accelereaz transcrierea i replicarea genomului viral
prezente la: herpesvirus
Tirozinkinaze codificate de oncogene ale v. sarcomului aviar (v. Rous)
au ca int proteinele celulare implicate n reglarea ciclului celular
Cele mai importante enzime virale
Proteinaze cliveaz precursorii polipeptidici n proteine funcionale
i structurale
prezente la: picornavirus, togavirus, coronavirus, flavivirus, calicivirus
4 clase: serinproteinaze
cisteinproteinaze
aspartatproteinaze
metaloproteinaze