1

„Az oktatás és kutatás színvonalának emelése a Szent István Egyetemen” (TÁMOP-4.2.1.B-11/2/KMR-2011-0003)

A fertőző állatbetegségek laboratóriumi diagnosztikája, a megelőzés lehetőségei.

(kiemelt kutatási terület)

2

Élelmezésbiztonság = Az élelmiszerek alapjául szolgáló termékek igényeknek megfelelő mennyiségben történő előállítása

3

4

Csirke- és pulykaállományokban enterális fertőzést okozó vírusok elterjedtségének

és kóroktani szerepének további vizsgálata

Mándoki Míra, Liptai Orsolya, Rusvai Miklós

5

Baromfitartás

• csirke (Gallus gallus domesticus) • pulyka (Meleagris gallopavo)

broilerállományok: nagyüzemi, iparszerű tartás

új, összetett kóroktanú betegségek, melyekben több kórokozó és környezeti tényezők játszanak szerepet

• emésztőszervi betegség komplex (enteric disease, ED)

http://en.wikipedia.org/wiki/Poultry_farming

6

Enterális kórképek csirkeállományokban• Runting-stunting syndrome (RSS)

– 1-4 hetes életkor• hasmenés, gubbasztás, alomevés, csipogás és összebújás

– változó morbiditás és mortalitás, másodlagos fertőzések: baktériumok, gombák, vírusok• gazdasági kár: csökkent téteményképesség, fejlődésben való

visszamaradás, megnövekedett gyógykezelési költség, csökkent takarmányhasznosítás

– Oktan: Astroviridae, Coronaviridae, Reoviridae, Adenoviridae, Parvoviridae etc.

7

• Poult enteritis complex (PEC)– hasmenés, gubbasztás ,

immunszuppresszió, alomevés és megnövekedett mortalitás

– nagy gazdasági jelentőség

• Oktan– enteropathogén E. coli törzsek– Coronaviridae, Astroviridae,

Reoviridae, Parvoviridae etc.

• Poult enteritis and mortality syndrome (PEMS)– akár 100% morbiditás és

mortalitás

Enterális kórképek pulykaállományokban

8

Az enterális kórképek oktanában vélhetőleg szerepet játszó vírusok• Astrovirusok

– avian nephritis virus (ANV)– turkey astrovirus (TAstV)

• Coronavirusok– turkey coronavirus (TCV)– infectious bronchitis virus (IBV)

• Adenovirusok– avian adenovirus group I (AAdVI)– hemorrhagic enteritis virus (HEV)

• Reovirusok (ARV)

• Rotavirusok (AvRV)

• Parvovirusok– chicken parvovirus (ChPV)– turkey parvovirus (TuPV)

www.stanford.edu/~jliebner/coronaviridae/taxonomywww.de.academic.ru/dic.nsf/dewiki

9

Anyag és módszer

• 3 év során (2010-2012) beküldött esetek• 1-4 hetes csirke- (87) és pulykaállományok (6)• boncolás és kórszövettan• bakteriológiai vizsgálat• indirekt immunhisztokémia (IHC)• polimeráz láncreakció (PCR)

10

PCR and RT-PCR: chicken samplesTargeted virus Targeted gene Primer name and sequence (5’-3’) Size (bp) Annealing

ChPV / TuPV NS1 PVF1: TTCTAATAACGATATCACTCAAGTTTCPVR1: TTTGCGCTTGCGGTGAAGTCTGGCTCG 561 55

ANV GP1 ANV-ORF1-f: AGATACGCTTGCTCGTCTTGANV-ORF1-r: CCTCTAACCGGCGATATTCT 608 53

CAstV ORF 1b ANVpol1F:GYT GGG CGC YTC YTT YGA YACANVpol1R:CRT TTG CCC KRT ART CTT TRT 473 53

TAstVs ORF-1b TAPG-L1:TGG TGG TGY TTY CTC AAR ATAPG-R1:GYC KGT CAT CMC CRT ARC A 601 55

TAstV-2 capsid ORF 2 MKCAP8F:TCA TCA TCC TCT CAC ACT GGMKCAP19R:AGC AGC AGT AGG TGG CAG TG 802 53

TCV nucleocapsid TCV-NF:GGT AGC GGT GTT CCT GATCV-NR:CCC TCC TTA CCT TTA GT 598 53

HEV CP1 HEV-CP1-F: GGTTCGTGAACATTGGAGACHEV-CP1-R: CAGGCACAACAGGTGTAACT 155 48

ARV S4 S4-F13:GTG CGT GTT GGA GTT TCC CGS4-R1133:TAC GCC ATC CTA GCT GGA 1120 53

AvRV NSP4 NSP4-F30:GTG CGG AAA GAT GGA GAA CNSP4-R660:GTT GGG GTA CCA GGG ATT AA 630 55

AAdV1 Hexon H1:TGG ACA TGG GGG CGA CCT AH2:AAG GGA TTG ACG TTG TCC A 1219 53

11

Eredmények

Megfigyelés: szétnövés, gubbasztás

12

Megfigyelés: szétnövés, gubbasztás

Eredmények

13

Boncolás: szétnövés, hasmenés

Eredmények

14

Boncolás: szétnövés, hasmenés

Eredmények

15

Boncolás: enterits

Eredmények

16

Boncolás: enterits

Eredmények

17

Boncolás: enterits

Eredmények

18

Boncolás: enterits

Eredmények

19

Kórszövettan: enteritis, a bélbolyhok megrövidülése, fúziója (jejunum, H&E)

Eredmények

20

Kórszövettan: enteritis, granulocyták, histiocyták, lymphocyták (jejunum, H&E)

21

Immunhisztokémia: vírusantigén kimutatása

(jejunum, ChPV)

22

Immunhisztokémia: vírusantigén kimutatása (jejunum, ChPV)

23

EredményekPCR vizsgálatok pulykaállományokban

Év 2011 2012

Esetszám 4 2

ChPV/TuPV 2 1

TuAstV-2 1 2

AvAst 1 0

Reo 1 0

AvRota, ANV, HEV, TCoV nem volt kimutatható

24

Év 2010 2011 20123 év

átlagaEsetszám 13 36 38

ChPV/TuPV 9 (69%) 29 (81%) 33 (87%) 79%

Reo 3 (23%) 32 (89%) 27 (71%) 61%

ANV 8 (62%) 21 (58%) 18 (47%) 56%

ChAstro 5 (38%) 18 (50%) 11 (29%) 39%

AvAst 6 (46%) 8 (22%) 4 (11%) 26%

AvRota 1 (8%) 2 (6%) 0 5%

EredményekPCR vizsgálatok csirkeállományokban

25

PCR vizsgálatok csirkeállományokban2010 2011 2012 3 év

0 vírussal 1 1

1 vírussal 4 2 9 15

2 vírussal 2 10 10 22

3 vírussal 6 10 8 24

4 vírussal 11 9 20

5 vírussal 3 1 4

6 vírussal 1 12,46 3,08 2,47 2,72

Eredmények

26

• A felmérés tanúsága szerint a csirkeállományok enteritissel járó kórképe esetén leggyakrabban parvovírusok és reovírusok mutathatók ki

• A parvovírusok előfordulási aránya folyamatosan növekszik

• Igen gyakori a többszörös fertőzés

Megbeszélés

27

Köszönöm a figyelmet!

Az oktatás és kutatás színvonalának emelése a Szent István Egyetemen" (TÁMOP-4.2.1.B-11/2/KMR-2011-0003)