第三章细菌的分布与消毒灭菌

• 第一节 细菌的分布•一、细菌在自然界的分布•1 、土壤•2 、水中•3 、空气•二、细菌在人体的分布

鼻咽腔鼻咽腔葡萄球菌、甲，丙型链球菌肺炎球菌、奈氏菌、类杆菌等

外耳道外耳道葡萄球菌、类白喉杆菌绿脓杆菌、非致病性分枝杆菌

表皮葡萄球菌 口腔口腔甲，丙型链球菌类白喉杆菌、肺炎球菌奈氏菌、乳杆菌、梭杆菌螺旋体、放线菌、白念珠菌

肠道肠道大肠杆菌、产气杆菌、变形杆菌绿脓杆菌、葡萄球菌、厌氧性细菌真菌、乳杆菌，双歧杆菌等

阴道阴道大肠杆菌、乳杆菌白念珠菌、类白喉杆菌非致病性分枝等

皮肤皮肤葡萄球菌、绿脓杆菌、白念珠菌丙酸杆菌、类白喉杆菌、非致病性分枝杆菌

人体内正常菌群的分布

眼结膜眼结膜白色葡萄球菌、干燥杆菌

尿道尿道白色葡萄球菌、类白喉杆菌、非致病性分枝杆菌

人体各部位正常细菌数量人体各部位正常细菌数量

三、人体正常菌群及其意义（一） 正常菌群（ normal flora ） 正常人体的体表及与外界相通的腔

道的黏膜上存在者不同种类和一定数量的细菌，这些细菌通常对人体是无害的，称为正常菌群。

•（二） 正常菌群的生理作用• 1 、拮抗作用：生物屏障• ① 改变 pH ：抑制外来菌 • ② 占位性保护作用：生物膜 • ③ 争夺营养 • ④ 抗生素与细菌素的作用

•2 、营养作用 代谢：蛋白质、糖、脂肪、 胆汁、胆固醇 合成：维生素 乳酸杆菌• 3 、免疫作用 Ag Ab • 4 、抗癌作用 激活巨噬细胞

（三）条件致病菌（机会致病菌）（三）条件致病菌（机会致病菌） 正常情况下不致病，特殊情况下能 正常情况下不致病，特殊情况下能引起疾病的细菌。引起疾病的细菌。

条件致病菌致病的条件：条件致病菌致病的条件：

① ① 免疫功能下降 免疫功能下降

② ② 寄生部位改变寄生部位改变

③ ③ 不适当的抗菌药物治疗所导致的不适当的抗菌药物治疗所导致的菌群失调菌群失调

（四）菌群失调及菌群失调症 • 由于某种原因使正常菌群的种类、数量和比

例发生较大幅度的改变，导致微生态失去平衡称为菌群失调。

• 由于菌群失调而使宿主发生一系列临床症状，则称为菌群失调症。

• 措施：停用原来的抗生素 微生态制剂（酪酸菌、双歧杆菌、乳酸菌素等）

第二节、第二节、消毒与灭菌 消毒消毒：指杀死物体上病原微生物的方：指杀死物体上病原微生物的方法，但不包括芽胞。法，但不包括芽胞。 灭菌灭菌：是指杀灭物体上所有微生物，：是指杀灭物体上所有微生物，包括繁殖体和芽胞。包括繁殖体和芽胞。 无菌无菌：物品中没有活的微生物存在。：物品中没有活的微生物存在。 无菌操作无菌操作：防止微生物进入机体或物：防止微生物进入机体或物体的操作技术。体的操作技术。

• 防腐：指防止或抑制微生物生长繁

殖的方法。 消毒剂：高浓度 防腐剂：低浓度

消毒、灭菌的方法一般可分为：

热力灭菌法 紫外线照射 物理学方法 电离辐射杀菌法 滤过除菌法 化学方法

（一） 热力灭菌法分类：干热灭菌法 湿热灭菌法湿热比干热灭菌好的原因：① 、湿热穿透力强② 、细菌蛋白质在有水的情况下易

于凝固变性③ 、湿热蒸气有潜热存在　

一、 物理消毒灭菌法

1 、湿热灭菌法 A 高压蒸气灭菌法 : 最常用、最有效的

灭菌方法。 压力： 103.4KPa ； 温度： 121.3℃ ； 作用时间 15-30min

•用途：凡耐高温、不怕潮湿的物品。 如：手术器械、敷料和一般的培养基。

•B 煮沸消毒法： 100℃ ， 5min -10min 用途 : 常用于食具、刀剪、注射器消毒• 芽胞 延长1～3小时• 2％碳酸氢钠 105℃

•C 流通蒸气消毒法： 不超过 100℃ ， 15-30min ， 37℃孵箱过夜

（ 3次）• 用途 : 不耐高温的营养丰富的培养基的灭菌•D 巴氏消毒法• 61.1-62.8℃ ， 30 min• 71.7℃ ， 15-30sec•用途 : 不耐高温的如牛奶、酒类、饮料等食品的

消毒

2 、干热灭菌法（ 1 ） 焚烧与烧灼： 用途：废器的物品、接种环、试管口、瓶口等（ 2 ）干烤： 160° ～ 170℃ ， 2h 如：玻璃器皿、瓷器等耐高温的物品

（二）紫外线与电离辐射灭菌法

1 、日光与紫外线

　波长 265～ 266nm 杀菌最强

机理：损坏DNA构型 细菌死亡或变异

特点：穿透力弱

有效距离 2～ 3m 时间 1～ 2h

主要用于空气及物体表面的消毒

•2 、电离辐射： 包括 X射线和 γ射线• 机制：干扰DNA 的合成；破坏细

胞膜； 产生过氧化氢等 • 特点：穿透力强，不升高温度• 主要用于一次性塑料制品的消毒

（三）滤过除菌法 用滤菌器除去液体及空气中的细菌 用于不耐热的血清、抗毒素、抗生素和药液等的除菌。

二、化学消毒灭菌法

（一）化学消毒剂的种类、性质与用途

酚类： 酚类： 3%3% ～～ 5%5% 石炭酸、石炭酸、 2%2%来苏、 来苏、

0.01%0.01% ～～ 0.05%0.05% 洗必泰洗必泰

醇类： 醇类： 70%70% ～～ 75%75% 乙醇乙醇

重金属盐类： 重金属盐类：

2%2% 红汞、红汞、 0.1%0.1% 硫柳汞、硫柳汞、 1%1% 硝酸银硝酸银

氧化剂： 氧化剂： 0.1%0.1%高锰酸钾、高锰酸钾、 3%3%过氧化氢、过氧化氢、

0.2%-0.3%0.2%-0.3%过氧乙酸、过氧乙酸、 2%2% ～～ 2.5%2.5%碘伏碘伏

表面活性剂等等表面活性剂等等

•（二）常用消毒剂的作用机制： ① 使菌体蛋白质变性或凝固 ② 干扰或破坏细菌的酶系统或代谢 ③ 改变细胞壁或细胞膜的通透性

（三）影响消毒灭菌的因素⑴消毒剂的性质、浓度与作用时间⑵微生物的种类与数量与状态⑶环境因素 有机物⑷温度和酸碱度

• （四）防腐剂 某些低浓度的消毒剂可用作防腐剂。

第三节 生物安全

一、实验室生物安全及其重要意义 实验室生物安全（ laboratory biosafety）

是指在从事病原生物实验活动的实验室中避免病原体对工作人员和相关人员的危害，避免对环境的污染和公众的危害，为了保证实验研究的科学性还要保护实验因子免受污染。

建立生物安全实验室的重要意义：1. 保证研究人员不受伤害，保护环境和公众健康，保护实验因子

2.预防与控制传染病

3.面临新的环境、生物恐怖

4.提高实验室检测能力

5.检测医院感染

6.抵御突发传染病的全球传播

二、病原微生物危害程度分级

•危害等级 危害性• 1级 危害最低 不大可能致病• 2级 能致病 危害不严重 传播有限• 3级 能严重致病 不易发生个体间传播• 4级 能严重致病 易发生个体间传播

三、生物安全水平分级及实验室设备要求生物安全实验室分级• 根据实验室的设计特点、建筑结构和

屏障设施等可将生物安全实验室分为四个安全防护等级，即生物安全防护水平一级（ biosafety level,BSL-1）～生物安全防护水平四级（ biosafety level,BSL-4 ）。

• BSL-1 防护水平和隔离要求最低，BSL-4 防护水平和隔离要求最高。 BSL-1 、 BSL-2实验室属基础实验室， BSL-3实验室为屏障实验室， BSL-4实验室为高度屏障实验室。

• 但使用频率最高，最频繁的是 BSL-2级实验室。

四、对生物恐怖活动防范

利用强致病力的细菌、病毒等微生物攻击人群。

日军侵华使用大量生物武器，造成平民伤亡。

•（二）防腐剂•（三）化学疗剂