ESPOROFORMADORES COMO

PROBIÓTICOS HUMANOS

Cristian Baquero Duarte

PROBIÓTICOS“A favor de la vida”

Los probióticos deben poder ejercer sus efectos beneficiosos en el huésped mediante su crecimiento

y/o actividad en el cuerpo humano

FAO, & OMS. (2006).

Lo que importa es la especificidad de la acción, y no la fuente del

microorganismo

La capacidad de seguir siendo viable en el lugar de destino y de ser eficaz debería verificarse para

cada cepa potencialmente probiótica

PROBIÓTICOS

• Prevención de la diarrea causada por ciertas bacterias patógenas y virus• Infección por Helicobacter pylori y complicaciones• Enfermedades inflamatorias y síndromes intestinales• Cáncer• Estreñimiento• Inmunidad mucosa• Alergia• Enfermedades cardiovasculares• Vaginosis bacteriana• Vaginitis por levaduras• Infecciones del aparato urinario

• Probióticos en personas sanas• Mantienen la salud y bienestar, ayudando a reducir el riesgo de

contraer enfermedades intestinales, renales, respiratorias y cardíacas

FAO, & OMS. (2006).

• Producción de sustancias antimicrobianas

• Exclusión competitiva de la fijación de patógenos• Competencia por los nutrientes

• Modulación del sistema inmunitario

PROBIÓTICOS

NORMATIVIDAD

(GRAS) Generally Recognized as Safe

INVIMA

Directrices para la Evaluación de los Probióticos para Uso

AlimentarioIdentificación de la cepa por métodos fenotípicos y

genotípicos •Género, especie, cepa•Depósito de la cepa en una colección de cultivos internacional

Evaluación de la inocuidad• In vitro y/o animal•Fase 1 estudio en seres humanos

Caracterización funcional• Estudios in vitro• Estudios en animales

Ensayos aleatorios de doble anonimato controlados con placebo• Fase 2 de ensayos en seres humanos u otro diseño pertinente

Determinar si la cepa/producto es eficaz

FAO, & OMS. (2006).

Fase 3, (aconsejable) un ensayo de eficacia

• Comparar los probióticos con el tratamiento estándar para una condición específica

Directrices para la Evaluación de los Probióticos para Uso

AlimentarioDe preferencia un segundoestudio DBPC independientepara confirmar los resultados

ALIMENTO PROBIÓTICO

Etiquetado•Contenido – denominación de género, especie, cepa•Numero mínimo de bacterias viables al final de su período de conservación•Condiciones adecuadas de almacenamiento•Datos de contacto con la empresa para información al consumidor.

FAO, & OMS. (2006).

Lactobacillus sp.

Lactobacillus sp.

FDA

Bifidobacterium sp.

FDA

ESPOROFORMADORES

Bacillus Clostridiu

m

Cutting, S. M. (2011). Bacillus probiotics. Food microbiology, 28(2), 214–20.

doi:10.1016/j.fm.2010.03.007

• Sobre todo en suelo (anaerobiosis).• Incluso especies patógenas pueden aislarse de suelo.

• Aislados fácilmente de agua o aire y son de los contaminantes más frecuentes.• Encuentran en intestino de mamíferos

• Muchos Bacillus producen antimicrobianos como la bacitracina, polimixina, glamicidina y circulina.

• Producción de antibióticos relacionada con esporulación

• Especies son agentes causales de enfermedad

Bacillus sp.

Lorenz, M. G., & Wackernagel, W. (1994). Bacterial gene transfer by natural genetic transformation in the environment. Microbiological reviews, 58(3), 563–

602.

Bacillus sp.

Lorenz, M. G., & Wackernagel, W. (1994). Bacterial gene transfer by natural genetic transformation in the environment. Microbiological reviews, 58(3), 563–

602.

FDA

Bacillus sp.

Cutting, S. M. (2011). Bacillus probiotics. Food microbiology, 28(2), 214–20.

doi:10.1016/j.fm.2010.03.007

Bacillus clausii

Cutting, S. M. (2011). Bacillus probiotics. Food microbiology, 28(2), 214–20.

doi:10.1016/j.fm.2010.03.007

• Suspensión de 2x109 esporas en 5mL de agua

• Prevenir la diarrea• Alergias en niños • Cuatro cepas resistentes a

antibióticos• Novobiocina + Rifampicina• Cloranfenicol• Estreptomicina + Neomicina• Tetraciclina• Resistencias estables e incapaces

de transferir??

Bacillus coagulans

Cutting, S. M. (2011). Bacillus probiotics. Food microbiology, 28(2), 214–20.

doi:10.1016/j.fm.2010.03.007

• Coagülina (Bacteriocina)• Amplio espectro contra bacterias

entéricas.• Único incluido en el listado GRAS de

la FDA• Alimentos tratados con temperatura.• Terapia complementaria para la AR.• Recientemente cuestionado

• Estudios que comprueben su eficacia son necesarios

Bacillus cereus

Cutting, S. M. (2011). Bacillus probiotics. Food microbiology, 28(2), 214–20.

doi:10.1016/j.fm.2010.03.007

• Patógeno humano• Intoxicación alimentaria• Enterotoxinas

• No todas las cepas tiene los genes• Paciflor, uso animal

• Se retiro del mercado• Bactisubtil, misma cepa de Paciflor

Protection activity of a novel probiotic strain of Bacillus subtilis againstSalmonella Enteritidis infection

Investigar la actividad de las cepas de Bacillus spp. para su posible uso como potenciales probióticos, y su actividad de

inhibición protectora contra la infección por Salmonella Enteritidis.

Sallmonella

METODOLOGÍA

24033

117BG+ | E+ | C+

S. Enteritidis S. Typhimurium E. coli Bacillus cereus Staphylococcus aureus L. monocytogenes Vibrio cholerae

ANTAGONISMO

15

TOLERANCIA A ACIDO Y SALES BILIARES

Ligada a una mayor capacidad de adherencia y activar una respuesta inmune benéfica

HIDROFOBICIDAD CELULAR

ADHESIÓN A CÉLULAS EPITELIALES

16s → NC11 → BS

RESISTENCIA A ANTIBIOTICOS

CITOTOXICIDAD

MEB Control

Salmonella Enteritidis

B. subtilis NC11

B. subtilis NC11 vs. S. Enteritidis sobre celulas

intestinales

• B. subtilis, B. licheniformis, B. pumilus, B. megaterium, B. firmus, B. clausii, y B. cereus

• 117 Aislamientos y solo 15 presentaron actividad antimicrobiana contra bacterias patógenas• S. Enteritidis

• Sobreviven a el ambiente gastrointestinal

• Mayor habilidad de adherencia → Bacillus NC11

• Necesario confirmar si es seguro para uso en humanos

• La inhibición de S. Enteritidis por parte de B. subtilis NC11 es debida a exclusión competitiva por el sitio de adhesión y la producción de sustancias antimicrobianas

• La cepa de B. subtilis NC11 tiene una actividad protectora contra S. Enteritidis

CONCLUSIONES

¿Recomiendan el uso de cepas de Bacillus sp. como probióticos?