Download - Immobiline-based two-dimensional gel electrophoresis: An optimised protocol for resolution of human colonic mucosal proteins

��

�� !�� "�#$$� � �� $�% �� &'#$ �� % �� (��)*+� ��,�� -�� .�� #$$ �� /�0� �� / � �� /$�1� !� �� !� �� .��

�� !�� 2 .�� 2 .��

2 3�� 2 �� 2 1� �� 45 &66$

��

��

!�� "� ��

�� #��$

%� &�� '�(��

#7�� )��3�� 1� �� 89�� )��.�� 3��&3�� 1��9�� :�� )�� ;)��

�� .�� #�%�<#=� �� (.�:+ �� !�� .4* �� (�� + �� -�� .�: �� !�� "�#$$� �� !�� (&'#$�0+ �� ,�� -��

*�� !� �� /�1 �� #$ �� >�� 4>�� !� �� 0$ �� ,� �� ?��

�� '@$�1� � �� A�� ,� �� !�� "�#$$� � �� $�% �� &'#$ �� % �� )*(�� #6$ �� )* ��- �� +� !� �� ?�� 4�� #�0 �5 4�� > �� 0$$ �5 �� # � �� )�� ?�� (0$$ �5+ �� % � �� $�0 !�� "�#$$� � �� $�% �� &'#$� �� $�# �� !�� >�� > �� #$ �� #$ $$$ � ��

.�� 3��)�� (#@�#�&0�$#B �� 7�� )��+ �� &�$'#$�0 (#�$ � &�& � $�0 ��+ �� $ �� #$$ �� /�0� ��/ �� #0 �� (�� + �� (33�+ �� &$ �� 33�� )�� ,�� .�� % � �� $�0 !�� "�#$$� #$ �� 3!!� � �� C�� : �� : ��: �� , �� -�� -�� $�0 �� 33� ��

�� 3�� 1� 1�� 3�� 9�� ;�� )�� )� 5��;)� �$60� �� %�� D��)*� E6#��/&@�0/�$

�� #�� &/6@'&/@# &/6@

F �.54G�H1� H� �� :�� 6�/0# �� #�� $#@&�$%&02��2#@#@�&/6@ I#@�0$E�0$2$

!��

� +%

#0 �� .�� .. �� (��+� �� /$�1�� !�� .. �� (��+�� #$$ �5 �� .�� .�� &$$ H �� & � �� &0$$ H �� /� � �� #&$ $$$ H�� .�� 33� �� ,� �� '@$�1� *�� .�� #0 �� ?�� $�$0 � !��1 � �� 6�%� 6 � �� &$ � �� # )3) �� 33�� *�� 0 ��3!! �� #$ �5 �� ?�� B�� $�/0 � �� #$ �5 �� ?��

� �� (�0$ � #�$ � $�0 ��+ �� %'#% �� 0 ��-�� )3)��:4� ��,�� (�3�+ <�= �� -� (��6 1+� �� $�#� � !�� $�#� � �� $�# )3)� ��6�/� �� (��)+ �� ,�� (3��.�+<&=� !� � �� (: �� : �� + �� > �� 33�� #$ �� !� )3) � �� -�� )3) �� !� ?�� .�� ' � �� ' �� )3) � � # �� 4 �� #$�1 �� >�� /$$ H �� &$ ��

&/6% 1� 1�� #�� &/6@'&/@#

)�� !� �� .�� 3 � �� !� �� .�: �� #�$ �� &'#$�0� �� #$$ �� /�0� �� / �� >�� !� �� %'#% �� )3)��:4 �� 0 ��-�� #�$ �� -�� J �$$� ##6� �@� 66� 00� &@� &#� �� #/� �� 6 -3��

�� >�� !� �� #0 �� - �� !� .�� @0 �� (�� #$ ��+�!� �� .�� @0 �� 4 �� (�� /�0 �+� *� �� .�� > �� # � �� $ !1� �� # )�� H�� #@ �� </=B �� : � �� > �� -�� 3��- <0=� *�� # �� .� �� ?�� : �� .� �� $$$ ��

��3 ��:4 �� .� �� - �� !�� 3 ��:4 �� >�� K�� .�: �� &�0'#$ �� % � �� / 1��)� � �� (3!! �� +� 9�� <6= �� (& � #$@2�5+ �� )�� - �� <@=�� $ �� B �� ?�� #$'0$ �� B �� 1��)2��2�� -�� ,�� -�� .�: �� >��

� �� ,�� -�� (!�� "�#$$� �� K�3�� + �� ,�� J 1��) �� &�<(&�� +�� =��>��#�� (1��)C+� �� J �� #�#�&�&�� (!�7+�

� �� !�� "�#$$2�� 2�� -�� >�� .�: �� 0$ �� (�� +�

9�� .4*�� -� �� .�� <%= �� >�� <�'##=� !�� -� �� .�� !� �� .�� B �� .�: �� (1�2.�:+�� > �� <�=�

!�� .�� .4* �� .�: � �� #$$ �� /�0� �� /0 �� <#$= �� .4* �� (�� +<##=� �� 3 ��:4� �� .� �� 3 ��:4 ��- �� >�� ,�� -�� -�� .4* �� >�� .�� !� �� B �� / � �� .�� 3!!� �� .�� >��

1�� .4* �� -�� .�� .4* �� #$'�0�1� �� .�: � � �� .�� $�1� �� -�� 3 �� .�: � �� /'@ <#�=� .� ��

�� #�� &/6@'&/@# ��3 �� &/6�

�� >�� .4* �� C�� #$� #0� �$� �0� &$� &0� /$� /0� �� 0$�1� !�� /$�1� �� /0�1 �� -�� /$�1� �� ?�� (#$'�$�1B �� +� �� ?�� #$�� /0�1 (�� + �� -�� .� �� <#�=� � �� -�� )�� (�� +�� >�� &$ �� .4*�

*�� .�� #$$ �� / � �� .4* �� /$�1� � �� *�� /� (�� + �� /� (�/ � �� + �� .�� / � ��

#$$ �� *�� /� (.4* ��/$�1+ �� /� (.4* �� #$�1+ � �� /$�1�

.� �� - �� .4* �� .�:� �� ,�� -�� !�� ?�� ?�� !�� "�#$$� $�% �� % � �� 3 � �� K� �� ,�� -��J (�+ � �/ � �� .�� #$$ �� /�0B �� (��+ �� /$�1 �� .4*�

� � �� .�� 3 ��:4� �� 3 �� )�� L��

�� !�� "�� "�� #��

&/@$ 1� 1�� #�� &/6@'&/@#

)�� !� �� .4* �� 3 �� (�+ .4* �� /$�1 �� B (�+ .4* �� /$�1 �� / � �� .�� #$$ �� /�0B (�+ .4* �� #$�1 �� / � �� .�� #$$ �� /�0�*�� .4* �� ##$ �� .�: �� &'#$�0� )�� )3)��:4 �� %'#% �� 0 ��-�� #$$ �� : � �� 1�� K�� K ��

�� $�� %�� &�� #��' �� ' ��

9�� *�� #��B �� A� � �6� #��

��

<#= KL ?�� K�� 4-� M�� 9�� :�� :��,,�� 4�� :N�� 9�� (� )�� )��'�� *��#�%�� +� #&/'#00�

<�= �� 3� *�� -� �� 1� 9�� %�� )��,�� #�%%� -./� /#�'/�&�

<&= �� 3� *�� 1� 9�� %�� 0�� #�%%� -� &0'/$�

</= �� ;� �� *�� 9�� K� A�� #�%%� 1� /%%'/�6�

<0= ��-�� A�� 3��-� 9�� J 9�� K� A� (4�+� ��,��,2�� 3+4� !�� 7��O�� P��#�%6� �� '�@�

<6= 9�� )��,� A��1�� )�� 1�� 9�� !�� )�� M�� !�� 3� *�� M��-� �� *�� #��@� -+�6��'6�/�

<@= )�� -� A�� K�� A�� A��-� �� 5�� *�� M�� #��@� -+� 6�0'6�%�

<%= �� 4�� *�� :��,,�� 4�� 9�� :�� #�%@� 4� #6�'#@$�

<�= 9�� !�� : �� 1�� K�� 5�� 9�� :�� ,�� #�%@� +� &$0'&#��

<#$= 9�� :�� 1�� 1�� 4�� 1�� 1�� %��0�� #�%�� -� ##0'#�#�

<##= � � �� M�� K�� K��,�� #�%@�+� ��&'��@�

<#�= :N�� *�� 1�� M��-� 9�� )�� A� 9�� )� �� #��#� - � 60&'60%�

�� #�� &/6@'&/@# ��3 �� &/@#