Vitrifikacija oocita i sekundarni ICSI – doprinos kumulativnom uspjehu liječenja
-
Upload
marvin-salas -
Category
Documents
-
view
52 -
download
1
description
Transcript of Vitrifikacija oocita i sekundarni ICSI – doprinos kumulativnom uspjehu liječenja
![Page 1: Vitrifikacija oocita i sekundarni ICSI – doprinos kumulativnom uspjehu liječenja](https://reader035.fdocuments.net/reader035/viewer/2022062314/56812fd4550346895d954fd0/html5/thumbnails/1.jpg)
Vitrifikacija oocita i sekundarni ICSI – Vitrifikacija oocita i sekundarni ICSI –
doprinos kumulativnom uspjehu liječenjadoprinos kumulativnom uspjehu liječenja
11Patrik Stanić, Patrik Stanić, 11Višnja Hlavati, Višnja Hlavati, 22Sanda Koprivc Varga i Sanda Koprivc Varga i 22Danko DobecDanko Dobec
11Klinika za ženske bolesti i porodeKlinika za ženske bolesti i porode Kliničkog bolničkog centra ZagrebKliničkog bolničkog centra Zagreb22Poliklinika IVF ZagrebPoliklinika IVF Zagreb
![Page 2: Vitrifikacija oocita i sekundarni ICSI – doprinos kumulativnom uspjehu liječenja](https://reader035.fdocuments.net/reader035/viewer/2022062314/56812fd4550346895d954fd0/html5/thumbnails/2.jpg)
Priprema hranilištai otopina
IVF/ICSIIzdvajanjeoocita
Aspiracijafolikula
Izdvajanje i koncentriranje
spermija
Prikupljanjeejakulata
Kultivacija 18-20 h
Potvrda oplodnje (2PRN)
Promjena hranilišta
Kultivacija 24 h
Broj i morfologijazametaka
Kultivacija 24 h
Transfer embrija 2/3 dan
Promjena hranilišta
Kultivacija 24-48 h Transfer morula/blastocista
Kriopohrana
Kultivacija gameta i zametaka
Stimulacijajajnika
Kriopohrana
KriopohranaSekundarni ICSI
![Page 3: Vitrifikacija oocita i sekundarni ICSI – doprinos kumulativnom uspjehu liječenja](https://reader035.fdocuments.net/reader035/viewer/2022062314/56812fd4550346895d954fd0/html5/thumbnails/3.jpg)
Kumulativno povećanje stupnja trudnoća po aspiriranim oocitama
ZAMRZAVANJEOOCITA
ZAMRZAVANJEEMBRIJA
IVF/ICSI
KUMULATIVNO TRUDNOĆE(najrelevantniji indeks uspjeha)
![Page 4: Vitrifikacija oocita i sekundarni ICSI – doprinos kumulativnom uspjehu liječenja](https://reader035.fdocuments.net/reader035/viewer/2022062314/56812fd4550346895d954fd0/html5/thumbnails/4.jpg)
Indikacije za Indikacije za zazamrzavanje mrzavanje humanih embrijahumanih embrija
smanjenje broja transferiranih embrija
smanjenje višeplodnih trudnoća
odgoda ET (OHSS, endometralni polip)
zakonske odredbe o zabrani ET više od jednog embrija
![Page 5: Vitrifikacija oocita i sekundarni ICSI – doprinos kumulativnom uspjehu liječenja](https://reader035.fdocuments.net/reader035/viewer/2022062314/56812fd4550346895d954fd0/html5/thumbnails/5.jpg)
Indikacije za Indikacije za zazamrzavanje mrzavanje humanih oocitahumanih oocita
kemoterapija ili radijacijska terapija
kirurške operacije na spolnom sustavu
donorska banka oocita
odgađanje majčinstva
zakonske odredbe o ograničenju broja oplođenih oocita
![Page 6: Vitrifikacija oocita i sekundarni ICSI – doprinos kumulativnom uspjehu liječenja](https://reader035.fdocuments.net/reader035/viewer/2022062314/56812fd4550346895d954fd0/html5/thumbnails/6.jpg)
Procesi zamrzavanja i odmrzavanja
toplinski šok
unutarstanično stvaranje kristala leda
dehidracija i rehidracija
početna kvaliteta gameta i zametaka
sastav medija za zamrzavanje
postupak zamrzavanja i odmrzavanja
![Page 7: Vitrifikacija oocita i sekundarni ICSI – doprinos kumulativnom uspjehu liječenja](https://reader035.fdocuments.net/reader035/viewer/2022062314/56812fd4550346895d954fd0/html5/thumbnails/7.jpg)
Moguća oštećenja oocita tijekom kriopohraneMoguća oštećenja oocita tijekom kriopohrane
Depolimerizacija diobenog vretena
Oštećenja citoplazme i citoskeleta
Stvrdnuće zone pellucide
Degeneracija polarnog tjelešca
Utjecaj na fiziologiju i starenje oocite
Propusnost membrane
![Page 8: Vitrifikacija oocita i sekundarni ICSI – doprinos kumulativnom uspjehu liječenja](https://reader035.fdocuments.net/reader035/viewer/2022062314/56812fd4550346895d954fd0/html5/thumbnails/8.jpg)
Kriopohrana oocita –Kriopohrana oocita –odabir metode, medija i nosačaodabir metode, medija i nosača
Sporo zamrzavanjeSporo zamrzavanje COOK, MediCult, VitrolifeCOOK, MediCult, Vitrolife
VitrifikacijaVitrifikacija Kitazato, MediCult, Irvine ScientificKitazato, MediCult, Irvine Scientific
cryotopcryotop
cryoleafcryoleaf
cryoloopcryoloop
cryotipcryotip
![Page 9: Vitrifikacija oocita i sekundarni ICSI – doprinos kumulativnom uspjehu liječenja](https://reader035.fdocuments.net/reader035/viewer/2022062314/56812fd4550346895d954fd0/html5/thumbnails/9.jpg)
KrioprotektoriKrioprotektori
Permeabilni krioprotektoriPermeabilni krioprotektori glicerol, etilenglikol (EG), 1,2-propandiol (PROH), glicerol, etilenglikol (EG), 1,2-propandiol (PROH),
dimetilsulfoksid (DMSO)dimetilsulfoksid (DMSO)dehidracijadehidracija
smanjenje točke ledištasmanjenje točke ledišta
ne toksičnine toksični
Ne permeabilni krioprotektoriNe permeabilni krioprotektori saharozasaharoza
osmotski puferosmotski pufer
![Page 10: Vitrifikacija oocita i sekundarni ICSI – doprinos kumulativnom uspjehu liječenja](https://reader035.fdocuments.net/reader035/viewer/2022062314/56812fd4550346895d954fd0/html5/thumbnails/10.jpg)
Postupci zamrzavanja
Kontrolirano sporo zamrzavanjeKontrolirano sporo zamrzavanje(Whittingham et al., 1972)(Whittingham et al., 1972)
Vitrifikacija - ultra brzo zamrzavanjeVitrifikacija - ultra brzo zamrzavanje(Rall (Rall && Fahy, 1985 Fahy, 1985))
Kontrolirano sporo zamrzavanjeKontrolirano sporo zamrzavanje VitrifikacijaVitrifikacija
Konc. krioprotektoraKonc. krioprotektora 1,5 M1,5 M 3,0-5,0 M3,0-5,0 M
VolumenVolumen 0,3-1,0 ml0,3-1,0 ml <<1 1 μμll
Kontakt NKontakt N22 i stanice i stanice Ne Ne DaDa
Stupanj hlađenjaStupanj hlađenja ~~ 0,5 0,5°°C/minC/min 15.000 – 50.00015.000 – 50.000°°C/minC/min
ZamrzavanjeZamrzavanje SporoSporo UltrabrzoUltrabrzo
OdmrzavanjeOdmrzavanje SporoSporo BrzoBrzo
Vrijeme postupkaVrijeme postupka ≥ ≥ 180 min.180 min. 2 sec.2 sec.
DehidracijaDehidracija Nije kontroliranaNije kontrolirana KontroliranaKontrolirana
Lomovi zone pelucideLomovi zone pelucide MogućeMoguće NeNe
Stvaranje kristala ledaStvaranje kristala leda DaDa NeNe
Smanjenje osmotskog stresaSmanjenje osmotskog stresa NeNe DaDa
![Page 11: Vitrifikacija oocita i sekundarni ICSI – doprinos kumulativnom uspjehu liječenja](https://reader035.fdocuments.net/reader035/viewer/2022062314/56812fd4550346895d954fd0/html5/thumbnails/11.jpg)
Sporo zamrzavanje vs vitrifikacijaSporo zamrzavanje vs vitrifikacija
sporo zamrzavanjesporo zamrzavanje 50-76% stupanj preživljenja50-76% stupanj preživljenja 13-38% stupanj trudnoća/ET 13-38% stupanj trudnoća/ET (Porcu 2000, Boldt 2006, Borini 2007)(Porcu 2000, Boldt 2006, Borini 2007)
91% stupanj preživljenja 91% stupanj preživljenja (La (La et alet al., 2010)., 2010)
vitrifikacijavitrifikacija 63-100% stupanj preživljenja63-100% stupanj preživljenja 6,4-61% stupanj implantacije 6,4-61% stupanj implantacije (Cobo, 2009)(Cobo, 2009)
![Page 12: Vitrifikacija oocita i sekundarni ICSI – doprinos kumulativnom uspjehu liječenja](https://reader035.fdocuments.net/reader035/viewer/2022062314/56812fd4550346895d954fd0/html5/thumbnails/12.jpg)
Sporo zamrzavanje vs vitrifikacijaSporo zamrzavanje vs vitrifikacija
mnoge studije su retrospektivne, ne komparativnemnoge studije su retrospektivne, ne komparativne
podaci o trudnoćama nedostatni za analizepodaci o trudnoćama nedostatni za analize
preživljenje embrija/blastocista favorizira vitrifikaciju preživljenje embrija/blastocista favorizira vitrifikaciju (Loutradi, 2008)(Loutradi, 2008)
razvoj do stadija blastociste iz zamrznutih embrija u stadiju diobe razvoj do stadija blastociste iz zamrznutih embrija u stadiju diobe favorizira vitrifikacijufavorizira vitrifikaciju
nema statistički značajne razlike u stupnju kliničkih trudnoća/ETnema statistički značajne razlike u stupnju kliničkih trudnoća/ET
![Page 13: Vitrifikacija oocita i sekundarni ICSI – doprinos kumulativnom uspjehu liječenja](https://reader035.fdocuments.net/reader035/viewer/2022062314/56812fd4550346895d954fd0/html5/thumbnails/13.jpg)
Vitrifikacija oocita: rezultati Cryotop metodeVitrifikacija oocita: rezultati Cryotop metode
Kuwayama M. Theriogenology 2007.
broj vitrificiranih oocita (MII) 111
stupanj preživljenja 95%
stupanj oplodnje (ICSI) 91%
razvoj blastociste 50%
stupanj trudnoća/ET (2,2 zametka/ET)
41%
Cryotop metoda
EG / DMSO + saharoza
![Page 14: Vitrifikacija oocita i sekundarni ICSI – doprinos kumulativnom uspjehu liječenja](https://reader035.fdocuments.net/reader035/viewer/2022062314/56812fd4550346895d954fd0/html5/thumbnails/14.jpg)
Vitrifikacija oocita: rezultati Cryotop metode
Vitrificirane oocite Svježe oocite
Stupanj preživljenja (%) 96,7%
Stupanj oplodnje (%) 76,3% 82,2%
Dioba na dan 2 94,2% 97,8%
Dioba na dan 3 80,8% 80,5%
Razvoj blastociste (%) 48,7% 47,5%
Cobo et al., Fertil Steril 2007.
![Page 15: Vitrifikacija oocita i sekundarni ICSI – doprinos kumulativnom uspjehu liječenja](https://reader035.fdocuments.net/reader035/viewer/2022062314/56812fd4550346895d954fd0/html5/thumbnails/15.jpg)
Vitrifikacija oocita - McGill Reproductive CenterVitrifikacija oocita - McGill Reproductive Center
Chian et al. (2005) ASRM Annual Meeting
Pacijentice (ciklusa) 25 (25)
Dob pacijentica 31.8 ± 3.6
Broj odmrznutih oocita 283 (11.3 ± 5.9)
Broj preživjelih oocita (%) 253 (89.4)
Broj oplođenih oocita (%) 179 (72.7)
Broj oocita u diobi (%) 155 (80.0)
Broj transferiranih embrija 92 (3.7 ± 1.1)
Broj kliničkih trudnoća (%) 11 (44.0)
Broj implantiranih embrija (%) 15 (20.7)
![Page 16: Vitrifikacija oocita i sekundarni ICSI – doprinos kumulativnom uspjehu liječenja](https://reader035.fdocuments.net/reader035/viewer/2022062314/56812fd4550346895d954fd0/html5/thumbnails/16.jpg)
Nove strategije u kliničkoj primjeni –Nove strategije u kliničkoj primjeni –IVM + vitrifikacija oocitaIVM + vitrifikacija oocita
pacijentice oboljele od malignih bolestipacijentice oboljele od malignih bolesti IVM postupak nezrelih oocita + vitrifikacijaIVM postupak nezrelih oocita + vitrifikacija izbjegnuta hormonska stimulacijaizbjegnuta hormonska stimulacija
odgoda majčinstvaodgoda majčinstva IVM postupak nezrelih oocita + vitrifikacijaIVM postupak nezrelih oocita + vitrifikacija čuvanje plodne sposobnostičuvanje plodne sposobnosti
program donacije oocitaprogram donacije oocita potencijalna donorica izbjegava hormonsku stimulacijupotencijalna donorica izbjegava hormonsku stimulaciju
![Page 17: Vitrifikacija oocita i sekundarni ICSI – doprinos kumulativnom uspjehu liječenja](https://reader035.fdocuments.net/reader035/viewer/2022062314/56812fd4550346895d954fd0/html5/thumbnails/17.jpg)
Trudnoće nakon vitrifikacije oocita u Trudnoće nakon vitrifikacije oocita u mladih plodnih pacijenticamladih plodnih pacijentica
Kim TJ et al., Fertil Steril 2010Kim TJ et al., Fertil Steril 2010
(n) odmrznutih oocita 395
(n) stupanj preživljenja oocita (%) 320 (81,0%)
2 PRN 72,3%
(n) embrija / (n) ET 53/19
(n) kliničke trudnoće/ET (%) 16/19 (80%)
(n) implantiranih embrija (%) 24 (45,3%)
živorođena djeca/odmrznuta oocita 5,1 %
![Page 18: Vitrifikacija oocita i sekundarni ICSI – doprinos kumulativnom uspjehu liječenja](https://reader035.fdocuments.net/reader035/viewer/2022062314/56812fd4550346895d954fd0/html5/thumbnails/18.jpg)
Klinički ishod – sporo zamrzavanje Klinički ishod – sporo zamrzavanje oocita neplodnih pacijenticaoocita neplodnih pacijentica
Borini et al., Fertil Steril 2010Borini et al., Fertil Steril 2010
(n) ciklusa s odmrzavanjem oocita 940
stupanj preživljenja oocita 55,8%
2 PRN 72,5%
kliničke trudnoće/ciklus 13,7%
kliničke trudnoće/ET 17,0%
implantacija 10,1%
![Page 19: Vitrifikacija oocita i sekundarni ICSI – doprinos kumulativnom uspjehu liječenja](https://reader035.fdocuments.net/reader035/viewer/2022062314/56812fd4550346895d954fd0/html5/thumbnails/19.jpg)
Kumulativni rezultati – trudnoće prije i nakon Kumulativni rezultati – trudnoće prije i nakon uvođenja ograničenja oplodnjeuvođenja ograničenja oplodnje
Borini et al., 2008.Borini et al., 2008.
Kumulativne trudnoće sa Kumulativne trudnoće sa zamrznutim embrijima zamrznutim embrijima
(1992-2004)(1992-2004)
Kumulativne trudnoće sa Kumulativne trudnoće sa zamrznutim oocitama zamrznutim oocitama
(2004-2008)(2004-2008)
sve pacijentice 50% 49%
≤34 54% 53%
35-38 50% 52%
39-40 34% 47%
41-43 25%
>=43 15%26%
![Page 20: Vitrifikacija oocita i sekundarni ICSI – doprinos kumulativnom uspjehu liječenja](https://reader035.fdocuments.net/reader035/viewer/2022062314/56812fd4550346895d954fd0/html5/thumbnails/20.jpg)
Klinički ishod – vitrifikacija oocita Klinički ishod – vitrifikacija oocita neplodnih pacijenticaneplodnih pacijentica
Rienzi et al., Human Reproduction 2009Rienzi et al., Human Reproduction 2009
Pacijentice (N=40)Pacijentice (N=40)
(n) odmrznutih oocita 3,1
(n) transferiranih zametaka 2,3
(n) ET 39/40 (97,5%)
kliničke trudnoće/ciklus 15/40 (37,5%)
kliničke trudnoće/ET 15/39 (38,5%)
implantacija 19/93 (20,4%)
![Page 21: Vitrifikacija oocita i sekundarni ICSI – doprinos kumulativnom uspjehu liječenja](https://reader035.fdocuments.net/reader035/viewer/2022062314/56812fd4550346895d954fd0/html5/thumbnails/21.jpg)
Kumulativni rezultati – trudnoće nakon Kumulativni rezultati – trudnoće nakon svježeg ciklusa te vitrifikacije oocita u svježeg ciklusa te vitrifikacije oocita u
neplodnih pacijenticaneplodnih pacijentica
Rienzi Laura. Oral Presentation ESHRE Campus 2010 “The search for excellence in Rienzi Laura. Oral Presentation ESHRE Campus 2010 “The search for excellence in
IVF: a practical approach”IVF: a practical approach”
Svježi ciklusSvježi ciklus I ciklus odmrzavanjaI ciklus odmrzavanja II ciklus odmrzavanjaII ciklus odmrzavanja
sve pacijentice
66/182 (37,4%) 94/182 (51,6%) 97/182 (53,3%)
≤34 29/72 (40,2%) 45/72 (62,5%) 45/72 (62,5%)
35-37 20/48 (41,7%) 23/48 (47,9%) 24/48 (50,0%)
38-40 15/41 (36,6%) 20/41 (48,8%) 21/41 (51,2%)
41-43 4/21 (19,0%) 6/21 (28,6%) 7/21 (33,3%)
![Page 22: Vitrifikacija oocita i sekundarni ICSI – doprinos kumulativnom uspjehu liječenja](https://reader035.fdocuments.net/reader035/viewer/2022062314/56812fd4550346895d954fd0/html5/thumbnails/22.jpg)
KLINIČKI BOLNIČKI CENTAR ZAGREB KLINIČKI BOLNIČKI CENTAR ZAGREB Kumulativni rezultati za 2010 godinuKumulativni rezultati za 2010 godinu– trudnoće po stimuliranom ciklusu u neplodnih pacijentica sa – trudnoće po stimuliranom ciklusu u neplodnih pacijentica sa zamrznutim oocitamazamrznutim oocitama
Svježi ciklusSvježi ciklus I ciklus odmrzavanjaI ciklus odmrzavanja
Broj pacijentica 79 29
Dob pacijentica 32 33,2
Broj oocita 9,7 (770/79) 3,2 (94/29)
Stupanj preživljenja oocita 65% (61/94)
Stupanj oplodnje 79% 69%
Stupanj implantacije 20,4% 12,2%
Stupanj trudnoća/ET 44% (34/77) 17,8% (5/28)
Kumulativno trudnoće/ stimulirani ciklus
49,4% (39/79)
![Page 23: Vitrifikacija oocita i sekundarni ICSI – doprinos kumulativnom uspjehu liječenja](https://reader035.fdocuments.net/reader035/viewer/2022062314/56812fd4550346895d954fd0/html5/thumbnails/23.jpg)
POLIKLINIKA IVF ZAGREB POLIKLINIKA IVF ZAGREB Kumulativni rezultati za 2010 godinuKumulativni rezultati za 2010 godinu– trudnoće po stimuliranom ciklusu u neplodnih pacijentica sa – trudnoće po stimuliranom ciklusu u neplodnih pacijentica sa zamrznutim oocitamazamrznutim oocitama
Svježi ciklusSvježi ciklus I ciklus odmrzavanjaI ciklus odmrzavanja
Broj pacijentica 45 20
Dob pacijentica 35 36
Broj oocita 7,8 (351/45) 2,6 (52/20)
Stupanj preživljenja oocita 76,9% (40/52)
Stupanj oplodnje 78% 72%
Stupanj implantacije 14% 17,2%
Stupanj trudnoća/ET 34,8% (15/43) 29,4% (5/17)
Kumulativno trudnoće/ stimulirani ciklus
44,4% (20/45)