Vezba 4 - Antibiogram
-
Upload
danijela-radocaj -
Category
Documents
-
view
274 -
download
6
description
Transcript of Vezba 4 - Antibiogram
-
ISPITIVANJE OSETLJIVOSTI BAKTERIJA NA ANTIBIOTIKE I HEMIOTERAPEUTIKE
-
ta je antibiogram?Postupak za ispitivanje osetljivosti bakterija na antibiotike i hemioterapeutikeMetode antibiograma
Kombinovani metod(E test)Difuzioni metodDilucioni metod
-
MIK: minimalna inhibitorna koncentracijanajmanja koncentracija antibiotika koja spreava rast i razmnoavanje bakterija
MBK: minimalna baktericidna koncentracijanajmanja koncentracija antibiotikakoja izaziva smrt bakterija
-
Disk difuzioni metod antibiogramaPravljenje suspenzije odreene gustine od ispitivane bakterijske kultureIz iste bakterijske kulture uzeti 4-5 kolonija ezomPoreenje bakterijske suspenzije sa standardom odreene gustineZasniva se na principu difuzije antibiotika kroz vrstu hranljivu podlogu (agar) prethodno zasejanu ispitivanom bakterijskom kulturom.
-
Disk difuzioni metod antibiogramaRavnomerno nanoenje bakterijske suspenzije brisem na celu povrinu agara (najee Mueller-Hinton) da bi se dobio konfluentan porastBris natopiti suspenzijom bakterija i ocediti viak tenosti lakim pritiskom o zidove epruvete PravilnoNepravilno
-
Disk difuzioni metod antibiogramaStavljanje diskova sa odreenim (standardnim) koncentracijama antibiotika pincetomInkubacija u termostatu na 37C od 16 - 24 hRaspored diskova sa antibioticima
-
ta se deava tokom inkubacije?bakterije se umnoavajuantibiotik difunduje kroz podloguKoncentracija antibiotika postepeno i radijalno opada sa udaljavanjem od diska sve do take gde vie nije inhibitorna i gde se pojavljuje porast bakterija.Nastaje zona inhibicije rasta.24 hvrsta hranljiva podloga zasejana istom bakterijskomkulturomitanjerezultata37CAntibiogram diskovi
-
Oitavanje rezultata disk difuzionog metoda antibiogramaZona inhibicije rasta: okrugla zona oko diska sa antibiotikom u kojoj nema vidljivog porasta bakterijaMerenje prenika zone inhibicije
-
Tumaenje rezultata disk difuzionog metoda3 kategorije osetljivosti:
osetljivintermedijarno (umereno) osetljivrezistentan
-
Tumaenje rezultata disk difuzionog metodaDijametar zone inhibicije rastaUporediti izmerene prenike zona inhibicije ispitivane bakterije sa standardnim preporuenim zonama za odreenu bakteriju i odreeni antibiotikPrimer preporuenih zona
-
Rezultati disk difuzionog metoda antibiograma
-
Disk difuzioni metodPrednosti:istovremeno se ispituje osetljivost na vei broj antibiotikajednostavanrelativno brz (24 h)Ogranienja:ne moe se odrediti MIK (odnosno MBK)Kvalitativan metod u rutinskoj upotrebi
-
Dilucioni metod antibiogramadilucioni: niz dvostrukih razblaenja antibiotika u odgovarajuoj podlozi
Prema podlozi u kojoj se prave razblaenja antibiotika:
bujon dilucioni metod
agar dilucioni metod
-
100 lBakterijska suspenzijaAntibiotik (g/ml)BujonMBK = 0,5 g/mlMBKMIKMIK = 0,25 g/ml+24 h37C24 h37C0,030,060,1250,250,5Bujon dilucioni metod antibiogramaMIK: najmanja koncentracija antibiotika koja inhibira porast bakterija (bujon ostaje bistar)MBK: presejavanjem svih razblaenja koja inhibiraju porast bakterija
-
Bujon dilucioni metod antibiogramaPrednosti:mogunost odreivanja MIK i MBK
Ogranienja:ispituje se osetljivost jedne bakterijske vrste na jedan antibiotiksloena tehnika izvoenjatrajanje > 24 h
-
24 h37CPlastina traka impregniranaantibiotikom u gradijentukoncentracije Zasniva se na principu difuzije antibiotika kroz vrstu hranljivu podlogu (agar) prethodno zasejanu ispitivanom bakterijskom kulturom. Opadajui gradijent koncentracije antibiotika na E test traci.Kombinovani metod antibiograma: E testZona inhibicije: elipsa
-
E test i disk difuzioni metod: razlike u zoni inhibicije
-
itanje rezultata E testa
vrednost MIK: oitava se na skali koncentracija na E test traci na mestu gde linija zone inhibicije rasta preseca ivicu E test trakeMIK
-
Rezultati E testa
-
E testPrednosti:direktno oitavanje vrednosti MIKistovremeno se ispituje osetljivost na vei broj antibiotikajednostavanrelativno brz (24 h)Ogranienja:visoka cena
-
konvencionalna dijagnostika:2 do 4 danai transportObradabrza dijagnostika:krae (~ do 24h)
-
SKRAENICE ANTIBIOTIKAA - AmpicilinConet - ImipenemCef3 - Ceftriakson (Longaceph)Met - MeticilinChl - HloramfenikolG - GentamicinCip - CiprofloksacinB - Trimetoprim+sulfametoksazol (Bactrim)V - Vankomicin