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venerdì 4 maggio 2012
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Centro Università di Milano-Scuolaper la diffusione delle Bioscienze
e delle Biotecnologie
venerdì 4 maggio 2012
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Attività per studenti“Sperimenta il BioLab”“Una settimana da ricercatore”“Apprendisti ricercatori”
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Concorso: “Una settimana da ricercatore”
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Studenti che hanno partecipato a “Sperimenta
il BioLab” nel 2010/11
Test a scelta multipla (uguale per
tutte le classi)
Test finale: quiz al computer
Studenti che hanno partecipato al
concorso
~13000
~300
30
Vincitori
Concorso 2010/11
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Data del test finale
Il test finale del concorso si terrà il
25 maggio 2012 Presso il Settore Didattico
Università degli Studi di Milano via Celoria, 20
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Attività per insegnanti
• Corsi e Seminari• Formazione nazionale e internazionale• Happy Science
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CusMiBioIndirizzi utiliSede ufficio: Via Viotti 3/5 20133 MilanoTel 02.503.15822Fax 02.503.15864Sede laboratori: via Celoria 20 Settore Didattico
Sito: www.cusmibio.unimi.it E-mail: [email protected]
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http://www.cusmibio.unimi.it/http://www.cusmibio.unimi.it/
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La biologia molecolare:dalla teoria alla pratica
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Un lungo percorso
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La doppia elica del DNA
1953 - James Watson e Francis Crick Pubblicano su Nature la scoperta della struttura del DNA 1962 – Crick, Watson e Wilkins vincono il premio Nobel
1952 - Rosalind Franklin e Maurice Wilkins studiano la molecola del DNA con ladiffrattometria ai raggi X
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Caratteristiche del DNAOgni persona ha un caratteristico e unico profilo di DNA (salvo per i gemelli omozigoti).
Il DNA di ogni persona è lo stesso in ogni cellula.
Il profilo del DNA di un individuo rimane lo stesso durante tutta la vita.
Metà del vostro DNA deriva da vostra madre e metà da vostro padre.
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Microsatelliti: Short Tandem Repeats (STR) sono corte sequenze di basi azotate ripetute
Tetranucleotide: AAAG AAAG AAAG AAAG Trinucleotide: CTT CTT CTT CTT CTT Dinucleotide: AG AG AG AG AG AG Tetranucleotidi sono i preferiti per l’dentificazione personale
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1 aatttttgta ttttttttag agacggggtt tcaccatgtt ggtcaggctg actatggagt61 tattttaagg ttaatatata taaagggtat gatagaacac ttgtcatagt ttagaacgaa121 ctaacgatag atagatagat agatagatag atagatagat agatagatag atagacagat181 tgatagtttt tttttatctc actaaatagt ctatagtaaa catttaatta ccaatatttg241 gtgcaattct gtcaatgagg ataaatgtgg aatcgttata attcttaaga atatatattc301 cctctgagtt tttgatacct cagattttaa ggcc
D7S280, uno dei 13 CODIS STR loci geneticiSi trova nel 7° cromosoma umano;
la sequenza di DNA di un allele rappresentativo di questo locus è mostrata qui sotto
1 aattgagcnc aggagtttaa gaccagcctg ggtaacacag tgagacccct gtctctaca 61 aaaaatacaa aaatnagttg ggcatggtgg cacgtgcctg tagtctcagc tacttgcagg 121 gctgaggcag gaggagttct tgagcccaga aggttaaggc tgcagtgagc catgttcatg 181 ccactgcact tcactctgag tgacaaattg agaccttgtc tcagaaagaa agaaagaaag 241 aaagaaagaa agaaagaaag aaagaaagaa agaaagaaag aaaaagagag ggaaagaaag 301 agaaanagna aanaaatagt agcaactgtt attgtaagac atctccacac accagagaag 361 ttaattttaa ttttaacatg ttaagaacag agagaagcca acatgtccac cttaggctga 421 cggtttgttt atttgtgttg ttgctggtag tcgggtttgt tatttttaaa gtagcttatc 481 caatacttca ttaacaattt cagtaagtta tttcatcttt caacataaat acgnacaagg 541 atttcttctg gtcaagacca aactaatatt agtccatagt aggagctaat actatcacat 601 ttactaagta ttctatttgc aatttgactg tagcccatag ccttttgtcg gctaaagtga 661 gcttaatgct gatcgactct agag
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Elettroforesi del DNA
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Elettroforesi
Corsa del DNA
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La tecnica della PCR(polymerase chain reaction)
Inventata da Kary Mullis nel 1985 (premio Nobel per la chimica nel 1993)
Ha rivoluzionato la genetica molecolare
Offre la possibilità di amplificare una sequenza specifica di DNA
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http://www.jman5.com/books.htmlhttp://www.jman5.com/books.html
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I componenti della PCR
DNA
Primers
dNTPs
PCR buffer + MgCl2
Taq DNA polymerase
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Sir Alec Jeffreys
DNA FINGERPRINTING
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Colin Pitchfork: il primo criminale catturato in base al DNA fingerprinting
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DNA profiling:Tecnica di identificazione personale
La tecnica consiste nell’amplificazione simultanea di 13-15 loci STR (short
tandem repeats), altamente polimorfici e indipendenti, i cui alleli non abbiano
dimensioni sovrapponibili
(PCR STR-Multiplex)
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1. Estrazione del DNA! Test di paternità: mucosa orale! Identificazione colpevoli: sangue, saliva (bicchiere, mozzicone, ecc.), sperma, capello2. PCR! Kit commerciali con primers marcati con fluorocromi diversi! Marcatori interni di lunghezza (ladder allelico)3. Elettroforesi4. Elaborazione automatizzata dell’immagine
Fasi del DNA-profiling
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Federal Bureau of Investigation
Sistema CODIS ( Combined DNA Index System)
Utilizza13 loci STR + Locus sesso.
Ogni locus STR è identificato da una sigla (D3S1179, D8S1179, ecc.) e di ciascuno è nota la frequenza dei rispettivi alleli nella popolazione.
I dati sono stati inseriti nella Banca dati nazionale degli Stati Uniti.
Laboratori di tutto il mondo contribuiscono ai dati sulle frequenze degli alleli nelle rispettive popolazioni.
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CSF1PO
D5S818
D21S11
TH01
TPOX
D13S317
D7S820
D16S539 D18S51
D8S1179
D3S1358
FGAVWA
AMEL
AMEL
Sex-typingPenta E
Penta D
D2S1338
D19S433
CODIS: Combined DNA Index System
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I test di paternità
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madre padrefiglio
TEST DI PATERNITÀ
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CHI È IL PADRE BIOLOGICO?
padre 1madre
figlio padre 2
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