UJI BERBAGAI KONSENTRASI (EKSTRAK MAHKOTA DEWA DAN ...

50
perpustakaan.uns.ac.id digilib.uns.ac.id commit to user i UJI BERBAGAI KONSENTRASI (EKSTRAK MAHKOTA DEWA DAN MENIRAN) SERTA PENAMBAHAN PUPUK ORGANIK CAIR PADA PERTUMBUHAN TUNAS PEGAGAN ( Centella asiatica L. ) SECARA INVITRO Skripsi Untuk memenuhi sebagian persyaratan guna memperoleh derajat Sarjana Pertanian di Fakultas Pertanian Universitas Sebelas Maret Jurusan/ Program Studi Agronomi Disusun oleh : VENI SISKAYANTI H 0107095 FAKULTAS PERTANIAN UNIVERSITAS SEBELAS MARET SURAKARTA 2011

Transcript of UJI BERBAGAI KONSENTRASI (EKSTRAK MAHKOTA DEWA DAN ...

Page 1: UJI BERBAGAI KONSENTRASI (EKSTRAK MAHKOTA DEWA DAN ...

perpustakaan.uns.ac.id digilib.uns.ac.id

commit to user

i

UJI BERBAGAI KONSENTRASI (EKSTRAK MAHKOTA DEWA DAN

MENIRAN) SERTA PENAMBAHAN PUPUK ORGANIK CAIR PADA

PERTUMBUHAN TUNAS PEGAGAN ( Centella asiatica L. )

SECARA INVITRO

Skripsi Untuk memenuhi sebagian persyaratan guna memperoleh derajat

Sarjana Pertanian di Fakultas Pertanian Universitas Sebelas Maret

Jurusan/ Program Studi Agronomi

Disusun oleh :

VENI SISKAYANTI

H 0107095

FAKULTAS PERTANIAN UNIVERSITAS SEBELAS MARET

SURAKARTA 2011

Page 2: UJI BERBAGAI KONSENTRASI (EKSTRAK MAHKOTA DEWA DAN ...

perpustakaan.uns.ac.id digilib.uns.ac.id

commit to user

ii

HALAMAN PENGESAHAN

UJI BERBAGAI KONSENTRASI (EKSTRAK MAHKOTA DEWA DAN

MENIRAN) SERTA PENAMBAHAN PUPUK ORGANIK CAIR PADA

PERTUMBUHAN TUNAS PEGAGAN ( Centella asiatica L. )

SECARA INVITRO

yang dipersiapkan dan disusun oleh

VENI SISKAYANTI

H 0107095

telah dipertahankan di depan Dewan Penguji

Pada tanggal Juli 2011

dan dinyatakan telah memenuhi syarat

Susunan Tim Penguji

Ketua Anggota I Anggota II

Ir. Retna Bandriyati A.P., MS NIP. 19641114.198803.2.001

Ir. Praswanto, MS NIP.19470110.198003.1.001

Ir. YV. Pardjo NS, MS NIP. 19490323.198010.1.001

Surakarta, Juli 2011

Universitas Sebelas Maret Surakarta Fakultas Pertanian

Dekan

Prof. Dr. Ir. Bambang Pujiasmanto, MS NIP. 1956225.198601.1.001

Page 3: UJI BERBAGAI KONSENTRASI (EKSTRAK MAHKOTA DEWA DAN ...

perpustakaan.uns.ac.id digilib.uns.ac.id

commit to user

iii

KATA PENGANTAR

Segala puji dan syukur kepada Tuhan YME atas segala limpahan rahmat-

Nya kepada penulis sehingga penyusunan skripsi dengan judul “ UJI

BERBAGAI KONSENTRASI (EKSTRAK MAHKOTA DEWA DAN

MENIRAN) SERTA PENAMBAHAN PUPUK ORGANIK CAIR PADA

PERTUMBUHAN TUNAS PEGAGAN (Centella asiatica L.) SECARA

INVITRO ” dapat terselesaikan dengan baik tanpa halangan yang berarti.

Penulis menyadari bahwa dalam penyelesaian skripsi ini tidaklah lepas

dari dukungan berbagai pihak, oleh karena itu penulis menyampaikan terima kasih

yang sebesar-besarnya kepada :

1. Prof. Dr. Ir. Bambang Pujiasmanto, MS selaku Dekan Fakultas Pertanian

Universitas Sebelas Maret Surakarta

2. Ir. Pardono, MS selaku Ketua Jurusan Program Studi Agronomi FP UNS

3. Ir. Retna Bandriyati A.P., MS selaku Dosen Pembimbing Utama Skripsi

4. Ir. Praswanto, MS selaku Dosen Pembimbing Pendamping Skripsi

5. Ir. YV. Pardjo NS. MS selaku Dosen Pembahas Skripsi

6. Muji Rahayu, SP. MP selaku Dosen Pembimbing Akademik

Penulis menyadari bahwa penulisan skripsi ini masih jauh dari sempurna.

Penulis mengharapkan kritik dan saran yang membangun. Demikian, semoga

skripsi ini bermanfaat bagi penulis khususnya dan pembaca pada umumnya.

Surakarta, Juli 2011

Penulis

Page 4: UJI BERBAGAI KONSENTRASI (EKSTRAK MAHKOTA DEWA DAN ...

perpustakaan.uns.ac.id digilib.uns.ac.id

commit to user

iv

DAFTAR ISI

Halaman

KATA PENGANTAR ....................................................................................... iii

DAFTAR ISI ...................................................................................................... iv

DAFTAR TABEL ............................................................................................. vi

DAFTAR GAMBAR ......................................................................................... vii

DAFTAR LAMPIRAN ..................................................................................... ix

RINGKASAN .................................................................................................... x

SUMMARY ....................................................................................................... xi

I. PENDAHULUAN.......................................................................................... 1

A. Latar Belakang .......................................................................................... 1

B. Perumusan Masalah .................................................................................. 2

C. Tujuan Penelitian ...................................................................................... 3

II. TINJAUAN PUSTAKA ................................................................................ 4

A. Pegagan (Centella asiatica L) ................................................................... 4

B. Kultur In Vitro .......................................................................................... 5

C. Mahkota Dewa .......................................................................................... 6

D. Meniran ..................................................................................................... 7

E. Pupuk Organik Cair .................................................................................. 8

F. Media MS .................................................................................................. 9

III. METODE PENELITIAN ............................................................................. 11

A. Waktu dan Tempat Penelitian ................................................................... 11

B. Bahan dan Alat Penelitian ........................................................................ 11

C. Rancangan Penelitian ................................................................................ 12

D. Cara Kerja Penelitian ................................................................................ 13

E. Variabel Pengamatan ............................................................................... 15

F. Analisis Data ............................................................................................ 15

IV. HASIL DAN PEMBAHASAN ..................................................................... 16

A. Saat Muncul Tunas.................................................................................... 16

B. Jumlah Tunas ............................................................................................ 21

Page 5: UJI BERBAGAI KONSENTRASI (EKSTRAK MAHKOTA DEWA DAN ...

perpustakaan.uns.ac.id digilib.uns.ac.id

commit to user

v

C. Tinggi Tunas ............................................................................................. 26

D. Jumlah Daun ............................................................................................. 31

V. KESIMPULAN DAN SARAN ..................................................................... 36

A. Kesimpulan ............................................................................................... 36

B. Saran.......................................................................................................... 36

DAFTAR PUSTAKA .......................................................................................... 37

LAMPIRAN ......................................................................................................... 40

Page 6: UJI BERBAGAI KONSENTRASI (EKSTRAK MAHKOTA DEWA DAN ...

perpustakaan.uns.ac.id digilib.uns.ac.id

commit to user

vi

DAFTAR TABEL

Nomor Judul Halaman

1 Kombinasi Perlakuan ......................................................................... 12

2 Rata-rata saat muncul tunas eksplan pegagan (HST) tiap

kombinasi perlakuan .......................................................................... 16

3 Rata-rata jumlah tunas eksplan pegagan yang terbentuk tiap

kombinasi perlakuan pada umur 60 HST .......................................... 22

4 Rata-rata tinggi tunas (cm) eksplan pegagan pada umur 60 HST

tiap kombinasi perlakuan ................................................................... 30

5 Rata-rata jumlah daun eksplan pegagan pada umur 60 HST tiap

kombinasi perlakuan .......................................................................... 31

Page 7: UJI BERBAGAI KONSENTRASI (EKSTRAK MAHKOTA DEWA DAN ...

perpustakaan.uns.ac.id digilib.uns.ac.id

commit to user

vii

DAFTAR GAMBAR

Nomor Judul Halaman

1 Histogram pengaruh faktor penambahan ekstrak meniran dan

mahkota dewa terhadap persentase keberhasilan tumbuh tunas

(%)... .................................................................................................. 17

2 Histogram faktor media dasar terhadap persentase keberhasilan

tumbuh tunas (%) ............................................................................... 18

3 Histogram faktor konsentrasi pupuk organik cair (POC) terhadap

persentase keberhasilan tumbuh tunas (%) ........................................ 19

4 Grafik konsentrasi 5 ml/l dan 25 ml/l terhadap persentase

keberhasilan tumbuh tunas (%) (a) Ekstrak meniran (b) Ekstrak

mahkota dewa .................................................................................... 20

5 Tunas ke -2 kombinasi perlakuan No.1, yang terbentuk pada 19

HST .................................................................................................... 21

6 Histogram faktor konsentrasi POC terhadap rata-rata jumlah tunas

yang terbentu ...................................................................................... 22

7 Tunas yang terbentu pada 60 HST, (a) Kombinasi perlakuan no.13

(b) Kombinasi perlakuan no.9 ........................................................... 23

8 Histogram faktor penambahan ekstrak meniran dan mahkota dewa

terhadap rata-rata jumlah tunas yang terbentuk ................................ 24

9 Grafik konsentrasi 5 ml/l dan 25 ml/l ekstrak meniran terhadap

rata-rata jumlah tunas yang terbentuk ................................................ 25

10 Grafik konsentrasi 5 ml/l dan 25 ml/l ekstrak mahkota dewa

terhadap rata-rata jumlah tunas yang terbentuk ................................. 25

11 Histogram faktor media dasar terhadap rata-rata jumlah tunas yang

terbentuk ............................................................................................ 26

12 Histogram faktor media dasar terhadap rata-rata tinggi tunas (cm) .. 27

13 Histogram faktor konsentrasi POC terhadap rata-rata tinggi tunas

(cm) .................................................................................................... 28

Page 8: UJI BERBAGAI KONSENTRASI (EKSTRAK MAHKOTA DEWA DAN ...

perpustakaan.uns.ac.id digilib.uns.ac.id

commit to user

viii

14 Histogram faktor penambahan ekstrak meniran dan mahkota dewa

terhadap tinggi tunas .......................................................................... 28

15 Grafik konsentrasi 5 ml/ dan 25 ml/l ekstrak meniran terhadap rata-

rata tinggi tunas .................................................................................. 29

16 Grafik konsentrasi 5 ml/l dan 25 ml/l ekstrak mahkota dewa dan

meniran terhadap rata-rata tinggi tunas ............................................. 30

17 Histogram faktor media terhadap rata-rata jumlah daun ................... 32

18 Histogram faktor konsentrasi POC terhadap rata-rata jumlah daun .. 33

19 Histogram faktor penambahan ekstrak meniran dan mahkota dewa

terhadap rata-rata jumlah daun .......................................................... 33

20 Grafik konsentrasi 5 ml/l dan 25 ml/l ekstrak meniran dan mahkota

dewa terhadap rata-rata jumlah daun ................................................. 34

Page 9: UJI BERBAGAI KONSENTRASI (EKSTRAK MAHKOTA DEWA DAN ...

perpustakaan.uns.ac.id digilib.uns.ac.id

commit to user

ix

DAFTAR LAMPIRAN

Nomor Judul Halaman

1 Komposisi media Murashige Skoog (MS) ......................................... 41

2 Foto-foto hasil penelitian eksplan pegagan (Centella asiatica L) ..... 42

Page 10: UJI BERBAGAI KONSENTRASI (EKSTRAK MAHKOTA DEWA DAN ...

perpustakaan.uns.ac.id digilib.uns.ac.id

commit to user

x

UJI BERBAGAI KONSENTRASI (EKSTRAK MAHKOTA DEWA DAN

MENIRAN) SERTA PENAMBAHAN PUPUK ORGANIK CAIR PADA

PERTUMBUHAN TUNAS PEGAGAN ( Centella asiatica L. )

SECARA INVITRO

VENI SISKAYANTI H 0107095

RINGKASAN

Pegagan (Centella asiatica L) merupakan salah satu tanaman yang dimanfaatkan sebagai obat tradisionaal karena memiliki banyak khasiat salah satunya adalah sebagai pemenuh kebutuhan otak. Penelitian ini bertujuan untuk mengetahui jenis media dasar, jenis bahan organik (ekstrak mahkota dewa dan meniran), konsentrasi mahkota dewa, konsentrasi meniran, konsentrasi pupuk organic cair yang paling baik untuk pengembangan kultur tanaman pegagan yaitu melalui kultur jaringan dan dengan metode penapisan (rancangan 2k) diharapkan dapat disaring jenis media dasar, jenis bahan organik (ekstrak mahkota dewa dan meniran), konsentrasi meniran, konsentrasi mahkota dewa dan konsentrasi pupuk organik cair yang paling baik untuk perkembangan kultur tunas pegagan.

Penelitian ini dilaksanakan di Laboratorium Fisiologi Tumbuhan dan Bioteknologi Fakultas Pertanian Universitas Sebelas Maret, mulai bulan November 2010 sampai Juni 2011. Penelitian ini menggunakan rancangan 2k dengan rancangan lingkungan RAL yang disusun secara faktorial dengan 4 faktor yang masing-masing mempunyai 2 taraf perlakuan, yaitu Faktor 1 : Jenis media - ( ½ MS dan MS); Faktor 2 : Konsentrasi pupuk organik cair (2 ml/l dan 20 ml/l); Faktor 3 : Konsentrasi meniran (5 ml/l dan 25 ml/l); Faktor 3 : Konsentrasi mahkota dewa (5 ml/l dan 25 ml/l). Sehingga, ada 24 = 16 kombinasi perlakuan masing-masing diulang 3 kali. Data dianalisis secara deskriptif.

Hasil penelitian menunjukkan bahwa media MS, penambahan pupuk organik cair 20 ml/l, serta ekstrak meniran 5 ml/l dapat memberikan pertumbuhan yang paling baik dalam pengembangan kultur jaringan tanaman pegagan (Centella asiatica L.)

Page 11: UJI BERBAGAI KONSENTRASI (EKSTRAK MAHKOTA DEWA DAN ...

perpustakaan.uns.ac.id digilib.uns.ac.id

commit to user

xi

AN EXAMINATION ON VARIOUS CONCENTRATIONS (GOD CROWN

AND MENIRAN EXTRACT) AS WELL AS LIQUID ORGANIC

FERTILIZER ADDITION IN GOTULOCA ( Centella asiatica L. )

SHOOT GROWTH INVITRO

VENI SISKAYANTI H 0107095

SUMMARY

Gotuloca (Centella asiatica L) is one plant utilized as the traditional medicine because it has many benefits, one of which is to fulfill the brain requirement. This research aims to aims to know of media type, god crown and meniran extract, concentration of meniran, concentration of god crown, and concertation of liquid organic fertilizer what as well as shoot growth of gotuloca using tissue culture and filtering (2k design) that is expected it can be screened of the basic media types, organic material types (god crown and meniran extract), meniran concentration, god crown concentration and liquid organic fertilizer concentration.

This research was taken place in Plant Physiology and Biotechnology Laboratory of Agriculture Faculty of Sebelas Maret University, from November 2010 to June 2011. This research used 2k design with RAL environment. Factor 1: Media type ( ½ MS and MS); Factor 2: Concentration of liquid organic fertilizer (2 ml/l and 20 ml/l); Factor 3: Concentration of meniran 5 ml/l and 25 ml/l); and Factor 4: Concentration of god crown (5 ml/l and 25 ml/l). Thus, there is 24 = 16 treatment combinations, each of which is repeated three times. The variables observed are shoot emerging duration, shoot number, shoot height, and leaves number. The data was analyzed descriptively.

The result of research showed that basic media MS, that basic media MS, POC 20 ml/l, and meniran extract 5 ml/l provided the best explants growth of Gotuloca (Centella asiatica L.) through invitro.

Page 12: UJI BERBAGAI KONSENTRASI (EKSTRAK MAHKOTA DEWA DAN ...

perpustakaan.uns.ac.id digilib.uns.ac.id

commit to user

xii

I. PENDAHULUAN

A. Latar Belakang

Pegagan (Centella asiatica [L] Urb.) merupakan salah satu tanaman

yang dapat tumbuh dimana saja, seperti di kebun, sawah ataupun pinggiran

jalan dan ternyata tanaman ini telah lama dimanfaatkan sebagai obat

tradisional. Secara empirik C.asiatica dapat menggantikan gingko biloba

sebagai pemenuh kebutuhan otak hingga juga bisa menyembuhkan beberapa

penyakit seperti disentri ataupun tubercolosius. Penemuan terbaru yaitu

tanaman inipun juga mampu menghambat virus HIV yang dapat

mempertahankan kekebalan tubuh si penderita.

Hal tersebut menarik perhatian industri farmasi maupun perusahaan jamu

untuk dapat mengembangkan serta memanfaatkan C. asiatica tetapi saat ini,

tanaman tersebut yang dikembangkan secara konvensional belum mampu

memenuhi kebutuhan dalam skala besar. Kebutuhan C. asiatica yang harus

dipenuhi pada sebuah perusahaan jamu tiap tahunnya adalah sebanyak 25 ton,

tetapi saat ini, per tahun baru bisa terpenuhi 4 ton saja (Pusat Studi

Biofarmaka-IPB Bogor, 2010).

Kultur jaringan merupakan salah satu alternatif budidaya tanaman untuk

menghasilkan tanaman dalam skala besar sebab dengan teknik ini, lingkungan

tumbuh in vitro terkendali sehingga tanaman yang ingin dikembangkan tidak

harus bergantung musim dan bebas penyakit. Penambahan ekstrak tanaman

atau sering disebut dengan penambahan bahan organik pada media tanam yang

mengandung antibiotik mampu menekan pertumbuhan bakteri yang

berkembang biak serta membantu pertumbuhan eksplan yang ditanam.

Komponen lain seperti senyawa nitrogen organik, berbagai asam organik,

metabolit dan ekstrak tambahan tidak mutlak tetapi dapat menguntungkan

ketahanan sel dan perbanyakan (Wetter et al., 1991). Pada tahun 1974, Robbin

dan White melakukan percobaan kultur jaringan dengan menambahkan ekstrak

ragi kedalam medium. Hasil percobaan ini menunjukkan bahwa ekstrak ragi

dapat memperbaiki pertumbuhan akar. Penelitian lain juga menambahkan

Page 13: UJI BERBAGAI KONSENTRASI (EKSTRAK MAHKOTA DEWA DAN ...

perpustakaan.uns.ac.id digilib.uns.ac.id

commit to user

xiii

bahan organik pada kultur anggrek yang menggunakan penambahan air kelapa.

Air kelapa juga mengandung zeatin dan ribozeatin (kelompok zat tumbuh v

sitokinin) yang mempunyai kemampuan dalam merangsang pembelahan dan

diferensiasi sel, terutama dalam hal pembentukan pucuk tanaman dan

pertumbuhan akar (Hess, 1975 didalam Widiastoety et al., 1997).

Ekstrak tanaman meniran dan mahkota dewa juga merupakan bahan

organik. Hal terpenting dalam penggunaan kedua tanaman tersebut karena

keduanya mengandung alkaloid yang dapat menekan pertumbuhan bakteri

maupun infeksi jamur dan diharapkan senyawa ini dapat dapat meningkatkan

pertumbuhan tanaman.

Pertumbuhan tanaman yang diawali dari pembentukan tunas dalam

teknik kultur jaringan membutuhkan penambahan nutrisi. Nutrisi yang

dibutuhkan tanaman, tentu saja yang dapat memacu pertumbuhan tanaman

tersebut untuk kemunculan tunas dan juga yang mengandung unsur makro serta

mikro, biasanya nutrisi dalam kutur jaringan didapat dari penambahan hormon

dan ZPT. Namun ternyata penggunaan pupuk organik cair juga dapat

menggantikan peran dari hormon maupun ZPT sebab pupuk organik cair telah

mengandung unsur makro mikro maupun hormon.

B. Perumusan Masalah

Beragam manfaat yang dimiliki tanaman pegagan, menjadikan tanaman

ini memiliki prospek yang baik dalam dunia industri farmasi maupun

perusahaan jamu. Maka diperlukan alternatif dalam usaha penyediaan bibit,

salah satunya adalah dengan teknik kultur jaringan. Maka dari itu

menggunakan teknik penapisan dengan rancangan 2k dapat disaring jenis

media dasar, jenis bahan organik (ekstrak mahkota dewa dan meniran),

konsentrasi meniran, konsentrasi mahkota dewa, konsentrasi pupuk organik

cair bagi perkembangan kultur tunas pegagan.

Page 14: UJI BERBAGAI KONSENTRASI (EKSTRAK MAHKOTA DEWA DAN ...

perpustakaan.uns.ac.id digilib.uns.ac.id

commit to user

xiv

C. Tujuan Penelitian

Penelitian ini bertujuan untuk mengetahui jenis media dasar, jenis bahan

organik (ekstrak mahkota dewa dan meniran), konsentrasi meniran, konsentrasi

mahkota dewa, konsentrasi pupuk organik cair yang paling baik untuk

perkembangan kultur tunas pegagan.

Page 15: UJI BERBAGAI KONSENTRASI (EKSTRAK MAHKOTA DEWA DAN ...

perpustakaan.uns.ac.id digilib.uns.ac.id

commit to user

xv

II. TINJAUAN PUSTAKA

A. Pegagan (Centella asiatica (L). Urban)

Secara botani tanaman pegagan (Centella asiatica (L). Urban), dapat

diklasifikasikan sebagai berikut:

Kingdom : Plantae (tanaman)

Subkingdom : Tracheobionta (berpembuluh)

Superdivisio : Spermatophyta (menghasilkan biji)

Divisio : Magnoliophyta (berbunga)

Kelas : Magnoliopsida (dikotil)

Sub-kelas : Rosidae

Ordo : Apiales

Familia : Apiaceae

Genus : Centella

Spesies : Centella asiatica (L.) Urban

(BPTO, 2010)

Pegagan merupakan tanaman terna atau herba menahun tanpa batang,

tetapi dengan rimpang pendek dan stolon-stolon lunak dan beruas yang

merayap dengan panjang 10-80 cm. Pada tiap ruas/bonggol akan tumbuh akar

berwarna putih dan daun dengan tangkai daun panjang, banyak bercabang yang

membentuk tanaman baru. Dengan berkembang biak secara vegetatif alami

seperti itu, ia cepat beranak-pinak. Jika keadaan tanahnya bagus, tiap ruas yang

menyentuh tanah akan tumbuh menjadi tanaman baru. Selain itu pegagan juga

dapat diperbanyak dengan pemisahan stolon dan biji. Daun pegagan berhelai

tunggal, bertangkai panjang sekitar 5-15 cm, berbentuk bulat ginjal, tepinya

bergerigi atau beringgit, diameter 1-7 cm tersusun dalam roset yang terdiri atas

2-10 helai daun dan kadang-kadang agak berambut. Bunga pegagan berwarna

putih atau merah muda, tersusun dalam karangan berupa payung, tunggal atau

3-5 bunga bersama-sama keluar dari ketiak daun, dan tangkai bunga sekitar 5-

50 mm. Buah pegagan kecil bergantung, berbentuknya lonjong/pipih panjang

2-2,5 mm, lebar lebih kurang 7 mm dan tinggi lebih kurang 3 mm, berlekuk 2

Page 16: UJI BERBAGAI KONSENTRASI (EKSTRAK MAHKOTA DEWA DAN ...

perpustakaan.uns.ac.id digilib.uns.ac.id

commit to user

xvi

berwarna kuning kecoklatan dan berdinding agak tebal, baunya wangi dan

rasanya pahit (Riandi, 2010).

Pegagan (Centella asiatica (L.) Urban) merupakan salah satu jenis

tumbuhan yang memiliki khasiat sebagai obat. Khasiat obat dalam pegagan ini

berasal dari kandungan senyawa kimia hasil metabolisme sekunder. Pegagan

mengandung senyawa triterpenoid yaitu asam asiatikat, asam madekasat,

asiatikosida dan madekasosida. Kegunaan pegagan antara lain obat sakit perut,

luka, obat cacing, kencing batu, demam, pembersih darah, batuk kering dan

hidung berdarah, bahkan dianggap lebih bermanfaat dibandingkan dengan

ginko biloba atau ginseng yang berasal dari Korea ( Ika Puspitasari, 2006).

Salah satu pabrik jamu memerlukan lebih kurang 100 ton pegagan setiap

tahunnya. Dari sepuluh jenis jamu yang beredar di pasaran, pegagan

merupakan bahan baku yang dipergunakan, dengan kadar simplisia yang

dicantumkan dalam kemasannya antara 15-25 %. Maka dari itu dibutuhkan

sekali alternatif dalam budidaya tanaman pegagan sehingga dapat

menghasilkan tanaman dalam skala besar yang bisa memenuhi keperluan dari

pabrik jamu (Januwati M, 2005).

B. Kultur Invitro

Bioteknologi di bidang pertanian telah berkembang pesat, salah satu

contohnya adalah kultur jaringan. Kultur jaringan tanaman merupakan teknik

menumbuh kembangkan bagian tanaman, baik berupa sel jaringan atau organ

tanaman dalam kondisi aseptis secara in vitro. Ciri teknik ini adalah kondisi

kultur yang aseptis, penggunaan media kultur buatan dengan kandungan nutrisi

lengkap, dan kondisi lingkungan kultur yang sesuai. Lingkungan yang sesuai

dapat dipenuhi dengan menentukan media tumbuh yang sesuai dan penempatan

pada kondisi yang terkendali berkaitan dengan intensitas dan periodisitas,

cahaya, temperatur, dan kelembaban serta keharusan sterilisasi (Mattjik, NA,

2005).

Page 17: UJI BERBAGAI KONSENTRASI (EKSTRAK MAHKOTA DEWA DAN ...

perpustakaan.uns.ac.id digilib.uns.ac.id

commit to user

xvii

Kendala utama berkaitan dengan proses pertumbuhan adalah bila eksplan

yang ditanam mengalami stagnasi, dari mulai tanam hingga kurun waktu

tertentu tidak mati tetapi tidak tumbuh. Untuk menghindari hal itu dapat

dilakukan dengan preventif menghindari bahan tanam yang tidak juvenil atau

tidak meristematik. Karena awal pertumbuhan eksplan akan dimulai dari sel-sel

yang muda yang aktif membelah, atau dari sel-sel tua yang muda kembali.

Media juga dapat menjadi sebab terjadinya stagnasi pertumbuhan, karena dari

kondisi medialah suatu sel dapat atau tidak terdorong melakukan proses

pembelahan dan pembesaran dirinya (Nugroho, 1996).

Untuk memecahkan masalah pengadaan bibit tanaman secara besar-

besaran dan penanaman secara masal dalam rangka memenuhi kebutuhan

konsumen yang semakin meningkat dapat dipenuhi dengan kultur jaringan. Di

Negara-negara maju seperti Jepang, Eropa, dan AS kultur aseptik telah umum

digunakan sebagai sarana perbanyakan tanaman terutama untuk tanaman buah-

buahan (Purbiati dan Triatminingsih, 1992).

Cara memilih eksplan harus didasarkan oleh ilmu pengetahuan tentang

sel, yaitu bagian-bagian tanaman yang mempunyai sel aktif membelah

(meristem). Pada bagian sel meristem mengandung hormon tanaman, sehingga

hasilnya akan sesuai seperti yang diharapkan yakni dapat memunculkan tunas

maupun bagian lain dari tanaman (Hendaryono dan Wijayani, 1994).

C. Mahkota Dewa

Mahkota dewa (Phaleria macrocarpa) dari suku Thymelaceae. Tanaman

yang berasal dari Papua ini tingginya bisa mencapai 3 meter dengan daun

berbentuk lonjong, berujung lancip dengan tepi rata dan berwarna hijau tua.

Yang unik adalah buahnya yang berbentuk bulat dengan diameter 3-5

sentimeter, permukaan licin beralur. Warna buah hijau dan setelah matang

berubah menjadi merah tua. Saat ini mahkota dewa banyak ditanam di

pekarangan rumah sebagai tanaman hias atau peneduh. Bagian tanaman yang

dipakai adalah daun, daging buah dan kulit buah. Biasanya bagian itu dijual

dalam keadaan kering. Walaupun sebagian orang juga menggunakan daun dan

Page 18: UJI BERBAGAI KONSENTRASI (EKSTRAK MAHKOTA DEWA DAN ...

perpustakaan.uns.ac.id digilib.uns.ac.id

commit to user

xviii

kulit buah yang masih segar. Sebuah skrining untuk mempelajari zat

kandungan, menunjukkan buah mahkota dewa mengandung senyawa golongan

alkaloid, tanin, saponin, flavonoid dan polifenol (Anne Ahira, 2010).

Mahkota dewa merupakan salah satu tanaman yang mengandung

antibiotik alami. Bagian tanaman yang dipakai adalah daun, daging buah dan

kulit buah. Biasanya bagian itu dijual dalam keadaan kering. Walaupun

sebagian orang juga menggunakan daun dan kulit buah yang masih segar.

Sebuah skrining untuk mempelajari zat kandungan, menunjukkan buah

mahkota dewa mengandung senyawa golongan alkaloid, tanin, saponin,

flavonoid dan polifenol (Budi Sahjaya, 2010).

Salah satu senyawa yang terkandung paling banyak pada tanaman

mahkota dewa adalah senyawa alkaloid. Hampir semua alkaloida yang

ditemukan didalam mempunyai keaktifan biologis tertentu, ada yang sangat

beracun tetapi ada pula yang sangat berguna dalam pengobatan. Misalnya

kuinin, morfin, dan stiknin adalah alkaloida yang terkenal dan mempunyai efek

sifologis dan psikologis. Alkalida dapat ditemukan dalam berbagai tumbuhan

seperti biji, daun, ranting, dan kulit batang. Alkalida umumnya ditemukan

dalam kadar yang kecil dan harus dipisahkan dari campuran senyawa yang

rumit yang bersal dari jaringan tumbuhan ( Sovia Lenny, 2006).

D. Meniran

Tanaman meniran juga merupakan tanaman penghasil antibiotik alami

yang telah dikonsumsi lama masyarakat untuk menyembuhkan beberapa

penyakit. Ekstrak metanol daun meniran mempunyai efek antibakteri paling

tinggi terhadap bakteri Staphylococcus aureus, Bacillus subtilis, Escherichia

colli, dan Pseudomonas aeruginosa. Efek ini disebabkan senyawa antibakteri

pada Meniran seperti phyllanthin, hypophyllanthin, niranthin, dan nietetralin.

Ekstrak petroleum eter dari batang, daun, dan akar meniran juga menunjukkan

efek antifungi (Nakita, 2010).

Meniran merupakan tanaman tradisional yang secara turun-temurun

dipercaya berkhasiat mengatasi berbagai penyakit. Antara lain penyakit kulit,

Page 19: UJI BERBAGAI KONSENTRASI (EKSTRAK MAHKOTA DEWA DAN ...

perpustakaan.uns.ac.id digilib.uns.ac.id

commit to user

xix

radang, malaria, kencing batu, diare, sariawan, batu ginjal, dan penyakit

kuning. Setiap daerah memiliki nama khas untuk meniran seperti dukung anak

(Kalimantan), meniran ijo, meniran (Jawa, Sunda), dan gossau ma dugi

(Ternate). Pun, meski tidak tahu namanya, banyak orang langsung

mengenalinya begitu tanaman bernama Latin Phyllanthus niruri L,. ini

diperlihatkan. Meniran tidak hanya dikenal di Indonesia, tapi juga di negara

lain tempat bertumbuhnya, seperti Thailand dan India. Di negara tropis seperti

Indonesia, meniran mudah ditemui di ladang, pematang sawah, tanah yang

lembap, tepi sungai, bahkan tumbuh liar begitu saja di halaman rumah.

Batangnya tegak setinggi kira-kira 50 cm dan memiliki daun menyirip

berbentuk lonjong (Riana, 2010).

Secara klinis imunomodulator digunakan pada pasien dengan gangguan

imunitas, antara lain pada kasus keganasan HIV/AIDS, malnutrisi, alergi, dan

lain-lain. Sebuah penelitian membuktikan mengenai efek antihyperuricemic

ekstrak metanol P. niruri memperlihatkan penghambatan xanthine oxidase

secara in vitro dengan IC50 39,39 µg/mL. Filantin merupakan salah satu

komponen utama Phylanthus niruri Linn yang memiliki aktivitas melindungi

hati dari zat toksik (antihepatotoksik) baik berupa parasit, obat-obatan, virus

maupun bakteri (Putra Dhanang P, 2010).

E. Pupuk Organik Cair

Penggunaan pupuk organik alam yang dapat dipergunakan untuk

membantu mengatasi kendala produksi pertanian yaitu pupuk organik cair.

Pupuk organik ini diolah dari bahan baku berupa kotoran ternak, kompos,

limbah alam, hormon tumbuhan dan bahan-bahan alami lainnya yang diproses

secara alamiah selama 4 bulan. Pupuk organik cair selain dapat memperbaiki

sifat fisik, kimia, dan biologi tanah, membantu meningkatkan produksi

tanaman, meningkatkan kualitas produk tanaman, mengurangi penggunaan

pupuk anorganik dan sebagai alternatif pengganti pupuk kandang

(Indrakusuma, 2000).

Page 20: UJI BERBAGAI KONSENTRASI (EKSTRAK MAHKOTA DEWA DAN ...

perpustakaan.uns.ac.id digilib.uns.ac.id

commit to user

xx

Nitrogen yang terkandung dalam pupuk organik cair berperan sebagai

penyusun protein sedangkan fosfor dan kalsium berperan dalam memacu

pembelahan jaringan meristem dan merangsang pertumbuhan akar dan

perkembangan daun. Akibatnya tingkat absorbsi unsur hara dan air oleh

tanaman sampai batas optimumnya yang akan digunakan untuk pembelahan,

perpanjangan dan diferensiasi sel. Kalium mengatur kegiatan membuka dan

menutupnya stomata. Pengaturan stomata yang optimal akan mengendalikan

transpirasi tanaman dan meningkatkan reduksi karbondioksida yang akan

diubah menjadi karbohidrat (Sarjana Parman, 2007).

Pupuk organik cair mengandung unsur hara kalium dan kalsium yang

akan meningkatkan pertumbuhan dan perkembangan akar lateral sehingga

mempengaruhi kemampuan tanaman kentang dalam menyerap air. Pupuk

organik merupakan pupuk dengan bahan dasar yang diambil dari alam dengan

jumlah dan jenis unsur hara yang terkandung secara alami. Dapat dikatakan

bahwa pupuk organik merupakan salah satu bahan yang paling penting dalam

upaya memperbaiki kesuburan tanah secara aman (Suryanti, 2011).

F. Media MS

Komposisi media yang digunakan dalam kultur jaringan dapat berbeda

jenis bahan kimia atau konsentrasinya. Perbedaan komposisis media dapat

mengakibatkan perbedaan pertumbuhan dan perkembangan eksplan yang

ditumbuhkan secara in vitro. Media Murashige dan Skoog (MS) sering

digunakan karena cukup memenuhi unsur hara makro, mikro dan vitamin

untuk pertumbuhan tanaman ( Nina Marlina, 2004).

Keberhasilan dalam teknologi serta penggunaan metode in vitro terutama

disebabkan oleh pengetahuan tentang kebutuhan hara sel dan jaringan yang

dikulturkan.Kebutuhan hara tersebut dipenuhi dalam suatu media. Komposisi

media yang digunakan tergantung dengan jenis tanaman yang akan

diperbanyak. Media yang digunakan biasanya terdiri dari garam mineral,

vitamin, dan hormon. Selain itu, diperlukan juga bahan tambahan seperti agar,

gula, dan lain-lain. Zat pengatur tumbuh (hormon) yang ditambahkan juga

Page 21: UJI BERBAGAI KONSENTRASI (EKSTRAK MAHKOTA DEWA DAN ...

perpustakaan.uns.ac.id digilib.uns.ac.id

commit to user

xxi

bervariasi, baik jenisnya maupun jumlahnya, tergantung dengan tujuan dari

kultur jaringan yang dilakukan. Salah satu medium untuk kultur jaringan

tanaman adalah media Murashige dan Skoog (MS) (Hendri Gunawan, 2007).

Salah satu kesulitan dalam kultur jaringan tanaman adalah kebutuhan

nutrisi untuk pertumbuhan optimum sangat berbeda pada tiap spesies, sehingga

tidak ada media yang dapat direkomendasikan untuk semua tanaman.

Penelitian – penelitian yang intensif pada kultur jaringan selama 50 tahun

terakhir telah banyak mengembangkan media, beberapa diantaranya telah

digunakan secara luas dalam kultur jaringan saat ini (Yusnita, 2003).

Media Murashige & Skoog (media MS) merupakan perbaikan komposisi

media Skoog, terutama kebutuhan garam anorganik yang mendukung

pertumbuhan optimum pada kultur jaringan tembakau. Media MS mengandung

40 mM N dalam bentuk NO3 dan 29 mM N dalam bentuk NH4+. Kandungan N

ini, lima kali lebih tinggi dari N total yang terdapat pada media Miller, 15 kali

lebih tinggi dari media tembakau Hildebrant, dan 19 kali lebih tinggi dari

media White. Kalium juga ditingkatkan sampai 20 mM, sedangkan P, 1.25

mM. Unsur makro lainnya konsemtrasinya dinaikkan sedikit. Pertama kali

unsur-unsur makro dalam media MS dibuat untuk kultur kalus tembakau, tetapi

komposisi MS ini sudah umum digunakan untuk kultur jaringan jenis tanaman

lain (Yuniyati, 2005).

Page 22: UJI BERBAGAI KONSENTRASI (EKSTRAK MAHKOTA DEWA DAN ...

perpustakaan.uns.ac.id digilib.uns.ac.id

commit to user

xxii

III. METODE PENELITIAN

A. Waktu dan Tempat Penelitian

Penelitian ini dilaksanakan bulan November 2010 – Juni 2011 di

Laboratorium Fisiologi Tumbuhan dan Bioteknologi Fakultas Pertanian

Universitas Sebelas Maret Surakarta.

B. Bahan dan Alat Penelitian

1) Bahan Penelitian

Bahan tanaman yang akan digunakan sebagai eksplan adalah bagian

mata tunas tanaman pegagan. Bahan kimia yang akan digunakan dalam

penelitian ini meliputi media Murashige and Skoog (MS), aquades, chrolox,

fungisida, bakterisida, detergen, spirtus, dan alkohol 70 %. Selain itu juga

menggunakan ekstrak tanaman antibiotik yaitu mahkota dewa dan meniran.

Serta menggunakan pupuk organik cair untuk kebutuhan unsur hara bagi

tanaman pegagan.

2) Alat Penelitian

Alat yang digunakan dalam penelitian ini adalah:

a. Botol kultur

b. Bunsen

c. Laminar Air Flow Cabinet (LAFC)

d. Petridish

e. Pinset

f. Scalpel

g. Timbangan analitik

h. Plastik PP 0,4

i. Botol semprot

j. Karet gelang,

k. Magnetik stirer,

l. Hot plate,

Page 23: UJI BERBAGAI KONSENTRASI (EKSTRAK MAHKOTA DEWA DAN ...

perpustakaan.uns.ac.id digilib.uns.ac.id

commit to user

xxiii

m. Beker glass

n. Gelas ukur

o. Erlenmeyer

p. pH meter

q. Autoklaf

r. Pipet ukur

s. Rak kultur

t. Blender

u. dan Thermoshaker.

C. Rancangan Percobaan

Penelitian ini menggunakan metode screening yaitu 2k dengan

rancangan lingkungan RAL yang disusun secara faktorial dengan 4 faktor

yang masing-masing mempunyai 2 taraf perlakuan, yaitu:

a) Faktor 1: Media dasar Murashige and Skoog (MS)= ½ MS dan MS

b) Faktor 2: Konsentrasi pupuk organik cair= 2ml/l dan 20ml/l

c) Faktor 3: Konsentrasi meniran= 5ml/l dan 25ml/l

d) Faktor 4: Konsentrasi mahkota dewa= 5ml/l dan 25ml/

Maka ada 24 = 16 kombinasi perlakuan yang masing-masing diulang

sebanyak 3 kali.

Tabel 1. Kombinasi Perlakuan

½ MS MS POC 2 ml/l POC 20

ml/l POC 2ml/l POC

20ml/l

Meniran

5ml/l 1 5 9 13

25ml/l 2 6 10 14

Mahkota Dewa

5ml/l 3 7 11 15

25ml/l 4 8 12 16

Page 24: UJI BERBAGAI KONSENTRASI (EKSTRAK MAHKOTA DEWA DAN ...

perpustakaan.uns.ac.id digilib.uns.ac.id

commit to user

xxiv

D. Cara Kerja Penelitian

a) Pembuatan larutan stok

Pembuatan larutan stok yaitu dengan menimbang bahan-bahan

kimia, hara makro, maupun hara mikro sesuai komposisi media MS

untuk dibuat larutan stok. Kemudian bahan-bahan tersebut dilarutkan

dengan aquades dan diaduk sampai homogen dengan magnetic stirrer,

kemudian dimasukkan dalam botol yang diberi label pada tiap botolnya

sesuai dengan perlakuan dan disimpan dalam lemari pendingin.

b) Pembuatan ekstrak

Ekstrak tanaman antibiotik menggunakan tanaman mahkota dewa

dan meniran. Pengambilan tanaman dari lapang juga harus

memperhatikan kualitas tanamannya, yaitu tanaman yang berwarna hijau

segar, tidak terlalu banyak serangan hama. Kemudian tanaman dicuci

bersih hingga tidak ada kotoran yang tertinggal. Setelah itu ditimbang

sebanyak 80 g berat segar. Lalu tanaman tersebut direndam dengan

menggunakan fungisida selama 10 menit dan dilanjutkan direndam pada

detergen selama 5 menit. Setelah itu dibilas dengan air mengalir hingga

bersih lalu dibilas pula dengan aquades steril. Setelah semua tanaman

telah bersih, masing-masing tanaman baik meniran maupun biji mahkota

dewa yang sudah ditimbang sebanyak 80 g, lalu di diblender dengan

menambahkan aquades sebanyak 200 ml. Setelah itu diambil ekstraknya.

c) Pembuatan media tanam

Pembuatan media dengan mengambil dan menakar masing-masing

larutan stok sesuai dengan perlakuan dan ukuran yang telah ditentukan

serta menambahkan estrak dan pupuk organik cair sesuai perlakuan

kemudian memasukkannya ke dalam labu takar. Bahan-bahan tersebut

dilarutkan dengan aquades sampai volume larutan mencapai 1 liter.

Kemudian ditambahkan gula sebanyak 30 g. Larutan dimasukkan dalam

beker glass dan diaduk serta dididihkan dengan menggunakan magnetik

stirer dan hot plate.

Page 25: UJI BERBAGAI KONSENTRASI (EKSTRAK MAHKOTA DEWA DAN ...

perpustakaan.uns.ac.id digilib.uns.ac.id

commit to user

xxv

Langkah selanjutnya yaitu pengukuran pH larutan. pH media diatur

pada kisara0n 5,6-5,8. Apabila pH terlalu rendah ditambahkan dengan

NaOH dan bila pH terlalu tinggi ditambahakan dengan HCl. Setelah pH

telah sesuai, kemudian larutan ditambahkan bahan pemadat media yaitu

agar-agar sebanyak 8 g. Setelah semua larutan terlarut, maka tahap

selanjutnya adalah menuangkan larutan tersebut ke botol-botol kultur,

kurang lebih 25 ml setiap botolnya. Botol ditutup dengan plastik PP dan

kemudian disterilisasi dengan autoklaf pada suhu 121 0C, pada tekanan

1,5 kg/cm3 selama 45 menit. Setelah selesai, botol diangkat dari autoklaf

dan di tempatkan di ruang inkubasi supaya media menjadi padat. Apabila

media telah memadat, maka penanaman eksplan dapat dilakukan.

d) Sterilisasi alat

Alat-alat yang harus disterilkan diantaranya adalah botol kultur,

petridish, skalpel, dan pinset. Alat-alat tersebut dicuci sampai bersih

dengan menggunakan sabun cuci kemudian dikeringkan. Setelah kering

dibungkus dengan kertas koran (kecuali botol kultur) lalu dimasukkan ke

dalam autoklaf pada tekanan 1,5 Psi (kg/cm2), pada suhu 121 0C selama

45 menit.

e) Sterilisasi eksplan dan penanaman

Bahan tanaman yang digunakan sebagai eksplan adalah mata tunas

tanaman pegagan. Eksplan dicuci dengan deterjen sampai bersih dan

dibilas dengan air mengalir, kemudian digojog dalam campuran larutan

Agrept dan Dithane selama 12 jam dengan shaker dan dibilas dengan air

mengalir. Lalu direndam dalam larutan detergen selama 5 menit

kemudian dicuci dengan air mengalir dan dibilas dengan aquades steril.

Eksplan yang telah steril dibawa ke dalam LAFC dan disterilisasi dalam

larutan clorox yang telah dicampur aquades dengan perbandingan 1:2

selama 5 menit dan dibilas aquades steril.

Penanaman eksplan dilakukan di dalam LAFC (Laminar Air Flow

Cabinet) yang telah dibersihkan terlebih dahulu dengan alkohol 70 % dan

ruang LAFC disemprot formalin atau spirtus. Kemudian eksplan

Page 26: UJI BERBAGAI KONSENTRASI (EKSTRAK MAHKOTA DEWA DAN ...

perpustakaan.uns.ac.id digilib.uns.ac.id

commit to user

xxvi

dikeluarkan dari botol dengan menggunakan pinset panjang yang telah

direndam dalam alkohol dan dibakar diatas lampu bunsen, eksplan siap

ditanam dalam botol kultur dan kemudian ditutup kembali dengan plastik

pp 0,4. Botol-botol yang telah selesai diberi label sesuai dengan

perlakuan dan tanggal penanaman.

f) Pemeliharaan

Pemeliharaan dilakukan untuk meminimalisasi risiko kontaminasi

dengan cara menyemprotkan spirtus ke botol-botol kultur setiap 2 hari

sekali serta mengeluarkan botol-botol kultur yang terkontaminasi dari

ruang inkubasi.

E. Variabel Pengamatan

a) Saat Muncul Tunas

Pengamatan munculnya tunas dilakukan setiap hari pada tiap–tiap

botol kultur dengan menghitung berapa hari tunas sudah mulai muncul

atau tumbuh.

b) Jumlah Tunas yang Terbentuk

Pengamatan jumlah tunas dilakukan setiap hari pada tiap–tiap botol

kultur dengan menghitung berapa jumlah tunas yang sudah muncul pada

setiap botol.

c) Tinggi tunas

Tinggi diamati pada akhir pengamatan, dengan mengukur tinggi

dari pangkal batang hingga ujung daun tertinggi.

d) Jumlah daun

Jumlah daun diamati pada akhir pengamatan, dilakukan dengan

menghitung jumlah buku yang terbentuk.

F. Analisis Data

Data hasil penelitian yang diperoleh dianalisis secara deskriptif.

Karena dari uji kenormalan data, data tidak dapat dianalisis dengan analisis

ragam.

Page 27: UJI BERBAGAI KONSENTRASI (EKSTRAK MAHKOTA DEWA DAN ...

perpustakaan.uns.ac.id digilib.uns.ac.id

commit to user

xxvii

IV. HASIL DAN PEMBAHASAN

A. Saat Muncul Tunas

Munculnya tunas merupakan faktor penting dalam budidaya secara

invitro untuk mengetahui perkembangan dan pertumbuhan eksplan. Tunas

terbentuk dari hasil diferensiasi sel eksplan. Semakin cepat muncul tunas maka

semakin cepat pula dihasilkan bahan untuk perbanyakan tanaman. Pada

dasarnya induksi tunas dipengaruhi oleh penggunaan zat pengatur tumbuh

salah satunya adalah sitokinin (Wattimena, 1991), namun pada penelitian ini

tidak menggunakan zat pengatur tumbuh, melainkan menggunakan pupuk

organik cair. Dan menggunakan penambahan ekstrak meniran dan mahkota

dewa sebagai fitohormon yang berfungsi untuk pertahanan anti bakteri. Rata-

rata saat muncul tunas eksplan pegagan tiap kombinasi perlakuan disajikan

dalam tabel 2.

Tabel 2. Rata-rata saat muncul tunas eksplan pegagan (HST) tiap kombinasi perlakuan

Jenis Bahan Organik ½ MS MS POC 2 ml/l POC 20

ml/l POC 2ml/l POC

20ml/l

Meniran

5ml/l 7,6 22 10,3 9

25ml/l 8 10 28 13

Mahkota Dewa

5ml/l 0 15 0 9

25ml/l 0 0 33 0

Keterangan: HST = hari setelah tanam

Tabel 2. menunjukkan bahwa rata-rata saat muncul tunas tercepat dari

eksplan pegagan yaitu pada kombinasi No 1. yang merupakan kombinasi

antara penggunaan media dasar ½ MS serta penambahan POC 2 ml/l dan

ekstrak meniran 5 ml/l muncul pada 7,6 HST. Hal ini dapat terjadi karena

diduga adanya penambahan pupuk organik cair sebanyak 2 ml/l, meskipun

hanya menggunakan ½ MS sudah dapat memunculkan tunas pegagan. Pupuk

organik cair juga mengandung kandungan hormon (zat pengatur tumbuh)

Page 28: UJI BERBAGAI KONSENTRASI (EKSTRAK MAHKOTA DEWA DAN ...

perpustakaan.uns.ac.id digilib.uns.ac.id

commit to user

xxviii

seperti sitokinin, auksin dan giberelin yang dapat membantu pertumbuhan

tanaman (Suskendriyati, 2003).

Hal lain terjadi pada kombinasi no.12 yang mengalami kelambatan dalam

memunculkan tunas yaitu 33 HST. Kombinasi perlakuan no.12 terdiri dari MS,

POC 2ml/l dan ekstrak mahkota dewa 25ml/l. Hal ini diduga penambahan

ekstrak mahkota dewa menghambat pertumbuhan tunas yang akan muncul.

Menurut Sevon (2002) senyawa yang terkandung dalam mahkota dewa seperti

alkaloid dan saponin dapat menghambat pembelahan sel. Pada Tabel 2. dapat

dilihat bahwa untuk semua kombinasi perlakuan yang diberikan penambahan

ekstrak mahkota dewa mengalami pertumbuhan yang lama hingga tidak

tumbuh tunas sama sekali dibandingkan dengan yang menggunakan ekstrak

meniran yaitu pada kombinasi no. 3, 4, 7, 8, 11, 12, 15 dan 16.Histogram

pengaruh faktor penambahan ekstrak meniran dan mahkota dewa terhadap

persentase keberhasilan tumbuh tunas Gambar 1.

Gambar 1. Histogram pengaruh faktor penambahan ekstrak meniran dan mahkotadewa terhadap persentase keberhasilan tumbuh tunas (%)

Pada Gambar 1. dapat dilihat bahwa penambahan ekstrak meniran lebih

banyak memunculkan tunas eksplan pegagan yaitu 54% dibandingkan ekstrak

mahkota dewa yang hanya 12% seperti yang telah dipaparkan sebelumnya

bahwa ternyata mahkota dewa memiliki senyawa yang dapat menghambat

pembelahan sel yang menyebabkan pertumbuhan tunas juga terganggu.

Sedangkan pada tanaman meniran terdapat senyawa filantin yang dapat

54

12

0

10

20

30

40

50

60

MENIRAN Mahkota Dewa

% keberhasi

lan tumbuh

tunas

Page 29: UJI BERBAGAI KONSENTRASI (EKSTRAK MAHKOTA DEWA DAN ...

perpustakaan.uns.ac.id digilib.uns.ac.id

commit to user

xxix

membantu dalam pertumbuhan tunas (Putra, 2010). Hal ini berarti penambahan

ekstrak meniran dapat memberikan pengaruh terhadap pertumbuhan tunas

eksplan pegagan.

Pada penelitian ini, kemunculan tunas tidak hanya berasal dari faktor

penambahan bahan organik yaitu ekstrak meniran maupun mahkota dewa

tetapi juga pengaruh dari media dasar dalam penanaman eksplan pegagan itu

sendiri. Media dasar yang digunakan yaitu MS (Murashige and Skoog) dengan

taraf ½ MS serta MS. Media MS merupakan media dasar yang paling banyak

digunakan, baik untuk tanaman herba maupun berkayu, selain itu juga

modifikasi media MS juga banyak digunakan (Pierik, 1987)

Gambar 2. Histogram faktor media dasar terhadap persentase keberhasilan tumbuh tunas (%)

Pada gambar 2 telihat bahwa penggunaan media dasar dengan taraf MS

lebih banyak dalam menghasilkan persentase keberhasilan tumbuh tunas

eksplan pegagan dibandingkan dengan taraf ½ MS yaitu nilai persentase untuk

masing-masing taraf adalah MS sebesar 37% dan ½ MS sebesar 29%. Hal ini

menunjukan bahwa eksplan pegagan yang dikulturkan lebih responsif terhadap

penggunaan media dasar dengan taraf MS meskipun dengan mengunakan ½

MS pun juga ada beberapa eksplan pegagan yang dapat muncul tunas tetapi

membutuhkan waktu yang lama.

Pertumbuhan kemunculan tunas yang relatif banyak dengan

menggunakan media dasar dengan taraf MS ini, disebabkan adanya kandungan

total ion yang tinggi pada media dasar MS, khususnya NH4. Amonium dapat

29

37

0

10

20

30

40

1/2 MS MS

% k

eber

hasi

lan

tum

buh

tuna

s

Page 30: UJI BERBAGAI KONSENTRASI (EKSTRAK MAHKOTA DEWA DAN ...

perpustakaan.uns.ac.id digilib.uns.ac.id

commit to user

xxx

meningkatkan biosintesis sitokinin alami yang berperan dalam menstimulasi

pertunasan (Hyndman et al, 1982). Maka penggunaan media dasar MS cocok

untuk digunakan dalam menumbuhkan eksplan pegagan secara kultur jaringan,

meskipun menggunakan taraf ½ MS pun juga bisa tumbuh dengan waktu yang

cukup lama.

Penambahan pupuk organik cair pada penelitian ini juga dijadikan salah

satu faktor dalam mengkulturkan eksplan pegagan. Pupuk organik cair selain

dapat memperbaiki sifat fisik, kimia, dan biologi tanah, membantu

meningkatkan produksi tanaman, meningkatkan kualitas produk tanaman,

mengurangi penggunaan pupuk anorganik dan sebagai alternatif pengganti

pupuk kandang (Indrakusuma, 2000). Pada penelitian ini, penggunaan pupuk

organik berfungsi sebagai pengganti penggunaan zat pengatur tumbuh seperti

auksin, sitokinin maupun giberelin serta unsur hara makro dan mikro.

Gambar 3. Histogram faktor konsentrasi pupuk organik cair (POC) terhadap persentase keberhasilan tumbuh tunas (%)

Nutrisi sangat penting bagi pertumbuhan dan perkembangan tanaman,

tanpa air dan mineral tanaman tidak dapat hidup (Arniputri, 1993). Pada

gambar 3 terlihat bahwa pemberian POC (pupuk organik cair) dengan

konsentrasi 2 ml/l dapat memberikan nilai persentase keberhasilan tumbuh

tunas yang lebih besar dari pada POC konsentrasi 2 ml/l yaitu sebesar 37%

sedangkan POC konsentrasi 20 ml/l hanya mampu memunculkan tunas sebesar

28%. Hal ini menunjukkan bahwa dengan pemberian POC 2 ml/l telah mampu

37

28

0

5

10

15

20

25

30

35

40

POC 2ML/L

POC 20ML/L

% keberha

silan tumb

uh tunas

Page 31: UJI BERBAGAI KONSENTRASI (EKSTRAK MAHKOTA DEWA DAN ...

perpustakaan.uns.ac.id digilib.uns.ac.id

commit to user

xxxi

memunculkan tunas eksplan pegagan. Menurut Sarjana Parman (2007), POC

mengandung unsur N (Nitrogen) yang berperan sebagai penyusun protein

sedangkan fosfor dan kalsium berperan dalam memacu pembelahan jaringan

meristem dan merangsang pertumbuhan akar dan perkembangan daun.

Pada penelitian ini juga menggunakan penambahan bahan organik yaitu

ekstrak mahkota dewa dan meniran dengan masing-masing faktor,

menggunakan 2 taraf yaitu konsentrasi 5 ml/l dan 25 ml/l. Grafik konsentrasi 5

ml/l dan 25 ml/l ekstrak meniran dan mahkota dewa terhadap persentase

keberhasilan tumbuh tunas disajikan dalam gambar 4.

(a) (b) Gambar 4. Grafik konsentrasi 5 ml/l dan 25 ml/l ekstrak meniran dan mahkota

dewa terhadap persentase keberhasilan tumbuh tunas (%) (a) Ekstrak meniran (b) Ekstrak mahkota dewa

Dari gambar 4 dapat terlihat bahwa penambahan bahan organik, baik

yang menggunakan ekstrak meniran ataupun mahkota dewa, ternyata pada

konsentrasi 5 ml/l sudah dapat memberikan kemunculan tunas eksplan pegagan

dibanding konsentrasi 25 ml/l. Penambahan ekstrak meniran dengan

konsentrasi 5 ml/l, memunculkan tunas lebih banyak yaitu 75% dibandingkan

dengan yang konsentrasi 25ml/l yang 33%. Begitu juga halnya dengan

penambahan ekstrak mahkota dewa dengan konsentrasi 5 ml/l dapat

memunculkan tunas lebih banyak yaitu 17% daripada konsentrasi 25ml/l yang

hanya memunculkan tunas sebanyak 8%. Hal ini diduga penambahan

17

8

0

5

10

15

20

5 ml/l 25 ml/l

% k

eber

hasil

an tu

mbu

h tu

nas

Mahkota dewa

75

33

0

20

40

60

80

5 ml/l 25 ml/l

% k

eb

er

ha

sila

n

tum

bu

h t

un

as

Meniran

Page 32: UJI BERBAGAI KONSENTRASI (EKSTRAK MAHKOTA DEWA DAN ...

perpustakaan.uns.ac.id digilib.uns.ac.id

commit to user

xxxii

konsentrasi yang terlalu banyak dapat menghambat pertumbuhan dari eksplan

pegagan itu sendiri, sehingga konsentrasi 5 ml/l dirasa lebih baik daripada

konsentrasi sebesar 25ml/l. Hal lain dalam penggunaan bahan organik memang

harus disesuaikan dengan jenis eksplannya terlebih dahulu.

Gambar 5. Tunas ke-2 kombinasi per- lakuan No. 1, yang terbentuk pada 19 HST

Pada gambar 5 menunjukkan bahwa pada 19 HST kombinasi antara

penggunaan media dasar ½ MS serta penambahan POC 2 ml/l dan ekstrak

meniran 5 ml/l muncul tunas ke dua. Kemunculan tunas eksplan pegagan

secara kultur jaringan juga dipengaruhi oleh faktor eksplannya itu sendiri,

maka sangat penting sekali dalam melakukan pemilihan eksplan yang baik dari

lapang, sebelum dilakukan penanaman. Eksplan adalah bahan tanam yang kecil

dan masih aktif untuk membelah. Maka dari itu dalam kultur jaringan tanaman

pegagan, bagian yang digunakan sebagai eksplan yaitu tunas yang terbentuk

karena pada bagian tersebut merupakan bagian yang masih aktif mengalami

pembelahan sehingga memudahkan dalam terbentuknya tunas baru.

B. Jumlah Tunas

Tunas adalah bagian dari tanaman yang tumbuh dalam rangka

melangsungkan keturunan pada tanaman tersebut. Semakin banyak tunas yang

terbentuk maka tahap multiplikasinya semakin tinggi maka dari itu jumlah

tunas sangat penting dalam kultur jaringan tanaman. Pada variabel jumlah

tunas ini, sangat terlihat perbedaannya pada penambahan pupuk organik cair

Page 33: UJI BERBAGAI KONSENTRASI (EKSTRAK MAHKOTA DEWA DAN ...

perpustakaan.uns.ac.id digilib.uns.ac.id

commit to user

xxxiii

(POC). Histogram faktor konsentrasi POC terhadap rata-rata jumlah tunas yang

terbentuk disajikan dalam gambar 6.

0.83

0.94

0.75

0.8

0.85

0.9

0.95

POC 2 ml/l POC 20 ml/l

Rata-rata

jumlah t

unas

Gambar 6. Histogram faktor konsentrasi POC terhadap rata-rata jumlah tunas yang terbentuk

Pada gambar 6 terlihat bahwa penambahan POC sebanyak 20 ml/l

memberikan pengaruh terhadap banyaknya jumlah tunas yang terbentuk yaitu

0,94 dibandingkan POC 2 ml/l yaitu hanya 0,83. Hal ini diduga karena dalam

pembuatan media penanaman, POC terakumulasi dengan media dasar MS itu

sendiri, yang mana media MS itu sendiri mengandung banyak unsur sama

halnya dengan POC yang mengakibatkan terjadi kompetisi unsur. Menurut

Suryanti (2011) bahwa pengaplikasian POC secara konvensional hanya

membutuhkan 2 ml/l untuk jenis tanaman herbaceous, hal ini berarti apabila

POC diaplikasikan secara kultur jaringan harus membutuhkan konsentrasi yang

lebih banyak dibanding budidaya secara konvensional.

Tabel 3. Rata-rata jumlah tunas eksplan pegagan yang terbentuk tiap kombinasi perlakuan pada umur 60 HST

½ MS MS POC 2 ml/l POC 20

ml/l POC 2ml/l POC

20ml/l

Meniran

5ml/l 1,66 1 2 2,5

25ml/l 1 1 1 1

Mahkota Dewa

5ml/l 0 1 0 1

25ml/l 0 0 1 0

Page 34: UJI BERBAGAI KONSENTRASI (EKSTRAK MAHKOTA DEWA DAN ...

perpustakaan.uns.ac.id digilib.uns.ac.id

commit to user

xxxiv

Pada tabel 3 dapat dilihat pada kombinasi no 13, yang terdiri dari media

dasar MS; POC 20 ml/l; meniran 5 m/l dapat membentuk tunas paling banyak

dari kombinasi lainnya yaitu dengan nilai rata-rata sebesar 2,5. Hal ini diduga,

pada kombinasi ini merupakan kombinasi yang tepat dengan penambahan

konsentrasi dari MS, ekstrak meniran 5 ml/l serta POC 20 ml/l. Diketahui

bahwa, dalam teknik kultur jaringan perlu memperhatikan konsentrasi yang

tepat sebab media dasar seperti MS, membutuhkan bahan organik atau zat

pengatur tumbuh untuk merangsang pertumbuhan dari tunas suatu eksplan

(Wattimena, 1991). Sedangkan kombinasi no 9, yang juga terdiri dari media

dasar MS; meniran 5 ml/l; dan POC 2 ml/l, jumlah tunas yang terbentuk yaitu

2. Diduga penambahan POC dengan konsentrasi yang berbeda, dapat dillihat

pada tabel 3, bahwa dengan penambahan POC 20 ml/l jumlah tunas yang

terbentuk lebih banyak dihasilkan.

(a) (b)

Gambar 7. Tunas yang terbentuk pada 60 HST, (a) Kombinasi perlakuan no. 13, (b) Kombinasi perlakuan no. 9

Dalam perbanyakan secara in vitro beberapa metode dapat ditempuh

melalui perbanyakan tunas aksilar dan adventif, baik secara langsung maupun

tidak langsung. Secara tidak langsung, pembentukannya terjadi melalui tahap

pembentukan kalus. Pada penelitian ini, muncul tunas tanpa diawali dengan

pembentukan kalus terlebih dahulu. Dari gambar 7 dapat terlihat perbedaan

antara kombinasi no. 13 yang dapat membentuk tunas lebih banyak daripada

Page 35: UJI BERBAGAI KONSENTRASI (EKSTRAK MAHKOTA DEWA DAN ...

perpustakaan.uns.ac.id digilib.uns.ac.id

commit to user

xxxv

kombinasi perlakuan no 9. Hal ini sesuai dengan pendapat Rao (1994) &

Poewowidodo (1992) yang mengatakan bahwa pupuk organik cair

mengandung unsur kalium yang berperan penting dalam setiap proses

metabolisme tanaman, yaitu dalam sintesis asam amino dan protein dari ion-

ion ammonium serta berperan dalam memelihara tekanan turgor dengan baik

sehingga memungkinkan lancarnya proses-proses metabolisme dan menjamin

kesinambungan pemanjangan sel.

Jumlah tunas yang terbentuk juga dipengaruhi oleh adanya penambahan

dari ekstrak meniran dan mahkota dewa yang juga dipengaruhi oleh

konsentrasi penambahan dari kedua ekstrak tersebut. Histogram faktor

penambahan ekstrak meniran dan mahkota dewa terhadap jumlah tunas yang

terbentuk disajikan pada gambar 8.

1.4

0.375

00.20.40.60.8

11.21.41.6

MENIRAN MAHKOTA DEWA

Rata

-rata J

umlah

tunas

Gambar 8. Histogram faktor penambahan ekstrak meniran dan mahkota dewa terhadap rata-rata jumlah tunas yang terbentuk

Pada gambar 8, terlihat bahwa penambahan ekstrak meniran lebih banyak

menghasilkan terbentuknya tunas eksplan pegagan daripada ekstrak mahkota

dewa. Nilai rata-ratanya adalah untuk ekstrak meniran yaitu 1,4 sedangkan

ekstrak mahkota dewa hanya 0,37. Hal ini diduga ekstrak dari meniran bekerja

secara optimal sehingga eksplan pegagan lebih responsif terhadap ektrak

tersebut. Hal ini berarti sesuai dengan Andini (2010) yang menyatakan bahwa

tanaman meniran yang diekstrak akan bekerja secara optimal sebab mampu

Page 36: UJI BERBAGAI KONSENTRASI (EKSTRAK MAHKOTA DEWA DAN ...

perpustakaan.uns.ac.id digilib.uns.ac.id

commit to user

xxxvi

meningkatkan aktivitas sel yang membantu dalam pembelahan meristem

sehingga meningkatkan pertumbuhan tanaman. Maka untuk membentuk

jumlah tunas eksplan pegagan secara kultur jaringan, dapat menambahkan

ekstrak meniran sesuai kebutuhan. Hal ini juga terjadi pada pemberian

konsentrasi 5 ml/l ekstrak meniran yang meningkatkan hasil lebih banyak

daripada konsentrasi 25 ml/l. Grafik konsentrasi 5 ml/l dan 25 ml/l ekstrak

meniran disajikan pada gambar 9.

Gambar 9. Grafik konsentrasi 5 ml/l dan 25 ml/l ekstrak meniran terhadap

rata-rata jumlah tunas yang terbentuk

Terlihat pada gambar 9, bahwa meniran 5 ml/l lebih banyak membentuk

tunas yaitu 1,79 sedangkan meniran 25 ml/l hanya 1. Hal ini diduga

penggunaan konsentrasi ekstrak meniran yang terlalu banyak menghambat

metabolisme dan proses fisiologis pada tumbuhan yang mengakibatkan

jaringan meristem tidak dapat menyerap nutrisi yang diberikan dengan baik.

Hal yang sama juga terjadi pada ekstrak mahkota dewa.

0.5

0.25

0

0.1

0.2

0.3

0.4

0.5

0.6

5 ml/l 25 ml/l

Rata-rata juml

ah tunas

Mahkota dewa

Gambar 10. Grafik konsentrasi 5 ml/l dan 25 ml/l ekstrak mahkota dewa terhadap rata-rata jumlah tunas yang terbentuk

1.79

1

0

0.5

1

1.5

2

5 ml/l 25 ml/l

Rata-rata jum

lah tunas

Meniran

Page 37: UJI BERBAGAI KONSENTRASI (EKSTRAK MAHKOTA DEWA DAN ...

perpustakaan.uns.ac.id digilib.uns.ac.id

commit to user

xxxvii

Pada gambar 10. Konsentrasi 25 ml/l lebih sedikit membentuk tunas

eksplan pegagan yaitu 0,25 sedangkan pada konsentrasi 5 ml/l lebih banyak

yaitu 0,5. Sama halnya dengan ekstrak meniran, pada penambahan ekstrak

mahkota dewapun, apabila penambahan ekstrak dengan konsentrasi yang

terlalu banyak juga menghambat pertumbuhan tunas yang akan muncul.

0.7

1.1

0

0.2

0.4

0.6

0.8

1

1.2

1/2 MS MS

Rata

-rata ju

mlah tu

nas

Gambar 11. Histogram faktor media dasar terhadap rata-rata jumlah tunas yang terbentuk

Faktor media dasar juga memberikan pengaruh terhadap jumlah tunas

yang terbentuk pada eksplan pegagan. Gambar 11, menunjukkan bahwa

penggunaan media dasar MS lebih banyak membentuk tunas daripada ½ MS

dengan nilai rata-rata yaitu MS 1,1 dan ½ MS 0,7. Yuniyati (2005) melaporkan

bahwa media dasar ½ MS lebih tepat untuk perkecambahan biji dan

pertumbuhan protokorm anggrek Dendrobium hibrida. Sehingga untuk

membentuk tunas pada tanaman herbaceous seperti pegagan membutuhkan

konsentrasi penuh dari MS. Media MS mengandung unsur N yang banyak

sehingga eksplan pegagan responsif dan dapat melakukan metabolisme dengan

baik sehingga membentuk tunas anakan.

C. Tinggi Tunas

Tinggi tunas merupakan variabel yang diamati pada akhir pengamatan,

yaitu dengan mengukur tinggi tunas dari pangkal tunas yang muncul hingga

tunas tertinggi. Semakin tinggi tunas merupakan salah satu keberhasilan dalam

Page 38: UJI BERBAGAI KONSENTRASI (EKSTRAK MAHKOTA DEWA DAN ...

perpustakaan.uns.ac.id digilib.uns.ac.id

commit to user

xxxviii

melakukan multiplikasi. Histogram faktor Media terhadap rata-rata tinggi tunas

disajikan dalam gambar 12.

1.25

1.75

00.20.40.60.8

11.21.41.61.8

2

1/2 MS MS

Rata

-rata tin

ggi tuna

s (cm)

Gambar 12. Histogram faktor media dasar terhadap rata-rata tinggi tunas (cm)

Pada gambar 12 terlihat bahwa, pemberian konsentrasi media dasar MS

lebih besar menunjukakan nilai rata-rata daripada ½ MS yaitu 1,25 cm untuk ½

MS dan 1,75 cm untuk MS. Hal ini diduga karena pada penggunaan media MS

dengan komposisi yang penuh memberikan pengaruh yang baik sehingga

eksplan pegagan dapat responsif untuk melangsungkan metabolisme dan tunas

dapat berkembang dengan tinggi. Seperti halnya dengan variabel saat muncul

tunas serta jumlah tunas yang terbentuk, pemberian MS pun juga memberikan

hasil yang lebih besar daripada ½ MS. Media MS mengandung 40 mM N

dalam bentuk NO3 dan 29 mM N dalam bentuk NH4+. Kandungan N ini, 15

kali lebih tinggi dari media tembakau Hildebrant, dan 19 kali lebih tinggi dari

media White. Kalium juga ditingkatkan sampai 20 mM, sedangkan P, 1.25

mM. Unsur makro lainnya konsentrasinya dinaikkan sedikit (Yuniyati, 2005).

Maka dengan penggunaan komposisi yang tepat pada media MS, dapat

meningkatkan pertumbuhan tanaman sehingga eksplan pegagan dapat tumbuh

tinggi dengan maksimal.

Penambahan konsentrasi POC 20 ml/l juga memberikan pertumbuhan

tinggi yang maksimal dibandingkan dengan POC 2 ml/l. Histogram faktor

konsentrasi POC terhadap rata-rata tinggi tunas disajikan dalam gambar 13.

Page 39: UJI BERBAGAI KONSENTRASI (EKSTRAK MAHKOTA DEWA DAN ...

perpustakaan.uns.ac.id digilib.uns.ac.id

commit to user

xxxix

1.4

1.6

1.31.351.4

1.451.5

1.551.6

1.65

POC 2 ml/l POC 20 ml/lRata-rat

a tinggi t

unas (cm

)

Gambar 13. Histogram faktor konsentrasi POC terhadap rata-rata tinggi tunas

Gambar 13, menunjukan bahwa POC 20 ml/l memberikan nilai rata-rata

tertinggi yaitu 1,6 cm daripada POC 2 ml/l hanya 1,4 cm. Hal ini diperkirakan

bahwa pemberian pupuk organik cair dapat menyebabkan terdorongnya atau

terpacunya sel diujung batang untuk segera mengadakan pembelahan dan

pembesaran sel terutama didaerah meristematis. Hal ini sesuai dengan Suryanti

(2011) yang menyatakan bahwa pemberian pupuk organik cair yang

mengandung unsur N, P, K, Mg dan Ca akan menyebabkan terpacunya sintesis

dan pembelahan dinding sel secara antiklinal sehingga akan mempercepat

pertambahan tinggi tanaman.

2.3

0.75

0

0.5

1

1.5

2

2.5

MENIRAN MAHKOTA DEWA

Rata-rat

a tinggi t

unas (cm

)

Gambar 14. Histogram faktor penambahan ekstrak meniran dan mahkota dewa terhadap tinggi tunas

Page 40: UJI BERBAGAI KONSENTRASI (EKSTRAK MAHKOTA DEWA DAN ...

perpustakaan.uns.ac.id digilib.uns.ac.id

commit to user

xl

Pada gambar 14, menunjukan bahwa pemberian ekstrak meniran juga

memberikan rata-rata tinggi tunas tertinggi daripada mahkota dewa yaitu

sebesar 2,3cm dan nilai rata-rata ekstrak mahkota dewa yaitu 0,75cm.

Penambahan ekstrak meniran juga didukung dengan konsentrasi 5 ml/l ekstrak

meniran yang ditambahkan pada media penanaman. Grafik konsentrasi 5 ml/l

dan 25 ml/l ekstrak meniran terhadap rata-rata tinggi tunas disajikan dalam

gambar 15.

2.5

2

0

0.5

1

1.5

2

2.5

3

5 ml/l 25 ml/l

Rata-rata t

inggi tunas (cm

)

Meniran

Gambar 15. Grafik konsentrasi 5 ml/l dan 25 ml/ ekstrak meniran terhadap rata-rata tinggi tunas

Pada gambar 15, menunjukan nilai rata-rata dari ekstrak meniran 5 ml/l

dan 25 ml/l yang ditambahkan pada eksplan pegagan yaitu masing-masing

2,5cm dan 2 cm. Itu berarti dengan hanya menambahkan ekstrak meniran 5

ml/l saja, sudah dapat memberikan tinggi tanaman yang maksimal pada

eksplan pegagan, diduga karena konsentrasi yang terlalu tinggi dapat menjadi

toksik terhadap tanaman, sehingga dapat menghambat pertumbuhan tanaman.

Hal ini juga terjadi pada penambahan konsentrasi ekstrak mahkota dewa.

Diketahui bahwa pada dasarnya tanaman mahkota dewa meskipun

mengandung banyak senyawa yang bermanfaat bagi manusia yang dijadikan

sebagai bahan obat tetapi juga bisa bersifat toksik bila salah cara pengolahan.

Grafik konsentrasi 5 ml/l dan 25 ml/l ekstrak mahkota dewa terhadap rata-rata

tinggi tunas disajikan pada gambar 16.

Page 41: UJI BERBAGAI KONSENTRASI (EKSTRAK MAHKOTA DEWA DAN ...

perpustakaan.uns.ac.id digilib.uns.ac.id

commit to user

xli

2

0.5

0

0.5

1

1.5

2

2.5

5 ml/l 25 ml/lRata-rata

tinggi tuna

s (cm)

Mahkota dewa

Gambar 16. Grafik konsentrasi 5 ml/l dan 25 ml/l ekstrak mahkota dewa terhadap rata-rata tinggi tunas

Gambar 16 menunjukkan nilai rata-rata konsentrasi 5 ml/l ekstrak

mahkota dewa lebih tinggi daripada konsentrasi 25 ml/l yaitu 2 cm dan 0,5 cm.

Terlihat bahwa semakin tinggi konsentrasi yang ditambahkan maka akan

menghambat pertumbuhan. Hal ini diduga karena dalam pembuatan ekstrak

mahkota dewa, menggunakan bagian biji yang diketahui bahwa pada biji

mahkota dewa terdapat senyawa yang toksik yang dapat membunuh bakteri,

sehingga adanya senyawa tersebut juga menghambat pembelahan dinding sel

sehingga tanaman tidak dapat tumbuh optimal.

Tabel 4. Rata-rata tinggi tunas (cm) eksplan pegagan pada umur 60 HST tiap kombinasi perlakuan

½ MS MS POC 2 ml/l POC 20

ml/l POC 2ml/l POC

20ml/l

Meniran

5ml/l 2 2 3 3

25ml/l 2 2 2 2

Mahkota Dewa

5ml/l 0 2 0 2

25ml/l 0 0 2 0

Pada tabel 4, menunjukkan bahwa kombinasi perlakuan yang

menunjukkan pertumbuhan dengan tinggi tanaman yaitu pada kombinasi no 13

Page 42: UJI BERBAGAI KONSENTRASI (EKSTRAK MAHKOTA DEWA DAN ...

perpustakaan.uns.ac.id digilib.uns.ac.id

commit to user

xlii

dan kombinasi no 9. Kombinasi no 13 terdiri dari MS; POC 20 ml/l; Meniran 5

ml/l sedangkan kombinasi no. 9 terdiri dari MS; POC 2 ml/l; Meniran 5 ml/l.

Tinggi tunas pada kombinasi no 13 dan 9 mencapai 3 cm. Hal ini diduga

karena kombinasi tersebut, terdiri dari penambahan yang komplementer dalam

menunjang pertumbuhan tinggi tunas eksplan pegagan. Meskipun penambahan

konsentrasi POC berbeda, ternyata pertumbuhan tinggi tanaman menunjukan

nilai yang sama pada 60 HST. Diketahui bahwa media MS dengan kompisisi

yang penuh, dapat merangsang eksplan pegagan, sehingga responsif dalam

perpanjangan sel-sel dan ditambah pula tambahan nutrisi yang berasal dari

POC.

D. Jumlah Daun

Daun merupakan salah satu organ penting bagi tumbuhan yang tumbuh

dari batang, umumnya berwarna hijau dan berfungsi sebagai penangkap energi

dari cahaya matahari melalui fotosintesis. Fotosintesis yaitu proses

pembentukan karbohidrat dari CO2 dan H2O dengan bantuan sinar matahari.

Semakin banyak jumlah daun, mengindikasikan pertumbuhan eksplan yang

semakin baik.

Tabel 5. Rata-rata jumlah daun eksplan pegagan pada umur 60 HST tiap kombinasi perlakuan

½ MS MS POC 2 ml/l POC 20

ml/l POC 2ml/l POC

20ml/l

Meniran

5ml/l 2 1 1,7 2,5

25ml/l 1 1 1 1

Mahkota Dewa

5ml/l 0 1 0 1

25ml/l 0 0 1 0

Pada tabel 5, menunjukkan bahwa untuk variabel jumlah daun terbanyak

ada pada kombinasi perlakuan no 13 yaitu sebanyak 2,5. Campuran dari MS;

POC 20 ml/l; dan Meniran 5 ml/l, mampu merangsang eksplan pegagan

Page 43: UJI BERBAGAI KONSENTRASI (EKSTRAK MAHKOTA DEWA DAN ...

perpustakaan.uns.ac.id digilib.uns.ac.id

commit to user

xliii

sehingga dapat melakukan pertumbuhan dengan baik. Jumlah daun yang

terbentuk dipengaruhi oleh adanya penambahan POC serta meniran yang

ditambahkan pada media tanam, sehingga mendukung dalam pembentukan

perkembangan daun.

0.75

1.03

00.2

0.40.6

0.8

11.2

1/2 MS MSRata

-rata J

umlah

daun

Gambar 17. Histogram faktor media terhadap rata-rata jumlah daun

Gambar 17, menunjukan bahwa pada penggunaan media MS lah yang

mampu membentuk jumlah daun terbanyak. Rata-rata jumlah daun dari MS

1,03 dan ½ MS 0,75. Kebutuhan eksplan akan unsur hara sangat bergantung

pada jenis tanaman yang digunakan, ketersediaan unsur hara dalam jumlah

optimal selama masa pertumbuhan berdampak terhadap peningkatan laju

pertumbuhan. Unsur hara terutama N dimanfaatkan oleh tanaman untuk

membentuk asam amino yang akan diubah menjadi protein. Pada proses

pembelahan sel, protein merupakan sumber energi untuk terjadinya proses

meiosis dan mitosis (Yuniyati, 2005). Hal tersebut diduga juga mempengaruhi

eksplan pegagan sehingga pada penggunaan media MS penuh, jumlah daun

lebih banyak dari pada yang ½ MS. Faktor lainnya dalam membantu

pertumbuhan jumlah daun pada eksplan pegagan yaitu penggunaan POC.

Page 44: UJI BERBAGAI KONSENTRASI (EKSTRAK MAHKOTA DEWA DAN ...

perpustakaan.uns.ac.id digilib.uns.ac.id

commit to user

xliv

0.96

0.94

0.930.935

0.940.945

0.950.955

0.960.965

POC 2 ML/L

POC 20 ml/l

Rata-rata

jumlah daun

Gambar 18. Histogram faktor konsentrasi POC terhadap rata-rata jumlah daun

Pada gambar 18 terlihat bahwa POC 2 ml/l memberikan jumlah daun

terbanyak sebanyak 0,96 dibandingkan POC 20 ml/l hanya 0,94. Pada dasarnya

POC mengandung unsur hara yang diperlukan oleh tumbuhan salah satunya

adalah unsur nitrogen. Unsur hara nitrogen dan unsur hara mikro tersebut

berperan sebagai penyusun klorofil sehingga meningkatkan aktivitas

fotosintesis tersebut akan menghasilkan fotosintat yang mengakibatkan

perkembangan pada jaringan meristematis daun (Poewowidodo, 1992). Hal ini

tidak sesuai pada eksplan pegagan, meskipun pada konsentrasi 20 ml/l jumlah

daun tetap muncul tetapi tidak sebanyak POC 2 ml/l, diduga karena terlalu

banyak penggunaan konsentrasi unsur hara, kemungkinan akan bersifat toksik

pada tumbuhan sehingga menggangu aktivitas fotosintesis.

Selain itu pula, pada penelitian ini, nutrisi yang ditambahkan tidak hanya

berasal dari POC saja melainkan juga berasal dari penambahan bahan organik

yaitu ekstrak meniran dan mahkota dewa.

1.4

0.37

0

0.5

1

1.5

Meniran Mahkota dewa

Rata-rata ju

mlah daun

Gambar 19. Histogram faktor penambahan ekstrak meniran dan mahkota dewa terhadap rata-rata jumlah daun

Page 45: UJI BERBAGAI KONSENTRASI (EKSTRAK MAHKOTA DEWA DAN ...

perpustakaan.uns.ac.id digilib.uns.ac.id

commit to user

xlv

Pada gambar 19 menunjukkan bahwa ekstrak meniran memberikan

jumlah daun yang lebih banyak daripada ekstrak mahkota dewa yaitu sebanyak

1,4 dan ekstrak mahkota dewa 0,37. Hal ini diduga adanya senyawa dalam

mahkota dewa yang menghambat pembentukkan daun, sehingga eksplan

pegagan tidak dapat merespon ekstrak mahkota dewa dengan baik. Sama

halnya dengan variabel yang lain, pada jumlah daun penambahan ekstrak

menira dengan konsentrasi yang rendah, mampu membentuk daun lebih

banyak. Grafik konsentrasi 5 ml/l dan 25 ml/l ekstrak meniran dan mahkota

dewa terhadap rata-rata jumlah daun disajikan dalam gambar 20.

Gambar 20. Grafik konsentrasi 5 ml/l dan 25 ml/l ekstrak meniran dan mahkota dewa terhadap rata-rata jumlah daun

Dari gambar 20 terlihat bahwa penambahan ekstrak meniran dan

mahkota dewa yang menggunakan konsentrasi yang rendah menunjukkan nilai

rata-rata yang lebih besar dari pada konsentrasi yang tinggi yaitu untuk ekstrak

meniran dan mahkota dewa konsentrasi 5 ml/l masing-masing bernilai 1,8 dan

0,5. Sedangkan untuk konsentrasi 25 ml/l penambahan ekstrak meniran dan

mahkota dewa masing-masing yaitu 1 dan 0,25.. Hal ini diduga penambahan

konsentrasi yang terlalu tingga, kemungkinan bersifat toksik terhadap beberapa

eksplan pegagan sehingga seharusnya metabolissme dan proses fotosintesis

yang akan membentuk fotosintat terhambat sehingga sel tumbuhan yang

seharusnya membentuk jaringan dengan sempurna juga terhambat dan daunpun

0.5

0.25

0

0.1

0.2

0.3

0.4

0.5

0.6

5 ml/l 25 ml/l

Ra

ta-r

ata

ju

mla

h d

au

n

Mahkota dewa

1.8

1

00.20.40.60.8

11.21.41.61.8

2

5 ml/l 25 ml/l

Rat

a-ra

ta ju

mla

h da

un

Meniran

Page 46: UJI BERBAGAI KONSENTRASI (EKSTRAK MAHKOTA DEWA DAN ...

perpustakaan.uns.ac.id digilib.uns.ac.id

commit to user

xlvi

tidak terbentuk. Bahan organik dapat merangsang pertumbuhan tanaman secara

signifikan apabila, menggunakan konsentrasi yang tepat sebab apabila

konsentrasi berlebih bagi tanaman, maka akan menghambat metabolisme

tanaman ( Bowo, 2010).

Page 47: UJI BERBAGAI KONSENTRASI (EKSTRAK MAHKOTA DEWA DAN ...

perpustakaan.uns.ac.id digilib.uns.ac.id

commit to user

xlvii

V. KESIMPULAN DAN SARAN

A. Kesimpulan

Berdasarkan hasil penelitian ini dapat diambil kesimpulan bahwa

penggunaan media dasar MS, penambahan pupuk organik cair 20 ml/l dan

ekstrak meniran 5 ml/l dapat memberikan pertumbuhan yang paling baik

dalam pengembangan kultur jaringan tanaman pegagan (Centella asiatica L.)

B. Saran

Berdasarkan hasil penelitian yang diperoleh, penulis memberikan

saran bahwa untuk penelitian lebih lanjut sebaiknya menggunakan media MS

bagi kultur tanaman pegagan (Centella asiatica L.) dan dilakukan

penyempitan range konsentrasi pupuk organik cair dan mencari alternatif

bahan organik lain yang lebih akurat untuk multiplikasi tunas pegagan.

Page 48: UJI BERBAGAI KONSENTRASI (EKSTRAK MAHKOTA DEWA DAN ...

perpustakaan.uns.ac.id digilib.uns.ac.id

commit to user

xlviii

DAFTAR PUSTAKA

Andini, Aditya. P. 2010. Pengaruh Pemberian Simunox Terhadap Kadar Interferon Gamma (IFN-) Pada Mencit Swiss. Skripsi Fakultas Kedokteran UNDIP. Semarang.

Anne, Ahira. 2010. Mengenal Jenis Tanaman Antibiotik. www. anneahira.com. Diakses 15 Desember 2010.

Arniputri, R.B. 1993. Studi Beberapa Jenis Substitusi Agar Dan Pengaruhnya Terhadap Empat Jenis Tanaman Penguji Dalam Kultur Jaringan. Program Pasca Sarjana IPB. Bogor.

Bowo, Tatries. 2010. Pembentukan Tunas Lengkeng Dataran Rendah (Dimorcarpus longan. Lour) Pada Berbagai Konsentrasi BA Dan Bahan Organik Secara Invtro. Skripsi Fakultas Pertanian UNS. Surakarta.

BPTP. 2010. Budidaya Tanaman Pegagan. www.bpto.com. Diakses 15 Desember 2010.

Budi, Sahjaya. 2010. Tanaman Dari Dewa. www.nyata.co.id. Diakses 15 Desember 2010.

George, E.F. Dan P. D. Sherrington. 1984. Plant Propagation by Tissue Culture. Exegetics Limited. England.

Hendaryono, D. P. S. dan A.Wijayani. 1994. Teknik Kultur Jaringan Pengenalan dan Petunjuk Perbanyakan Tanaman Secara Vegetatif Modern. Kanisius. Yogyakarta.

Hendri, G. 2007. Mikropropagasi Tunas Stroberi (Fragaria sp) Dengan Pemberian NAA dan BAP Pada Media MS. Skripsi Universitas Sumatera Utara.

Hyndman, S.L, P. M. Hasegawa and K A. Bressand. 1982. Stimulation Of Root Invitiation From Cultured Rose Through The Use Concentration Of Mineral Salt. Hort. Sci 17 (1): 82-83.

Ika, Puspitasari. 2006. Efektivitas Konsentrasi Sorbitol Medium Purifikasi Dalam Menghasilakan Jmlah Sel Viabel Pada Isolasi Sel Mesofil Daun Pegagan (Centella asiatica (L.) Urban). Buletin Anatomi Dan Fisiologi Vol XIV, No. 2.

Indrakusuma, 2000. Proposal Pupuk Organik Cair Supra Alam Lestari. PT Surya Pratama Alam. Yogyakarta.

Page 49: UJI BERBAGAI KONSENTRASI (EKSTRAK MAHKOTA DEWA DAN ...

perpustakaan.uns.ac.id digilib.uns.ac.id

commit to user

xlix

Januwati, M. 2005. Budidaya Tanaman Pegagan. Balai Penelitian Tanaman Obat dan Aromatika Sirkuler No. 11.

Mattjik, N. A. 2005. Peran kultur Jaringan dalam Perbaikan Tanaman. FP. IPB. Bogor.

Nakita. 2010. Meniran, Tanaman Pemacu Kekebalan Tubuh. Dexa-medica.com. Diakses 15 Desember 2010.

Nina, M. 2004. Teknik Modifikasi Media Murashige Dan Skoog (MS) Untuk Konsentrasi In Vitro Mawar (Rossa spp.). Buletin Teknik Pertanian Vol 9. Nomor 1.

Nugroho, A. dan H. Sugito. 1996. Pedoman Pelaksanaan Teknik Kultur Jaringan. Penebar Swadaya. Jakarta.

Pierik, R.L.M. 1987. Invitro Culture Of Higher Plants. Martinus Nijhoff Publishers. Netherlands.

Poewowidodo. 1992. Telaah Kesuburan Tanah. Penerbit Angkasa. Bandung.

Purbiati, T. dan R. Triatminingsih. 1992. Pengaruh Penambahan Beberapa Zat Pengatur Tumbuh terhadap Pertumbuhan Eksplan Kesemek. J. Hort. 2(3):34-36.

Pusat Studi Biofarmaka-IPB. 2010. Pasar Domestik Dan Ekspor Produk Tanaman Obat (BIOFARMAKA). IPB. Bogor.

Putra, Dhanang, P. 2010. Isolasi Senyawa Filantin Dari Daun Meniran (Phyllanthus niruri Linn). Skripsi S1 Fakultas Farmasi UMS. Surakarta

Rao, S. 1994. Mikroorganisme dan Pertumbuhan Tanaman. Universitas Indonesia. Jakarta.

Riana. 2010. Pengembangan Tanaman Meniran. www.tanaman obat.com. Diakses 2 Desember 2010

Riandi. 2010. Pegagan, Tanaman Liar Sejuta Manfaat. www. iptek.net.id. Diakses 2 Desember 2010.

Robbin dan White, citt,. Tatries Bowo. 2010. Pembentukan Tunas Lengkeng Dataran Rendah (Dimorcarpus longan Lour) Pada Berbagai Konsentrasi BA dan Bahan Organik Secara In Vitro. Skripsi Fakultas Pertanian Univesitas Sebelas Maret. Surakarta

Sarjana Parman. 2007. Pengaruh Pemberian Pupuk Organik Cair Terhadap Pertumbuhan Dan Produksi Kentang (Solanum tuberosum L.). Buletin Anatomi dan Fisiologi. Vol. XV, No. 2.

Page 50: UJI BERBAGAI KONSENTRASI (EKSTRAK MAHKOTA DEWA DAN ...

perpustakaan.uns.ac.id digilib.uns.ac.id

commit to user

l

Sevon, N. and Candentey, K.M. 2002. Agrobacterium rhizogenes Mediated Transformation Root Culture as A Source of Alkaloid. Planta Medica. 68: 859-950.

Sovia, Lenny. 2006. Senyawa Flavonoida, Fenilpropanoida Dan Alkaloida. Karya Imiah Fakultas Matematika dan Ilmu Pengetahuan Alam Universitas Sumatera Utara Medan.

Suryanti. 2011. Aplikasi POC. www.indofarm.com. Diakses 5 Juni 2011.

Suskendriyati, H., Solichatun, Ahmad D.S. 2003. Pertumbuhan dan Produksi Saponin Kultur Kalus Talinum paniculatum Gaertn dengan Variasi Pemberian Sumber Karbon. Berita Biologi. 6 (1): 19-23.

Wattimenna, G.A, N.M.A. Wiendi dan L.W. Gunawan. 1991. Zat Pengatur Tumbuh Bioteknologi Tanaman. PAU Biotek IPB.Bogor.

Wetter, L.R. dan F. Constabel. 1991. Metode Kultur Jaringan Tanaman.ITB Press. Bandung.

Widiastoety, D., S. Kusumo dan Syafni. 1997. Pengaruh Tingkat Ketuaan Air Kelapa dan Jenis Kelapa terhadap Pertumbuhan Plantlet Anggrek Dendrobium. J. Hort. 7(3):768-772.

Yuniyati, N. 2005. Pengaruh Konsentrasi Media MS dan NAA Terhadap Pengakaran Alocasia suhirmaniana Secara Invitro. Skripsi Jurusan Budidaya Pertanian FP IPB. Bogor .

Yusnita. 2003. Kultur Jaringan Cara Memperbanyak Tanaman Secara Efisien. Agro Media Pustaka. Jakarta.