The role of flagella and motility in the adherence and invasion to fish cell lines by Aeromonas...

5

Transcript of The role of flagella and motility in the adherence and invasion to fish cell lines by Aeromonas...

��� ���� �� ������ �� �� ��� � � �� �������� �� ������

� ��� ���� ���� �� ��������� ������ �

�������� ���� � ����

����� ������ ������ �������� ����� ������ !�� �" ����#� $

������������ � �������� ������ ��������� � ����� ���� ������� ���� ���� ����� ���� !����

�������� % ����� &''() ������� *+ ����� &''() ����� �� � ���� &''(

��������

,� �������� �� ����� � �� ��������� ������ � -���. ��� � ���� �� �������� ����� �.�� ��� �� ��������� �� � �

�� �� ���� �� � � ������� � �������� ������ /0 ���� � ������� �� �" ������ � 1.� 2����� -���. ���3 ��

����-� ���� �� � � � ��4� ������� �� � �� �� ���� � ������ �� ����� -� ���� ���� ����" ,� ���� �� �� ��� � ��

���� ��� � ���� � ���� ��� �������� �� ���� �� ��������� �� ������� �� ���� ��� ��� �� ����� � � ����� �� ���� ���� ����"

,� ��� ���� �� �� ������� ��� �� � ������� �� �� �� ��� � ��� ���� �� ������� � �" ������ � �������� ����

��� ����� ������ �� �� � ���� ���� ����"

#�$���% ��������� ������ � ) �������� ����) �� ��� �) 5������) ������� �� ������

�� ���� ����

�� ��� ��������� ������� ��� ���6�� ��� �����.

� � �� �� �6�� �� ������� �� ��� ���� ��.

������� � �� ��� �� �� ����� ��������� �� ��

� �� ��� ��� �� ��7��� ������" �� ��� ������&

��� � ���� ���� ��� ���� ���� � �� ����� �� ��

�.� �� �� 89� :&;� ���� 4�- �� �� ���� ��

� ��" �������� ���� � ���� �� �" ������ �

���� ��� ��������� ���� ������� ��� :*; ��

���� ������� �������� :�;) ��� ��� �� ����

��� ����� ��������� �������� �� �����

��� *%"�< �� ��� ���� ���" 9������� ���� �� ���

���� ������ �� ��������� ������ � �� � �������

�� ��� �� � ����� � �� �6�� �� �� ����� ���� ��.

����� ������ ����� :��=;"

�� ��� � �� �� ������� �� ������ ���� ���

���� �� � ��7��� ����� ����� � �� ��� ����� �� ��.

������ �������� �� �������� � �� ������ ��

��4���� �� ����� :%>+;" ,� �������� ���� �� ����� ��

�� �������� 2�.�� ���3 �� � � �� ������� ��.

������ �� �" ������ � � ���� �� �������� �����

�� �������� � �� �� �� �� � �� �� �������.

� ������ /0 ���� � ����� ������� �� ��

-���. ��� � ���" ,� � ���� � ���� -� � ����� ��

���� �� ������ �� �� ��� � � �� ������� � ��

������ �� ��� ���� ���� �� �" ������ � ��������

����"

?�(+.&?'( @ '( @ A&("?? B &''( 5����� �� �� C������ �������������� ����� ���" 9�������� �� C������� ������ D"E"

'(( � ? � ( + . & ? ' ( 2 ' ( 3 ? ? & % * . %

$ F��������� �� ���" ���" � G�� 2�3 �?*&�+%)5�H� G�� 2�3 �&&?='*) C.����� I�� J��� ���"���"��"��

5C�� ����������� 8� ��� &=& 2&''(3 *&�>*&(

�� �������� �� ��� ��

���� ������� ������� ����� ��� ����

��� �� ����� ��� ������� �� ����� � ����

��� ����� ���������� ������������������� � �����

��� ���� ���� ����� ��� ��������� ���� ��������

������ � ! �!"�# � $ �!!� ��� � � �!$� ����

���� ����������%�� ����� ���& ���� '��� ���������

� �� ����� ��� ()��� ��� ����� ���� � ��� �

��������� ��'�� ��� ����� ��������� '�� �����

��� ��� ���� � ������� ��� ���� '��� !�*+

����� � ������� �� ���� '� ����� "�,+ ���� �

������� ��� ����� ������������ ����������� � ���

�������� '�� ������� �� � ��� ����� -������ '���

� ���� ��'� �� $"./�

�������� ��� � ����� '��� ������� ���� ����

�������� ������ �� ����� ��� ��������� ����

���� ��������

�������� ������� � ������� � ��0�� 1������

������ ()�� '�� ������ �� �� �� 2�' 3������ 4����

������� �� ����� ��� ��������� �!���

���� �������������� �� �������� �������

����� ��'� � ��������� ���� ������ 5�� � !""

��6�� ��������� ��� $* ��6�� 7��������8

'��� ������� '��� ���� � �������� ��� 0����� 5 �����

��� /���# �����# (8� 9���� 0����� '��� ����

���7��# ��� �������� '��� �����0� 1������ ������

������� � 5!�!"""8 ��� ������� '��� ��� �����������

��� ���� ��� : ��7����� ���������� 5����

������8� ��� ������ ���� ���� �������� �������

'��� � ��0�� ��� ���������� ����� �� ��� ���� ���

��� ��# ��� ������� � �������# �������� 1������#

���������������� ��� ������������ ��������

���� � � ������������ �������������� ������ ���

������� �������

����� '��� � ��0�� �� �� ����� ��� ������� ���

�����%�� �� ����� ��� ��������� ��#!$��

���� ������ ������ �����!���

-9-��(:; '�� ������� �� ��� ����� ��

<������ �!��� -������ '��� ��=�� !�! '��� ������

� >�� 5��������� �+ -9-8# ����� � * ���# ��� !"

�� ������ '��� ������� � ��� ���� <�������������

��� ����� '��� �������� �� ��� ������ �������� �����

���� ��� ?����� �!*��

��"� ������� ������� �

2������� �������� ������� �������� '���

����� ��� � ��0�� 1������ '��� �� ����� ��� ���

������� �!$��

��#� $�����

��� ������@ �� ��� � ��� ��������� �����

��� '��� �� ����� ��� ��������� �!$��

��%� &������ '(� �������

92( ����� ������ '��� ������� � ����������� ��

����� ��� ��������� �!,��

��)� *���������� �� �� �� ����� ��� �+�� ������

������

�� ����� ��� ()�� ������ 92( '�� �������

��� ��������� �������� '��� ,���( �� ����� ��� ���

������� �!,�� /���� �<($�!A �!A� '�� �������� '���

���BB# �������������� ��� ���� ������� � ,���(

������ 92( �������� 5����=������� $" 7�

���� ��%�8� 92( ���7����� '�� ��� ���� :����

���7 :�� BBB 5-���������8 ��� ������� � ���

9)*� '�� ������� � �������� � ��� ��� ��� ��

��C� ����� ������ D��������� ����� '��� ��������

���� ��� ���������� �����������

���-� .�� ���� ����

;�/ ����� 5���������� ��� �� � ����# *� ��

��� ��� �8 '��� ��'� �� $*./ �!E�� -�< ����� 5���

���� ������8 '��� ��'� �� $"./ �!���

����� /* ��� ,�� ��������� ��� �0���� ������

(����� '��� ������� �� ��� ������ ����

��������� �� ��� �$"�� ����1�# ����=������� $�!"�

�������� '��� ������� �� � ��1 ��� �������

�� � A�!"� ;�/ � -�< ����� ��� '��� �

,� $���� �� ��� 1 . $, $��������� ������� ��� 2�))#3 ���4��#$!�

������� ����� �� � ������ �� �� �� ���� ��� � �

���� � ���������� �� �� ������� ���� � ����

���� ����� �� ���! � ��� �� ����� ��� �� �������

��� ������!�� �� "����� ��� #� �� ����� �� ��

������ $�#%� &�� ����������� �� ������ � ���

���� ���� ������ �'����(�� � )�*�+ ���� ��

���� ������� ���� ����! �!������ ��� � �� �����

�� � ��! ��� ����� �� ���� ���#� ,���� -�#��

�� ��������� �� ����� �� ����� � ����� ����

&�� ����������� �� �(���� ��� ����� �� ���

������ �'����(�� ���� )�*�+ ���� �� ���� �����

��� �� ����� �������������.���������� ������

�����! !����� � /#�� �!���0 ��� ����� ��

*��� �'��� ������� �� ������ 1���� # � � ������ ���

����� �� ��� ������ ��� � ���� )�*�+ ���� ��

���� ������� �� � ��� ���� ���#� ,���� -�#�� ���

"� ��2 ��� �������� ���� ������� �� ����� ����

��������� � ����� ���� �(���� ������ ��� �'�

������� �� ��� ��� ���!� �� ��� �� ���� ���(�(�!

��� !����� � ��������2 ������� �� ����� ���� �'�

������� �� ��� ����� ����� �� �� ����� ���������

������� �������� ��������� � ���� �'��������

�� ���� �(������� � ��� ������� ��� � �� �����

� ������ ��� �(������� ���� ������ 3'�� � 4��

������� �� 5����� ������� ��(������� ���� ���

������ � !���� �� ��� ��� ������ �� ������ �

��� �������� � ���!���3��� �� ��� �� � &�� �� �

���� �� ����� ������! �� "� ������ ���� ��� ����

���� �� � �� ��� ����� ��� ���� ������ ,��

���� � ���� ��������� �� ����� � ������ ����

�� ������� � �������

6� �������� ������ ��(��� �� 7�!���� ����

������ 1)���� �� 1)���8 � ,� �������� ���

��!����� �� ������ ����! �� ��� ����� ���(��

9� ��:���� ����� ������ ���� ������� ��

��� � ������ 1)�44; �� 1)�4;� /����(�� ����

1)���� �� 1)���8 ����� ��(�� 0 ���� ����������

��(�� ,���� ������ ���� �������� ������ �������

� � �� ��� 7�!�������� �3 �� ��������!� <9" ��

� 7�!���� ���� �� �����(�� � �!���(� �����!

��� ��� �� ��� �� � ,�� ���� ������(� �� �� ����

�����!� <9# �� �������� �� �� ��������!� <9�

��� !��� �� ���� ������� ���� ��� ������ ��

������� �� ������ �� ������������� �������

��� � ���� ����� �� �� ����� �� ��� ������ �� �������

,���� ������� ��� ��� ���� ��� ������ ������ �

���������� � ����� �'����� ����� � ����� ���� ���

�� * �� 7�!�����

1 ����������� !���� ������ �� �� ��������

1)�" ���������� =>1 ��� ����� ��� �� ��

����� �� ��� � ��� =)�� � ���� ��! ����� ���

/�� �!���0��������� ����� ,���� ���� ���� ����

��!����� ���� ��� ������ ������� �?@��4" /��� ����

� ����������0 $�% � ���������� ����! ���! 1)�

44; /,� �7�!����� �����0 �� �� ����� ����� ���� ��

�! ��� ������� � /#�� �!���0 ����� ��� �� *��

�� � ������� �� 1���� ��� ����! ������ ����

������ ����� ���� ��� �3 ��������� �!���� ���

7�!����� 6� ���� �� ������(� ��� /����� 1)�

,���� #

,�� ������ � �� ��:���� �� �������� ������ ���� ����!���� �D"� �� A<� �� BEC ����

B���� 1����� � /�0 ���

A<� ���� BEC ����

1)�" /������ ��0 #��# F ���� #�"� F ��"#

1)���� /1)�" ������� ��0 #�#� F ���8 #�"" F ����

1)�44; /,� �7�!����� �����0 ���� F ���� ��"� F ����

1)�4�# /1)�44; ��� �! �C1��#40 ���" F ���� ���� F ���"

1)�;"" /1)�44; ��� �! ��B&C1"0 #�#4 F ��#� #��8 F ��"�

E�� /������ ��0 #��8 F ���8 #�"� F ��"�

1)���8 /E�� ������� ��0 #��� F ���# #�"8 F ��"�

1)�4;� /,� �7�!����� �����0 ���� F ���" ��"� F ���8

1)�4�� /1)�4;� ��� �! �C1��#40 ���# F ���� ���� F ����

1)�;"� /1)�4;� ��� �! ��B&C1"0 #��� F ���" #�"# F ����

�1����� � �� ��� ��� ���!� �� ���� �� ����� ������! ����� �'����(� �����! ������� !����� � ��������� >������ �������� ���

���F ������� ��(����� /�� "0� ,�� �!���(� ����� ��� ������ � ��� � ��� =)�� ��� � ������ ��#8F ���;� ������ � �� ���

������(� ����� � � ��� A<A� ����� ��� � ������ ;�� F #��� ������ ��

�� ����� �� ��� � � �� ���������� ������� ��� ������ ��� ��� �#�

���� ����� ������ �� �������� ������ ����

����� �������� ������ ����� ��� �� �������

�� ������� ����� �� �!!� " �� � ��� � ����� �!���

�� �������"� ��� ����� ��� �� ������ �

#$� ��� ��� �!� � �!�% ������� ��� �!� �!�

���!���� �� ��� �!!�� �� �� �����& '(��

� ���� �����&� ����� ����� ���� ���! ������ �����

��� � ���� ������% �� �! � ����� ������ ���

�����& ������ �!" �� ����� ��� � ���)&*�

+*�, '� ����� ����&* ��� ����&)� ������ ���!"� ����

��� �!!�� �� �� �� ����� �� �� ������ � #$�

��� ���� �!�� �� ���� ���� ����� �� �� � �����%

���� �������� �� ��� ��� �

�� ���� �� -�!� *� �� ��!�� "�� � ����� � ��

��(������������� �� �� �� � �!��"� ����� ��� ��

��������� '����.��� �!" /�(!� ��������� 0#�

��� �1� ��� ��!! !���� ��� �� -�� ��� �!!�� �� ��

� �����% ������� ���� ���� �� �� � ����� ����

��� �� ������� �!����� 23� '�������� �� �

�!!� ��� ��� � �!��� ��" ����� �� ���� ������

���� 0#� ��� �1� ��!!� �� �� ��!�� "�� � �����

'-�!� *�% 3 ���� �� �� ��������� ��� ��!!� ����

������ � ���� �� ��� �!!�� �� �� � ��� ��

���� �� �� � ������ �� ����� ��� �

���)&*� �!�� �� �� ��" 23� ����� % ��� ����

���� ���� �� -�� ��� �!!�� �� �� � ���� ��.��

�� � 0#� ��� �1� ��� ��!!� ��� ��� ��(� �� ����

����� �� +)*, ���� ��� � �%/�(!� �������� �� ���

������� �� �������� �� � �� ������ ��(� �� ����

�!��% -��� �� �� � �� �� ��!! �� �� �� �!!� ���

����!� ��������� � �!� " �� ���!" �� �� ���

�� �� (�� � (� �� ��������� ( ���� ��� ���

�4�5 �� ��������� � ����� �1� ��� 0#� ���

��!!�% �!�� ���� ��� �� ��� ��������� (� �!! ��

� ����� �1� ��� 0#� ��!!�%

-�!� ) ���� �� ����! � ����� (� ������� (

���� � ����� 0#� ��� �1� ��� ��!! !����% 6 ��

���� �� � � �� �� -�� ��� �!!�� �� �� �

���� ��� ��(� �� �� � �� ��7��" �� ��!!� � �� ��

����� ( �� �.������� ����� �� ���� �� ���

��!�� �� �������� ( � �!� " � ������� ��� �����

(�� �� �� ������� +)*,% 8�!�� "�� � ����� '�

��(������������� �� �� �� �� ��� -�� ��� �!!�� ���

�� � ������ �� ������� '�� � �� �!!� ���

� �!�� ����� ����!�� �� ���� ( ������� 0#�

��� �1� ��� ��!! !����% ������� �� -�� ��� �!!��

�� �� � ����� '�� ��� �� � � �� �� �� �����

��� � ���)&*�� ����� ����.��� �!" 9�(!� ���

��� �� �� �� �� ��� ( ������� �� ���� ��!!

!����� ��� ���� ���!!" �����������% -���� ����! �

������ � �� �� �� �!!�� ��� �� ������� ��

����� � � �������� �!���!" ��������� �� �� ��� ( ���

�����% �� �(��� � ����� ��� ���� � ����� �����

� �� ��� ������� �� � (� �1� ��� (� 0#� ��!!�%

6( ���� � ����� ��� �������!" ��� ��� �� �� �

�����!���� �� �� ������ '/9:� (� �/ ����

� ���� �� ������� �� �!!�� �� ������� ( ��

��!�� "�� � ����� ��� �!�����% 3 �;�� ��� ����

-�!� )

-�� ������� ( ��;���� �� ��������� � ����� (�� ��� ��� �4�5 ( 0#� ��� �1� ��!!�

� ���� 6������ '=� (�

0#� ��!!� �1� ��!!�

���� '��!�� "��� <%5&> <%<� <%/�> <%**

���5</ '���� ��(��������� <%/*> <%<& <%/&> <%**

������ '-�� ��� �!!�� �� �� � <%<<�> <%<<� <%<*<> <%<<5

����&* '������ ����"�� ���)&*�� <%<<�> <%<<) <%<<&> <%<<�

������ '������ ����"�� �������� <%5/> <%<9 <%/�> <%*)

1�/ '��!�� "��� <%/*> <%<� <%9<> <%*<

���5<9 '1�/ ��(��������� <%5&> <%<� <%/�> <%<&

�����& '-�� ��� �!!�� �� �� � <%<<�> <%<<5 <%<<�> <%<<�

����&) '�����& ����"�� ���)&*�� <%<<9> <%<<� <%<<�> <%<<5

�����& '�����& ����"�� �������� <%5�> <%<& <%/9> <%*<

�6������ �� �� ������ � � ( ���� �� ���� �������� � �( �� �. ������ ������ � �� ������ ��� ��� % 3����� �������� �� ����> � ������

����� �� '�� ��% -�� �� � ��� �� �! (� ������� ��� �� ��� 2�/� ����� ����� <%<5 > <%<<5= �������� ��� �� ��� ��� �� �!

�������� ����� -") ����� ����� &%� > *%9= �������%

�� ������ �� �� � ���� ����������� ������ ��� ����� !��"!��)*9

�� ��� ��������� ������ � ��� �������� ������

���� ���� ������� ��� ��������� ������

��� ����� ������� ������ �� �� �������� ���� ���

���� � �� �������� ������ � �������� ���� �

�������� �� ���������� ��� ��������� ���� �

����������� �� ��� ���� ���� �� ������ � �����

����������� ������� � !� "����������� ��� #�����

��� �������� �������� �� ��� �������� ������ �

��� ���� ���� �� ����� �������� �� �������� �� ��

�������� ������ �$$!� ������ ������� �$�!� ����

������ �������� �%!� ������ ���������� �&!

��� ������ �� ������ ��'������ ������

�������������

(�� ����� ��� ��������� �� ����� )*+��,+,%

��� -�./0( 12������ �� 3������4� � /����5

�� 6�2�(� 7�8� ��� ���� ���� "). ��������� ���

��� 2������ �� 3������4� � /����� 9� ����'

2��� )��� �� ��� �������� ����������

���������

�:! ;�'�<�'� 8� ��� ;������ (� 1:+ �5 ����������� ������

�� �������� �������� ������� 6��� 6� 2��� ;�� *��� �&�

$�&=$>>�

�$! 2����� ;�� *����?4� @�6� ��� (���4�� 6�2� 1:+ +5 ��������

�������� ������ ��� �������� ��������� 2������ >+�

:%>=:&��

��! 2���� ;�A�� ;������ (�� *������ 8�A�� )��� ;�/� ��� B���

��*� 1:+ +5 ;�������� � �������� ������ ��� ������

��� ������������ ������� � /�������� .���� 6� -�����

-�� 8��� &� =:$�

��! A�''�� 8�)�� 6����� 6�2�� ������ C�;�� ������ 2�� ;����

��� (�� ;�'�<�'� 8� ��� *������� -�6� 1:++:5 *�������� ���

����� ���������<���� � ������������ ���������� �

�������� ������ ��������� ��� ������ ��� ���������

������� 6� .� ���� -�� :%�� +,= +��

�>! 6����� 6�2�� �������<� C�;�� A�''�� 8�)� ��� ;������ (�

1:++�5 �������� ������ � ��������� ���������� ����������

���� ��� ������ ������������ /��� .� ���� -�� :+� &&= ��

�%! -��'�� -� ��� 2����� (�/� 1:+ 5 "������� ������ ���

������ �������� � ���������� ��������� 6� ���� 2����

���� :��� ��=>$�

�&! ;������� -�/�� -�*�����/������� .� ��� 2���'� 2�"�

1:++�5 /��������<���� � ������ ���������� #�����

��� �D��� � ���#����� �������� �� ������ � �����

������������� .� ���� .����� %:� �+%$=�+&:�

� ! 0��� 8�� *���� -�E�� -�� )�� (����� (�6�� B�� E� ���

������� )� 1:++�5 .������� � ����� ��� ��������� �����

����� ������� � ���������� ������ � ��� ���� � ������

� ��������� ��� ������ � ��'������ ������ 2��� 2�������

:�� �= +��

�+! 2����� ;�� 8������ 7�� ������ �� ��� (���4�� 6�2� 1:++%5

(�� ���������� ���������������� �� �� ������ � ����

���� ��������� "32; 2������� C���� :�+� +&=:,:�

�:,! 2����� ;�� /������?4� ;� ��� (���4�� 6�2� 1:++$5 /���������

<���� � �� ������� ����������� ��� �������� �����

���� /��� 6� 2������� � � $�>=$�,�

�::! 2����� ;�� /������?4� ;� ��� (���4�� 6�2� 1:++,5 .�������

��� ���������<���� � ����������� )2$ ��� ��������

��������� "32; 2������� C���� % � $�+=$���

�:$! 2����� ;�� /������?4� ;� ��� (���4�� 6�2� 1:++,5 .�������

��� ���������<���� � ����������� )2� ��� ��������

�������� ��� �������� �������� �� ���� � ��� ���������

#������� "32; 2������� C���� %+� $&&=$ $�

�:�! 2����� ;�� /������?4� ;� ��� (���4�� 6�2� 1:++:5� (�� ���� �

���������������� � ���������� '��� � �������� �����

��� ������ � �������� ����� 6� ���� 2������� :�&� :> �=

:>+,�

�:�! C������ F�A� 1:+&,5 /������ � ���������� ������� ����

��� �������� � ��� ���� � ����������� (�� B����� $$&�

% ,=% >�

�:>! (��� /�2� ��� "������ /�3� 1:+ $5 � ������� ����� ���� ��

������� ���������������� � ������������� ���� ����� *�

������ ::+� ::>=::+�

�:%! 2������ (�� "������ 3�"� ��� ;������'� 6� 1:+ $5� 2�����

���� /����� � C��������� 2������ /��� ;��� E�����

C���������� /��� ;��� E������ B0�

�:&! ������ C�B� ��� E������ 8�;� 1:+ >5 /���������� � �����

��������� ����� ����� ������� ���������� � ���� ����

������ �� ����� � �������������� ���������� �� �����

����� 6� *�������� :%:� +>>=+%$�

�: ! 9�� � A� ��� 2���� 6��� 1:+ ,5 )�'������� ���������� ����

���� ��� ������� � ������� ��� �� ������ .� @��� :%� :% =

:&+�

�:+! )���4 � 8�2�� 6� ��� 6�� ����� "�7�� ���<�4��<�-��'���� ���

*����� �� 1:++�5 /����������� � ��� ��������� ������ ���

���� ������� � ������ 6� @���� 2������ ��� �:=�,�

�$,! ������������ (���� ������� )� ��� A����'�� -�6� 1:++�5 F��

����� �������������������� ���������� ��������� ���

���� �� ���������� ������ ��� ���������� ��������� )����

B���� ����� ;�� F;� +,� % �=% �

�$:! 2������������� 3� ��� ;������ -�)� 1:++>5 B��������

���������� � ���������� �������� �� ����������

��� ����������������� ���'������ ��G���� ��� �������� �

��� �������� #������� .� ���� .����� %�� �>:+=�>$��

�$$! A��'��� 2�3�� *���'���� "� ��� 6����� C��� 1:++,5� .����

����������� ������ � ���������� ������� 6� .� ���� -��

:%$� = +>�

�$�! �H(����� 8�� 2����� -�C� ��� 9�� �9��<� E� 1:++%5� /�����

����� ������ � ��G���� �� ������ � ��� ���� �� ��� ���

������� ������ �������� 2��� 2������� :+� %$>=%�&�

�� ������ �� � � ���� ����������� ������ !"! #!$$%& '!()'!% $:&