The role of flagella and motility in the adherence and invasion to fish cell lines by Aeromonas...
-
Upload
susana-merino -
Category
Documents
-
view
214 -
download
2
Transcript of The role of flagella and motility in the adherence and invasion to fish cell lines by Aeromonas...
��� ���� �� ������ �� �� ��� � � �� �������� �� ������
� ��� ���� ���� �� ��������� ������ �
�������� ���� � ����
����� ������ ������ �������� ����� ������ !�� �" ����#� $
������������ � �������� ������ ��������� � ����� ���� ������� ���� ���� ����� ���� !����
�������� % ����� &''() ������� *+ ����� &''() ����� �� � ���� &''(
��������
,� �������� �� ����� � �� ��������� ������ � -���. ��� � ���� �� �������� ����� �.�� ��� �� ��������� �� � �
�� �� ���� �� � � ������� � �������� ������ /0 ���� � ������� �� �" ������ � 1.� 2����� -���. ���3 ��
����-� ���� �� � � � ��4� ������� �� � �� �� ���� � ������ �� ����� -� ���� ���� ����" ,� ���� �� �� ��� � ��
���� ��� � ���� � ���� ��� �������� �� ���� �� ��������� �� ������� �� ���� ��� ��� �� ����� � � ����� �� ���� ���� ����"
,� ��� ���� �� �� ������� ��� �� � ������� �� �� �� ��� � ��� ���� �� ������� � �" ������ � �������� ����
��� ����� ������ �� �� � ���� ���� ����"
#�$���% ��������� ������ � ) �������� ����) �� ��� �) 5������) ������� �� ������
�� ���� ����
�� ��� ��������� ������� ��� ���6�� ��� �����.
� � �� �� �6�� �� ������� �� ��� ���� ��.
������� � �� ��� �� �� ����� ��������� �� ��
� �� ��� ��� �� ��7��� ������" �� ��� ������&
��� � ���� ���� ��� ���� ���� � �� ����� �� ��
�.� �� �� 89� :&;� ���� 4�- �� �� ���� ��
� ��" �������� ���� � ���� �� �" ������ �
���� ��� ��������� ���� ������� ��� :*; ��
���� ������� �������� :�;) ��� ��� �� ����
��� ����� ��������� �������� �� �����
��� *%"�< �� ��� ���� ���" 9������� ���� �� ���
���� ������ �� ��������� ������ � �� � �������
�� ��� �� � ����� � �� �6�� �� �� ����� ���� ��.
����� ������ ����� :��=;"
�� ��� � �� �� ������� �� ������ ���� ���
���� �� � ��7��� ����� ����� � �� ��� ����� �� ��.
������ �������� �� �������� � �� ������ ��
��4���� �� ����� :%>+;" ,� �������� ���� �� ����� ��
�� �������� 2�.�� ���3 �� � � �� ������� ��.
������ �� �" ������ � � ���� �� �������� �����
�� �������� � �� �� �� �� � �� �� �������.
� ������ /0 ���� � ����� ������� �� ��
-���. ��� � ���" ,� � ���� � ���� -� � ����� ��
���� �� ������ �� �� ��� � � �� ������� � ��
������ �� ��� ���� ���� �� �" ������ � ��������
����"
?�(+.&?'( @ '( @ A&("?? B &''( 5����� �� �� C������ �������������� ����� ���" 9�������� �� C������� ������ D"E"
'(( � ? � ( + . & ? ' ( 2 ' ( 3 ? ? & % * . %
$ F��������� �� ���" ���" � G�� 2�3 �?*&�+%)5�H� G�� 2�3 �&&?='*) C.����� I�� J��� ���"���"��"��
5C�� ����������� 8� ��� &=& 2&''(3 *&�>*&(
�� �������� �� ��� ��
���� ������� ������� ����� ��� ����
��� �� ����� ��� ������� �� ����� � ����
��� ����� ���������� ������������������� � �����
��� ���� ���� ����� ��� ��������� ���� ��������
������ � ! �!"�# � $ �!!� ��� � � �!$� ����
���� ����������%�� ����� ���& ���� '��� ���������
� �� ����� ��� ()��� ��� ����� ���� � ��� �
��������� ��'�� ��� ����� ��������� '�� �����
��� ��� ���� � ������� ��� ���� '��� !�*+
����� � ������� �� ���� '� ����� "�,+ ���� �
������� ��� ����� ������������ ����������� � ���
�������� '�� ������� �� � ��� ����� -������ '���
� ���� ��'� �� $"./�
�������� ��� � ����� '��� ������� ���� ����
�������� ������ �� ����� ��� ��������� ����
���� ��������
�������� ������� � ������� � ��0�� 1������
������ ()�� '�� ������ �� �� �� 2�' 3������ 4����
������� �� ����� ��� ��������� �!���
���� �������������� �� �������� �������
����� ��'� � ��������� ���� ������ 5�� � !""
��6�� ��������� ��� $* ��6�� 7��������8
'��� ������� '��� ���� � �������� ��� 0����� 5 �����
��� /���# �����# (8� 9���� 0����� '��� ����
���7��# ��� �������� '��� �����0� 1������ ������
������� � 5!�!"""8 ��� ������� '��� ��� �����������
��� ���� ��� : ��7����� ���������� 5����
������8� ��� ������ ���� ���� �������� �������
'��� � ��0�� ��� ���������� ����� �� ��� ���� ���
��� ��# ��� ������� � �������# �������� 1������#
���������������� ��� ������������ ��������
���� � � ������������ �������������� ������ ���
������� �������
����� '��� � ��0�� �� �� ����� ��� ������� ���
�����%�� �� ����� ��� ��������� ��#!$��
���� ������ ������ �����!���
-9-��(:; '�� ������� �� ��� ����� ��
<������ �!��� -������ '��� ��=�� !�! '��� ������
� >�� 5��������� �+ -9-8# ����� � * ���# ��� !"
�� ������ '��� ������� � ��� ���� <�������������
��� ����� '��� �������� �� ��� ������ �������� �����
���� ��� ?����� �!*��
��"� ������� ������� �
2������� �������� ������� �������� '���
����� ��� � ��0�� 1������ '��� �� ����� ��� ���
������� �!$��
��#� $�����
��� ������@ �� ��� � ��� ��������� �����
��� '��� �� ����� ��� ��������� �!$��
��%� &������ '(� �������
92( ����� ������ '��� ������� � ����������� ��
����� ��� ��������� �!,��
��)� *���������� �� �� �� ����� ��� �+�� ������
������
�� ����� ��� ()�� ������ 92( '�� �������
��� ��������� �������� '��� ,���( �� ����� ��� ���
������� �!,�� /���� �<($�!A �!A� '�� �������� '���
���BB# �������������� ��� ���� ������� � ,���(
������ 92( �������� 5����=������� $" 7�
���� ��%�8� 92( ���7����� '�� ��� ���� :����
���7 :�� BBB 5-���������8 ��� ������� � ���
9)*� '�� ������� � �������� � ��� ��� ��� ��
��C� ����� ������ D��������� ����� '��� ��������
���� ��� ���������� �����������
���-� .�� ���� ����
;�/ ����� 5���������� ��� �� � ����# *� ��
��� ��� �8 '��� ��'� �� $*./ �!E�� -�< ����� 5���
���� ������8 '��� ��'� �� $"./ �!���
����� /* ��� ,�� ��������� ��� �0���� ������
(����� '��� ������� �� ��� ������ ����
��������� �� ��� �$"�� ����1�# ����=������� $�!"�
�������� '��� ������� �� � ��1 ��� �������
�� � A�!"� ;�/ � -�< ����� ��� '��� �
,� $���� �� ��� 1 . $, $��������� ������� ��� 2�))#3 ���4��#$!�
������� ����� �� � ������ �� �� �� ���� ��� � �
���� � ���������� �� �� ������� ���� � ����
���� ����� �� ���! � ��� �� ����� ��� �� �������
��� ������!�� �� "����� ��� #� �� ����� �� ��
������ $�#%� &�� ����������� �� ������ � ���
���� ���� ������ �'����(�� � )�*�+ ���� ��
���� ������� ���� ����! �!������ ��� � �� �����
�� � ��! ��� ����� �� ���� ���#� ,���� -�#��
�� ��������� �� ����� �� ����� � ����� ����
&�� ����������� �� �(���� ��� ����� �� ���
������ �'����(�� ���� )�*�+ ���� �� ���� �����
��� �� ����� �������������.���������� ������
�����! !����� � /#�� �!���0 ��� ����� ��
*��� �'��� ������� �� ������ 1���� # � � ������ ���
����� �� ��� ������ ��� � ���� )�*�+ ���� ��
���� ������� �� � ��� ���� ���#� ,���� -�#�� ���
"� ��2 ��� �������� ���� ������� �� ����� ����
��������� � ����� ���� �(���� ������ ��� �'�
������� �� ��� ��� ���!� �� ��� �� ���� ���(�(�!
��� !����� � ��������2 ������� �� ����� ���� �'�
������� �� ��� ����� ����� �� �� ����� ���������
������� �������� ��������� � ���� �'��������
�� ���� �(������� � ��� ������� ��� � �� �����
� ������ ��� �(������� ���� ������ 3'�� � 4��
������� �� 5����� ������� ��(������� ���� ���
������ � !���� �� ��� ��� ������ �� ������ �
��� �������� � ���!���3��� �� ��� �� � &�� �� �
���� �� ����� ������! �� "� ������ ���� ��� ����
���� �� � �� ��� ����� ��� ���� ������ ,��
���� � ���� ��������� �� ����� � ������ ����
�� ������� � �������
6� �������� ������ ��(��� �� 7�!���� ����
������ 1)���� �� 1)���8 � ,� �������� ���
��!����� �� ������ ����! �� ��� ����� ���(��
9� ��:���� ����� ������ ���� ������� ��
��� � ������ 1)�44; �� 1)�4;� /����(�� ����
1)���� �� 1)���8 ����� ��(�� 0 ���� ����������
��(�� ,���� ������ ���� �������� ������ �������
� � �� ��� 7�!�������� �3 �� ��������!� <9" ��
� 7�!���� ���� �� �����(�� � �!���(� �����!
��� ��� �� ��� �� � ,�� ���� ������(� �� �� ����
�����!� <9# �� �������� �� �� ��������!� <9�
��� !��� �� ���� ������� ���� ��� ������ ��
������� �� ������ �� ������������� �������
��� � ���� ����� �� �� ����� �� ��� ������ �� �������
,���� ������� ��� ��� ���� ��� ������ ������ �
���������� � ����� �'����� ����� � ����� ���� ���
�� * �� 7�!�����
1 ����������� !���� ������ �� �� ��������
1)�" ���������� =>1 ��� ����� ��� �� ��
����� �� ��� � ��� =)�� � ���� ��! ����� ���
/�� �!���0��������� ����� ,���� ���� ���� ����
��!����� ���� ��� ������ ������� �?@��4" /��� ����
� ����������0 $�% � ���������� ����! ���! 1)�
44; /,� �7�!����� �����0 �� �� ����� ����� ���� ��
�! ��� ������� � /#�� �!���0 ����� ��� �� *��
�� � ������� �� 1���� ��� ����! ������ ����
������ ����� ���� ��� �3 ��������� �!���� ���
7�!����� 6� ���� �� ������(� ��� /����� 1)�
,���� #
,�� ������ � �� ��:���� �� �������� ������ ���� ����!���� �D"� �� A<� �� BEC ����
B���� 1����� � /�0 ���
A<� ���� BEC ����
1)�" /������ ��0 #��# F ���� #�"� F ��"#
1)���� /1)�" ������� ��0 #�#� F ���8 #�"" F ����
1)�44; /,� �7�!����� �����0 ���� F ���� ��"� F ����
1)�4�# /1)�44; ��� �! �C1��#40 ���" F ���� ���� F ���"
1)�;"" /1)�44; ��� �! ��B&C1"0 #�#4 F ��#� #��8 F ��"�
E�� /������ ��0 #��8 F ���8 #�"� F ��"�
1)���8 /E�� ������� ��0 #��� F ���# #�"8 F ��"�
1)�4;� /,� �7�!����� �����0 ���� F ���" ��"� F ���8
1)�4�� /1)�4;� ��� �! �C1��#40 ���# F ���� ���� F ����
1)�;"� /1)�4;� ��� �! ��B&C1"0 #��� F ���" #�"# F ����
�1����� � �� ��� ��� ���!� �� ���� �� ����� ������! ����� �'����(� �����! ������� !����� � ��������� >������ �������� ���
���F ������� ��(����� /�� "0� ,�� �!���(� ����� ��� ������ � ��� � ��� =)�� ��� � ������ ��#8F ���;� ������ � �� ���
������(� ����� � � ��� A<A� ����� ��� � ������ ;�� F #��� ������ ��
�� ����� �� ��� � � �� ���������� ������� ��� ������ ��� ��� �#�
���� ����� ������ �� �������� ������ ����
����� �������� ������ ����� ��� �� �������
�� ������� ����� �� �!!� " �� � ��� � ����� �!���
�� �������"� ��� ����� ��� �� ������ �
#$� ��� ��� �!� � �!�% ������� ��� �!� �!�
���!���� �� ��� �!!�� �� �� �����& '(��
� ���� �����&� ����� ����� ���� ���! ������ �����
��� � ���� ������% �� �! � ����� ������ ���
�����& ������ �!" �� ����� ��� � ���)&*�
+*�, '� ����� ����&* ��� ����&)� ������ ���!"� ����
��� �!!�� �� �� �� ����� �� �� ������ � #$�
��� ���� �!�� �� ���� ���� ����� �� �� � �����%
���� �������� �� ��� ��� �
�� ���� �� -�!� *� �� ��!�� "�� � ����� � ��
��(������������� �� �� �� � �!��"� ����� ��� ��
��������� '����.��� �!" /�(!� ��������� 0#�
��� �1� ��� ��!! !���� ��� �� -�� ��� �!!�� �� ��
� �����% ������� ���� ���� �� �� � ����� ����
��� �� ������� �!����� 23� '�������� �� �
�!!� ��� ��� � �!��� ��" ����� �� ���� ������
���� 0#� ��� �1� ��!!� �� �� ��!�� "�� � �����
'-�!� *�% 3 ���� �� �� ��������� ��� ��!!� ����
������ � ���� �� ��� �!!�� �� �� � ��� ��
���� �� �� � ������ �� ����� ��� �
���)&*� �!�� �� �� ��" 23� ����� % ��� ����
���� ���� �� -�� ��� �!!�� �� �� � ���� ��.��
�� � 0#� ��� �1� ��� ��!!� ��� ��� ��(� �� ����
����� �� +)*, ���� ��� � �%/�(!� �������� �� ���
������� �� �������� �� � �� ������ ��(� �� ����
�!��% -��� �� �� � �� �� ��!! �� �� �� �!!� ���
����!� ��������� � �!� " �� ���!" �� �� ���
�� �� (�� � (� �� ��������� ( ���� ��� ���
�4�5 �� ��������� � ����� �1� ��� 0#� ���
��!!�% �!�� ���� ��� �� ��� ��������� (� �!! ��
� ����� �1� ��� 0#� ��!!�%
-�!� ) ���� �� ����! � ����� (� ������� (
���� � ����� 0#� ��� �1� ��� ��!! !����% 6 ��
���� �� � � �� �� -�� ��� �!!�� �� �� �
���� ��� ��(� �� �� � �� ��7��" �� ��!!� � �� ��
����� ( �� �.������� ����� �� ���� �� ���
��!�� �� �������� ( � �!� " � ������� ��� �����
(�� �� �� ������� +)*,% 8�!�� "�� � ����� '�
��(������������� �� �� �� �� ��� -�� ��� �!!�� ���
�� � ������ �� ������� '�� � �� �!!� ���
� �!�� ����� ����!�� �� ���� ( ������� 0#�
��� �1� ��� ��!! !����% ������� �� -�� ��� �!!��
�� �� � ����� '�� ��� �� � � �� �� �� �����
��� � ���)&*�� ����� ����.��� �!" 9�(!� ���
��� �� �� �� �� ��� ( ������� �� ���� ��!!
!����� ��� ���� ���!!" �����������% -���� ����! �
������ � �� �� �� �!!�� ��� �� ������� ��
����� � � �������� �!���!" ��������� �� �� ��� ( ���
�����% �� �(��� � ����� ��� ���� � ����� �����
� �� ��� ������� �� � (� �1� ��� (� 0#� ��!!�%
6( ���� � ����� ��� �������!" ��� ��� �� �� �
�����!���� �� �� ������ '/9:� (� �/ ����
� ���� �� ������� �� �!!�� �� ������� ( ��
��!�� "�� � ����� ��� �!�����% 3 �;�� ��� ����
-�!� )
-�� ������� ( ��;���� �� ��������� � ����� (�� ��� ��� �4�5 ( 0#� ��� �1� ��!!�
� ���� 6������ '=� (�
0#� ��!!� �1� ��!!�
���� '��!�� "��� <%5&> <%<� <%/�> <%**
���5</ '���� ��(��������� <%/*> <%<& <%/&> <%**
������ '-�� ��� �!!�� �� �� � <%<<�> <%<<� <%<*<> <%<<5
����&* '������ ����"�� ���)&*�� <%<<�> <%<<) <%<<&> <%<<�
������ '������ ����"�� �������� <%5/> <%<9 <%/�> <%*)
1�/ '��!�� "��� <%/*> <%<� <%9<> <%*<
���5<9 '1�/ ��(��������� <%5&> <%<� <%/�> <%<&
�����& '-�� ��� �!!�� �� �� � <%<<�> <%<<5 <%<<�> <%<<�
����&) '�����& ����"�� ���)&*�� <%<<9> <%<<� <%<<�> <%<<5
�����& '�����& ����"�� �������� <%5�> <%<& <%/9> <%*<
�6������ �� �� ������ � � ( ���� �� ���� �������� � �( �� �. ������ ������ � �� ������ ��� ��� % 3����� �������� �� ����> � ������
����� �� '�� ��% -�� �� � ��� �� �! (� ������� ��� �� ��� 2�/� ����� ����� <%<5 > <%<<5= �������� ��� �� ��� ��� �� �!
�������� ����� -") ����� ����� &%� > *%9= �������%
�� ������ �� �� � ���� ����������� ������ ��� ����� !��"!��)*9
�� ��� ��������� ������ � ��� �������� ������
���� ���� ������� ��� ��������� ������
��� ����� ������� ������ �� �� �������� ���� ���
���� � �� �������� ������ � �������� ���� �
�������� �� ���������� ��� ��������� ���� �
����������� �� ��� ���� ���� �� ������ � �����
����������� ������� � !� "����������� ��� #�����
��� �������� �������� �� ��� �������� ������ �
��� ���� ���� �� ����� �������� �� �������� �� ��
�������� ������ �$$!� ������ ������� �$�!� ����
������ �������� �%!� ������ ���������� �&!
��� ������ �� ������ ��'������ ������
�������������
(�� ����� ��� ��������� �� ����� )*+��,+,%
��� -�./0( 12������ �� 3������4� � /����5
�� 6�2�(� 7�8� ��� ���� ���� "). ��������� ���
��� 2������ �� 3������4� � /����� 9� ����'
2��� )��� �� ��� �������� ����������
���������
�:! ;�'�<�'� 8� ��� ;������ (� 1:+ �5 ����������� ������
�� �������� �������� ������� 6��� 6� 2��� ;�� *��� �&�
$�&=$>>�
�$! 2����� ;�� *����?4� @�6� ��� (���4�� 6�2� 1:+ +5 ��������
�������� ������ ��� �������� ��������� 2������ >+�
:%>=:&��
��! 2���� ;�A�� ;������ (�� *������ 8�A�� )��� ;�/� ��� B���
��*� 1:+ +5 ;�������� � �������� ������ ��� ������
��� ������������ ������� � /�������� .���� 6� -�����
-�� 8��� &� =:$�
��! A�''�� 8�)�� 6����� 6�2�� ������ C�;�� ������ 2�� ;����
��� (�� ;�'�<�'� 8� ��� *������� -�6� 1:++:5 *�������� ���
����� ���������<���� � ������������ ���������� �
�������� ������ ��������� ��� ������ ��� ���������
������� 6� .� ���� -�� :%�� +,= +��
�>! 6����� 6�2�� �������<� C�;�� A�''�� 8�)� ��� ;������ (�
1:++�5 �������� ������ � ��������� ���������� ����������
���� ��� ������ ������������ /��� .� ���� -�� :+� &&= ��
�%! -��'�� -� ��� 2����� (�/� 1:+ 5 "������� ������ ���
������ �������� � ���������� ��������� 6� ���� 2����
���� :��� ��=>$�
�&! ;������� -�/�� -�*�����/������� .� ��� 2���'� 2�"�
1:++�5 /��������<���� � ������ ���������� #�����
��� �D��� � ���#����� �������� �� ������ � �����
������������� .� ���� .����� %:� �+%$=�+&:�
� ! 0��� 8�� *���� -�E�� -�� )�� (����� (�6�� B�� E� ���
������� )� 1:++�5 .������� � ����� ��� ��������� �����
����� ������� � ���������� ������ � ��� ���� � ������
� ��������� ��� ������ � ��'������ ������ 2��� 2�������
:�� �= +��
�+! 2����� ;�� 8������ 7�� ������ �� ��� (���4�� 6�2� 1:++%5
(�� ���������� ���������������� �� �� ������ � ����
���� ��������� "32; 2������� C���� :�+� +&=:,:�
�:,! 2����� ;�� /������?4� ;� ��� (���4�� 6�2� 1:++$5 /���������
<���� � �� ������� ����������� ��� �������� �����
���� /��� 6� 2������� � � $�>=$�,�
�::! 2����� ;�� /������?4� ;� ��� (���4�� 6�2� 1:++,5 .�������
��� ���������<���� � ����������� )2$ ��� ��������
��������� "32; 2������� C���� % � $�+=$���
�:$! 2����� ;�� /������?4� ;� ��� (���4�� 6�2� 1:++,5 .�������
��� ���������<���� � ����������� )2� ��� ��������
�������� ��� �������� �������� �� ���� � ��� ���������
#������� "32; 2������� C���� %+� $&&=$ $�
�:�! 2����� ;�� /������?4� ;� ��� (���4�� 6�2� 1:++:5� (�� ���� �
���������������� � ���������� '��� � �������� �����
��� ������ � �������� ����� 6� ���� 2������� :�&� :> �=
:>+,�
�:�! C������ F�A� 1:+&,5 /������ � ���������� ������� ����
��� �������� � ��� ���� � ����������� (�� B����� $$&�
% ,=% >�
�:>! (��� /�2� ��� "������ /�3� 1:+ $5 � ������� ����� ���� ��
������� ���������������� � ������������� ���� ����� *�
������ ::+� ::>=::+�
�:%! 2������ (�� "������ 3�"� ��� ;������'� 6� 1:+ $5� 2�����
���� /����� � C��������� 2������ /��� ;��� E�����
C���������� /��� ;��� E������ B0�
�:&! ������ C�B� ��� E������ 8�;� 1:+ >5 /���������� � �����
��������� ����� ����� ������� ���������� � ���� ����
������ �� ����� � �������������� ���������� �� �����
����� 6� *�������� :%:� +>>=+%$�
�: ! 9�� � A� ��� 2���� 6��� 1:+ ,5 )�'������� ���������� ����
���� ��� ������� � ������� ��� �� ������ .� @��� :%� :% =
:&+�
�:+! )���4 � 8�2�� 6� ��� 6�� ����� "�7�� ���<�4��<�-��'���� ���
*����� �� 1:++�5 /����������� � ��� ��������� ������ ���
���� ������� � ������ 6� @���� 2������ ��� �:=�,�
�$,! ������������ (���� ������� )� ��� A����'�� -�6� 1:++�5 F��
����� �������������������� ���������� ��������� ���
���� �� ���������� ������ ��� ���������� ��������� )����
B���� ����� ;�� F;� +,� % �=% �
�$:! 2������������� 3� ��� ;������ -�)� 1:++>5 B��������
���������� � ���������� �������� �� ����������
��� ����������������� ���'������ ��G���� ��� �������� �
��� �������� #������� .� ���� .����� %�� �>:+=�>$��
�$$! A��'��� 2�3�� *���'���� "� ��� 6����� C��� 1:++,5� .����
����������� ������ � ���������� ������� 6� .� ���� -��
:%$� = +>�
�$�! �H(����� 8�� 2����� -�C� ��� 9�� �9��<� E� 1:++%5� /�����
����� ������ � ��G���� �� ������ � ��� ���� �� ��� ���
������� ������ �������� 2��� 2������� :+� %$>=%�&�
�� ������ �� � � ���� ����������� ������ !"! #!$$%& '!()'!% $:&