SPOED FISH acute promyelocytenleukemie
-
Upload
kpphuijbers -
Category
Education
-
view
94 -
download
11
Transcript of SPOED FISH acute promyelocytenleukemie
![Page 1: SPOED FISH acute promyelocytenleukemie](https://reader036.fdocuments.net/reader036/viewer/2022062710/55ba82bdbb61eb164d8b479e/html5/thumbnails/1.jpg)
SPOED FISH APL
Een snelle diagnostiek van FISH op beenmergsmears voor de detectie van acute promyelocytenleukemie
Naam: Kristiaan Huijbers
![Page 2: SPOED FISH acute promyelocytenleukemie](https://reader036.fdocuments.net/reader036/viewer/2022062710/55ba82bdbb61eb164d8b479e/html5/thumbnails/2.jpg)
Inhoud
• Wat is APL?
• De nieuwe FISH methode
• Resultaten
• Waarom een snellere diagnostiek?
![Page 3: SPOED FISH acute promyelocytenleukemie](https://reader036.fdocuments.net/reader036/viewer/2022062710/55ba82bdbb61eb164d8b479e/html5/thumbnails/3.jpg)
APL• APL = acute promyelocyten leukemie
• Leukemische/ Oncologische ziekte • Aangedane cel: promyelocyt• Ontstaan van maligniteit: beenmerg• Mediane leeftijd: 30-40 jaar.
• Ontstaan van maligne aandoening:• Chromosomale translocatie (15;17)
• Morfologisch herkenbaar• Auerse staven (‘takkenbosjes’)
![Page 4: SPOED FISH acute promyelocytenleukemie](https://reader036.fdocuments.net/reader036/viewer/2022062710/55ba82bdbb61eb164d8b479e/html5/thumbnails/4.jpg)
Morfologie promyelocyt
Normaal Afwijkend
![Page 5: SPOED FISH acute promyelocytenleukemie](https://reader036.fdocuments.net/reader036/viewer/2022062710/55ba82bdbb61eb164d8b479e/html5/thumbnails/5.jpg)
De translocatie (15;17)• In 99% van de gevallen gevonden
• Betrokken genen: • PML en RARα
• Detectie met FISH
![Page 6: SPOED FISH acute promyelocytenleukemie](https://reader036.fdocuments.net/reader036/viewer/2022062710/55ba82bdbb61eb164d8b479e/html5/thumbnails/6.jpg)
FISH• Directe uitstrijk op ongekweekt materiaal• beenmergsmear
• Voorbehandelen• Pepsinebehandeling• Wasstappen ter verbetering FISH resultaat
• Opbrengen probe• Vysis PML-RARA t(15;17) Dual Color Dual Fusion
![Page 7: SPOED FISH acute promyelocytenleukemie](https://reader036.fdocuments.net/reader036/viewer/2022062710/55ba82bdbb61eb164d8b479e/html5/thumbnails/7.jpg)
FISH• Hybridiseren• 3 minuten denatureren, 76 °C• 120 minuten hybridiseren, 37 °C
• Posthybridisatiewassen• Stap 1: wassen op hoge temperatuur: 76 °C• Stap 2: wassen op kamertemperatuur
• Tijdschema• Inzetten: 4 uur (inclusief hybridiseren)
![Page 8: SPOED FISH acute promyelocytenleukemie](https://reader036.fdocuments.net/reader036/viewer/2022062710/55ba82bdbb61eb164d8b479e/html5/thumbnails/8.jpg)
FISH• Analyseren
Normaal afwijkend
![Page 9: SPOED FISH acute promyelocytenleukemie](https://reader036.fdocuments.net/reader036/viewer/2022062710/55ba82bdbb61eb164d8b479e/html5/thumbnails/9.jpg)
Resultaten• Validatie:• 5 patiënten (indicatie AML) getest zonder voorbehandeling. • Resultaat: bij 1/5 preparaten, storende achtergrond.
• Tweede validatie:• 5 patiënten (indicatie AML) getest met voorbehandeling.• Resultaat: 5/5 preparaten van voldoende kwaliteit.
• Ontbrekende positieve controle
![Page 10: SPOED FISH acute promyelocytenleukemie](https://reader036.fdocuments.net/reader036/viewer/2022062710/55ba82bdbb61eb164d8b479e/html5/thumbnails/10.jpg)
Waarom deze snellere diagnostiek?
• De patiënt heeft baat bij een snelle behandeling• ATRA (vitamine A afgeleide) en chemotherapie
• Na snelle en juiste behandelwijze, gunstige prognose• 12 jaars overleving van 70%
![Page 11: SPOED FISH acute promyelocytenleukemie](https://reader036.fdocuments.net/reader036/viewer/2022062710/55ba82bdbb61eb164d8b479e/html5/thumbnails/11.jpg)
Tijdschema• Tijdschema SPOEDFISH APL
• Beenmergsmears maken 20 minuten• 2 stuks
• Voorbehandelen en probe opbrengen 45 minuten• Denatureren en hybridiseren 125 minuten• Posthybridisatiewassen 20 minuten
• Analyseren van preparaat 30 minuten• Superviseren van preparaat 15 minuten
• Totaal benodigde tijd: 4 uur en 15 minuten
![Page 12: SPOED FISH acute promyelocytenleukemie](https://reader036.fdocuments.net/reader036/viewer/2022062710/55ba82bdbb61eb164d8b479e/html5/thumbnails/12.jpg)
SOP
• Van deze is SPOED methode is een SOP opgesteld:• SOP: M06035: ‘SPOEDFISH APL.’