Skripsi Curcuma Aromatica Salisb

5/27/2018 Skripsi Curcuma Aromatica Salisb

1/63

OPTIMASI WAKTU PENGERINGAN TERHADAP AKTIVITAS

ANTIOKSIDAN EKSTRAK ETANOL RIMPANG TEMU PUTIH

(Curcuma aromaticaSalisb)

SKRIPSI

Sebagai salah satu syarat memperoleh Gelar Sarjana Sains (S.Si) Program Studi

Kimia Fakultas Matematika dan Ilmu Pengetahuan Alam

Universitas Nusa Bangsa

Oleh :

Puji Lestari

NPM : 41204720109036

PROGRAM STUDI KIMIA

FAKULTAS MATEMATIKA DAN ILMU PENGETAHUAN ALAM

UNIVERSITAS NUSA BANGSA

BOGOR

2013


2/63

LEMBAR PENGESAHAN



Kami menyatakan skripsi yang ditulis oleh :

Nama : Puji Lestari

NPM : 41204720109036

Program Studi : Kimia

Judul : Optimasi Waktu Pengeringan terhadap Aktivitas Antioksidan

Ekstrak Etanol Rimpang Temu Putih (Curcuma aromatica Salisb)

Diterima sebagai salah satu syarat memperoleh Gelar Sarjana Sains, pada ProgramStudi Kimia, Fakultas Matematika dan Ilmu Pengetahuan Alam, Universitas Nusa

Bangsa Bogor.

Menyetujui,

Hj. Nia Yuliani, Dra. M.Pd Mamay Maslahat S.Si, M.Si

Pembimbing I Pembimbing II

Mengetahui,

Prof. Dr. RTM. Sutamihardja, M.Ag (Chem) Mamay Maslahat S.Si, M.Si

Dekan Fakultas Kimia Ketua Program Studi Kimia


3/63

PENGESAHAN PANITIA TIM PENGUJI



Kami menyatakan skripsi yang ditulis oleh :

Nama : Puji Lestari

NPM : 41204720109036

Program Studi : Kimia

Judul : Optimasi Waktu Pengeringan terhadap Aktivitas Antioksidan

Ekstrak Etanol Rimpang Temu Putih (Curcuma aromatica Salisb)

Diterima sebagai salah satu syarat memperoleh Gelar Sarjana Sains, pada ProgramStudi Kimia, Fakultas Matematika dan Ilmu Pengetahuan Alam, Universitas Nusa

Bangsa Bogor.

PANITIA PENGUJI

Ketua Sidang : Hj. Nia Yuliani, Dra., MPd. : .

Anggota 1 : Mamay Maslahat, S.Si., M.Si. : .

Anggota 2 : Dr. Padmono C. : .

Anggota 3 : Amry Syawaalz, Drs., M.Sc. : ..

Anggota 4 : Febi Nurilmala, Dra., M.Si. : ..

Tanggal Lulus : 22 Agustus 2013


4/63

PUJI LESTARI. 2013. Optimasi Waktu Pengeringan terhadap Aktivitas

Antioksidan Ekstrak Etanol Rimpang Temu Putih (Curcuma aromatica Salisb).

Dibimbing oleh NIA YULIANIdan MAMAY MASLAHAT.

RINGKASAN

Indonesia merupakan negara tropis yang memiliki berbagai macam

tanaman obat. Salah satunya adalah temu putih (Curcuma aromatica Salisb).

Temu putih mengandung senyawa metabolit sekunder yang bermanfaat sebagai

antioksidan. Senyawa metabolit sekunder akan rusak bila dikeringkan dengan

waktu yang lama.

Rimpang temu putih dikeringkan pada suhu 65o

C dengan variasi waktu 22,

23, 24, 25 dan 26 jam. Simplisia temu putih diekstrak dengan pelarut etanol

diperoleh rendemen berturut-turut, 14,16%, 11,89%, 15,95%, 12,10% dan

11,97%. Uji Fitokimia menunjukkan adanya alkaloid dan flavonoid pada ekstrak

etanol rimpang temu putih. Penentuan aktivitas antioksidan dilakukan dengan

metode DPPH menggunakan spektrofotometer pada panjang gelombang 517 nm.

Hasilnya dibandingkan dengan Kuersetin sebagai kontrol positif.

Nilai IC50Kuersetin, ekstrak etanol rimpang temu putih 22, 23 24, 25 dan

26 jam berturut-turut adalah 6,47g/ml , 160,54g/ml, 133,17g/ml,

117,81g/ml, 144,69 g/ml, dan 157,7 g/ml. Ekstrak etanol rimpang temu putih

pengeringan 23-25 jam memiliki aktivitas antioksidan sedang, sedangkan

pengeringan 22 dan 26 jam memiliki aktivitas antioksidan lemah.

Lama proses pengeringan mempengaruhi aktivitas antioksidan ekstrak

etanol rimpang temu putih. IC50 terbaik diperoleh pada standar positif Kuersetin

kemudian pada ekstrak etanol rimpang temu putih pengeringan 24 jam.

Kata Kunci : etanol, Curcuma aromaticaSalisb, lama pengeringan, aktivitas

antioksidan


5/63

RIWAYAT HIDUP

Penulis bernama Puji Lestari dilahirkan di Sukabumi pada tanggal 16

Oktober 1990 sebagai anak kedua dari dua bersaudara, putri dari pasangan Bapak

Ibnu Ismandri dan Ibu Tentrem.

Penulis menyelesaikan Sekolah Dasar di SDK BPK Penabur Cicurug

tahun 2002, lulus SLTP Mardi Yuana Cicurug pada tahun 2005, kemudian penulis

melanjutkan ke Sekolah Menengah Analis Kimia Bogor dan lulus pada tahun

2009.

Pada tahun 2009, penulis tercatat sebagai mahasiswa Fakultas Matematika

dan Ilmu Pengetahuan Alam, Program Studi Kimia, Universitas Nusa Bangsa

Bogor dan lulus pada bulan Agustus 2013, kemudian penulis langsung bekerjasebagai Technical and Lab Supportdi PT IMCD Indonesia.


6/63

i

KATA PENGANTAR

Puji syukur penulis panjatkan ke hadirat Tuhan Yang Maha Esa atas

limpahan berkat dan karunia-Nya penulis dapat menyelesaikan skripsi ini dengan

baik. Skripsi ini berjudul Optimasi Waktu Pengeringan terhadap Aktivitas

Antioksidan Ekstrak Etanol Rimpang Temu Putih (Curcuma aromatica Salisb).

Pada kesempatan ini penulis menyampaikan terima kasih kepada Bapak

Prof. Dr. RTM. Sutamihardja, M.Ag (Chem), selaku Dekan Fakultas MIPA

Universitas Nusa Bangsa, Ibu Hj. Nia Yuliani, Dra. M.Pd, selaku pembimbing I,

Ibu Mamay Maslahat S.Si, M.Si., selaku pembimbing II dan Ketua Program Studi

Kimia atas segala bimbingan, arahan, masukkan serta saran dalam penyusunan

skripsi ini.

Ucapan terima kasih juga penulis sampaikan kepada Bapak, Ibu dan

Kakak tercinta. Seluruh dosen beserta staf Fakultas MIPA Universitas Nusa

Bangsa, dan teman-teman yang telah memberikan semangat, doa, dan dukungan

kepada penulis sehingga skripsi ini dapat diselesaikan.

Penulis menyadari bahwa skripsi ini masih jauh dari sempurna karena

kemampuan, pengetahuan dan pengalaman yang dimiliki masih terbatas, oleh

karena itu penulis sangat mengharapkan saran dan kritik yang membangun. Akhir

kata penulis berharap skripsi ini dapat bermanfaat khususnya bagi mahasiswa

Universitas Nusa Bangsa serta masyarakat pada umumnya.

Bogor, Agustus 2013

Penulis


7/63

ii

DAFTAR ISI

Isi Halaman

KATA PENGANTAR .......................................................................................... iDAFTAR ISI ....................................................................................................... iiDAFTAR GAMBAR .......................................................................................... ivDAFTAR TABEL ................................................................................ ............... viDAFTAR LAMPIRAN ....................................................................................... viI. PENDAHULUAN........................................................................................ 1

A. Latar Belakang ...................................................................................... 1B. Identifikasi Masalah .............................................................................. 2C. Tujuan Penelitian ................................................................................... 2D. Manfaat Penelitian ................... .............................................................. 2E. Kerangka Pemikiran .............................................................................. 2F. Hipotesis ............................................................................................... 3G. Tempat dan Waktu Penelitian ................................................................ 3

II. TINJAUAN PUSTAKA ............................................................................... 4A. Temu Putih (Curcuma aromatica Salisb) ............................................... 4

1. Identifikasi Temu Putih ...................................................................... 42. Morfologi Tumbuhan ......................................................................... 53. Kandungan Kimia .............................................................................. 54. Khasiat dan Kegunaan ........................................................................ 5

B. Antioksidan ........................................................................................... 61. Pengertian Antioksidan ...................................................................... 6


8/63

iii

2. Fungsi Zat Antioksidan ...................................................................... 73. Metode Pengujian antioksidan ............................................................ 8

C. Proses Pengeringan .............................................................................. 11D. Ekstraksi dan Pemekatan Larutan ........................................................ 12E. Senyawa Fitokimia .............................................................................. 13F. Kurkuminoid ....................................................................................... 18G. Spektrofotometer UV-Vis .................................................................... 19

III. METODE PENELITIAN ........................................................................ 20A. Alat dan Bahan .................................................................................... 20B. Prosedur Penelitian. ............................................................................. 20

IV. HASIL DAN PEMBAHASAN ................................................................ 26A. Determinasi Tanaman .......................................................................... 26B. Pengeringan Simplisia dan Penetapan Kadar Air ................................. 26C. Pembuatan Ekstrak Simplisia ................................................. .............. 27D. Uji Fitokimia ....................................................................................... 29E. Uji Aktivitas Antioksidan .................................................................... 31

V. KESIMPULAN DAN SARAN................................................................... 38DAFTAR PUSTAKA ........................................................................................ 39LAMPIRAN ...................................................................................................... 41


9/63

iv

DAFTAR GAMBAR

Gambar Halaman

1. Temu putih ....................................................................................................... 42. Struktur DPPH (Diphenyl Picril Hydrazil) ....................................................... 93. Struktur Alkaloid ........................................................................................... 144. Struktur Triterpenoid ...................................................................................... 145. Struktur Flavonoid ......................................................................................... 156. Struktur Tanin ................................................................................................ 167. Struktur Saponin ............................................................................................ 178. Struktur Steroid .............................................................................................. 179. Struktur Kurkumin ......................................................................................... 1810. Struktur Dimetoksi-kurkumin ....................................................................... 1811. Struktur Bis-Demetoksi-Kurkumin ............................................................... 1812. Skema Peralatan Spektrofotometer UV-Vis .................................................. 1913. Hubungan antara Konsentrasi dan Peredaman Radikal Bebas ....................... 2414. Grafik Hubungan Kadar Air dan Lama Pengeringan Simplisia Temu Putih .. 2715. Hasil Rendemen Ekstrak Etanol Temu Putih ................................................ 2816. Pengukuran Panjang Gelombang Maksimum ............................................... 3117. Kurva hubungan konsentrasi (g/ml) dengan Peredaman Radikal Bebas

(% nhibisi) Ekstrak Temu Putih Pengeringan 22 jam .................................... 3218. Kurva Hubungan Konsentrasi (g/ml) dengan Peredaman Radikal Bebas

(% Inhibisi) Ekstrak Temu Putih Pengeringan 23 Jam ................... .............. 3319. Kurva Hubungan Konsentrasi (g/ml) dengan Peredaman Radikal Bebas

(% Inhibisi) Ekstrak Temu Putih Pengeringan 24 Jam .................... .............. 33


10/63

v

20. Kurva Hubungan Konsentrasi (g/ml) dengan Peredaman Radikal Bebas

(% Inhibisi) Ekstrak Temu Putih Pengeringan 25 Jam. ................... .............. 3421. Kurva Hubungan Konsentrasi (g/ml) dengan Peredaman Radikal Bebas

(% Inhibisi) Ekstrak Temu Putih Pengeringan 26 Jam .................... .............. 3422. Kurva Hubungan Konsentrasi Kuersetin (g/ml) dengan Peredaman Radikal

Bebas (% Inhibisi) ........................................................................................ 3523. Mekanisme Reaksi Senyawa Antioksidan dengan DPPH .............................. 3624. Grafik Nilai IC50Ekstrak Etanol Temu Putih dan Kontrol Positif ................. 37


11/63

vi

DAFTAR TABEL

Tabel Halaman

1. Hasil Uji Fitokimia Ekstrak Etanol Temu Putih .............................................. 30

DAFTAR LAMPIRAN

Lampiran Halaman

1. Diagram Alir Metode Penelitian ..................................................................... 412. Diagram Alir Metode Uji Antioksidan Estrak Etanol Temu Putih ................... 423. Diagram Alir Metode Uji Aktivitas Antioksidan Kuersetin............................. 434. Hasil Determinasi Tanaman Temu Putih ........................................................ 445. Data kadar air simplisia rimpang temu putih................................................... 456. Data Rendemen yang diperoleh dari Hasil Ekstraksi ....................................... 467. DataInhibition ConcentrationEkstrak Temu Putih dan Kuersetin .................. 47


12/63

1

I. PENDAHULUAN

A. Latar BelakangIndonesia sebagai negara tropis memiliki beranekaragam tumbuhan yang

dapat dimanfaatkan untuk kepentingan manusia. Masyarakat Indonesia sejak

zaman dahulu telah mengenal tanaman yang mempunyai khasiat obat atau

menyembuhkan berbagai macam penyakit. Tanaman yang berkhasiat obat tersebut

dikenal dengan sebutan tanaman obat tradisional.

Temu putih (Curcuma aromatica Salisb) merupakan keluarga

Zingiberaceae yang tumbuh liar dan banyak ditemukan di India dan Asia

Tenggara. Secara tradisional temu putih digunakan sebagai obat anti radang, obat

memar, keseleo dan infeksi kulit. Di China temu putih dimanfaatkan oleh

masyarakat sebagai obat kanker.

Komponen utama yang berkhasiat dalam rimpang temu putih adalah

kurkuminoid, flavonoid, polifenol, dan minyak atsiri. Temu putih memiliki sifat

antioksidan yang dapat menahan zat radikal bebas penyebab tumbuhnya sel

kanker, anti-inflamasi (peradangan) serta dapat meningkatkan sel darah merah.

Rimpang temu putih mempunyai potensi sebagai sumber antioksidan.Senyawa-senyawa antioksidan temu putih dapat mengalami kerusakan pada saat

proses pengolahan. Salah satu cara pengolahan yang berpotensi menyebabkan

kerusakan antioksidan adalah tahap pengeringan dalam pembuatan simplisia temu

putih.

Mutu simplisia yang dikeringkan sangat dipengaruhi oleh waktu proses

pengeringan. Waktu pengeringan yang terlalu cepat dapat menyebabkan simplisia

temu putih memiliki kadar air yang masih tinggi sehingga mudah diserang jamur.

Pengeringan yang terlalu lama akan menyebabkan kerusakan mutu simplisia.

Kondisi suhu pengeringan paling optimal pada pengeringan kunyit adalah

pengeringan dengan oven pada suhu 65oC (Adinda, 2006). Kunyit merupakan


13/63

2

tanaman temu-temuan. Berdasarkan hal itu maka dilakukan pengeringan pada

temu putih dengan suhu 65oC. Akan tetapi belum diketahui waktu yang tepat

untuk mendapatkan aktivitas antioksidan optimal dari rimpang temu putih. Oleh

karena itu perlu dilakukan penelitian untuk mengetahui lama pengeringan yang

tepat untuk mendapatkan aktivitas antioksidan yang optimal.

B. Identifikasi MasalahApakah aktivitas antioksidan rimpang temu putih (Curcuma aromatica

Salisb.) dipengaruhi oleh waktu pengeringan simplisia?

C. Tujuan PenelitianMengetahui waktu pengeringan yang optimal terhadap aktivitas antioksidan

rimpang temu putih (Curcuma aromatica Salisb.) menggunakan oven pada suhu

650C.

D. Manfaat PenelitianPenelitian ini bermanfaat untuk memberikan informasi mengenai pengaruh

waktu pengeringan terhadap aktivitas antioksidan yang optimal.

E. Kerangka PemikiranTemu putih merupakan salah satu tanaman obat tradisional yang diketahui

memiliki aktivitas biologi yang luas, di antaranya sebagai antioksidan karena

adanya kurkumin yang dapat menahan zat radikal bebas penyebab tumbuhnya sel

kanker. Selain kurkumin ada juga senyawa metabolit sekunder lainnya yang

bermanfaat sebagai antioksidan. Kandungan senyawa metabolit sekunder dapat

dipengaruhi oleh lama proses pengeringan.

Simplisia temu putih yang baik memiliki kadar air


14/63

3

bervariasi, yaitu 22, 23, 24, 25 dan 26 jam, dilanjutkan dengan ekstraksi cara

maserasi dengan pelarut etanol, evaporasi, uji fitokimia dan uji aktivitas

antioksidan.

Penelitian untuk mengetahui aktivitas antioksidan dilakukan dengan metode

DPPH. Pada metode ini, adanya aktivitas antioksidan ditunjukkan dengan

perubahan warna ungu 1,1-difenil-2-pikrihidrazil (DPPH) menjadi kuning 1,1-

difenil-2-pikrilhidrazin (DPPH-H). Perubahan warna tersebut dapat mengukur

kandungan DPPH yang berhasil diredamkan oleh senyawa antioksidan yang

terkandung dalam ekstrak etanol rimpang temu putih.

F. HipotesisWaktu pengeringan mempengaruhi aktivitas antioksidan ekstrak etanol

rimpang temu putih (Curcuma aromatica Salisb.).

G. Tempat dan Waktu PenelitianPenelitian dilakukan di Laboratorium Kimia Universitas Nusa Bangsa

Bogor. Pelaksanaan penelitian berlangsung mulai Maret sampai Juli 2013.


15/63

4

II. TINJAUAN PUSTAKA

A. Temu Putih (Curcuma aromatica Salisb)Temu putih merupakan tanaman obat yang dibudidayakan di beberapa

negara di Asia Tenggara, seperti Thailand, Filipina, Malaysia dan Indonesia. Di

Indonesia temu putih banyak ditemukan sebagai tanaman liar di kawasan Jawa

Barat dan Jawa Tengah. Terutama di daerah yang kurang subur pada daerah

dengan ketinggian 1000 m di atas permukaan laut (Heyne, 1987).

Gambar 1. Rimpang Temu Putih

1. Identifikasi Temu PutihDivisi : Spermathophyta

Sub Divisi : Angiospermae

Kelas : Monocotyledoneae

Ordo : Zingiberales

Famili : Zingiberaceae

Genus :Curcuma

Spesies :Curcuma aromatica Salisb.

Sinonim : Curcuma zedoariaRoxb. (Heyne, 1987)


16/63

5

2. Morfologi TumbuhanTemu putih termasuk tanaman tahunan bersosok semak dengan tinggi

mencapai 1 m. Daun berjenis tunggal, berbentuk lonjong dengan ujung

meruncing dan pangkal tumpul, berbulu halus dan warnanya hijau bergaris

ungu. Bunganya muncul dari ujung batang, berwarna putih. Kulit rimpang

berwarna coklat. Rimpang berwarna putih kekuningan.

3. Kandungan KimiaRimpang temu putih mengandung beberapa senyawa kimia, di antaranya

minyak atsiri zingiberen, sineol, prokurkumenol, kurkumenol, kurkumol,

epikurmenol, kurkumadiol, zederona dan isofuranogermakrena

(Wijayakusuma, 1997). Senyawa yang terkandung dalam temu putih

merupakan turunan kadinena, germakran, eleman, eudesman, guaian, dan tipe

rangka lain (Tang & Eisenbrand dalam Esvandiari, 2002).

Komponen epikurmenol dan zederona berkhasiat sebagai antitumor.

Kurkumin berkhasiat sebagai antiradang dan antioksidan yang dapat

mencegah kerusakan gen (Novalina, 2003 dalam Pratiwi, 2006). Berbagai

jenis seskuiterpen telah diisolasi dari temu putih. Pada 1987, tiga seskuiterpen

baru, isozedoarondiol, methylzedoarondiol dan neocurdione, yang diisolasi

bersama dengan 7 seskuiterpen dari rimpang Curcuma aromatica

(Kuroyanagi et al, 1987).

4. Khasiat dan KegunaanRimpang temu putih mempunyai khasiat antiinflamasi (anti radang) dan

antioksidan. Temu putih juga digunakan oleh masyarakat tradisional sebagai

obat memar, keseleo dan pelega perut. Minyak atsiri yang dikandung temu

putih berpotensi sebagai antioksidan.


17/63

6

B. Antioksidan1. Pengertian Antioksidan

Antioksidan merupakan senyawa yang dapat menangkap radikal bebas

yang banyak terbentuk dalam tubuh, seperti enzim Superoksida Dismutase

(SOD), gluthatione, dan katalase. Antioksidan juga dapat diperoleh dari

asupan makanan yang banyak mengandung vitamin C, vitamin E dan

betakaroten serta senyawa fenolik. Bahan pangan yang dapat menjadi sumber

antioksidan alami, seperti rempah-rempah, coklat, biji-bijian, buah-buahan,

sayur-sayuran seperti buah tomat, pepaya, jeruk dan sebagainya (Prakash,

2001).

Radikal bebas adalah atom atau molekul yang tidak stabil dan sangat

reaktif karena mengandung satu atau lebih elektron tidak berpasangan pada

orbit terluarnya. Untuk mencapai kestabilan atom atau molekul, radikal bebas

akan bereaksi dengan molekul disekitarnya untuk memperoleh pasangan

elektron. Reaksi ini akan berlangsung terus menerus dalam tubuh dan bila

tidak dihentikan akan menimbulkan berbagai macam penyakit seperti kanker,

jantung, katarak, penuaan dini serta penyakit degeneratif lainnya. Untuk

mencapai kestabilan,radikal bebas akan mencari pasangan elektron dalam

makromolekul biologi. Protein dan DNA sel manusia yang sehat merupakan

sumber pasangan elektron yang baik. Penyerangan terhadap bagian tubuh

inilah yang dianggap bertanggungjawab sebagai penyebab timbulnya

berbagai macam penyakit degeneratif (Banito dan Kurnani, 2001 dalam Satiti

2012).

Antioksidan diharapkan aman dalam penggunaannya (tidak toksik).

Efektif pada konsentrasi rendah yaitu 0.01 -0.12%. Antioksidan tersedia

dengan harga yang cukup terjangkau dan tahan terhadap proses pengolahan

produk. Antioksidan penting dalam melawan radikal bebas, tetapi dalam

kapasitas berlebih menyebabkan kerusakan sel. Persyaratan (sesuai peraturan

/ undang-undang): antioksidan sebagai bahan tambahan pangan batas


18/63

7

maksimum penggunaannya telah diatur oleh Peraturan Menteri Kesehatan RI

No 772/Menkes/Per/IX/88. Antioksidan yang diizinkan penggunaannya

antara lain asam askorbat, asam eritrobat. Askorbil palmitat, askorbil stearat,

butyl hidroksilanisol (BHA), butyl hidrokinin tersier, butyl hidroksitoluen,

dilauril tiodipropionat, propel gallat, timah (II) klorida, alpha tokoferol,

tokoferol, campuran pekat (Cahyadi, 2008 dalam Satiti 2012).

2. Fungsi Zat AntioksidanBerkaitan dengan fungsinya, senyawa antioksidan diklasifikasikan dalam

lima tipe antioksidan, yaitu:

a. Primary antioxidants, yaitu senyawa-senyawa fenol yang mampumemutus rantai reaksi pembentukan radikal bebas asam lemak. Dalam

hal ini memberikan atom hidrogen yang berasal dari gugus hidroksi

senyawa fenol sehingga terbentuk senyawa yang stabil. Senyawa

antioksidan yang termasuk kelompok ini, misalnya BHA,BHT,PG,TBHQ

dan Tokoferol.

b. Oxygen scavenger, yaitu senyawa-senyawa yang berperan sebagaipengikat oksigen sehingga tidak mendukung reaksi oksidasi. Dalam hal

ini, senyawa tersebut akan mengadakan reaksi dengan oksigen yangberada dalam system sehingga jumlah oksigen akan berkurang. Contoh

dari senyawa-senyawa kelompok ini adalah vitamin C (asam askorbat),

askorbilpalmitat, asam eritrobat dan sulfit.

c. Secondary antioxidants, yaitu senyawa senyawa yang mempunyaikemampuan untuk terdekomposisi hidroperoksida menjadi produk akhir

yang stabil.. tipe antioksidan ini pada umumnya digunakan unyuk

menstabilkan polyolefin resin. Contohnya asam tiodipropionat dan

dilauriltiopropionat.


19/63

8

d. Antioxidative enzyme,yaitu enzim yang berperan mencegah terbentuknyaradikal bebas. Contohnya glucose oksidase, SOD, glutation peroksidase

dan katalase.

e. Chelators sequestrants,yaitu senyawasenyawa yang mampu mengikatlogam seperti besi dan tembaga yang mampu mengkatalis reaksi oksidasi

lemak. Senyawa yang termasuk didalammya adalah asan sitrat, asam

amino, etilenediamintetra acetic(EDTA) dan fosfolipid.

3. Metode Pengujian antioksidanAntioksidan dapat ditentukan dengan beberapa metode. Metode

penentuan kapasitas antioksidan seperti DPPH (1,1-difenil -2- pikrilhidrazil),

CUPRAC (cupric ion reducing antioxidant capacity), FRAP (Ferric

Reducing Aility Of Plasma), SOD, Deoksiribosa, Tiosianat, Ce dan ABTS (3-

ethylbenzothiazoline-6-sulfonic acid),. Pemilihan metode DPPH pada

penentuan aktivitas antioksidan dalam rimpang temu putih merupakan

metode yang sederhana, mudah, cepat, peka serta hanya memerlukan sedikit

sampel (Apak, 2004 dalam Satiti 2012).

a. Metode DPPHDPPH atau 1,1-difenil-2-pikrilhidrazil (,-difenil-pikrilhidrazil)

merupakan suatu radikal bebas yang stabil dan tidak membentuk dimer akibat

delokalisasi dari elektron bebas pada seluruh molekul. Ketika larutan DPPH

dicampur dengan senyawa yang dapat mendonorkan atom hidrogen, maka

warna ungu dari larutan akan hilang seiring dengan tereduksinya DPPH.

Uji aktivitas antioksidan dengan menggunakan metode ini

berdasarkan dari hilangnya warna ungu akibat tereduksinya DPPH oleh

antioksidan. Intensitas warna dari larutan uji diukur melalui spektrofotometri

UV-Vis pada panjang gelombang sekitar 520 nm. Hasil dari uji ini

diinterpretasikan sebagai IC50, yaitu jumlah antioksidan yang diperlukan


20/63

9

untuk menurunkan konsentrasi awal DPPH sebesar 50%. Pada metode ini

tidak diperlukan substrat sehingga memiliki keuntungan, yaitu lebih

sederhana dan waktu analisis yang lebih cepat. Struktur kimia dari DPPH

adalah sebagai berikut:

Gambar 2. Struktur DPPH (Diphenyl Picril Hydrazil)

b. Metode Uji Superoksida Dismutase (SOD)Aktivitas enzim SOD dapat dinilai berdasarkan kemampuannya

menghambat reaksi yang dikatalis oleh radikal superoksida, seperti

menghmbat reduksi sitokrom C dan nitro blue tetrazolium (NBT).

c. Metode DeoksiribosaMetode oksidasi 2-deoksiribosa dapat digunakan untuk mengetahui

aktivitas peredaman radikal hidroksil yang terbentuk dalam reaksi Fenton.Radikal hidroksil tersebut mengoksidasi 2-deoksiribosa menjadi

malondialdehida. Selanjutnya Malondialdehida produk dipanaskan dengan

asam tiobarbiturat (thiobarbituric acid/TBA) pada pH rendah hingga

menghasilkan kromogen warna merah muda, kemudian kromogen ini diukur

absorbansinya pada panjang gelombang 532 nm.

d. Metode TiosianatPeroksida akan mengoksidasi besi (II) menjadi besi (III), kemudian besi

(III) akan bereaksi dengan ammonium tiosianat menghasilkan suatu kompleks

besi (III) tiosianat yang berwarna merah tua. Penambahan antioksidan akan


21/63

10

mengalami proses oksidasi besi(II) menjadi besi (III) sehingga kompleks

yang berarna merah pun akan berkurang. Perbedaan warna yang dihasilkan

antara sampel dan standar dapat dibandingkan dengan mengukur absorbansi

keduanya pada panjang gelombang 490-500 nm.

e. Metode CeLarutan Ce (IV) sulfat yang diberikan pada sampel akan menyerang

senyawa antioksidan. Senyawa antioksidan dapat berperan sebagai penambah

elektron, maka perusakan struktur oleh elektron relative yang berasal dari

oksidator kuat seperti Ce (IV) tidak terjadi. Metode ini berdasarkan

spektrofotometri yang pengukurannya dilakukan pada panjang gelombang

320 nm. Panjang gelombang ini digunakan untuk mengukur Ce (IV) yangtidak bereaksi dengan Kuersetin dan senyawa flavonoid lain. Kapasitas

reduksi Ce (IV) pada sampel dapat diukur konsentrasi dan pH larutan yang

sesuai membuat Ce (IV) hanya mengoksidasi antioksidan dan bukan senyawa

organic lain yang mungkin teroksidasi. Hal ini membuat penentuan panjang

gelombang maksimum dan nilai larutan pH penting untuk diketahui dan

dijaga selama pengukuran agar tidak terjadi pergeseran panjang gelombang

selama pengukuran.

f. Metode Status antioksidan TotalAsam 2,2-Azinobis(3-etilbenzatiazolin)-6-sulfonat (ABTS) merupakan

substrat dari peroksidase, di mana ketika dioksidasi dengan kehadiran H2O2

akan membentuk senyawa radikal kation metastabil dengan karakteristik

menunjukan absorbansi kuat pada panjang gelombang 414 nm. ABTS

merupakan senyawa larut air dan stabil secara kimia. Akumulasi dari ABTS

dapat dihambat oleh antioksidan pada medium reaksi dengan aktivitas yang

bergantung waktu reaksi dan jumlah antioksidan.


22/63

11

4. Inhibition Concentration 50(IC50)Inhibition Concentration 50(IC50) yaitu konsentrasi suatu zat antioksidan

yang dapat menyebabkan 50% DPPH kehilangan karakter radikal atau

konsentrasi suatu zat antioksidan yang memberikan penghambatan 50%. Zat

yang mempunyai antioksidan tinggi, akan mempunyai nilai IC50yang rendah

(Brand-Willams, 1995 dalam satiti 2012). IC50 dihitung dari persentase

penghambatan serapan larutan ekstrak dengan menggunakan persamaan yang

diperoleh dari kurva regresi linear, konsentrasi sampel sebagai sumbu x dan

% inhibisi sebagai sumbu y.

C. Proses PengeringanPengeringan adalah proses pemindahan panas dan uap air yang

memerlukan energi panas untuk menguapkan kandungan air yang dipindahkan

dari permukaan bahan yang dikeringkan oleh media pengering. Proses

pengeringan adalah proses pengambilan atau penurunan kadar air sampai batas

tertentu sehingga dapat memperlambat laju kerusakan akibat aktivitas

mikroorganisme sebelum bahan diolah (digunakan).

Faktor-faktor yang mempengaruhi pengeringan ada dua golongan yaitu

faktor yang berhubungan dengan udara pengering dan kelembaban udara,

sedangkan faktor yang berhubungan dengan sifat bahan yang dikeringkan yaitu,

ukuran dan kadar air awal dalam bahan.

Pada dasarnya proses pengeringan dalam pembuatan simplisia temu putih

dapat dilakukan dengan menggunakan oven. Mutu simplisia temu putih yang

dikeringkan menggunakan oven sangat dipengaruhi oleh suhu. Semakin tinggi

suhu, makin cepat pula proses pengeringan yang berlangsung karena energi panas

yang dibawa makin besar yang disebabkan jumlah massa cairan yang diuapkan

dari permukaan bahan yang dikeringkan makin besar.


23/63

12

Muchtadi (1989) mengatakan bahan pangan yang dikeringkan umumnya

mempunyai nilai gizi yang lebih rendah dibandingkan bahan segarnya. Selama

pengeringan terjadi perubahan warna, tekstur dan aroma. Pada umumnya bahan

pangan yang dikeringkan akan berubah warnanya menjadi coklat. Perubahan

warna ini disebabkan oleh reaksi-reaksi baik enzimatis maupun non enzimatis.

Efek lainnya adalah terjadinya case hardening, yaitu suatu keadaan dimana

bagian luar atau permukaan bahan sudah kering sedangkan bagian dalamnya

masih basah. Hal ini disebabkan suhu pengeringan yang terlalu tinggi akan

menyebabkan bagian permukaan cepat mengering dan menjadi keras sehingga

menghambat penguapan air selanjutnya.

Manfaat dari pengeringan adalah ketahanan bahan dari proses kerusakan.

Hal ini disebabkan oleh aktivitas air yang terdapat pada bahan mengalami

penurunan sehingga mikroorganisme sebagai sumber penyebab kerusakan bahan

tidak dapat hidup (Buckle et al, 1985).

Lamanya proses pengeringan simplisia temu putih menyebabkan terjadinya

penguapan dan kerusakan sebagian senyawa fenol, akibatnya terjadi penurunan

aktivitas antioksidan pada simplisia temu putih.

D. Ekstraksi dan Pemekatan LarutanEkstraksi merupakan cara pemisahan suatu senyawaan kimia yang

terkandung dalam suatu bahan dengan menggunakan sistem pelarut. Teknik

ekstraksi yang tepat bergantung pada tekstur dan kandungan air bahan tumbuhan

yang diekstraksi dan genus senyawa yang diisolasi (Harbone, 1987).

Ekstraksi yang digunakan adalah maserasi. Maserasi adalah perendaman

sampel dengan menggunakan pelarut organik pada suhu ruangan. Pemilihan

pelarut yang digunakan untuk proses maserasi akan memberikan efektifitas yang

tinggi dengan memperhatikan kelarutan senyawa bahan alam karena dapat

melarutkan seluruh golongan metabolit sekunder.


24/63

13

Hasil ekstraksi dalam jumlah pelarut yang cukup banyak dapat dipekatkan

dengan menggunakan rotary evaporator pada proses pemekatan yaitu dengan

menggunakan pompa vakum dengan pengaliran air. Penggunaan kondisi vakum

untuk menghindari agar senyawa metabolit sekunder tidak terdegradasi selama

proses pemekatan karena tidak panas.

E. Senyawa FitokimiaSenyawa fitokimia merupakan senyawa bioaktif alami yang terdapat pada

tanaman yang dapat berperan sebagai nutrisi dan serat alami yang dapat mencegah

berbagai penyakit (Harborne, 1987). Beberapa penelitian menunjukkan bahwa

fitokimia terdapat pada nutrisi yang terkandung dalam buah-buahan, sayur-sayuran, dan kacang-kacangan. Komponen biokatif tersebut dapat menghambat

proses penuaan dini dan menurunkan resiko terhadap berbagai penyakit, misalnya

kanker, penyakit pada hati, stroke, tekanan darah tinggi, osteoporosis dan infeksi

saluran pencernaan (Hamburger dan Hastettmaun, 1991). Senyawa-senyawa

fitokimia yang umum terdapat pada tanaman, yaitu golongan alkaloid, flavoniod,

kuinon, tannin dan polifenol, saponin, steroid dan triterpenoid (Harborne, 1987).

Senyawa fitokimia berperan dalam menjaga kesehatan. Senyawa-senyawa

tersebut saling melengkapi dalam mekanisme kerja yang terjadi dalam tubuh,termasuk didalamnya adalah antioksidan, detoksifikasi oleh enzim, stimulasi dari

sistem imun, metabolism hormon dan antibakteri serta antivirus (Hamburger dan

Hastettmaun, 1991. dalam Sudirman, 2011).

a. AlkaloidAlkaloid adalah senyawa organik yang terdapat di alam bersifat basa atau

alkali dan sifat basa ini disebabkan karena adanya atom N (Nitrogen) dalam

molekul senyawa tersebut dalam struktur lingkar heterosiklik atau aromatis,

dan dalam dosis kecil dapat memberikan efek farmakologis pada manusia dan

hewan.


25/63

14

Pereaksi yang umum untuk uji alkaloid adalah pereaksi Mayer (kalium

mercury iodida), pereaksi Wagner (iodium dan kalium iodida) dan pereaksi

Dragendorff (Bismut nitrat, HCl pekat, air dan kalium iodida). Berikut adalah

rumus umum dari alkaloid.

Gambar 3. Struktur Alkaloid

b. TriterpenoidTriterpenoid adalah senyawa yang umumnya larut dalam lemak dan

terdapat dalam sitoplasma sel. Senyawa triterpenoid berupa senyawa tanpa

warna, berbentuk Kristal, titik leleh tinggi dan bersuifat optis aktif. Uji yang

banyak digunakan adalah dengan menggunakan pereaksi Lieberman-

Burchard (anhidrida asetat dan H2SO4pekat) yang kebanyakan triterpena dan

sterol memberikan warna hijau biru. Menurut Harborne (1987) senyawa

triterpenoid dapat dibagi menjadi empat golongan,yaitu: triterpenoid, saponin,

steroid, dan glikosida jantung (cardiosonic gliocside).

Gambar 4. Struktur Triterpenoid


26/63

15

c. FlavonoidFlavonoid merupakan salah satu senyawa golongan fenol alam yang

terbesar. Flavonoid adalah senyawa yang terdiri dari dari 15 atom karbon

yang umumnya tersebar di dunia tumbuhan. Flavonoid terutama berupa

senyawa yang larut dalam air. Flavonoid terdapat dalam semua tumbuhan

hijau sehingga pasti ditemukan pada setiap telaah ekstrak tumbuhan

(Markham, 1988). Flavonoid adalah golongan senyawa polifenol yang

diketahui memiliki sifat sebagai penangkap radikal bebas, penghambat enzim

hidrolisis dan oksidatif, dan bekerja sebagai antiinflamasi (Pourmourad. 2006

dalam haris, 2011). Jadi dapat disimpulkan bahwa flavonoid dapat bekerja

sebagai antioksidan.

Gambar 5. Struktur Flavonoid

d. TaninTanin merupakan zat organik yang sangat kompleks dan terdiri dari

senyawa fenolik. Tanin adalah. suatu senyawa polifenol yang berasal dari

tumbuhan, berasa pahit dan kelat, yang bereaksi dengan dan menggumpalkan

protein, atau berbagai senyawa organik lainnya termasuk asam amino dan

alkaloid. Tanin dianggap senyawa kompleks yang dibentuk dari campuran

polifenol yang sangat sukar dipisahkan karena tidak dapat dikristalkanTanin

umumnya terdapat dalam organ: daun, buah, kulit batang, dan kayu.


27/63

16

Tanin merupakan senyawa aktif metabolit sekunder yang diketahui

mempunyai beberapa khasiat yaitu sebagai astringen, anti diare, anti bakteri

dan antioksidan. Tanin merupakan komponen zat organik yang sangat

kompleks, terdiri dari senyawa fenolik yang sukar dipisahkan dan sukar

mengkristal, mengendapkan protein dari larutannya dan bersenyawa dengan

protein tersebut (Desmiaty et al., 2008). Tanin dibagi menjadi dua kelompok

yaitu tanin terhidrolisis dan tanin terkondensasi. Tanin memiliki peranan

biologis yang kompleks mulai dari pengendap protein hingga pengkhelat

logam. Tanin juga dapat berfungsi sebagai antioksidan biologis (Hagerman,

2002). Reaksi ini menyebabkan protein lebih sukar dicapai oleh cairan

pencernaan hewan.

Gambar 6. Struktur Tanin

e. SaponinSaponin adalah senyawa golongan glikosida yang mempunyai struktur

steroid dan mempunyai sifat-sifat khas dapat membentuk larutan koloidal

dalam air dan membui bila dikocok. Glikosida saponin bisa berupa saponin

steroid maupun saponin triterpenoid. Sehingga ketika direaksikan dengan air

dan dikocok maka akan terbentuk buih yang dapat bertahan lama. Saponin

mudah larut dalam air dan tidak larut dalam eter. Saponin memiliki rasa pahit

menusuk dan menyebabkan bersin serta iritasi pada selaput lendir.


28/63

17

Pembentukan busa yang mantap sewaktu mengekstraksi tumbuhan atau

waktu memekatkan ekstrak tumbuhan merupakan bukti akan adanya saponin.

Gambar 7. Struktur Saponin

f. SteroidSteroid adalah suatu golongan senyawa triterpenoid yang mengandung

inti siklopentana perhidrofenantren yaitu dari tiga cincin sikloheksana dan

sebuah cincin siklopentana. Steroid sebelumnya dikenal dengan senyawa

hewani (sebagai hormon kelamin, asam empedu, dan lain-lain) tetapi saat ini

steroid banyak ditemukan di dalam jaringan tumbuhan. Sterol banyak

ditemukan dalam tumbuhan dan disebut fitosterol yang dapat berperan

menghambat penyerapan kolesterol sehingga dapat menurunkan penyerapan

kolesterol total. Reaksi warna untuk uji kualitatif steroid adalah dengan

pereaksi Lieberman-Burchard yang menghasilkan warna hijau biru

(Harborne, 1987).

Gambar 8. Struktur Steroid


29/63

18

F. KurkuminoidKurkuminoid termasuk kelompok senyawa fenolat yang terkandung dalam

rimpang tanaman family Zingiberaceae antara lain temulawak, kunyit dan bangle.

Kurkuminoid merupakan senyawa aktif dalam temulawak, kunyit dan bangle

(Miftahuddin, 2010).

Hasil penelitian yang dilakukan oleh Quiles et al (2002); Tonessen &

Karlsen (1985) menunjukkan bahwa kunyit mengandung kurkuminoid yang

terdiri atas kurkumin, dimetoksi-kurkumin dan bis-demetoksi kurkumin.

Kurkumin diketahui berpotensi dalam menghambat proses oksidasi LDL dan

peroksidasi plasmatik yang berperan penting dalam pathogenesis penyakit (Quiles

et al, 2002).

Gambar 9. Struktur Kurkumin

Gambar 10. Struktur Dimetoksi-kurkumin

Gambar 11. Struktur Bis-Demetoksi-Kurkumin


30/63

19

G. Spektrofotometer UV-VisSpektrofotometri merupakan suatu metoda analisis yang didasarkan pada

pengukuran serapan sinar monokromatis oleh suatu lajur larutan pada panjang

gelombamg spesifik dengan menggunakan monokromator prisma atau kisi

difraksi dengan detektor fototube.Spektrofotometer adalah alat untuk mengukur

transmitan atau absorban suatu sampel sebagai fungsi panjang gelombang.

Sedangkan pengukuran menggunakan spektrofotometer ini, metoda yang

digunakan sering disebut dengan spektrofotometri. Spektrum ultraviolet

merupakan suatu gambar antara panjang gelombang atau frekuensi serapan lawan

intensitas serapan (transmisi atau absorbansi). Spektrofotometri ultraviolet

berguna pada penentuan struktur molekul organik dan pada analisis kuantitatif

(Creswell, 1982)

Spektrofotometri dapat dianggap sebagai perluasan suatu pemeriksaan visual

dengan studi yang lebih mendalam dari absorbsi energi. Absorbsi radiasi oleh

suatu sampel diukur pada berbagai panjang gelombangdan dialirkan oleh suatu

perkam untuk menghasilkan spektrum tertentu yang khas untuk komponen yang

berbeda.

Gambar 12. Skema Peralatan Spektrofotometer UV-Vis


31/63

20

III.METODE PENELITIANA. Alat dan Bahan

Peralatan yang digunakan adalah neraca analitik, oven, evaporator,

peralatan gelas, eksikator dan spektrofotometer UV-Vis Genesys 20 single

beam.

Bahan-bahan yang digunakan adalah rimpang temu putih dari daerah

Sukabumi berusia 11 bulan, ammonia 25%, kloroform, etanol, HCl 37%,

pereaksi Dragendorff, pereaksi Mayer, Pereaksi Wagner, Pereaksi

Liebermann-Burchard, serbuk Magnesium, Amilalkohol, FeCl3,1%, dietil eter,

heksametilentetramin 0,5 %, DPPH dan kuersetin.

B. Prosedur Penelitian.1. Determinasi Tanaman

Determinasi tanaman dilakukan untuk memastikan kebenaran simplisia

yang akan digunakan dalam penelitian. Determinasi dilakukan di Pusat

Penelitian Biologi Lembaga Ilmu Pengetahuan Indonesia (LIPI) diCibinong, Bogor.

2. Persiapan SimplisiaTemu putih yang digunakan sebagai sampel penelitian diperoleh dari

daerah Sukabumi. Rimpang temu putih yang digunakan berumur 11 bulan.

Temu putih dicuci dan dibersihkan, kemudian ditiriskan. Rimpang temu

putih dipotong memanjang dengan ketebalan 0,6-0,7 mm. Temu putih yang

telah dipotong dikeringkan pada suhu 65C dengan waktu bervariasi.

Selanjutnya dihaluskan sampai menjadi serbuk simplisia.


32/63

21

3. EkstraksiSebanyak 25 g simplisia temu putih diekstraksi dengan pelarut etanol

dengan perbandingan sampel:pelarut 1:20, disimpan pada suhu ruang dalam

shaker selama 24 jam dengan beberapa kali pengulangan sampai larutan

ekstrak pelarut jernih. Kemudian filtrat dipisahkan dan dipekatkan

menggunakan evaporator.

4. Uji Fitokimia SenyawaAnalisis fitokimia yang dilakukan dalam penelitian dilakukan secara

kualitatif. Senyawa yang diidentifikasi adalah alkaloid, saponin, flavonoid,

steroid dan triterpenoid, tanin, dan kuinon.

a. AlkaloidSebanyak 0,1 gram ekstrak kunyit ditambahkan 5 mL kloroform dan 3

tetes amoniak. Fraksi kloroform dipisahkan dan diasamkan dengan 2 tetes

H2SO4 2M. Fraksi asam dibagi menjadi tiga tabung kemudian masing-

masing ditambahkan pereaksi Dragendorf, Meyer dan Wagner. Adanya

alkaloid ditandai dengan terbentuknya endapan putih ada pereaksi Meyer,

endapan merah pada perekasi Dragendorf, dan endapan coklat pada

pereaksi Wagner.b. Saponin

Sebanyak 0,1 gram ekstrak kunyit ditambahkan 5 mL akuades lalu

dipanaskan selama 5 menit. Kemudian dikocok selama 5 menit. Busa yang

terbentuk setinggi kurang lebih 1 cm dan tetep stabil setelah didiamkan

selama 15 menit menunjukkan adanya saponin.

c. FlavonoidSebanyak 0,1 gram ekstrak kunyit ditambahkan air secukupnya lalu

dipanaskan selama 5 menit, kemudian ditambahkan serbuk Mg, 0,2 ml

asam HCl pekat dan beberapa tetes amil alkohol, larutan dikocok dan


33/63

22

dibiarkan terpisah. Adanya flavonoid ditandai dengan terbentuknya warna

merah coklat pada lapisan amil alkohol

d. Triterpenoid dan SteroidSebanyak 0,1 gram ekstrak kunyit ditambahkan 5 mL etanol 30% lalu

selama 5 menit dipanaskan dan disaring. Filtratnya diuapkan kemudian

ditambahkan dengan eter. Lapisan eter ditambahkan dengan pereaksi

Liebermen Burchard (3 tetes asetat anhidrida dan 1 tetes H2SO4 pekat).

Warna merah atau ungu yang terbentuk menunjukkan adanya triterprnoid

dan warna hijau menunjukkan adanya steroid.

e. TaninSebanyak 0,1 gram ekstrak kunyit ditambahkan 5 mL akuades kemudian

dididihkan selama 5 menit. Kemudian disaring dan filtratnya ditambahkandengan 5 tetes FeCl31% (b/v). Warna biru tua atau hitam kehijauan yang

terbentuk menunjukkan adanya tanin.

f. KuinonSebanyak 0,1 gram ekstrak kunyit ditambahkan 5 mL akuades kemudian

dididihkan selama 5 menit. Setelah dingin di saring lalu filtrat

ditambahkan NaOH 15%, bila berwarna merah positif mengandung

kuinon.

5. Uji Aktivitas AntioksidanUji aktivitas antioksidan ditentukan secara spektrofotometri dengan metode

DPPH.

a. Pembuatan Larutan DPPH 1 mMDitimbang dengan teliti 39.5 mg DPPH (BM 394.32), dimasukkan

kedalam labu takar 100 ml, kemudian ditambahkan metanol pro analisis

(p.a) hingga batas volume, lalu ditempatkan dalam botol gelap.


34/63

23

b. Pembuatan Larutan BlankoLarutan DPPH 1 mM dipipet sebanyak 1.0 ml kedalam labu takar 10 ml,

lalu ditambahkan metanol (p.a) hingga tanda batas volume.

c. Pembuatan Larutan Uji Ekstrak SimplisiaEkstrak sampel sebanyak 50 mg di timbang, kemudian dimasukkan ke

dalam labu takar 50 ml, ditambahkan metanol (p.a) hingga tanda batas

volume (larutan induk 1000 g / ml atau ppm). Larutan induk 1000 g / ml

masing-masing dipipet sebanyak 2,0 ml ; 3,0 ml ; 4,0 ml ; 5,0 ml ; 6,0 ml ;

7,0 ml dan 8,0 ml ke dalam labu takar 50 ml untuk mendapatkan

konsentrasi 40, 60, 80, 100, 120, 140 dan 160 g / ml atau ppm.

d. Pembuatan Larutan Kontrol PositifKuersetin sebanyak 59 mg ditimbang kemudian dimasukkan kedalam labu

takar 50 ml, lalu dilarutkan dengan metanol (p.a) hingga tanda batas

volume (larutan induk 1000 g / ml atau ppm). Sebanyak 1 ml larutan

induk diencerkan dengan metanol (p.a) hingga 10 ml (larutan induk 100g

/ ml atau ppm). Larutan induk 100g / ml masing-masing dipipet sebanyak

0,5 ml ; 1,0 ml; 1,5 ml; 2,0 ml dan 2,5 ml ke dalam labu takar 10 ml untuk

mendapatkan konsentrasi 1, 2, 3, 4 dan 5 g / ml atau ppm.

e. Pengukuran Aktivitas AntioksidanMasing-masing labu takar yang berisi deret larutan uji dan larutan kontrol

positif ditambahkan 5 ml larutan DPPH 1 mM, ditambahkan metanol (p.a)

hingga tanda batas volume, kemudian dihomogenkan. Larutan blanko,

deret larutan uji dan deret larutan standar diinkubasi dalam penangas air

dengan suhu 37oC selama 30 menit.

Panjang gelombang maksimum ditentukan dengan mengukur serapan

larutan blanko pada rentang panjang gelombang 400-700 nm. Panjang

gelombang maksimum diperoleh dari nilai absorbansi maksimum.


35/63

24

Kemudian diukur absorbansi deret larutan uji dan deret larutan standar

pada panjang gelombang maksimum yang diperoleh.

f. Perhitungan aktivitas antioksidana)Peredaman radikal bebas dihitung dengan rumus sebagai berikut:

Peredaman radikal bebas (%) =

Keterangan:

Abs Blanko = Absorbansi larutan blanko

Abs Sampel = Absorbansi larutan sampel (larutan uji atau kontrol

positif)

b) PerhitunganInhibition Concentration 50(% IC50)Data-data hasil pengukuran kemudian dianalisis dengan menggunakan

persamaan regresi linier dan diperoleh kurva hubungan antara

konsentrasi (sebagai sumbu x) dengan peredaman radikal bebas

(sebagai sumbu y). Kurva hubungan antara konsentrasi dan peredaman

radikal bebas ditunjukkan pada gambar 13.

Gambar 13. Hubungan antara Konsentrasi dan Peredaman Radikal Bebas


36/63

25

Nilai IC50diperoleh dari y = ax + b, dimana y = Absorbansi Blanko. Sampel

dinyatakan berpotensi sebagai antioksidan jika memiliki IC50kurang dari 100

g / ml atau 100 ppm (Kiswandono dan Maslahat, 2011).


37/63

26

IV.HASIL DAN PEMBAHASAN

A. Determinasi TanamanDeterminasi tanaman merupakan proses untuk menentukan secara spesifik

nama atau jenis dari suatu tumbuhan. Determinasi bertujuan untuk menentukan

suatu spesies yang lebih spesifik dan tepat sasaran, karena dalam proses

pemanfaatannya, tumbuhan memiliki berbagai jenis varietas yang hampir mirip untuk

digunakan pada penelitian, jamu-jamu dan obat.

Rimpang temu putih yang digunakan berasal dari daerah Sukabumi usia 11

bulan. Determinasi rimpang temu putih dilakukan di Pusat Penelitian Biologi

(Herbarium Bogoriense). Lembaga Ilmu Pengetahuan Indonesia (LIPI) Cibinong,

Bogor. Hasil uji Determinasi menyatakan bahwa rimpang temu putih yang

digunakan dalam penelitian ini adalah temu putih jenis Curcuma aromatica

Salisb. sesuai dengan data yang ditunjukkan dalam Lampiran 4.

B. Pengeringan Simplisia dan Penetapan Kadar AirRimpang temu putih yang digunakan pada penelitian ini merupakan bahan

yang memiliki kadar air dalam jumlah relatif tinggi. Maka dilakukan pengeringanterhadap sampel. Pengeringan dilakukan dengan waktu yang bervariasi, yaitu 22,

23, 24, 25, dan 26 jam. Simplisia yang telah mengalami pengeringan, kemudian

ditentukan kadar airnya.

Kadar air simplisia temu putih dilakukan dengan cara pemanasan pada suhu

1050C. Menurut Harijadi (1993), air yang terikat secara fisik dapat dihilangkan

dengan pemanasan pada suhu 100-1050C Hasil pengukuran kadar air simplisia

rimpang temu putih dalam berbagai variasi waktu pengeringan ditunjukan oleh

Gambar 14.


38/63

27

Gambar 14. Grafik Hubungan Kadar Air dan Lama Pengeringan Simplisia Temu

Putih

Pada Tabel 1 dapat dilihat pada semua waktu pengeringan kadar air simplisia

berkisar antara 6,63 7,38%. Hasil ini sesuai dengan standar Depkes RI (1995) untuk

kadar air simplisia, yaitu kurang dari 10% . Semakin lama proses pengeringan

semakin kecil kadar air yang didapatkan. Setiap penambahan waktu proses

pengeringan selama 1 jam kadar air berkurang sebanyak 0,15 0,22 %.

Kadar air akan mempengaruhi daya tahan sampel terhadap serangan atau

aktivitas mikroorganisme. Semakin besar kandungan air pada simplisia, maka

semakin rendah daya tahannya terhadap serangan mikroorganisme. Kadar air yang

baik untuk simplisia adalah 6-7%, jika kurang dari nilai tersebut, kemungkinan zat

aktif dalam simplisia tersebut telah hilang.

C. Pembuatan Ekstrak SimplisiaEkstrak simplisia yang diperoleh dalam bentuk persen rendemen

ditunjukkan pada Gambar 15.


39/63

28

Gambar 15. Hasil Rendemen Ekstrak Etanol Temu Putih

Pada penelitian ini teknik ekstraksi yang dipilih yaitu maserasi.

Maserasi merupakan metode perendaman sampel dengan pelarut organik dengan

molekul relatif kecil dan dilakukan pada suhu ruang. Dalam proses maserasi ini

terjadi kontak antara serbuk simplisia temu putih dan etanol yang cukup lama.

Pelarut terus menerus terdistribusi ke dalam sel tumbuhan. Muncul perbedaan

tekanan di dalam dan di luar sel sehingga terjadi proses difusi. Larutan yang

terpekat akan didesak menuju keluar berusaha mencapai keseimbangan

konsentrasi antara zat aktif di dalam dan di luar sel. Proses ini akan berhenti,

setelah terjadi keseimbangan konsentrasi. Senyawa metabolit sekunder akan

terlarut dalam pelarut etanol.

Metode maserasi digunakan karena tidak memakai suhu tinggi. Jika

ekstraksi menggunakan suhu tinggi ada kemungkinan senyawa-senyawa metabolit

sekunder terdegradasi. Pelarut yang digunakan adalah pelarut polar, yaitu etanol.

Pemilihan etanol sebagai pelarut karena senyawa antioksidan seperti flavonoid

dan alkaloid larut dalam pelarut semipolar.


40/63

29

Larutan hasil proses maserasi dipekatkan dengan menggunakan evaporator

pada suhu 600C agar bahan aktif dalam ekstrak tidak ikut menguap bersama

pelarut.

Ekstrak etanol yang dihasilkan berwarna coklat pekat dengan kadar

rendemen berturut-turut untuk ekstrak dengan pengeringan 22, 23, 24, 25 dan 26

jam yaitu 14,16%, 11,89%,15,95%, 12,10% dan 11,97%.

(Gambar 15).

D. Uji FitokimiaUji fitokimia terhadap ekstrak temu putih dilakukan dengan pengujian

kimia senyawa golongan alkaloid, flavonoid, saponin, steroid/triterpenoid, tanindan kuinon. Pengujian ini bertujuan untuk mengetahui ada atau tidaknya senyawa

metabolit sekunder di dalam ekstrak tersebut. Uji fitokimia ini merupakan suatu

uji kualitatif dari sampel untuk menentukan ada atau tidaknya bahan aktif dalam

sampel yang akan dianalisis.

Temu putih mengandung beberapa senyawa kimia. Berdasarkan penelitian

Pratiwi (2006), pada uji fitokimia temu putih alkaloid dan flavonoid menunjukkan

hasil uji positif dan mempunyai aktivitas antioksidan. Pada tahun yang sama

Irawan (2006) menyatakan bahwa temu putih mengandung terpenoid, alkaloid,

dan flavonoid mempunyai potensi tinggi sebagai antikanker.

Hasil uji fitokimia pada ekstrak etanol temu putih disajikan pada Tabel 1.


41/63

30

Tabel 1. Hasil Uji Fitokimia Ekstrak Etanol Temu Putih

Senyawa Metabolit

Sekunder

Ekstrak Temu Putih

22 jam 23 jam 24 jam 25 jam 26 jam

Alkaloid

Dragendroff ++ ++ ++ + + Mayer + + + - - Wagner ++ ++ ++ ++ +

Flavonoid ++ ++ ++ + +

Saponin - - - - -

Triterpenoid - - + - -

Steroid - - - - -

Tanin - - - - -

Kuinon - - - - -

Keterangan : ++ = kuat

+ = tidak terlalu kuat

- = tidak terdeteksi

Berdasarkan data pada Tabel 1 diketahui bahwa ekstrak etanol temu putih

mengandung senyawa alkaloid dan flavonoid positif, sedangkan saponin,

triterpenoid, steroid, tanin dan kuinon negatif. Preparasi sampel untuk pengujian

alkaloid dilakukan dengan prosedur Kiang Douglas, yaitu pengujian terhadap

garam alkaloid yang terdapat dalam tanaman (lazimnya sitrat, tartrat atau laktat).

Ekstrak pertama-tama diubah menjadi basa bebas dengan larutan amonia encer.

Hasil yang diperoleh kemudian diekstrak dengan larutan kloroform, dan alkaloid

diubah menjadi garam kloridanya dengan cara menambahkan asam klorida 10%.

Filtrat larutan berair kemudian diuji dengan pereaksi alkaloid yaitu pereaksi

Mayer, Dragendorff atau Wagner. Reaksi didasarkan pada kesanggupan alkaloid

untuk bergabung dengan logam yang memiliki berat atom tinggi seperti merkuri /

raksa (Hg), bismut (Bi), tungsten / wolfram, atau iod (I2). Pereaksi Mayer

mengandung kaliun iodida (KI) dan merkuri klorida (HgCl2). Pereaksi Dragendorff

mengandung bismut nitrat (Bi(NO3)3) dan HgCl2 dalam nitrit berair. Pereaksi Wagner


42/63

31

menunjukkan perbedaan yang besar dalam hal sensitivitas terhadap gugus alkaloid

yang berbeda (Sjahid, 2008).

Pada uji alkaloid, ekstrak etanol temu putih pengeringan 25 dan 26 jam

endapan coklat yang terbentuk dengan pereaksi Wagner tidak sebanyak endapan

yang dibentuk oleh ekstrak etanol temu putih pengeringan 22, 23, dan 24 jam.

Begitu pula pada pengujian flavonoid, ekstrak etanol temu putih pengeringan 25

dan 26 jam hanya memberikan sedikit warna merah coklat pada lapisan amil

alkohol (lebih sedikit dari ekstrak etanol temu putih pengeringan 22, 23 dan 24

jam). Hal ini menandakan kandungan alkaloid dan flavonoid pada ekstrak etanol

temu putih pengeringan 25 dan 26 jam sudah berkurang.

Triterpenoid pada temu putih tidak terdeteksi diduga karena triterpenoid

bersifat non polar sehingga tidak terbawa pada saat ekstraksi dengan pelarutsemipolar (etanol). Pada pengeringan 24 jam sedikit terlihat.

Lama pengeringan mempengaruhi kandungan metabolit sekunder dari

ekstrak etanol temu putih. Semakin lama proses pengeringan, semakin tidak kuat

reaksi yang ditimbulkan dari pengujian alkaloid dan flavonoid.

E. Uji Aktivitas AntioksidanUji aktivitas antioksidan ekstrak etanol temu putih terhadap radikal bebas

DPPH dilakukan dengan cara spektrofotometri dengan kuersetin sebagai kontrol

positif. Dilakukan pengukuran maks antara 500-525.

Gambar 16. Pengukuran Panjang Gelombang Maksimum


43/63

32

Berdasarkan Gambar 16, panjang gelombang maksimum yang didapatkan

adalah pada panjang gelombang 517 nm dengan nilai absorbansi 0,918. Pada

panjang gelombang maksimal, kepekaan absorbansi juga maksimal karena pada

panjang gelombang maksimal tersebut, perubahan absorbansi untuk setiap satuan

konsentrasi adalah yang paling besar.

Aktivitas antioksidan adalah kemampuan antioksidan untuk menghambat

reaksi oksidasi yang dinyatakan sebagai persen penghambatan. Hasil uji aktivitas

antioksidan dalam ekstrak rimpang temu putih adalah sebagai berikut:

Gambar 17. Kurva hubungan konsentrasi (g/ml) dengan Peredaman Radikal

Bebas (% Inhibisi) Ekstrak Temu Putih Pengeringan 22 jam


44/63

33

Gambar 18. Kurva Hubungan Konsentrasi (g/ml) dengan Peredaman Radikal

Bebas (% Inhibisi) Ekstrak Temu Putih Pengeringan 23 Jam




45/63

34


Bebas (% Inhibisi) Ekstrak Temu Putih Pengeringan 25 Jam.




46/63

35

Gambar 22. Kurva Hubungan Konsentrasi Kuersetin (g/ml) dengan Peredaman

Radikal Bebas (% Inhibisi)

Pada Gambar 17-21 dapat dilihat nilai peredaman radikal bebas semakin

menurun seiring dengan naiknya konsentrasi. Kontrol positif Kuersetin

menunjukkan nilai IC50 yang paling rendah, yaitu 6,47g/ml (Gambar 22).

Parameter yang digunakan untuk menunjukkan aktivitas antioksidan adalah

Inhibition Concentration (IC50) yaitu konsentrasi suatu zat antioksidan yang dapatmenghambat reaksi radikal bebas DPPH sebesar 50%. Zat yang mempunyai

aktivitas antioksidan tinggi, akan memberikan nilai IC50yang rendah. Nilai IC50

diperoleh dengan cara membandingkan serapan radikal bebas DPPH sebelum

bereaksi (blanko) dan setelah direaksikan dengan ekstrak sampel yang

mengandung antioksidan (sampel). Nilai ini kemudian dimasukkan kedalam

persamaan linier dengan konsentrasi (g/ml) sebagai sumbu x dan nilai

peredaman radikal bebas (%) sebagai sumbu y, kemudian dimasukkan ke

persamaan y = ax+b, dimana y = 50, dan nilai x menunjukkan IC50.

Berdasarkan mekanisme reaksi senyawa antioksidan dengan DPPH yang

disajikan pada Gambar 23 diketahui bahwa senyawa antioksidan memiliki sifat


47/63

36

yang relatif stabil dalam bentuk radikalnya. Sehingga senyawa-senyawa yang

berpotensi sebagai antioksidan dapat diprediksi dari golongan fenolat, flavonoid

dan alkaloid (Brand-William,1995). Berikut adalah mekanisme reaksi senyawa

antioksidan dengan DPPH.

Gambar 23. Mekanisme Reaksi Senyawa Antioksidan dengan DPPH


48/63

37

Gambar 24. Grafik Nilai IC50Ekstrak Etanol Temu Putih dan Kontrol Positif

Pada sampel 22-24 jam nilai IC50 semakin kecil, pada sampel 25 dan 26

jam nilai IC50naik kembali. Hal ini disebabkan pada lama pengeringan 22 dan 23

jam kemungkinan masih ada metabolit sekunder yang terjerap dalam air sehingga

tidak terekstrak secara sempurna. Sedangkan pada lama pengeringan 25 dan 26

jam zat aktif sudah ada yang mengalami kerusakan. Hal ini sebanding dengan

hasil fitokimia yang memperlihatkan reaksi warna yang semakin melemah untuk

ekstrak etanol dengan lama pengeringan 25 dan 26 jam.

Nilai IC50yang didapatkan untuk ekstrak etanol dengan lama pengeringan

22, 23, 24, 25 dan 26 jam berturut-turut adalah 160,54g/ml, 133,17 g/ml,

117,81g/ml, 144,69g/ml, dan 157,70g/ml. Berbeda jauh dengan Kuersetin

sebagai kontrol positif yang memiliki nilai IC506,47 g/ml. Secara spesifik suatu

senyawa dikatakan sebagai antioksidan sangat kuat jika nilai IC50 kurang dari 50

g/ml, kuat untuk IC50 bernilai 50-100 g/ml, sedang jika bernilai 100-150 g/ml, dan

lemah jika nilai IC50 bernilai 151-200 g/ml (Zuhra dkk, 2008). Ekstrak etanol

rimpang temu putih dengan pengeringan 23-25 jam termasuk memiliki aktivitas

antioksidan sedang. Ekstrak etanol rimpang temu putih dengan pengeringan 22 dan

26 jam termasuk memiliki aktivitas antioksidan yang lemah.


49/63

38

V. KESIMPULAN DAN SARANA. Kesimpulan

Hasil penelitian menunjukkan bahwa lama proses pengeringan

berpengaruh terhadap aktivitas antioksidan rimpang temu putih. Ekstrak etanol

rimpang temu putih dengan lama pengeringan simplisia 24 jam memiliki aktivitas

antioksidan terbaik, yaitu dengan nilai IC50117,81 g/ml.

B. SaranUntuk mendapatkan senyawa aktif lain dalam rimpang temu putih yang

berkhasiat sebagai antioksidan perlu dilakukan ekstraksi dengan pelarut lain,

seperti heksan dan etil asetat.


50/63

39

DAFTAR PUSTAKA

Adinda. S dan D.K. Ningrum. 2006. Pengeringan Kunyit menggunakan

Microwavedan Oven. Universitas Diponegoro. Semarang.

Buckle, K.A. 1985.Ilmu Pangan. Cet.1. Universitas Indonesia. Jakarta.

Cresswell, C. J. 1982.Analisis Spektrum Senyawa Organik.Edisi kedua. Institut

Teknologi Banndung. Bandung

Ditjen POM. 2000.Parameter Standar Umum Ekstrak Tumbuhan Obat

Departemen Kesehatan RI. Jakarta

Esvandiari. 2002. Pengaruh Ekstrak Temu Putih (Curcuma zedoaria) dan Kunir

Putih (Curcuma mangga) pada Pertumbuhan Saccharomyces cerevisiae.

(Skripsi). Fakultas Matematika dan Ilmu Pengetahuan Alam InstitutPertanian Bogor. Bogor.

Hamburger M. and K Hostettmaun. 1991.Bioactivity in plants: The link between

phytochemistry and medicine. Phytochemical 30(12):3864-3874.

Harborne JB. 1987. Metode Fitokimia. Ed ke-2. Institut Teknologi Bandung.

Bandung.

Haris,M. 2011. Penentuan Kadar Flavonoid Total Dan Aktifitas Antioksidan DariDaun Dewa (Gynura Pseudochina [Lour] Dc) Dengan Spektrofotometer Uv-

Visibel. Skripsi. Universitas Andalas. Padang

Hagerman, E. The Tannin Handbook. http://chemistry.muohio.edu/hagerman/ ,

diakses 28 Juli 2013.

Heyne K. 1987. Tanaman Berguna Indonesia. Badan Litbang Kehutanan Jakarta,

penerjemah. Jilid I. Badan Penelitian dan Pengembangan Kehutanan.

Jakarta.

Irawan, D. 2006. Penentuan Aktivitas Antioksidan Ekstrak Mahkota Dewa, Temu

Putih, Sambiloto dan Keladi Tikus secara In Vitro. Skripsi. Institut

Pertanian Bogor. Bogor.

Kiswandono.A.A. dan M. Maslahat. 2011.Uji Antioksidan Ekstrak Heksana, EtilAsetat, Etanol, Metanol 80% Dan Air Daun Kelor (Moringa Oleifera,

Lamk). Jurnal Sains Natural Universitas Nusa Bangsa Vol. 1, No. 1,

Januari 2011,39 44. Universitas Nusa Bangsa. Bogor

Kuroyanagi M. and A. Ueno. 1987. Structures of sesquiterpenes from Curcuma

aromatica Salisb. Chemical & Pharmaceutical Bulletin 35(1): 53-59.


51/63

40

Kuronayagi M, M. Ohshiro and A. Ueno. 1990. Structures of Sesquiterpenes from

Curcuma longa. Phytochemistry Volume 29. University of Shizuoka. Japan.

Liang OB, Y. Widjaja dan S. Puspa. 1985. Beberapa aspek isolasi, identifikasi,

dan penggunaan komponenkomponen Curcuma xanthorriza Roxb dan

Curcuma domestika Val. Di dalam: Symposium Nasional Temulawak.Lembaga Penelitian Universitas Padjadaran. Bandung.

Markham, K.R. 1988. Cara Mengidentifikasi Flavonoid. Penerjemah Kosasih

Padmawinata. ITB. Bandung.

Miftahuddin, A. 2010.Diferensiasi Temulawak, Kunyit, dan Bangle Berdasarkan

Pola Pemisahan Senyawa Menggunakan Kromatografi Lapis Tipis. Skripsi.

Institut Pertanian Bogor. Bogor.

Prakash, A. 2001. Antioxidant Activity. Medall ion Labor ator ies :

Anal it hycal Progres Vol 19 No : 2. 1 4.

Pratiwi W. 2006. Penentuan daya inhibisi ekstrak air dan etanol temu putih

(Curcuma zeodaria) terhadap aktivitas tirosin kinase secara in vitro.

Skripsi. Institut Pertanian Bogor. Bogor.

Satiti, A.W. 2012. Ekstraksi Bertingkat Heksana, Etanol 90% dan Air Simplisia

Daun Sirsak (Annona muricata Linn) serta Potensinya Sebagai Zat

Antioksidan alami.Skripsi. Universitas Nusa Bangsa. Bogor

Sidik, M.W. Mulyono dan A. Mutadi. 1995. Temulawak (Curcuma xanthorriza

Roxb). Phyto Medika. Jakarta.

Sudirman,S. 2011. Aktivitas Antioksidan Dan Komponen Bioaktif Kangkung Air

(Ipomoea Aquatica Forsk.).(Skripsi). Institut Pertanian Bogor. Bogor

Tonnessen HH, G. Smistad, T. Agren and J. Karlsen. 1992. Studies of curcumin

and curcuminoid. XX III: Effects of Curcumin on Liposomal Lipid

Peroksidastion.

Quiles JL, MD Mesa, CLR Tortosa, CM Aguilera, M. Battio, A. Gil, and MCR

Tortosa. 2002. Curcuma longa extract suplementation reduces oxidative

stress and attenuates aortic fatty streak development in rabbits.

Arteriolscler Thromb Vasc Biol. 22: 1225-1231.

Wijayakusuma HMH. 1997. Hidup Sehat Secara Hembing. Volume ke-6. PT

Gramedia. Jakarta.

Zuhra,C.F., BT Juliati, S. Herlince. 2008. Aktivitas Antioksidan Senyawa Flavonoid

dari Daun Katuk (sauropus androgunus (l) merr.).Jurnal Biologi Sumatera.Universitas Sumatera Utara. Medan.


52/63

41

LAMPIRAN

Determinasi

Tanaman

Pencucian dan penirisan

Pengeringan dengan waktu

22,23, 24,25, 26 jam

Ekstraksi cara maserasi

dengan etanol

Ekstrak kental

Uji AntioksidanUji Fitokimia

Pemeriksaan

kadar air

Lampiran 1. Diagram Alir Metode Penelitian


53/63

42

Lampiran 2. Diagram Alir Metode Uji Antioksidan Estrak Etanol Temu Putih


54/63

43

Lampiran 3. Diagram Alir Metode Uji Aktivitas Antioksidan Kuersetin


55/63

44

Lampiran 4. Hasil Determinasi Tanaman Temu Putih


56/63

45

Lampiran 5. Data kadar air simplisia rimpang temu putih

Waktu

Pengeringan

(Jam)

Ulangan Bobot

Kosong

(g)

Bobot +

Sampel

(g)

Bobot

Sampel

(g)

Bobot

Kering

(g)

Kadar

Air (%)

22 1

2

27,4533

29,6545

29,4533

31,6545

2,0000

2,0000

1,8525

1,8524

7,38

7,38

Rata-rata 7,38

23 1

2

30,1289

30,2884

32,1289

32,2884

2,0000

2,0000

1,8562

1,8560

7,19

7,20

Rata-rata 7,20

24 1

2

29,6074

32,4032

31,6075

34,4032

2,0001

2,0000

1,8594

1,8588

7,03

7,06

Rata-rata 7,05

25 1

2

29,7867

30,6472

31,7867

32,6472

2,0000

2,0000

1,8632

1,8630

6,84

6,85

Rata-rata 6,85

26 1

2

30,5542

30,4821

32,5542

32,4821

2,0000

2,0000

1,8764

1,8764

6,63

6,63

Rata-rata 6,63

Perhitungan :


57/63

46

Lampiran 6. Data Rendemen yang diperoleh dari Hasil Ekstraksi

Ekstrak

Temu Putih

Serbuk

Sampel (g)

Cawan

Kosong (g)

Cawan +

ekstrak (g)

Bobot

ekstrak (g)

Rendemen

(%)

22 Jam 20,0024 42,6867 45,5194 2,8327 14,16

23 Jam 20,0026 27,2557 29,6347 2,3790 11,89

24 Jam 20,0023 39,2007 42,3968 3,1961 15,98

25 Jam 20,0014 32,5544 30,1252 2,4292 12,10

26 Jam 20,0086 50,3384 52,7328 2,3944 11,97

Perhitungan :

Rendemen (%) = berat ekstrak x 100%

berat serbuk


58/63

47

Lampiran 7. DataInhibition ConcentrationEkstrak Temu Putih dan Kuersetin

1. Hasil uji aktivitas antioksidan ekstrak etanol temu putih pengeringan 22 jamUlangan Konsentrasi

(mg/l)

Ab As Peredaman

Radikal Bebas

IC50

(mg/l)

80 0,685 25,38

100 0,624 32,03

120 0,552 39,87

1 140 0,918 0,496 45,97 160,54

160 0,460 49,89

180 0,423 53,92

80 0,686 25,27

100 0,624 32,03

120 0,552 39,87

2 140 0,918 0,495 46,08 160,60

160 0,461 49,78

180 0,422 54,03

Keterangan :

Ab = Absorbansi blanko

As = Absorbansi sampel

IC50 = Konsentrasi sampel yang memberikan 50% peredaman radikal bebas.

Perhitungan persamaan regresi linear:

y = ax +b, dimana y=50 dan x = IC50

dari grafik diperoleh persamaan : y = 0,289x + 3,588

maka

x = 160,5


59/63

48

2. Hasil Uji Aktivitas Antioksidan Ekstrak Temu Putih Pengeringan 23 JamUlangan Konsentrasi

(mg/l)

Ab As Peredaman

Radikal Bebas

IC50

(mg/l)

40 0,793 13,62

60 0,692 24,62

80 0,636 30,72

1 100 0,918 0,550 40,09 133,17

120 0,498 45,75

140 0,454 50,54

40 0,793 13,62

60 0,694 17,65

80 0,632 31,05

2 100 0,918 0,524 42,92 131,07

120 0,498 45,75

140 0,454 50,54

Keterangan :







maka

x = 50-1,127

0,367

x = 133,17


60/63

49

3. Hasil Uji Aktivitas Antioksidan Ekstrak Temu Putih Pengeringan 24 JamUlangan Konsentrasi

(mg/l)

Ab As Peredaman

Radikal Bebas

IC50

(mg/l)

40 0,785 14,49

60 0,682 25,71

80 0,614 33,12

1 100 0,918 0,543 40,85 117,81

120 0,427 53,49

140 0,381 58,50

40 0,790 13,94

60 0,680 25,93

80 0,620 32,46

2 100 0,918 0,545 40,63 117,53

120 0,430 53,16

140 0,374 59,26

Keterangan :






dari grafik diperoleh persamaan : y = 0,444x - 2,309

maka

x = 50+2,309

0,444

x = 117,81


61/63

50


(mg/l)

Ab As Peredaman

Radikal Bebas

IC50

(mg/l)

40 0,758 17,43

60 0,750 18,30

80 0,672 26,80

1 100 0,918 0,569 38,02 144,69

120 0,528 42,48

140 0,482 47,49

160 0,412 55,12

40 0,762 16,99

60 0,716 22,00

80 0,635 30,83

2 100 0,918 0,570 37,91 143,32

120 0,518 43,57

140 0,480 47,71

160 0,412 55,12

Keterangan :






dari grafik diperoleh persamaan : y = 0,334x+1,672

maka

x = 50-1,672

0,334

x = 144,69


62/63

51


(mg/l)

Ab As Peredaman

Radikal Bebas

IC50

(mg/l)

60 0,811 11,66

80 0,724 21,13

100 0,642 30,07

1 120 0,918 0,587 36,06 157,70

140 0,512 44,23

160 0,466 49,24

180 0,401 56,32

60 0,821 10,57

80 0,7720 21,57

100 0,633 31,05

2 120 0,918 0,588 35,95 164,64

140 0,531 42,16

160 0,482 47,49

180 0,424 53,81

Keterangan :






dari grafik diperoleh persamaan : y = 0,376x -9,294

maka

x = 50+9,294

0,376

x = 157,70


63/63

52

6. Hasil uji aktivitas antioksidan Standar Positif KuersetinUlangan Konsentrasi

(mg/l)

Ab As Peredaman

Radikal Bebas

IC50

(mg/l)

1 0,660 28,10

2 0,627 31,70

3 0,583 36,49

1 4 0,918 0,557 39,32 6,47

5 0,517 43,68

6 0,475 48,26

7 0,436 52,51

1 0,661 28,00

2 0,627 31,70

3 0,583 36,49

2 4 0,918 0,556 39,43 6,46

5 0,517 43,68

6 0,476 48,15

7 0,435 52,61

Keterangan :







maka

x = 50 23,79

4,053

x = 6,47

Skripsi Curcuma Aromatica Salisb

Documents

Transcript of Skripsi Curcuma Aromatica Salisb