INTRODUCCIONPara efectuar el estudio de losmicroorganismos, se han diseado diversos mtodos que permiten cultivarlosbajo condiciones artificiales, en los que es posiblecultivarlos bajo condiciones experimentales y manejar unsolo tipo de microorganismo. Una de las tcnicas ms usadas en el laboratorio de microbiologa consiste en transferir una muestra microbiolgica de un ambiente determinado a un medio de cultivo, lo que permite obtener cultivos microbianos. A l efectuar este procedimiento, es necesario considerar que en el rea de trabajo, existen muchos otros microorganismos; debido a esto, es necesario tomar precauciones para impedir que stos penetren y contaminen los cultivos en estudio. Por otra parte, paraconsiderar no slo el aspecto nutricional, sinotambin las condiciones ambientales de su hbitat natural, por lo que en el medio de cultivo se debe ajustar el pH y concentracin de sales y durante la incubacin condiciones tales como la temperatura, aireacinla luminosidad. La aplicacin de estos procedimientos ha permitido propagar a los microorganismos en cultivos mixtos, as como su aislamiento y la obtencin de cultivos puros, facilitando de este modo, el estudio, caracterizacin, aplicacin y control de los mismos. La forma de sembrarlos y cultivarlos depende del tipo de microorganismo y propsito especfico del estudio

OBJETIVOS Aplicar la tcnica adecuada para preparar elrea de trabajo y evitar contaminaciones.

Manipular adecuadamente los cultivos puros.

Reconocerlaimportanciadelplaqueadoyflameado.

Aprender a sembrar en tubos con Agarinclinado de adentro hacia fuera.

Dominarypracticarlasiembradeplacasporestras

MARCO TEORICOSembrar o inocular es introducir artificialmente una porcin de muestra (inculo) en un medio adecuado, con el fin de iniciar un cultivo microbiano, para su desarrollo y multiplicacin. Una vez sembrado, el medio de cultivo se incuba a una temperatura adecuada para el crecimiento.Las reglas fundamentales para efectuar la siembra exigen: Que se efecten aspticamente Que los medios de cultivo y el instrumental a utilizar estn esterilizados Que se realicen solo los manipuleos indispensables Que se trabaje fuera de toda corriente de aire. De ser posible utilizando un mechero o bien Flujo laminar.Existen diferentes tipos de siembra de acuerdo al medio utilizado y los requerimientos del microorganismo a estudiar.MEDIOS SLIDOS Siembra por inmersin: se coloca el inculo en una placa o caja de Petri y sobre el mismo se vierte el medio de cultivo previamente fundido. Este mtodo se utiliza para microorganismos aerobios Siembra en doble capa: se procede de la misma manera que por inmersin. Una vez solidificado el medio se vierte una cantidad extra de medio necesaria para cubrir la capa anterior (generalmente 10 ml. aprox.). Este mtodo se utiliza para microorganismos anaerobios facultativos y microaeroflicos

Siembra en superficie: se vierte sobre una placa de Petri el medio de cultivo fundido, se deja solidificar y se coloca sobre la superficie el inculo. Con ayuda de una esptula de Drigalsky se extiende el inculo hasta su absorcin total por el medio de cultivo. Este tipo de siembra se recomienda para microorganismos aerobios estrictos

Siembra en estra: se vierte sobre una placa de Petri el medio de cultivo fundido y se deja solidificarMATERIALES Y METODOSDILUCIONES SUCESIVAS Materiales 100ml de muestra 3 tubos de solucin peptonada (9ml)Metodologa Agregar 1ml de muestra (10ml) Mesclar Luego se utilizan 3 placas Agregamos 0.1 solucin Mediante una esptula se comienza a distribuir 0.1ml Durante 24 h observar colonias Recopilamos la ltima muestra para ser analizada

TECNICA POR ESTRIAS Placa con agar agar Agar inclinado solido Caldo (agar nutritivo) liquido Agar uniforme solido

Materiales Mechero AzasMetodologa Tomar muestra solida o liquida Ingresar el aza a un lado, por agotamiento, ir rotando la placa Retirar el aza Flamear hasta color rojo Cerrar la placa y flamear los bordes

Coger muestra Sacar algodn No alejarse del mechero AGAR UNIFORME Introducir hasta la mitad} Evitar chocar con paredes Flamear

Coger muestra agar Sacar algodn No alejarse del mechero Agitar el caldo nutritivo (liquido) CALDO NUTRITIVO Retirar Flamear

DISCUCIONPor medio de esta prctica se logr utilizar las tcnicas aprendidas durante el transcurso del curso, adems aprender a realizar algunos de los mtodos que existen para cultivar bacterias y de esta manera observar sus caractersticas tanto macroscpicas como microscpicas e interpretacin de las mismas, con lo que se observ que para cada bacteria existen caractersticas diferentes que son las que las identifican y diferencian de otras bacterias, por lo que de esta manera se le puede llegar a identificar con su correcta siembra y observacin para anlisis posteriores o simplemente para la identificacin de una bacteria en algn medio u organismo.

REFERENCIAS BIBLIOGRAFICAS Tortora, G, 2014, Introduccin a la microbiologa, 9 Edicin, Editorial Mdicos Panamericanos Madrid-Espaa

Roger Y , John L, Mark L, Page R, 2014, Microbiologa, 2 Edicin, Editorial Revert Barcelona-Espaa