SELECCION INVITRO
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8/19/2019 SELECCION INVITRO
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UNIVERSIDA NACIONALPEDRO RUIZ GALLO
FACULTAD DE CIENCIAS BIOLÓGICAS
ESCUELA PROFESIONAL DE BIOLOGÍA
SELECCIÓN IN VITRO
Autor:Pisfil Colchado Kather ! Geor"et
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La selecci#! i! $itro es u!%rocedi&ie!to del culti$o dec'lulas te(idos e! la )ue estasestructuras so! so&etida u!adeter&i!ada %resi#! deselecci#! co! la fi!alidad deseleccio!ar l*!eas celulares )uee+hi,a! tolera!cia deresiste!cia al factor de %resi#!e(ercido- Esta %resi#! deselecci#! esta dada %or di$ersosfactores co&o te&%eratura.se)u*a. &etales %esados.her,icidas. to+i!as de&icroor"a!is&os %at#"e!os. etc -
• Es el mejor método debid
" # "id d de m % ri "io$es l res!lt do es• Es !$ método de %
som "lo$ l( "o$di"i'$ " mbi r el som "l'$ "" r)"ter dese do*+ $ B!l,-.//.01 r#-.//23&
• C! $do l " # "id d i$tr4
% ri "i'$ de los "!lti%os "r %itro es #ote$"i li5 d l di"i'$ de !$ 6e$sele""i'$ l medio de "!lti#osible obte$er %7som "lo$ les8 "o$ tolerese 6e$te de sele""i'$té"$i" se de$omi$ 7sele %itro8*Lesr ri 9::;3&
SELECCI/N IN VI0RO
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La selección in vitro puede aplicarse a poblaciones inicialmente homogéna poblaciones de células hibridas por fusión de protoplastos o a célulastransformadas por ingeniera genética.
El procedimiento de selección es semejante al utilizado para bacterias enexperimentos de microbiología, con la diferencia de que en este caso lasbacterias permanecen libres en tanto que en las células vegetales tiendena formar agregados celulares, lo que de alguna manera altera ladistribución de las células que se modifican, aun cuando los criterios deaplicación de la genética microbiana sean los mismos !urph",#$%&'.
(olo tal planta tolerante es capaz de crecer ,para obtener la planta con elcar)cter deseado no toma mucho tiempo *is+as et al& &'El logro de la técnica de selección in vitro esta en la disponibilidad de -
alta variación de la célulauna f)cil aplicación del método de selección in vitro /idoretno,& 0'el car)cter deseado para ser heredado 1usnita,& 2'
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Selecci#!%or
resiste!cia
selecci#! $isual-
selecci#!co!traria o
1cou!terselectio! 3.
(eleccióntotal .
2icro&a!i%ulac*o!
El objeti%o es mostr r < dis"!tir l s
#ote$"i lid des =!e o>re"e lsele""i'$ i$ %itro e$ elmejor mie$to 6e$éti"o de los"!lti%os < l obte$"i'$ de l s l4$e s"el!l res #rod!"tor s des!st $"i s met b'li" sse"!$d ri s&Colli$ ? Di@*.//:3"o$sider ro$ % ri s estr te6i s e$ el #ro"eso desele""i'$ i$ %itro(
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selecciónpor
resistencia
L s "él!l s so$ "!lti% d s dire"t me$te b jo de #resi'$ de sele""i'$- el =!e #!ede =!4mi"o*#&e&!$ to@i$ 3 o >4si"o* #& e
lt 3& $i" me$te l s "él!l s resiste$tes o t=!e "o$ti$ $ s! "re"imie$to ser)$ sele""io$"omo l4$e s "el!l res resiste$tes e$>ermed des*">& o$es-.//:3-m r" dores
6e$éti"os*">&Ne6r!ti! .//:3- 4bridos $!"leGleb ?S l!m!,o%-.//:3 4br"ito#l sm)ti"os*">& ed6
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sele""i'$
"o$tr ri
B s do e$ el e" o de =!e "iert s dro6m t r solo "él!l s e$ di%isi'$- e$ t $to =do$de l i$ ibi"i'$ es i$ ibid - #or ejem#lode>i"ie$"i $!tri"io$ l- #!ede$ sobre%i%ir&e$ m!t $tes !totr'>i"os < l6 $ otro m!t
"o$di"io$ l- do$de $o se "!e$t "o$ !$ #ro"edimie$to de sele""i'$ *">&P <1i$6-.//:3&
Sele""i'$tot l
A#li" do # r #r!eb s de "re"imie$to e$"!lti%o $o de"! do- < es !tili5 do e$ l ide !@otro>os*">&P
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!4567!894:;L854o del explante
5ultivo entratamientos
crecientes del factorestresante
=iempo de duracióndel cultivo
5ultivo desuspensiones
celulares
:laqueamiento desuspensiones
celulares
5ultivo deprotoplastos
5ultivosdiferenciados
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=7LE689548
8 metalespesados
8 herbicidas
8 salinidad
a estréshídrico
atemperaturas
extremas
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Resistencia
patógenos
Selecciónutilizandoparásitosfúngicos
obligatorios
Selecciónutilizando virus
Selecciónutilizando
parásitosfacultativos
tóxinas
Debido a su natraleza los virus
permiten la realización deestudios sobre resistencia in vitroun un amplio numero desistemas y tejidos,lo que a sidoexpresado en callos,protoplastosy suspensionescelulares!"ura#is i et al$,%&'()*tilizando ongos y bacteriasfacultivas en interacciones conel cultivo de callos$
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Selecci#! in vitro a Ustilago scitaminea S d so,re callos e&,rio"'!icca6a de a78car-
Leo$ rdo G r"4 - Lo!rdes G r"4 - No%isel +eit4 - Id lmisI$stit!to de Biote"$olo64 de l s Pl $t s& U$i%ersid d Ce$tr l 7
+ill s& C rreter C m j! $4 1m 2 H& S $t Cl r +ill Cl
Co$ el objeti%o de i$"reme$t r le>i"ie$"i de los métodos desele""i'$ in vitro l e$>ermed ddel " rb'$ de l " de 5 " r &
Obt!%iero$ " llos embrio6é$i"os de los6e$oti#os( ;: 2-
IBP J2 9K *s!s"e#tibles3 <B K ;9*"o$trol resiste$te3=!e >!ero$ e@#!estos di>ere$tes"o$"e$tr "io$es de "!lti%o >iltr do deUstilago scitaminea S
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Los res!lt dos i$di" ro$ =!e e@isti'!$ "orres#o$de$"i e$tre l res#!est
l "!lti%o >iltr do < los 4$di"es deresiste$"i l e$>ermed d e$ el" m#o.
obser%' =!e e$ l medid e$ =!e !me$t'l "o$"e$tr "i'$ del "!lti%o >iltr do e$ elmedio- !me$t' l >e"t "i'$ e$ el"re"imie$to de los " llos- e$ tod s l s"o$"e$tr "io$es l >e"t "i'$ >!e me$or
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SELECCI/N I! Vitro DE 9OR2AS 0OLERAN0ES DE PAPA Sola!u& tu,erosu&. L-;9IL0RADOS DE Ph to%hthora i!festa!s 2o!t-; de 3ar
Mer$)$de5- r4 &0 Esté%e5- A$ 0 oré- Oli%i 0 Go$5)le5- r4 E&0 )r=!eG&0 Orti5- Urs!l &
I$stit!to N "io$ l de Cie$"i s A6r4"ol s&L M b $ - C!b &*9::)
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SELECCI/N 5 REGENERACI/N i! $itro DE SO2ACLONES DE 0O2A0E
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2etodolo"*a %ara la selecci#! i! $itro de Mycos haerella !i"iens2orelt e! ,a!a!o-
L&G r"4 -L&Merrer -I&Berm de5-N&+eit4 - &ClI$stit!to de Biote"$olo64 de l s Pl $t s&UCL+-Cl r -C!b *)
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VENTAJAS
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a)5o implica t cnicas de manipulacióngen tica "olecular
b) 6ermite la manipulación simultanea de unnumero prácticamente ilimitado de c lulas
en un solo ciclo de selección$
c) +xisten protocolos de regeneración in vitefectivos para muc as especies de
importancia económica$
d) 7ay disponibilidad de muc as t cnicasmoleculares para una discriminación rápida y
e8caz de variantes gen ticos vs. 9ariantes+pigenticos
e) 5o requiere de insumos o infraestructuraespecializada
f) +s una t cnica bien sustentadacient:8camente$
VENTAJAS
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a ) ;eneración degermoplasma
resistente