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    UNIVERSIDA NACIONALPEDRO RUIZ GALLO

    FACULTAD DE CIENCIAS BIOLÓGICAS

    ESCUELA PROFESIONAL DE BIOLOGÍA

    SELECCIÓN IN VITRO

    Autor:Pisfil Colchado Kather ! Geor"et

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    La selecci#! i! $itro es u!%rocedi&ie!to del culti$o dec'lulas te(idos e! la )ue estasestructuras so! so&etida u!adeter&i!ada %resi#! deselecci#! co! la fi!alidad deseleccio!ar l*!eas celulares )uee+hi,a! tolera!cia deresiste!cia al factor de %resi#!e(ercido- Esta %resi#! deselecci#! esta dada %or di$ersosfactores co&o te&%eratura.se)u*a. &etales %esados.her,icidas. to+i!as de&icroor"a!is&os %at#"e!os. etc -

    • Es el mejor método debid

    " # "id d de m % ri "io$es l res!lt do es• Es !$ método de %

    som "lo$ l( "o$di"i'$ " mbi r el som "l'$ "" r)"ter dese do*+ $ B!l,-.//.01 r#-.//23&

    • C! $do l " # "id d i$tr4

    % ri "i'$ de los "!lti%os "r %itro es #ote$"i li5 d l di"i'$ de !$ 6e$sele""i'$ l medio de "!lti#osible obte$er %7som "lo$ les8 "o$ tolerese 6e$te de sele""i'$té"$i" se de$omi$ 7sele %itro8*Lesr ri 9::;3&

    SELECCI/N IN VI0RO

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    La selección in vitro puede aplicarse a poblaciones inicialmente homogéna poblaciones de células hibridas por fusión de protoplastos o a célulastransformadas por ingeniera genética.

    El procedimiento de selección es semejante al utilizado para bacterias enexperimentos de microbiología, con la diferencia de que en este caso lasbacterias permanecen libres en tanto que en las células vegetales tiendena formar agregados celulares, lo que de alguna manera altera ladistribución de las células que se modifican, aun cuando los criterios deaplicación de la genética microbiana sean los mismos !urph",#$%&'.

    (olo tal planta tolerante es capaz de crecer ,para obtener la planta con elcar)cter deseado no toma mucho tiempo *is+as et al& &'El logro de la técnica de selección in vitro esta en la disponibilidad de -

    alta variación de la célulauna f)cil aplicación del método de selección in vitro /idoretno,& 0'el car)cter deseado para ser heredado 1usnita,& 2'

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    Selecci#!%or

    resiste!cia

    selecci#! $isual-

    selecci#!co!traria o

    1cou!terselectio! 3.

    (eleccióntotal .

    2icro&a!i%ulac*o!

    El objeti%o es mostr r < dis"!tir l s

    #ote$"i lid des =!e o>re"e lsele""i'$ i$ %itro e$ elmejor mie$to 6e$éti"o de los"!lti%os < l obte$"i'$ de l s l4$e s"el!l res #rod!"tor s des!st $"i s met b'li" sse"!$d ri s&Colli$ ? Di@*.//:3"o$sider ro$ % ri s estr te6i s e$ el #ro"eso desele""i'$ i$ %itro(

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    selecciónpor

    resistencia

    L s "él!l s so$ "!lti% d s dire"t me$te b jo de #resi'$ de sele""i'$- el =!e #!ede =!4mi"o*#&e&!$ to@i$ 3 o >4si"o* #& e

    lt 3& $i" me$te l s "él!l s resiste$tes o t=!e "o$ti$ $ s! "re"imie$to ser)$ sele""io$"omo l4$e s "el!l res resiste$tes e$>ermed des*">& o$es-.//:3-m r" dores

    6e$éti"os*">&Ne6r!ti! .//:3- 4bridos $!"leGleb ?S l!m!,o%-.//:3 4br"ito#l sm)ti"os*">& ed6

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    sele""i'$

    "o$tr ri

    B s do e$ el e" o de =!e "iert s dro6m t r solo "él!l s e$ di%isi'$- e$ t $to =do$de l i$ ibi"i'$ es i$ ibid - #or ejem#lode>i"ie$"i $!tri"io$ l- #!ede$ sobre%i%ir&e$ m!t $tes !totr'>i"os < l6 $ otro m!t

    "o$di"io$ l- do$de $o se "!e$t "o$ !$ #ro"edimie$to de sele""i'$ *">&P <1i$6-.//:3&

    Sele""i'$tot l

    A#li" do # r #r!eb s de "re"imie$to e$"!lti%o $o de"! do- < es !tili5 do e$ l ide !@otro>os*">&P

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    !4567!894:;L854o del explante

    5ultivo entratamientos

    crecientes del factorestresante

    =iempo de duracióndel cultivo

    5ultivo desuspensiones

    celulares

    :laqueamiento desuspensiones

    celulares

    5ultivo deprotoplastos

    5ultivosdiferenciados

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    =7LE689548

    8 metalespesados

    8 herbicidas

    8 salinidad

    a estréshídrico

    atemperaturas

    extremas

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    Resistencia

    patógenos

    Selecciónutilizandoparásitosfúngicos

    obligatorios

    Selecciónutilizando virus

    Selecciónutilizando

    parásitosfacultativos

    tóxinas

    Debido a su natraleza los virus

    permiten la realización deestudios sobre resistencia in vitroun un amplio numero desistemas y tejidos,lo que a sidoexpresado en callos,protoplastosy suspensionescelulares!"ura#is i et al$,%&'()*tilizando ongos y bacteriasfacultivas en interacciones conel cultivo de callos$

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    Selecci#! in vitro a Ustilago scitaminea S d so,re callos e&,rio"'!icca6a de a78car-

    Leo$ rdo G r"4 - Lo!rdes G r"4 - No%isel +eit4 - Id lmisI$stit!to de Biote"$olo64 de l s Pl $t s& U$i%ersid d Ce$tr l 7

    +ill s& C rreter C m j! $4 1m 2 H& S $t Cl r +ill Cl

    Co$ el objeti%o de i$"reme$t r le>i"ie$"i de los métodos desele""i'$ in vitro l e$>ermed ddel " rb'$ de l " de 5 " r &

    Obt!%iero$ " llos embrio6é$i"os de los6e$oti#os( ;: 2-

    IBP J2 9K *s!s"e#tibles3 <B K ;9*"o$trol resiste$te3=!e >!ero$ e@#!estos di>ere$tes"o$"e$tr "io$es de "!lti%o >iltr do deUstilago scitaminea S

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    Los res!lt dos i$di" ro$ =!e e@isti'!$ "orres#o$de$"i e$tre l res#!est

    l "!lti%o >iltr do < los 4$di"es deresiste$"i l e$>ermed d e$ el" m#o.

    obser%' =!e e$ l medid e$ =!e !me$t'l "o$"e$tr "i'$ del "!lti%o >iltr do e$ elmedio- !me$t' l >e"t "i'$ e$ el"re"imie$to de los " llos- e$ tod s l s"o$"e$tr "io$es l >e"t "i'$ >!e me$or

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    SELECCI/N I! Vitro DE 9OR2AS 0OLERAN0ES DE PAPA Sola!u& tu,erosu&. L-;9IL0RADOS DE Ph to%hthora i!festa!s 2o!t-; de 3ar

    Mer$)$de5- r4 &0 Esté%e5- A$ 0 oré- Oli%i 0 Go$5)le5- r4 E&0 )r=!eG&0 Orti5- Urs!l &

    I$stit!to N "io$ l de Cie$"i s A6r4"ol s&L M b $ - C!b &*9::)

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    SELECCI/N 5 REGENERACI/N i! $itro DE SO2ACLONES DE 0O2A0E

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    2etodolo"*a %ara la selecci#! i! $itro de Mycos haerella !i"iens2orelt e! ,a!a!o-

    L&G r"4 -L&Merrer -I&Berm de5-N&+eit4 - &ClI$stit!to de Biote"$olo64 de l s Pl $t s&UCL+-Cl r -C!b *)

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    VENTAJAS

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    a)5o implica t cnicas de manipulacióngen tica "olecular

    b) 6ermite la manipulación simultanea de unnumero prácticamente ilimitado de c lulas

    en un solo ciclo de selección$

    c) +xisten protocolos de regeneración in vitefectivos para muc as especies de

    importancia económica$

    d) 7ay disponibilidad de muc as t cnicasmoleculares para una discriminación rápida y

    e8caz de variantes gen ticos vs. 9ariantes+pigenticos

    e) 5o requiere de insumos o infraestructuraespecializada

    f) +s una t cnica bien sustentadacient:8camente$

    VENTAJAS

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    a ) ;eneración degermoplasma

    resistente