K’’RISPOSTA IMMUNITARIA UMORALE NEL FLUIDO CREVICOLARE: IMPLICAZIONI SISTEMICHE E

LOCALI’’

UniCT – CLMOPD Corso di Patologia Odontostomatologica 2 aa 17/18

Docente – Prof. Giovanni Barbagallo

Relazione descrittiva di gruppo

Jeffrey L. Ebersole, Periodontology 2000, Vol. 31, 2003, 135–166

PARTE A

Concetto Giurato

Giuseppe Leanza

Francesco Calanna

Pietro La Paglia

Rosario Sapienza

• La cavità orale presenta un microbiota composto sia da batteri in simbiosi con l’ospiteche patogeni (come S. Mutans e A. Actinomycetemcomitans) e per mantenerel’omeostasi tre sistemi immunitari integrati controllano la colonizzazione: il salivare, ilsistemico (dal siero) e quello del tessuto gengivale.

• Il terzo sistema, insieme al fluido crevicolare (GCF – gingival crevice fluid), è il maggiorecontribuente all’ambiente del solco.

ASPETTI GENERALI DELLE IMMUNOGLOBULINE NEL FLUIDO CREVICOLARE

• Il GCF trasuda dal solco gengivale minimizzando l’accumulo batterico e contienecomponenti immunitarie che contribuiscono a molti meccanismi antibatterici.

• Il GCF contiene macromolecole (dal siero e dagli interstizi gengivali) come le IgGe IgA, inibitori delle proteasi, β2-microglobuline, fibrinogeno, albumina elipoproteine la cui concentrazione è correlata alle dimensioni (suggerendo unfiltraggio passivo dei tessuti gengivali sani) e ai valori sierici.

• Con l’infiammazione diventa un essudato con più molecole sieriche e di originelocale come anche cellule di origine vascolare (come i leucociti).

• La maggior parte dei leucociti sono neutrofili(95-97%), indipendentemente dallo stadio dellaparodontite.

• I mononucleati aumentano conl’infiammazione: linfociti T e B (1-2%) e monociti(2-3%).

• Infine si rilevano prodotti batterici modificanti lerisposte dell’ospite, molecole regolatoriedell’ospite alteranti le percentuali didistribuzione cellulare e molecole esclusive deitessuti gengivali.

• Il GCF deriva daicapillari e dallecelluleinfiammatorie.

• Le IgG ed IgAprovengono dalsiero e dalleplasmacellule neitessuti gengivali.

• Nelle parodontiti c’è una produzionelocale estesa di Ig con specificitàanti-genica per batteri locali e lamaggior parte deriva dallaattivazione policlonale delle celluleB (mentre Ig e anticorpi sono pococon-centrati nel GCF di siti sani).

• I mediatori infiammatori/ immunitari ricercati nei siti con gengivite sia di pazientiparodontalmente sani che malati, sono in maggiore concentrazione nei siti congengivite, meno nei siti sani di persone sane.

• Il GCF di siti con gengivite di adulti con parodontite ha livelli alti di IgG, mapiù bassi di IgA che invece sono maggiori nel GCF di siti con gengiviterispetto a quello di siti con parodontite (avrebbero localmente una funzioneprotettiva contro i processi distruttivi).

• Il profilo infiammatorio nel parodonto, clinicamente identificabile comegengivite, potrebbe essere regolato anche dalle caratteristiche geno-tipiche del paziente.

• L’infiltrato cellulare infiammatorio nei tessuti gengivali e nel GCF è predominatodai leucociti PMC; le cellule B e le plasmacellule sono buona parte dell’infiltratomononucleato nelle parodontiti aggressive (es. parodontiti ad esordio precoce).

• Nei tessuti di granulazione di questi pazienti si ha un minore numero di cellule T.

• Le plasmacellule producono principalmente IgG ed in quantità minore IgA.

• Questi contribuirebbero localmentealla regolazione o disregolazioneimmunitaria

• Principalmente vi sonoplasmacellule produttrici di IgGcon poche IgA; nellaparodontite aggressiva non visono plasmacellule produttricidi IgM. Oltre alla rispostaimmunitaria acquisita, cioèanticorpi e complemento, sipossono misurare nel GCFmediatori e citochineinfiammatorie/immunitarie tracui prostaglandine, leucotrieni,IL-1, IL-6, IL-8, TNF-α.

• L’infiltrato infiammatorio di pazienti con parodontite cronica presenta le seguenticellule mononucleate: plasmacellule (5-15%), linfociti (30-35%), e macrofagi (40-55%).

EVIDENZE PER LA PRODUZIONE LOCALE DI IMMUNOGLOBULINE IN GFC

• La figura mostra la distribuzione degli

anticorpi nel GFC in risposta all’A.

Actinomycetemcomitans nei pazienti

affetti da parodontite aggressiva (AP) e

cronica (CP).

• Ogni linea rappresenta un paziente

raffigurando la percentuale di campioni

di fluido con IgG alti se paragonato con

del siero prelevato dalla stessa

persona.

• I dati descrivono un’alta variabilità di

frequenza di campioni nel GCF con

evidente produzione di anticorpi locali,

indipendentemente dalla classifi-

cazione clinica del paziente.

• Studi vari hanno descritto ladistribuzione delle sottoclassi deiplasmociti IgG evidenziando unaumento di cellule IgG4 neitessuti malati (nei siti attivi sonocirca 25 volte più alte rispetto aquelle nel siero).

• Studi più recenti hannoidentificato le proporzioni deisottotipi nei tessuti gengivali sanie notato cheIgG1>IgG2>IgG3>IgG4 (IgG1 eIgG4 sono le più prodotte nei sitimalati)e IgA1, con molte celluleIgA2 osservate in lesioniavanzate.

• La letteratura sembra per oragarantire ottimi risultati scientificia supporto della sintesi locale diIgG nel parodonto.

• Recentemente un ampionumero di linee cellulari di tipo Bin tessuti gengivali sono statiosservati presentare un fenotipoche può fortemente stimolare T-cell autoreattive, aventi lacapacità di produrre anticorpipolireattivi e sembrano esserenumerose nei tessuti gengivaliinfiammati.

• Studi trasversali hanno suggeritoche quei campioni di GCF conmolti anticorpi dianofrequentemente asilo a batteriomologhi.

Questa immagine descrive larelazione tra la produzione di IgG nelGCF in seguito all’infezione daactinomicete e la presenza dellostesso nella placca sottogengivale.

I risultati indicano che ilmicrorganismo è presente nellamaggior parte dei siti con anticorpielevati, anche se può essereriscontrato in siti in cui non vi èun’apparente risposta locale.

• Tuttavia, abbiamo ancora poche informazionisull’importanza funzionale di questi anticorpi delGCF, piuttosto in contrasto rispetto ad unamoltitudine di studi “in vitro e in vivo” chedescrivono la capacità degli anticorpi del siero diinterferire con diverse proprietà virulente deipatogeni orali.

• Mallyson esaminò specifici antigeni e attivatoriimmunologici non specifici in un’infiammazionecronica, così come l’effetto dell’infiammazionestessa nella risposta locale gengivale.

• Notò che l’accumulo di plasmacellule nei siti infiammati è accentuatadall’infiammazione cronica, da attivatori di origine microbica e da specificiantigeni.

• L’attivazione delle cellule B policlonali probabilmente favorisce la formazione dianticorpi specifici per antigeni non specifici del cavo orale nella mucosagengivale infiammata.

• Recenti evidenze descrivono la presenza di cellule dendritiche che potrebberocampionare la presenza dell’antigene attraverso i tessuti delle mucose, migrandoai linfonodi drenanti locali.

Contributo sistemico alle immunoglobuline nel GCF

• Le cellule dendritiche fungono così da fonte di presentazione dell'antigene alunga durata correlata alle interazioni ospite-parassita nell’ambiente locale (adesempio quello gengivale).

• Vi è una correlazione positiva tra i livelli di IgG3, IgG4 e IgG2 in campioni di siero enel GCF che evidenziano più anticorpi aumentati per ciascuna di questesottoclassi.

• Gli anticorpi sistemici possono essere una manifestazione delle risposte anticorpalilocali nei tessuti gengivali e che una porzione di anticorpi sierici può derivaredalle risposte gengivali locali all'infezione.

• Al contrario, le IgG1 hanno mostrato una correlazione molto bassa e questopotrebbe suggerire la presenza di diversi meccanismi di elaborazione epresentazione dell'antigene per la sintesi di questa sottoclasse tra i tessuti locali esistemici.

• In particolare, una parte deicampioni del GCF reagivaad antigeni diversi da quellirilevati dalle specificità deglianticorpi sierici. Questascoperta ha fornito prove perdimostrare:

1. Una stimolazione locale diplasmacellule che potreb-be essere sottoposta aimmunoregolazione locale

2. Una presentazione delloantigene limitata allecomponenti immuno-logiche nei tessutigengivali.

• La specificità antigenica degli anticorpi nel GCF è stata generalmente stimatautilizzando microrganismi interi o preparazioni complesse di antigene sonicato.

• È stato utilizzato il Western immunoblotting (immunofissazione) per definire in modopiù critico la specificità antigenica degli anticorpi presenti nel GCF ai componentidella membrana esterna di A. Actino-micetemcomitans.

• Molti dei campioni di GCF di pazienti con parodontite mostravano un pattern direattività dell'antigene identico a quelli osservati con il siero omologo.

• Vi è la possibilità che le specificità deglianticorpi sierici possano riflettere l'elaborazionedell'antigene tissutale gengivale, risultando inuna risposta sia locale che sistemica.

• Prove da vari studi hanno indicato lamigrazione di cellule immunitarie dal siero allalesione infiammatoria nel parodonto, ma sonodisponibili poche informazioni su unaeventuale migrazione delle cellule immunitariedalla gengiva al circolo sistemico.

• Per capire meglio eutilizzare le capacitàfunzionali del risposteimmunitarie locali esistemiche, avremobisogno di chiarirequeste caratteristichedelle interazioni ospite-parassita.