Quantitative pcr monotoring_bockelmann_2009

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  1. 1. Estancia de Postdoctorado: Dra. Marianela Paredes Mendoza Laboratorio de Inmunologa Molecular Microbiana Facultad de Medicina Dra. Yolanda Lpez Vidal Dra. Antonia I. Castillo Rodal Dr. Gonzalo Castillo Rojas
  2. 2. Quantitative PCR Monitoring of Antibiotic Resistance Genes and Bacterial Pathogens in Three European Artificial Groundwater Recharge Systems Uta Bckelmann, Hans-Henno Dorries,Neus Ayuso- Gabella,Miquel Salgot de Marcay,Valter Tandoi, Caterina Levantesi,Costantino Masciopinto, Emmanuel Van Houtte, Ulrich Szewzyk,Thomas Wintgens, and Elisabeth Grohmann APPLIED AND ENVIRONMENTAL MICROBIOLOGY, 2009, 75(1):154163
  3. 3. Justificacin La recarga de acuferos presenta ventajas para la gestin integrada del ciclo del agua. Sin embargo uno de los riesgos que se originan por la recarga de acuferos que ms preocupa es la posible contaminacin con bacterias patgenas resistentes a antibiticos. Los antibiticos se emiten a diario en el medio ambiente, se pueden detectar fcilmente en los recursos hdricos lo que conduce a la creciente preocupacin con respecto a su contribucin en la abundancia y persistencia de la resistencia a los antibiticos en poblaciones de
  4. 4. Justificacin Existe poca informacin crtica con respecto a la transferencia de genes de resistencia dentro y entre las poblaciones de bacterias en el ambiente.
  5. 5. MEDITERRANEAN WASTEWATER REUSE WORKING GROUP (MED WWR WG) http://www.emwis.net/topics/wastewater
  6. 6. Membranas Osmosis reversa
  7. 7. Los trminos empleados para describir los niveles de respuesta a los antibiticos son tolerancia, susceptibilidad y resistencia. La tolerancia, es la habilidad de una poblacin de no ser daada en las dosis normalmente utilizadas para controlar otras especies. La susceptibilidad,
  8. 8. Furuya EY and Lowy F (2006) Antimicrobial-resistant bacteria in the community setting Nat Rev Microbiol. 4: 3645 doi:10.1038/nrmicro1325 Transferencia horizontal de genes
  9. 9. OBJETIVOS Detectar y cuantificar la presencia de seis diferentes genes de resistencia a los antibiticos Detectar y cuantificar la presencia de tres patgenos intracelulares humanos Determinar indicadores de contaminacin fecal
  10. 10. Porqu? Los genes de resistencia fueron seleccionados debido a su abundancia y persistencia ampC (resistencia a la ampicilina) mecA (resistencia a la meticilina) blaSHV-5 (resistencia extendida -lactmicos, resistencia a las penicilinas y cefalosporinas) ermB (eritromicina) tetO (resistencia a la tetraciclina) vanA (resistencia a la vancomicina).
  11. 11. Porqu? Yersinia enterocolitica, Helicobacter pylori, y Mycobacterium avium subsp. paratuberculosis Sobreviven por largo tiempo en los sistemas acuticos y causan enfermedades relacionadas con el uso y consumo de agua
  12. 12. Metodologa Torreele, Blgica, Sabadell, Espaa y Nardo, Italia, Concentracin de la muestra Ruptura celular y extraccin de ADN total qPCR en tiempo real (efecto Peltier, sondas y fluorocromos ).
  13. 13. RESULTADOS En el agua potable y de riego, ninguno de los patgenos se detectaron. tetO ermB y se encontraron con frecuencia en el agua tratada de Sabadell nardo. mecA se detectado una sola vez en el agua tratada de Sabadell.