Propiedades químicas de aminoácidos, péptidos y proteínas.
-
Upload
diego-sosa-espinoza -
Category
Documents
-
view
264 -
download
0
Transcript of Propiedades químicas de aminoácidos, péptidos y proteínas.
![Page 1: Propiedades químicas de aminoácidos, péptidos y proteínas.](https://reader033.fdocuments.net/reader033/viewer/2022061608/5665b48e1a28abb57c922922/html5/thumbnails/1.jpg)
Propiedades químicas de aminoácidos, péptidos y proteínas
![Page 2: Propiedades químicas de aminoácidos, péptidos y proteínas.](https://reader033.fdocuments.net/reader033/viewer/2022061608/5665b48e1a28abb57c922922/html5/thumbnails/2.jpg)
R1R2
Enlace peptídico
![Page 3: Propiedades químicas de aminoácidos, péptidos y proteínas.](https://reader033.fdocuments.net/reader033/viewer/2022061608/5665b48e1a28abb57c922922/html5/thumbnails/3.jpg)
Secuencia: AlaGluGlyLys o AEGK
![Page 4: Propiedades químicas de aminoácidos, péptidos y proteínas.](https://reader033.fdocuments.net/reader033/viewer/2022061608/5665b48e1a28abb57c922922/html5/thumbnails/4.jpg)
NH2
COO-
NH2NH2
COO-
COO-
![Page 5: Propiedades químicas de aminoácidos, péptidos y proteínas.](https://reader033.fdocuments.net/reader033/viewer/2022061608/5665b48e1a28abb57c922922/html5/thumbnails/5.jpg)
• Reacciones del enlace peptídico
• Reacciones del grupo amino terminal
• Reacciones del grupo carboxilo terminal
Análisis químico
Composición? Detección? Secuencia?
![Page 6: Propiedades químicas de aminoácidos, péptidos y proteínas.](https://reader033.fdocuments.net/reader033/viewer/2022061608/5665b48e1a28abb57c922922/html5/thumbnails/6.jpg)
Reacciones del enlace peptídico y de detección proteica
• Hidrólisis ácida (ClH 6M a 100 C, 24hs).
• Reacción de Biuret ( SO4Cu/tartrato alcalino 540nm). Baja sensibilidad.
• Reacción de Lowry et al. (Reactivo de Folin-Ciocalteau = mezcla de óxidos de tungsteno y molibdeno) 720-750 nm
• Coomassie Brillant Blue
• Plata
![Page 7: Propiedades químicas de aminoácidos, péptidos y proteínas.](https://reader033.fdocuments.net/reader033/viewer/2022061608/5665b48e1a28abb57c922922/html5/thumbnails/7.jpg)
Reacciones del grupo amino (terminal)
• Ninhidrina (570 nm) Pro a 440nm
• Fluorescamina (producto fluorescente). Alta sensibilidad
• 1-Fluoro-2,4 dinitrobenceno(FDNB, reactivo de Sanger)
• Cloruro de dansilo
• o-ftalaldehído (en sn con mercaptoetanol, producto fluorescente). Alta sensibilidad
![Page 8: Propiedades químicas de aminoácidos, péptidos y proteínas.](https://reader033.fdocuments.net/reader033/viewer/2022061608/5665b48e1a28abb57c922922/html5/thumbnails/8.jpg)
Reacciones del grupo Carboxilo
• Hidrazina (H2NNH2)
• Carboxipeptidasa
![Page 9: Propiedades químicas de aminoácidos, péptidos y proteínas.](https://reader033.fdocuments.net/reader033/viewer/2022061608/5665b48e1a28abb57c922922/html5/thumbnails/9.jpg)
Secuenciación
1. Purificación de la proteína o péptido
2. Ruptura de los puentes disulfuro
3. Determinación de los extremos amino-terminales y carboxilo-terminales
4. Corte específico de la secuencia principal en fragmentos menores, al menos en dos formas distintas
5. Purificación de cada segmento y secuenciación
6. Determinación de la secuencia total
![Page 10: Propiedades químicas de aminoácidos, péptidos y proteínas.](https://reader033.fdocuments.net/reader033/viewer/2022061608/5665b48e1a28abb57c922922/html5/thumbnails/10.jpg)
2 Ruptura de –S-S-
![Page 11: Propiedades químicas de aminoácidos, péptidos y proteínas.](https://reader033.fdocuments.net/reader033/viewer/2022061608/5665b48e1a28abb57c922922/html5/thumbnails/11.jpg)
DTNB ( ácido ditio-bis-nitrobenzoico)
nitrotiobenzoato
![Page 12: Propiedades químicas de aminoácidos, péptidos y proteínas.](https://reader033.fdocuments.net/reader033/viewer/2022061608/5665b48e1a28abb57c922922/html5/thumbnails/12.jpg)
3 Determinación de extremos
![Page 13: Propiedades químicas de aminoácidos, péptidos y proteínas.](https://reader033.fdocuments.net/reader033/viewer/2022061608/5665b48e1a28abb57c922922/html5/thumbnails/13.jpg)
Producto púrpura
![Page 14: Propiedades químicas de aminoácidos, péptidos y proteínas.](https://reader033.fdocuments.net/reader033/viewer/2022061608/5665b48e1a28abb57c922922/html5/thumbnails/14.jpg)
![Page 15: Propiedades químicas de aminoácidos, péptidos y proteínas.](https://reader033.fdocuments.net/reader033/viewer/2022061608/5665b48e1a28abb57c922922/html5/thumbnails/15.jpg)
![Page 16: Propiedades químicas de aminoácidos, péptidos y proteínas.](https://reader033.fdocuments.net/reader033/viewer/2022061608/5665b48e1a28abb57c922922/html5/thumbnails/16.jpg)
4 Cortes y producción de fragmentos
Métodos enzimáticos
![Page 17: Propiedades químicas de aminoácidos, péptidos y proteínas.](https://reader033.fdocuments.net/reader033/viewer/2022061608/5665b48e1a28abb57c922922/html5/thumbnails/17.jpg)
![Page 18: Propiedades químicas de aminoácidos, péptidos y proteínas.](https://reader033.fdocuments.net/reader033/viewer/2022061608/5665b48e1a28abb57c922922/html5/thumbnails/18.jpg)
4 Cortes y producción de fragmentos
Métodos químicos
![Page 19: Propiedades químicas de aminoácidos, péptidos y proteínas.](https://reader033.fdocuments.net/reader033/viewer/2022061608/5665b48e1a28abb57c922922/html5/thumbnails/19.jpg)
5 Secuenciación de fragmentos
![Page 20: Propiedades químicas de aminoácidos, péptidos y proteínas.](https://reader033.fdocuments.net/reader033/viewer/2022061608/5665b48e1a28abb57c922922/html5/thumbnails/20.jpg)