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2017
PremiumResearch Tools
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CROATIAVita Lab Nova d.o.o.T: +385 1 466 75 13F: +385 1 466 75 [email protected]
CZECH REPUBLICBiogen PRAHA s.r.o.T: +420 241 40 16 93F: +420 241 40 16 [email protected]
DENMARKLabLife Nordic ABT: +46 70 754 40 [email protected]
HUNGARYBIOLAB Inc. T: +36 122 196 14 F: +36 136 420 06 [email protected]
INDIANextGen Life Sciences PVT. LTD.T: +91 11 43 09 79 [email protected] INDONESIAPT Has Putra IndonesiaT: +62 21 319 038 53F: +62 21 319 038 [email protected]
ITALYBiofield Innovation SRLT: +39 049 76 16 98F: +39 049 87 09 51 [email protected]
JAPANGloboLab by 中村科学器械工業株式会社
Phone: +81 3 36 61 46 62Fax: +81 3 36 61 03 [email protected]
POLANDLKB BiotechT: +48 22 576 18 93F: +48 22 576 18 [email protected]
ROMANIAS.C. Bio Zyme S. R. L.T: +40 264 52 32 [email protected]
SLOVENIAVita Lab Nova d.o.o.T: +385 1 466 75 13F: +385 1 466 75 [email protected]
SPAINLabclinics, SAT: +34 934 464 700F: +34 933 481 [email protected]
SWEDENLabLife Nordic ABT: +46 70 754 40 [email protected]
TAIWANProtech Technology Enterprise Co., Ltd.T: +88 6 226 55 76 77F: +88 6 226 55 76 [email protected]
TURKEYGenus Biotechnology R&DT: +90 212 414 2000 33 [email protected]
UNITED KINGDOMClent Life ScienceT: +44 1384 44 45 85F: +44 1384 46 79 [email protected]
GERMANY highQu GmbHNelkenstrasse 576703 KraichtalT: +49 7250 33 13 401F: +49 7250 33 11 [email protected]@[email protected]@highQu.comwww.highQu.com
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PRODUCT USE LIMITATIONS:製品の使用制限
本カタログに記載されているすべての製品は、試験研究用途のために開発・設計されています。
医療・診断目的にはご使用になれません。
製品の販売者および購入者は、試験研究用途の内部での製品使用以外の権利:再販、改変、製造の権利を有しません。それらの目的の
ために製品を使用する場合は、製造者の許可を得る必要があります。
LIMITATION OF LIABILITY:責任の-制限
準拠する法律の範囲において、当社はいかなる場合も、直接的、間接的、偶発的、予見的、懲罰的、結果的、あるいは特別な(利用の
損失・利益の損失、財産の損失を含むがこれに限定されない)損害において、保証、契約不履行(無視を含む)、あるいは規定された
仕様を実行するための製品の不良若しくは販売に伴う深刻な負債に基づくか否かを問わず、責任を負うものではありません。
製品を購入することにより購入者は、当社の明示された仕様に適合していないと認められる製品があった場合の唯一の義務と改善は、
無償の製品交換に限定されることを承知若しくは同意したものと見なされます。購入者および使用者は、販売もしくは供給された製品
の使用の結果生じたいかなる損害に関しても当社を免責しなければなりません。
RELIABILITY OF INFORMATION:情報の信頼性
ここに示された情報は、当社の知識と信念に基づいて正確かつ信頼に値するものですが、必ずしもそう保証されているわけではありま
せん。また、すべての行為あるいは製品は、いかなる法律及び規制のへの違反を推奨するものではありません。必要と思われる安全策
を講じ、すべての手順、素材、製品の適合性の判断を行うことは、購入者及び使用者の責任に帰するものです。
DISCLAIMER
上記のインフォメーションは当社の契約条件の一部を抜粋したものの日本語訳です。
正式な拘束力のある条件は当社のドイツ語で記載された契約条件のみで、当社のホームページ(www.highQu.com)に記載されてい
ます。ご要望がある場合はご連絡下さい。
highQu は、最高品質のリサーチツールを提供することでライフサイエンスの発展をアシストします。
わたしたちのライフサイエンスへの想いが、最高の品質の製品をお届けすることを可能にしました。
科学者が常に捜し求めているもの ~優れた機能と簡潔さの融合~をお届けすることが、私たちのサイエンスに対する使命です。
わたしたちは、 サイエンスをかたちにするすべての研究者の皆様を、常にサポートします。
highQu は、ヒトが作り出したすべてのものよりも、人間性そのものを大切にする人たちに、敬意を表します。 わたしたちは、より良い製品を通じて、すべての人たちにより良い暮らしをお届けすることを約束します。
これが、わたしたちのライフサイエンスです:わたしたちは、人間です。わたしたちは、いのち(life)に仕えます。
Professionally simple:プロフェッショナリー・シンプル
• わたしたちは常に最高の製品をご提供します
• わたしたちは約束を守ります
• わたしたちはあなたの成功に貢献します
highQu は、最適化された単純で素早い手順とプロトコルを持ち、なおかつ誰が使用しても最良のパフォーマンスを発揮できるような"プロフェッシ
ョナルにシンプル" なライフサイエンス向け研究ツールを供給することを目的としています。
2013年に設立して以来、highQuは世界中で多くの研究室に用いられてきました。エンドポイントPCR、リアルタイムPCR、RT-PCR、電気泳動そし
てそのほかの分子生物学アプリケーションにおいて、無償のサンプルを含んだ最良のカスタマーサービスを提供し続けることで、highQuは研究者の
心を魅了し続けています。
数多くの選択肢の中から今まさにこのカタログを手に取って、highQuを選択しそして信頼して下さる皆様のために
Your highQu team
APPLICATION NEW PRODUCTS FEATURES PAGES
Probe-base qPCRORA™ SEE qPCR Probe Mixes
(No ROX, ROX L and ROX H)
信頼の ORA™ ブランドの性能はそのままにより高い利便性を追求:ORA™ SEE
qPCR Probe Mixes は、反応や蛍光検出を阻害しない青色ダイが添加されていま
す。調整時の視認性を高め、エラーを防止します。
10, 12, 14
Dye-base qPCRORA™ SEE qPCR Green Mixes
(ROX L and ROX H)
信頼の ORA™ ブランドの性能はそのままにより高い利便性を追求: ORA™ SEE qPCR
Green Mixes は、反応や蛍光検出を阻害しない青色ダイが添加されています。調整
時の視認性を高め、エラーを防止します。
16, 18
Hot Start PCR ALLin™ HS Red Taq Mastermix
高感度で高収量なPCRにダイレクトゲルローディング機能をプラス:ローデ
ィングダイプレミックスで、PCR後に直接ゲルにアプライが可能。好評の
SampleIN™Direct PCR Kit に同梱のマスターミックスが別売で利用可能になりまし
た。
36
Reverse
transcription
HighScriber™ Reverse
Transcriptase Mix, 20X
便利で安全なcDNA 合成: 熱安定性の高い逆転写酵素とリボヌクレアーゼ阻害剤をプ
レミックス。利便性を高め、安定したcDNA合成を可能にしました。46
DNA/RNA
Electrophoresis
StainIN™ RED Nucleic Acid
Stain
従来のEtBr染色法と比較して、感度・安全性が飛躍的に向上しました。経済的にも
優れ、これまでの2倍の感度で核酸のUV検出が可能です。62
DNA/RNA
Electrophoresis
StainIN™ GREEN Nucleic Acid
Stain
従来のEtBr染色法と比較して、感度・安全性が飛躍的に向上しました。経済的にも
優れ、これまでの4倍の感度で核酸のUV・ブルーライト検出が可能です。63
about highQu
What‘s new in 2017? More colors, more safety!
Info Tel: +497250 33 13 401 [email protected]
Content
What‘s new in 2017? More colors, more safety! ..................................................................................................................................................... 1 Content ........................................................................................................................................................................................................................ 2 Product Index ............................................................................................................................................................................................................. 4Trademarks of highQu .............................................................................................................................................................................................. 5
qPCR & HRM Master Mixes ........................................................................................................................................................ 7qPCR Selection: Instrument Compatibility of Probe and Dye-based ORA™ qPCR Mastermixes ..................................................................... 8ORA™ qPCR Probe Mix, 2X ........................................................................................................................................................................................ 9ORA™ SEE qPCR Probe Mix, 2X ............................................................................................................................................................................... 10ORA™ qPCR Probe ROX L Mix, 2X ........................................................................................................................................................................... 11ORA™ SEE qPCR Probe ROX L Mix, 2X ................................................................................................................................................................... 12 ORA™ qPCR Probe ROX H Mix, 2X .......................................................................................................................................................................... 13ORA™ SEE qPCR Probe ROX H Mix, 2X .................................................................................................................................................................. 14ORA™ qPCR Green ROX L Mix, 2X .......................................................................................................................................................................... 15 ORA™ SEE qPCR Green ROX L Mix, 2X ................................................................................................................................................................... 16ORA™ qPCR Green ROX H Mix, 2X ......................................................................................................................................................................... 17 ORA™ SEE qPCR Green ROX H Mix, 2X .................................................................................................................................................................. 18 ORA™ qPCR HRM Mix, 2X ........................................................................................................................................................................................ 19
One Step RT qPCR Kits ............................................................................................................................................................. 21One Step RT qPCR Selection: Instrument Compatibility of Probe and Dye-based 1Step RT qPCR Kits ........................................................ 221Step RT qPCR Probe Kit ......................................................................................................................................................................................... 231Step RT qPCR Probe ROX L Kit .............................................................................................................................................................................. 241Step RT qPCR Probe ROX H Kit ............................................................................................................................................................................. 251Step RT qPCR Green ROX L Kit ............................................................................................................................................................................. 261Step RT qPCR Green ROX H Kit ............................................................................................................................................................................. 27
End-point PCR Enzymes & Master Mixes ............................................................................................................................... 29End-point PCR Selection: Standard, Hot-start, Long, High fidelity, Direct PCR ................................................................................................. 30ALLin™ Taq DNA Polymerase ................................................................................................................................................................................. 31ALLin™ Red Taq Mastermix, 2X .............................................................................................................................................................................. 32ALLin™ Taq Mastermix, 2X ...................................................................................................................................................................................... 33Taq DNA Polymerase ............................................................................................................................................................................................... 34ALLin™ Hot Start Taq Polymerase .......................................................................................................................................................................... 35ALLin™ HS Red Taq Mastermix, 2X ........................................................................................................................................................................ 36ALLin™ Hot Start Taq Mastermix, 2X ..................................................................................................................................................................... 37ALLin™ RPH Polymerase ......................................................................................................................................................................................... 38ALLin™ RPH Mastermix, 2X ..................................................................................................................................................................................... 39ALLin™ HiFi DNA Polymerase ................................................................................................................................................................................. 40SampleIN™ Direct PCR Kit ....................................................................................................................................................................................... 41
RT PCR & Reverse Transcription Enzymes & Kits ................................................................................................................. 43RT PCR & Reverse Transcription Selection ............................................................................................................................................................ 441Step RT PCR Kit ....................................................................................................................................................................................................... 45HighScriber™ Reverse Transcriptase Mix, 20X ...................................................................................................................................................... 46qScriber™ cDNA Synthesis Kit ................................................................................................................................................................................ 47
3
order@ highQu.com Order Tel: +497250 33 13 401
Content
PCR-related Reagents & Kits ................................................................................................................................................... 49PCR-related Reagents Overview ............................................................................................................................................................................. 50UDGin™ PCR Cleaner Mix, 20X ................................................................................................................................................................................ 51PCRbeam™ Fast PCR Detection Kit ................................................................................................................................................................... 52dNTP Sets & Mixes ................................................................................................................................................................................................... 53PCR Water ................................................................................................................................................................................................................. 54
Cloning Kits ............................................................................................................................................................................... 55Cloning Kits Overview .............................................................................................................................................................................................. 56Rally™ Rapid Ligation Kit ......................................................................................................................................................................................... 57HighEnd™ Repair Kit ................................................................................................................................................................................................ 58
Ladders & Stains for DNA & Protein Electrophoresis .......................................................................................................... 59Selection of DNA Electrophoresis Ladders & Stains ............................................................................................................................................. 60DNA Electrophoresis Ladders ................................................................................................................................................................................. 61StainIN™ RED Nucleic Acid Stain ........................................................................................................................................................................... 62StainIN™ GREEN Nucleic Acid Stain ...................................................................................................................................................................... 63Selection of Protein Electrophoresis Ladders ........................................................................................................................................................ 64Protein Electrophoresis Ladders ............................................................................................................................................................................ 65
Info Tel: +497250 33 13 401 [email protected]
Product Index
CAT.# NEW PRODUCT CONCENTRATION SIZE SIZE UNIT PAGE
QPP0101
QPP0105
ORA™ qPCR Probe Mix
ORA™ qPCR Probe Mix
2X
2X
200
1000
r of 20 µl
r of 20 µl9
QPP0401
QPP0405NEW
ORA™ SEE qPCR Probe Mix
ORA™ SEE qPCR Probe Mix
2X
2X
200
1000
r of 20 µl
r of 20 µl10
QPP0201
QPP0205
ORA™ qPCR Probe ROX L Mix
ORA™ qPCR Probe ROX L Mix
2X
2X
200
1000
r of 20 µl
r of 20 µl11
QPP0501
QPP0505NEW
ORA™ SEE qPCR Probe ROX L Mix
ORA™ SEE qPCR Probe ROX L Mix
2X
2X
200
1000
r of 20 µl
r of 20 µl12
QPP0301
QPP0305
ORA™ qPCR Probe ROX H Mix
ORA™ qPCR Probe ROX H Mix
2X
2X
200
1000
r of 20 µl
r of 20 µl13
QPP0601
QPP0605NEW
ORA™ SEE qPCR Probe ROX H Mix
ORA™ SEE qPCR Probe ROX H Mix
2X
2X
200
1000
r of 20 µl
r of 20 µl14
QPD0101
QPD0105
ORA™ qPCR Green ROX L Mix
ORA™ qPCR Green ROX L Mix
2X
2X
200
1000
r of 20 µl
r of 20 µl15
QPD0501
QPD0505NEW
ORA™ SEE qPCR Green ROX L Mix
ORA™ SEE qPCR Green ROX L Mix
2X
2X
200
1000
r of 20 µl
r of 20 µl16
QPD0201
QPD0205
ORA™ qPCR Green ROX H Mix
ORA™ qPCR Green ROX H Mix
2X
2X
200
1000
r of 20 µl
r of 20 µl17
QPD0401
QPD0405NEW
ORA™ SEE qPCR Green ROX H Mix
ORA™ SEE qPCR Green ROX H Mix
2X
2X
200
1000
r of 20 µl
r of 20 µl18
QPD0301
QPD0305
ORA™ qPCR HRM Mix
ORA™ qPCR HRM Mix
2X
2X
200
1000
r of 20 µl
r of 20 µl19
QOP0101
QOP0105
1Step RT qPCR Probe Kit
1Step RT qPCR Probe Kit
2X & 20X
2X & 20X
200
1000
r of 20 µl
r of 20 µl 23
QOP0201
QOP0205
1Step RT qPCR Probe ROX L Kit
1Step RT qPCR Probe ROX L Kit
2X & 20X
2X & 20X
200
1000
r of 20 µl
r of 20 µl24
QOP0301
QOP0305
1Step RT qPCR Probe ROX H Kit
1Step RT qPCR Probe ROX H Kit
2X & 20X
2X & 20X
200
1000
r of 20 µl
r of 20 µl25
QOD0101
QOD0105
1Step RT qPCR Green ROX L Kit
1Step RT qPCR Green ROX L Kit
2X & 20X
2X & 20X
200
1000
r of 20 µl
r of 20 µl26
QOD0201
QOD0205
1Step RT qPCR Green ROX H Kit
1Step RT qPCR Green ROX H Kit
2X & 20X
2X & 20X
200
1000
r of 20 µl
r of 20 µl27
PCE0101
PCE0105
ALLin™ Taq DNA Polymerase
ALLin™ Taq DNA Polymerase
5 u/µl
5 u/µl
500
2500
u
u31
PCM0201
PCM0205
ALLin™ Red Taq Mastermix
ALLin™ Red Taq Mastermix
2X
2X
200
1000
r of 50 µl
r of 50 µl32
PCM0101
PCM0105
ALLin™ Taq Mastermix
ALLin™ Taq Mastermix
2X
2X
200
1000
r of 50 µl
r of 50 µl33
PCE0201
PCE0202
Taq DNA Polymerase
Taq DNA Polymerase
5 u/µl
5 u/µl
1500
3000
u
u34
HSE0101
HSE0105
ALLin™ Hot Start Taq Polymerase
ALLin™ Hot Start Taq Polymerase
5 u/µl
5 u/µl
500
2500
u
u35
HSM0301
HSM0305NEW
ALLin™ HS Red Taq Mastermix
ALLin™ HS Red Taq Mastermix
2X
2X
200
1000
r of 50 µl
r of 50 µl36
HSM0201
HSM0205
ALLin™ Hot Start Taq Mastermix
ALLin™ Hot Start Taq Mastermix2X
200
1000
r of 50 µl
r of 50 µl37
HLE0101
HLE0105
ALLin™ RPH Polymerase
ALLin™ RPH Polymerase
5 u/µl
5 u/µl
250
1250
u
u38
HLM0101
HLM0105
ALLin™ RPH Mastermix
ALLin™ RPH Mastermix
2X
2X
200
1000
r of 50 µl
r of 50 µl39
HLE0201
HLE0205
ALLin™ HiFi DNA Polymerase
ALLin™ HiFi DNA Polymerase
2 u/µl
2 u/µl
200
1000
u
u40
order@ highQu.com Order Tel: +497250 33 13 401 5
Product Index
Trademarks of highQuALLinCozyCozyHiHighEndhighQu HighScriberqScriberORAPCRbeamprofessionally simpleRallyUDGinSampleINStainINTake5
CAT.# NEW PRODUCT CONCENTRATION SIZE SIZE UNIT PAGE
DPK0101
DPK0105
SampleIN™ Direct PCR Kit
SampleIN™ Direct PCR Kit
80
400
r of 50 µl
r of 50 µl41
RTK0201 1Step RT PCR Kit 2X & 20X 100 r of 50 µl 45
RTM0301
RTM0305NEW
HighScriber™ Reverse Transcriptase Mix
HighScriber™ Reverse Transcriptase Mix
20X
20X
10000
50000
u
u46
RTK0101
RTK0104
qScriber™ cDNA Synthesis Kit
qScriber™ cDNA Synthesis Kit
5X & 20X
5X & 20X
25
100
r of 20 µl
r of 20 µl47
UDG0101 UDGin™ PCR Cleaner Mix 20X 0.5 ml 51
PDK0101 PCRbeam™ Fast PCR Detection Kit 50 tests 52
NUM0101 25 mM dNTP Mix 25 mM each 1 ml 53
NUM0201 10 mM dNTP Mix 10 mM each 1 ml 53
NUS0101 100 mM dNTP Set 100 mM 4 x 0.25 ml 53
WAT0110 PCR Water 10 x 1 ml 54
RLK0101
RLK0105
Rally™ Rapid Ligation Kit
Rally™ Rapid Ligation Kit
1 r/µl
1 r/µl
40
200
r of 20 µl
r of 20 µl57
HER0101
HER0105
HighEnd™ Repair Kit
HighEnd™ Repair Kit
1 r/µl
1 r/µl
40
200
r of 25 µl
r of 25 µl58
DNL0102 Take5™ 1kb DNA Ladder 5 µl/appl. 200 appl. (5 µl) 61
DNL0202 Take5™ 100 bp DNA Ladder 5 µl/appl. 200 appl. (5 µl) 61
DNL0302 Take5™ 50 bp DNA Ladder 5 µl/appl. 200 appl. (5 µl) 61
DNL0402 Take5™ HR DNA Ladder 5 µl/appl. 200 appl. (5 µl) 61
NAS0101 NEW StainIN™ RED Nucleic Acid Stain 20000X 1 ml 62
NAS0201 NEW StainIN™ GREEN Nucleic Acid Stain 20000X 1 ml 63
PRL0102 Cozy™ Prestained Protein Ladder 5 µl/appl. 200 appl. (5 µl) 65
PRL0202 CozyHi™ Prestained Protein Ladder 5 µl/appl. 200 appl. (5 µl) 65
Info Tel: +497250 33 13 401 [email protected]
highQu Tips
highQu qPCR マスターミックスは、その最適化さ
れた使いやすさと最高のパフォーマンスで知られ
ています。
PCR water付属、スタンダード or ファスト反応
の両方に対応、素早いCt値の決定、高い再現性な
ど、必要とされるすべてがひとつになりました。
無料のサンプルがご希望ですか?下記より今すぐ
ご連絡ください。
www.highqu.com/samplerequest
order@ highQu.com Order Tel: +497250 33 13 401 7
qPCR & HRM Master Mixes
Info Tel: +497250 33 13 401 [email protected]
リアルタイムPCR用装置適合表: Probe and Dye-based ORA™ qPCR Mastermixes
Probe-based qPCR Green dye-based qPCR
ORA™ (SEE)
qPCR Probe
ORA™ (SEE)
qPCR Probe
ROX L
ORA™ (SEE)
qPCR Probe
ROX H
Instruments
ORA™ (SEE)
qPCR Green
ROX L
ORA™ (SEE)
qPCR Green
ROX H
page 9-10 page 11-12 page 13-14 page 15-16 page 17-18
• •
Analytic Jena: qTOWERBioRad: Opticon®, Opticon®2, Chromo4™, MiniOpticon™, CFX96™, CFX384™Cepheid: SmartCycler® BJS: Xxpress®
Illumina: EcoEppendorf: Mastercycler® ep realplex, Mastercycler® realplex 2SHain Lifescience: FluoroCycler®96QIAGEN: Rotor-Gene®Q, Rotor-Gene® 6000, Rotor-Gene® 3000Roche Applied Science: LightCycler®480, LightCycler®96, LightCycler®Nano Takara: Thermal Cycler Dice®
Thermo Fisher Scientific: Piko Real®
Techne: PrimeQ, Quantica®
•
•Agilent: Mx3000P®, Mx3005P®, Mx4000P®
Fluidigm: BioMark™Life Technologies: 7500, 7500 FAST, Viia™7, QuantStudio™ 12K Flex
•
• Life Technologies: 7000, 7300, 7700, 7900, 7900HT, 7900HT FAST, StepOne™, StepOnePlus™ •
• BioRad: iCycler®, MyiQ™, iQ™5
高解像度融解曲線分析(HRM)用リアルタイムPCR用装置適合表: ORA™ qPCR HRM Mix (page 19)
Life Technologies: 7500, 7500 FAST, 7900, 7900HT FAST, 7900HT, Viia™7, QuantStudio™ 12K Flex
BioRad: CFX96™, CFX384™
Eppendorf: Mastercycler® ep realplex Mastercycler® realplex 2S
Illumina: Eco
QIAGEN: Rotor-Gene®Q, Rotor-Gene® 6000, Rotor-Gene® 3000
Roche Applied Science: LightCycler®480, LightCycler®96, LightCycler®Nano
order@ highQu.com Order Tel: +497250 33 13 401 9
IN VITRO RESEARCH USE ONLY
ROX L and ROX H qPCR Mixes にはROXリファレンスダイが含まれています。ご使用の機器でROX detection の標準化を行いたい場合は、機器のマニュアルに従いソフトウェアを
設定してください
ご購入者様へ:本製品のご購入においては、U.S. Patent: 5,928,907 および US 以外の国の関連する特許のいかなる権利を譲渡するものではありません
ü 下記に従い20 μl の反応液を調整:
Reverse Primer 100-400 nM final c.
Forward Primer 100-400 nM final c.
Specific Probe 200 nM final c. (0.4 μl of 10 μM)
cDNA Template orgDNA Template
<100 ng or1 μg
PCR Water to 10 μl
ORA™ qPCR Mix, 2X 10 μl
ü 泡の発生を避けて穏やかに混合
ü 機器にセットし、以下のように設定
Initial denaturation 1 cycle: 95°C - 2 min for cDNA, or1 cycle: 95°C - 3 min for gDNA
Denaturation 40 cycles: 95°C - 5 sec
Annealing/extension 40 cycles: 60 - 65°C – 20 - 30 sec
ü 融解曲線分析の場合は機器の説明書に従ってください
PROTOCOL
• 用途に応じて最適なプライマーを設計してください
• アンプリコンのサイズは 80-200bp, 最大で 400 bpでご使用
ください
• コンタミネーションを避けるため、実験台を清潔に保つ、手
袋をはめる、滅菌済みチューブやフィルターチップを使用す
るなどの対策を行ってください
• ポジティブコントロールとネガティブコントロールを作成
し、並行して実験を行ってください
• 試薬は氷中で融解させ、使用前によく混ぜてご使用下さい
• アニーリング&伸長反応は最長で30秒、温度は60℃以上で
行ってください
PERFORMANCEORA™ qPCR Probe Mixは、わずか10コピーのターゲットから高感度に100%
有効なqPCRを可能にします。 例:10~106 コピーのヒトACVR2B遺伝子
を含むプラスミド希釈液をテンプレートとしたqPCR。TaqMan® probe 使
用。95℃:2min, 40×95℃:10s・60℃:15s。 Biorad CFX.使用
PRODUCT DETAILShighQu qPCR マスターミックスは、small molecular inhibitor technology によるHot Start PCR技術を採用しています。最適
化された反応バッファー組成によって高い感度と汎用性を兼ね
備えており、ファストサイクリング反応やGC/ATリッチサンプ
ルをテンプレートとした反応、マルチプレックス反応など多様
な用途において、高いパフォーマンスを発揮します。迅速な反
応により、素早くCt値を決定することが可能です。
highQuのマスターミックス製品には高品質なPCR Water が付
属しており、いつもフレッシュなPCR Waterをご使用いただけ
ます。環境に合わせてROXリファレンスダイの濃度を3通り-
without ROX, with low or high ROX-ご用意しております。お
手持ちの機器との適合性に関しては、8ページの適合表をご確
認下さい。
BENEFITS• すべてのプローブ方式qPCRアッセイ、GC/ATリッチサンプル、ファ
スト反応などに幅広く対応。
• シングル and/or マルチプレックス反応で最適なパフォーマンス
• 迅速な伸長反応ですばやいCt値決定 • PCR Water付属でクロスコンタミのリスク減・手間も削減
APPLICATIONS• 各種プローブ方式のqPCRアッセイ向け:TaqMan®, Molecu-
lar Beacons, Scorpions™ Probes などに対応
• gDNA, cDNA, viral DNAの相対定量・絶対定量、低コピー数
解析、遺伝子発現解析
CAT.# SIZE COMPONENTS COMPONENT COMPOSITION
QPP0101200回(20 μl 反応系)
2 x 1 ml - ORA™ qPCR Probe Mix, 2X2 x 1 ml - PCR Water Hot Start対応qPCRマスターミックス。 dNTPs (0.25 mM)
含有、最適化済みバッファー。PCR Water付属。
※ROXダイは含まれていません。QPP01051000回(20 μl 反応系)
10 x 1 ml - ORA™ qPCR Probe Mix, 2X10 x 1 ml - PCR Water
Storage: In the dark at -20°C.
ORA™ qPCR Probe Mix, 2X
cycles
RFU
10
3
amplification
Info Tel: +497250 33 13 401 [email protected]
IN VITRO RESEARCH USE ONLY
ROX L and ROX H qPCR Mixes にはROXリファレンスダイが含まれています。ご使用の機器でROX detection の標準化を行いたい場合は、機器のマニュアルに従いソフトウェアを
設定してください
ご購入者様へ:本製品のご購入においては、U.S. Patent: 5,928,907 および US 以外の国の関連する特許のいかなる権利を譲渡するものではありません
ü 下記に従い20 μl の反応液を調整:
Reverse Primer 100-400 nM final c.
Forward Primer 100-400 nM final c.
Specific Probe 200 nM final c. (0.4 μl of 10 μM)
cDNA Template orgDNA Template
<100 ng or1 μg
PCR Water to 10 μl
ORA™ SEE qPCR Mix, 2X 10 μl
ü 泡の発生を避けて穏やかに混合
ü 機器にセットし、以下のように設定
Initial denaturation 1 cycle: 95°C - 2 min for cDNA, or1 cycle: 95°C - 3 min for gDNA
Denaturation 40 cycles: 95°C - 5 sec
Annealing/extension 40 cycles: 60 - 65°C – 20 - 30 sec
ü 融解曲線分析の場合は機器の説明書に従ってください
PRODUCT DETAILShighQu qPCR マスターミックスは、small molecular inhibitor technology によるHot Start PCR技術を採用しています。最適化さ
れた反応バッファー組成によって高い感度と汎用性を兼ね備えてお
り、ファストサイクリング反応やGC/ATリッチサンプルをテンプレ
ートとした反応、マルチプレックス反応など多様な用途において、
高いパフォーマンスを発揮します。迅速な反応により、素早くCt値を決定することが可能です。
ORA™ SEE qPCR ミックスは不活性の青色トラッキングダイを含む
ことで作業中の視認性が大幅に改善され、安全性が向上しました。
highQuのマスターミックス製品には高品質なPCR Water が付属し
ており、いつもフレッシュなPCR Waterをご使用いただけます。環
境に合わせてROXリファレンスダイの濃度を3通り-without ROX, with low or high ROX-ご用意しております。お手持ちの機器との
適合性に関しては、8ページの適合表をご確認下さい。
BENEFITS• すべてのプローブ方式qPCRアッセイ、GC/ATリッチサンプル、ファ
スト反応などに幅広く対応。
• シングル and/or マルチプレックス反応で最適なパフォーマンス
• 迅速な伸長反応ですばやいCt値決定 • 青色のトラッキングダイ含有で視認性良好、ミスを防止。
APPLICATIONS• 各種プローブ方式のqPCRアッセイ向け:TaqMan®, Molecu-
lar Beacons, Scorpions™ Probes などに対応
• gDNA, cDNA, viral DNAの相対定量・絶対定量、低コピー数
解析、遺伝子発現解析
CAT.# SIZE COMPONENTS COMPONENT COMPOSITION
QPP0401200回(20 μl 反応系)
2 x 1 ml - ORA™ SEE qPCR Probe Mix, 2X2 x 1 ml - PCR Water 青色ダイ含有、Hot Start対応 qPCRマスターミックス。
dNTPs (0.25 mM)含有、最適化済みバッファー。
PCR Water付属。※ROXダイは含まれていません。QPP04051000回(20 μl 反応系)
10 x 1 ml - ORA™ SEE qPCR Probe Mix, 2X10 x 1 ml - PCR Water
Storage: In the dark at -20°C.
ORA™ SEE qPCR Probe Mix, 2X
PERFORMANCE
PROTOCOL
• 用途に応じて最適なプライマーを設計してください
• アンプリコンのサイズは 80-200bp, 最大で 400 bpでご使用
ください
• コンタミネーションを避けるため、実験台を清潔に保つ、手
袋をはめる、滅菌済みチューブやフィルターチップを使用す
るなどの対策を行ってください
• ポジティブコントロールとネガティブコントロールを作成
し、並行して実験を行ってください
• 試薬は氷中で融解させ、使用前によく混ぜてご使用下さい
• アニーリング&伸長反応は最長で30秒、温度は60℃以上で行
ってください
order@ highQu.com Order Tel: +497250 33 13 401 11
IN VITRO RESEARCH USE ONLY
ROX L and ROX H qPCR Mixes にはROXリファレンスダイが含まれています。ご使用の機器でROX detection の標準化を行いたい場合は、機器のマニュアルに従いソフトウェアを
設定してください
ご購入者様へ:本製品のご購入においては、U.S. Patent: 5,928,907 および US 以外の国の関連する特許のいかなる権利を譲渡するものではありません
ü 下記に従い20 μl の反応液を調整:
Reverse Primer 100-400 nM final c.
Forward Primer 100-400 nM final c.
Specific Probe 200 nM final c. (0.4 μl of 10 μM)
cDNA Template orgDNA Template
<100 ng or1 μg
PCR Water to 10 μl
ORA™ qPCR Mix, 2X 10 μl
ü 泡の発生を避けて穏やかに混合
ü 機器にセットし、以下のように設定
Initial denaturation 1 cycle: 95°C - 2 min for cDNA, or1 cycle: 95°C - 3 min for gDNA
Denaturation 40 cycles: 95°C - 5 sec
Annealing/extension 40 cycles: 60 - 65°C – 20 - 30 sec
ü 融解曲線分析の場合は機器の説明書に従ってください
ORA™ qPCR Probe ROX L Mix, 2X
PRODUCT DETAILShighQu qPCR マスターミックスは、small molecular inhibitor technology によるHot Start PCR技術を採用しています。最適
化された反応バッファー組成によって高い感度と汎用性を兼ね
備えており、ファストサイクリング反応やGC/ATリッチサンプ
ルをテンプレートとした反応、マルチプレックス反応など多様
な用途において、高いパフォーマンスを発揮します。迅速な反
応により、素早くCt値を決定することが可能です。
highQuのマスターミックス製品には高品質なPCR Water が付
属しており、いつもフレッシュなPCR Waterをご使用いただけ
ます。環境に合わせてROXリファレンスダイの濃度を3通り-
without ROX, with low or high ROX-ご用意しております。お
手持ちの機器との適合性に関しては、8ページの適合表をご確
認下さい。
BENEFITS•すべてのプローブ方式qPCRアッセイ、GC/ATリッチサンプル、ファ
スト反応などに幅広く対応。
• シングル and/or マルチプレックス反応で最適なパフォーマンス
• 迅速な伸長反応ですばやいCt値決定 • PCR Water付属でクロスコンタミのリスク減・手間も削減
APPLICATIONS• 低濃度のROXダイ向けに設定されたqPCR機器向け
• 各種プローブ方式のqPCRアッセイ向け:TaqMan®, Molecu-lar Beacons, Scorpions™ Probes などに対応
• gDNA, cDNA, viral DNAの相対定量・絶対定量、低コピー数
解析、遺伝子発現解析
CAT.# SIZE COMPONENTS COMPONENT COMPOSITION
QPP0201200回(20 μl 反応系)
2 x 1 ml - ORA™ qPCR Probe ROX L Mix, 2X2 x 1 ml - PCR Water Hot Start対応qPCRマスターミックス。 dNTPs (0.25 mM)含
有、最適化済みバッファー。PCR Water付属。
※低濃度のROXダイ含有QPP02051000回(20 μl 反応系)
10 x 1 ml - ORA™ qPCR Probe ROX L Mix, 2X10 x 1 ml - PCR Water
Storage: In the dark at -20°C.
PERFORMANCEORA™ qPCR Probe Mixは、わずか10コピーのターゲットから高感度に100%
有効なqPCRを可能にします。 例:10~106 コピーのヒトLMIK1遺伝子を
含むプラスミド希釈液をテンプレートとしたqPCR。TaqMan® probe 使
用。95℃:2min, 40×95℃:10s・60℃:15s。 Biorad CFX使用
amplification
cycles
RFU
10
3
PROTOCOL
• 用途に応じて最適なプライマーを設計してください
• アンプリコンのサイズは 80-200bp, 最大で 400 bpでご使用
ください
• コンタミネーションを避けるため、実験台を清潔に保つ、手
袋をはめる、滅菌済みチューブやフィルターチップを使用す
るなどの対策を行ってください
• ポジティブコントロールとネガティブコントロールを作成
し、並行して実験を行ってください
• 試薬は氷中で融解させ、使用前によく混ぜてご使用下さい
• アニーリング&伸長反応は最長で30秒、温度は60℃以上で行
ってください
Info Tel: +497250 33 13 401 [email protected]
IN VITRO RESEARCH USE ONLY
ROX L and ROX H qPCR Mixes にはROXリファレンスダイが含まれています。ご使用の機器でROX detection の標準化を行いたい場合は、機器のマニュアルに従いソフトウェアを
設定してください
ご購入者様へ:本製品のご購入においては、U.S. Patent: 5,928,907 および US 以外の国の関連する特許のいかなる権利を譲渡するものではありません
ü 下記に従い20 μl の反応液を調整:
Reverse Primer 100-400 nM final c.
Forward Primer 100-400 nM final c.
Specific Probe 200 nM final c. (0.4 μl of 10 μM)
cDNA Template orgDNA Template
<100 ng or1 μg
PCR Water to 10 μl
ORA™ SEE qPCR Mix, 2X 10 μl
ü 泡の発生を避けて穏やかに混合
ü 機器にセットし、以下のように設定
Initial denaturation 1 cycle: 95°C - 2 min for cDNA, or1 cycle: 95°C - 3 min for gDNA
Denaturation 40 cycles: 95°C - 5 sec
Annealing/extension 40 cycles: 60 - 65°C – 20 - 30 sec
ü 融解曲線分析の場合は機器の説明書に従ってください
PROTOCOL
• 用途に応じて最適なプライマーを設計してください
• アンプリコンのサイズは 80-200bp, 最大で 400 bpでご使用
ください
• コンタミネーションを避けるため、実験台を清潔に保つ、手
袋をはめる、滅菌済みチューブやフィルターチップを使用す
るなどの対策を行ってください
• ポジティブコントロールとネガティブコントロールを作成
し、並行して実験を行ってください
• 試薬は氷中で融解させ、使用前によく混ぜてご使用下さい
• アニーリング&伸長反応は最長で30秒、温度は60℃以上で
行ってください
PERFORMANCEPRODUCT DETAILShighQu qPCR マスターミックスは、small molecular inhibitor technology によるHot Start PCR技術を採用しています。最適化さ
れた反応バッファー組成によって高い感度と汎用性を兼ね備えてお
り、ファストサイクリング反応やGC/ATリッチサンプルをテンプレ
ートとした反応、マルチプレックス反応など多様な用途において、
高いパフォーマンスを発揮します。迅速な反応により、素早くCt値を決定することが可能です。
ORA™ SEE qPCR ミックスは不活性の青色トラッキングダイを含む
ことで作業中の視認性が大幅に改善され、安全性が向上しました。
highQuのマスターミックス製品には高品質なPCR Water が付属し
ており、いつもフレッシュなPCR Waterをご使用いただけます。環
境に合わせてROXリファレンスダイの濃度を3通り-without ROX, with low or high ROX-ご用意しております。お手持ちの機器との
適合性に関しては、8ページの適合表をご確認下さい。
BENEFITS• すべてのプローブ方式qPCRアッセイ、GC/ATリッチサンプル、ファ
スト反応などに幅広く対応。
• シングル and/or マルチプレックス反応で最適なパフォーマンス
• 迅速な伸長反応ですばやいCt値決定 • 青色のトラッキングダイ含有で視認性良好、ミスを防止。
APPLICATIONS• 低濃度のROXダイ向けに設定されたqPCR機器向け
• 各種プローブ方式のqPCRアッセイ向け:TaqMan®, Molecu-lar Beacons, Scorpions™ Probes などに対応
• gDNA, cDNA, viral DNAの相対定量・絶対定量、低コピー数
解析、遺伝子発現解析
CAT.# SIZE COMPONENTS COMPONENT COMPOSITION
QPP0501200回(20 μl 反応系)
2 x 1 ml - ORA™ SEE qPCR Probe ROX L Mix, 2X2 x 1 ml - PCR Water 青色ダイ含有、Hot Start対応 qPCRマスターミックス。
dNTPs (0.25 mM)含有、最適化済みバッファー。
PCR Water付属。※低濃度のROXダイ含有QPP05051000回(20 μl 反応系)
10 x 1 ml - ORA™ SEE qPCR Probe ROX L Mix, 2X10 x 1 ml - PCR Water
Storage: In the dark at -20°C.
ORA™ SEE qPCR Probe ROX L Mix, 2X
order@ highQu.com Order Tel: +497250 33 13 401 13
IN VITRO RESEARCH USE ONLY
ROX L and ROX H qPCR Mixes にはROXリファレンスダイが含まれています。ご使用の機器でROX detection の標準化を行いたい場合は、機器のマニュアルに従いソフトウェアを
設定してください
ご購入者様へ:本製品のご購入においては、U.S. Patent: 5,928,907 および US 以外の国の関連する特許のいかなる権利を譲渡するものではありません
ü 下記に従い20 μl の反応液を調整:
Reverse Primer 100-400 nM final c.
Forward Primer 100-400 nM final c.
Specific Probe 200 nM final c. (0.4 μl of 10 μM)
cDNA Template orgDNA Template
<100 ng or1 μg
PCR Water to 10 μl
ORA™ qPCR Mix, 2X 10 μl
ü 泡の発生を避けて穏やかに混合
ü 機器にセットし、以下のように設定
Initial denaturation 1 cycle: 95°C - 2 min for cDNA, or1 cycle: 95°C - 3 min for gDNA
Denaturation 40 cycles: 95°C - 5 sec
Annealing/extension 40 cycles: 60 - 65°C – 20 - 30 sec
ü 融解曲線分析の場合は機器の説明書に従ってください
PROTOCOL
• 用途に応じて最適なプライマーを設計してください
• アンプリコンのサイズは 80-200bp, 最大で 400 bpでご使用
ください
• コンタミネーションを避けるため、実験台を清潔に保つ、手
袋をはめる、滅菌済みチューブやフィルターチップを使用す
るなどの対策を行ってください
• ポジティブコントロールとネガティブコントロールを作成
し、並行して実験を行ってください
• 試薬は氷中で融解させ、使用前によく混ぜてご使用下さい
• アニーリング&伸長反応は最長で30秒、温度は60℃以上で
行ってください
PERFORMANCEORA™ qPCR Probe Mixは、わずか10コピーのターゲットから高感度に100%
有効なqPCRを可能にします。 例:10~106 コピーのヒトACVR1B遺伝子
を含むプラスミド希釈液をテンプレートとしたqPCR。TaqMan® probe 使
用。95℃:2min, 40×95℃:10s・60℃:15s。 Biorad CFX.使用
PRODUCT DETAILShighQu qPCR マスターミックスは、small molecular inhibi-tor technology によるHot Start PCR技術を採用しています。
最適化された反応バッファー組成によって高い感度と汎用性
を兼ね備えており、ファストサイクリング反応やGC/ATリッ
チサンプルをテンプレートとした反応、マルチプレックス反
応など多様な用途において、高いパフォーマンスを発揮しま
す。迅速な反応により、素早くCt値を決定することが可能で
す。
highQuのマスターミックス製品には高品質なPCR Water が付属しており、いつもフレッシュなPCR Waterをご使用いた
だけます。環境に合わせてROXリファレンスダイの濃度を3通り-without ROX, with low or high ROX-ご用意しており
ます。お手持ちの機器との適合性に関しては、8ページの適合
表をご確認下さい。
BENEFITS•すべてのプローブ方式qPCRアッセイ、GC/ATリッチサンプル、ファ
スト反応などに幅広く対応。
• シングル and/or マルチプレックス反応で最適なパフォーマンス
• 迅速な伸長反応ですばやいCt値決定 • PCR Water付属でクロスコンタミのリスク減・手間も削減
APPLICATIONS• 高濃度のROXダイ向けに設定されたqPCR機器向け
• 各種プローブ方式のqPCRアッセイ向け:TaqMan®, Molecu-lar Beacons, Scorpions™ Probes などに対応
• gDNA, cDNA, viral DNAの相対定量・絶対定量、低コピー数
解析、遺伝子発現解析
CAT.# SIZE COMPONENTS COMPONENT COMPOSITION
QPP0301200回(20 μl 反応系)
2 x 1 ml - ORA™ qPCR Probe ROX H Mix, 2X2 x 1 ml - PCR Water Hot Start対応qPCRマスターミックス。 dNTPs (0.25 mM)含
有、最適化済みバッファー。PCR Water付属。
※高濃度のROXダイ含有QPP03051000回(20 μl 反応系)
10 x 1 ml - ORA™ qPCR Probe ROX H Mix, 2X10 x 1 ml - PCR Water
Storage: In the dark at -20°C.
ORA™ qPCR Probe ROX H Mix, 2X
amplification
cycles
RFU
10
3
Info Tel: +497250 33 13 401 [email protected]
IN VITRO RESEARCH USE ONLY
ROX L and ROX H qPCR Mixes にはROXリファレンスダイが含まれています。ご使用の機器でROX detection の標準化を行いたい場合は、機器のマニュアルに従いソフトウェアを
設定してください
ご購入者様へ:本製品のご購入においては、U.S. Patent: 5,928,907 および US 以外の国の関連する特許のいかなる権利を譲渡するものではありません
ü 下記に従い20 μl の反応液を調整:
Reverse Primer 100-400 nM final c.
Forward Primer 100-400 nM final c.
Specific Probe 200 nM final c. (0.4 μl of 10 μM)
cDNA Template orgDNA Template
<100 ng or1 μg
PCR Water to 10 μl
ORA™ SEE qPCR Mix, 2X 10 μl
ü 泡の発生を避けて穏やかに混合
ü 機器にセットし、以下のように設定
Initial denaturation 1 cycle: 95°C - 2 min for cDNA, or1 cycle: 95°C - 3 min for gDNA
Denaturation 40 cycles: 95°C - 5 sec
Annealing/extension 40 cycles: 60 - 65°C – 20 - 30 sec
ü 融解曲線分析の場合は機器の説明書に従ってください
PERFORMANCEPRODUCT DETAILShighQu qPCR マスターミックスは、small molecular inhibitor technology によるHot Start PCR技術を採用しています。最適化さ
れた反応バッファー組成によって高い感度と汎用性を兼ね備えてお
り、ファストサイクリング反応やGC/ATリッチサンプルをテンプレ
ートとした反応、マルチプレックス反応など多様な用途において、
高いパフォーマンスを発揮します。迅速な反応により、素早くCt値を決定することが可能です。
ORA™ SEE qPCR ミックスは不活性の青色トラッキングダイを含む
ことで作業中の視認性が大幅に改善され、安全性が向上しました。
highQuのマスターミックス製品には高品質なPCR Water が付属し
ており、いつもフレッシュなPCR Waterをご使用いただけます。環
境に合わせてROXリファレンスダイの濃度を3通り-without ROX, with low or high ROX-ご用意しております。お手持ちの機器との
適合性に関しては、8ページの適合表をご確認下さい。
BENEFITS• すべてのプローブ方式qPCRアッセイ、GC/ATリッチサンプル、ファ
スト反応などに幅広く対応。
• シングル and/or マルチプレックス反応で最適なパフォーマンス
• 迅速な伸長反応ですばやいCt値決定 • 青色のトラッキングダイ含有で視認性良好、ミスを防止。
APPLICATIONS• 高濃度のROXダイ向けに設定されたqPCR機器向け
• 各種プローブ方式のqPCRアッセイ向け:TaqMan®, Molecu-lar Beacons, Scorpions™ Probes などに対応
• gDNA, cDNA, viral DNAの相対定量・絶対定量、低コピー数
解析、遺伝子発現解析
ORA™ SEE qPCR Probe ROX H Mix, 2X
CAT.# SIZE COMPONENTS COMPONENT COMPOSITION
QPP0601200回(20 μl 反応系)
2 x 1 ml - ORA™ SEE qPCR Probe ROX H Mix, 2X2 x 1 ml - PCR Water 青色ダイ含有、Hot Start対応 qPCRマスターミックス。
dNTPs (0.25 mM)含有、最適化済みバッファー。
PCR Water付属。※高濃度のROXダイ含有QPP06051000回(20 μl 反応系)
10 x 1 ml - ORA™ SEE qPCR Probe ROX H Mix, 2X10 x 1 ml - PCR Water
Storage: In the dark at -20°C.
PROTOCOL
• 用途に応じて最適なプライマーを設計してください
• アンプリコンのサイズは 80-200bp, 最大で 400 bpでご使用
ください
• コンタミネーションを避けるため、実験台を清潔に保つ、手
袋をはめる、滅菌済みチューブやフィルターチップを使用す
るなどの対策を行ってください
• ポジティブコントロールとネガティブコントロールを作成
し、並行して実験を行ってください
• 試薬は氷中で融解させ、使用前によく混ぜてご使用下さい
• アニーリング&伸長反応は最長で30秒、温度は60℃以上で
行ってください
order@ highQu.com Order Tel: +497250 33 13 401 15
IN VITRO RESEARCH USE ONLY
ü Prepare a 20 μl reaction:
Reverse Primer 100-400 nM final c.
Forward Primer 100-400 nM final c.
Specific Probe 200 nM final c. (0.4 μl of 10 μM)
cDNA Template orgDNA Template
<100 ng or1 μg
PCR Water to 10 μl
ORA™ qPCR Mix, 2X 10 μl
ü Mix gently, avoid bubbles. ü Place into the instrument set like:
Initial denaturation 1 cycle: 95°C - 2 min for cDNA, or1 cycle: 95°C - 3 min for gDNA
Denaturation 40 cycles: 95°C - 5 sec
ü Follow instrument instructions for melting curve analysis.
ROX L and ROX H qPCR Mixes にはROXリファレンスダイが含まれています。ご使用の機器でROX detection の標準化を行いたい場合は、機器のマニュアルに従いソフトウェアを
設定してください
ご購入者様へ:本製品のご購入においては、U.S. Patent: 5,928,907 および US 以外の国の関連する特許のいかなる権利を譲渡するものではありません
ü 下記に従い20 μl の反応液を調整:
Reverse Primer 100-400 nM final c.
Forward Primer 100-400 nM final c.
cDNA Template orgDNA Template
<100 ng or1 μg
PCR Water to 10 μl
ORA™ qPCR Mix, 2X 10 μl
ü 泡の発生を避けて穏やかに混合
ü 機器にセット・SYBR® Green or FAM チャンネルを使用し
下記のように設定:
Initial denaturation 1 cycle: 95°C - 2 min for cDNA, or1 cycle: 95°C - 3 min for gDNA
Denaturation 40 cycles: 95°C - 5 sec
Annealing/extension 40 cycles: 60 - 65°C – 20 - 30 sec
ü 融解曲線分析の場合は機器の説明書に従ってください
PROTOCOL
• 用途に応じて最適なプライマーを設計してください
• アンプリコンのサイズは 80-200bp, 最大で 400 bpでご使用
ください
• コンタミネーションを避けるため、実験台を清潔に保つ、手
袋をはめる、滅菌済みチューブやフィルターチップを使用す
るなどの対策を行ってください
• ポジティブコントロールとネガティブコントロールを作成
し、並行して実験を行ってください
• 試薬は氷中で融解させ、使用前によく混ぜてご使用下さい
• アニーリング&伸長反応は最長で30秒、温度は60℃以上で
行ってください
PERFORMANCEORA™ qPCR Green Mix (青)は、他社製品(ピンク)と比較してすばやく
Ct値を決定することが可能です。
例:マウスACTG1のcDNAテンプレートからのqPCR。95 oC 2 m, 40 x 95 oC 10
s & 60 oC 15 s。 Roche LightCycler® 480使用。
PRODUCT DETAILShighQu qPCR マスターミックスは、small molecular inhibitor technology によるHot Start PCR技術を採用しています。最適化さ
れた反応バッファー組成によって高い感度と汎用性を兼ね備えてお
り、ファストサイクリング反応やGC/ATリッチサンプルをテンプレ
ートとした反応など多様な用途において、高いパフォーマンスを
発揮します。迅速な反応により、素早くCt値を決定することが可能
です。
highQuのマスターミックス製品には、高品質なPCR Water が付属
しており、パッケージごとにフレッシュなPCR Waterをご使用いた
だけます。ご使用の機器に合わせて、ROXリファレンスダイの濃度
を2通り- with low or high ROX-ご用意しております。お手持ち
の機器との適合性に関しては、8ページの適合表をご確認下さい。
BENEFITS• GC/ATリッチサンプル、ファスト反応などに幅広く対応。
• 迅速な伸長反応ですばやいCt値決定 • PCR Water付属でクロスコンタミのリスク減・手間も削減
APPLICATIONS• 低濃度のROXダイ向けに設定されたqPCR機器向け
• 緑色蛍光ダイを用いたqPCRアッセイ向け • gDNA, cDNA, viral DNAの相対定量・絶対定量、低コピー数
解析、遺伝子発現解析
CAT.# SIZE COMPONENTS COMPONENT COMPOSITION
QPD0101200回(20 μl 反応系)
2 x 1 ml - ORA™ qPCR Green ROX L Mix, 2X2 x 1 ml - PCR Water Hot Start対応PCRマスターミックス。 dNTPs (0.25 mM)含
有、最適化済みバッファー。PCR Water付属。
※低濃度のROXダイ含有QPD01051000回(20 μl 反応系)
10 x 1 ml - ORA™ qPCR Green ROX L Mix, 2X10 x 1 ml - PCR Water
Storage: In the dark at -20°C.
ORA™ qPCR Green ROX L Mix, 2X
IN VITRO RESEARCH USE ONLY
Info Tel: +497250 33 13 401 [email protected]
IN VITRO RESEARCH USE ONLY
ROX L and ROX H qPCR Mixes にはROXリファレンスダイが含まれています。ご使用の機器でROX detection の標準化を行いたい場合は、機器のマニュアルに従いソフトウェアを
設定してください
ご購入者様へ:本製品のご購入においては、U.S. Patent: 5,928,907 および US 以外の国の関連する特許のいかなる権利を譲渡するものではありません
PERFORMANCE
ü 下記に従い20 μl の反応液を調整:
Reverse Primer 100-400 nM final c.
Forward Primer 100-400 nM final c.
cDNA Template orgDNA Template
<100 ng or1 μg
PCR Water to 10 μl
ORA™ SEE qPCR Mix, 2X 10 μl
ü 泡の発生を避けて穏やかに混合
ü 機器にセット・SYBR® Green or FAM チャンネルを使用し下
記のように設定:
Initial denaturation 1 cycle: 95°C - 2 min for cDNA, or1 cycle: 95°C - 3 min for gDNA
Denaturation 40 cycles: 95°C - 5 sec
Annealing/extension 40 cycles: 60 - 65°C – 20 - 30 sec
ü 融解曲線分析の場合は機器の説明書に従ってください
PROTOCOL
• 用途に応じて最適なプライマーを設計してください
• アンプリコンのサイズは 80-200bp, 最大で 400 bpでご使用
ください
• コンタミネーションを避けるため、実験台を清潔に保つ、手
袋をはめる、滅菌済みチューブやフィルターチップを使用す
るなどの対策を行ってください
• ポジティブコントロールとネガティブコントロールを作成
し、並行して実験を行ってください
• 試薬は氷中で融解させ、使用前によく混ぜてご使用下さい
• アニーリング&伸長反応は最長で30秒、温度は60℃以上で
行ってください
PRODUCT DETAILShighQu qPCR マスターミックスは、small molecular inhibitor technology によるHot Start PCR技術を採用しています。最適化さ
れた反応バッファー組成によって高い感度と汎用性を兼ね備えて
おり、ファストサイクリング反応やGC/ATリッチサンプルをテンプ
レートとした反応など多様な用途において、高いパフォーマンス
を発揮します。迅速な反応により、素早くCt値を決定することが可
能です。
ORA™ SEE qPCR ミックスは不活性の青色トラッキングダイを含む
ことで作業中の視認性が大幅に改善され、安全性が向上しました。
highQuのマスターミックス製品には、高品質なPCR Water が付属
しており、パッケージごとにフレッシュなPCR Waterをご使用いた
だけます。ご使用の機器に合わせて、ROXリファレンスダイの濃度
を2通り- with low or high ROX-ご用意しております。お手持ち
の機器との適合性に関しては、8ページの適合表をご確認下さい。
BENEFITS• GC/ATリッチサンプル、ファスト反応などに幅広く対応。
• 迅速な伸長反応ですばやいCt値決定 • PCR Water付属でクロスコンタミのリスク減・手間も削減
• 青色のトラッキングダイ含有で視認性良好、ミスを防止。
APPLICATIONS• 低濃度のROXダイ向けに設定されたqPCR機器向け
• 緑色蛍光ダイを用いたqPCRアッセイ向け • gDNA, cDNA, viral DNAの相対定量・絶対定量、低コピー数解
析、遺伝子発現解析
ORA™ SEE qPCR Green ROX L Mix, 2X
CAT.# SIZE COMPONENTS COMPONENT COMPOSITION
QPD0501200回(20 μl 反応系)
2 x 1 ml - ORA™ SEE qPCR Green ROX L Mix, 2X2 x 1 ml - PCR Water 青色ダイ含有、Hot Start対応 qPCRマスターミックス。
dNTPs (0.25 mM)含有、最適化済みバッファー。
PCR Water付属。※低濃度のROXダイ含有QPD05051000回(20 μl 反応系)
10 x 1 ml - ORA™ SEE qPCR Green ROX L Mix, 2X10 x 1 ml - PCR Water
Storage: In the dark at -20°C.
order@ highQu.com Order Tel: +497250 33 13 401 17
IN VITRO RESEARCH USE ONLY
ROX L and ROX H qPCR Mixes にはROXリファレンスダイが含まれています。ご使用の機器でROX detection の標準化を行いたい場合は、機器のマニュアルに従いソフトウェアを
設定してください
ご購入者様へ:本製品のご購入においては、U.S. Patent: 5,928,907 および US 以外の国の関連する特許のいかなる権利を譲渡するものではありません
PERFORMANCEORA™ qPCR Green Mix (紫)は、他社製品(赤)と比較して高い感度を示し
ます。
例:マウスACTG1のcDNAテンプレートからの融解曲線分析。95 oC 2 m, 40 x
95 oC 10 s & 60 oC 15 s。 Roche LightCycler® 480使用。
PRODUCT DETAILShighQu qPCR マスターミックスは、small molecular inhibitor technology によるHot Start PCR技術を採用しています。最適化さ
れた反応バッファー組成によって高い感度と汎用性を兼ね備えてお
り、ファストサイクリング反応やGC/ATリッチサンプルをテンプレ
ートとした反応など多様な用途において、高いパフォーマンスを発
揮します。迅速な反応により、素早くCt値を決定することが可能で
す。
highQuのマスターミックス製品には、高品質なPCR Water が付属
しており、パッケージごとにフレッシュなPCR Waterをご使用いた
だけます。ご使用の機器に合わせて、ROXリファレンスダイの濃度
を2通り- with low or high ROX-ご用意しております。
BENEFITS• GC/ATリッチサンプル、ファスト反応などに幅広く対応。
• 迅速な伸長反応ですばやいCt値決定 • PCR Water付属でクロスコンタミのリスク減・手間も削減
ORA™ qPCR Green ROX H Mix, 2X
CAT.# SIZE COMPONENTS COMPONENT COMPOSITION
QPD0201200回(20 μl 反応系)
2 x 1 ml - ORA™ qPCR Green ROX H Mix, 2X2 x 1 ml - PCR Water Hot Start対応PCRマスターミックス。 dNTPs (0.25 mM)含
有、最適化済みバッファー。PCR Water付属。
※高濃度のROXダイ含有QPD02051000回(20 μl 反応系)
10 x 1 ml - ORA™ qPCR Green ROX H Mix, 2X10 x 1 ml - PCR Water
Storage: In the dark at -20°C.
APPLICATIONS• 高濃度のROXダイ向けに設定されたqPCR機器向け
• 緑色蛍光ダイを用いたqPCRアッセイ向け • gDNA, cDNA, viral DNAの相対定量・絶対定量、低コピー数解
析、遺伝子発現解析
ü 下記に従い20 μl の反応液を調整:
Reverse Primer 100-400 nM final c.
Forward Primer 100-400 nM final c.
cDNA Template orgDNA Template
<100 ng or1 μg
PCR Water to 10 μl
ORA™ qPCR Mix, 2X 10 μl
ü 泡の発生を避けて穏やかに混合
ü 機器にセット・SYBR® Green or FAM チャンネルを使用し下
記のように設定:
Initial denaturation 1 cycle: 95°C - 2 min for cDNA, or1 cycle: 95°C - 3 min for gDNA
Denaturation 40 cycles: 95°C - 5 sec
Annealing/extension 40 cycles: 60 - 65°C – 20 - 30 sec
ü 融解曲線分析の場合は機器の説明書に従ってください
PROTOCOL
• 用途に応じて最適なプライマーを設計してください
• アンプリコンのサイズは 80-200bp, 最大で 400 bpでご使用
ください
• コンタミネーションを避けるため、実験台を清潔に保つ、手
袋をはめる、滅菌済みチューブやフィルターチップを使用す
るなどの対策を行ってください
• ポジティブコントロールとネガティブコントロールを作成
し、並行して実験を行ってください
• 試薬は氷中で融解させ、使用前によく混ぜてご使用下さい
• アニーリング&伸長反応は最長で30秒、温度は60℃以上で
行ってください
Info Tel: +497250 33 13 401 [email protected]
IN VITRO RESEARCH USE ONLY
ROX L and ROX H qPCR Mixes にはROXリファレンスダイが含まれています。ご使用の機器でROX detection の標準化を行いたい場合は、機器のマニュアルに従いソフトウェアを
設定してください
ご購入者様へ:本製品のご購入においては、U.S. Patent: 5,928,907 および US 以外の国の関連する特許のいかなる権利を譲渡するものではありません
ORA™ SEE qPCR Green ROX H Mix, 2X
CAT.# SIZE COMPONENTS COMPONENT COMPOSITION
QPD0401200回(20 μl 反応系)
2 x 1 ml - ORA™ SEE qPCR Green ROX H Mix, 2X2 x 1 ml - PCR Water 青色ダイ含有、Hot Start対応 qPCRマスターミックス。
dNTPs (0.25 mM)含有、最適化済みバッファー。
PCR Water付属。※高濃度のROXダイ含有QPD04051000回(20 μl 反応系)
10 x 1 ml - ORA™ SEE qPCR Green ROX H Mix, 2X10 x 1 ml - PCR Water
Storage: In the dark at -20°C.
APPLICATIONS• 高濃度のROXダイ向けに設定されたqPCR機器向け
• 緑色蛍光ダイを用いたqPCRアッセイ向け • gDNA, cDNA, viral DNAの相対定量・絶対定量、低コピー数解
析、遺伝子発現解析
BENEFITS• GC/ATリッチサンプル、ファスト反応などに幅広く対応。
• 迅速な伸長反応ですばやいCt値決定 • PCR Water付属でクロスコンタミのリスク減・手間も削減
• 青色のトラッキングダイ含有で視認性良好、ミスを防止。
PRODUCT DETAILShighQu qPCR マスターミックスは、small molecular inhibitor technology によるHot Start PCR技術を採用しています。最適化さ
れた反応バッファー組成によって高い感度と汎用性を兼ね備えて
おり、ファストサイクリング反応やGC/ATリッチサンプルをテンプ
レートとした反応など多様な用途において、高いパフォーマンス
を発揮します。迅速な反応により、素早くCt値を決定することが
可能です。
ORA™ SEE qPCR ミックスは不活性の青色トラッキングダイを含む
ことで作業中の視認性が大幅に改善され、安全性が向上しました。
highQuのマスターミックス製品には、高品質なPCR Water が付属
しており、パッケージごとにフレッシュなPCR Waterをご使用いた
だけます。ご使用の機器に合わせて、ROXリファレンスダイの濃度
を2通り- with low or high ROX-ご用意しております。お手持ち
の機器との適合性に関しては、8ページの適合表をご確認下さい。
PERFORMANCE
ü 下記に従い20 μl の反応液を調整:
Reverse Primer 100-400 nM final c.
Forward Primer 100-400 nM final c.
cDNA Template orgDNA Template
<100 ng or1 μg
PCR Water to 10 μl
ORA™ SEE qPCR Mix, 2X 10 μl
ü 泡の発生を避けて穏やかに混合
ü 機器にセット・SYBR® Green or FAM チャンネルを使用し下
記のように設定:
Initial denaturation 1 cycle: 95°C - 2 min for cDNA, or1 cycle: 95°C - 3 min for gDNA
Denaturation 40 cycles: 95°C - 5 sec
Annealing/extension 40 cycles: 60 - 65°C – 20 - 30 sec
ü 融解曲線分析の場合は機器の説明書に従ってください
PROTOCOL
• 用途に応じて最適なプライマーを設計してください
• アンプリコンのサイズは 80-200bp, 最大で 400 bpでご使用
ください
• コンタミネーションを避けるため、実験台を清潔に保つ、手
袋をはめる、滅菌済みチューブやフィルターチップを使用す
るなどの対策を行ってください
• ポジティブコントロールとネガティブコントロールを作成
し、並行して実験を行ってください
• 試薬は氷中で融解させ、使用前によく混ぜてご使用下さい
• アニーリング&伸長反応は最長で30秒、温度は60℃以上で
行ってください
order@ highQu.com Order Tel: +497250 33 13 401 19
IN VITRO RESEARCH USE ONLY
ü Prepare a 20 μl reaction:
Reverse Primer 100-400 nM final c.
Forward Primer 100-400 nM final c.
Specific Probe 200 nM final c. (0.4 μl of 10 μM)
cDNA Template orgDNA Template
<100 ng or1 μg
PCR Water to 10 μl
ORA™ qPCR Mix, 2X 10 μl
ü Mix gently, avoid bubbles. ü Place into the instrument set like:
Initial denaturation 1 cycle: 95°C - 2 min for cDNA, or1 cycle: 95°C - 3 min for gDNA
Denaturation 40 cycles: 95°C - 5 sec
ü Follow instrument instructions for melting curve analysis.
ü 下記に従い20 μl の反応液を調整:
Reverse Primer 100-400 nM final c.
Forward Primer 100-400 nM final c.
cDNA Template orgDNA Template
<100 ng or1 μg
PCR Water to 10 μl
ORA™ HRM Mix, 2X 10 μl
ü 泡の発生を避けて穏やかに混合
ü 機器にセット・SYBR® Green or FAM チャンネルを使用し
下記のように設定:
Initial denaturation 1 cycle: 95°C - 2 min for cDNA, or1 cycle: 95°C - 3 min for gDNA
Denaturation 40 cycles: 95°C - 5 sec
Annealing/extension 40 cycles: 60 - 65°C – 20 - 30 sec
ü 融解曲線分析の場合は機器の説明書に従ってください
PROTOCOL
• 用途に応じて最適なプライマーを設計してください
• アンプリコンのサイズは 80-200bp, 最大で 400 bpでご使用
ください
• コンタミネーションを避けるため、実験台を清潔に保つ、手
袋をはめる、滅菌済みチューブやフィルターチップを使用す
るなどの対策を行ってください
• ポジティブコントロールとネガティブコントロールを作成
し、並行して実験を行ってください
• 試薬は氷中で融解させ、使用前によく混ぜてご使用下さい
• アニーリング&伸長反応は最長で30秒、温度は60℃以上で
行ってください
COMPATIBILE INSTRUMENTSPPRODUCT DETAILS高解像度曲線分析(HRM: High Resolution Melting analysis)は
迅速かつシンプルなDNA塩基配列の変異分析手法です。qPCR融解曲線のわずかな差を配列の変異として捉えることで、わずか1塩基の変異でさえ検出することができます。
highQu ORATM HRM qPCR Mixは、PCR反応にまったく影響を
及ぼすことのない独自のインターカレーションダイを使用してい
ます。このダイはAT/GCリッチ配列に対しても等しい親和性を示
し、最高精度のジェノタイピングを可能にします。
Small molecular inhibitor technology によるHot Start PCR技術
を採用し、かつ最適化された反応バッファー組成によって高い感
度と汎用性を兼ね備えており、ファストサイクリング反応やGC/ATリッチサンプルをテンプレートとした反応など多様な条件下に
おいて高いパフォーマンスを発揮します。
BENEFITS• 簡単でローコストなDNA配列変異の分析 • GC/ATリッチサンプル、ファスト反応などに幅広く対応。
• 最高レベルの感度
• PCR Water付属でクロスコンタミのリスク減・手間も削減
APPLICATIONS高解像度融解曲線分析
(HRM: High Resolution Melting analysis):• 配列変異検出
• 一塩基多型(SNP)ジェノタイピング
• DNAメチル化解析 •突然変異スキャニング
CAT.# SIZE COMPONENTS COMPONENT COMPOSITION
QPD0301200回(20 μl 反応系)
2 x 1 ml - ORA™ qPCR HRM Mix, 2X2 x 1 ml - PCR Water Hot Start対応PCRマスターミックス。 dNTPs (0.25 mM)含
有、最適化済みバッファー。PCR Water付属。高解像度融解曲
線分析(HRM)専用のダイ含有。QPD03051000回(20 μl 反応系)
10 x 1 ml - ORA™ qPCR HRM Mix, 2X10 x 1 ml - PCR Water
Storage: In the dark at -20°C.
ORA™ qPCR HRM Mix, 2X
IN VITRO RESEARCH USE ONLY
LifeTechnologies:
7500, 7500 FAST, 7900, 7900HT FAST, 7900HT, Viia™7, QuantStudio™ 12K Flex
BioRad: CFX96™, CFX384™
Eppendorf: Mastercycler® ep realplex Mastercycler® realplex 2S
Illumina: Eco
QIAGEN: Rotor-Gene®Q, Rotor-Gene® 6000, Rotor-Gene® 3000
Roche AppliedScience:
LightCycler®480, LightCycler®96, LightCycler®Nano
Info Tel: +497250 33 13 401 [email protected]
highQu Tips
highQu RT qPCRマスターミックスは、その安定し
たパフォーマンスと最適化された使いやすさで知
られています。
PCR water付属、スタンダード or ファスト反応
の両方に対応、素早いCt値の決定、高い再現性な
ど、必要とされるすべてがひとつになりました。
無料のサンプルがご希望ですか?下記より今すぐ
ご連絡ください。
www.highqu.com/samplerequest
order@ highQu.com Order Tel: +497250 33 13 401 21
One Step RT qPCR Kits
Info Tel: +497250 33 13 401 [email protected]
リアルタイムPCR用装置適合表:Probe and Dye-based 1Step RT qPCR Kits
Probe-based One-step RT qPCR
Green dye-based One-step RT qPCR
1Step RT
qPCR Probe
1Step RT qPCR
Probe
ROX L
1Step RT
qPCR Probe
ROX H
Instruments
1Step RT
qPCR Green
ROX L
1Step RT qPCR
Green
ROX H
page 23 page 24 page 25 page 26 page 27
• •
Analytic Jena: qTOWERBioRad: Opticon®, Opticon®2, Chromo4™, MiniOpticon™, CFX96™, CFX384™Cepheid: SmartCycler® BJS: Xxpress®
Illumina: EcoEppendorf: Mastercycler® ep realplex, Mastercycler® realplex 2SHain Lifescience: FluoroCycler®96QIAGEN: Rotor-Gene®Q, Rotor-Gene® 6000, Rotor-Gene® 3000Roche Applied Science: LightCycler®480, LightCycler®96, LightCycler®Nano Takara: Thermal Cycler Dice®
Thermo Fisher Scientific: Piko Real®
Techne: PrimeQ, Quantica®
•
•Agilent: Mx3000P®, Mx3005P®, Mx4000P®
Fluidigm: BioMark™Life Technologies: 7500, 7500 FAST, Viia™7, QuantStudio™ 12K Flex
•
• Life Technologies: 7000, 7300, 7700, 7900, 7900HT, 7900HT FAST, StepOne™, StepOnePlus™ •
• BioRad: iCycler®, MyiQ™, iQ™5
order@ highQu.com Order Tel: +497250 33 13 401 23
IN VITRO RESEARCH USE ONLY
ROX L and ROX H qPCR Mixes にはROXリファレンスダイが含まれています。ご使用の機器でROX detection の標準化を行いたい場合は、機器のマニュアルに従いソフトウェアを
設定してください。
ご購入者様へ:本製品のご購入においては、U.S. Patent: 5,928,907 および US 以外の国の関連する特許のいかなる権利を譲渡するものではありません
ü 下記に従い20 μl の反応液を調整:
Reverse Primer 100-400 nM final c.
Forward Primer 100-400 nM final c.
Specific Probe 200 nM final c. (0.4 μl of 10 μM)
Total RNA Template ormRNA Template
1 pg to 1 µg or>0.01 pg
PCR Water to 10 μl
1Step RT qPCR Mix, 2X 10 μl
RT3 Mix, 20X 1 - 2 μl
ü 泡の発生を避けて穏やかに混合
ü 機器にセットし下記のように設定:
Reverse Transcription 1 cycle: 40 - 55 °C – 10 min
Initial denaturation 1 cycles: 95°C - 2 min
Denaturation 40 cycles: 95°C - 5 sec
Annealing/extension 40 cycles: 60 - 65°C – 20 - 30 sec
ü 融解曲線分析の場合は機器の説明書に従ってください
PROTOCOL
• 用途に応じて最適なプライマーを設計してください
• アンプリコンのサイズは 80-200bp, 最大で 400 bpでご使用
ください
• コンタミネーションを避けるため、実験台を清潔に保つ、手
袋をはめる、滅菌済みチューブやフィルターチップを使用す
るなどの対策を行ってください
• ポジティブコントロールとネガティブコントロールを作成
し、並行して実験を行ってください
• 試薬は氷中で融解させ、使用前によく混ぜてご使用下さい
• RT3 Mixを通常より多く使用するとCt値の改善が見られるこ
とがありますが、プライマーダイマーの生成を助長すること
があります。
• アニーリング&伸長反応は最長で30秒、温度は60℃以上で
行ってください
PRECAUTIONS FOR WORK WITH RNARNA実験においては、RNaseによるRNAの分解がもっとも大きな障
害となります。実験の下準備と本試験を隔離された別の場所で行
う、DEPC処理済の器具やグローブを使用する、などの対策を行って
ください。
cDNA合成の前に、変性アガロースゲルを用いた電気泳動でRNAテン
プレートの品質チェックを行うことをお勧めいたします。
PRODUCT DETAILShighQu 1Step RT qPCR キットは 、高い酵素活性と熱安定性をもつ
逆転写酵素とRNase阻害剤をブレンドしたRT-Mixにより、1つのチ
ューブ内で逆転写反応とqPCRを一度に行うことができます。
本キットに付属するhighQu qPCRマスターミックスは、small molecular inhibitor technology によるHot Start PCR技術を採用し
ています。最適化された反応バッファー組成によって高い感度と汎
用性を兼ね備えており、ファストサイクリング反応やGC/ATリッチ
サンプルをテンプレートとした反応など多様な用途において、高い
パフォーマンスを発揮します。迅速な反応により、素早くCt値を決
定することが可能です。
highQu 1Step RT qPCR キットは、ご使用の機器に合わせてROXリファレンスダイの濃度を3通り-without ROX, with low or high ROX-ご用意しております。 お手持ちの機器との適合性に関して
は、22ページの適合表をご確認下さい。
BENEFITS• 逆転写反応とqPCRを一本のチューブで高感度に実行可能
• 高い酵素活性と熱安定性を誇る逆転写酵素&RNase阻害剤のブレン
ドで効率的なcDNA合成
• GC/ATリッチサンプルの増幅やファスト反応に対応 • 迅速な伸長反応。すばやいCt値の決定
• PCR Water付属でクロスコンタミのリスク減・手間も削減
APPLICATIONS• TaqMan®, Molecular Beacons, Scorpions™ Probesなどの各
種プローブ方式を用いた 1 Step RT qPCRアッセイ向け
• gDNA, cDNA, viral DNAの相対定量・絶対定量、低コピー数
解析、遺伝子発現解析
CAT.# SIZE COMPONENTS COMPONENT COMPOSITION
QOP0101200回(20 μl 反応系)
2 x 1 ml - 1Step RT qPCR Probe Mix, 2X2 x 0.2 ml - RT3 Mix, 20X (RNase Inhibitor+RTase)2 x 1 ml - PCR Water
Hot Start対応、dNTP(0.25mM)含有のqPCRマスターミ
ックス。改良型MMuLV逆転写酵素とRNase阻害剤がブレ
ンドされたRT3 Mix。PCR Water付属。
※ROXリファレンスダイは含まれていませんQOP01051000回(20 μl 反応系)
10 x 1 ml - 1Step RT qPCR Probe Mix, 2X10 x 0.2 ml - RT3 Mix, 20X (RNase Inhibitor+RTase)10 x 1 ml - PCR Water
Storage: In the dark at -20°C.
1Step RT qPCR Probe Kit
IN VITRO RESEARCH USE ONLY
Info Tel: +497250 33 13 401 [email protected]
1Step RT qPCR Probe ROX L Kit
CAT.# SIZE COMPONENTS COMPONENT COMPOSITION
QOP0201200回(20 μl 反応系)
2 x 1 ml - 1Step RT qPCR Probe ROX L Mix, 2X2 x 0.2 ml - RT3 Mix, 20X (RNase Inhibitor+RTase)2 x 1 ml - PCR Water
Hot Start対応、dNTP(0.25mM)、ROXリファレンス
ダイ(低濃度)含有のqPCRマスターミックス。改良型
MMuLV逆転写酵素とRNase阻害剤がブレンドされたRT3 Mix。PCR Water付属。QOP0205
1000回(20 μl 反応系)
10 x 1 ml - 1Step RT qPCR Probe ROX L Mix, 2X10 x 0.2 ml - RT3 Mix, 20X (RNase Inhibitor+RTase)10 x 1 ml - PCR Water
Storage: In the dark at -20°C.
PRECAUTIONS FOR WORK WITH RNARNA実験においては、RNaseによるRNAの分解がもっとも大きな障
害となります。実験の下準備と本試験を隔離された別の場所で行
う、DEPC処理済の器具やグローブを使用する、などの対策を行って
ください。
cDNA合成の前に、変性アガロースゲルを用いた電気泳動でRNAテン
プレートの品質チェックを行うことをお勧めいたします。
PRODUCT DETAILShighQu 1Step RT qPCR キットは 、高い酵素活性と熱安定性をもつ
逆転写酵素とRNase阻害剤をブレンドしたRT-Mixにより、1つのチ
ューブ内で逆転写反応とqPCRを一度に行うことができます。
本キットに付属するhighQu qPCRマスターミックスは、small molecular inhibitor technology によるHot Start PCR技術を採用し
ています。最適化された反応バッファー組成によって高い感度と汎
用性を兼ね備えており、ファストサイクリング反応やGC/ATリッチ
サンプルをテンプレートとした反応など多様な用途において、高い
パフォーマンスを発揮します。迅速な反応により、素早くCt値を決
定することが可能です。
highQu 1Step RT qPCR キットは、ご使用の機器に合わせてROXリファレンスダイの濃度を3通り-without ROX, with low or high ROX-ご用意しております。 お手持ちの機器との適合性に関して
は、22ページの適合表をご確認下さい。
BENEFITS• 逆転写反応とqPCRを一本のチューブで高感度に実行可能
• 高い酵素活性と熱安定性を誇る逆転写酵素&RNase阻害剤のブレン
ドで効率的なcDNA合成
• GC/ATリッチサンプルの増幅やファスト反応に対応 • 迅速な伸長反応。すばやいCt値の決定
• PCR Water付属でクロスコンタミのリスク減・手間も削減
APPLICATIONS• 低濃度のROXダイ向けに設定されたqPCR機器向け
• TaqMan®, Molecular Beacons, Scorpions™ Probesなどの各
種プローブ方式を用いた 1 Step RT qPCRアッセイ向け
• gDNA, cDNA, viral DNAの相対定量・絶対定量、低コピー数
解析、遺伝子発現解析
ROX L and ROX H qPCR Mixes にはROXリファレンスダイが含まれています。ご使用の機器でROX detection の標準化を行いたい場合は、機器のマニュアルに従いソフトウェアを
設定してください。
ご購入者様へ:本製品のご購入においては、U.S. Patent: 5,928,907 および US 以外の国の関連する特許のいかなる権利を譲渡するものではありません
ü 下記に従い20 μl の反応液を調整:
Reverse Primer 100-400 nM final c.
Forward Primer 100-400 nM final c.
Specific Probe 200 nM final c. (0.4 μl of 10 μM)
Total RNA Template ormRNA Template
1 pg to 1 µg or>0.01 pg
PCR Water to 10 μl
1Step RT qPCR Mix, 2X 10 μl
RT3 Mix, 20X 1 - 2 μl
ü 泡の発生を避けて穏やかに混合
ü 機器にセットし下記のように設定:
Reverse Transcription 1 cycle: 40 - 55 °C – 10 min
Initial denaturation 1 cycles: 95°C - 2 min
Denaturation 40 cycles: 95°C - 5 sec
Annealing/extension 40 cycles: 60 - 65°C – 20 - 30 sec
ü 融解曲線分析の場合は機器の説明書に従ってください
PROTOCOL
• 用途に応じて最適なプライマーを設計してください
• アンプリコンのサイズは 80-200bp, 最大で 400 bpでご使用
ください
• コンタミネーションを避けるため、実験台を清潔に保つ、手
袋をはめる、滅菌済みチューブやフィルターチップを使用す
るなどの対策を行ってください
• ポジティブコントロールとネガティブコントロールを作成
し、並行して実験を行ってください
• 試薬は氷中で融解させ、使用前によく混ぜてご使用下さい
• RT3 Mixを通常より多く使用するとCt値の改善が見られるこ
とがありますが、プライマーダイマーの生成を助長すること
があります。
• アニーリング&伸長反応は最長で30秒、温度は60℃以上で
行ってください
IN VITRO RESEARCH USE ONLY
order@ highQu.com Order Tel: +497250 33 13 401 25
IN VITRO RESEARCH USE ONLY
ROX L and ROX H qPCR Mixes にはROXリファレンスダイが含まれています。ご使用の機器でROX detection の標準化を行いたい場合は、機器のマニュアルに従いソフトウェアを
設定してください。
ご購入者様へ:本製品のご購入においては、U.S. Patent: 5,928,907 および US 以外の国の関連する特許のいかなる権利を譲渡するものではありません
ü 下記に従い20 μl の反応液を調整:
Reverse Primer 100-400 nM final c.
Forward Primer 100-400 nM final c.
Specific Probe 200 nM final c. (0.4 μl of 10 μM)
Total RNA Template ormRNA Template
1 pg to 1 µg or>0.01 pg
PCR Water to 10 μl
1Step RT qPCR Mix, 2X 10 μl
RT3 Mix, 20X 1 - 2 μl
ü 泡の発生を避けて穏やかに混合
ü 機器にセットし下記のように設定:
Reverse Transcription 1 cycle: 40 - 55 °C – 10 min
Initial denaturation 1 cycles: 95°C - 2 min
Denaturation 40 cycles: 95°C - 5 sec
Annealing/extension 40 cycles: 60 - 65°C – 20 - 30 sec
ü 融解曲線分析の場合は機器の説明書に従ってください
PROTOCOL
• 用途に応じて最適なプライマーを設計してください
• アンプリコンのサイズは 80-200bp, 最大で 400 bpでご使用
ください
• コンタミネーションを避けるため、実験台を清潔に保つ、手
袋をはめる、滅菌済みチューブやフィルターチップを使用す
るなどの対策を行ってください
• ポジティブコントロールとネガティブコントロールを作成
し、並行して実験を行ってください
• 試薬は氷中で融解させ、使用前によく混ぜてご使用下さい
• RT3 Mixを通常より多く使用するとCt値の改善が見られるこ
とがありますが、プライマーダイマーの生成を助長すること
があります。
• アニーリング&伸長反応は最長で30秒、温度は60℃以上で
行ってください
PRECAUTIONS FOR WORK WITH RNARNA実験においては、RNaseによるRNAの分解がもっとも大きな障
害となります。実験の下準備と本試験を隔離された別の場所で行
う、DEPC処理済の器具やグローブを使用する、などの対策を行って
ください。
cDNA合成の前に、変性アガロースゲルを用いた電気泳動でRNAテン
プレートの品質チェックを行うことをお勧めいたします。
PRODUCT DETAILShighQu 1Step RT qPCR キットは 、高い酵素活性と熱安定性をもつ
逆転写酵素とRNase阻害剤をブレンドしたRT-Mixにより、1つのチ
ューブ内で逆転写反応とqPCRを一度に行うことができます。
本キットに付属するhighQu qPCRマスターミックスは、small molecular inhibitor technology によるHot Start PCR技術を採用し
ています。最適化された反応バッファー組成によって高い感度と汎
用性を兼ね備えており、ファストサイクリング反応やGC/ATリッチ
サンプルをテンプレートとした反応など多様な用途において、高い
パフォーマンスを発揮します。迅速な反応により、素早くCt値を決
定することが可能です。
highQu 1Step RT qPCR キットは、ご使用の機器に合わせてROXリファレンスダイの濃度を3通り-without ROX, with low or high ROX-ご用意しております。 お手持ちの機器との適合性に関して
は、22ページの適合表をご確認下さい。
BENEFITS• 逆転写反応とqPCRを一本のチューブで高感度に実行可能
• 高い酵素活性と熱安定性を誇る逆転写酵素&RNase阻害剤のブレン
ドで効率的なcDNA合成
• GC/ATリッチサンプルの増幅やファスト反応に対応 • 迅速な伸長反応。すばやいCt値の決定
• PCR Water付属でクロスコンタミのリスク減・手間も削減
APPLICATIONS• 高濃度のROXダイ向けに設定されたqPCR機器向け
• TaqMan®, Molecular Beacons, Scorpions™ Probesなどの各
種プローブ方式を用いた 1 Step RT qPCRアッセイ向け
• gDNA, cDNA, viral DNAの相対定量・絶対定量、低コピー数
解析、遺伝子発現解析
CAT.# SIZE COMPONENTS COMPONENT COMPOSITION
QOP0301200回(20 μl 反応系)
2 x 1 ml - 1Step RT qPCR Probe ROX H Mix, 2X2 x 0.2 ml - RT3 Mix, 20X (RNase Inhibitor+RTase)2 x 1 ml - PCR Water
Hot Start対応、dNTP(0.25mM)、ROXリファレンス
ダイ(高濃度)含有のqPCRマスターミックス。改良型
MMuLV逆転写酵素とRNase阻害剤がブレンドされたRT3 Mix。PCR Water付属。QOP0305
1000回(20 μl 反応系)
10 x 1 ml - 1Step RT qPCR Probe ROX H Mix, 2X10 x 0.2 ml - RT3 Mix, 20X (RNase Inhibitor+RTase)10 x 1 ml - PCR Water
Storage: In the dark at -20°C.
1Step RT qPCR Probe ROX H Kit
IN VITRO RESEARCH USE ONLY
Info Tel: +497250 33 13 401 [email protected]
1Step RT qPCR Green ROX L Kit
CAT.# SIZE COMPONENTS COMPONENT COMPOSITION
QOD0101200回(20 μl 反応系)
2 x 1 ml - 1Step RT qPCR Green ROX L Mix, 2X2 x 0.2 ml - RT3 Mix, 20X (RNase Inhibitor+RTase)2 x 1 ml - PCR Water
Hot Start対応、dNTP(0.25mM)、ROXリファレンス
ダイ(低濃度)含有のqPCRマスターミックス。改良型
MMuLV逆転写酵素とRNase阻害剤がブレンドされたRT3 Mix。PCR Water付属。QOD0105
1000回(20 μl 反応系)
10 x 1 ml - 1Step RT qPCR Green ROX L Mix, 2X10 x 0.2 ml - RT3 Mix, 20X (RNase Inhibitor+RTase)10 x 1 ml - PCR Water
Storage: In the dark at -20°C.
PRECAUTIONS FOR WORK WITH RNARNA実験においては、RNaseによるRNAの分解がもっとも大きな障
害となります。実験の下準備と本試験を隔離された別の場所で行
う、DEPC処理済の器具やグローブを使用する、などの対策を行って
ください。
cDNA合成の前に、変性アガロースゲルを用いた電気泳動でRNAテン
プレートの品質チェックを行うことをお勧めいたします。
PRODUCT DETAILShighQu 1Step RT qPCR キットは 、高い酵素活性と熱安定性をもつ
逆転写酵素とRNase阻害剤をブレンドしたRT-Mixにより、1つのチ
ューブ内で逆転写反応とqPCRを一度に行うことができます。
本キットに付属するhighQu qPCRマスターミックスは、small molecular inhibitor technology によるHot Start PCR技術を採用し
ています。最適化された反応バッファー組成によって高い感度と汎
用性を兼ね備えており、ファストサイクリング反応やGC/ATリッチ
サンプルをテンプレートとした反応など多様な用途において、高い
パフォーマンスを発揮します。迅速な反応により、素早くCt値を決
定することが可能です。
highQu 1Step RT qPCR キットは、ご使用の機器に合わせてROXリファレンスダイの濃度を2通り-with low or high ROX-ご用意し
ております。お手持ちの機器との適合性に関しては、22ページの適
合表をご確認下さい。
BENEFITS• 逆転写反応とqPCRを一本のチューブで高感度に実行可能
• 高い酵素活性と熱安定性を誇る逆転写酵素&RNase阻害剤のブレン
ドで効率的なcDNA合成
• GC/ATリッチサンプルの増幅やファスト反応に対応 • 迅速な伸長反応。すばやいCt値の決定
• PCR Water付属でクロスコンタミのリスク減・手間も削減
APPLICATIONS• 低濃度のROXダイ向けに設定されたqPCR機器向け
• gDNA, cDNA, viral DNAの相対定量・絶対定量、低コピー数
解析、遺伝子発現解析
ROX L and ROX H qPCR Mixes にはROXリファレンスダイが含まれています。ご使用の機器でROX detection の標準化を行いたい場合は、機器のマニュアルに従いソフトウェアを
設定してください
ご購入者様へ:本製品のご購入においては、U.S. Patent: 5,928,907 および US 以外の国の関連する特許のいかなる権利を譲渡するものではありません
ü 下記に従い20 μl の反応液を調整:
Reverse Primer 100-400 nM final c.
Forward Primer 100-400 nM final c.
Specific Probe 200 nM final c. (0.4 μl of 10 μM)
Total RNA Template ormRNA Template
1 pg to 1 µg or>0.01 pg
PCR Water to 10 μl
1Step RT qPCR Mix, 2X 10 μl
RT3 Mix, 20X 1 - 2 μl
ü 泡の発生を避けて穏やかに混合
ü 機器にセットし下記のように設定:
Reverse Transcription 1 cycle: 40 - 55 °C – 10 min
Initial denaturation 1 cycles: 95°C - 2 min
Denaturation 40 cycles: 95°C - 5 sec
Annealing/extension 40 cycles: 60 - 65°C – 20 - 30 sec
ü 融解曲線分析の場合は機器の説明書に従ってください
PROTOCOL
• 用途に応じて最適なプライマーを設計してください
• アンプリコンのサイズは 80-200bp, 最大で 400 bpでご使用
ください
• コンタミネーションを避けるため、実験台を清潔に保つ、手
袋をはめる、滅菌済みチューブやフィルターチップを使用す
るなどの対策を行ってください
• ポジティブコントロールとネガティブコントロールを作成
し、並行して実験を行ってください
• 試薬は氷中で融解させ、使用前によく混ぜてご使用下さい
• RT3 Mixを通常より多く使用するとCt値の改善が見られるこ
とがありますが、プライマーダイマーの生成を助長すること
があります。
• アニーリング&伸長反応は最長で30秒、温度は60℃以上で
行ってください
IN VITRO RESEARCH USE ONLY
order@ highQu.com Order Tel: +497250 33 13 401 27
IN VITRO RESEARCH USE ONLY
ROX L and ROX H qPCR Mixes にはROXリファレンスダイが含まれています。ご使用の機器でROX detection の標準化を行いたい場合は、機器のマニュアルに従いソフトウェアを
設定してください
ご購入者様へ:本製品のご購入においては、U.S. Patent: 5,928,907 および US 以外の国の関連する特許のいかなる権利を譲渡するものではありません
ü 下記に従い20 μl の反応液を調整:
Reverse Primer 100-400 nM final c.
Forward Primer 100-400 nM final c.
Specific Probe 200 nM final c. (0.4 μl of 10 μM)
Total RNA Template ormRNA Template
1 pg to 1 µg or>0.01 pg
PCR Water to 10 μl
1Step RT qPCR Mix, 2X 10 μl
RT3 Mix, 20X 1 - 2 μl
ü 泡の発生を避けて穏やかに混合
ü 機器にセットし下記のように設定:
Reverse Transcription 1 cycle: 40 - 55 °C – 10 min
Initial denaturation 1 cycles: 95°C - 2 min
Denaturation 40 cycles: 95°C - 5 sec
Annealing/extension 40 cycles: 60 - 65°C – 20 - 30 sec
ü 融解曲線分析の場合は機器の説明書に従ってください
PROTOCOL
• 用途に応じて最適なプライマーを設計してください
• アンプリコンのサイズは 80-200bp, 最大で 400 bpでご使用
ください
• コンタミネーションを避けるため、実験台を清潔に保つ、手
袋をはめる、滅菌済みチューブやフィルターチップを使用す
るなどの対策を行ってください
• ポジティブコントロールとネガティブコントロールを作成
し、並行して実験を行ってください
• 試薬は氷中で融解させ、使用前によく混ぜてご使用下さい
• RT3 Mixを通常より多く使用するとCt値の改善が見られるこ
とがありますが、プライマーダイマーの生成を助長すること
があります。
• アニーリング&伸長反応は最長で30秒、温度は60℃以上で
行ってください
PRECAUTIONS FOR WORK WITH RNARNA実験においては、RNaseによるRNAの分解がもっとも大きな障
害となります。実験の下準備と本試験を隔離された別の場所で行
う、DEPC処理済の器具やグローブを使用する、などの対策を行って
ください。
cDNA合成の前に、変性アガロースゲルを用いた電気泳動でRNAテン
プレートの品質チェックを行うことをお勧めいたします。
PRODUCT DETAILShighQu 1Step RT qPCR キットは 、高い酵素活性と熱安定性をもつ
逆転写酵素とRNase阻害剤をブレンドしたRT-Mixにより、1つのチ
ューブ内で逆転写反応とqPCRを一度に行うことができます。
本キットに付属するhighQu qPCRマスターミックスは、small molecular inhibitor technology によるHot Start PCR技術を採用し
ています。最適化された反応バッファー組成によって高い感度と汎
用性を兼ね備えており、ファストサイクリング反応やGC/ATリッチ
サンプルをテンプレートとした反応など多様な用途において、高い
パフォーマンスを発揮します。迅速な反応により、素早くCt値を決
定することが可能です。
highQu 1Step RT qPCR キットは、ご使用の機器に合わせてROXリファレンスダイの濃度を2通り-with low or high ROX-ご用意し
ております。お手持ちの機器との適合性に関しては、22ページの適
合表をご確認下さい。
BENEFITS• 逆転写反応とqPCRを一本のチューブで高感度に実行可能
• 高い酵素活性と熱安定性を誇る逆転写酵素&RNase阻害剤のブレン
ドで効率的なcDNA合成
• GC/ATリッチサンプルの増幅やファスト反応に対応 • 迅速な伸長反応。すばやいCt値の決定
• PCR Water付属でクロスコンタミのリスク減・手間も削減
APPLICATIONS• 高濃度のROXダイ向けに設定されたqPCR機器向け
• gDNA, cDNA, viral DNAの相対定量・絶対定量、低コピー数
解析、遺伝子発現解析
CAT.# SIZE COMPONENTS COMPONENT COMPOSITION
QOD0201200回(20 μl 反応系)
2 x 1 ml - 1Step RT qPCR Green ROX H Mix, 2X2 x 0.2 ml - RT3 Mix, 20X (RNase Inhibitor+RTase)2 x 1 ml - PCR Water
Hot Start対応、dNTP(0.25mM)、ROXリファレンス
ダイ(高濃度)含有のqPCRマスターミックス。改良型
MMuLV逆転写酵素とRNase阻害剤がブレンドされたRT3 Mix。PCR Water付属。QOD0205
1000回(20 μl 反応系)
10 x 1 ml - 1Step RT qPCR Green ROX H Mix, 2X10 x 0.2 ml - RT3 Mix, 20X (RNase Inhibitor+RTase)10 x 1 ml - PCR Water
Storage: In the dark at -20°C.
1Step RT qPCR Green ROX H Kit
IN VITRO RESEARCH USE ONLY
Info Tel: +497250 33 13 401 [email protected]
highQu Tips
highQu エンドポイント PCR用ラインナップは、デイリー
ユースから特別なアプリケーションまで、すべてのニーズ
をカバーしています。
highQu独自の高性能Taqとバッファーの組み合わせは、フ
ァスト反応やGCリッチテンプレートを用いた反応において
も高いPCR収量を得ることができます。
highQuオリジナルレシピで調合された 5X ALLin™ PCR
Bufferには、最適濃度のヌクレオチド・MgCl2・反応促進剤
が含まれており、常に最高のPCR体験をお約束します。
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End-point PCREnzymes & Master Mixes
Info Tel: +497250 33 13 401 [email protected]
Standard Hot StartRobust, Long & Hot
Start
High
FidelityDirect
ALLin™ Taq
DNA
Polymerase
ALLin™
(RED) Taq
Mastermix
Taq DNA
Polymerase
ALLin™ Hot
Start Taq
Polymerase
ALLin™ Hot
Start (HS Red)
Taq
Mastermix
ALLin™ RPH
Polymerase
ALLin™ RPH
Mastermix
ALLin™ HiFi
DNA
Polymerase
SampleIN™
Direct PCR
Kit
page 31 page 32-33 page 34 page 35 page 36-37 page 38 page 39 page 40 page 41
Fast
cycling • • • • • • • •GC/AT rich
PCR •• • •• • •• • •• •Hot Start • • • • •High
sensitivity •• •• • • •Fidelity vs
Taq1 X 1 X 1 X 1 X 1 X 5 X 5 X 50 X 1 X
Long PCR • •• •• •Max.
amplicon6 kb 6 kb 5 kb 6 kb 6 kb 35 kb 35 kb 10 kb 5 kb
High yields •• •• • • • •• •• • •Direct PCR Colony Colony Colony
Colony,
blood, urine
Colony, blood,
urine
Colony,
bloodColony, blood Colony
Mouse tail, ear,
blood, tissues,
swab, hair
Multiplex
PCR • • •• •• • • •Classical
PCR ••Cloning TA TA TA TA TA TA TA Blunt TA
Direct
Loading
on gels
Red Mix
Red Mix
Red Mix
ALLin™
Buffer*
with
dNTPs• • • •
Mastermix • • • •* ALLin™ PCR buffers は最適濃度のdNTP, MgCl2, 反応促進剤・安定剤を含み、ファスト反応やGC/ATリッチテンプレート
からの反応でも容易に最高の結果を引き出すことができます。
End-point PCR Selection: Standard, Hot-start, Long, High fidelity, Direct PCR
order@ highQu.com Order Tel: +497250 33 13 401 31
IN VITRO RESEARCH USE ONLY
ü 下記に従い50μl の反応液を調整:
Rev. & For. Primers 0.1-0.4 µM final each (≤2 µl of 10 µM)
cDNA Template orgDNA Template
< 100 ng or5-500 ng
5X ALLin™ PCR Buffer 10 μl
Water (PCR Water,WAT0110)
to 49 μl
ALLin™ Taq DNAPolymerase, 5 u/µl
0.25 - 1 µl
ü 泡の発生を避けて穏やかに混合
ü 機器にセットし下記のように設定:
Initial denaturation 1 cycle: 95°C - 1 min
Denaturation 40 cycles: 95°C - 15 sec
Annealing 40 cycles: 55-65°C – 15 sec
Extension 40 cycles: 72°C – 1-90 sec (15 sec/kb)
ü PCR後の反応液は短期なら氷中、長期なら-20℃で保管
PROTOCOL
• 用途に応じて最適なプライマーを設計してください
• コンタミネーションを避けるため、実験台を清潔に保つ、手
袋をはめる、滅菌済みチューブやフィルターチップを使用す
るなどの対策を行ってください
• 試薬は氷中で融解させ、使用前によく混ぜてご使用下さい
• ポジティブコントロールとネガティブコントロールを作成
し、並行して実験を行ってください
• 伸長反応時間は、目的のアンプリコン1kb当り15 sec を目安
として設定してください
• マルチプレックス反応では目的断片長に関わらず 90 sec の伸長時間を設定し、ファスト反応は行わないで下さい
• 最適アニール温度を調べるために、初回は 55℃~65℃のグ
ラジエント反応を行うことを推奨いたします。
PRODUCT DETAILShighQu ALLin™ Taq DNA Polymerase は各種の反応に最適化
された ALLin™ buffer が付属したオールインワンタイプのス
タンダードPCR用キットです。GC/ATリッチテンプレート・
コロニーPCR・ファストPCR・マルチプレックスPCRなど、
さまざまな用途において高く安定したパフォーマンスを示し
ます。 ALLin™ Taq DNA Polymerase は従来の Taq DNA Polymeraseと同等の正確性(4.5 x 104 個のヌクレオチド中に1つのエラ
ー)を示します。増幅されたDNA断片は3'側にAが突出した突
出末端を形成するため、TAクローニングにそのまま用いるこ
とができます。
マスターミックスタイプの2X ALLin™ Taq Mastermix (PCM0101, 0105)、ゲルに直接アプライが可能な 2X ALLin™ Red Taq Mastermix (PCM0201, 0205) がご利用可能です。
BENEFITS• 高品質 Taq とバッファーの組み合わせで高性能を実現 • スタンダード or ファストPCRを問わず高収量
• 6 kb までの増幅に対応
• GC/AT リッチテンプレートでも確実に増幅
• Mg2+ と dNTPs プレミックスの 5X ALLin™ PCR Buffer
APPLICATIONS• 断片長 6 kb までのスタンダードなPCR向け
• GC/ATリッチテンプレートからの増幅、コロニー PCR、 ファスト PCR、マルチプレックスPCRに対応
• 3'末端形状:突出末端(TAクローニング可能)
CAT.# SIZE COMPONENTS COMPONENT COMPOSITION
PCE0101400回(50 μl 反応系)
500 u - ALLin™ Taq DNA Polymerase, 5 u/µl4 x 1 ml - 5X ALLin™ PCR Buffer 酵素は保存バッファー中に溶解
dNTPs(終濃度 0.25 mM)と MgCl2(終濃度 3 mM) および反応促進剤・安定剤含有のALLin™ PCR Buffer PCE0105
2000回(50 μl 反応系)
5 x 500 u - ALLin™ Taq DNA Polymerase, 5 u/µl20 x 1 ml - 5X ALLin™ PCR Buffer
Storage: In the dark at -20°C.
ALLin™ Taq DNA Polymerase
PERFORMANCE
highQu ALLin™ Taq DNA Polymerase (上) は、他社製のTaq DNA Polymerase
(下) と比較して高い感度と収量を示します.
テスト条件:ヒトゲノムDNA中のGAPDH遺伝子(1.2 kb、 60% GC-rich)
テンプレートの量は左から200 ng~0.7 pg までのグラジエント
Info Tel: +497250 33 13 401 [email protected]
PRODUCT DETAILShighQu ALLin™ Taq DNA Polymerase は各種の反応に最適化
された ALLin™ buffer が付属したオールインワンタイプのス
タンダードPCR用キットです。GC/ATリッチテンプレート・
コロニーPCR・ファストPCR・マルチプレックスPCRなど、
さまざまな用途において高く安定したパフォーマンスを示し
ます。 ALLin™ Taq DNA Polymerase は従来の Taq DNA Polymeraseと同等の正確性(4.5 x 104 個のヌクレオチド中に1つのエラ
ー)を示します。増幅されたDNA断片は3'側にAが突出した突
出末端を形成するため、TAクローニングにそのまま用いるこ
とができます。
BENEFITS• 高品質 Taq とバッファーの組み合わせで高性能を実現 • 電気泳動用ローディングダイ(赤色トラッキングダイ & 比重調整
剤)プレミックスでPCR後に直接ゲルにアプライが可能 • スタンダード or ファストPCRを問わず高収量
• 6 kb までの増幅に対応
• GC/AT リッチテンプレートでも確実に増幅
APPLICATIONS• 断片長 6 kb までのスタンダードなPCR向け
• GC/ATリッチテンプレートからの増幅、コロニー PCR、 ファスト PCR、マルチプレックスPCRに対応
• 3'末端形状:突出末端(TAクローニング可能)
CAT.# SIZE COMPONENTS COMPONENT COMPOSITION
PCM0201200回(50 μl 反応系)
5 x 1 ml - ALLin™ Red Taq Mastermix, 2X5 x 1 ml - PCR Water
dNTPs(終濃度 0.25 mM)と MgCl2(終濃度 3 mM) 、および
反応促進剤・安定剤、電気泳動用ローディングダイ(トラッキ
ングダイ&比重調整剤)入りのマスターミックス。
PCR Water 付属。PCM0205
1000回(50 μl 反応系)
25 x 1 ml - ALLin™ Red Taq Mastermix, 2X25 x 1 ml - PCR Water
Storage: In the dark at -20°C.
ALLin™ Red Taq Mastermix, 2X
マスターミックス(2X)でのご提供により、ピペッティング回数を減
らして手間とヒューマンエラーを抑制できます。さらに高品質なPCR Water が付属しており、パッケージごとにフレッシュなPCR Waterをご使用いただけます。テンプレートをご用意頂くだけで実験が可
能です。
ALLin™ Red Taq Mastermix, 2X は電気泳動用のローディングダイ
(赤色トラッキングダイ & 比重調整剤)がプレミックスされてお
り、PCR後に直接ゲルにアプライが可能です。2% アガロース TAE ゲルでは、赤色ダイは~350 bpのDNAバンド付近に、1% アガロース
TAEゲルでは~600 bp DNAバンド付近に移動します。
ü 下記に従い50μl の反応液を調整:
Rev. & For. Primers 0.1-0.4 µM final each (≤2 µl of 10 µM)
cDNA Template orgDNA Template
< 100 ng or5 - 500 ng
PCR Water to 25 μl
ALLin™ Red TaqMastermix, 2X
25 µl
ü 泡の発生を避けて穏やかに混合
ü 機器にセットし下記のように設定:
Initial denaturation 1 cycle: 95°C - 1 min
Denaturation 40 cycles: 95°C - 15 sec
Annealing 40 cycles: 55-65°C – 15 sec
Extension 40 cycles: 72°C – 1-90 sec (15 sec/kb)
ü 反応後はアガロースゲルに直接アプライ可能
ü PCR後の反応液は短期なら氷中、長期なら-20℃で保管
PROTOCOL
• コンタミネーションを避けるため、実験台を清潔に保つ、手袋
をはめる、滅菌済みチューブやフィルターチップを使用するな
どの対策を行ってください
• ポジティブコントロールとネガティブコントロールを作成し、
並行して実験を行ってください
• 試薬は氷中で融解させ、使用前によく混ぜてご使用下さい
• 伸長反応時間は、目的のアンプリコン1kb当り15 sec を目安と
して設定してください
• マルチプレックス反応では目的断片長に関わらず 90 sec の伸長
時間を設定し、ファスト反応は行わないで下さい
• 最適アニール温度を調べるために、初回は 55℃~65℃のグラジ
エント反応を行うことを推奨いたします。
• 本製品にプレミックスのトラッキングダイ(赤)は、2% アガロ
ース TAE ゲルでは 350 bpのDNAバンド付近に、1% アガロース
TAEゲルでは 600 bp のDNAバンド付近に移動します。
IN VITRO RESEARCH USE ONLY
order@ highQu.com Order Tel: +497250 33 13 401 33
ü 下記に従い50μl の反応液を調整:
Rev. & For. Primers 0.1-0.4 µM final each (≤2 µl of 10 µM)
cDNA Template orgDNA Template
< 100 ng or5-500 ng
PCR Water to 25 μl
ALLin™ TaqMastermix, 2X
25 µl
ü 泡の発生を避けて穏やかに混合
ü 機器にセットし下記のように設定:
Initial denaturation 1 cycle: 95°C - 1 min
Denaturation 40 cycles: 95°C - 15 sec
Annealing 40 cycles: 55-65°C – 15 sec
Extension 40 cycles: 72°C – 1-90 sec (15 sec/kb)
ü PCR後の反応液は短期なら氷中、長期なら-20℃で保管
PROTOCOL
• コンタミネーションを避けるため、実験台を清潔に保つ、手
袋をはめる、滅菌済みチューブやフィルターチップを使用す
るなどの対策を行ってください
• ポジティブコントロールとネガティブコントロールを作成
し、並行して実験を行ってください
• 試薬は氷中で融解させ、使用前によく混ぜてご使用下さい
• 伸長反応時間は、目的のアンプリコン1kb当り15 sec を目安
として設定してください
• マルチプレックス反応では目的断片長に関わらず 90 sec の伸長時間を設定し、ファスト反応は行わないで下さい
• 最適アニール温度を調べるために、初回は 55℃~65℃のグ
ラジエント反応を行うことを推奨いたします。
PRODUCT DETAILShighQu ALLin™ Taq DNA Polymerase は各種の反応に最適化
された ALLin™ buffer が付属したオールインワンタイプのス
タンダードPCR用キットです。GC/ATリッチテンプレート・
コロニーPCR・ファストPCR・マルチプレックスPCRなど、
さまざまな用途において高く安定したパフォーマンスを示し
ます。 ALLin™ Taq DNA Polymerase は従来の Taq DNA Polymeraseと同等の正確性(4.5 x 104 個のヌクレオチド中に1つのエラ
ー)を示します。増幅されたDNA断片は3'側にAが突出した突
出末端を形成するため、TAクローニングにそのまま用いるこ
とができます。
BENEFITS• 高品質 Taq とバッファーの組み合わせで高性能を実現 • スタンダード or ファストPCRを問わず高収量
• 6 kb までの増幅に対応
• GC/AT リッチテンプレートでも確実に増幅
APPLICATIONS• 断片長 6 kb までのスタンダードなPCR向け
• GC/ATリッチテンプレートからの増幅、コロニー PCR、 ファスト PCR、マルチプレックスPCRに対応
• 3'末端形状:突出末端(TAクローニング可能)
CAT.# SIZE COMPONENTS COMPONENT COMPOSITION
PCM0101 200 r of 50 μl5 x 1 ml - ALLin™ Taq Mastermix, 2X5 x 1 ml - PCR Water 1X mastermix contains 0.25 mM dNTPs, 3 mM MgCl2,
enhancers, stabilizers.PCM0105 1000 r of 50 μl
25 x 1 ml - ALLin™ Taq Mastermix, 2X25 x 1 ml - PCR Water
Storage: In the dark at -20°C.
ALLin™ Taq Mastermix, 2X
IN VITRO RESEARCH USE ONLY
マスターミックス(2X)でのご提供により、ピペッティング回数を減
らして手間とヒューマンエラーを抑制できます。さらに高品質なPCR Water が付属しており、パッケージごとにフレッシュなPCR Waterをご使用いただけます。テンプレートをご用意頂くだけで実験が可
能です。
Info Tel: +497250 33 13 401 [email protected]
PRODUCT DETAILShighQu Taq DNA Polymerase はスタンダードなPCRにおいて安定
した能力を発揮するクラシカルなPCR用キットです。本キットでは 組み換え大腸菌より高度な品質管理のもと抽出・精製された高品質
なTaq DNA Polymerase を使用しています。
Taq DNA Polymerase は熱安定性 5' - 3' DNA 合成酵素です。3' - 5' エクソヌクレアーゼ(プルーフリーディング)活性を示さず、わず
かに 5' - 3' エクソヌクレアーゼ活性を示します。ポリメラーゼの持
つ末端デオキシヌクレオチド転移活性によりPCR産物の3'末端には
アデニンが付与されるため、得られたDNA断片はそのままTAクロ
ーニングに用いることができます。
Taq DNA Polymerase は、4.5 x 104 個のヌクレオチド配列中に1つの割合でしかエラーを起こさない正確性を示します。
BENEFITS• スタンダード or ファストPCRを問わず高収量
• 5 kb までの増幅に対応
• 複雑なテンプレートでも力強い増幅
APPLICATIONS• 断片長 5 kb までのスタンダードなPCR向け
• RT-PCR、コロニーPCRに対応
• 3'末端形状:突出末端(TAクローニング可能)
• ジェノタイピング、スクリーニング
CAT.# SIZE COMPONENTS COMPONENT COMPOSITION
PCE02011200回(50 μl 反応系)
1500 u - Taq DNA Polymerase, 5 u/µl4 x 2 ml - 10X PCR Buffer2 x 2 ml - 50 mM MgCl2
酵素は保存バッファー中に溶解
反応促進剤・安定剤含有の10X PCR Buffer50 mM MgCl2※ dNTPsは含まれていません PCE0202
2400回(50 μl 反応系)
2 x 1500 u - Taq DNA Polymerase, 5 u/µl8 x 2 ml - 10X PCR Buffer4 x 2 ml - 50 mM MgCl2
Storage: In the dark at -20°C.
Taq DNA Polymerase
ü 下記に従い50μl の反応液を調整:
Rev. & For. Primers 0.1-0.5 µM final (1-2 µl of 10 µM each)
cDNA Template orgDNA Template
< 100 ng or5 - 500 ng
10X PCR Buffer 5 μl
dNTP Mix(NUM0201)
0.25 mM final (1.25 µl of 10 mM dNTP mix)
50 mM Mg Cl2 5 μl
Water (PCR Water,WAT0110)
to 49 μl
Taq DNAPolymerase, 5 u/µl
0.25 - 1 µl
ü 泡の発生を避けて穏やかに混合し、機器を下記で設定:
Initial denaturation 1 cycle: 95°C - 60 sec
Denaturation 30-40 cycles: 95°C - 15 sec
Annealing 30-40 cycles: 55-65°C – 15 sec
Extension 30-40 cycles: 72 °C – 15-90 sec
Final Extension 1 cycle: 72°C – 5 min (for TA cloning)
ü PCR後の反応液は短期なら氷中、長期なら-20℃で保管
PROTOCOL• コンタミネーションを避けるため、実験台を清潔に保つ、手
袋をはめる、滅菌済みチューブやフィルターチップを使用す
るなどの対策を行ってください
• ポジティブコントロールとネガティブコントロールを作成
し、並行して実験を行ってください
• 試薬は氷中で融解させ、使用前によく混ぜてご使用下さい
• Taq DNA Polymerase の DNA伸長速度は ~ 2000 塩基/minです。そのため、目的とするDNA断片長に応じて 15-90 sec の伸長反応時間を設定して下さい。
• 最適アニール温度を調べるために、初回は 55℃~65℃のグ
ラジエント反応を行うことを推奨いたします。
IN VITRO RESEARCH USE ONLY
RECOMMENDATIONS本キットには dNTPs が含まれていません。別途お買い求め下さい。
• 一般的なPCR反応液中のdNTP濃度は、A,T,G,C それぞれ0.2 - 0.25 mM です。dNTPsの濃度を高めるとPCR収量が増加しますが、同時
にMg2+イオンと不要に結合してしまう恐れがあり、双方がバランス
よく存在する必要があります。この2つの濃度が濃すぎるとエラー
が発生しやすくなり正確なPCRを阻害することがあります。
• 使用前にdNTPsとMgCl2をそれぞれよく混ぜてからご使用下さい。
• スタンダードなPCR条件では、MgCl2:3 mM, dNTPs :それぞれ
0.25 mM となるように調整してください。
Starting dNTP Mix conc.
Vol. of dNTP mix in 50 µl r.
10 mM25 mM
1.25 µl0.5 µl
Final Mg2+
conc. in r.Vol. of 50 mM MgCl2 in 50 µl rxn to achieve desired conc.
2 mM3 mM
2 µl3 µl
order@ highQu.com Order Tel: +497250 33 13 401 35
ü 下記に従い50μl の反応液を調整:
Rev. & For. Primers 0.1-0.4 µM final each (≤2 µl of 10 µM)
cDNA Template orgDNA Template
< 100 ng or5-500 ng
5X ALLin™ PCR Buffer 10 μl
Water (PCR Water, WAT0110)
to 49 μl
ALLin™ Hot Start Taq DNA Polymerase, 5 u/µl
0.25 - 1 µl
ü 泡の発生を避けて穏やかに混合
ü 機器にセットし下記のように設定:
Initial denaturation 1 cycle: 95°C – 1-2 min
Denaturation 40 cycles: 95°C - 15 sec
Annealing 40 cycles: 55-65°C – 15 sec
Extension 40 cycles: 72°C – 1-90 sec (15 sec/kb)
ü PCR後の反応液は短期なら氷中、長期なら-20℃で保管
PROTOCOL
• コンタミネーションを避けるため、実験台を清潔に保つ、手
袋をはめる、滅菌済みチューブやフィルターチップを使用す
るなどの対策を行ってください
• ポジティブコントロールとネガティブコントロールを作成
し、並行して実験を行ってください
• 試薬は氷中で融解させ、使用前によく混ぜてご使用下さい
• 伸長反応時間は、目的のアンプリコン1kb当り15 sec を目安
として設定してください
• マルチプレックス反応では目的断片長に関わらず 90 sec の伸長時間を設定し、ファスト反応は行わないで下さい
• 最適アニール温度を調べるために、初回は 55℃~65℃のグ
ラジエント反応を行うことを推奨いたします。
PRODUCT DETAILShighQu ALLin™ Hot Start Taq Polymerase は最高の感度を
誇るホットスタートタイプのDNAポリメラーゼです。Small molecular inhibition hot-start テクノロジーによるホットスタ
ート機能は、初期熱変性(95℃)で inhibitor が分解されるま
で酵素活性をブロックし、非特異的な反応を抑制することによ
りPCR性能を向上させます。さらに各種の反応に最適化された ALLin™ buffer が付属しており、GC/ATリッチテンプレート・
クルードサンプルPCR・ファストPCR・マルチプレックスPCRなど、さまざまな用途において高く安定したパフォーマンスを
示します。
ALLin™ Hot Start Taq DNA Polymerase は従来のTaq と同等の
正確性を示し、3'突出末端を形成します。マスターミックスタ
イプの2X ALLinTM Hot Start Taq Mastermix (HSM0201, 0205) がご利用可能です。ぜひご検討下さい。
BENEFITS• Small molecular inhibition hot-start テクノロジーと反応促進剤・
安定剤含有のALLin™ PCR Buffer の組み合わせで高性能を実現
• 極微量のサンプルも高感度に検出する最高の性能
• スタンダード or ファストPCRを問わず高収量
• 6 kb までの増幅に対応
• GC/AT リッチ・クルードサンプルでも確実に増幅
• Mg2+ と dNTPs プレミックスの 5X ALLin™ PCR Buffer
APPLICATIONS• 断片長6 kb までの高感度ホットスタートPCR• 極微量のサンプルでも高感度に検出可能
• GC/ATリッチテンプレートからの増幅、コロニー PCR、 ファスト PCR、マルチプレックスPCRに対応
• 3'末端形状:突出末端(TAクローニング可能)
CAT.# SIZE COMPONENTS COMPONENT COMPOSITION
HSE0101400回(50 μl 反応系)
2x 250 u - ALLin™ Hot Start Taq Polymerase, 5 u/µl4 x 1 ml - 5X ALLin™ PCR Buffer 酵素は保存バッファー中に溶解
dNTPs(終濃度 0.25 mM)と MgCl2(終濃度 3 mM) および反応促進剤・安定剤含有のALLin™ PCR Buffer HSE0105
2000回(50 μl 反応系)
10 x 250 u - ALLin™ Hot Start Taq Polymerase, 5 u/µl20 x 1 ml - 5X ALLin™ PCR Buffer
Storage: In the dark at -20°C.
ALLin™ Hot Start Taq Polymerase
IN VITRO RESEARCH USE ONLY
PERFORMANCEhighQu ALLin™ Hot
Start Taq DNA Polyme-
rase は他社製品と比較
して高い感度と収量を示
します。
テスト条件:ヒトゲノ
ムDNAより0.4 kbの領
域を、左(100 ng)か
ら10倍づつ希釈し、フ
ァストサイクリングに
て増幅。
ALLin™ Hot
Start Taq
Competitor K
Competitor L
Info Tel: +497250 33 13 401 [email protected]
BENEFITS• 最高の感度と特異性を持ち、極微量のテンプレートからでも高感度
に検出&バックグラウンドなし。
• スタンダード or ファストPCRを問わず高収量
• 6 kb までの増幅に対応
• GC/AT リッチ・クルードサンプルでも確実に増幅
• 電気泳動用ローディングダイ(赤色トラッキングダイ & 比重調整
剤)プレミックスでPCR後に直接ゲルにアプライが可能
APPLICATIONS• 断片長6 kb までの高感度ホットスタートPCR• 極微量のサンプルでも高感度に検出可能
• GC/ATリッチテンプレートからの増幅、コロニー PCR、 ファスト PCR、マルチプレックスPCRに対応
• 3'末端形状:突出末端(TAクローニング可能)
CAT.# SIZE COMPONENTS COMPONENT COMPOSITION
HSM0301200回(50 μl 反応系)
5 x 1 ml - ALLin™ HS Red Taq Mastermix, 2X 5 x 1 ml - PCR Water
dNTPs(終濃度 0.25 mM)と MgCl2(終濃度 3 mM) 、およ
び反応促進剤・安定剤、電気泳動用ローディングダイ(トラ
ッキングダイ&比重調整剤)入りのマスターミックス。
PCR Water 付属。HSM0305
1000回(50 μl 反応系)
25 x 1 ml - ALLin™ HS Red Taq Mastermix, 2X 25 x 1 ml - PCR Water
Storage: In the dark at -20°C.
ALLin™ HS Red Taq Mastermix, 2X
PROTOCOL
• コンタミネーションを避けるため、実験台を清潔に保つ、手袋を
はめる、滅菌済みチューブやフィルターチップを使用するなどの
対策を行ってください
• ポジティブコントロールとネガティブコントロールを作成し、並
行して実験を行ってください
• 試薬は氷中で融解させ、使用前によく混ぜてご使用下さい
• 伸長反応時間は、目的のアンプリコン1kb当り15 sec を目安とし
て設定してください
• マルチプレックス反応では目的断片長に関わらず 90 sec の伸長時
間を設定し、ファスト反応は行わないで下さい
• 最適アニール温度を調べるために、初回は 55℃~65℃のグラジエ
ント反応を行うことを推奨いたします。
•• 本製品にプレミックスのトラッキングダイ(赤)は、2% アガロ
ース TAE ゲルでは 350 bpのDNAバンド付近に、1% アガロース
TAEゲルでは 600 bp のDNAバンド付近に移動します。
IN VITRO RESEARCH USE ONLY
PRODUCT DETAILShighQu ALLin™ Hot Start Taq Polymerase は最高の感度を誇る
ホットスタートタイプのDNAポリメラーゼです。Small molecu-lar inhibition hot-start テクノロジーによるホットスタート機能
は、初期熱変性(95℃)で inhibitor が分解されるまで酵素活性
をブロックし、非特異的な反応を抑制することによりPCR性能
を向上させます。
さらに各種の反応に最適化された バッファー組成により、GC/ATリッチテンプレート・クルードサンプルPCR・ファスト
PCR・マルチプレックスPCRなど、さまざまな用途において高く
安定したパフォーマンスを示します。
ALLin™ Hot Start Taq DNA Polymerase は従来のTaq と同等の
正確性を示し、3'突出末端を形成します。PCR産物はTAクロー
ニングにそのまま使用可能です。
マスターミックス(2X)でのご提供により、ピペッティング回数を減
らして手間とヒューマンエラーを抑制できます。さらに高品質なPCR Water が付属しており、パッケージごとにフレッシュなPCR Waterをご使用いただけます。テンプレートをご用意頂くだけで実験が可
能です。
ALLin™ Red Taq Mastermix, 2X は電気泳動用のローディングダイ
(赤色トラッキングダイ & 比重調整剤)がプレミックスされてお
り、PCR後に直接ゲルにアプライが可能です。2% アガロース TAE ゲルでは、赤色ダイは~350 bpのDNAバンド付近に、1% アガロース
TAEゲルでは~600 bp DNAバンド付近に移動します。キットにはPCR Waterが付属しています。
本品はクルードサンプルからの高感度PCRを可能にする SampleIN™ Direct PCR Kit (DPK0101/DPK0105) にも付属しています。
ü 下記に従い50μl の反応液を調整:
Rev. & For. Primers 0.1-0.4 µM final each (≤2 µl of 10 µM)
cDNA Template orgDNA Template
< 100 ng or5-500 ng
PCR Water to 25 μl
ALLin™ HS Red Taq Mastermix, 2X
25 µl
ü 泡の発生を避けて穏やかに混合
ü 機器にセットし下記のように設定:
Initial denaturation 1 cycle: 95°C – 1-2 min
Denaturation 40 cycles: 95°C - 15 sec
Annealing 40 cycles: 55-65°C – 15 sec
Extension 40 cycles: 72°C – 1-90 sec (15 sec/kb)
ü 反応後はアガロースゲルに直接アプライ可能
ü PCR後の反応液は短期なら氷中、長期なら-20℃で保管
order@ highQu.com Order Tel: +497250 33 13 401 37
ALLin™ Hot Start Taq Mastermix, 2X
IN VITRO RESEARCH USE ONLY
BENEFITS• 長鎖合成, 高正確性, ホットスタート型DNAポリメラーゼ
• Small molecular inhibitor hot-start テクノロジーにより極少量テン
プレートからでも高感度に検出が可能
• 最大 35 kb までの長鎖合成に対応。通常のTaqの5倍の正確
• スタンダード or ファストPCRを問わず高収量
• GC/AT リッチ・クルードサンプルでも強力に増幅
APPLICATIONS• 断片長6 kb までの高感度ホットスタートPCR• 極微量のサンプルでも高感度に検出可能
• GC/ATリッチテンプレートからの増幅、コロニー PCR、 ファスト PCR、マルチプレックスPCRに対応
• 3'末端形状:突出末端(TAクローニング可能)
CAT.# SIZE COMPONENTS COMPONENT COMPOSITION
HSM0201200回(50 μl 反応系)
5 x 1 ml - ALLin™ Hot Start Taq Mastermix, 2X 5 x 1 ml - PCR Water dNTPs(終濃度 0.25 mM)と MgCl2(終濃度 3 mM) および
反応促進剤・安定剤入りマスターミックス。
PCR Water 付属。HSM02051000回(50 μl 反応系)
25 x 1 ml - ALLin™ Hot Start Taq Mastermix, 2X 25 x 1 ml - PCR Water
Storage: In the dark at -20°C.
PRODUCT DETAILShighQu ALLin™ Hot Start Taq Polymerase は最高の感度を誇る
ホットスタートタイプのDNAポリメラーゼです。Small molecu-lar inhibition hot-start テクノロジーによるホットスタート機能
は、初期熱変性(95℃)で inhibitor が分解されるまで酵素活
性をブロックし、非特異的な反応を抑制することによりPCR性能を向上させます。さらに各種の反応に最適化された バッファ
ー組成により、GC/ATリッチテンプレート・クルードサンプル
PCR・ファストPCR・マルチプレックスPCRなど、さまざまな用
途において高く安定したパフォーマンスを示します。
ALLin™ Hot Start Taq DNA Polymerase は従来のTaq と同等の
正確性を示し、3'突出末端を形成します。PCR産物はTAクロー
ニングにそのまま使用可能です。
マスターミックス(2X)でのご提供により、ピペッティング回数を減
らして手間とヒューマンエラーを抑制できます。さらに高品質なPCR Water が付属しており、パッケージごとにフレッシュなPCR Waterをご使用いただけます。テンプレートをご用意頂くだけで実験が可
能です。
PROTOCOL
• コンタミネーションを避けるため、実験台を清潔に保つ、
手袋をはめる、滅菌済みチューブやフィルターチップを使
用するなどの対策を行ってください
• ポジティブコントロールとネガティブコントロールを作成
し、並行して実験を行ってください
• 試薬は氷中で融解させ、使用前によく混ぜてご使用下さい
• 伸長反応時間は、目的のアンプリコン1kb当り15 sec を目
安として設定してください
• マルチプレックス反応では目的断片長に関わらず 90 sec の伸長時間を設定し、ファスト反応は行わないで下さい
• 最適アニール温度を調べるために、初回は 55℃~65℃のグ
ラジエント反応を行うことを推奨いたします。
ü 下記に従い50μl の反応液を調整:
Rev. & For. Primers 0.1-0.4 µM final each (≤2 µl of 10 µM)
cDNA Template orgDNA Template
< 100 ng or5-500 ng
PCR Water to 25 μl
ALLin™ Hot Start Taq Mastermix, 2X
25 µl
ü 泡の発生を避けて穏やかに混合
ü 機器にセットし下記のように設定:
Initial denaturation 1 cycle: 95°C – 1-2 min
Denaturation 40 cycles: 95°C - 15 sec
Annealing 40 cycles: 55-65°C – 15 sec
Extension 40 cycles: 72°C – 1-90 sec (15 sec/kb)
ü PCR後の反応液は短期なら氷中、長期なら-20℃で保管
Info Tel: +497250 33 13 401 [email protected]
IN VITRO RESEARCH USE ONLY
ALLin™ RPH Polymerase
CAT.# SIZE COMPONENTS COMPONENT COMPOSITION
HLE0101200回(50 μl 反応系)
250 u - ALLin™ RPH Polymerase, 5 u/µl2 x 1 ml - 5X ALLin™ RPH Buffer 酵素は保存バッファー中に溶解
dNTPs(終濃度 0.25 mM)と MgCl2(終濃度 3 mM) および反応促進剤・安定剤含有のALLin™ RPH Buffer HLE0105
1000回(50 μl 反応系)
5 x 250 u - ALLin™ RPH Polymerase, 5 u/µl10 x 1 ml - 5X ALLin™ RPH Buffer
Storage: In the dark at -20°C.
APPLICATIONS• 最大35 kb の長鎖PCR & 通常のTaqの5倍の正確性 • GC/ATリッチテンプレートからの増幅、コロニー PCR、 ファスト PCR、マルチプレックスPCRに対応
• 3'末端形状:突出末端(TAクローニング可能)
BENEFITS• 長鎖合成, 高正確性, ホットスタート型DNAポリメラーゼ
• Small molecular inhibitor hot-start テクノロジーにより極少量テ
ンプレートからでも高感度に検出が可能
• 最大 35 kb までの長鎖合成に対応。通常のTaqの5倍の正確
• スタンダード or ファストPCRを問わず高収量
• GC/AT リッチ・クルードサンプルでも強力に増幅
• Mg2+ と dNTPs プレミックスの 5X ALLin™ RPH Buffer
PRODUCT DETAILShighQu ALLin™ RPH Polymerase は、Robust(強力な)
・Proofreading(修正機能付き≒高正確性の)・ Hot-start(ホットスタート型)の DNAポリメラーゼです。最大で35 kb の長鎖合成に対応し、かつ通常のTaq と比較して5倍の正確性を
誇ります。さらにGC/ATリッチテンプレート・クルードサンプ
ルPCR・ファストPCR・マルチプレックスPCRなど、さまざま
な用途において高く安定したパフォーマンスを示します。
ALLin™ RPH Polymerase は3'突出末端を形成し、TAクローニ
ングにそのまま用いることができます。
マスターミックスタイプの2X ALLin™ RPH Mastermix (HLM0101, 0105) がご利用可能です。
PERFORMANCEALLin™ RPH Polymerase
は 25 kb の長鎖PCRにお
いて、他社製品と比較し
て高い感度と収量を示し
ます。
テスト条件:ヒトゲノム
DNAよりp53 遺伝子領域
(25 kb) を、200 ng (
左)より2倍づつ希釈し
増幅。
ALLin™ RPH Pol
Competitor R
Competitor L
PROTOCOL
• コンタミネーションを避けるため、実験台を清潔に保つ、手
袋をはめる、滅菌済みチューブやフィルターチップを使用す
るなどの対策を行ってください
• ポジティブコントロールとネガティブコントロールを作成
し、並行して実験を行ってください
• 試薬は氷中で融解させ、使用前によく混ぜてご使用下さい
• 5 kb より短い断片を増幅する場合は、1 kb 当り15 sec の伸
長反応時間を設定してください。5 kb を超える場合は、1 kb 当り40-60 sec の伸長反応時間を設定してください。
• マルチプレックス反応では目的断片長に関わらず 90 sec の伸長時間を設定し、ファスト反応は行わないで下さい
• 最適アニール温度を調べるために、初回は 55℃~65℃のグ
ラジエント反応を行うことを推奨いたします。
ü 下記に従い50μl の反応液を調整:
Rev. & For. Primers 0.1-0.4 µM final each (≤2 µl of 10 µM)
cDNA Template orgDNA Template
< 100 ng or5-500 ng
5X ALLin™ RPH Buffer 10 μl
Water (PCR Water, WAT0110)
to 49 μl
ALLin™ RPH Polymerase, 5 u/µl
0.25 - 1 µl
ü 泡の発生を避けて穏やかに混合
ü 機器にセットし下記のように設定:
Initial denaturation 1 cycle: 95°C – 1 min
Denaturation 25-35 cycles: 95°C - 15 sec
Annealing 25-35 cycles: 55-65°C – 15 sec
Extension 25-35 cycles: 72°C – 10 min
ü PCR後の反応液は短期なら氷中、長期なら-20℃で保管
order@ highQu.com Order Tel: +497250 33 13 401 39
APPLICATIONS• 最大35 kb の長鎖PCR & 通常のTaqの5倍の正確性 • GC/ATリッチテンプレートからの増幅、コロニー PCR、 ファスト PCR、マルチプレックスPCRに対応
• 3'末端形状:突出末端(TAクローニング可能)
CAT.# SIZE COMPONENTS COMPONENT COMPOSITION
HLM0101200回(50 μl 反応系)
5 x 1 ml - ALLin™ RPH Mastermix, 2X 5 x 1 ml - PCR Water dNTPs(終濃度 0.25 mM)と MgCl2(終濃度 3 mM) および
反応促進剤・安定剤入りマスターミックス。
PCR Water 付属。HLM01051000回(50 μl 反応系)
25 x 1 ml - ALLin™ RPH Mastermix, 2X 25 x 1 ml - PCR Water
Storage: In the dark at -20°C.
ALLin™ RPH Mastermix, 2X
PROTOCOL• コンタミネーションを避けるため、実験台を清潔に保つ、
手袋をはめる、滅菌済みチューブやフィルターチップを使
用するなどの対策を行ってください
• ポジティブコントロールとネガティブコントロールを作成
し、並行して実験を行ってください
• 試薬は氷中で融解させ、使用前によく混ぜてご使用下さい
• 5 kb より短い断片を増幅する場合は、1 kb 当り15 sec の伸
長反応時間を設定してください。5 kb を超える場合は、1 kb 当り40-60 sec の伸長反応時間を設定してください。
• マルチプレックス反応では目的断片長に関わらず 90 sec の伸長時間を設定し、ファスト反応は行わないで下さい
• 最適アニール温度を調べるために、初回は 55℃~65℃のグ
ラジエント反応を行うことを推奨いたします。
IN VITRO RESEARCH USE ONLY
PRODUCT DETAILShighQu ALLin™ RPH Polymerase は、Robust(強力な)
・Proofreading(修正機能付き≒高正確性の)・ Hot-start(ホ
ットスタート型)の DNAポリメラーゼです。最大で35 kb の長
鎖合成に対応し、かつ通常のTaq と比較して5倍の正確性を誇
ります。さらにGC/ATリッチテンプレート・クルードサンプル
PCR・ファストPCR・マルチプレックスPCRなど、さまざまな用
途において高く安定したパフォーマンスを示します。
ALLin™ RPH Polymerase は3'突出末端を形成し、TAクローニン
グにそのまま用いることができます。
マスターミックス(2X)でのご提供により、ピペッティング回数を減
らして手間とヒューマンエラーを抑制できます。さらに高品質なPCR Water が付属しており、パッケージごとにフレッシュなPCR Waterをご使用いただけます。テンプレートをご用意頂くだけで実験が可
能です。
ü 下記に従い50μl の反応液を調整:
Rev. & For. Primers 0.1-0.4 µM final each (≤2 µl of 10 µM)
cDNA Template orgDNA Template
< 100 ng or5-500 ng
PCR Water to 25 μl
ALLin™ RPHMastermix, 2X
25 µl
ü 泡の発生を避けて穏やかに混合
ü 機器にセットし下記のように設定:
Initial denaturation 1 cycle: 95°C – 1-2 min
Denaturation 25-40 cycles: 95°C - 15 sec
Annealing 25-40 cycles: 55-65°C – 15 sec
Extension 25-40 cycles: 72°C – 10 min)
ü PCR後の反応液は短期なら氷中、長期なら-20℃で保管
BENEFITS• 長鎖合成, 高正確性, ホットスタート型DNAポリメラーゼ
• Small molecular inhibitor hot-start テクノロジーにより極少量テン
プレートからでも高感度に検出が可能
• 最大 35 kb までの長鎖合成に対応。通常のTaqの5倍の正確
• スタンダード or ファストPCRを問わず高収量
• GC/AT リッチ・クルードサンプルでも強力に増幅
Info Tel: +497250 33 13 401 [email protected]
ALLin™ HiFi DNA Polymerase
IN VITRO RESEARCH USE ONLY
ü 下記に従い50μl の反応液を調整:
Rev. & For. Primers 0.1-0.4 µM final each (≤2 µl of 10 µM)
cDNA Template orgDNA Template
< 100 ng or5-500 ng
5X ALLin™ HiFi Buffer 10 μl
Water (PCR Water,WAT0110)
to 49 μl
ALLin™ HiFi DNAPolymerase, 2 u/µl
0.5 µl
ü 泡の発生を避けて穏やかに混合
ü 機器にセットし下記のように設定:
Initial denaturation 1 cycle: 95°C - 1 min
Denaturation 25-35 cycles: 95°C - 15 sec
Annealing 25-35 cycles: 55-65°C – 15 sec
Extension 25-35 cycles: 72°C – 30 sec (30 sec/kb)
ü PCR後の反応液は短期なら氷中、長期なら-20℃で保管
PROTOCOL
• コンタミネーションを避けるため、実験台を清潔に保つ、手
袋をはめる、滅菌済みチューブやフィルターチップを使用す
るなどの対策を行ってください
• ポジティブコントロールとネガティブコントロールを作成
し、並行して実験を行ってください
• 試薬は氷中で融解させ、使用前によく混ぜてご使用下さい
• 伸長反応時間は、目的のアンプリコン1kb当り30sec を目安
として設定してください
• 最適アニール温度を調べるために、初回は 55℃~65℃のグ
ラジエント反応を行うことを推奨いたします。
PRODUCT DETAILShighQu ALLin™ HiFi DNA Polymerase はPfu polymerase を元
にいくつかの改良が施された、最高品質の配列修正機能を持
つDNAポリメラーゼです。最適化されたALLin™ HiFi Bufferと組み合わせることで、通常のTaqと比較して50倍の正確性と
10 kb までの長鎖合成を兼ね備えています。さらにGC/ATリッ
チテンプレート・クルードサンプルPCR・ファストPCRにも対
応しています。
ALLin™ HiFi DNA Polymerase で増幅されたDNA断片は平滑末
端を形成しているため、平滑末端ライゲーションにそのまま
使用できます。End-polishing および DNA 末端のリン酸化に
は、HighEnd™ Repair Kit (HER0101)がご利用可能です。
APPLICATIONS• 通常のTaqと比較して50倍の正確性(Fidelity)• 最大10 kb の長鎖合成
• GC/ATリッチテンプレートからの増幅、クルードサンプル
PCR、ファスト PCRに対応
• 3'末端形状:平滑末端
CAT.# SIZE COMPONENTS COMPONENT COMPOSITION
HLE0201200回(50 μl 反応系)
200 u - ALLin™ HiFi DNA Polymerase, 2 u/µl3 x 1 ml - 5X ALLin™ HiFi Buffer 酵素は保存バッファー中に溶解
dNTPs(終濃度 0.25 mM)と MgCl2(終濃度 3 mM) および反応促進剤・安定剤含有のALLin™ HiFi Buffer HLE0205
1000回(50 μl 反応系)
5 x 200 u - ALLin™ HiFi DNA Polymerase, 2 u/µl15 x 1 ml - 5X ALLin™ HiFi Buffer
Storage: In the dark at -20°C.
PERFORMANCE
highQu ALLin™ HiFi DNA Polymerase (上) は、他社同等製品(下)と比較し
て高い感度と収量を示します。
テスト条件:ヒトゲノムDNAより 1 kb のGAPDH遺伝子領域(60% GC)
を、100 ng (左)から2倍づつ8段階に希釈し増幅。
BENEFITS• Pfu ベースの配列修正機能を持つ酵素と最適化されたバッファー
• 通常のTaqと比較して50倍の正確性
• 最大 10 kb の長鎖合成に対応
• スタンダード or ファストPCRを問わず高収量
• GC/AT リッチ・クルードサンプルでも強力に増幅
• Mg2+ と dNTPs プレミックスの 5X ALLin™ HiFi Buffer
IN VITRO RESEARCH USE ONLY
order@ highQu.com Order Tel: +497250 33 13 401 41
SampleIN™ Direct PCR Kit
PRODUCT DETAILSSampleIN™ Direct PCR Kit は煩雑なテンプレートの精製を省いた
ダイレクトPCRを可能にするプレミアムなキットです。マウステー
ルをはじめとする哺乳動物組織、毛根、口内粘膜、血液などから直
接PCRを行うことができます。DPK Lysis Buffer と DPK Protease Buffer を用いたDNA抽出はわずか15分で反応が完了し、そのまま ALLin™ HS Red Taq Mastermixを用いた強力&高速 な PCRを行うこ
とで、実験開始から最短50分でPCRを完了させることができます。
さらにローディングダイがプレミックスされているため、PCR産物
はゲルに直接アプライが可能です。
ALLin™ HS Red Taq Mastermixは高収量・高精度・低バックグラウンド
を可能にする高性能ホットスタート型 Taq ポリメラーゼを使用してお
り、最適化されたバッファ組成と合わせてファストPCR・GC/ATリッチ
サンプルPCR・3ペアまでのマルチプレックスPCRに対応可能です。プ
レミックスされているトラッキングダイ(赤)は、2% TAE アガロ
ースゲルで350 bp DNA近辺に、1%ゲルでは600 bp DNA近辺に移
動します。PCR産物は3'突出末端を形成し、そのままTAクローニン
グ・シーケンス・およびその他アプリケーションに使用できます。
APPLICATIONS• テンプレート精製不要のダイレクトPCR• マウスのジェノタイピング、ノックアウト解析に最適
• マウステール、マウス耳、その他哺乳動物組織、FFPE(ホル
マリン固定パラフィン包埋)サンプル、毛根、口内粘膜、血
液サンプル(EDTA、FTA等)からのダイレクトPCR
CAT.# SIZE COMPONENTS COMPONENT COMPOSITION
DPK010180回(50 µl)
1.6 ml - DPK Lysis Buffer, 5X0.8 ml - DPK Protease Buffer, 10X2 x 1 ml - ALLin™ HS Red Taq Mastermix, 2X
哺乳動物組織の溶解に必要とされるすべてのコンポーネントを含むDPK Lysis Buffer。サンプルに含まれPCR阻害要因となるタンパク質を分解する DPK Protease Buffer。最適濃度の dNTPs、MgCl2、ゲルローディングダイがプレミックスの
ALLin™ HS Red Taq Mastermix DPK0105
400回 (50 µl)
5 x 1.6 ml - DPK Lysis Buffer, 5X5 x 0.8 ml - DPK Protease Buffer, 10X10 x 1 ml - ALLin™ HS Red Taq Mastermix, 2X
Storage: In the dark at -20°C. ALLin™ HS Red Taq Mastermix can be ordered separately: HSM0301 / HSM0305.
ü 下記に従い50μl の反応液を調整:
Rev. & For. Primers 0.1-0.4 µM final each (≤ 2 µl of 10 µM)
Template 1-5 µl of extraction supernatant
PCR Water to 25 μl
ALLin™ HS Red Taq Mastermix, 2X
25 µl
ü 泡を避け穏やかに混合し、機器にセットし下記の様に設定
Initial denaturation 1 cycle: 95°C - 2 min
Denaturation 40 cycles: 95°C - 15 sec
Annealing 40 cycles: 55-65°C – 15 sec
Extension 40 cycles: 72°C – 15 sec/kb(90 sec for multiplex)
ü PCR mixはローディングダイ含有で、直接ゲルにアプライできます。
ü PCR後の反応液は短期なら氷中、長期なら-20℃で保管
I. SAMPLE DNA EXTRACTION PROTOCOL
• コンタミを避けるため、実験台を清潔に保つ、手袋をはめ
る、滅菌済み消耗品を使用するなどの対策を行ってください
• 2種類のDPK Bufferを室温で融解させ、よく混ぜてください
• 下記のように 100 µl の反応液を調整してください。口腔粘膜
を使用する場合は300 µl にスケールアップしてください。
IN VITRO RESEARCH USE ONLY
SAMPLE GUIDELINES
• 900 µl のPCR Water を加え、1 min 遠心分離し細胞残渣を除去
• 上澄を滅菌済みチューブに移し、直ちにPCRに用いる
※上澄みは-20℃で数ヶ月保管が可能
The use of this product in certain countries for certain applications may
be covered by patents and may require a license
II. PCR PROTOCOL
BENEFITS• テンプレート精製不要。最短50分でPCR完了
• 15分でDNA抽出完了 & ローディングダイ入 PCR マスターミックス
で素早く簡単に実験可能
• ファスト& ホットスタート PCR 対応で、高収量&高感度のPCR• GC/AT リッチテンプレートからでも高効率な増幅
サンプル種類(生 or 冷凍) サンプル使用量 抽出液量
マウステール 2 mm or 3-5 mg 100 µl
マウス耳 2 mm2 or 3-5 mg 100 µl
哺乳類組織 5 mg 100 µl
FFPE 組織片 2 mm2 of 10 µm section 100 µl
血液 (fresh/EDTA) 2 µl 100 µl
血液 (ガスリーカード) 2 mm2 100 µl
血液 (FTA/FTA カード) 2 mm2 100 µl
毛根 (Hair follice) 2 follicles 100 µl
口腔粘膜 (Buccal swab) 1 swab 300 µl
反応あたりのサンプル使用量を増量するとPCR収量が改善することがありま
すが、PCR反応を阻害する可能性があります。
SampleIN™ Direct PCR Kit (上) は他社製品 (下) と比較して高い感度と収量を示
します。サンプル:マウステールサンプル
Sample amount 右上のガイドラインを参照
DPK Lysis Buffer, 5X 20 μl
DPK Protease Buffer, 10X 10 μl
PCR Water (not supplied) 70 μl
ü 泡を避け穏やかに混合し、ヒートブロック等で下記の様に処理
Lysis 75°C - 5 min. Vortex twice during lysis.
Protease inactivation 95°C - 10 min
Info Tel: +497250 33 13 401 [email protected]
highQu Tips
highQu の逆転写反応・RT-PCR用キットおよびマスターミ
ックスは、反応時間の短縮とピペッティング回数の削減に
よって、貴重なRNAサンプルの安全性向上と実験時間の短
縮を可能にしました。
highQuの熱安定性の高い逆転写酵素は、GC/ATリッチな配
列からでも、最大12-15kbの全長cDNA合成を高い収量で行
うことができます。
無料のサンプルがご希望ですか?下記より今すぐご連絡く
ださい。
www.highqu.com/samplerequest
order@ highQu.com Order Tel: +497250 33 13 401 43
RT PCR & Reverse Transcription
Enzymes & Kits
RT PCR & Reverse Transcription Selection
Info Tel: +497250 33 13 401 [email protected]
1Step RT PCR KitHighScriber™ Reverse
Transcriptase Mix
qScriber™ cDNA
Synthesis Kit
page 45 page 46 page 47
Short description1本のチューブ内で
反応が完了する 1-Step RT PCR
高温でも機能し
長鎖cDNA合成が可能な
逆転写酵素
qPCRのための
効率的な
cDNA合成キット
高効率なcDNA合成 • • •GCリッチ等合成困難な
テンプレートへの対応 • • •15 kb までの
全長 cDNA合成 •高感度 • • •One-step RT-PCR •Two-step RT-PCR • •Two-step RT-qPCR • •RNasesによる
RNA分解の阻害 • • •
order@ highQu.com Order Tel: +497250 33 13 401 45
ü 下記に従い50μl の反応液を調整:
Rev. & For. Primers 0.2-0.4 µM final (≤2 µl of 10 µM each)
Total RNAmRNA
1 pg to 1 µg or> 0.01 pg
PCR Water to 22.5 μl
1Step RT PCRMastermix, 2X
25 µl
RT2 Mix, 20X 2.5 µl
ü 泡の発生を避けて穏やかに混合
ü 機器にセットし下記のように設定:
Reverse transcription 1 cycle: 45 - 55°C – 10 to 20 min
Initial denaturation 1 cycle: 95°C – 2 min
Denaturation 40 cycles: 95°C - 10 sec
Annealing 40 cycles: 60-65°C – 10 sec
Extension 40 cycles: 72°C – 30-60 sec (15 sec/kb)
ü PCR後の反応液は短期なら氷中、長期なら-20℃で保管
PROTOCOL
• RNA は RNase による分解に非常に敏感です。RNase 混入を
避けるため、実験台を清潔に保つ、手袋をはめる、滅菌済み
チューブやフィルターチップを使用するなどの対策を行って
ください
• ポジティブコントロールとネガティブコントロールを作成
し、並行して実験を行ってください
• 試薬は氷中で融解させ、使用前によく混ぜてご使用下さい
• cDNA 合成は、1 kb 未満の場合は45℃・10 min、それ以上
の場合は45℃・20 min 行ってください。配列がGC/ATリッ
チな場合は、最大55℃まで反応温度を上げてください。
• PCRの伸長反応は、3 kb 未満であれば 15 sec / kb、5 - 10 kbの場合は 40 - 60 sec / kb にて行ってください。
• 最適アニール温度を調べるために、初回は 58℃~65℃のグ
ラジエント反応を行うことを推奨いたします。
PRODUCT DETAILShighQu 1Step RT PCR Kit は、高い酵素活性と熱安定性を持つ
逆転写酵素とRNase阻害剤をブレンドしたRT - Mix により、
1つのチューブ内で逆転写反応とPCRが一度に行える 1 Step - RT PCR 用のキットです。
RT2 Mix, 20X は 40-55℃でも安定した活性を示す改良型 MMuLV 逆転写酵素とRNase 阻害剤を含み、高いcDNA 収量を
可能にしました。
1Step RT PCR Mastermix, 2X は、Small molecular inhibitor テクノロジーを採用したホットスタートタイプのPCRマスタ
ーミックスです。初期熱変性(95℃)で inhibitor が分解され
るまで酵素活性をブロックしプライマーダイマーの発生を抑
制、非特異的な反応を防ぎ PCR 性能を向上させます。
BENEFITS• 高感度な逆転写反応とPCRを一本のチューブ内で
• RNase 阻害剤と高耐熱性逆転写酵素(~55℃)がブレンドされた
RT Mixで高いcDNA収量
• ホットスタート型のRT PCR Mastermix で、極少量のテンプレート
からでも高感度に検出可能
• GC/ATリッチサンプルの増幅やファスト反応に対応
APPLICATIONS• One step RT-PCR• GC/AT リッチで複雑な配列に対応したRT- PCR • ファスト反応対応
• 末端形状:3'突出末端
CAT.# SIZE COMPONENTS COMPONENT COMPOSITION
RTK0201100回 (50 µl反応系)
2 x 1.25 ml - 1Step RT PCR Mastermix, 2X2 x 0.125 ml - RT2 Mix, 20X3 x 1 ml - PCR Water
dNTPs(終濃度 0.25 mM)と MgCl2(終濃度 3 mM)、反応促進
剤・安定剤含有、ホットスタートタイプのマスターミックス。
逆転写酵素とRNase阻害剤含有のRT2 Mix。PCR Water付属
Storage: In the dark at -20°C.
1Step RT PCR Kit
IN VITRO RESEARCH USE ONLY
最適化され、各種反応促進剤・安定剤含有のバッファー組成は、GC/ATリッチテンプレートからの増幅やファストPCRにも対応していま
す。Hot Start Taq DNA ポリメラーゼは従来のTaq と同等の正確性
を持ち、増幅された断片は3'末端にアデニンが追加された突出末端
を形成します。TAクローニングなどにそのまま用いることができま
す。
本キットには高品質な PCR Water が付属しているため、品質の高い
RNA テンプレートをご用意いただければすぐに実験を始めることが
できます。
Info Tel: +497250 33 13 401 [email protected]
PRODUCT DETAILSThe HighScriber™ Reverse Transcriptase Mix は、最大で12~15 kb の cDNA 合成に対応した高効率な逆転写酵素です。 逆転写酵素と
RNase阻害剤を含む Enzyme Mix は、安定・強力かつ簡便なcDNA合成を可能にし、1 pg の全量RNA からでも合成可能な高い感度を
示します。38℃~55℃の広範囲な温度で安定した活性を示し、増
幅の難しい GC/ATリッチなテンプレートからでも安定して cDNA 合成を行うことができます。本酵素は ssRNA or ssDNA をテンプ
レートとして用います。RNA-DNA ハイブリット中のRNAに対する Ribonuclease H 活性 はほぼ完全に除かれており、長鎖 cDNAの合成
を可能にしました。
HighScriber™ Reverse Transcriptase はターミナルトランスフェラ
ーゼ活性を有し、cDNA の3'末端にシトシンを付与するため、RACE法に用いることができます。
BENEFITS• 熱安定性の高い逆転写酵素とRNase阻害剤のミックスによる効率的
な cDNA 合成
• 高収量および最大 12~15 kb までの長鎖 cDNA 合成 • 55℃ まで 活性を保ち、増幅の難しいGC/AT 配列も強力に合成
• 1 pg の全量 RNA テンプレートからでも高感度に増幅
APPLICATIONS• 最大15 kb までの cDNA 合成
• RT-PCR & RT-qPCR 用のテンプレート合成
• GC/AT リッチテンプレートからの cDNA 合成
CAT.# SIZE COMPONENTS COMPONENT COMPOSITION
RTM030150反応
(20 µl 反応系)
2 x 25 µl - HighScriber™ Reverse Transcriptase Mix, 20X2x 0.25 ml - 5X ALLin™ HighScriber Reaction Buffer
Enzyme Mix は、HighScriber™ Reverse Transcriptase Mix (200 u/µl) と Ribonuclease Inhibitor、グリセリン
を含みます。5X HighScriber™ Reaction Buffer は、
MgCl2、dNTPs、 促進剤・安定剤を含みます。RTM0305
250反応
(20 µl 反応系)
10 x 25 µl - HighScriber™ Reverse Transcriptase Mix, 20X10 x 0.25 ml - 5X ALLin™ HighScriber Reaction Buffer
Storage: In the dark at -20°C.
HighScriber™ Reverse Transcriptase Mix, 20X
1ユニットは、50 µl の反応液中において、37℃・10min で poly (rA) oligo (dT)18をテンプレートとして、1 nmol dTTPの酸不溶性分画への
取り込みを行うために必要な酵素量として定義されます。
ü 下記に従い20μl の反応液を調整:
5X ALLin™ HighScriber Reaction Buffer
4 µl (includes dNTPs!)
Oligo dT primer orRandom primer orSpecific primer
0.5 µg or 0.2 µg or15-20 pmol
Total RNA orPoly-A mRNA
1 pg to 5 µg or1 pg to 0.5 µg
Water (PCR Water, WAT0110) to 19 µl
ü 泡の発生を避け、穏やかに混ぜる
ü 65℃で 5 min 反応→スピンダウン→氷中で 1 min
ü Oligo dT / 特異的プライマーの場合は 42℃・2 min で、ラ
ンダムプライマーの場合は 25℃・10 min でアニール
ü 1 µl の HighScriber™ Reverse Transcriptase Mix, 20Xを加
え、よく混ぜる
ü 50℃・30-50 min で逆転写反応
ü 85℃・10 min で酵素を不活性化
ü 反応液は短期なら氷中、長期なら-20℃で保管
ü 50 µl 反応系 PCR テンプレートに用いる場合:2-5 µl
ü 20 µl 反応系 qPCR テンプレートに用いる場合:1-2 µl
PROTOCOL
• RNA は RNase による分解に非常に敏感です。RNase 混入
を避けるため、実験台を清潔に保つ、手袋をはめる、滅菌
済みチューブやフィルターチップを使用するなどの対策を
行ってください
• 変性アガロースゲル電気泳動で、RNAテンプレートの品質チ
ェックをしてから実験を行ってください
• ポジティブコントロールを作成して実験を行ってください
• 試薬は氷中で融解させ、使用前によく混ぜてご使用下さい
• 終濃度 0.8-1 mM のdNTP を使用してください
• プライマーとテンプレート濃度の最適化を行ってください
• 推奨された酵素濃度を守って実験を行ってください
• 反応時間は 30-50 min、短い配列の場合は15 - 30 min で逆転
写反応を行ってください
• 42 - 55℃の間で反応温度を最適化を行ってください
• RNase阻害剤やdNTPsはすでにバッファーに含まれていま
す。別途添加はしないで下さい。
IN VITRO RESEARCH USE ONLY
PRODUCT SPECIFICATIONS• 最適温度:45-50°C
• 動作温度範囲: 38-55°C
• 不活性化条件: 85°C for 10 min
Enzyme Mixに含まれるRNase阻害剤は、リボヌクレアーゼによ
るRNAの分解を防ぎます。付属の5X HighScriber™ Reaction Bufferは、cDNA合成に必要とされる成分(MgCl2, dNTPs, 促進剤・安定剤)を
すべて含むため、ピペッティングの回数を減らすことができます。必要
なものは RNAテンプレートとプライマーだけです。
order@ highQu.com Order Tel: +497250 33 13 401 47
ü 下記に従い20μl の反応液を調整:
5X qScriber™ Reaction Mix 4 µl
qScriber™ Enzyme Blend, 20X 1 µl
Total RNA 1 pg to 5 µg
PCR Water up to 20 μl
ü 泡の発生を避け、穏やかに混ぜる
ü 42-50℃・30 min でインキュベートしcDNA を合成
ü 85℃・10 min で酵素を不活性化
ü 反応液は短期なら氷中、長期なら-20℃で保管
ü 2-4 µl を 20 µl 反応系 qPCRテンプレートとして使用
IN VITRO RESEARCH USE ONLY
PROTOCOL
• RNA は RNase による分解に非常に敏感です。RNase 混入
を避けるため、実験台を清潔に保つ、手袋をはめる、滅菌済
みチューブやフィルターチップを使用するなどの対策を行っ
てください
• ポジティブコントロールを作成して実験を行ってください
• 試薬は氷中で融解させ、使用前によく混ぜてご使用下さい
• RNAテンプレートを除いて、本キット付属物以外のものを反
応液中に加えないでください
• 推奨される反応温度は 42 - 50℃です。GCリッチなテンプレ
ートの場合は55℃を上限として反応温度を調整して下さい
PERFORMANCEqScriber™ cDNA Synthesis Kit は、ご使用になる全量RNAテンプレートの量を
問わず、最高の結果をお届けいたします。
PRODUCT DETAILSThe qScriber™ cDNA Synthesis Kit は、煩雑な反応最適化の手間
を省いた高効率かつシンプルな cDNA 合成キットです。
qScriber™ Enzyme Blend は、極微量のターゲットからでも高感
度の検出を可能にします。熱安定性に優れた HighScriber™Reverse Transcriptase とRNase 阻害剤の組み合わせは、効率的
かつ安定した cDNA 合成を可能にしました。38℃~55℃の広範囲
な温度で安定した活性を示し、増幅の難しい GC/ATリッチなテン
プレートからでも安定して cDNA 合成を行うことができます。
The 5X qScriber™ Reaction Mix には、反応に最適な濃度の
dNTPs、MgCl2、最適混合比のオリゴ (dt) とランダムプライマー
がプレミックスされており、mRNAの末端形状を問わず高効率な
翻訳を可能にしました。
本キットは、ウイルスRNA、miRNA、およびその他のPCR/qPCR テンプレートとなる高品質な cDNA 合成に最適です。
BENEFITS• 熱安定性の高いHighScriber™Reverse Transcriptase とRNase 阻害
剤のブレンドで効率的な cDNA 合成
• 最適比で混合されたオリゴ (dT) とランダムプライマーによる cDNA 合成。mRNA末端形状に依存しない高効率な反応
• 55℃ まで 活性を保ち、増幅の難しいGC/AT 配列も強力に合成
• 1 pg の全量 RNA テンプレートからでも高感度に増幅
APPLICATIONS• qPCR or PCR用の cDNA テンプレートの生成
• 高効率・高精度の cDNA 合成
• 極微量のターゲットでも高感度に検出
• GC/AT リッチテンプレートからの cDNA 合成
CAT.# SIZE COMPONENTS COMPONENT COMPOSITION
RTK010125反応
(20 µl 反応系)
25 µl - qScriber™ Enzyme Blend, 20X100 µl - 5X qScriber™ Reaction Mix1 ml – PCR Water
保存バッファー組成:Tris, 50% グリセリン, その他
5X qScriber™ Reaction Buff er は dNTPs、MgCl2、アンカーオ
リゴ (dt) 、ランダムヘキサマー およびその他を含みます。
PCR Water 付属。RTK0104100反応
(20 µl 反応系)
4 x 25 µl - qScriber™ Enzyme Blend, 20X4 x 100 µl - 5X qScriber™ Reaction Mix2 x 1 ml – PCR Water
Storage: In the dark at -20°C.
qScriber™ cDNA Synthesis Kit
それぞれ 4 pg、40 pg、400 pg、4 ng、40 ng、400 ng、 4 µg のマウス全
量RNAをテンプレートとして本製品の標準プロトコルに従い cDNAを合成
し、得られたそれぞれの cDNA サンプルを等量使用して マウスRN18S遺伝子
(70bp)領域をターゲットとして qPCRを行った(ORA™ qPCR Green Mix 使
用)。すべての検量線は最初に使用されたRNA量と完全に合致した。
Info Tel: +497250 33 13 401 [email protected]
highQu Tips
PCR-relatedReagents & Kits
PCRのために、他に何が必要ですか?
Uracil DNA Glycosylase は、あなたのPCR/qPCRから
クロスコンタミネーションを排除します。もし必要な
ら、highQuの新製品「UDGin™ PCR Cleaner Mix, 20X」を
ぜひお試し下さい。
highQuの PCRbeam™ Fast PCR Detection Kit は、電気泳動
不要で遺伝子特異的な増幅産物の素早い検出を可能にする非
常にユニークな製品です。
無料のサンプルがご希望ですか?下記より今すぐご連絡く
ださい。
www.highqu.com/samplerequest
order@ highQu.com Order Tel: +497250 33 13 401 49
PCR-relatedReagents & Kits
Info Tel: +497250 33 13 401 [email protected]
UDGin™ PCR Cleaner
Mix, 20X
PCRbeam™ Fast PCR
Detection KitdNTP Sets & Mixes PCR Water
page 51 page 52 page 53 page 54
ApplicationsqPCR, PCR反応での
キャリーオーバーによる
コンタミネーション防止
PCR産物の検出:
ゲル電気泳動・qPCR以外の方法として
PCR/qPCR, DNA/cDNA合成
PCR、qPCRを含む
すべての分子生物学実験
PCR-related Reagents Overview
order@ highQu.com Order Tel: +497250 33 13 401 51
ü 下記に従い20μl の反応液を調整:
Reverse Primers 100 - 400 nM final c.
Forward Primers 100 - 400 nM final c.
cDNA Template orgDNA Template
< 100ng or< 1 μg
UDGin™ PCR Cleaner Mix, 20X 1 μl (to final 1X conc.)
PCR Water to 10 μl
ORA™ Green ROX L Mix, 2X 10 μl
ü 泡の発生を避けて穏やかに混合
ü 機器にセット・SYBR® Green or FAM チャンネルを使用し
下記のように設定:
PROTOCOL
• このプロトコルは、ORA™ qPCR Mix あるいは ALLin™ PCR キッ
ト/マスターミックスを例としています。UDGin™ PCR Cleaner Mixを用いてたった3ステップを追加すれば、キャリーオーバ
ー・コンタミネーションを防ぐことができます。
1. PCR 反応液にPCR Watarを加えるまえに、1µl の UDGin™ PCR Cleaner Mix, 20X を加え、その後 PCR Water を用いて 20 µl にメスアップする
2. qPCR/PCR 用機器にセットし、PCRサイクルの前に 37℃・10 min のインキュベーションステップを追加する。
3. UDGを不活性化させるため、インキュベーションステップの後
の初期変性ステップを通常より長く(95℃・5 min)設定する
• 反応後は氷中にて保管
• 本手順で増幅されたPCR産物はウラシルを含んでいます。ウラ
シルを含むことは電気泳動やシーケンシングには影響を及ぼし
ませんが、制限酵素処理の場合は用いる制限酵素がウラシルを
含むDNAに対応しているかどうかを確認してください。また、
クローニングに用いる際は ung バクテリア ホストを使用する必
要があります。
PRODUCT DETAILSUDGin™ PCR Cleaner Mix は、qPCR / PCRのキャリーオー
バーコンタミネーションの防止に有効なツールです。すべて
のhighQu qPCR / PCR 製品に最適化されています。ウラシル
DNA グリコシラーセ (UDG) と dUTP、安定剤 が混合された 20X ミックスですので、簡単にすぐお使いいただけます。1 µl の UDGin™ PCR Cleaner Mix を 20 µl PCR reaction に加える
だけで、以前にdUTPを使用して行われたPCRからキャリーオ
ーバーされたDNAの増幅を抑えることができます。 PCR反応の前に行うインキュベーションで、UDGはウラシル
を含んだDNAのウラシルと糖のN-グリコシド結合を加水分解
します。残された脱ピリミジン部位はPCRの初期熱変性時に
切断されるため、新たに加えられたDNAテンプレートのみが
増幅されます。UDGはPCRの初期変性時に不活性化され、新
たにウラシルを含んで合成されるDNAを壊すことはありませ
ん。このPCRで増幅されたDNAは同様にウラシルを含み、続
くUDGin™ PCR Cleaner Mix を用いたPCRの際には再度UDGによって破壊されるため、新たなコンタミネーションを起こ
すことはありません。
BENEFITS• +UDG と dUTPのミックス。簡単ですぐに使える
• すべての highQu qPCR / PCR 製品に使用可能
APPLICATIONS• qPCR・PCR反応でのキャリーオーバー・コンタミネーショ
ンの防止
CAT.# SIZE COMPONENTS COMPONENT COMPOSITION
UDG0101500回(20 µl 反応系)
0.5 ml - UDGin™ PCR Cleaner Mix, 20XPCRキャリーオーバー・コンタミネーションの防止用Mix。dUTP, ウラシル DNA グリコシラーゼ (UDG)、安定剤含有。
Storage: In the dark at -20°C.
UDGin™ PCR Cleaner Mix, 20X
IN VITRO RESEARCH USE ONLY
PCR CARRY-OVER CONTAMINATION PREVENTION
The use of this product in certain countries for certain applications may be covered by patents and may require a license
UDG treatment 1 cycle: 37°C - 10 min(uracil-containing DNA hydrolysis)
Initial denaturation
1 cycle: 95°C - 5 min (DNA denaturation, UDG
inactivation, Hot-start Polymerase activation)
Denaturation 40 cycles: 95°C - 5 sec
Annealing/Extension
40 cycles: 60-65°C – 20-30 sec
ü PCR後の反応液は短期なら氷中、長期なら-20℃で保管
If you use UDGin™ PCR Cleaner Mix in every PCR, only the newly added template DNA will be amplified. All PCR products will contain uracil. Therefore, even if you carry them over into the next PCR they will not be amplified, as the uracil containing DNA will be destroyed during UDG treatment before each PCR. Only new added DNA containing no uracil will serve as PCR template.
Reference: Longo, M.C., et al., Use of uracil DNA glycosylase to control carry-over contamination in polymerase chain reactions, Gene 93, 125-8, 1990.
UDG hydrolysis
UDG hydrolysis
PCR
UDG hydrolysis
Carry-over DNA dUTPを用いたPCRによって増幅さ
れたDNAのウラシルはUDGによっ
て加水分解され増幅されない
UDG hydrolysis
New Template DNA 新たに追加されたDNAはウラシルを含まないため
加水分解を受けず、増幅される
UDG hydrolysis
Info Tel: +497250 33 13 401 [email protected]
PRODUCT DETAILShighQu PCRbeam™ Fast PCR Detection Kit は、PCR法、LAMP法、RPA法で増幅された特異的増幅物を簡易かつ迅速に検出するた
めのツールです。5'末端にビオチンおよびFITC標識が施されたプラ
イマーペアをご用意頂くだけで、簡単かつ高感度な免疫検出が可能
となります。プライマーペアの一方はビオチン or FITC標識された
特異的プローブで代替することも可能です。 本キットに付属する PCRbeam™ Membrane Strips は、ビオチン
リガンド(テストバンド)および抗ウサギ抗体(コントロールバン
ド)でコートされており、サンプル添加部位となるメンブレンス
トリップの基部には、金粒子で標識された抗FITC抗体が含まれてい
ます。PCRbeam™ Detection Buffer は効果的な検出を可能にする
Tris緩衝生理食塩水で構成されています。
The PCRbeam™ Fast PCR Detection Kit は、PCR法やその他核酸増
幅法をベースとした既知の、あるいは独自に開発された定性的バイ
オアッセイに使用することが可能です。従来のゲル電気泳動EtBr染色法と比較して最大で100倍の高感度で検出が可能なため、高感度
かつ安全で低環境負荷なアッセイを提供します。
高感度なPCRベースのテストを行うために、ホットスタートタイプ
のDNAポリメラーゼのご使用をお勧め致します。 highQu ALLin™ Hot Start Taq Mastermix(HSM0201, HSM0205)、ALLin™ Hot Start Taq DNA Polymerase(HSE0101, HSE0105)がご利用可能
です
BENEFITS• Sensitive detection of PCR, LAMP, RPA gene-specific products• No gel loading after PCR, no ethidium bromide handling• Saved costs compared to qPCR-based detection methods• Fast and easy procedure with little hands on time
APPLICATIONS• ロースループット PCR, LAMP, RPA ベースのテスト用
• 特異的増幅物の高感度検出
• EtBr染色ゲルと比較して20~100倍の高感度
• 経済性に優れ、qPCR テストの代替として最適
PCRbeam™ Fast PCR Detection Kit
PROTOCOL
• 100 µl の PCRbeam™ Detection Buffer を 空の PCR チューブもしく
はプレートに入れてください。
• 5-10 µl の PCR後の反応液を、バッファーの入ったチューブにいれ、
ゆっくりとピペッティングしてください。PCR収量が非常に少ないと
予想される場合は、使用する反応液を 20 µl に増量してください。
• PCRbeam™ Membrane Strip を、矢印の方向を上にしてチューブに
入れ、反応液に浸してください。
• 室温で 2-10 min インキュベートし、上方のコントロールバンドが出
現するまで反応させてください。
• バンドが2本(コントロールとテストバンド)確認できれば陽性
(DNAが増幅された)、1本(コントロールのみ)しか確認できなけ
れば陰性です。バンドの濃淡は関係ありません。
PRINCIPLE
CAT.# SIZE COMPONENTS COMPONENT COMPOSITION
PDK0101 50 tests50 - PCRbeam™ Membrane Strip10 ml - PCRbeam™ Detection Buffer
PCRbeamTM Membrane Strip:ビオチンリガンド(テストバン
ド)と金粒子で標識された抗FITC抗体を含む
PCRbeamTM Detection Buffer:Tris緩衝生理食塩水
Storage: In the dark at -20°C.
メンブレンストリップをPCRbeamTM Detection Bufferで希釈されたPCR産物の入ったチュー
ブに10分間浸します。事前にFITCとビオチンで標識されているDNA断片は、あらかじめメン
ブレンにコートされている金粒子で標識済みの抗FITC抗体と反応したのち、毛細管現象によ
ってメンブレン上を移動してゆきます。DNA断片がビオチンリガンドでコートされたテスト
バンド部位に到達すると、DNAに付与されているビオチンとリガンドが反応し、DNA断片は
テストバンド部位に捕捉され、金粒子の作用によって赤-青色のバンドが出現します。バンド
は目視で確認できます。DNA断片と結合しなかった金標識FITC抗体はさらに移動を続け、コ
ントロールバンド部位にコートされた抗ウサギ抗体と反応・捕捉されて同様の赤-青色のバン
ドが出現します。
PCRで目的部位が増幅されなかった(テストが陰性だった)場合はコントロールバンドのみ
が出現します。
NOTES
• 片方のプライマーの5'末端をFITCで、もう片方のプライマーの5'末端をビオチンで 修飾したプライマーペアを用いてPCRを行ってく
ださい。
• PCRbeam™ Fast PCR Detection Kit はよく検討され確立されたPCRアッセイのみに使用してください。
• 最大で5 pg の DNA が検出可能です。
• ご使用まえに、PCRbeam™ Membrane Strips と PCRbeam™ Detection Buffer を5分間室温で暖めてからご使用下さい。
• PCRにミネラルオイルを使用される場合は、オイルが反応させる
サンプルに混入しないよう細心の注意を払ってください。オイル
が混入するとキットの感度に悪影響を及ぼします。
gold particle
FITC labeled amplified DNA strand
Biotin labeled amplified DNA strand
Anti-FITC antibody
Biotin ligand
antibody
lateral sample flow
gold particle
コントロールバンド
テストバンドで捕捉されなかった金粒
子は、メンブレン上のコントロールラ
インに付加されている抗体と反応しま
す。
テストバンド
5'末端にそれぞれFITCおよびビオチンで標識 され
たプライマーを用いたPCR産物は金粒子標識抗FITC抗体と反応し、その後テストバンド上のビオチン
リガンドに捕捉されます。
order@ highQu.com Order Tel: +497250 33 13 401 53
IN VITRO RESEARCH USE ONLY
PREPARATION OF DNTP MIXES FROM A SET
• よく混ぜてからご使用下さい
• 4種すべてのdNTPが等しい濃度で混合されている状態が理想
的なdNTPミックスです
• 一般的によく使用される濃度に調整するには、下記の表に従
い調整してください。
PRODUCT DETAILShighQu dNTP セット&ミックスは最高グレードの品質をも
ち、PCRやその他すべての dNTP を用いる分子生物学アプリ
ケーションにおいて高いパフォーマンスを発揮します。
非常に厳しい品質管理体制のもとで生産されており、>99% HPLC グレードの純度、核酸その他PCR阻害剤が含まれてい
ないことが確認されています。
BENEFITS• >99% HPLC グレードの dNTPs。 高品質・高再現性。
• DNA および PCR 阻害剤フリー
• 30回の凍結・融解後に40回のPCRサイクル後、室温で数週間放置し
ても安定。
• すぐに使用できる dNTPs ミックス & フレキシブルに調整できる dNTP セット
APPLICATIONSdNTPsを用いるすべての分子生物学実験向け:• cDNA 合成
• 各種PCR反応
• qPCR• シーケンシング
CAT.# SIZE COMPONENTS COMPONENT COMPOSITION
dNTP Mixes:NUM0101 1 ml 1 ml - 25 mM dNTP Mix 4種類のdNTPがそれぞれ 25 mM 含有された水溶液。pH 7.0。
NUM0201 1 ml 1 ml - 10 mM dNTP Mix 4種類のdNTPがそれぞれ 10 mM 含有された水溶液。pH 7.0。
dNTP Sets:
NUS0101 4 x 0.25 ml
0.25 ml -100 mM dATP0.25 ml - 100 mM dCTP0.25 ml - 100 mM dGTP0.25 ml - 100 mM dTTP
100 mM dATP 水溶液, pH 7.0100 mM dCTP 水溶液, pH 7.0100 mM dGTP 水溶液, pH 7.0100 mM dTTP 水溶液, pH 7.0
Storage: In the dark at -20°C.
25 mM and 10 mM dNTP Mixes & 100 mM dNTP Set
短期間の常温保管や凍結・融解の繰り返し、40回のPCRサイクル後で
も高い安定性を発揮し、安心してご使用いただけます。
PROTOCOL RECOMMENDATIONS FOR STANDARD PCR
• 通常のPCRにおける dNTPの最適濃度は 0.2 - 0.25 mM です。これ
より高い濃度でPCRを行うと、収量は増えますが dNTP と Mg2+イオンが結合しやすくなり、PCRの正確性を損ねることがありま
す。双方の濃度をバランスよく設定してください。
• 反応液中の濃度の偏りを避けるため、よく混合してから添加して
下さい。
• 通常のPCRでは、MgCl2が終濃度 3 mM、dNTP(4種それぞれ)
が終濃度 0.25 mM になるよう調整してください。100 mM dNTP solutions: 4種類す
べてを下記の液量ずつ混合
PCR
Water
Resulting 1 ml Mix
concentration:
20 µl 920 µl 2 mM dNTP
25 µl 900 µl 2.5 mM dNTP
100 µl 600 µl 10 mM dNTP
250 µl - 25 mM dNTP
加える
dNTP Mix濃度 50 µl 反応系
へ加える量
10 mM25 mM
1.25 µl0.5 µl
Mg2+
終濃度
50 mM MgCl2 を 50 µl 反応系に加える量
2 mM3 mM
2 µl3 µl
Info Tel: +497250 33 13 401 [email protected]
PRODUCT DETAILShighQu PCR Water は、すべての分子生物学アプリケーション
に使用可能な最高の品質を備えています。本製品はあらゆる
PCR用試薬に対する阻害物質を含まない、最高の純度でお届け
されています。
highQu PCR Water は、脱イオン化およびメンブレンフィルタ
ーでろ過された精製水です。品質はPCR・qPCR試験によって
管理されており、常に最高のパフォーマンスを示すことが確
認されています。
BENEFITS• すべての分子生物学アプリケーションに使用可能なPCRグレー
ド・DNaseフリーの滅菌水
• 多くのhighQu製品に同梱され、常に高いパフォーマンスを発揮
• PCR・qPCR試験で品質テスト済み
APPLICATIONS• すべての分子生物学アプリケーションに
CAT.# SIZE COMPONENTS COMPONENT COMPOSITION
WAT0110 10 x 1 ml 10 x 1 ml - PCR Water PCR グレード, ヌクレアーセフリー
Storage: In the dark at -20°C. コンタミネーションのリスクを抑えるため、常温では保管しないで下さい
PCR Water
PROTOCOL
•使用になるアプリケーションのプロトコルに従い使用してください。 IN VITRO RESEARCH USE ONLY
order@ highQu.com Order Tel: +497250 33 13 401 55
Cloning Kits
Cloning Kits Overview
Info Tel: +497250 33 13 401 [email protected]
Rally™ Rapid Ligation Kit HighEnd™ Repair Kit
page 57 page 58
Applications迅速なベクターインサートライゲーション、
アダプター or リンカーライゲーション、線
形DNAの環状化
PCR増幅された断片、断片化DNA、制限酵素処理後のDNA、あるいは cDNAの平滑末端化処理
5' もしくは3'突出末端 → 5'リン酸化平滑末端
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ü 下記に従い20μl の反応液を調整:
2X Rally™ Buffer 10 µl
Linear dephosphorylatedvector DNA
~100 ng (20 – 200 ng range)
100 ng of linear pUC vectors ( ~2.7 kb) have ~0.1 pmol ends100 ng of linear pBR322 vectors ( ~4.4 kb) have ~0.07 pmol ends
Insert DNA (phosphorylated) ~200 ng (up to 3-6 X more pmol ends than vector)
200 ng of 1 kb linear DNA has ~0.6 pmol ends100 ng of 0.5 kb linear DNA has ~0.6 pmol ends40 ng of 0.2 kb linear DNA has ~0.6 pmol ends
DNase-free water(PCR Water, WAT0110)
to 19 µl
Rally™ T4 DNA Ligase, 1 r/µl 1 µl maximum
ü よく混合し、室温(25℃)で 5 - 10 min インキュベート
ü ケミカルコンピテントセルの場合はすべて10-50倍希釈
ü 電気的形質転換の場合は下記に従いPEGを除去 or 希釈
IN VITRO RESEARCH USE ONLY
PROTOCOL
• 反応前にDNAの品質と濃度をチェックしてください
• ポジティブコントロールを作成してください
• 試薬は氷中で融解させ、使用前によく混ぜてご使用下さい。
バッファーに沈殿が生じた場合は、暖めて沈殿を溶解させて
からご使用下さい
• インサート:ベクターのモル比は 3:1 から 6:1 が適切な
範囲です。インサートが多すぎると多重挿入が、少なすぎる
とライゲーション効率が低下します。
• Rally™ Buffer に含まれる PEG は、エレクトロコンピテント
セルを用いる場合は反応を阻害します。電気的形質転換を行
う場合は右記に従いPEGを除去するか、もしくは大幅に希釈
して行ってください
• 高品質なコンピテントセルを使用してクローニングを行っ
てください。ご使用のセルの品質をチェックするために
は、まず 0.1 ng のスーパーコイル状ベクターDNAを用いて
形質転換を行います。結果100個のコロニーが得られた場
合、1×106の形質転換体が 1 µl のスーパーコイル状ベクター
DNAによって得られたのと同等の転換効率を示したことにな
ります。通常、ライゲーション後のベクターDNAを使用した
場合はライゲーション前のスーパーコイル状ベクターDNAを用いた場合と比較して転換効率は10%に低下します。これを
元に、予想される結果と比較すればコンピテントセルの品質
PRODUCT SPECIFICATIONS• 室温( 25℃)で最大の活性を示します
• 不活性化は 65℃・ 15 minで完了します
PRODUCT DETAILSRally™ Rapid Ligation Kit は迅速で効率的なクローニング・アダプ
ター/リンカーライゲーションのためのプレミアムなツールです。
本キットは反応速度を高めるために特別にデザインされた Rally™ T4 DNA Ligase と、同じくDNA末端の結合反応を促進するための
PEG(ポリエチレングリコール)を含む 2X RallyTM buffer で構成
されています。
これら2種のコンポーネントにより、効率的で迅速なライゲーショ
ン反応と、突出末端でも平滑末端でも利用可能な汎用性
BENEFITS• 5 min で素早く高効率なライゲーション
• 突出末端でも平滑末端でもライゲーションが可能
• 最高品質・高再現性
APPLICATIONS• クローニング
• ベクターインサートライゲーション
• アダプター or リンカーライゲーション
• 線形DNAの環状化
CAT.# SIZE COMPONENTS COMPONENT COMPOSITION
RLK010140 回(20 µl 反応系)
40 µl – Rally™ T4 DNA Ligase, 1 r/µl1.5 ml - 2X Rally™ Buffer 保存バッファー組成:Tris, 50% グリセリン, その他
2X Rally™ Buffer :DTT, ATP, PEG 6000 , その他RLK0105
200 回(20 µl 反応系)
5 x 40 µl – Rally™ T4 DNA Ligase, 1 r/µl5 x 1.5 ml - 2X Rally™ Buffer
Storage: In the dark at -20°C.
Rally™ Rapid Ligation Kit
Rally™ T4 DNA Ligaseは、DNA/RNAの隣接する5'- P末端と3'- OH末
端のホスホジエステル結合反応を触媒する酵素です。本酵素は二重鎖
DNA/RNAもしくはDNA・RNAハイブリットの突出 or 平滑なDNA末端を結合させ、ニックを修復する機能を持ちます。
Option 1: PEGの除去
PCR精製用スピンカラムを用いて反応液を精製し、20 µl のTEもしくは
滅菌水で溶解させ、そのうち1- 2 µl を エレクトロコンピテントセル反
応液(50µl)に加える
Option 2: PEGの希釈ライゲーション反応後直ちにTEもしくは滅菌水で10倍希釈し、そのうち
2 - 5 µl をエレクトロコンピテントセル反応液(100µl)に加える
Info Tel: +497250 33 13 401 [email protected]
PRODUCT DETAILSHighEnd™ Repair Kit は、平滑末端ライゲーションの前処理とし
て行うDNA断片末端の平滑化・リン酸化処理のためのプレミア
ムなツールです。PCR産物、制限酵素処理後のDNA断片、断片化
DNA、cDNAなどさまざまな直鎖DNAの平滑化・リン酸化を数十
分で完了させ、平滑末端ライゲーション・クローニングに使用す
ることができます。
本キットに含まれる HighEndTM Repair Blend は、T4 DNA ポリ
メラーゼと T4 ポリヌクレオチドキナーゼが最適混合比でミッ
クスされたものです。T4 DNA ポリメラーゼの 5' - 3' ポリメラ
ーゼ活性と 3' - 5' エキソヌクレアーゼ活性がDNA末端を平滑化
し、T4 ポリヌクレオチドキナーゼが5'末端をリン酸化します。
これらによって得られた高品質の平滑末端DNA断片は、T4 DNA リガーゼによるライゲーション反応に最適です。
BENEFITS• DNA末端の平滑化とリン酸化を迅速かつシンプルに1度で可能
• どんな種類のDNAにでも使用可能
• 高品質・高再現性
APPLICATIONS• PCR産物、制限酵素処理後のDNA、断片化DNA、cDNAなど
を平滑末端ライゲーションするための前処理
• 5' and/or 3'突出末端を、5' リン酸化平滑末端へ変換
CAT.# SIZE COMPONENTS COMPONENT COMPOSITION
HER0101 40 r of 25 µl40 µl – HighEnd™ Repair Blend, 1 r/µl1.5 ml - 10X HighEnd™ Buffer0.5 ml - 1 mM dNTP Mix
保存バッファー組成:Tris, 50% グリセリン, その他
10X HighEnd™ Buffer:Tris, NaCl, MgCl2, DTT, その他
※dNTPsは突出末端を埋める材料として、あるいはリン酸供与
体として機能するHER0105 200 r of 25 µl
5 x 40 µl – HighEnd™ Repair Blend, 1 r/µl2 x 1.5 ml - 10X HighEnd™ Buffer3 x 0.5 ml - 1 mM dNTP Mix
Storage: In the dark at -20°C.
HighEnd™ Repair Kit
最大で 1 - 5 µl の直鎖DNAを20分で平滑化・リン酸化することが
可能です。加熱による不活性化ののち、反応液はそのままライゲ
ーションに用いることができます
HighEnd™ Repair Kit は、ALLin™ HiFi DNA Polymerase (HLE0201) をはじめとする high fidelityタイプのDNAポリメラー
ゼによるアンプリコンに使用すると、ライゲーション反応をさら
に効率的に行うことができます。
PRODUCT SPECIFICATION• 室温( 25℃)で最大の活性を示します
• 不活性化は 70℃・ 20 minで完了します
ü 下記に従い20μl の反応液を調整:
Linear DNA in TE buffer or water up to 1 µg (up to 30 pmol ends)
1 µg of 1 kb linear DNA has ~3 pmol ends1 µg of 0.5 kb linear DNA has ~6 pmol ends1 µg of 0.1 kb linear DNA has ~30 pmol ends
10X HighEnd™ Buffer 2.5 µl
1 mM dNTP Mix 2.5 µl
DNase-free water(PCR Water, WAT0110)
to 24 µl
HighEnd™ Repair Blend, 1 r/µl 1 µl (max 2 µl)
ü よく混合し、25℃で20 - 30 min インキュベート
ü 75℃・20 min でインキュベートし酵素を不活性化。その
後すぐにライゲーション反応に用いる場合は冷やしてから
お使い下さい。保管する場合は冷凍保存してください。
ü 長期にわたり保存する場合は、精製後に25 µl の滅菌水あ
るいはTEに溶解させてから冷凍保存してください。
ü その後のライゲーション反応やクローニングには、 Rally™ Rapid Ligation Kit (RLK0101) がご利用になれます。
PROTOCOL
• 反応前にDNAの品質と濃度をチェックしてください
• 反応前には必ずDNAを精製してください
• 試薬は氷中で融解させ、使用前によく混ぜてご使用下さい
• 反応に最適なDNA量はDNA鎖の長さに依存します。例え
ば 1 kb の直鎖DNA 1 µg には 3 pmolの末端が含まれます
が、100 bp の直鎖DNA 1 µg には 30 pmolの末端が含ま
れ、10倍の平滑化・リン酸化反応に対する基質が存在する
ことになります。よって、断片が短い場合は反応に用いる
DNA量を減らしてご使用下さい。後のライゲーション反応
も同様です。
• 使用する DNA 量が多い場合は反応をアップスケールして下
さい。たとえば、100 bp のDNA断片 5 µg を平滑化・リン酸
化したい場合は、反応スケールを通常の25 µl から 100 µl に増やし、2-5 µl の HighEnd™ Repair Blend を使用して下さ
い。
IN VITRO RESEARCH USE ONLY
Ladders & Stains for DNA & Protein
Electrophoresis
order@ highQu.com Order Tel: +497250 33 13 401 59
Ladders & Stains for DNA & Protein
Electrophoresis
Info Tel: +497250 33 13 401 [email protected]
Selection of DNA Electrophoresis Ladders
DNA LADDER LADDER BANDS IN BP AND IN KB, ALL REFERENCE BANDS IN BOLD
Take5™ 50 bp 50 - 100 - 150 - 200 - 250 - 300 - 350 - 400 -- 500 - 600 - 700 - 800 - 900 - 1 - 1,2 -- 1,5
Take5™ 100 bp ----- 100 ---------- 200 -------- 300 --------- 400 -- 500 - 600 - 700 - 800 - 900 - 1 --------- 1,5 ------------ 3
Take5™ 1kb ---- 100 ----------- 200 -------- 300 --------- 400 -- 500 - 600 - 700 - 800 - 900 - 1 --------- 1,5 - 2 - 2,5 - 3 - 4 - 5 - 6 - 8 - 10
Take5™ HR ---------------------------- 250 ––––––––––––––––– 500 ------------ 750 ------------- 1 --------- 1,5 - 2 - 2,5 - 3 - 4 - 5 - 6 - 8 - 10 - 25
Selection of DNA Electrophoresis Stains
FEATURES OF NUCLEIC ACID STAINSStainIN™ RED Nucleic Acid Stain
page 62StainIN™ GREEN Nucleic Acid Stain
page 63
蛍光色 赤 DNA:緑 RNA:赤
励起波長 540 nm 490 nm
蛍光波長 630 nm 520 nm and 635 nm
アガロース電気泳動中の染色 ○ ○
PAGE中の染色 ○ ○
電気泳動後の染色 × ×
DNA検出感度 0,3 - 0,6 ng 0,1 - 0,3 ng
UV検出 ○ ○
ブルーライト検出 × ○
ローディングダイとしての使用 × ×
クローニングへの使用 △(UV照射量が少ない場合) ○(ブルーライトを用いた場合)
使用する光学フィルタ エチジウムブロマイド用 SYBR® Green 用
order@ highQu.com Order Tel: +497250 33 13 401 61
CAT.# SIZE COMPONENTS COMPONENT COMPOSITION
DNL0102200回
(5 µl/回)
2 x 0.5 ml - Take5™ 1 kb DNA Ladder2 x 1 ml - Take5™ Loading Dye, 6X DNA Ladder:高度精製されたPCR増幅物およびプラスミド断片、ローデ
ィングダイ入〔終濃度 10 mM Tris-HCl (pH 8.0)、終濃度10 mM EDTA、グ
リセリン、トラッキングダイ(3色)
Take5TM Loading Dye:上記ローディングダイと同じ組成
DNL0202200回
(5 µl/回)
2 x 0.5 ml - Take5™ 100 bp DNA Ladder2 x 1 ml - Take5™ Loading Dye, 6X
DNL0302200回
(5 µl/回)
2 x 0.5 ml - Take5™ 50 bp DNA Ladder2 x 1 ml - Take5™ Loading Dye, 6X
DNL0402200回
(5 µl/回)
2 x 0.5 ml - Take5™ HR DNA Ladder2 x 1 ml - Take5™ Loading Dye, 6X IN VITRO RESEARCH USE ONLY
APPLICATIONS• アガロースゲル電気泳動時のDNA断片長推定、および簡易的な定
量
BENEFITS• 室温で保管が可能。いつでもすぐにお使いになれます。
• シャープで明瞭なバンド。ある程度のDNA定量も可能です。 • 3色のトラッキングダイを含むローディングダイ付属。
DNA Electrophoresis Ladders
Take5™ 1kb DNA Ladder Take5™ HR DNA Ladder250 bp- 25 kb レンジ
計14バンド
※1 & 3 kb のバンドは
リファレンスとして他より
明るく表示される
濃度:104 ng/µl
100 bp- 10 kb レンジ
計19バンド
※0.5、1.5、3 kbのバンドは
リファレンスとして他より
明るく表示される
濃度:172 ng/µl
直接アプライが可能
標準使用量: 5 µl/well
トラッキングダイ:
Xylene cyanol FF (~4 kb)
Bromophenol blue (~0.4 kb)
Orange G (<50 bp)
直接アプライが可能
標準使用量: 5 µl/well
トラッキングダイ:
Xylene cyanol FF (~4 kb)
Bromophenol blue (~0.4 kb)
Take5™ 50 bp DNA Ladder
Take5™ 100 bp DNA Ladder100 bp- 3 kb レンジ
計12バンド
※0.5 & 1.5 kb のバンドは
リファレンスとして他より
明るく表示される
濃度:108 ng/µl
50 bp- 1.5 kb レンジ
計17バンド
※0.2 & 0.5 kb のバンドは
リファレンスとして
他より明るく教示される
濃度:112 ng/µl
直接アプライが可能
標準使用量: 5 µl/well
トラッキングダイ:
Orange G (<50 bp)
保管温度と使用期限: 室温で6ヶ月; 冷蔵(4℃)で12ヶ月; 冷凍(-20℃)で 24 ヶ月
直接アプライが可能
標準使用量: 5 µl/well
トラッキングダイ:
Xylene cyanol FF (~4 kb)
Orange G (<50 bp)
Info Tel: +497250 33 13 401 [email protected]
IN VITRO RESEARCH USE ONLY
StainIN™ RED Nucleic Acid Stain
CAT.# SIZE COMPONENTS COMPONENT COMPOSITION
NAS0101 1 ml 1ml - StainIN™ RED Nucleic Acid StainDNAおよびRNA赤色染色剤:20,000X DMSO溶液、使用時濃度はアガ
ロースおよびアクリルアミドゲル中で1.0X、泳動バッファー中で0.5X
Storage: In the dark at +4°C.
廃棄: 使用したゲルおよびバッファーは、フィルターろ過後に多量の水とともに排水溝に流すことができます。
PRODUCT DETAILSStainIN™ RED Nucleic Acid Stainは、従来のエチジウムブロマイド(EtBr)
染色法と比較して2倍の感度を持ち、しかもはるかに安全な核酸染色法で
す。同様の他社製品と比較して安価にご提供できます。人体に無害で環境
にも付加を与えず、廃液の処理も非常に簡単に行うことができます。
StainIN™ RED は、アガロースとポリアクリルアミドゲルの両方におい
て、最小で0.3ngのDNAを検出可能な蛍光ダイです。ssDNA, dsDNA,
およびRNAをと結合し、UV下で赤い蛍光を発します。この蛍光は従来の
EtBr法と同じフィルターで検出することが可能です。UVへの暴露を最小
に抑えれば、クローニング用アプリケーションに応用することができま
す。
本色素の発がん性がEtBrよりはるかに小さいことはエームズ試験によって
証明されており、加えて哺乳動物細胞変異原性試験、マウス骨髄赤血球小
核および精母細胞染色体異常試験においても変異源性がないことが確認さ
れています。
APPLICATIONS• ssDNA, dsDNAおよびRNAなどの可視化やゲルドキュメンテーシ
ョンを目的とした、各種核酸の電気泳動中の染色
BENEFITS• エチジウムブロマイド(EtBr)法と比べてはるかに安全
• EtBrと比較して2倍の検出感度
• 実験時間の短縮: 泳動後染色不要、脱色不要
PERFORMANCE
左画像- StainIN™ RED Nucleic Acid Stainを用いたアガロースゲル染色
右画像- StainIN™ RED の最適励起波長(540 nm)と蛍光波長 (630 nm)。
PROTOCOL FOR AGAROSE GEL ELECTROPHORESIS
1. 染色試薬・ゲル・バッファーに触る前に手袋をつけてください。
2. アガロースの製造者の指示に従い、溶液を調整してください。
3. アガロース溶液を手で扱える温度に冷ましてください。
4. 100 ml のアガロース溶液に対して 5µl の StainIN™ RED を、ゲル枠に
流し込む直前に加えてください。
5.泡の発生を避けて穏やかに溶液を混ぜ、静かにゲル枠に注いでコウムを
挿入してください。
6. 必要量の1X TAE or 1X TBE ランニングバッファー を準備して下さい。
7. ランニングバッファー 100 ml あたり 2,5 - 3 µl のStainIN™ RED を加え
てください。
8. ゲルとランニングバッファーを泳動槽に入れ、通常通りに電気泳動を
行ってください
9. 泳動後、UV光でゲルを照らし、核酸を観察してください
• 通常脱色は必要ありませんが、バックグラウンドが高い場合は脱色を行
うと改善することがあります。泳動後の染色はお勧めしません。
• 写真を撮影する場合はEtBr用のフィルターを使用してください。
• 数回に一度、ステップ7に従いランニングバッファーを新しいものと交
換してください。
• ゲルを溶かして再利用する場合は、少なくともステップ4の半量の
StainIN™ RED を加えてください。
PROTOCOL FOR PAGE
1. 染色試薬・ゲル・バッファーに触る前に手袋をつけてください。
2. 変性もしくは非変性のアクリルアミド(PAA)溶液を、製造者の指示に
従い調整してください。
3. TEMED と APS を加え、直ちに次のステップに進んでください。
4. 100 ml のPPA溶液に対して 5µl の StainIN™ RED を、ゲル枠に流し込
む直前に加えてください。
5.泡の発生を避けて穏やかに溶液を混ぜ、静かにゲル枠に注いでコウムを
挿入してください。
6. 必要量の 1X TBE ランニングバッファー を準備して下さい。
7. ランニングバッファー 100 ml あたり 2,5 - 3 µl のStainIN™ RED soluti-
on を加えてください。
8. ゲルとランニングバッファーを泳動槽に入れ、通常通りに電気泳動を
行ってください
9. 泳動後、UV光でゲルを照らし、核酸を観察してください
• 脱色は不要です。泳動後の染色はお勧めしません。
• 写真を撮影する場合はEtBr用のフィルターを使用してください。
• 数回に一度、ステップ7に従いランニングバッファーを新しいものと交
換してください。
IN VITRO RESEARCH USE ONLY
order@ highQu.com Order Tel: +497250 33 13 401 63
StainIN™ GREEN Nucleic Acid Stain
CAT.# SIZE COMPONENTS COMPONENT COMPOSITION
NAS0201 1 ml 1ml - StainIN™ GREEN Nucleic Acid StainDNAおよびRNA緑色染色剤:20,000X DMSO溶液、使用時濃度はアガ
ロースおよびアクリルアミドゲル中で1.0X、泳動バッファー中で0.5X
Storage: In the dark at +4°C.
廃棄: 使用したゲルおよびバッファーは、フィルターろ過後に多量の水とともに排水溝に流すことができます。
PRODUCT DETAILSStainIN™ GREEN Nucleic Acid Stain iは、従来のエチジウムブロマイド
(EtBr)染色法と比較して2倍の感度を持ち、しかもはるかに安全な核酸染
色法です。同様の他社製品と比較して安価にご提供できます。人体に無害
で環境にも付加を与えず、廃液の処理も非常に簡単に行うことができま
す。StainIN™ GREEN は、アガロースとポリアクリルアミドゲルの両方に
おいて、最小で0.1ngのDNAを検出可能な蛍光ダイです。ssDNA, dsDNA,
およびRNAをと結合し、UVおよびブルーLED光の下で、DNAの場合は緑
の、RNAの場合は赤の蛍光を発します。この蛍光は従来の緑色蛍光ダイ
と同じフィルターで検出することが可能です。UVを用いなくとも検出で
きるため、クローニング用のアプリケーションに最適です。
本色素の発がん性がEtBrよりはるかに小さいことはエームズ試験によって
証明されており、加えて哺乳動物細胞変異原性試験、マウス骨髄赤血球
小核および精母細胞染色体異常試験においても変異源性がないことが確
認されています。
APPLICATIONS• ssDNA, dsDNAおよびRNAなどの可視化やゲルドキュメンテーショ
ンを目的とした、各種核酸の電気泳動中の染色
• 紫外線およびブルーLED光での検出が可能。クローニング用アプリ
ケーションに最適
BENEFITS• エチジウムブロマイド(EtBr)法と比べてはるかに安全で、他社の
緑色ダイよりリーズナブル
• DNA はグリーン、RNAはレッドの蛍光を発するユニークさ
• EtBrと比較して4倍の検出感度
• 実験時間の短縮: 泳動後染色不要、脱色不要
PROTOCOL FOR AGAROSE GEL ELECTROPHORESIS
1. 染色試薬・ゲル・バッファーに触る前に手袋をつけてください。
2. アガロースの製造者の指示に従い、溶液を調整してください。
3. アガロース溶液を手で扱える温度に冷ましてください。
4. 100 ml のアガロース溶液に対して 5µl の StainIN™ GREEN を、ゲル枠
に流し込む直前に加えてください。
5.泡の発生を避けて穏やかに溶液を混ぜ、静かにゲル枠に注いでコウムを
挿入してください。
6. 必要量の1X TAE or 1X TBE ランニングバッファー を準備して下さい。
7. ランニングバッファー 100 ml あたり 2,5 - 3 µl のStainIN™ GREEN を
加えてください。
8. ゲルとランニングバッファーを泳動槽に入れ、通常通りに電気泳動を
行ってください
9. ブルーLEDもしくはUVでゲルを照らし、核酸を観察してください。
• 通常脱色は必要ありませんが、バックグラウンドが高い場合は脱色を行
うと改善することがあります。泳動後の染色はお勧めしません。
• DNAをクローニング用に用いる場合はUVを使用せず、ブルーLED光を
使用してください。
• 写真を撮影する場合は SYBRGreen用のフィルターを使用して下さい。
• 数回に一度、ステップ7に従いランニングバッファーを新しいものと交
換してください。
• ゲルを溶かして再利用する場合は、少なくともステップ4の半量の
StainIN™ GREEN を加えてください。
PROTOCOL FOR PAGE
1. 染色試薬・ゲル・バッファーに触る前に手袋をつけてください。
2. 変性もしくは非変性のアクリルアミド(PAA)溶液を、製造者の指示に
従い調整してください。
3. TEMED と APS を加え、直ちに次のステップに進んでください。
4. 100 ml のPPA溶液に対して 5µl の StainIN™ GREEN を、ゲル枠に流し
込む直前に加えてください。
5.泡の発生を避けて穏やかに溶液を混ぜ、静かにゲル枠に注いでコウムを
挿入してください。
6. 必要量の 1X TBE ランニングバッファー を準備して下さい。
7. ランニングバッファー 100 ml あたり 2,5 - 3 µl のStainIN™ GREEN を
加えてください。
8. ゲルとランニングバッファーを泳動槽に入れ、通常通りに電気泳動を
行ってください。
9. ブルーLEDもしくはUVでゲルを照らし、核酸を観察してください。
• 脱色は不要です。泳動後の染色はお勧めしません。
• 写真を撮影する場合はSYBERGreen用のフィルターを使用して下さい。
• 数回に一度、ステップ7に従いランニングバッファーを新しいものと交
換してください。
IN VITRO RESEARCH USE ONLY
PERFORMANCE
左画像- StainIN™ GREEN Nucleic Acid Stainを用いたアガロースゲル染色
右画像- StainIN™ GREEN の最適励起波長(490 nm)と蛍光波長(520 nm、DNA
の場合)。※RNAの場合は635nm
Info Tel: +497250 33 13 401 [email protected]
PROTEIN LADDER COLORED LADDER BANDS IN KDA (TRIS-GLYCINE, 4-20% GRADIENT GEL)
Cozy™ Prestained ----- 11 -- 17 ---- 25 -- 35 -- 48 -- 63 -- 75 -- 100 -- 135 ---- 180
CozyHi™ Prestained 5 --- 11 - 17 ---- 25 -- 35 -- 48 -- 63 -- 75 -- 100 -- 135 ---- 180 ------- 245
Selection of Protein Electrophoresis Ladders
order@ highQu.com Order Tel: +497250 33 13 401 65
Protein Electrophoresis Ladders
CAT.# SIZE COMPONENTS COMPONENT COMPOSITION
PRL0102200回
(5 µl/回)2 x 0.5 ml - Cozy™ Prestained Protein Ladder
すぐゲルにアプライ可能な染色済みプロテインラダー
組成:20 mM Tris-Phosphate (pH 7.5 at 25°C), 2% SDS, 0.2 mM DTT, 3.6 M Urea, 15% (v/v) glycerol).
PRL0202200回
(5 µl/回)2 x 0.5 ml - CozyHi™ Prestained Protein Ladder
IN VITRO RESEARCH USE ONLY
APPLICATIONS• 変性ゲル上およびウエスタンブロットでのタンパク質量の推定
• 電気泳動中の状態確認
BENEFITS• 室温で2週間保管可能。すぐにご使用になれます。
• 明瞭なバンド。クリアなカラー。
Cozy™ Prestained Protein Ladder
10 - 180 kDa レンジ
計10バンド:25(緑) & 75(赤) kDa はリファレンス
濃度:0.2 - 0.4 µg/µl (各バンド当り)
直接アプライが可能
標準使用量: 3- 5 µl/gel well (電気泳動)
標準使用量: 2- 3 µl/gel well (ウエスタンブロット)
保管温度と期限:• 室温: 2週間 • 冷蔵(4℃):3ヶ月
• 冷凍(-20℃):12ヶ月
Cozy™ Prestained Protein Ladder
3.5 - 245 kDa レンジ
計13バンド:25(緑) & 75(赤)kDa はリファレンス
濃度:0.2 - 0.4 µg/µl (各バンド当り)
直接アプライが可能
標準使用量: 3- 5 µl/gel well (電気泳動)
標準使用量: 2- 3 µl/gel well (ウエスタンブロット)
左の写真はタンパク分子量測定のガイドラインを示しています。掲示されてい
るそれぞれの分子量は、同等の分子量を示す既知の未染色タンパク質を基準と
して決定されています。より正確な分子量の測定のためには、ご使用される実
験環境に応じたキャリブレーションを行う必要があります。
左の写真はタンパク分子量測定のガイドラインを示しています。掲示されてい
るそれぞれの分子量は、同等の分子量を示す既知の未染色タンパク質を基準と
して決定されています。より正確な分子量の測定のためには、ご使用される実
験環境に応じたキャリブレーションを行う必要があります。
保管温度と期限:• 室温: 2週間 • 冷蔵(4℃):3ヶ月
• 冷凍(-20℃):12ヶ月
Info Tel: +497250 33 13 401 [email protected]
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