Pestvirus - UFRGS · •Final dos anos 60 no Brasil (CORREA et al, 1968) odoença gastroentérica,...
Transcript of Pestvirus - UFRGS · •Final dos anos 60 no Brasil (CORREA et al, 1968) odoença gastroentérica,...
Material e Métodos • Animais:
o Leitões de 8 semanas de idade
o Livres de BVDV
• Vírus:
o BVDV-1b não-citopático estirpe St. Oedenrode – isolado de tonsila de suíno naturalmente infectado
o Multiplicado em traqueia de embrião bovino
o CSFV estirpe Paderborn – isolado em 1997 surto na Alemanha
o Multiplicado em PK15
Material e Métodos
• Delineamento experimental:
o Grupo 1 – 10 leitões inoculados com BVDV
o Grupo 2 – 10 leitões contatos com BVDV
o Grupo 3 – 10 leitões controle
• Inoculação:
o Após 35 dias todos os animais foram desafiados com CSFV
Material e Métodos
• Análises:
o Contagem de células sanguíneas
o Isolamento Viral
o Sorologia – ELISA e NPLA (Neutralização ligada a peroxidase)
o Imunofluorescência
Resultados
• Os leitões não apresentaram sinais clínicos após inoculação com BVDV
• Depois do desafio com CSFV um leitão do grupo controle apresentou quadro virêmico por 20 dias
o Febre, letargia, diarreia e inchaço de membros posteriores
Resultados
• Contagem de células sanguíneas:
o Leucopenia nos animais contato e controle
o Constante e sem sinais de leucopenia no grupo inoculado com BVDV
• Isolamento viral:
o BVDV em fluido orofaringeal e amostras de soro
o 1 leitão do grupo contato positivo para BVDV
o CSFV não foi isolado no grupo inoculado com BVDV
o Grupo contato e controle - positivo para o vírus
Resultados
• Sorologia
o Todos os leitões inoculados com BVDV e um leitão do grupo contato apresentaram anticorpos
o Todos os leitões do grupo contato e controle apresentaram anticorpos contra CSFV
• Imunofluorescência
o CSFV – baço, íleo, rim e tonsila de um leitão do grupo controle
Discussão e Resultados
• Transmissão do BVDV entre suínos demonstrou ser possível, só que de forma limitada
• Infecção auto-limitante
• Não houve transmissão do CSFV nos leitões com anticorpos contra o BVDV
• Presença de anticorpos contra o BVDV pode proteger contra os sinais clínicos da infecção pelo CSFV e limitar ou prevenir a transmissão do vírus
Discussão e Resultados
• Durante surtos, o CSFV pode não ser diagnosticado em rebanhos com alta prevalência de anticorpos contra o BVDV
• Resultados do teste de neutralização ligada a peroxidase podem apresentar diagnósticos errôneos, não detectando anticorpos contra CSFV
• Necessidade de teste que diferencie os pestivírus
Introdução
• Família Flaviviridae
• Gênero Pestivirus
• Diarreia Viral Bovina
• Peste Suína Clássica
• São antigenicamente relacionados
• Suínos infectados com BVDV demonstram certo grau de proteção clínica com o CSFV
• Outros vírus antigenicamente relacionados:
o Hobi-like - 2004 na Suíça: soro bovino vindo do Brasil
o Bungowannah – granja de suínos, Austrália
o Pronghorn em antílopes
o Giraffe em girafas
BVDV
• Primeiro relato – 1946, no Canadá (OLAFSON et al., 1946)
• Final dos anos 60 no Brasil (CORREA et al, 1968)
odoença gastroentérica, com aspectos clínicos e patológicos compatíveis a Doença das Mucosas
• 1973 - uma estirpe de Diarreia Viral Bovina (BVDV) isolada pela primeira vez em suínos (FERNELIUS et al., 1973)
CSFV
• Primeiro surto relatado na França em 1822 (Cole et al., 1962)
• Lista da OIE
• Brasil possui regiões livres de CSFV sem vacinação
• Genoma RNA de fita simples e sentido positivo, com aproximadamente 12,3 a 12,5 kb.
• Possui envelope.
• Genoma contém uma única fase de leitura (ORF), flanqueada pelas regiões não traduzidas 5’ e 3’.
• A ORF codifica uma poliproteína que é posteriormente clivada gerando proteínas estruturais e não-estruturais.
• Diferem nas sequências da região não traduzida 5’ e gene E2.
• CSFV é mais estável e diferentes cepas podem sem agrupadas com base nas diferenças nos nucleotídeos das sequências da 5’ UTR, região N terminal da E2 e região da NS5B
• Similaridade entre CSFV e BVDV – cerca de 70%
• Alta homologia - NS3 da proteína NS2-3
• Baixa homologia – proteína E2
oBVD-1 dividido em 16 subgenótipos
oBVDV-2 dividido em 4 subgenótipos
• Os biótipos citopático e não-citopático são diferenciados baseado na ação lítica do vírus em cultura de células
• Um sorotipo de CSFV
• Subgrupos: 1.1, 1.2, 1.3; 2.1, 2.2, 2.3; 3.1, 3.2, 3.3 e 3.4
• Número de cepas de variável virulência e antigenicidade podem ser distinguidas com anticorpos monoclonais
Receptores Celulares
• CD46 – receptor celular para o BVDV
• CD46 e Heparan sulfato – receptor celular para CSFV
Vídeo
• http://www.cast-animal-health.com/portfolio/bovine-viral-diarrhoea-animation/