INTRODUCCIÓN

El siguiente informe contiene procedimientos y técnicas realizadas en el Laboratorio.

Las parasitosis intestinales constituyen un importante problema de salud

principalmente para los países en vías de desarrollo. Si bien no causan mortalidad

directa, sí importante morbilidad, pudiendo ser asintomáticas y disminuir el potencial

educativo en los niños. Por ello, es importante el diagnóstico y tratamiento temprano

ya que varios estudios muestran relación entre las infecciones parasitarias y

consecuencias negativas en la función cognoscitiva, aprendizaje y anemia

PRÁCTICA NUMERO 1

RECONOCIMIENTO GENERAL DE PARÁSITOS

Los parásitos son organismos que obtienen su nutrición y viven en o sobre el organismo huésped, mientras que cause daños a la misma. No sólo infligir seres humanos, pero también puede ser una causa de preocupación para los animales. Un ataque de parásitos en seres humanos, así como animales puede causar una serie de problemas de salud tales como diarrea, fatiga, exantema, nerviosismo, asma, anemia y más para el anfitrión. Algunos ejemplos clásicos de los parásitos en los humanos son las tenias, trematodos, las especies de Plasmodium y pulgas. Hay una gama de parásitos que se clasifican sobre la base de la interacción con el huésped y el ciclo de vida.

Clasificación de los parásitos

Los parásitos pueden clasificarse teniendo en cuenta distintos criterios:

1- Según habiten en el interior ó en la parte externa del huésped, se clasifican en:

Endoparásitos, que pueden ser intracelulares, como Leishmanias sp. O extracelulares, por ejemplo Fasciola hepatica

Ectoparásitos, por ejemplo Sarcoptes scabei (sarna) Se suele dar el nombre de infección a la invasión interna y de infestación a la

externa, por ectoparásitos

3- Según la capacidad de producir lesión o enfermedad en el hombre, se clasifican en:

Patógenos No patógenos

Los patógenos en determinadas circunstancias no producen sintomatología ni causan daño al huésped, como ocurre en los portadores. En condiciones especiales de susceptibilidad del huésped, los no patógenos pueden aumentar su capacidad de producir lesión, en este caso se los considera parásitos oportunistas.

4- Según la necesidad, se clasifican en:

Obligatorio, es el que requiere de por lo menos un huésped para cumplir todo o un parte de su ciclo evolutivo

Facultativo: cuando un organismo de vida libre puede adaptarse a la vida parasitaria, por ejemplo Strongyloides stercoralis.

Accidental, cuando un organismo de vida libre llega a un huésped y continúa en él su ciclo sin adaptarse a la vida parasitaria, por ejemplo Naegleria fowleri

Lo que agrupamos bajo el nombre de parásitos es una gama variada de seres vivos que va desde organismos unicelulares a multicelulares, e incluyen tres grupos:

protozoarios metazoarios o helmintos artrópodos parásitos

MATERIALES

Muestras de helmintos adultos Muestra de heces con elementos parasitarios (quistes y huevos. Laminas portaobjeto Laminas cubreobjetos Lugol Palillo o baja lengua

Procedimiento y resultados

1. Observación de protozoos a) Colocar una gota de lugol en una lámina portaobjetob) Tomar la muestra de heces con un palillo c) Observar las características de los protozoos que permiten su identificación.

2. Observar helmintos

a) Tremátodes: Se observo la forma de hoja del cuerpo del parasito adulto, y la presencia de la ventosa oral y ventral.

b) Cestodes: Se observo la forma de cinta del cuerpo y la presencia de segmentos.

c) Nematodes: Se observo la foma cilíndrica del cuerpo y el dimorfismo sexual.

PRÁCTICA NUMERO 2

RECONOCIMIENTO DE DE PROTOZOARIOS RIZÓPODOS

Las amebas son protistas unicelulares. Son células eucariotas, que se caracterizan por su forma cambiante, puesto que carecen de pared celular, y por su movimiento ameboide a base de seudópodos (prolongación del citoplasma), que también usan para capturar alimentos (a través del proceso llamado fagocitosis). Las amebas pueden vivir libres en agua o tierra o parasitando el intestino del hombre o de los animales.

Se encuentran típicamente en vegetación en descomposición. Sin embargo, debido a la facilidad con la que se obtienen, pueden guardarse en laboratorios, ya que son objeto común de estudio.

Cada ameba solo posee un núcleo, y una vacuola que mantiene su presión osmótica, y obtienen su comida por fagocitosis.

Tipos de amebas

Entamoeba histolytica

Ciclo Biológico:

El trofozoíto de E. histolytica mide entre 20 y 60 &µm, encontrándose por lo general entre 15 y0 &µm. El menor tamaño es del trofozoíto que no está invadiendo tejidos, es decir de baja patogenicidad. Se dice que esta en forma minuta. Mientras que la forma de mayor tamaño correspondería a la cepa invasiva, este esta en forma magna.

El quiste es de forma infectante, de 10 a 20 &µm de diámetro, esférico, con membrana quística mas gruesa, desaparece la vacuola y se adelgazan las barras cromatoidales, que son masas de ARN condensados. Estas barras desaparecen en un quiste maduro. En esta especie de ameba siempre son redondos en las puntas.

Entamoeba coli

Esta especie es similar a la mencionada anteriormente. El ciclo biológico es igual. Los trofozoítos miden entre15 a 50 &µm, muy similares a los de E. histolytica, excepto en que, como inclusiones citoplasmáticas, tiene bacterias, nunca hematíes (no es hematófaga), la disposición de la cromatina nuclear es más irregular en la periferia, tanto en tamaño como en su distribución, y el cariosoma es excéntrico. La emisión de pseudópodos es lenta.

Los quistes miden entre 15 y 30 &µm, tienen entre 1 y 8 núcleos y las barras cromidiales terminan en puntas astilladas.

ENTAMOEBA HARTMANI

Esta especie es la mas parecida a E. histolytica. Se diferencia fundamentalmente por su menor tamaño. Sus troforzoítos miden entre 4 y 12 &µm y los quistes entre 5 y 10 &µm. Los pequeños núcleos tienen cromatina dispuesta igual que E. histolytica.

ENDOLIMAX NANA

Los trofozoítos, que miden entre 6 y 15 &µm, son poco móviles, se caracterizan por poseer las características nucleares de este género: un grueso cariosoma central, muy bien visible y coloreado, el que puede estar excéntrico o adosado a la membrana del núcleo.

Los quistes, de 8 a 10 &µm, tienen forma ovalada y contienen entre uno y cuatro núcleos con las mismas características de los trofozoítos.

IODAMOEBA BÜTSCHLII

Este genero sebe su nombre a una característica vacuola yodófila que ocupa más de la mitad del quiste.

Los trofozoítos miden entre 6 y 25 &µm, con citoplasma vacuolado y bacterias en su interior. El núcleo se presenta con las características correspondientes al género Iodamoeba: cariosoma central o excéntrico, con cromatina dispuesta alrededor del mismo, como rulos, dándole

aspecto de una diminuta flor que permite visualizar un espacio claro entre esta estructura y la membrana nuclear.

Los quistes, de 6 a 18 &µm, piriformes, con la típica vacuola que se tiñe perfectamente con lugol y que ocupa más de la mitad del mismo en la parte más ancha. El núcleo se encuentra en la región mas estrecha del quiste, con las características nucleares ya descriptas.

Materiales

• Muestra de heces con elementos parasitarios (quistes y huevos).• Pool de amebas (entamoeba hystolitica, E. Nana, E. coli)• Laminas portaobjeto • Laminas cubreobjetos • Lugol • Palillo o baja lengua

EXAMEN MACROSCÓPICO DE LAS HECES (2 Muestras)

Muestra Nº1

Consistencia

Blanda, sólida y formada............................................ Normal

Restos de alimentos................................................... Tránsito rápido

Color (influenciado por la dieta, fármacos, aditivos alimentarios.)

Pardo oscuro............................................................... NormalAmarillo........................................................................Dieta lácteaCastaño oscuro.......................................................... Dieta cárnica

Olor

Fecal , característico................................................. Normal

No se observo parasito en esta muestra

Procedimiento y resultados del pool

3. Observación en el microscopio d) Colocar una gota de lugol en una lámina portaobjetoe) Tomar la muestra de heces con un palillo f) Colocar la lamina cubre objetog) Observar las características de los protozoos que permiten su identificación.

PRÁCTICA NUMERO 3

RECONOCIMIENTO DE PROTOZOARIOS FLAGELADOS

La Giardia lamblia

Es un protozoario, flagelado, de simetría bilateral, extracelular, anaerobio, binucleado

y piriforme. Parasita el tracto digestivo de humanos y otros mamíferos, produciendo

una patología denominada giardiosis, giardiasis o lambliasis.

Ciclo de vida

Vive en forma de trofozoito en la luz del intestino delgado adherido a las vellosidades

intestinales.

Se alimenta y se reproduce hasta que el contenido intestinal inicia el proceso de

deshidratación, momento en que la Giardia lamblia comienza el enquistamiento del

trofozoito. El trofozoito pierde los flagelos, adquiere una morfología ovalada.

Los quistes expulsados junto a las heces ya son infectantes. Cuando quistes son

ingeridos por un nuevo hospedador, llegan al duodeno, donde se disuelve la pared

quística, dando así lugar aun individuo tetranucleado que se divide inmediatamente en

dos trofozoitos binucleados que se anclan al epitelio intestinal, cerrando así su ciclo.

Trichomona Vaginalis

Es un parásito unicelular y cosmopolita y se localiza en el tracto genitourinario de la mujer y el hombre. Según la OMS se tiene un estimado anual de 180 millones de personas afectadas en el planeta. Todas las especies del género Trichomonas son parásitos y ninguna de ellas produce quistes; por lo tanto, solamente son conocidas en el estado de trofozoito.

Se multiplica en forma asexuada por fisión binaria longitudinal; tiene forma piriforme, mide de 7 a 23 µm por 5 a 12 µm de ancho; presenta cuatro flagelos anteriores libres y un quinto sobre la membrana ondulante. Posee un grueso axostilo. El núcleo es grande, ovalado, excéntrico y localizado hacia el extremo anterior. La infección producida por este protozoo flagelado se denomina trichomonosis vaginal.

Ciclo de vida

El hombre es el único huésped natural conocido; la infección tiene como mecanismo de transmisión principal el contacto sexual. La infección durante el baño es altamente improbable, en forma ocasional puede ser contraída a través de piscinas, aguas termales y por el uso compartido de ropa interior, toallas, etc; esta forma de transmisión extravenérea se ha comprobado en niñas y mujeres vírgenes. El parásito se produce en las vías urinarias y genitales en la forma de trofozoitos.

MATERIALES

• Muestra de heces con elementos parasitarios (quistes y huevos).• Pool de protozoo flagelados • Laminas portaobjeto • Laminas cubreobjetos • Lugol • Palillo o baja lengua

EXAMEN MACROSCÓPICO DE LAS HECES 1 Muestras)

Muestra Nº1

Consistencia

Restos de alimentos................................................... Tránsito rápido

Color (influenciado por la dieta, fármacos, aditivos alimentarios.)

Amarillo........................................................................Dieta láctea

Olor

Fecal , característico................................................. Normal

Procedimiento y resultados

4. Observación a) Colocar una gota de lugol en una lámina portaobjetob) Tomar la muestra de heces con un palillo c) Colocar la lamina cubre objetod) Observar las características de los protozoos que permiten su identificación.

Solo se encontró restos fecales en la muestra

MÉTODO DE CONCENTRACIÓN POR FLOTACIÓN WILLIS

OBJETIVO: Realizar método de concentración por flotación simple.

GENERALIDADES: En 1921 Willis ,basándose en métodos de flotación simple anteriores describió el método que lleva su nombre, el cual dada su sencillez, se puede utilizar en trabajos de campo, ya que para realizarlo únicamente se requiere microscopio y laminillas. Este método se basa en un principio de flotación simple, utilizando una solución de cloruro de sodio de una densidad entre 1.200 y 1.250, en la cual los quistes, huevos y larvas flotan perfectamente.

MATERIAL Y EQUIPO:

Vasos de precipitado de 50 ml Tubos de ensaye de 13 X 100 mm Gradilla Abatelenguas de madera Portaobjetos de 26 X 76 mm Cubreobjetos de 22 X 22 mm Microscopio Solución de salmuera o solución saturada de cloruro de sodio Lugol

METODO

1.- Se colocan en el vaso de precipitado de 2 a 3 gr de materia fecal, se añade una pequeña cantidad de solución saturada de cloruro de sodio, se homogeniza.

2.- Se vierte en un tubo de ensaye hasta el borde, se coloca el cubreobjetos de tal manera que quede en contacto con la suspensión y se deja reposar durante 15 minutos.

3.- Transcurridos los 15 minutos se toma el cubreobjetos y se coloca sobre un portaobjetos al cual se le ha puesto previamente una gota de lugol.

4.- Se observa al microscopio con objetivos de 10X y 40 X.

5.- Anotar resultados de observación y hacer dibujos.

En la práctica realizada de Willis no se observo ningún tipo de parasito en la muestra solo se pudo observar restos vegetales en las heces.

PRÁCTICA NUMERO 4

RECONOCIMIENTO DE PROTOZOARIOS HISTOPARASITOS

Leishmania es un género de protistas responsable de la enfermedad conocida

como leishmaniasis, o leishmaniosis. El principal vector de infección son

los mosquitos de los géneros Phlebotomus (en eurasia y africa) y Lutzomyia (en

América). Sus víctimas son vertebrados: la leishmaniosis afecta

a marsupiales, cánidos, roedores y primates. Se estima que unos 12 millones de

personas padecen leishmaniosis hoy en día.

Morfología

Los especímenes de Leishmania muestran dos morfologías durante su ciclo vital:

Promastigote, alargada con un cilio o flagelo anterior, en el intestino del

invertebrado vector.

Amastigote, esférica y con un cilio muy corto, que no sobresale de la bolsa flagelar,

de modo que sólo es apreciable en el microscopio eléctrónico, que se reproduce

dentro de macrófagos y células delsistema retículoendotelial del huésped

vertebrado. Las infecciones se producen en la piel (cutáneas), piel

y mucosas(mucocutáneas) o en los órganos (viscerales).

MATERIALES

• Muestra de heces con elementos parasitarios (quistes y huevos).• Pool de protozoo flagelados • Laminas portaobjeto • Laminas cubreobjetos • Lugol • Palillo o baja lengua

EXAMEN MACROSCÓPICO DE LAS HECES 1 Muestras)

Muestra Nº1

Consistencia

Restos de alimentos................................................... Tránsito rápido

Color (influenciado por la dieta, fármacos, aditivos alimentarios.)

Amarillo........................................................................Dieta láctea

Olor

Fecal , característico................................................. NormalProcedimiento y resultados

Observación

Se observo en la lamina fijada de Leishmania

CONCLUSIONES

En las prácticas realizadas, pude diferenciar los restos vegetales, almidón, grasas de 0parasitos. Entre los parásitos existen diferencias minuciosas, debido a su morfología de cada especie

Solo se encontró restos fecales en la muestra