Obtención de Riboflavina Vitamina b2 Equipo 8

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    Universidad Autónoma de NuevoLeón

    Facultad de Ciencias QuímicasQuímico Farmacéutico Biólogo

    Equipo:Mireya Abigail Santiago Reyes 1583266Brenda Alejandra Castillo Navarro 1587065Brandon Efrén Caballero Morales 1583927

     Jorge Isaac Ramírez Sepúlveda 1560538Erik Bernardo Liñán Vázquez 1554516

    Profesor: M.C Julio S

    OBTENCIÓN DE RIBOFLAVINA ( VITAMINA B2), POR PROCESO DEFERMENTACIÓN SUMERGIDA EN MEDIO DE PRODUCCIÓN DE AGUA

    DECOCIMIENTO DE MAÍZ Y ACEITE DE SOYA UTILIZANDO COMOMICROORGANISMO PRODUCTOR SACCHAROMYCES CEREVISIAE

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    OBJETIVO GENERAL

    Obtención de riboflavina ( Vitamina B2), por el proceso de fesumergida en medio de producción de agua de cocimiento de

    aceite de soya utilizando como microorganismo productorSaccharomyces cerevisiae.

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    OBJETIVOS ESPECÍFICOS

    Recolectar de la industria alimenticia agua de cocimiento de maíz y esta enriquecerla soya, para usarlo como medio de producción en la obtención de metabolitos de intervitamina B2.

    Optimizar las condiciones de la cinética de crecimiento microbiana en el proceso de fsumergida para la obtención de la vitamina B2. 2.

    Identificar la vitamina B2 obtenida en el caldo de producción por fluorescencia en cám

    Cuantificar la vitamina B2 obtenida en el caldo por el método oficial espectrofotomet

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    vitamina

    Es un compuestofluorescente de color

    amarillo anaranjado, soluble

    en agua, termoestable y lábila la acción de la luz.

    Es el compuesto matriz del flavín adenín dinucleótido (FAD) y el flavín mon(FMN) 2 coenzimas que desempeñan un papel importante en las reaccionereducción

    RIBOFLAVINA

    B2

    INTRODUCCIÓN

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    CARENCIA DE RIBOFLAVINA

    Genera trastornos oculares, bucales y cutáneos.

    Bucales: inflamación de la comisura de la boca, labios resecos, lisos y

    brillantes, inflamación de la lengua (glositis) y dolor de garganta.

    Cutáneos: dermatitis seborreica o caída del cabello por enfermedad de la piel

    (alopecia).Otros síntomas son la anemia, la cicatrización lenta y la fatiga

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    OBTENCIÓN DE RIBOFLAVINA

    La riboflavina puede ser obtenida por biosíntesis sometiendo medios nutritivos escogidos a fercultivos puros de varios microorganismos. Se conocen tres grupos de microorganismos que sinen cantidades importantes:

      – Bacterias del grupo butanol-acetona, del que el representante principal es el

    Clostridium acetobutylicum.

      – Ciertas levaduras del género Cándida.

      – Dos hongos afines a las levaduras; Eremothecium ashbyii y Ashbya

      gossypii 

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    MARCO TEÓRICO

    La realización de las aguas residuales derivadas delproceso de mixtamalización, se basa por una parte enque estas aguas residuales contienen sobrantes propiosdel maíz, así como restos de cal que fue usada durante lacocción. Esta materia orgánica e inorgánica es una fuentede contaminación desde el punto de vista ambiental.

    Valor nutricional del agua de maízLa utilización del agua de cocimiento

    objeto aprovechar una buena cantidorgánicas incluyendo las proteínas, carb

    liberados del grano de maíz, durantcocción y que dan por resultado un me

    en nutrientes orgánico

    La aplicación del estudio cinético de crecimpermite la utilización de este medio para lun método de obtención de vitamina B2 umicroorganismo de fermentación la levaducerevisiae.

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    ELEMENTOS QUÍMICOS DEL AGUA DE MAÍZ

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    DISEÑO METODOLÓGICO

    PROCEDIMIENTO PARAPREPARAR EL MEDIO DEFERMENTACIÓN

    Recolectar elagua de

    cocción demaíz.

    Filtrar

    Separar ellíquido pordecantación

    Agregar aceitede soya,

    peptona,glicinay D-glucosa

    Agitarhasta

    disolversólidos

    Regular

    pH hasta4.5

    Esterautoclapor 15

    15 lpres

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    COMPOSICIÓN DEL MEDIO DE FERMENTACIÓN

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    PROCEDIMIENTO PARAADAPTAR LALEVADURASaccharomyces cerevisiae

    AL MEDIO DEFERMENTACIÓN.

    Pesar 10 g de levadura(Saccharomyces

    cerevisiae)

    Inocular l100 ml d

    ferm

    Agitar el medioinoculado.

    Colocaerlenm

    contieninoculad

    aparato d

    Incubar durante 24h atemperatura ambiente,con agitación constante

    (proteger de la luz).

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    PREPARACIÓN DEL BIORREACTOR

    El biorreactor con el medio de fermentamicroorganismo Saccharomyces cerevisiaecarbón para protegerlo de la luz, se crearaerobiosis y agitación, luego se coloprotegido en el hot plate.

    Se usa como biorreactor un kitazato de 1000 ml contapón de caucho y varilla hueca de vidrio paraaireación, este se lavará con agua, detergente, y se desinfectarácon alcohol isopropílico.

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    PRODUCCIÓN Y DETERMINACIÓN DE RIBOFLAVINA

    1) Preparar un Kitazato conteniendo 800ml demedio de cultivo de fermentación estéril (aguade cocción de maíz).2) Inocular con 100ml de inoculo preparadosegún procedimiento.3) Agitar para obtener homogenización

    completa.4) Incubar en condiciones de agitación yaeración a temperatura ambiente durante 8días.5) Retirar una muestra cada 24 horas.

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    DETERMINACION ANALÍTICA DE BIOMASA

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    RESULTADOS PROMEDIOS DE BIOMASA EN ENSAYOS 1, 2 Y

    La gráfica muestra la gcélulas microbianas proensayos de fermentaciótendencia de la curva v

    hasta las 72 horas, donvalor máximo de 9.63 g/siguiendo la tendencia dcrecimiento.

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    RESULTADOS DE IDENTIFICACION DE VITAMINA B2 PORFLUORESCENCIA EN CAMARA UV.

    La grafica muestra el comde la Fluorescencia en losfermentación 1,2 y 3. Se oaumento desde las 0 horahoras, donde alcanza su mintensidad y la disminució

    horas. Con esto se demupresencia de riboflavina olos ensayos ya que esta ticaracterística de identificfluorescente.

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    RESULTADOS DE CONCENTRACIÓN DE VITAMINA B2 DUPROCESO DE PRODUCCIÓN.

    La grafica muestra que a part72 horas se observa un increconcentración de vitamina B2su máximo valor a las 72 hora

    producción de 2.48 mg /L de

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    CONCLUSIONES

    La biomasa obtenida en el caldo de fermentación alcanza un valor máximo de 9.63 g/L a las 72 así, el desarrollo metabólico y los procesos bioquímicos de la Saccharomyces cerevisiae.

    En el caldo de fermentación los valores de pH se mantienen dentro del rango óptimo de (3.5 a

    la Saccharomyces cerevisiae se desarrolla funcionalmente.

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    CONCLUSIONES

    El agua de cocimiento de maíz enriquecida con aceite de soya es un medio de fermentación adeSaccharomyces cerevisiae, por que permite adquirir los carbohidratos necesarios que son transfoproduciendo, durante la oxidación aeróbica el proceso de biosíntesis con el que se alcanza su mde riboflavina a las 72 horas, obteniendo un valor de 2.48 mg / L.

    La fluorescencia observada en los ensayos de fermentación confirma la producción de vitamina máxima intensidad a las 72 horas el cual es el tiempo de máxima producción de riboflavina.