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UNIVERSIDAD NACIONALDEL CALLAO FACULTAD DE INGENIERÍA QUIMICA ESCUELA PROFESIONAL DE ESCUELA PROFESIONAL DE INGENIERÍA INGENIERÍA QUÍMICA QUÍMICA TRABAJO DE LABORATORIO DE MICROBIOLOGÍA TEMA : MICROSCOPÍA ALUMNO : CRISPIN IRAZABAL DENIS VASQUEZ MACHA MANUEL VILLACORTA GONZALES MIGUEL A.

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UNIVERSIDAD NACIONALDEL CALLAO

FACULTAD DE INGENIERÍA QUIMICA

ESCUELA PROFESIONAL DE INGENIERÍAESCUELA PROFESIONAL DE INGENIERÍA

QUÍMICAQUÍMICA

TRABAJO DE LABORATORIO DE MICROBIOLOGÍA

TEMA : MICROSCOPÍA

ALUMNO :

CRISPIN IRAZABAL DENIS

VASQUEZ MACHA MANUEL

VILLACORTA GONZALES MIGUEL A.

PROFESORA: ING. GLORIA SAENZ

2009

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LABORATORIO DE MICROBIOLOGÍA

MICROSCOPIA

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I.-OBJETIVOS

Al finalizar la práctica el alumno debe estar en la capacidad de:

Identificar la función de cada componente del microscopio y los

cuidados en su uso.

Observar las muestras con el microscopio y lograr la imagen más nítida

y detallada que el instrumento pueda brindar

Determinar el tamaño de un objeto observado en el microscopio

utilizando el ocular micrométrico y la barra de referencia de una

fotografía

II.-RESUMEN

La invención del microscopio, a diferencia de muchos otros instrumentos en la

historia de la ciencia y a semejanza de solamente unos pocos como el telescopio,

resultó en la creación de una nueva ciencia: la microbiología. El desarrollo técnico

de este instrumento, logró revelar mundos cada vez más complejos para el

entendimiento humano. En este artículo se presenta de manera cronológica cada

uno de los hitos que llevaron a su desarrollo tecnológico hasta nuestra actualidad;

Existen tipos de microscopio como la focal la electrónica la atómica, etc.

III.-HISTORIA DE LA MICROSCOPIA

Ya los antiguos sabían que los espejos curvos y las esferas de cristal llenas de

agua aumentaban el tamaño de las imágenes. En las primeras décadas del siglo

XVII se iniciaron experiencias con lentes (así llamadas por tener forma de lentejas)

a fin de lograr el mayor aumento posible. Para ello se basaron en otro instrumento

con lentes que obtuvo gran éxito, el telescopio, usado por primera vez con fines

astronómicos por

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Galileo, en 1609. Antes de esta fecha, los seres vivientes más pequeños

conocidos eran insectos diminutos. Naturalmente, se daba por sentado que no

existía organismo alguno más pequeño. Los instrumentos para aumentar la visión

de los objetos, o microscopios (la palabra griega significa “para ver lo pequeño”)

comenzaron a usarse progresivamente.

Por primera vez la biología se ampliaba y extendía gracias a un mecanismo que

llevaba el sentido de la vista humana más allá de sus límites naturales. Así, los

naturalistas podían describir en detalle los pequeños organismos, cosa de otro

modo imposible, y los anatomistas podían descubrir estructuras hasta entonces

invisibles. Existían dos tipos de microscopios: el sencillo y el compuesto; el

sencillo no era más que una lente montada el compuesto estaba formado por una

combinación de lentes y fue inventado por

Zacharias Jansen en Holanda. Los detalles sobre el primer microscopio no son

claros, pero la Fig. 1 muestra el microscopio hallado en Middleburg, Holanda

correspondiente a Jansen que contenía dos lentes.

,

Fig. 1. Primer microscopio atribuido a Jansen

Luego de la invención de Jansen, en pocos años hubo un gran número de

diseñadores de microscopios en Europa. El primer avance técnico del microscopio

luego de Jansen fue el paso de un sistema de 2 lentes a uno de 3, este sistema es

la configuración estándar que se mantiene en los microscopios de hoy. Lo

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siguiente intenta resumir los acontecimientos más sobresalientes en la historia de

la microscopía:

• El naturalista holandés Jan Swammerdam observó insectos con el microscopio

haciendo incapié en su conformación, descubrió también que la sangre no es un

líquido uniforme rojo sino que existen corpúsculos que le dan ese color.

• El botánico inglés Nehemiah Grew estudió los órganos de reproducción de las

plantas y descubrió los granos de polen.

• El anatomista holandés Reigner de Graaf realizó estudios similares en animales

describiendo ciertos elementos del ovario que desde entonces se conocen con el

nombre de folículos de Graaf.

• Marcello Malpighi fue uno de los microscopistas más grandes de la historia de

acuerdo a su espectacular descubrimiento. Sus primeros estudios los realizó con

pulmones de rana, pudiendo observar en ellos una compleja red de vasos

sanguíneos, demasiado pequeños para ser vistos por separado y muy

anastomosados.

Cuando siguió el recorrido de los vasos hasta que se unían con otros mayores,

comprobó que estos últimos eran venas en una dirección y arterias en dirección

opuesta. Por consiguiente, las arterias y las venas se hallaban unidas mediante

una red de vasos llamados capilares

Fig. 2. Modelos de microscopios Italianos del siglo XVII como los que

utilizó Marcello Malpighi.

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Los microscopios que se observan en la Fig 2 son del tipo que se diseñaba en

Italia en los tiempos de los trabajos de Malpighi.

• Otro descubrimiento importante en la época fue el del científico inglés Robert

Hooke. El microscopio lo fascinaba y realizó uno de los mejores trabajos en esta

rama, nueva para ese entonces. En 1665 publicó un libro llamado Micrographia en

el cual pueden encontrarse algunos de los mejores dibujos que se hallan hecho de

observaciones microscópicas

La observación simple más importante fue la de un delgado trozo de corcho sobre

el cual no se sabía porque flotaba en agua y era tan liviano y firme. Hooke observó

que estaba constituido por una fina trama de pequeñas celdillas rectangulares en

las cuales se encontraba aire, que él llamó “células”, un término habitual para

designar pequeñas habitaciones en los monasterios. El microscopio utilizado por

Hooke se ilustra en la siguiente figura y no había sido construido por él.

Fig. 4. Microscopio utilizado por Hooke

Los primeros en usar el microscopio, incluso Malpighi, usaron sistemas de lentes

que producían aumentos mucho mayores que los obtenidos con una sola lente.

Sin embargo, empleaban lentes imperfectos, de superficies irregulares y con fallas

internas.

Si se intentaba lograr un aumento apreciable, la visión de los detalles se hacía

confusa.

• Un comerciante holandés, Anton van Leeuwenhoek usaba lentes simples, que

por su reducido tamaño podían obtenerse de pequeños trozos de cristal perfecto.

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Puliendo cuidadosamente dichos fragmentos, logró aumentar un objeto hasta 270

veces sin perjuicio de la nitidez. Tenía 419 lentes alguna de las cuales eran de

cristal de roca y hasta de diamante, en algunos casos no eran mayores que el

tamaño de un alfiler, por lo que sus microscopios tenían un tamaño diminuto

comparados con otros de la misma época

Fig. 5 Microscopio diseñado por Leeuwenhoek

Con esas lentes observaba todo lo que podía y logró describir los glóbulos rojos

de la sangre y los capilares con mayor detalle que los verdaderos descubridores:

Swammerdam y Malpighi. Pero lo más sensacional de todo ello fue su

descubrimiento de pequeños organismos invisibles a simple vista, al estudiar

aguas estancadas con su microscopio, con todos los atributos de la vida. Las

descripciones de van Leeuwenhoek eran, desde luego, imprecisas, pero no cabe

duda que fue el primero en ver lo que más tarde se llamarían bacterias y

“animalículos”, como los denominó entonces, conocidos hoy como protozoarios

que en griego significa pequeños animales.

• El microscopista danés Otto Muller consiguió en 1773 distinguir lo

suficientemente bien a aquellos pequeños seres para clasificarlos en dos tipos:

bacilos (que significa“pequeños vástagos”) y espirilos (por su forma espiral).

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Fig. 6 Como se utiliza un microscopio de lLeeuwenhoek

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Fig. 7 Microscopio acromático diseñado y utilizado por Lister

El microscopio fue perfeccionándose con gran lentitud, uno de los defectos de los

microscopios primitivos era que sus lentes descomponían la luz blanca en los

colores que la constituyen. Los objetos pequeños se veían rodeados de anillos de

color (aberración cromática) que impedían observar con claridad los detalles. Pero

alrededor de 1820 se perfeccionaron cuando Joseph Jackson Lister, un óptico

inglés, diseñó un microscopio acromático capaz de eliminar los anillos de color

que limitaban la claridad de la imagen. Lister descubrió que los glóbulos rojos eran

en realidad, discos bicóncavos. El microscopio acromático constituyó un gran

avance, iniciando una serie de perfeccionamientos que dieron como resultado el

moderno microscópio óptico.

Desde 1660 hasta la actualidad el microscopio óptico ha sido el pilar fundamental

en el conocimiento de lo invisible. Aunque su poder de resolución aumentó a

través del tiempo (con la mejora en la calidad de las lentes) al igual que el poder

de magnificación, su factor limitante fue la longitud de onda de la luz. En 1930 el

mundo submicroscópico se amplió con la aparición del microscopio electrónico

cuya ventaja principal con respecto al microscopio óptico es un aumento de 1000

veces en la magnificación del material observado acompañado de una mayor

capacidad de resolución generando una mejor definición y una ampliación del

mundo microscópico.

ADN, virus y pequeñas organelas fueron observadas por primera vez con este

microscopio.

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La mayoría de los pioneros en la microscopía electrónica en biología siguen vivos

y los más importantes son: Albert Claude, Don Fawcett, Earnest Fullam, Charles

Leblond, John Luft, George Palade, Daniel Pease y Keith Porter. Claude y Palade

recibieron el Premio Nobel de Medicina en 1974 por sus logros en biología celular

utilizando el microscopio electrónico.

Existen dos tipos básicos de microscopios electrónicos los cuales fueron

inventados al mismo tiempo pero tienen diferentes usos.

El microscopio electrónico de transmisión (MET) proyecta electrones a través de

una fina capa de tejido o material a observar produciendo una imagen en dos

dimensiones sobre una pantalla fosforescente.

El brillo en un área particular de la imagen es proporcional al número de

electrones que son transmitidos a través del material. El microscopio electrónico

de barrido (MEB) produce una imagen que da la impresión de ser en tres

dimensiones. Este microscopio utiliza dos o tres puntos de la muestra donde

llegan los electrones que escanean la superficie del especimen a observar y salen

del especimen como electrones secundarios siendo detectados por un sensor. La

imagen se produce como el especimen entero, a diferencia del MET donde la

imagen corresponde sólo a los electrones transmitidos

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Fig. 8 Diferencias básicas entre el MET y el MEB

La siguiente figura muestra los distintos tipos de células y componentes que

pueden ser vistas sólo con el microscopio electrónico y no con el microscopio

óptico (como las moléculas pequeñas y los virus), como así también otras

estructuras que pueden ser vistas con los dos tipos de microscopios (célula

animal, célula vegetal y bacterias).

IV.-TIPOS DE MICROSCOPIOS

Existen varios tipos de microscopios entre los mas destacados son:

Microscopio de luz

El microscopio de luz es un aparato óptico usado para amplificar y resolver deta-

lles finos de un objeto microscópico. Está compuesto de diferentes partes: mecá-

nica, óptica y de iluminación

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Microscopio de contraste de fase (microscopio de luz modificado)

Permite observar células sin colorear y resulta especialmente útil para células

vivas. Este aprovecha las pequeñas diferencias de los índices de refracción en las

distintas partes de una célula y en distintas partes de una muestra de tejido.

Microscopio de campo oscuro (microscopio de luz modificado)

Método por el cuál la muestra es observada sobre un fondo oscuro, al dirigir la luz

por los lados de la muestra la luz no pasa directamente a través del espécimen el

espécimen es iluminado desde los lados

Microscopio de fluorescencia

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La resolución similar a la de la microscopía de luz, es otra técnica para lograr

contraste usando tintes fluorescentes

Microscopía de fluorescencia (se utiliza un pigmento que genera luz al absorber

luz de un largo de onda específico), permite visualizar células en un medio

complejo, suelo, agua, muestras ambientales.

Microscopio electrónico de rastreo

Se utiliza para imágenes de alta resolución de partes externas de la célula o

superficies de objetos, la muestra se cubre con una capa fina de metal, y se

rastrea con un rayo de electrones en presencia de un vacío y el patrón de

movimiento de los electrones sobre la muestra produce una imagen

Microscopio electrónico de transmisión

Se usa para visualizar estructuras internas de una célula; requiere el corte de las

muestras en secciones delgadas (nm de ancho)

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Microscopio de fuerza atómica

Resolución similar al microscopio electrónico de rastreo, contrario a microscopios

electrónicos, genera imágenes de muestras suspendidas en aire o agua y permite

ver células vivas

Microscopio Confocal Laser

Con un laser realiza cortes ópticos (la muestra permanece intacta) de diferentes

capas de una muestra gruesa imágenes de cada capa pueden solaparse para

crear una imagen completa del espécimen

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V.- MICROSCOPIA

La microscopía es la técnica de producir imágenes visibles de estructuras o

detalles demasiado pequeños para ser percibidos a simple vista. En la

microscopía se evidencia los grandes aportes que la física ha hecho a la biología.

VI.-ALGUNOS CONCEPTOS IMPORTANTES EN MICROSCOPÍA

Aumento: Es la proporción entre el tamaño de la imagen observada al

microscopio y el tamaño real del objeto. El aumento total puede calcularse como el

producto del aumento del ocular por el del objetivo.

Distancia frontal: Es la distancia ente el objeto observado y la lente del objetivo

cuando el preparado se encuentra enfocado correctamente. Es inversamente

proporcional al aumento, es decir, que a medida que se utilizan objetivos de mayor

aumento disminuye la distancia frontal y por lo tanto aumenta el riesgo de romper

el preparado.

Profundidad de campo o de foco o poder de penetración: Es el espesor del

preparado que se observa con nitidez, es decir, profundidad de planos que están

en foco en un momento dado. Con aumentos medianos o grandes, al mover el

tornillo micrométrico, podemos observar sólo pequeños espesores con nitidez,

mientras que por encima y por debajo de esta zona la imagen se desvanece.

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La profundidad de foco guarda relación inversa con el aumento: es tanto menor

cuanto mayor es el aumento de la lente. Con inmersión en aceite, la profundidad

de campo es muy escasa (menor que 1 um).

tornillo micrométrico, podemos observar sólo pequeños espesores con nitidez,

mientras que por encima y por debajo de esta zona la imagen se desvanece.

La profundidad de foco guarda relación inversa con el aumento: es tanto menor

cuanto mayor es el aumento de la lente. Con inmersión en aceite, la profundidad

de campo es muy escasa (menor que 1 m).

Campo observado: Es la porción del preparado incluida en la imagen. Se

representa por el diámetro de la parte de la preparación que se está observando

(área del campo). El tamaño del campo observado es inversamente proporcional

al aumento total del microscopio, y por esta razón las lentes de pequeño aumento

son útiles para rastrear la preparación. Si cambiamos de un objetivo a otro de

mayor aumento, observaremos una imagen más aumentada pero que incluirá sólo

una parte de lo que observábamos con el objetivo menor.

Poder de resolución: Es la capacidad de las lentes de distinguir o resolver

(mostrar separados) con nitidez dos puntos situados muy próximos entre sí. Se

expresa como la distancia mínima que permite dar una imagen bien definida de

dos puntos, en vez de verlos como uno solo.

Cuanto mayor es el poder de resolución (PR), menor es la distancia que separa

los puntos entre sí sin que estos se confundan. En consecuencia, cuanto mayor

sea el poder resolutivo del objetivo, más finos serán los detalles de la preparación

que puedan distinguirse.

Límite de resolución: Es la distancia mínima que debe existir ente dos puntos del

objeto para que puedan visualizarse separados. En los microscopios ópticos, el

límite de resolución no es, en general, inferior a 0.2 um.

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Apertura numérica: Es una medida de la capacidad del microscopio de agrupar

las refracciones de la luz producidas por los finos detalles del objeto, debido a que

determina el tamaño del haz de luz que es captado por el objetivo luego de haber

pasado a través del objeto. Es una característica propia de cada objetivo, es por

esto que forma parte de las inscripciones grabadas en los objetivos.

La parte mecánica del Microscopio

La parte mecánica del microscopio comprende: el pie, el tubo, el revólver, el asa,

la platina, el carro, el tornillo macrométrico y el tornillo micrométrico. Estos

elementos sostienen la parte óptica y de iluminación, además permite los

desplazamientos necesarios para el enfoque del objeto.

El pie. Constituye la base sobre la que se apoya el microscopio y tiene por

lo general forma de Y o bien es rectangular

El tubo. Tiene forma cilíndrica y está ennegrecido internamente para evitar

las molestias que ocasionan los reflejos de la luz. En su extremidad

superior se colocan los oculares.

El revólver. Es una pieza giratoria provista de orificios en los cuales se

enroscan los objetivos. Al girar el revólver, los objetivos pasan por el eje del

tubo y se colocan en posición de trabajo, la cual se nota por el ruido de un

piñón que lo fija.

La columna, llamada también asa o brazo, es una pieza colocada en la

parte posterior del aparato. Sostiene el tubo en su porción superior y por el

extremo inferior se adapta al pie.

La platina. Es una pieza metálica plana en la que se coloca la preparación

u objeto que se va a observar. Presenta un orificio en el eje óptico del tubo

que permite el paso de los rayos luminosos a la preparación. La platina

puede ser fija, en cuyo caso permanece inmóvil; en otros casos puede ser

giratoria, es decir, mediante tornillos laterales puede centrarse o producir

movimientos circulares.

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Carro. Es un dispositivo colocado sobre la platina que permite deslizar la

preparación con movimiento ortogonal de adelante hacia atrás y de derecha

a izquierda.

El tornillo macrométrico. Girando este tornillo, asciende o desciende el

tubo del microscopio, deslizándose en sentido vertical gracias a una

cremallera. Estos movimientos largos permiten el enfoque rápido de la

preparación.

El tornillo micrométrico. Mediante el movimiento casi imperceptible que

produce al deslizar el tubo o la platina, se logra el enfoque exacto y nitido

de la preparación. Lleva acoplado un tambor graduado en divisiones de

0,001 mm que se utiliza para precisar sus movimientos y puede medir el

espesor de los objetos.

Sistema Óptico

El sistema óptico es el encargado de reproducir y aumentar las imágenes

mediante el conjunto de lentes que lo componen. Está formado por los oculares y

los objetivos.

Los oculares. Los oculares están constituidos generalmente por dos

lentes, dispuestas sobre un tubo corto. Los oculares generalmente más

utilizados son los de: 8X, 1OX, 12.5X, 15X. La X se utiliza para expresar en

forma abreviada los aumentos.

Los objetivos. Los objetivos producen aumento de las imágenes de los

objetos y organismos y, por tanto, se hallan cerca de la preparación que se

examina. Los objetivos utilizados corrientemente son de dos tipos: objetivos

secos y objetivos de inmersión.

Los objetivos secos se utilizan sin necesidad de colocar sustancia

alguna entre ellos y la preparación. En la cara externa llevan una serie de

índices que indican el aumento que producen, la abertura numérica y

otros datos. Asi por ejemplo, si un objetivo tiene estos datos: plan

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40/0,65 y 160/0,17, significa que el objetivo es planacromático, su

aumento 40 y su abertura numérica 0,65, calculada para una longitud de

tubo de 160 mm. El número de objetivos varía con el tipo de microscopio

y el uso a que se destina. Los aumentos

El objetivo de inmersión está compuesto por un complicado sistema de

lentes. Para observar a través de este objetivo es necesario colocar una

gota de aceite de cedro entre el objetivo y la preparación, de manera que

la lente frontal entre en contacto con el aceite de cedro. Generalmente,

estos objetivos son de 1 OOX y se distingue por uno o dos círculos o

anillos de color negro que rodea su extremo inferior.

Los objetivos se disponen en una pieza giratoria denominada revólver

Sistema de Iluminación

Este sistema tiene como finalidad dirigir la luz natural o artificial de tal manera que

ilumine la preparación u objeto que se va a observar en el microscopio.

Comprende los siguientes elementos:

El espejo. Tiene dos caras: una cóncava y otra plana. Goza de

movimientos en todas las direcciones. La cara cóncava se emplea de

preferencia con iluminación artificial, y la plana, para iluminación natural (luz

solar). Modernamente se prescinde del espejo en la fabricación de

microscopios, ya que éstos traen incorporada una lámpara colocada en el

eje del microscopio.

Condensador. El condensador está formado por un sistema de lentes,

cuya finalidad es concentrar los rayos luminosos sobre el plano de la

preparación. El condensador se halla debajo de la platina. El condensador

puede deslizarse sobre un sistema de cremallera mediante un tornillo que

determina su movimiento ascendente o descendente.

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Diafragma. Generalmente, el condensador está provisto de un diafragma-

iris, que regula su abertura y controla la calidad de luz que debe pasar a

través del condensador.

Propiedades del Microscopio

Poder separador. También llamado a veces poder de resolución, es una

cualidad del microscopio, y se define como la distancia mínima entre dos

puntos próximos que pueden verse separados. El ojo normal no puede ver

separados dos puntos cuando su distancia es menor a una décima de

milímetro.

En el microscopio óptico, el poder separador máximo conseguido es de 0,2

décimas de micra, y en el microscopio electrónico, el poder separador llega hasta

10 ángstrom.

Poder de definición. Se refiere a la nitidez de las imágenes obtenidas,

sobre todo respecto a sus contornos. Esta propiedad depende de la calidad

y de la corrección de las aberraciones de las lentes utilizadas.

Aumento del microscopio. En términos generales se define como la

relación entre el diámetro aparente de la imagen y el diámetro o longitud del

objeto.

Esto quiere decir que si el microscopio aumenta 100 diámetros un objeto, la

imagen que estamos viendo es 100 veces mayor que el tamaño real del objeto.

Para calcular el aumento de un microscopio, basta multiplicar el aumento del

ocular por el aumento del objetivo. Por ejemplo, si estamos utilizando un ocular de

10X y un objetivo de 45X, el aumento a que estamos viendo la preparación será:

1OX x 45X = 450X, lo cual quiere decir que la imagen del objeto está ampliada

450 veces.

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VII.-MATERIALES Y EQUIPOS

Microscopio

Porta objetos

Cubre objetos

Muestra de levadura en solución

Muestra viva de levadura

VIII.-PROCEDIMIENTO EXPERIMENTAL

OSERVACION Nº1

En un corte de papel delgado de 1 cm de lado dibuje una pequeña flecha

con lápiz.

El pedazo de papel colocarlo sobre una lamina porta objetos, añadir

gotas de agua, para que el papel se adhiera al porta objetos.

Luego cubrir con el porta objetos, colocarlo sobre la platina y enfocar con

el objetivo 4X

Comentar sobre la dirección del movimiento de la figura cuando se ve a

través del microscopio.

En primer lugar aprendemos a manejar el sistema mecánico del

microscopio manipulando por ejemplo el cabezal, el revólver, platina y los

tornillos de enfoque. Luego el sistema óptico haciendo girar el revólver

para ver las distintas ampliaciones de la imagen que se pueden observar,

el diafragma y otros.

Al llevar el porta objetos al microscopio, se logro ver la imagen luego

de aprender a reconocer para que servía cada parte de este, ya que al

inicio de la experiencia el microscopio no estaba calibrado, se tuvo que

manipular el macrométrico. Y una vez calibrado se pudo observar la

imagen.

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Al observar la flecha a través del microscopio la imagen de esta se

encuentra invertida esto se debe a que la imagen proyectada por el

microscopio…….

OBSERVACION Nº2

En la lamina del porta objetos colocar una gota de la levadura utilizando

el asa de siembra o asa de kolle para extenderla.

Para poder utilizar el asa de kolle primero ponemos el extremo de esta

en la llama de un mechero hasta que la punta se ponga de un color rojo

vivo luego dejar enfriar al medio ambiente, una vez el asa de kolle este

lista expandir la muestra utilizando esta.

IX.-REFERENCIAS BIBLIOGRAFICAS

http://www.mdp.edu.ar/exactas/biologia/grupos/version%201_1/

Practicos/archivos/049_055_LECTURA_Microscopia.pdf

http://www.utmem.edu/personal/thjones/hist/c3.htm

Enciclopedia Encarta 2000. Microsoft Corporation

Asimov, I. 1997. Historia de la Ciencia II. Ed. Salvat. 731 pág

http://www.mdp.edu.ar/exactas/biologia/grupos/version%201_1/

Practicos/archivos/049_055_LECTURA_Microscopia.pdf(historia)

http://academic.uprm.edu/~cmrodriguez/

Tema_5_Micro_herramienta_est.pdf(tipos micro)

http://www.azc.uam.mx/cbi/quimica/microbiologia/p01.pdf

http://www.ucv.ve/Farmacia/Micro_web/Catedras02/usodelmicro.pdf

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