Malign Hematolojik Hastalıklarda İmmunfenotiplendirme · 2019. 12. 13. · Neoplastik...
Transcript of Malign Hematolojik Hastalıklarda İmmunfenotiplendirme · 2019. 12. 13. · Neoplastik...
![Page 1: Malign Hematolojik Hastalıklarda İmmunfenotiplendirme · 2019. 12. 13. · Neoplastik hematopoetik hücrelerin kontrolsüz çoğalması Blast artışı (AML –ALL) Bir veya daha](https://reader035.fdocuments.net/reader035/viewer/2022071409/610299f98e519858ba05139c/html5/thumbnails/1.jpg)
![Page 2: Malign Hematolojik Hastalıklarda İmmunfenotiplendirme · 2019. 12. 13. · Neoplastik hematopoetik hücrelerin kontrolsüz çoğalması Blast artışı (AML –ALL) Bir veya daha](https://reader035.fdocuments.net/reader035/viewer/2022071409/610299f98e519858ba05139c/html5/thumbnails/2.jpg)
Malign Hematolojik Hastalıklarda İmmunfenotiplendirme
Dr.Mesude Falay
Ankara Numune Eğitim ve Araştırma Hastanesi Hematoloji Lab.
2-5 Kasım 2016 Sivas Biyokimya Günleri
![Page 3: Malign Hematolojik Hastalıklarda İmmunfenotiplendirme · 2019. 12. 13. · Neoplastik hematopoetik hücrelerin kontrolsüz çoğalması Blast artışı (AML –ALL) Bir veya daha](https://reader035.fdocuments.net/reader035/viewer/2022071409/610299f98e519858ba05139c/html5/thumbnails/3.jpg)
FCM güncel hematolojik uygulamalarda kullanımıgiderek artmaktadır.
Kısa sürede sonuç alınabilmesiKullanımının kolay olmasıAnormal hücrelerin tanınmasıFCM hematolojide en çok
• tanı• lösemi-lenfoma-myelom sınıflaması• MRD• Prognoz• Ve tedavinin takibi amacıyla kullanılmaktadır.
![Page 4: Malign Hematolojik Hastalıklarda İmmunfenotiplendirme · 2019. 12. 13. · Neoplastik hematopoetik hücrelerin kontrolsüz çoğalması Blast artışı (AML –ALL) Bir veya daha](https://reader035.fdocuments.net/reader035/viewer/2022071409/610299f98e519858ba05139c/html5/thumbnails/4.jpg)
FCM nin tanıya katkıda bulunduğu hematolojik hastalıklar
FCM ile tanı konulabilir• B ALL• T-ALL• B-CLL,SLL,MCL• Hairy Cell Lösemi• AML• PNH
FCM tanı/ayırıcı tanıda yardımcıdır• Foliküler NHL• Diğer low grade lenfoma• Büyük B hücreli NHL• Burkitt’s Lenfoma• Large garnüler lenfosit hast.• Plazma hücre hast.• MDS
![Page 5: Malign Hematolojik Hastalıklarda İmmunfenotiplendirme · 2019. 12. 13. · Neoplastik hematopoetik hücrelerin kontrolsüz çoğalması Blast artışı (AML –ALL) Bir veya daha](https://reader035.fdocuments.net/reader035/viewer/2022071409/610299f98e519858ba05139c/html5/thumbnails/5.jpg)
Klinik Kullanımı
![Page 6: Malign Hematolojik Hastalıklarda İmmunfenotiplendirme · 2019. 12. 13. · Neoplastik hematopoetik hücrelerin kontrolsüz çoğalması Blast artışı (AML –ALL) Bir veya daha](https://reader035.fdocuments.net/reader035/viewer/2022071409/610299f98e519858ba05139c/html5/thumbnails/6.jpg)
Akut Lösemi Tanısı
Sitolojik inceleme (PK ve/veya KI)My Grunwald Giemsa Boyası/Histokimyasal BoyalarBlast oranı, morfolojik displastik değişiklikler
İmmunfenotipleme ile tanı/köken aldığı hücre/sınıflamaKaryotipleme ile sitogenetik anomali Moleküler gen analizleri
![Page 7: Malign Hematolojik Hastalıklarda İmmunfenotiplendirme · 2019. 12. 13. · Neoplastik hematopoetik hücrelerin kontrolsüz çoğalması Blast artışı (AML –ALL) Bir veya daha](https://reader035.fdocuments.net/reader035/viewer/2022071409/610299f98e519858ba05139c/html5/thumbnails/7.jpg)
İmmunfenotipleme Hedefleri:
Blastların köken aldığı hücre serisi(leri)nin belirlenmesiBifenotipik akut lösemilerin tanınmasıMevcut sınıflamalara göre (ör EGIL, FAB, GEIL,WHO) bir değerlendirme yapabilmekTakipte kullanılabilecek anormal antijen dağılımlarının belirlenmesi
Sitogenetik anomaliler için ipucuPrognostik değerlendirme
![Page 8: Malign Hematolojik Hastalıklarda İmmunfenotiplendirme · 2019. 12. 13. · Neoplastik hematopoetik hücrelerin kontrolsüz çoğalması Blast artışı (AML –ALL) Bir veya daha](https://reader035.fdocuments.net/reader035/viewer/2022071409/610299f98e519858ba05139c/html5/thumbnails/8.jpg)
FCM verileri ile tanı koyabilmek için:
• Normal hematopoietik matürasyon• Kazanılan/kaybedilen antijenler• Antijen dansitesindeki değişimler (sadece var/ yok değil)
• Sık görülen anormal immunfenotipik değişiklikler bilinmelidir• Reaktiflerin performansı• Örneklerin hazırlanması önem taşır
![Page 9: Malign Hematolojik Hastalıklarda İmmunfenotiplendirme · 2019. 12. 13. · Neoplastik hematopoetik hücrelerin kontrolsüz çoğalması Blast artışı (AML –ALL) Bir veya daha](https://reader035.fdocuments.net/reader035/viewer/2022071409/610299f98e519858ba05139c/html5/thumbnails/9.jpg)
Acute Myeloid Leukemia
![Page 10: Malign Hematolojik Hastalıklarda İmmunfenotiplendirme · 2019. 12. 13. · Neoplastik hematopoetik hücrelerin kontrolsüz çoğalması Blast artışı (AML –ALL) Bir veya daha](https://reader035.fdocuments.net/reader035/viewer/2022071409/610299f98e519858ba05139c/html5/thumbnails/10.jpg)
New Acute Myeloid Leukemia subtypes
2016
• AML with RUNX1 mutation (provisional)
– Elderly male, poor prognosis
• AML with BCR-ABL 1 (provisional)
– Antigen receptor deletion (IGH)
• AML with biallelic CEBPA mutations (CEBPAdm)
• Familial AML/MDS (multiple types)
• Promoted to full entity (No longer provisional)
– Acute Myeloid Leukemia with NPM1 mutation
– Acute Myeloid Leukemia with CEBPAdm
![Page 11: Malign Hematolojik Hastalıklarda İmmunfenotiplendirme · 2019. 12. 13. · Neoplastik hematopoetik hücrelerin kontrolsüz çoğalması Blast artışı (AML –ALL) Bir veya daha](https://reader035.fdocuments.net/reader035/viewer/2022071409/610299f98e519858ba05139c/html5/thumbnails/11.jpg)
Provisional entities are listed in italics.*Changes from the 2008 classification.
Table 1. 2016 WHO classification of
mature lymphoid, histiocytic, and
dendritic neoplasms
![Page 12: Malign Hematolojik Hastalıklarda İmmunfenotiplendirme · 2019. 12. 13. · Neoplastik hematopoetik hücrelerin kontrolsüz çoğalması Blast artışı (AML –ALL) Bir veya daha](https://reader035.fdocuments.net/reader035/viewer/2022071409/610299f98e519858ba05139c/html5/thumbnails/12.jpg)
Table 1. 2016 WHO classification of mature lymphoid, histiocytic,
and dendritic neoplasms
![Page 13: Malign Hematolojik Hastalıklarda İmmunfenotiplendirme · 2019. 12. 13. · Neoplastik hematopoetik hücrelerin kontrolsüz çoğalması Blast artışı (AML –ALL) Bir veya daha](https://reader035.fdocuments.net/reader035/viewer/2022071409/610299f98e519858ba05139c/html5/thumbnails/13.jpg)
İmmunfenotiplemede kritik noktalar
Uygun panelin seçilmesiKöken aldığı hücre? Bifenotipi? Sınıflma? Aberan fenotip?
Uygun tekniğin seçilmesiHücre hazırlığı (dansite gradienti , eritrosit uzaklaştırma hangi lizis sol?, işlemden geçmemiş hücrelerle çalışmak )Gate alma (CD45? FSC-SSC?)Kullanılan antikor ( hangi klon? Seçilen florokrom?)
![Page 14: Malign Hematolojik Hastalıklarda İmmunfenotiplendirme · 2019. 12. 13. · Neoplastik hematopoetik hücrelerin kontrolsüz çoğalması Blast artışı (AML –ALL) Bir veya daha](https://reader035.fdocuments.net/reader035/viewer/2022071409/610299f98e519858ba05139c/html5/thumbnails/14.jpg)
Hücre Serilerinin Belirlenmesi
![Page 15: Malign Hematolojik Hastalıklarda İmmunfenotiplendirme · 2019. 12. 13. · Neoplastik hematopoetik hücrelerin kontrolsüz çoğalması Blast artışı (AML –ALL) Bir veya daha](https://reader035.fdocuments.net/reader035/viewer/2022071409/610299f98e519858ba05139c/html5/thumbnails/15.jpg)
![Page 16: Malign Hematolojik Hastalıklarda İmmunfenotiplendirme · 2019. 12. 13. · Neoplastik hematopoetik hücrelerin kontrolsüz çoğalması Blast artışı (AML –ALL) Bir veya daha](https://reader035.fdocuments.net/reader035/viewer/2022071409/610299f98e519858ba05139c/html5/thumbnails/16.jpg)
Anormal hematopoez
Neoplastik hematopoetik hücrelerin kontrolsüz çoğalması
Blast artışı (AML – ALL)
Bir veya daha fazla seride myelodisplazi
Periferik yıkım artışına bağlı artmış hematopoetik hücre üretimi
Kemo/immünoterapi sonrası veya enfeksiyon yanıtına bağlı kemik iliği rejenerasyonu
Prekürsör B hücre artışMature B hücreleri var
Prekürsör B hücre diferansiasyonunda duraklamaPrekürsör B hücre rölatif artışMature B hücreleri az
KEMİK İLİĞİ
KOMPOZİSYONU
MAJOR DEĞİŞİKLİKLER
(sayı, oran)
![Page 17: Malign Hematolojik Hastalıklarda İmmunfenotiplendirme · 2019. 12. 13. · Neoplastik hematopoetik hücrelerin kontrolsüz çoğalması Blast artışı (AML –ALL) Bir veya daha](https://reader035.fdocuments.net/reader035/viewer/2022071409/610299f98e519858ba05139c/html5/thumbnails/17.jpg)
Normal Hematopoez(Lochem, et al., 2004 Cytometry Part B 60B;1-13)
B hücre diferansiasyonuTdt / CD20 / CD19 / CD10CD45 / CD34 / CD19 / CD22
Monositik diferansiasyonCD34 / CD117 / CD45 /CD 13.33CD14 / CD33 / CD45 / CD34
Granülositik diferansiasyonCD34 / CD117 / CD45 / CD13+33CD16 / CD13 / CD45 / CD11b
Eritroid diferansiasyonCD71 / CD235a / CD45 / CD117
![Page 18: Malign Hematolojik Hastalıklarda İmmunfenotiplendirme · 2019. 12. 13. · Neoplastik hematopoetik hücrelerin kontrolsüz çoğalması Blast artışı (AML –ALL) Bir veya daha](https://reader035.fdocuments.net/reader035/viewer/2022071409/610299f98e519858ba05139c/html5/thumbnails/18.jpg)
Normal Hematopoez(Lochem, et al., 2004 Cytometry Part B 60B;1-13)
B hücre diferansiasyonuTdT / CD20 / CD19 / CD10CD45 / CD34 / CD19 / CD22
CD19 ----- pan B markerCD10 ve CD20 ----- 4 farklı gelişim dönemi
CD10 hücre olgunlaştıkça azalıyorCD20 hücre olgunlaştıkça artıyorCD10 (-) ve CD20 (-) hücreler plazma hücreleri
CD10 ve TdT ---- rejeneratif KITdT (+) CD10(+) / TdT (-) CD10 (+) prekürsör B hücre oranı
![Page 19: Malign Hematolojik Hastalıklarda İmmunfenotiplendirme · 2019. 12. 13. · Neoplastik hematopoetik hücrelerin kontrolsüz çoğalması Blast artışı (AML –ALL) Bir veya daha](https://reader035.fdocuments.net/reader035/viewer/2022071409/610299f98e519858ba05139c/html5/thumbnails/19.jpg)
![Page 20: Malign Hematolojik Hastalıklarda İmmunfenotiplendirme · 2019. 12. 13. · Neoplastik hematopoetik hücrelerin kontrolsüz çoğalması Blast artışı (AML –ALL) Bir veya daha](https://reader035.fdocuments.net/reader035/viewer/2022071409/610299f98e519858ba05139c/html5/thumbnails/20.jpg)
Yaş-İmmunfenotip ilişkisi
VAN LOCHEM ET AL.
![Page 21: Malign Hematolojik Hastalıklarda İmmunfenotiplendirme · 2019. 12. 13. · Neoplastik hematopoetik hücrelerin kontrolsüz çoğalması Blast artışı (AML –ALL) Bir veya daha](https://reader035.fdocuments.net/reader035/viewer/2022071409/610299f98e519858ba05139c/html5/thumbnails/21.jpg)
Normal Hematopoez(Lochem, et al., 2004 Cytometry Part B 60B;1-13)
Monositik diferansiasyonCD34 / CD117 / CD45 / CD13.33
AMAÇ: Monoblast ile myeloblastları diğer prekürsör hücrelerden immünfenotipik olarak ayırmak
Monoblast ile myeloblast immünfenotipik olarak ayrılamıyorCD45 dim expresyon: tüm prekürsör hücreler (monoblast, myeloblast, prekürsör B hücreleri ve eritroblast)CD34: granülositik, monositik, B hücre prekürsörlerinde pozitifCD117: granülositik ve monositik prekürsörlerde pozitifCD 13.33: granülositik ve monositik prekürsörlerde pozitif
CD45dim CD34+ CD117+ CD13.33+ hücreler myelo/monoblastCD45dim CD34+ CD117- CD13.33- hücreler prekürsör B hücre
![Page 22: Malign Hematolojik Hastalıklarda İmmunfenotiplendirme · 2019. 12. 13. · Neoplastik hematopoetik hücrelerin kontrolsüz çoğalması Blast artışı (AML –ALL) Bir veya daha](https://reader035.fdocuments.net/reader035/viewer/2022071409/610299f98e519858ba05139c/html5/thumbnails/22.jpg)
Normal Hematopoez(Lochem, et al., 2004 Cytometry Part B 60B;1-13)
Monositik diferansiasyonCD34 / CD117 / CD45 / CD13.33
CD14 / CD33 / CD45 / CD34Promonosit: CD45orta CD34- CD33yüksek
Monoblast --- promonosit dönüşümü: CD33 artıyor ve CD34 kayboluyor (CD45 orta expresyon)
Monosit: CD14+
![Page 23: Malign Hematolojik Hastalıklarda İmmunfenotiplendirme · 2019. 12. 13. · Neoplastik hematopoetik hücrelerin kontrolsüz çoğalması Blast artışı (AML –ALL) Bir veya daha](https://reader035.fdocuments.net/reader035/viewer/2022071409/610299f98e519858ba05139c/html5/thumbnails/23.jpg)
![Page 24: Malign Hematolojik Hastalıklarda İmmunfenotiplendirme · 2019. 12. 13. · Neoplastik hematopoetik hücrelerin kontrolsüz çoğalması Blast artışı (AML –ALL) Bir veya daha](https://reader035.fdocuments.net/reader035/viewer/2022071409/610299f98e519858ba05139c/html5/thumbnails/24.jpg)
Normal Hematopoez(Lochem, et al., 2004 Cytometry Part B 60B;1-13)
Granülositik diferansiasyonCD34/CD117/CD45/CD13+33
AMAÇ: Monoblast ile myeloblastları diğer prekürsör hücrelerden immünfenotipik olarak ayırmak
CD16/CD13/CD45/CD11bAğırlıklı olarak nötrofil diferansiasyonu gözleniyor, eozinifil ve bazofil diferansiasyonuçok azCD45 ekspresyonu
Granülositik seride ortaLenfosit ve monositlerde yüksek
CD13 ekspresyonuMyeloblast ve promyelositte yüksekMyelositte dimSegment nötrofilde yüksek
CD11b ve CD16 ekspresyonuBaşlangıçta düşük, hücre olgunlaştıkça artıyor
![Page 25: Malign Hematolojik Hastalıklarda İmmunfenotiplendirme · 2019. 12. 13. · Neoplastik hematopoetik hücrelerin kontrolsüz çoğalması Blast artışı (AML –ALL) Bir veya daha](https://reader035.fdocuments.net/reader035/viewer/2022071409/610299f98e519858ba05139c/html5/thumbnails/25.jpg)
![Page 26: Malign Hematolojik Hastalıklarda İmmunfenotiplendirme · 2019. 12. 13. · Neoplastik hematopoetik hücrelerin kontrolsüz çoğalması Blast artışı (AML –ALL) Bir veya daha](https://reader035.fdocuments.net/reader035/viewer/2022071409/610299f98e519858ba05139c/html5/thumbnails/26.jpg)
![Page 27: Malign Hematolojik Hastalıklarda İmmunfenotiplendirme · 2019. 12. 13. · Neoplastik hematopoetik hücrelerin kontrolsüz çoğalması Blast artışı (AML –ALL) Bir veya daha](https://reader035.fdocuments.net/reader035/viewer/2022071409/610299f98e519858ba05139c/html5/thumbnails/27.jpg)
Normal Hematopoez(Lochem, et al., 2004 Cytometry Part B 60B;1-13)
Eritroid diferansiasyonCD71 / CD235a / CD45 / CD117
Permabilizasyon / lize edici ajanlar ve NH4Cl çekirdekli eritroid hücreleri parçalamamaktadır.CD45 ekspresyonu
CD117+ ve CD71+ olan eritroid prekürsör ve proeritroblastlarda dim pozitif,Daha olgun hücrelerde negatif
CD71 ekspresyonuOlgunlaşma ile ekspresyonu artar, hücrenin çekirdeğini yitirmesi ile negatif olur
CD235a ekspresyonuEritroblast aşamasından itibaren eritrositler dahil pozitif
![Page 28: Malign Hematolojik Hastalıklarda İmmunfenotiplendirme · 2019. 12. 13. · Neoplastik hematopoetik hücrelerin kontrolsüz çoğalması Blast artışı (AML –ALL) Bir veya daha](https://reader035.fdocuments.net/reader035/viewer/2022071409/610299f98e519858ba05139c/html5/thumbnails/28.jpg)
![Page 29: Malign Hematolojik Hastalıklarda İmmunfenotiplendirme · 2019. 12. 13. · Neoplastik hematopoetik hücrelerin kontrolsüz çoğalması Blast artışı (AML –ALL) Bir veya daha](https://reader035.fdocuments.net/reader035/viewer/2022071409/610299f98e519858ba05139c/html5/thumbnails/29.jpg)
Paıetta E, ımmunphenotyping of Adult Leukemia, Adult Lekemias2002
T hücrelerin gelişimi
![Page 30: Malign Hematolojik Hastalıklarda İmmunfenotiplendirme · 2019. 12. 13. · Neoplastik hematopoetik hücrelerin kontrolsüz çoğalması Blast artışı (AML –ALL) Bir veya daha](https://reader035.fdocuments.net/reader035/viewer/2022071409/610299f98e519858ba05139c/html5/thumbnails/30.jpg)
Akut Lösemi Tanısında kullanılabilecek temel antikorlar
Hücre Serisi B T M
Hücre serisi belirleyici
Matürasyon belirleyici
Diğer
cCD79a
cCD22
CD19
CD34
TdT
CD10, CD20
CD22,c IgM
K, l
cCD3
CD3
CD7
CD34
TdT
CD1, CD2
CD3, CD5
CD4,CD8
cMPO
CD13
CD33
CD34, D117
CD15,CD11a
CD11b,HLA DR
CD14, CD68
CD41, CD61
cCD235a(Gly-A)
![Page 31: Malign Hematolojik Hastalıklarda İmmunfenotiplendirme · 2019. 12. 13. · Neoplastik hematopoetik hücrelerin kontrolsüz çoğalması Blast artışı (AML –ALL) Bir veya daha](https://reader035.fdocuments.net/reader035/viewer/2022071409/610299f98e519858ba05139c/html5/thumbnails/31.jpg)
AML SINIFLAMASI
![Page 32: Malign Hematolojik Hastalıklarda İmmunfenotiplendirme · 2019. 12. 13. · Neoplastik hematopoetik hücrelerin kontrolsüz çoğalması Blast artışı (AML –ALL) Bir veya daha](https://reader035.fdocuments.net/reader035/viewer/2022071409/610299f98e519858ba05139c/html5/thumbnails/32.jpg)
ALL SINIFLAMASI
B ALL-Prekürsor B ALL• Pro-B ALL• Common B ALL• Pre-B ALL• Transisyonel B ALL- Matür B ALL
T ALL-İmmatür T ALLPro-T ALLİmmatür T ALL -Common (Kortikal) T ALLPretimikT ALLTimik T ALL- Matür TALL
![Page 33: Malign Hematolojik Hastalıklarda İmmunfenotiplendirme · 2019. 12. 13. · Neoplastik hematopoetik hücrelerin kontrolsüz çoğalması Blast artışı (AML –ALL) Bir veya daha](https://reader035.fdocuments.net/reader035/viewer/2022071409/610299f98e519858ba05139c/html5/thumbnails/33.jpg)
BİFENOTİPİK LÖSEMİ
TANIM: Birden fazla seriye ait CD işaretleriMixed lineageHibrid akut lösemiacute leukemias of ambiguous lineageBilineal akut lösemi
European Group for the Immunological Characterization of
Leukemias(EGIL)
![Page 34: Malign Hematolojik Hastalıklarda İmmunfenotiplendirme · 2019. 12. 13. · Neoplastik hematopoetik hücrelerin kontrolsüz çoğalması Blast artışı (AML –ALL) Bir veya daha](https://reader035.fdocuments.net/reader035/viewer/2022071409/610299f98e519858ba05139c/html5/thumbnails/34.jpg)
LENFOMA İMMUNFENOTİPLENDİRME
![Page 35: Malign Hematolojik Hastalıklarda İmmunfenotiplendirme · 2019. 12. 13. · Neoplastik hematopoetik hücrelerin kontrolsüz çoğalması Blast artışı (AML –ALL) Bir veya daha](https://reader035.fdocuments.net/reader035/viewer/2022071409/610299f98e519858ba05139c/html5/thumbnails/35.jpg)
Flow Cytometry
Department of Immunology, Erasmus MC
Fluid System
Optik Sistem
Elektronik Sistem
![Page 36: Malign Hematolojik Hastalıklarda İmmunfenotiplendirme · 2019. 12. 13. · Neoplastik hematopoetik hücrelerin kontrolsüz çoğalması Blast artışı (AML –ALL) Bir veya daha](https://reader035.fdocuments.net/reader035/viewer/2022071409/610299f98e519858ba05139c/html5/thumbnails/36.jpg)
Monoklonal Antikorlar
• CD=cluster of differentiation
![Page 37: Malign Hematolojik Hastalıklarda İmmunfenotiplendirme · 2019. 12. 13. · Neoplastik hematopoetik hücrelerin kontrolsüz çoğalması Blast artışı (AML –ALL) Bir veya daha](https://reader035.fdocuments.net/reader035/viewer/2022071409/610299f98e519858ba05139c/html5/thumbnails/37.jpg)
Light Scatter
Forward scatter (FSC)
• Hücre büyüklüğü
Side scatter (SSC)
• Hücre granülaritesi
![Page 38: Malign Hematolojik Hastalıklarda İmmunfenotiplendirme · 2019. 12. 13. · Neoplastik hematopoetik hücrelerin kontrolsüz çoğalması Blast artışı (AML –ALL) Bir veya daha](https://reader035.fdocuments.net/reader035/viewer/2022071409/610299f98e519858ba05139c/html5/thumbnails/38.jpg)
Periferik Kan
![Page 39: Malign Hematolojik Hastalıklarda İmmunfenotiplendirme · 2019. 12. 13. · Neoplastik hematopoetik hücrelerin kontrolsüz çoğalması Blast artışı (AML –ALL) Bir veya daha](https://reader035.fdocuments.net/reader035/viewer/2022071409/610299f98e519858ba05139c/html5/thumbnails/39.jpg)
İmmunfenotiplendirmede Standardizasyon
• CLSI (Clinical Laboratory Standards Institute)– Hematolenfoid malignensilerde FC
• CCS (Clinical Cytometry Society)– 2006 Bethesda International Consensus‘ a göre
hematolenfoid malignensilerde FC
• ESCCA (European Society for Clinical Cell Analysis)– www.escca.eu
• European Leukemia Net– www.leukemia-net.org
• Latin American Consensus– Cytometry B Clin Cytom. 2006 Jan;70(1):39-44.
![Page 40: Malign Hematolojik Hastalıklarda İmmunfenotiplendirme · 2019. 12. 13. · Neoplastik hematopoetik hücrelerin kontrolsüz çoğalması Blast artışı (AML –ALL) Bir veya daha](https://reader035.fdocuments.net/reader035/viewer/2022071409/610299f98e519858ba05139c/html5/thumbnails/40.jpg)
İki açıdan konsensuslar yetersiz!
1. İmmunfenotiplendirne için önerdikleri markerların spesifik olmaması
– MoAb klonu?
– Hangi florokrom?
– Tanı için uygun antikor kombinasyonu?
![Page 41: Malign Hematolojik Hastalıklarda İmmunfenotiplendirme · 2019. 12. 13. · Neoplastik hematopoetik hücrelerin kontrolsüz çoğalması Blast artışı (AML –ALL) Bir veya daha](https://reader035.fdocuments.net/reader035/viewer/2022071409/610299f98e519858ba05139c/html5/thumbnails/41.jpg)
İki açıdan konsensuslar yetersiz!
2. Net çalışma protokollerinin olmaması.
– Panellerde hangi florokromlar bir arada olmalı? (kompenzasyon..)
– Örnek hazırlama teknikleri
– Uygun analiz nasıl yapılmalı?
![Page 42: Malign Hematolojik Hastalıklarda İmmunfenotiplendirme · 2019. 12. 13. · Neoplastik hematopoetik hücrelerin kontrolsüz çoğalması Blast artışı (AML –ALL) Bir veya daha](https://reader035.fdocuments.net/reader035/viewer/2022071409/610299f98e519858ba05139c/html5/thumbnails/42.jpg)
9
Bethesda International Consensus Conference
N = 35
Euroflow
![Page 43: Malign Hematolojik Hastalıklarda İmmunfenotiplendirme · 2019. 12. 13. · Neoplastik hematopoetik hücrelerin kontrolsüz çoğalması Blast artışı (AML –ALL) Bir veya daha](https://reader035.fdocuments.net/reader035/viewer/2022071409/610299f98e519858ba05139c/html5/thumbnails/43.jpg)
Tan
ımla
ma
dK
linik
en
dik
asyo
nTa
ram
a
ALOT LST PCSTİlk tüp plazma hücresi
SST
Akut Lösemi tanısı yüksek(blast)
Açıklanamayan Sitopeni
Atipik Lenfositoz ,
SM, LAP
Şüpheli Monositoz
Monoklonalkomponent
Açıklanamayan eozinofili
NonIgM M-Protein Kemik Lezyonu
BM plazmositoz
BOS, vitreusbiyopsisi vb
şüpheli lenfomatutulumu
olabilecek hücre miktarının düşük olduğu örnekler
BCP-ALL T-ALL AML/MDS
BCP-ALL‘ nin
subtipleri
T-ALL‘ ninsubtipleri
AML’ninsubtipleri
MDS
PNH
KML
CML-BC
Other MPD
B-CLPDLimited
B-CLPDBroad
T-CLPD NK-CLPD
KLL
Non-KLL
KLL
MCL
FCL
HCL
diğerklonalB
Aberrant γδ
Aberrant αβ
Reaktif
Aberrant NK cells
Reaktif
Reaktif/Poliklonal
Klonal
Diğer
BCR/ABL
PCD
AtipikPlazma hücresi
Reaktif/Poliklonal
Klonal/aberant
![Page 44: Malign Hematolojik Hastalıklarda İmmunfenotiplendirme · 2019. 12. 13. · Neoplastik hematopoetik hücrelerin kontrolsüz çoğalması Blast artışı (AML –ALL) Bir veya daha](https://reader035.fdocuments.net/reader035/viewer/2022071409/610299f98e519858ba05139c/html5/thumbnails/44.jpg)
ALOT (Acute Leukemia Orientation Tube)
Design for
• Akut Lösemi örneğinde ilk aşama blastik hücrenin hangi seriye ait olduğunu değerlendirmek
• Daha sonra uygun ikinci bir panel B-ALL, T-ALL ,AML/MDS yapılır
Target Antigen Fluorochromeconjugate
Gating markers (first level)
Gating Markers (second level) Immaturity markers Lineage markers
cyMPO FITC X My
cyCD79a PE X B, T
CD34 PerCP Cy5.5 X X -
CD19 PECY7 X B, My
CD7 APC X X T, My
smCD3 APC H7 X T
cyCD3 PacificBlue X T
CD45 PO X X -
Pac Blue PacOrange FITC PE PerCP Cy5.5 PE Cy7 APC APC H7
cyCD3 CD45 cyMPO cyCD79a CD34 CD19 CD7 smCD3
![Page 45: Malign Hematolojik Hastalıklarda İmmunfenotiplendirme · 2019. 12. 13. · Neoplastik hematopoetik hücrelerin kontrolsüz çoğalması Blast artışı (AML –ALL) Bir veya daha](https://reader035.fdocuments.net/reader035/viewer/2022071409/610299f98e519858ba05139c/html5/thumbnails/45.jpg)
![Page 46: Malign Hematolojik Hastalıklarda İmmunfenotiplendirme · 2019. 12. 13. · Neoplastik hematopoetik hücrelerin kontrolsüz çoğalması Blast artışı (AML –ALL) Bir veya daha](https://reader035.fdocuments.net/reader035/viewer/2022071409/610299f98e519858ba05139c/html5/thumbnails/46.jpg)
ALOT / AML
![Page 47: Malign Hematolojik Hastalıklarda İmmunfenotiplendirme · 2019. 12. 13. · Neoplastik hematopoetik hücrelerin kontrolsüz çoğalması Blast artışı (AML –ALL) Bir veya daha](https://reader035.fdocuments.net/reader035/viewer/2022071409/610299f98e519858ba05139c/html5/thumbnails/47.jpg)
LST (Lenfosit Tarama Tüpü)
Design for
• İmmunfenotip olarak klonal ve aberant matürlenfositler değerlendirilir
• Atipik lenfositlerin normal ve reaktif lenfositlerden ayırımı yapılır
Pac Blue PacOrange FITC PE PerCP Cy5.5 PE Cy7 APC APC H7
CD20-CD4 CD45 CD8-SmIgλ CD56-SmIgκ CD5 CD19-TCRγδ SmCD3 CD38
![Page 48: Malign Hematolojik Hastalıklarda İmmunfenotiplendirme · 2019. 12. 13. · Neoplastik hematopoetik hücrelerin kontrolsüz çoğalması Blast artışı (AML –ALL) Bir veya daha](https://reader035.fdocuments.net/reader035/viewer/2022071409/610299f98e519858ba05139c/html5/thumbnails/48.jpg)
LST (Lenfosit tarama tüpü)
Marker Hangi hücrenin belirteçi Positif
tanı
Population tanısal MRD Prognostisubgrup sınıflandırma marker
CD45 Mature lymphocytes and B-cell precursors
X X
CD19 B-cells, T- and NK-cells byexclusion X X X
CD20 B-cells, T- and NK-cells byexclusion X
X X X
SmIgκ and λ SmIg+ B-cells X X X
CD38 Plasma cells and B-cellprecursors X
X X X X
SmCD3 T-cells, B- and NK-cells byexclusion X
X X
CD4 CD4+ T-cells X X X X
CD8 CD8hi T-cells and CD8lo NK-cells X
X X X
CD56 NK-cells X X X
TCRγδ TCRγδ+ T-cells X X X
CD5 T-cells X X X
![Page 49: Malign Hematolojik Hastalıklarda İmmunfenotiplendirme · 2019. 12. 13. · Neoplastik hematopoetik hücrelerin kontrolsüz çoğalması Blast artışı (AML –ALL) Bir veya daha](https://reader035.fdocuments.net/reader035/viewer/2022071409/610299f98e519858ba05139c/html5/thumbnails/49.jpg)
Pac Blue Pac Orange FITC PEPerCP Cy5.5
PE Cy7 APC APC H7
CD20-CD4 CD45 CD8-SmIgλCD56-SmIgκ
CD5CD19-TCRγδ
SmCD3 CD38
Identify• Non-Hematopoetik hücreler (CD45, CD56, CD38, FSC, SSC)
![Page 50: Malign Hematolojik Hastalıklarda İmmunfenotiplendirme · 2019. 12. 13. · Neoplastik hematopoetik hücrelerin kontrolsüz çoğalması Blast artışı (AML –ALL) Bir veya daha](https://reader035.fdocuments.net/reader035/viewer/2022071409/610299f98e519858ba05139c/html5/thumbnails/50.jpg)
Pac Blue Pac Orange FITC PEPerCP Cy5.5
PE Cy7 APC APC H7
CD20-CD4 CD45 CD8-SmIgλCD56-SmIgκ
CD5CD19-TCRγδ
SmCD3 CD38
Identify• Non-Hematopoetik hücreler (CD45, CD38, CD56)• Hematopoetik hücreler
• B-cell (CD19, CD20, CD45)
![Page 51: Malign Hematolojik Hastalıklarda İmmunfenotiplendirme · 2019. 12. 13. · Neoplastik hematopoetik hücrelerin kontrolsüz çoğalması Blast artışı (AML –ALL) Bir veya daha](https://reader035.fdocuments.net/reader035/viewer/2022071409/610299f98e519858ba05139c/html5/thumbnails/51.jpg)
Pac Blue Pac Orange FITC PEPerCP Cy5.5
PE Cy7 APC APC H7
CD20-CD4 CD45 CD8-SmIgλCD56-SmIgκ
CD5CD19-TCRγδ
SmCD3 CD38
Identify• Non-Hematopoetik hücreler(CD45, CD38, CD56)• Hematopoetik hücreler
• B-cell (CD19, CD20, CD45)• Kappa (CD19, CD20, CD45, SmIgκ)• Lambda (CD19, CD20, CD45, SmIgλ)
![Page 52: Malign Hematolojik Hastalıklarda İmmunfenotiplendirme · 2019. 12. 13. · Neoplastik hematopoetik hücrelerin kontrolsüz çoğalması Blast artışı (AML –ALL) Bir veya daha](https://reader035.fdocuments.net/reader035/viewer/2022071409/610299f98e519858ba05139c/html5/thumbnails/52.jpg)
Pac Blue Pac Orange FITC PEPerCP Cy5.5
PE Cy7 APC APC H7
CD20-CD4 CD45 CD8-SmIgλCD56-SmIgκ
CD5CD19-TCRγδ
SmCD3 CD38
Identify• Non-Hematopoetik hücreler(CD45, CD38,
CD56)• Hematopoetik hücreler
• B-cell (CD19, CD20)• Kappa (CD19, CD20, CD45, SmIgκ)• Lambda (CD19, CD20, CD45, SmIgλ)
• T-cell (SmCD3, CD45)
![Page 53: Malign Hematolojik Hastalıklarda İmmunfenotiplendirme · 2019. 12. 13. · Neoplastik hematopoetik hücrelerin kontrolsüz çoğalması Blast artışı (AML –ALL) Bir veya daha](https://reader035.fdocuments.net/reader035/viewer/2022071409/610299f98e519858ba05139c/html5/thumbnails/53.jpg)
Pac Blue Pac Orange FITC PEPerCP Cy5.5
PE Cy7 APC APC H7
CD20-CD4 CD45 CD8-SmIgλCD56-SmIgκ
CD5CD19-TCRγδ
SmCD3 CD38
Identify• Non-Hematopoietic cells(CD45, CD38, CD56)• Hematopoietic cells
• B-cell (CD19, CD20)• Kappa (CD19, CD20, CD45, SmIgκ)• Lambda (CD19, CD20, CD45, SmIgλ)
• T-cell (SmCD3, CD45)• Helper T (SmCD3, CD45, CD4)• Cytotoxic T (SmCD3, CD45, CD8)• γδ+ (SmCD3, CD45, TCRγδ)
![Page 54: Malign Hematolojik Hastalıklarda İmmunfenotiplendirme · 2019. 12. 13. · Neoplastik hematopoetik hücrelerin kontrolsüz çoğalması Blast artışı (AML –ALL) Bir veya daha](https://reader035.fdocuments.net/reader035/viewer/2022071409/610299f98e519858ba05139c/html5/thumbnails/54.jpg)
Pac Blue Pac Orange FITC PEPerCP Cy5.5
PE Cy7 APC APC H7
CD20-CD4 CD45 CD8-SmIgλCD56-SmIgκ
CD5CD19-TCRγδ
SmCD3 CD38
Identify• Non-Hematopoetik hücreler(CD45, CD38, CD56)• Hematopoetik hücreler
• B-cell (CD19, CD20)• Kappa (CD19, CD20, CD45, SmIgκ)• Lambda (CD19, CD20, CD45, SmIgλ)
• T-cell (SmCD3, CD45)• Helper T (SmCD3, CD45, CD4)• Cytotoxic T (SmCD3, CD45, CD8)• γδ+ (SmCD3, CD45, TCRγδ)
• NK-cell (SmCD3, CD56, CD45, CD38)
![Page 55: Malign Hematolojik Hastalıklarda İmmunfenotiplendirme · 2019. 12. 13. · Neoplastik hematopoetik hücrelerin kontrolsüz çoğalması Blast artışı (AML –ALL) Bir veya daha](https://reader035.fdocuments.net/reader035/viewer/2022071409/610299f98e519858ba05139c/html5/thumbnails/55.jpg)
Pac Blue Pac Orange FITC PEPerCP Cy5.5
PE Cy7 APC APC H7
CD20-CD4 CD45 CD8-SmIgλCD56-SmIgκ
CD5CD19-TCRγδ
SmCD3 CD38
Identify• Non-Hematopoetik hücreler(CD45, CD38, CD56)• Hematopoetik Hücreler
• B-cell (CD19, CD20)• Kappa (CD19, CD20, CD45, SmIgκ)• Lambda (CD19, CD20, CD45, SmIgλ)
• T-cell (SmCD3, CD45)• Helper T (SmCD3, CD45, CD4)• Cytotoxic T (SmCD3, CD45, CD8)• γδ+ (SmCD3, CD45, TCRγδ)
• NK-cell (SmCD3, CD56, CD45, CD38)• Plasma cells (CD19, CD38, CD45, CD56)
![Page 56: Malign Hematolojik Hastalıklarda İmmunfenotiplendirme · 2019. 12. 13. · Neoplastik hematopoetik hücrelerin kontrolsüz çoğalması Blast artışı (AML –ALL) Bir veya daha](https://reader035.fdocuments.net/reader035/viewer/2022071409/610299f98e519858ba05139c/html5/thumbnails/56.jpg)
Pac Blue Pac Orange FITC PEPerCP Cy5.5
PE Cy7 APC APC H7
CD20-CD4 CD45 CD8-SmIgλCD56-SmIgκ
CD5CD19-TCRγδ
SmCD3 CD38
Identify• Non-Hematopoetik hücreler(CD45, CD38, CD56)• Hematopoetik hücreler
• B-cell (CD19, CD20)• Kappa (CD19, CD20, CD45, SmIgκ)• Lambda (CD19, CD20, CD45, SmIgλ)
• T-cell (SmCD3, CD45)• Helper T (SmCD3, CD45, CD4)• Cytotoxic T (SmCD3, CD45, CD8)• γδ+ (SmCD3, CD45, TCRγδ)
• NK-cell (SmCD3, CD56, CD45, CD38)• Plasma cells (CD19, CD38)
• B-CLPD özgün markerlar (CD19, CD20, CD45)
![Page 57: Malign Hematolojik Hastalıklarda İmmunfenotiplendirme · 2019. 12. 13. · Neoplastik hematopoetik hücrelerin kontrolsüz çoğalması Blast artışı (AML –ALL) Bir veya daha](https://reader035.fdocuments.net/reader035/viewer/2022071409/610299f98e519858ba05139c/html5/thumbnails/57.jpg)
Normal perferik kan / LST
![Page 58: Malign Hematolojik Hastalıklarda İmmunfenotiplendirme · 2019. 12. 13. · Neoplastik hematopoetik hücrelerin kontrolsüz çoğalması Blast artışı (AML –ALL) Bir veya daha](https://reader035.fdocuments.net/reader035/viewer/2022071409/610299f98e519858ba05139c/html5/thumbnails/58.jpg)
PCST (Plasma hücresi tarama tüpü)
Pac Blue PacOrange FITC PE PerCP Cy5.5 PE Cy7 APC APC H7
CD45 CD138 CD38 CD56 CD27 CD19 CyIgκ CyIgλ
![Page 59: Malign Hematolojik Hastalıklarda İmmunfenotiplendirme · 2019. 12. 13. · Neoplastik hematopoetik hücrelerin kontrolsüz çoğalması Blast artışı (AML –ALL) Bir veya daha](https://reader035.fdocuments.net/reader035/viewer/2022071409/610299f98e519858ba05139c/html5/thumbnails/59.jpg)
PCD (Plasma Cell Dyscrasia)
Tube TargetAntigen
Identification of plasma cells
Aberrant markers
2nd diagnostic level marker
Assessment of plasma cell clonality
BB markers
CD38 X C
CD138 X
CD45 X C
CD19 X C
Tube 1
CyIgκ X
CyIgλ X
CD56 C
β2 Micro X
Tube 2
CD27 X
CD28 X
CD117 X
CD81
![Page 60: Malign Hematolojik Hastalıklarda İmmunfenotiplendirme · 2019. 12. 13. · Neoplastik hematopoetik hücrelerin kontrolsüz çoğalması Blast artışı (AML –ALL) Bir veya daha](https://reader035.fdocuments.net/reader035/viewer/2022071409/610299f98e519858ba05139c/html5/thumbnails/60.jpg)
EuroFlow MRD PANEL: MMM
M #
1M
M#2
Nor
mal BM
#1
Nor
malBM
#2
SSC
SSC
SSC
SSC
CD38-FITC
CD38-FITC
CD38-FITC
CD38-FITC
SSC
SSC
SSC
SSC
CD38-FITC
CD38-FITC
CD38-FITC
CD38-FITC
Saptama PC SeçmePC
Merge PC
Principal component analysis(n=12 markers)
CD19 19.83
CD56 19.02
CD81 12.29
CD45 11.47
CD27 9.95
CD117 9.34
CD38 5.18
MOST INFORMATIVEMARKERS
![Page 61: Malign Hematolojik Hastalıklarda İmmunfenotiplendirme · 2019. 12. 13. · Neoplastik hematopoetik hücrelerin kontrolsüz çoğalması Blast artışı (AML –ALL) Bir veya daha](https://reader035.fdocuments.net/reader035/viewer/2022071409/610299f98e519858ba05139c/html5/thumbnails/61.jpg)
MGUS
![Page 62: Malign Hematolojik Hastalıklarda İmmunfenotiplendirme · 2019. 12. 13. · Neoplastik hematopoetik hücrelerin kontrolsüz çoğalması Blast artışı (AML –ALL) Bir veya daha](https://reader035.fdocuments.net/reader035/viewer/2022071409/610299f98e519858ba05139c/html5/thumbnails/62.jpg)
SST(SMALL SCREENING TUBE)
![Page 63: Malign Hematolojik Hastalıklarda İmmunfenotiplendirme · 2019. 12. 13. · Neoplastik hematopoetik hücrelerin kontrolsüz çoğalması Blast artışı (AML –ALL) Bir veya daha](https://reader035.fdocuments.net/reader035/viewer/2022071409/610299f98e519858ba05139c/html5/thumbnails/63.jpg)
Hücrelerin dağılımıNormal/Reaktif BOS Örneği
![Page 64: Malign Hematolojik Hastalıklarda İmmunfenotiplendirme · 2019. 12. 13. · Neoplastik hematopoetik hücrelerin kontrolsüz çoğalması Blast artışı (AML –ALL) Bir veya daha](https://reader035.fdocuments.net/reader035/viewer/2022071409/610299f98e519858ba05139c/html5/thumbnails/64.jpg)
SST (Small Screening Tube)
Düzenlenmesi
• Çok az sayıdaki hücrelerden maksimum bilgi elde edilecek şekilde düzenlenmeli
PB PO FITC PE PerCPCy5.5 PE-Cy7 APC APC-H7
Screen CD20 CD45 CD8-SmIgλ
CD56-SmIgκ
CD4 CD19 CD3-CD14
CD38
![Page 65: Malign Hematolojik Hastalıklarda İmmunfenotiplendirme · 2019. 12. 13. · Neoplastik hematopoetik hücrelerin kontrolsüz çoğalması Blast artışı (AML –ALL) Bir veya daha](https://reader035.fdocuments.net/reader035/viewer/2022071409/610299f98e519858ba05139c/html5/thumbnails/65.jpg)
SST Analizi
![Page 66: Malign Hematolojik Hastalıklarda İmmunfenotiplendirme · 2019. 12. 13. · Neoplastik hematopoetik hücrelerin kontrolsüz çoğalması Blast artışı (AML –ALL) Bir veya daha](https://reader035.fdocuments.net/reader035/viewer/2022071409/610299f98e519858ba05139c/html5/thumbnails/66.jpg)
![Page 67: Malign Hematolojik Hastalıklarda İmmunfenotiplendirme · 2019. 12. 13. · Neoplastik hematopoetik hücrelerin kontrolsüz çoğalması Blast artışı (AML –ALL) Bir veya daha](https://reader035.fdocuments.net/reader035/viewer/2022071409/610299f98e519858ba05139c/html5/thumbnails/67.jpg)
BOS tutulumunun FCM ve CC ile saptanması Aggressive B-NHL (n=123)
Conventional Cytology
Flow Cytometry
Negative Positive
No. % No. %
Negative 95/123 77 17/123 14
Positive 1*/123 1 7/123 6
Suspicious -- -- 3/123 2
*The presence of neoplastic cells in this patient was ruled out by further immunocytochemical analyses (one cytospin slide was fixed in acetone and stained with CD20 monoclonal antibody L-26 [Dako, Glostrup, Denmark] using the ABC method).
CSF (+)
FCM
22% (27/123)
Cytology
6% (6/123)
P
<0.0001
J Clin Oncol. 2009 Mar 20;27(9):1462-9.
![Page 68: Malign Hematolojik Hastalıklarda İmmunfenotiplendirme · 2019. 12. 13. · Neoplastik hematopoetik hücrelerin kontrolsüz çoğalması Blast artışı (AML –ALL) Bir veya daha](https://reader035.fdocuments.net/reader035/viewer/2022071409/610299f98e519858ba05139c/html5/thumbnails/68.jpg)
Immuno-phenotype
CD5 CD20 CD22 CD23 CD25 CD38 CD43 CD79b CD81 FMC7 SIg
CLL + +(weak) -/+ + - -/+ +(mod) -/+ +(weak) - +(weak)
MCL + +(mod-
strong)
+ -/+ - - -/+ +(strong) +(mod) + +(mod-
strong)
![Page 69: Malign Hematolojik Hastalıklarda İmmunfenotiplendirme · 2019. 12. 13. · Neoplastik hematopoetik hücrelerin kontrolsüz çoğalması Blast artışı (AML –ALL) Bir veya daha](https://reader035.fdocuments.net/reader035/viewer/2022071409/610299f98e519858ba05139c/html5/thumbnails/69.jpg)
FCM * B-cell LPH
Strong
Moderate
Weak / Neg
Percentile20th 50th 80th
All weak
All strong
Hetero-geneous
![Page 70: Malign Hematolojik Hastalıklarda İmmunfenotiplendirme · 2019. 12. 13. · Neoplastik hematopoetik hücrelerin kontrolsüz çoğalması Blast artışı (AML –ALL) Bir veya daha](https://reader035.fdocuments.net/reader035/viewer/2022071409/610299f98e519858ba05139c/html5/thumbnails/70.jpg)
FCM * B-cell LPH
Strong
Moderate
Weak / Neg
Percentile20th 50th 80th
All weak
All strong
Hetero-geneous
CD200 / CD23 / CD43 (and CD5) expresyonu , weak CD79b / CD81 CLL‘ nin diğer LPH’ lardanayırımını sağlar
![Page 71: Malign Hematolojik Hastalıklarda İmmunfenotiplendirme · 2019. 12. 13. · Neoplastik hematopoetik hücrelerin kontrolsüz çoğalması Blast artışı (AML –ALL) Bir veya daha](https://reader035.fdocuments.net/reader035/viewer/2022071409/610299f98e519858ba05139c/html5/thumbnails/71.jpg)
Panelde Hangi MoAb’ lar olmalı
• CD5
• CD20
• Kappa/Lambda
• CD23
• CD200
• CD79b
• CD43
• ROR1
![Page 72: Malign Hematolojik Hastalıklarda İmmunfenotiplendirme · 2019. 12. 13. · Neoplastik hematopoetik hücrelerin kontrolsüz çoğalması Blast artışı (AML –ALL) Bir veya daha](https://reader035.fdocuments.net/reader035/viewer/2022071409/610299f98e519858ba05139c/html5/thumbnails/72.jpg)
Reproducible diagnosis of CLL by flow
cytometry:an ERIC&ESCCA harmonisation
projectAndy C. Rawstron, Karl-Anton Kreuzer, Asha Soosapilla, Martin Spacek, PeterGambell, Neil McIver-Brown, Katherina Psarra, Maria Arroz, Raffaella Milani,Javier de la Serna, M. Teresa Cedena, Ozren Jaksic, Josep Nomdedeu, Carol
Moreno, Gian Matteo Rigolin, Antonio Cuneo, Preben Johansen, Hans Johnsen,Richard Rosenquist Brandell, Carston Utoft Niemann, David Westerman, Marek
Trneny, Stephen Mulligan, Peter Hillmen,Mesude Falay, David Oscier, MichaelHallek, Paolo Ghia, Emili Montserrat.
On behalf of the European Research Initiated on CLL (ERIC) and the European Society for Clinical
Cell Analysis (ESCCA)
![Page 73: Malign Hematolojik Hastalıklarda İmmunfenotiplendirme · 2019. 12. 13. · Neoplastik hematopoetik hücrelerin kontrolsüz çoğalması Blast artışı (AML –ALL) Bir veya daha](https://reader035.fdocuments.net/reader035/viewer/2022071409/610299f98e519858ba05139c/html5/thumbnails/73.jpg)
>75% ’ nin cevabı KLL tanısı için gereken moAb
>50% ‘ nin cevabı KLL tanısı için önerilen moAb
35 marker KLL tanısı için 154 ERIC/ESCCA üyesine
önerildi
![Page 74: Malign Hematolojik Hastalıklarda İmmunfenotiplendirme · 2019. 12. 13. · Neoplastik hematopoetik hücrelerin kontrolsüz çoğalması Blast artışı (AML –ALL) Bir veya daha](https://reader035.fdocuments.net/reader035/viewer/2022071409/610299f98e519858ba05139c/html5/thumbnails/74.jpg)
Tanı için önerilen minumum panel
• Tanı İçin gerekli:• CD19 / CD5 / CD23 / CD20 / Kappa / Lambda
• Tanı ve klinik çalışmalar için ilave edilebilir:
• CD43 / CD79b / CD81* / CD22 / CD10 / CD200* / [ROR1]*
• Sıklıkla Önerilen ancak tanı için gerekli olmayan:• CD45 / CD38 / FMC7
• Tanı için önerilen ama gerekmeyen• IgM/D and CD11c:
![Page 75: Malign Hematolojik Hastalıklarda İmmunfenotiplendirme · 2019. 12. 13. · Neoplastik hematopoetik hücrelerin kontrolsüz çoğalması Blast artışı (AML –ALL) Bir veya daha](https://reader035.fdocuments.net/reader035/viewer/2022071409/610299f98e519858ba05139c/html5/thumbnails/75.jpg)
FLOW SİTOMETRİ
NE ARADIĞINI
BİLMİYORSAN
NE BULDUĞUNU
ANLAYAMAZSIN
!! ZOR İŞ
?
![Page 76: Malign Hematolojik Hastalıklarda İmmunfenotiplendirme · 2019. 12. 13. · Neoplastik hematopoetik hücrelerin kontrolsüz çoğalması Blast artışı (AML –ALL) Bir veya daha](https://reader035.fdocuments.net/reader035/viewer/2022071409/610299f98e519858ba05139c/html5/thumbnails/76.jpg)
FLOW SİTOMETRİ
NE ARADIĞINI
BİLMİYORSAN
NE BULDUĞUNU
ANLAYAMAZSIN
!! ZOR İŞ
?
![Page 77: Malign Hematolojik Hastalıklarda İmmunfenotiplendirme · 2019. 12. 13. · Neoplastik hematopoetik hücrelerin kontrolsüz çoğalması Blast artışı (AML –ALL) Bir veya daha](https://reader035.fdocuments.net/reader035/viewer/2022071409/610299f98e519858ba05139c/html5/thumbnails/77.jpg)
FLOW SİTOMETRİ
NE ARADIĞINI
BİLMİYORSAN
NE BULDUĞUNU
ANLAYAMAZSIN
!! ZOR İŞ
?