Informe -Abs Carbs
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8/14/2019 Informe -Abs Carbs
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INTEGRANTES:
1. ALIAGA ECHEVARRIA, KATIA
2. BARRAGÁN RIVAS, DANIEL
3. CASTRO CONSTANTINO, JOSE
4. GOMEZ CASTRO, JOSE
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5. VELEZ ABANTO FRANKLIN
Laboratorio de Bioquímica
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EXPERIMENTOAbsorción de la glucosa por el intestino de la rata
1.- Preparación deHomogenizado de higado
• Pesar 10 gde higado de polloy triturarloadicionandole unasolución KCl( 9g/1000 ml)
• Luegofiltrar ycentrifugar a 3500rpm por 10minutos
• Utiizar elliquidocentrifugado.
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Luego proceder a preparar 4 tubos de acuerdo al siguiente esquema.
TUBO 1 2 3 4
ml solución de Potter pH 7,4 2,5 2,5 2,5 2,5
ml Glucosa 0,1 m 0,5 0,5 0,5 0,5
ml NAD 10m g/ml 0,2 0,0 0,2 0,2
ml ATP 5m g/ml 0,2 0,2 0 0,2
ml Nicotinamida 0,4m 0,1 0,1 0,1 0,1
ml Fluoruro de sodio 0,1m 0 0 0 0,1
ml Agua destilada 0,1 0,3 0,3 0Colocar en baño de maría 37ºC por 5 minutos
Gotas de rojo de fenol Ii Ii ii Ii
ml homogenizado de hígado 0,5 0,5 0,5 0,5
Tapar e incubar 1 hora a 37ºC
Titular cada tubo con NaOH 0,01N hasta el color original
RESULTADOS
Los resultados dependen de las sustancias que son añadidas a cadauno de los 2 tubos, cuales son los tubos 3 y 4.
3 4
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TUBO Nº 1: TUBO CONTROL➢ Presencia de glucosa➢ Presencia de agua➢ No tiene solución diluida intra saco➢ No tiene solución diluida extra saco
No se trabajo con la solución intra ni extra saco, por lo tanto nose evidencio una actividad de la glucosa en el intestino.No se llevo al espectrofotómetro, por lo tanto no medimos suabsorbancia, ya que solo se iba a utilizar como un patrón decolor para ver como viraban los demás tubos.Su color es un amarillo muy pálido, el mas claro de todos lostubos.
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TUBO Nº 2: TUBO PATRON➢ Presencia de glucosa➢ No tiene agua➢ Presencia de la solución patrón➢ No tiene solución diluida intra saco➢ No tiene solución diluida extra saco
Como no se trabajo con la solución intra ni con la extra sacoentonces al ponerle la glucosa estos no interactuaron.El intestino del cuy no perdió ni necesito mas líquido fuera odentro del saco así que quedo en une estado basal.Este fue el primer tuvo que medimos en el espectrofotómetropara tenerlo de patrón en la absorbancia.Se observa una coloración amarilla muy transparenteLa absorbancia en el TUBO Nº 2 es 0.137.Lo que nos indica que es significativamente clara que el TUBONº 3.
TUBO Nº 3:
➢ Presencia de glucosa➢ No tiene agua➢ No tiene la solución patrón➢ Tiene solución diluida intra saco➢ No tiene solución diluida extra saco
Se trabajo con la glucosa que interactúo con la solución intrasaco.El intestino del cuy no perdió en cambio necesito mas líquido
dentro del saco, ósea hubo una absorción.La absorbancia es mayor que el TUBO Nº4.La absorbancia en el TUBO Nº 3 es 0.086Coloración amarillo transparente (poco mas que el TUBO Nº 4).
TUBO Nº 4:➢ Presencia de glucosa➢ No tiene agua➢ No tiene la solución patrón➢ No tiene solución diluida intra saco
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➢ Tiene solución diluida extra saco
Se trabajo con la glucosa que interactúo con la solución extrasaco.El intestino del cuy no perdió en cambio necesito mas líquidodentro del saco, ósea hubo una absorción.La absorbancia es menor que el TUBO Nº3.La absorbancia en el TUBO Nº 4 es 0.041.Coloración amarillo transparente (poco menos que el TUBO Nº3).
CONCLUSIONES
➢La ABSORCIÓN de la glucosa en el Yeyuno-Íleon se realiza através de las vellosidades y microvellosidades intestinales queaumentan la superficie de absorción, la glucosa es absorbida porDifusión facilitada si este cuy hubiera estado vivo y sus intestinosubieran estado aun unidos se hubiera visto que la glucosa pasa alos capilares centrales de las vellosidades intestinales y de ahí estransportada por la sangre arterial a todas las células del cuerpo.
➢Otro mecanismo que sucedió al momento de exponer al intestinoCopn la glucosa fue la aparición del Glut 5 se encuentra en elintestino delgado en el lado arterial de la célula epitelial, y actúaconjuntamente con el cotransportador de la glucosa y el sodio enel lado luminal .➢ Y también SGLT 1 es un sistema específico de transportedependiente de Na + para la D-glucosa y la D-galactosa, realizael cotransporte activo de estos azúcares junto con Na+ desde lasuperficie luminal de las células con borde en cepillo
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➢ La ABSORBANCIA:Hay menor absorbancia en el tubo 4 debido a que hay menor
cantidad de sustrato ósea que se a absorbido en cambio en el tubo3 hay gran cantidad de sustrato, ósea esta mas concentrado y porlo tanto hay mayor absorbancia como se puede ver en losresultados a continuación:
• TUBO Nº 2 : 0.137 (tubo patrón) TIENE LA GLUCOSA Y LA
SOLUCIÓN PATRÓN.
• TUBO Nº 3 : 0.086 TIENE LA GLUCOSA Y LA
SOLUCIÓN INTRA SACO.
•
TUBO Nº 4 : 0.041 TIENE LA GLUCOSA Y LASOLUCIÓN EXTRA SACO.
➢ La CONCENTRACIÓN se obtuvo a través del tubo patrón (Nº2)que tiene 20ml/dL entonces teniendo este dato y suabsorbancia pudimos sacar el factor de calibración ( Fc= C/A)
TUBO Nº 2 : Fc= C/A => Fc= 145.99 TUBO Nº 3 : C= AxFc => C= 12.55514
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• TUBO Nº 4 : C= AxFc => C= 5.98559
➢ La COLORACIÓN en los TUBOS Nº 3 Y 4, son muy parecidas(amarillo), debido a que hubo solución intra y extra saco
• TUBO Nº3: solución intra saco.• TUBO Nº4: solución extra saco
➢ La solución Ringer Fosfato pH 7,4 con 0,2% de glucosa El HCl0.05 N, la utilizamos dentro y fuera del intestino cerradoesperamos aproximadamente media hora para que esta fueraabsorbida ya que el cuy estaba con 1 día de ayuno.
➢ Esperamos ese tiempo ya que como sabemos la cantidad deazucar es igual a un gramo por un kilogramo e peso corporal enuna hora.
Curva de Calibración
0,0410,086 0,137
0
5
10
15
20
25
Concentración
A b s o r b a n c i a
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DISCUSIONESLos resultados obtenidos de la absorción de la glucosa, El transportede glucosa hacia el interior celular, en contra de su gradiente deconcentración, es óptimo cuando existe un gradiente de Na+ a favor,que supere la fuerza antagónica que genera el gradiente de lahexosa.
Si la concentración de Na+ externa, es mucho mayor que la interna,el Na+ ligado al transportador tenderá a trasladarse hacia adentro, afavor del gradiente del Na+. El transportador para que funcione,necesita también de glucosa ligada. Entonces el transporte de Na+ afavor de un gradiente puede "arrastrar" también glucosa al interiorcelular, mediante un transportador pasivo con dos sitios de enlacecomo se anotó anteriormente, uno para el Na+ y otro para la glucosa.
Así de esta manera, se logra acumular glucosa en contra de ungradiente siempre y cuando el gradiente de Na+ hacia el interiorexceda el gradiente hacia fuera de la glucosa. La moléculatransportada y el ion cotransportado se dirigen en la misma dirección .A esto justamente es a lo que se le denomina cotransporte paralelo.Lo que se vio en el intestino del cuy.
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BIBLIOGRAFIA
1. Bioquímica de Harper; Robert K. Murry, Darul K.Granner, Peter A. Mayes, Víctor W. Rodwell;veintisieteava edición;
2. Bioquímica, las bases moleculares de la estructura yfunción celular. Albert L. Lehninger. Séptima edición.
3. www.iocd.unam.mx/organica/lab2/135.htm
4. www.arrakis.es/~rfluengo/imagenes/glumaterial.jpg
1. http://www.abcmedicus.com/articulo/pacientes/id/379/pagina/1/experimentoes.html
2. http://www.monografias.com/trabajos24/respiracion/tisular.html
3. http://www.es.geocities.com/joakinicu/apartado2e.htm
4. www.zonadiet.com/respiracion/tisular.htm