GASTROENTERITES VIRAIS Lígia Galhardi Laboratório de Virologia Dep. Microbiologia/CCB/UEL.
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GASTROENTERITES VIRAIS
Lígia Galhardi
Laboratório de Virologia
Dep. Microbiologia/CCB/UEL
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Associados a G-E:Associados a G-E:
• Rotavirus• Adenovirus entéricos (40, 41, 50 e 51)• Calicivirus• Astrovirus• Coronavirus• Torovirus
Vírus que infectam o intestino?
Infecção viral X doença
Não associados a G-ENão associados a G-E
• Polio• Coxsackie A e B• Echovírus• Enterovírus 68-71• Hepatite A e E• Adenovírus 1-39• Reovírus
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Mais comuns:
Adenovírus
Calicivírus
Astrovírus
Norovírus - Norwalk
Rotavírus
Sapovírus
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Cunliffe, N.A., et al. 2010. Healthcare-associated Viral Gastroenteritis among Children in a Large Pediatric Hospital, United Kingdom. Vol. 16, No. 1.
Epidemiologia:
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Epidemiologia:
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Kane EM, Turcios RM, Arvay ML, Garcia S, Bresee JS, Glass RI. The epidemiology of rotavirus diarrhea in Latin America. Anticipating rotavirus vaccines. Rev Panam Salud Publica. 2004;16(6):371–7.
Epidemiologia:
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GASTROENTERITES VIRAIS
ROTAVÍRUS Família – Reoviridae Diâmetro: 65-75 nm 7 grupos (A, B, C) - subgrupos e sorotipos Virion:
Core (proteínas VP1, VP2 e VP3) Capsídeo interno (VP6 - grupos) Capsídeo externo (sorotipos)
VP7 - Sorotipo G (14) VP4 - Sorotipo P (12)
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Classe I Classe II Classe III Classe IV
ROTAVÍRUS Ácido Nucléico – RNA df segmentado (11 genes) – 16.500 - 21.000 pb
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REPRESENTAÇÃO ESTRUTURAL DO ROTAVÍRUS
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ROTAVÍRUS
Modulação de Ca intracelular
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Classificação fenotípica
(eletroforétipos) dos Rotavírus
Mutações ou rearranjos
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Sorotipos (neutralização ou EIA) e genótipos (RT-PCR);
Classificação genômica e
sorológica dos Rotavírus grupo A
(Glicosilação)
(Proteólise)
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1) Cepas mais comuns: G1P1A[8], G2P1B[4], G3P1A[8] e G4P1A[8] – (92% casos humanos).
2) Cepas circulantes no Brasil: G5, G8, G10, G12 E P3.
3) Cepas já identificadas em áreas em desenvolvimento: G3P8[11], G4P6[1], G4P8[11], G5P2A[6], G5P1A[8], G1P1A[8], G6P3[9], G6P11[14],
G8P6[1], G1P1A[8], etc.
Classificação genômica e
sorológica dos Rotavírus já
descritos
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EPIDEMIOLOGIA - Sorotipos
R.Q. Gurgel et al. . Rotavirus genotypes circulating in Brazil before national rotavirus vaccination: A review Journal of Clinical Virology 43 (2008) 1–8
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(Soares LS, et al. Molecular characterization of G1 human rotaviruses detected in
children from Belém, Pará, Brazil. Rev Pan-Amaz Saude 2010; 1(1):125-130):
G1P[8], G2P[4], G3P[8], G4P[8] and G9P[8].
Classificação genômica e sorológica dos Rotavírus grupo A
R.Q. Gurgel et al. . Rotavirus genotypes circulating in Brazil before national rotavirus vaccination: A review Journal of Clinical Virology 43 (2008) 1–8
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VACINA No Brasil
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DIAGNÓSTICO LABORATORIAL
Material: fezes
Coleta: entre o 1º e o 4º dia
Pesquisa do vírus: Microscopia eletrônica
Pesquisa de Antígeno Viral:
Imunofluorescência
Enzimaimunoensaio
Aglutinação em Látex
Eletroforese em gel de poliacrilamida (EGPA)
PCR
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DIAGNÓSTICO LABORATORIAL
Pesquisa do vírus: Microscopia eletrônica
detecção dos RV em 80 a 90 % das fezes positivas
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DIAGNÓSTICO LABORATORIAL
Imunoensaio enzimático
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DIAGNÓSTICO LABORATORIAL
Imunocromatografia
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DIAGNÓSTICO LABORATORIAL
Aglutinação em látex
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DIAGNÓSTICO LABORATORIAL
EGPA
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DIAGNÓSTICO LABORATORIAL
PCR
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DIAGNÓSTICO LABORATORIAL
Isolamento do vírus em célula:
- rim de macaco (MA-104 e LLC-MK2) e de carcinoma de cólon intestinal
humano (Caco-2).
ECP em MA-104: aumento de refringência, seguido de redução do volume
citoplasmático, com formação de grumos celulares e células repuxadas, com
distribuição focal
Sorotipagem e neutralização
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DIAGNÓSTICO LABORATORIAL
MA-104 cells, mock- (A, D and G), SA-11 (B, E and H) and 1154 (C, F and I) infected cells at 24, 48 and 72 hpi (lanes A, D and G), respectively