SECRETARÍA DE AGRICULTURA, GANADERÍA, DESARROLLO

RURAL, PESCA Y ALIMENTACIÓN

COLEGIO SUPERIOR AGROPECUARIO DEL ESTADO DE

GUERRERO

CENTRO DE ESTUDIOS PROFESIONALES

COORDINACIÓN ACADÉMICA

FITOPATOLOGÍA

PUDRICIÓN DE RAÍZ DE TOMATE DE CÁSCARA

(Physalis ixocarpa Brot.)

TITULAR: DR. SERGIO AYVAR SERNA

ALUMNO:

LUCIO LEÓN GUZMÁN

SEXTO SEMESTRE

ESPECIALIDAD: FITOTECNIA

COCULA, GRO. JUNIO 2012

TOMATE DE CÁSCARA (Physalis ixocarpa Brot.)

INTRODUCCIÓN

El tomate de cáscara (Physalis ixocarpa Brot.), también conocido como tomate verde,

tomate de cáscara o tomate de fresadilla es un cultivo que está incluido dentro del

grupo de las hortalizas, y se agrupa dentro de la familia Solanaceae y género Physalis.

El tomate de cáscara es una hortaliza que se conoce desde tiempos precolombinos; la

herbolaria medicinal mexicana le atribuye al fruto propiedades curativas. Se considera

un cultivo hortícola de gran importancia en México; en 1997 el área sembrada con está

hortaliza fue de más de 35,000 ha con un rendimiento promedio de arriba de 11 ton/ha.

Este cultivo se produce en todas las entidades de la República Mexicana; Puebla es el

principal estado productor, seguido de Jalisco, Edo. De México, Sinaloa, Morelos y

Michoacán. (Pérez Moreno, 2001).

El tomate cáscara ocupa el lugar 44 en superficie cultivada en México, es el número 24

en importancia dentro de los cultivos anuales y ocupa el quinto lugar entre las especies

olerícolas, siendo superado únicamente por chile, jitomate, papa y cebolla. La superficie

cosechada de tomate de cáscara se ha incrementado paulatinamente desde 1932,

siendo a partir de la década de los setentas cuando empezó a cobrar importancia a

nivel nacional, ya que antes prácticamente sólo se cultivaba y consumía en el centro del

país. En la década de los ochentas pasó a ser de los 10 cultivos olerícolas más

importantes, en tanto que en los noventas su cultivo se extendió prácticamente a todo el

país, ya que para 1997 se informó que fue cultivado en los 32 estados del país. Otra

razón del incremento en la superficie cultivada con tomate de cáscara es que a partir de

los ochentas se ha estado exportando tanto fresco como industrializado a los Estados

Unidos de Norteamérica. (Pérez Moreno, 2001).

El tomate de cáscara (Physalis ixocarpa Brot.) es un cultivo que presenta una serie de

enfermedades con diferentes síntomas, que en conjunto se denominan

«amarillamiento». Los síntomas son causados principalmente por virus y en menor

medida por hongos como Fusarium spp, por la falta de fertilizantes y por la presencia de

ácaros. Las manifestaciones más comunes de dichos síntomas son mosaicos,

deformaciones de las hojas y tallos moteados, enanismo, necrosis y marchitamiento

con diferente grado de severidad. (Anónimo, 2001).

3

II. PROBLEMA DE INVESTIGACIÓN

El tomate de cáscara es una de las plantas que más presentan problemas fitosanitarios,

debido a que presentan problemas en todos los estadios del crecimiento.

En la comunidad de Buenavista, en Cocula, Gro, se ha visto que las plantas de tomate

de cáscara (Physalis ixocarpa Brot.), han sido afectadas por una coloración amarillenta,

además de una pudrición en la raíz, que produce una muerte total e intempestiva de la

planta.

El problema ha sido causa de diversas hipótesis, en la cual la mas fuerte es la de

hongos fitopatógenos, el motivo de esta investigación es averiguar cual es la causa de

la enfermedad en las plantas de tomate y su posterior investigación es sobre cual es la

mejor forma de controlarla.

4

III. REVISIÓN DE LITERATURA

3.1 Aspectos generales del cultivo.

3.1.1 Origen

La planta de tomate de cáscara se considera nativa de México, perteneciente a la

familia de las solanáceas. (Anónimo 2010a.)

3.1.2 Distribución

Distribuida de Estados Unidos a Costa Rica y Las Antillas. Cultivada y asilvestrada en

varias partes del mundo. En nuestro país se ha registrado en forma silvestre y cultivada

en Baja California Norte, Baja California Sur, Chiapas, Chihuahua, Coahuila, Colima,

Durango, Guerrero, Hidalgo, Jalisco, Estado de México, Michoacán, Morelos, Nayarit,

Nuevo León, Oaxaca, Puebla, Querétaro, San Luís Potosí, Sonora, Tamaulipas,

Tlaxcala, Veracruz. Común en cultivos de riego, sembradíos, orilla de acequias,

caminos y áreas con humedad. (Anónimo 2010a.)

Los principales países productores en el 2008, según la FAO fueron: China, Estados

Unidos, Turquía, india, Italia, Irán, Egipto, Brasil, España, México

Fuente: FAO 2008.

5

En cuanto a los estados se refiere, los que tiene más producción según SAGARPA de

esta planta son: Michoacán, Jalisco, Estado de México, Sonora y Puebla.

3.1.3 Descripciones taxonómica y morfológica

Clasificación científica:

Reino: Plantae

Subreino: Traqueobionta (plantas vasculares)

Superdivisión: Spermatophyta (plantas con semillas)

División: Magnoliophyta (plantas con flor)

Clase: Magnoliopsida (dicotiledóneas)

Subclase: Asteridae

Orden: Solanales

De las 80 especies del genero Physalis que existe, son muy pocas las que se cultivan,

entre ellas P. ixocarpa. (Anónimo 2009a).

Planta: Es normal que aparezcan dos tipos de plantas:

Tipo rastrero, que se caracteriza porque generalmente no alcanza altura de 30 cm, ya

que conforme se va desarrollando la planta, los tallos se extienden sobre la superficie

del suelo.

Tipo erecto, que se identifica por el aspecto arbustivo que presenta la planta, originado

por un crecimiento casi vertical de los tallos. Estos presentan la desventaja de que se

doblan o se rajan con el peso de los frutos. (Anónimo 2009a)

Hábito y forma de vida: Planta herbácea erecta y ramificada, sin pelos o en

ocasiones con pelos esparcidos. (Anónimo 2009a)

Tamaño: De 15 a 60 cm de alto. (Anónimo 2009a)

Hojas: Con pecíolos de 0.4 a 6.5 cm de largo, ovadas, de 2 a 8.2 cm de largo por 1 a 6

cm de ancho, ápice agudo a ligeramente acuminado, con márgenes tosca e

6

irregularmente dentados, con 2 a 6 dientes en cada lado, base atenuada. (Anónimo

2009a)

Flores: Con pedúnculos de 0.7 a 1 cm de largo; lóbulos del cáliz de forma ovada, de

0.7 a 1.3 cm de largo, con pelos largos más o menos tiesos; corola de 0.8 a 2.3 cm de

diámetro, amarilla que puede presentar manchas de color azul-verdoso que no

contrastan fuertemente, o bien, manchas de color morado; anteras azules o de color

azul-verde, de 2 a 3.5 mm de largo, generalmente retorcidas después de la

dehiscencia; cáliz del fruto de 1.8 a 4.3 cm de largo por 2.5 a 6 cm de ancho, con 10

costillas. (Anónimo 2009a)

Frutos y semillas: El fruto es una baya de 1.6 a 6 cm de diámetro,

pedúnculos de 0.6 a 1 cm de largo. Semillas de contorno obovado, oval,

reniforme o circular, de 1.1 a 2.3 mm de largo y 1.2 a 2.3 mm de ancho,

comprimidas, casi planas, superficie reticulado-foveolada a reticulada, color

amarillo a café(Anónimo 2009a)

Plántulas: Hipocótilo de 12 a 40 mm de largo, con pelos; cotiledones de

lámina ovada, ápice agudo, borde entero, con pelos; epicótilo ausente o hasta

de 2 mm de largo; hojas alternas, lámina aovada, ápice romo a agudo, borde

entero a crenado, con pelos (Anónimo 2009a)

3.1.4 Ecología

Es un cultivo de temperaturas calientes, de 18 a 25°C. Medianamente tolerante a sales

del suelo, de 6400 a 2600 ppm, soporta un Ph de 5.5 a 6.8, y una humedad en el aire

de 70-80%.

7

Es una planta que crece bien en casi todos los terrenos y climas, su límite lo establecen

las heladas bajo las cuales no se desarrolla adecuadamente. En cuanto al tipo de suelo,

soporta mejor los suelos limosos.

3.2 Plagas y enfermedades

3.2.1 Plagas

Son varias las plagas que atacan al tomate de cascara, a continuación se proporciona

información para su combate, adicionando algunas sugerencias sobre como y cuándo

deben realizarse los muestreos, así como información sobre los hábitos y bilogía de

cada plaga.

La siguiente descripción de hábitos y combate de las plagas del tomate de cascara, no

está dada por orden de importancia, sino que se menciona de acuerdo a cómo

aparecen a través del ciclo del cultivo.

Pulga saltona (Epitrix spp.) La pulga saltona es un insecto de color café y mide

de 2 a 3 milímetros de longitud; durante su desarrollo permanece bajo el suelo y

en su estado adulto sale para alimentarse del follaje tierno.

La pulga saltona ataca al tomate desde que nace, y en las primeras cuatro

semanas es cuando puede causar mayor daño, ya que si no se combate

oportunamente, puede devorar completamente al follaje, causando la muerte de

la planta. Para combatir esta plaga es necesario hacer aplicaciones semanales

de Sevin 80°/0, a razón de 2 gramos por litro de agua, cuando aparezcan los

primeros daños, estos se identifican fácilmente al observar en las hojas

pequeños agujeros de forma circular.

Gusano trozador (Feltia spp). El gusano trozador (“burro”), cuyo adulto es una

palomilla de color café que varía de intensidad en algunas partes del cuerpo,

mide alrededor de 1.5 cm. De largo llegando a tener una longitud

8

aproximadamente de 3.5 cm con las alas extendidas. La palomilla deposita sus

huevecillos generalmente sobre la superficie de la tierra, y al emerger las larvas

se introducen al suelo, y salen durante la noche para alimentarse.

Este gusano ataca a plantas pequeñas de 5 a 15 cm de altura; se alimenta del

tallo basal de la planta, la troza completamente y origina su caída, para localizar

el gusano basta con escarbar alrededor de la planta a unos 2 cm de profundidad,

que es donde generalmente permanece. Para su combate aplique al pie de la

planta cebos envenenados preparados a base de salvado, melaza y Dieldrin, o

bien, se puede combatir con aplicaciones de Salbadrin 10 kilos por hectárea o

Dieldrin 20°/0, 1.5 litros por hectárea (4 centímetros cúbicos por litro de agua)

cuando aparezcan mas de 3 plantas atacadas en 10 metros lineales.

Gusano del fruto (Heliothis spp). El adulto del gusano del fruto de tomate de

cascara, es una palomilla de color blanco “percudido”; tiene tres bandas de un

tono verde claro, situadas transversalmente sobre las alas anteriores.

El adulto deposita sus huevecillos principalmente en el envés de la hoja, aunque

con menor frecuencia suele ovipositar en tallos y flores. Las oviposiciones

comienzan al aparecer las primeras flores y al emerger la larva se alimentan

inicialmente del follaje; en poco tiempo alcanza los frutos pequeños, muchos de

los cuales pueden ser devorados por un solo gusano. Después de la cuarta

muda la larva se introduce bajo al suelo y se convierte en pupa, la cual es de un

tinte café cobrizo. Algunos días después, de la pupa emerge el adulto que

ovipositará en las plantas para iniciar un nuevo ciclo de vida.

Esta plaga se presenta invariablemente en cualquier fecha de siembra.

Para combatir esta plaga se puede usar Lannate 90°/0 de 0.3 a 0.5 kilos por

hectárea (un gramo por litro de agua) o Galecrón 50°/0, 0.75 litros por hectárea

(medio litro en 200 litros de agua). La aplicación de insecticidas debe iniciarse al

comienzo de la floración, y continuarse, haciendo una aplicación por semana

hasta el inicio de la cosecha. No es aconsejable aplicar insecticida después del

primer corte, debido a que en esta época la presencia de huevecillos es

9

sumamente baja y solamente existen larvas de tercer y cuarto estadio que son

difíciles de eliminar, ya que además de estar protegidas dentro del fruto, son más

resistentes a los productos tóxicos que las larvas más pequeñas.

Chicharritas y minadores. Varias especies de chicharritas y minadores

(Liriomyza spp), aparecen en el cultivo del tomate cuando las plantas tienen un

mes de nacidas. Las chicharritas son fácilmente reconocidas; miden alrededor de

0.6 cm de largo y son de color gris oscuro; cuando las infestaciones son altas al

mover bruscamente las plantas, las chicharritas hacen vuelos cortos y rápidos

hacia otro sitio. Esta plaga ocasiona un daño grave a la planta al alimentarse de

su savia, causando un debilitamiento general.

El adulto del minador de la hoja (Liriomyza spp) de tomate de cascara deposita

sus huevecillos en las hojas de la planta y al emerger la larva se introduce en la

hoja y al mismo tiempo que se alimenta, avanza formando galerías de color

blanco en la hoja, causando un debilitamiento de la planta.

Para combatir las dos plagas mencionadas, basta con hacer una o dos

aplicaciones de Diazinon 25°/0, 1 litro por hectárea (1 litro en 200 litros de agua);

Basudin 60°/0, 0.5 litros por hectárea (medio litro en 200 litros de agua) o

Tamaron 600, 0.75 litros por hectárea (tres cuartos de litro en 200 litros de agua)

a intervalos de una semana.

Diabróticas (Diabrotica spp). El adulto de este insecto es de color verde

amarillento con manchas negras en la parte superior y mide alrededor de 0.6 cm

de largo. La cabeza es negra y las antenas son de color oscuro.

Durante su etapa de desarrollo permanece bajo la superficie del suelo y en su

estado adulto sale para alimentarse del follaje. Cuando las infestaciones son

altas causan serios daños por lo cual debe combatirse oportunamente mediante

aplicaciones de Sevin 80°/0, a razón de 2 gramos por litro de agua; Parathion

metílico 25°/0, 1 litro por hectárea (1 litro en 200 litros de agua); Diazinon 25°/0, 1

10

litro por hectárea; Thiodan 35°/0, 5 cm cúbicos por litro de agua o Gusation

etílico 25°/0, 1 litro por hectárea (1 litro en 400 litros de agua) o Nuvacrón 60°/0 1

litro por hectárea (1 litro en 400 litros de agua). Iniciando las aplicaciones tan

pronto aparezcan los adultos para evitar que se multiplique demasiado.

3.2.2 Enfermedades

La enfermedad del tomate de cascara mas generalizad es la “cenicilla”, que se presenta

generalmente después de la floración. Se ha observado que con espolvoreaciones de

Azufre a razón de 20 a 25 kilos por hectárea, puede controlarse esta enfermedad.

Una de las enfermedades que se ha venido presentando con mayor frecuencia en los

últimos años, es el “chino del tomate”, cuyo agente causal no está plenamente

identificado. Esta enfermedad aparece generalmente después de iniciada la floración, y

los síntomas se manifiestan mediante deformaciones en los frutos y follaje tierno. A

pesar de que a la fecha no cuenta con productos químicos para combatir esta

enfermedad, se ha observado que ajustándose a las fechas de siembra de la segunda

quincena de mayo a diciembre, la incidencia de esta enfermedad no es de importancia

económica.

3.2.1 Enfermedad fungosa

Pudrición de la raíz (Fusarium oxysporum f. spp.)

Importancia. Es una enfermedad severa para muchos agricultores a nivel mundial; se

reconoce por atacar más de 125 especies de cultivos básicos, ornamentales y frutales.

Distribución. Es frecuente en regiones agrícolas tropicales, subtropicales y templadas;

es una de las especies más destructivas y de mayor importancia económica. Se

encuentra distribuida en todos los continentes, excepto en Antártica (Snyder y Nash,

1981).

Hospedantes. El hongo ataca a plantas de diversas familias: leguminosas,

cucurbitáceas y solanáceas; así como ornamentales, árboles frutales y forestales.

11

Síntomas. Las plantas infectadas sufren marchitez y amarillamiento en el borde de

las hojas, que posteriormente progresa hacia el nervio dejando un borde seco de color

marrón claro. En otras ocasiones, las hojas más viejas aparecen totalmente amarillas

sin desecación, y se tornan de color marrón. Muchos pecíolos presentan en su parte

externa unas pequeñas manchas alargadas de color púrpura, producto de la necrosis

de los vasos. Estos síntomas no se observan en todas las hojas; son más evidentes en

la cuarta, quinta y sexta hojas (empezando a contar del exterior al interior). Afecta

también la corteza de la raíz, provocando pudrición así como cancros, muerte

descendente y marchitez vascular; aunque los síntomas de marchitamiento son los

más evidentes en las plantas afectadas (Hall y Mac Hardy, 1981; Nelson, 1981;

Gutiérrez, 1999).

Clasificación taxonómica. El hongo pertenece al:

Reino Fungi

División Deuteromycota

Clase Hyphomycetes

Orden Moniliales

Familia Tuberculariaceae

Género Fusarium

Especie F. oxysporum (Romero, 1993; Noyd, 2000).

Descripción morfológica. Se caracteriza por formar microconidios, clamidosporas y

macroconidios hialinos, fusiformes, pedicelados y uni o pluritabicados, con célula

basal en forma de pie. La tasa de crecimiento promedio es de 4 a 5 cm, a los 4 días

de desarrollo en PDA, con pH de 6.5 a 7 y de 22 a 25°C (Nelson et al., 1983).

El micelio es de colores blanco, durazno o púrpura. Los microconidios nacen en

monofialides simples y ramificados de las hifas; son variables en forma: oval,

elipsoidales, cilíndricos, rectos o curvos. Los macroconidios se forman en conidióforos

12

ramificados simples o agrupadas en esporodoquios; son de pared delgada, de 3 a 5

septas y fusoides (Anónimo, 2007c)

Ciclo biológico. Este hongo es habitante del suelo; sobrevive en formas de micelio y

clamidosporas; puede permanecer por mucho tiempo en el suelo; las clamidosporas se

activan, germinan, originan hifas, micro y macroconidios y nuevas clamidosporas. Se

puede diseminar sobre suelo infestado, agua de riego, residuos de cosecha, viento,

animales y material propagativo (Nelson, 1981).

La penetración ocurre a través de heridas en el tejido de la raíz o tallo; sin

embargo, puede haber penetración directa a través de los pelos radicales y raíces

más jóvenes (Booth, 1971).

El micelio avanza inter e intracelularmente hacia el tejido vascular e invade

los vasos del xilema y traqueidas; de donde se diseminan en forma ascendente

hacia las partes superiores y tejidos adyacentes al xilema: floema, cambium y

corteza. A veces, se forma cancros o agrietamientos y ruptura en la base del tallo

(Figura 4).

Epidemiología. Las temperaturas cálidas favorecen el desarrollo óptimo de las

enfermedad (12 a 28 ºC); junto con alta humedad relativa, días cortos de baja

intensidad lumínica. Otros factores son: los suelos ácidos, arenosos, con bajo pH,

pobres en nitrógeno y alto suministro de potasio. Las heridas ocasionadas a las raíces

por maquinaria o nematodos (Melodogyine incognita Chitwood), aumentan la

susceptibilidad al marchitamiento y favorece el desarrollo del hongo (Anónimo, 2007b).

Daños. Las plantas infectadas mueren en forma repentina y prematura; o lo hacen

paulatinamente durante el desarrollo fenológico y son afectadas en el rendimiento y

calidad del fruto. En ataques severos pueden ser destruidas más de 30% de

Las plántulas y se incrementan los costos de la produccion por las prácticas de

control (Gutiérrez, 1999).

Control químico. Los fungicidas del grupo de los bencimidazoles (BENLATE -

benomil, PROZYCAR - carbendazin) son útiles contra patógenos vasculares, porque

tienen acción quimioterapéutica; se absorben por la raíz y se traslocan por el xilema

13

Cuadro 1. Composición del fungicida TECTO 60 (Thiabendazole)

Composición porcentual: % en peso

Ingrediente activo:thiabendazole 2- (4-thiazolyl) benzimidazole. No menos de:.............................................................. 60(Equivalente a 600 g de i.a. kg -1)Ingredientes inertes:Diluyente, humectante, dispersante y antiespumantes. No más de……………………....................................... 40

Cuadro 2. Composición del fungicida CERCOBIN (Tiofanato metílico)

Composición porcentual: % en peso

Ingrediente activo:tiofanato metílico: Dimetil -4 ,4 -0- Fenilenbis (3-Tioalofanato) benceno. No menos de:.............................................................. 70(Equivalente a 700 g de i.a. kg -1)Ingredientes inertes:Humectantes, dispersantes. No más de:.................................................................. 30

hacia el follaje y, en el sitio de infección, actúan directamente sobre el patógeno

(Erwin,1981).

3.3Descripción de los fungicidas usados en la investigación

En el presente estudio, sólo se seleccionaron 10 fungicidas para evaluarlos in vitro contra el hongo Fusarium oxysporum f. sp y se describen a continuación.

3.3.1 TECTO 60 (thiabendazole)

Es un fungicida sistémico formulado en polvo humectable; de amplio espectro, utilizado para tratamientos preventivos y/o curativos (Cuadro 1); en aspersiones foliares antes y después de la cosecha y en los cultivos. y contra las enfermedades indicadas en el Cuadro A-13 del apéndice (Thomson, 2006).

3.3.2 CERCOBIN (tiofanato metílico) Está formulado como polvo humectable (Cuadro 2); no es fitotóxico a las dosis recomendadas en diversos cultivos. (Cuadro A-11 del apéndice) (Thomson, 2006).

Cuadro 3. Composición del fungicida Terrazole.

3.3.3 TERRAZOLE 35% WP®

Es un fungicida para aplicación al suelo para el control de enfermedades de la raíz y el tallo, causadas por Pythium spp, Phytophtora sp, en cultivos de

14

Cuadro 4. Composición del fungicida PROZYCAR (Carbendazim)

Composición porcentual: % en pesoIngrediente activo:carbendazim: 2-(metoxicarbonilamino)-benzimidazol (Equivalente a 500 g de i. a. kg-1)No menos de:….......................................................... 50Ingredientes inertes:Diluyentes, humectante, dispersante ycompuestos relacionadosNo más de:…................................................. ………. 50Total:…………............................................................ 100

Fuente: Thomson (2006)

plantas ornamentales y viveros ornamentales (pudrición de tallos y raíces) y pastos. (Cuadro 3)

3.3.4 PROZYCAR (carbendazim)

Es un fungicida

sistémico del grupo de los

bencimidazoles que

controla las enfermedades

descritas en el Cuadro A-1

del apéndice. Este

producto tiene

incompatibilidad, con otros

de fuerte reacción alcalina.

En el Cuadro 4 se muestran su composición química porcentual. No se debe aplicar en

las horas de calor intenso ni cuando el viento sea fuerte (Thomson, 2006).

3.3.5 CALIFA® 50 WP

Es un fungicida sistémico

preventivo y curativo recomendado

para el control de enfermedades en

los cultivos especificados en la

etiqueta. CALIFA® 50 WP es más

efectivo contra etapas tempranas

del desarrollo de la infección, cuando se presentan los primeros síntomas de la

enfermedad. (CUADRO 5.)

15

Cuadro 5. Composición fungicida del Califa.

Cuadro 6. Composición del fungicida INTERGUZAN 30-30 (quintoseno +thiram)

Composición porcentual: % en peso

Ingrediente activo:quintoseno: pentacloronitrobenceno). (Equivalente a 300 g de i.a. kg -1) No menos de:..................................................... 30thiram: Disulfuro de tetrametil tiuram (Equivalente a 300 g de i.a. kg -1)No menos de……………………………………………. 30Ingredientes inertes:Diluyente, colorante y compuestos relacionados. No más de………………………………………………. 40Total:........................................................................... 100

Cuadro 8. Composición del fungicida CAPTAN (Captan)

Composición porcentual: % en pesoIngrediente act Ingrediente activo: Captan: N-(triclorometil) tio)-4ciclohexen-1, 2 dicarboximida.

No menos de:............................................................. 50 (Equivalente a 500 g de i.a. kg-1) Ingredientes inertes: Diluyente, humectante, dispersante y compuestos relacionados. No más de:................................................................. 50 Total: ......................................................................... 100

Fuente: Thomson (2006)

3.3.6 INTERGUZAN 30 – 30 (quintoseno +thiram)

Actúa contra hongos

diseminados por semilla o

habitantes del suelo Se aplica al

suelo en aspersión, espolvoreo;

también a la semilla. Está

formulado para aplicarse en seco

(Cuadro 6); sin embargo, por ser

polvo humectable, puede

aplicarse en suspensión

concentrada o tipo slurry

(Thomson, 2006).

3.3.7 Benomilo (metil 1-

butilcarbamoil)

Este producto es un fungicida

sistémico preventivo y curativo

recomendado para el control de

enfermedades en los cultivos

especificados en la etiqueta.

(CUADRO 7)

Es más efectivo contra etapas

tempranas del desarrollo de la infección, cuando se presentan los primeros síntomas de

la enfermedad.

3.3.8 CAPTAN (captan)

Es un fungicida de

contacto; actúa contra las

enfermedades. Su composición

química se muestra en el Cuadro

16

Cuadro. 7 composición del fungicida Benomilo.

5. No es compatible con THIRAM (thiram), polisulfuros, compuestos mercuriales,

DIAZINON (diazinon), cal y aceites agrícolas, no debe aplicarse en horas de calor

intenso o cuando la velocidad del viento sea alta (Thomson, 2006). (CUADRO 8)

3.3.9 ANATALONIL 75%PH Fungicida en polvo humectante ligeramente toxico, No causa fitotoxicidad en los cultivos señalados si se aplica a la dosis y en la forma de aplicación recomendadas.Agregar ANATALONIL 75% PH lentamente en la cantidad indicada para su volumen de agua suficiente para una premezcla y después agregue el total del agua para la aspersión. (CUADRO 9)

3.3.10 OXIQUIM Para uso exclusivo en plantas formuladoras de plaguicidas polvo humectable en equivalentes en gramos de ingrediente activo (I.A. /kg o L) de: 500 y 850., agrícolas: como polvo técnico en equivalentes en gramos de ingrediente activo (I.A. /kg o L) de: 570 y como sólido técnico en equivalentes en gramos de ingrediente activo (I.A. /kg o L) de: 554 y 956.Fórmula química: ClCu2H3OPeso molecular: 213.56Clasificación: Compuestos de cobre

Actúa por contacto que, dependiendo del hongo, puede evitar la germinación de esporas, el desarrollo del micelio y la producción de esporas; interrumpe procesos metabólicos como la biosíntesis del ergosterol (sustancia líquida que forma la parte de la pared celular de los hongos) y suprime así su desarrollo. Tiene efecto sobre importantes procesos metabólicos de los hongos, lo cual permite ejercer un efectivo control sobre una amplia variedad de enfermedades que atacan a los cultivos.

17

CUADRO.9 Composición del fungicida Anatalonil.

IV. OBJETIVOS E HIPÓTESIS

Por el impacto de las enfermedades fungosas en la productividad del cultivo de tomate, que está expuesto al ataque de hongos en la raíz, se realizó la presente investigación fundamentada en los objetivos e hipótesis siguientes:

4.1 Objetivos Aislar, purificar e identificar los hongos que se presentan en el cultivo de la

cebolla.

Evaluar la patogenicidad de las especies de hongos aislados.

Conocer la efectividad biológica in vitro de 10 fungicidas contra los aislamientos fungosos.

4.2 Hipótesis Las especies de hongos aislados son capaces de reproducir los síntomas de

las enfermedades en plantas inoculadas.

Los fungicidas sistémicos tiene una mayor eficiencia que los productos de contacto para inhibir el desarrollo de los patógenos en estudio.

V. MATERIALES Y MÉTODOS

18

5.1 Características del área de estudio La presente investigación se llevó acabo en el Laboratorio de Fitopatología

del Centro de Estudios Profesionales del Colegio Superior Agropecuario del Estado

de Gro., localizado geográficamente en el kilómetro 14.5 de la carretera Iguala-

Cocula; entre las coordenadas 18º 19’ latitud norte y 99º 39’ longitud oeste, a 640 m

de altitud (Figura 1 ).

Figura 1. Ubicación del lugar.

En esta región predomina un clima tropical seco [Awo (w) (i) g], con lluvias en

verano. La precipitación y temperatura medias anuales son de 797 mm y 26.4 ºC,

respectivamente (García, 1973).

5.2 Muestreo en campo

19

Muestreo. Se realizó en la colonia Buenavista, ubicada en Cocula, Gro, durante una

visita con fines de estudio, se observaron plantas de tomate de cascara con manchas

amarillentas en las hojas, por la cual se quiso observar de qué enfermedad se trataba.

5.3 Aislamiento de los hongos

Se utilizó la técnica de cámara húmeda para inducir la esporulación y/o

crecimiento miceliar fungoso, en trocitos de tejidos enfermos de raíz de cebolla (Figura

2). Se utilizó el procedimiento siguiente:

Figura 2. Cámara húmeda en caja Petri.

5.3.1 Cámara húmeda

Los tejidos infectados de raíces se lavaron con agua y jabón; se cortaron en

trocitos de 0.5 mm2 incluyendo partes de raíz enferma y sana (área de avance de la

infección ); se desinfectaron con hipoclorito de sodio al 1% , por 1.0 a 1.2 minutos; se

enjuagaron en agua destilada esterilizada; se colocaron 5 trocitos sobre dos

portaobjetos previamente flameados, dispuestos sobre papel absorbente humedecido,

dentro de cajas Petri (Figura 3).

Las cajas se etiquetaron con el nombre, fecha y tipo de tejido; se incubaron a

temperatura ambiente sobre una mesa en el laboratorio.

20

Figura 3. Preparación de cámaras húmedas.

5.3.2 Purificación de los hongos

Las raíces infectadas colocados en las cámaras húmedas, se inspeccionaron en

el microscopio estereoscopio; en los hongos que no esporularon, se localizó el

micelio, se tomaron con una aguja de disección flameada, muestras de hifas

fungosas; se transfirieron al centro de cajas Petri con medio de cultivo PDA en las

muestras que exhibían fructificaciones del hongo; Las cepas fungosas purificadas se

transfirieron a tubos de ensaye con PDA, para preservar los aislamientos y utilizarlos

en los ensayos experimentales subsecuentes.

5.4 Identificación de los hongos

De las cepas purificadas se tomaron muestras de micelio y esporas, se hicieron

preparaciones en lactofenol y se observaron en el microscopio compuesto las

estructuras fungosas (micelio, macroconidios, conidios, esclerocios y asérvulos), así

como las principales características de importancia taxonómica, como son: el color,

septación y ramificación de las hifas; la formación de esporas y el tipo de esclerocio.

(Figura 4)

21

Figura 4. Vista de un microscopio a Fusarium oxysporum.

La morfología observada sirvió de base para la utilización de las claves ilustradas de

Street (1982), Barnett y Hunter 1997), así como la descripción hecha por Romero

(1993), que permitieron la identificación del género y especie de los aislamientos

obtenidos.

5.5 Prueba de patogenicidad.

Se utilizaron 10 plántulas de tomate de cascara de 15 cm de altura (25 días de

edad).

Preparación del inóculo. En este caso se cultivó el hongo en un sustrato de glumillas

de avena se utilizaron 7.0 gr de este inóculo. Se efectuó la inoculación mediante el

procedimiento siguiente:

Inoculación. Se mezclaron homogéneamente 7.0 gr. de inóculo y arena previamente

esterilizada; con este inóculo se llenaron vasos de unicel del No. 8 y en ellos se

trasplantaron las plantas a raíz desnuda.

22

Se dejaron 3 plantas como testigo, que se trasplantaron solamente en arena

esterilizada y glumas 7.0 gr esterilizadas. Las plantas inoculadas se colocaron bajo

cubierta con media sombra; se inspeccionaron diariamente para observar la aparición

de los síntomas de la enfermedad. (Figura 5).

Figura 5. Plantas inoculadas.

5.6 Control químico in vitro de los hongos

Se preparó medio de cultivo PDA siguiendo el procedimiento descrito:

Procedimiento para la preparación de 500 mL de medio de cultivo papa-dextrosa-

agar

Etapa Procedimiento

1 Se pela la papa y corta en trozos pequeños no mayores de 1 cm; pesando 100 g

y se colocaron en un matraz Erlenmeyer de 500 mL.

2 Al matraz que tiene la papa, se agregan 250 mL de agua destilada, medidos en

una probeta.

3 Se pesan 7.5 g de dextrosa y 9 g de agar, se colocan los dos ingredientes en

otro matraz de 500 mL, se agregan 250 mL de agua destilada, medidos en una probeta.

4 Se colocan los dos matraces en el autoclave y se mantiene por 10 minutos a 10

libras de presión.

5 Se separa el líquido colocándolo a través de una malla.

6 Se afora la solución en la probeta a 500 mL con agua destilada.

23

7 Se coloca nuevamente los matraces en el autoclave para esterilizar el medio de

cultivo, por 30 minutos a 15 libras de presión.

8 Se sacan los matraces, se dejan enfriar a ± 40 °C y se vacía en las cajas Petri

esterilizadas.

9 Se espera que solidifique el medio PDA y queda listo para sembrar el tejido

enfermo. Fuente: Michel (2003)

Por otra parte, se pesaron en la balanza analítica los fungicidas (Cuadro 10),

tomando en cuenta las dosis recomendadas por el fabricante del producto, para cultivos

frutícolas.

No. Fungicida N. ComúnDosis

ha 20 mL de PDA1. TECTO 60 1000 gr. 0.1 gr.2. CERCOBIN tiofanato metílico 1000 gr. 0.1 gr.3. TERRAZOLE 35% 1500 gr. 0.15 gr.4. PROZYCAR carbendazin 1500 gr. 0.15 gr.5. CALIFA 1500 gr. 0.15 gr.6. INTERGUSAN 1000 gr. 0.1 gr.7. BENOMIL Benomilo 4000 gr. 0.4 gr.8. CAPTAN captan 2500 gr. 0.25 gr.9. ANATALONIL 2500 gr. 0.25 gr.10. OXIQUIM 1500 gr. 0.15 gr.

Cuadro 10. Fungicidas y peso.

Se abrió la caja previamente esterilizada, junto a la flama del mechero; se

depositaron en el fondo, primero las dosis de los productos químicos y, en seguida, 20

mL de PDA; se agitó suavemente la caja hasta

que el fungicida se disolvió completamente en el

medio de cultivo; que se dejó enfriar y solidificar

a temperatura ambiente; después se depositó un

disco de PDA con el inóculo del hongo en el

centro de la caja y se realizó la distribución de

las unidades experimentales sobre la mesa de

laboratorio, de acuerdo al diseño experimental

completamente al azar (Figura 6).

24

Figura 6. Distribución de los tratamientos en un diseño experimental completamente al azar.

5.6.1 Tratamientos y diseño experimental

Se realizó para el aislamiento de Fusarium oxysporum; constó de 10 fungicidas más un

testigo. Los 11 tratamientos se distribuyeron en el laboratorio, en un diseño

experimental completamente al azar con 4 repeticiones; para un total de 44 unidades

experimentales.

5.6.2 Variables de estudio

Para conocer el efecto de los fungicidas, sobre el desarrollo de las colonias de este

hongos investigado, se midieron las variables de respuesta siguientes;

Diámetro de la colonia. La especie de hongo identificado presento diferentes tasas de

crecimiento miceliar; por esta razón, esta variable tuvo diferentes periodos de

evaluación, así por ejemplo en el ensayo de las mediciones se hicieron cada 24 horas

durante 8 días (192 h);

Porcentaje de crecimiento de las colonias. En base al diámetro de las colonias, se

determinó el porcentaje de crecimiento en cada especie fungosa por tratamiento,

considerando que hubo 100 % de crecimiento en el testigo.

5.6.3 Análisis estadístico

Los datos del diámetro de las colonias obtenidos en las diferentes fechas de

observación en el Ensayo se transformaron mediante la fórmula: √x+0.5 (Reyes, 1981);

después se realizó el análisis de varianza, de acuerdo al diseño experimental

completamente al azar (Steel y Torrie, 1998) y el modelo estadístico siguiente:

Yij = μ + ti + eij

Donde:

Yij

= respuesta de la j-esima unidad experimenta, con el i-esimo tratamiento.

i = subíndice de tratamiento

j = subíndice de repetición

μ = media general

Ti = efecto del i-esimo tratamiento

25

Eij = error experimental de la j-esima repetición del i-esimo tratamiento

Las variables que mostraron el efecto significativo de los tratamientos se sometieron a

la prueba de rangos múltiples de Tukey ( < 0.05).

Figura 7. Distribución de 10 tratamientos Y un testigo con 4 repeticiones cada tratamiento en un diseño experimental

26

T4R4 T10R1 T7R2 T5R3 T4R3

T10R3 T 10R4 T4R2 T9R1 T7R4

T6R3 T8R3 T2 T8R2 T9R3

T2R2 T6R4 T1 T5R4 T5R2

T10R2 T9R2 T9R4 T1R1 T1R3

T2R1 T8R1 T4R1 T5R1 T4

T2R4 T3R4 T6R1 T7R1 T6R2

T3 T3R2 T1R4

T2R3 T3R3

T3R1

T1R2 T7R3 T8R4

Figura 9. Estructura morfológica de F. oxysporum (Anónimo, 2007b).

Figura 8. Crecimiento de F. oxysporum en PDA.

VI. RESULTADOS Y DISCUSIÓN

6.1 Identificación del hongo

Fusarium oxysporum Schlecht. Forma colonias blancas algodonosas de borde

regular, con pigmentaciones rosa a café rojizo sobre la superficie del medio de cultivo

PDA (Figura 8); en donde presentó un crecimiento de 0.4 cm día-1 y formó microconidios

unicelulares, hialinos y elipsoidales; así como macroconidios multicelulares hialinos y

clamidosporas en posición intercalar en las hifas más viejas.

Estas características morfológicas se pueden observar en la Figura 9. (Nelson

et al. 1983; Booth, 1971 y Walker, 1973).

6.2 Pruebas de patogenicidad

El aislamiento purificado de F. oxysporum, provocaron los síntomas típicos

de marchitez y pudrición de raíz, respectivamente, en las pruebas de patogenicidad.

27

El hongo F. oxysporum presentó el síndrome típico de la pudrición radical; que en la

parte aérea de las plantas inoculadas, se manifestó por amarillamiento y

marchitamiento.

6.3 Control químico in vitro del hongo identificado.Se observo el comportamiento y crecimiento del hongo testigo de F. oxysporum creció a una tasa de 1.6 cm dia-1, de tal forma que a las 192 h logró cubrir la superficie del medio de cultivo, de 9 cm de diámetro. (Figura 10).

5/6/2

012

5/7/2

012

5/8/2

012

5/9/2

012

5/10/2

012

5/11/2

012

5/12/2

012

5/13/2

012

0123456789

2.15 3.07 4.07 5.12 5.52 6.17 6.959

6.4 El efecto de fungicidasSe encontró que la mayoría de los fungicidas lograron al inhibir más del 100 % el desarrollo de las colonias del hongo solo Terrazole y Cercobin tuvieron una acción fungistática , Tecto 60, Prozycar, Califa, Interguzan, Benomil, Captan, Anatalonil y Oxyquin fueron los que mataron o inhibieron al 100% al hongo Fusarium oxysporum. (Figura 11).

28

Figura 10. Incremento diario del diámetro de las colonias de F. oxysporum en el tratamiento testigo.

6.5 Porcentaje de inhibición

TECTO

60

CERCOBIN

TERRAZO

LE 35%

PROZYCAR

CALIFA

INTE

RGUSAN

BENOMIL

CAPTAN

ANATALO

NIL

OXIQUIM

0

20

40

60

80

100

120

10090

74

100 100 100 100 100 100 100

PORCENTAJE DE INHIBICIÓN

Series1

Figura 12.Porcentaje de inhibición de Fusarium oxysporum en 10 Fungicidas.

29

Figura 11. Efecto de los fungicidas sobre el crecimiento de F. oxysporum.

Efecto de inhibición de los fungicidas dando como resultado que Cercobin y Terrazole tuvieron un porcentaje de mas 50 % todos los tratamientos T1, T3, T4, T5, T6, T7,T8, T9, T10 su porcentaje fue del 100%. (Figura 12)

30

VII. CONCLUSIONES

Los objetivos y resultados de la presente investigación, permiten deducir las conclusiones siguientes:

• Fusarium oxysporum causa la pudrición de raíz de tomate.

• El hongo Fusarium oxysporum tiene un crecimiento medio.

• En base a la prueba de fungicidas: Tecto 60, Prozycar, Califa, Interguzan, Benomil, Captan, Anatalonil, Oxiquim, tienen una efectividad de 100 % en la inhibición del hongo, por lo cual, se recomiendan éstos.

• Cercobin y Terrazole no inhiben completamente al hongo, con un porcentaje de inhibición de 90% y 74%, respectivamente

31

VIII. APÉNDICE

32

33

34

35

36

37

38

INTERPRETACIÓNLos datos proporcionan evidencia altamente significativa con una prueba de Tukey de que al menos dos de los 10 tratamientos es diferentes ya que los tratamientos 2, 3 nos generan evidencia fungistático , y en los tratamientos 1, 4, 5, 6, 7, 8, 9, 10 un efecto fungicida del 100% en el hongo Fusarium oxysporum.

39

IX. REFERENCIAS BIBLIOGRÁFICAS

Anónimo 2001a. el amarillamiento en el tomate de cascara. http://producirmejor.com/Libros/hortalizas/hortalizas7.pdf. En línea (Fecha de consulta: 28/05/12)

Anónimo 2009a. taxonomía tomate. En línea.http://www.conabio.gob.mx/malezasdemexico/solanaceae/physalis-philadelphica/fichas/ficha.htm. En línea (Fecha de consulta: 28/05/12)

Anónimo 2010a. origen tomate de cascara. En línea. http://terranostra-terranostra.blogspot.mx/2010/11/tomate-verde-mexicano-physalis-ixocarpa.html. En línea (Fecha de consulta: 28/05/12)

Barnett, H. L; and B. Hunter. 1997. Illustrated general olimperfect fungi. Third edition. Burgess Publishing Company. Minneapolis, USA. 241pp.

García, E. M. 1973. Modificaciones al sistema de clasificación climática de Köppen. Instituto de Geografía. Universidad Nacional Autónoma de México. México, D. F. pp 32-41.

García, A. M. 1984. Patología Vegetal Práctica. Segunda edición. Editorial Limusa. México, D. F. 264 pp.

Michel, A. A. C. 2003. Manual de prácticas de Biotecnología en Fitotecnia. Apuntes del Curso. Centro de Estudios Profesionales. Colegio Superior Agropecuario del Estado de Guerrero. 23 pp.

Steel, G. D. y J. Torrie. H. 1998. Bioestadística: principios y procedimientos. Segunda Edición. Mc Graw Hill. México, D. F. 392 pp

40