酉上一義・天野泰子* · Kazuyosh1NIsHIGAMI Yasuko AMAN0 Deparment of B1o1ogy,Sh1mane...

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島根大学文理学部紀要理苧科篇310F111頁7甲4表1970年3月 日. Mem Fac&SCL,Shmane Un1v,Nat Sc1,3 March1970 糸状菌の生長における脂肪酸の利用 酉上一義・天野泰子* (1969年11月30日受理) Fatty Ac1d Ut111zat1on on Growth of F11amentous F Kazuyosh1NIsHIGAMI Yasuko AMAN0 Deparment of B1o1ogy,Sh1mane Un1vers1ty,Matsue,Ja Abs缶ac也 肱60r ro〃加α舳3,ル猛κ〃功加θ∫o召郷and肋加o〃加榊o伽加吻榊were used-for this st By these f11a=mentous fung11ong-cham壬atty ac1ds were ut111zed The short-cha1n fatty ac1dls had a11tt1e meamng as so1e carbo 1sms But form1c ac1d.,n_butync ac1d and n_Ya1er1c ac1d1nh1b1 organ1sms Among the1ong_cha1n fatty ac1d-s,the1aur1c growth of P o倣刎鮒〃 Th1s growth1nh1b1t1on by fatty ac1d.s is d.u the resp1ratory system Mブo肌zα舳5for血ed.so_ca11ed-yeast_11k under aerob1c cond1t1on Th1s pheno皿enon dユsappeared-by g1ucose or ad-equate carbon source But,by the ad-d・1t1on of va of the yeast-11ke cens cou1d not be d1scontmued. The grow acid.was more conspicuous1y on n-va1eric acid.than.iso一▽a1eric ac 糸状菌や放線菌が脂肪酸を炭素源として生長することは,すでにEyre,HorOw1tz-Wassow, Reese(1),Sten(2),Er1kson(3)その他多数の研究者達によって明らかにされている。著者達 の研究室で以前から使用している糸状菌脇60r ro肌舳狐 も,好気的条件下で細胞内に多量 の脂質を蓄積することはすでに前報(4)において述べた。これら細胞内に蓄積された脂肪酸の 種類と炭素源として利用度の高い脂肪酸の種類とはどのような関係にあるかをしらべ,また生 長阻害効果を持つ脂肪酸の作用機作の一端にふれることを試みたのがこの報告である。 材料および方法 糸状菌として, ”κorヅα4エ{α伽3IMA6130, 戸〃o〃加刎6伽加㈱IMA7316の3種を使用した。 (1)YPG培地 Precu1tureに使用した。 〃κor3が脇6伽 IMA6071および *鳥取大学医学部薬理学教室

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島根大学文理学部紀要理苧科篇310F111頁7甲4表1970年3月 日.

Mem Fac&SCL,Shmane Un1v,Nat Sc1,3 March1970

糸状菌の生長における脂肪酸の利用

酉上一義・天野泰子*     (1969年11月30日受理)

Fatty Ac1d Ut111zat1on on Growth of F11amentous Fung1

    Kazuyosh1NIsHIGAMI  Yasuko AMAN0

 Deparment of B1o1ogy,Sh1mane Un1vers1ty,Matsue,Japan

                    Abs缶ac也

 肱60r ro〃加α舳3,ル猛κ〃功加θ∫o召郷and肋加o〃加榊o伽加吻榊were used-for this stud-y.

By these f11a=mentous fung11ong-cham壬atty ac1ds were ut111zed as so1e card-on source

The short-cha1n fatty ac1dls had a11tt1e meamng as so1e carbon source for these organ-

1sms But form1c ac1d.,n_butync ac1d and n_Ya1er1c ac1d1nh1b1ted-the growth of these

organ1sms  Among the1ong_cha1n fatty ac1d-s,the1aur1c ac1d-on1y mh1b1ted.the

growth of P o倣刎鮒〃 Th1s growth1nh1b1t1on by fatty ac1d.s is d.ue to the1nh1b1t1on on

the resp1ratory system Mブo肌zα舳5for血ed.so_ca11ed-yeast_11ke ce11s1n YP=med-1u皿

under aerob1c cond1t1on  Th1s pheno皿enon dユsappeared-by exogenous ad.d-1t1on of

g1ucose or ad-equate carbon source But,by the ad-d・1t1on of va1er1c ac1d・the format1on

of the yeast-11ke cens cou1d not be d1scontmued. The growth mh1b1t1on by・va1er1c

acid.was more conspicuous1y on n-va1eric acid.than.iso一▽a1eric acid一・

 糸状菌や放線菌が脂肪酸を炭素源として生長することは,すでにEyre,HorOw1tz-Wassow,

Reese(1),Sten(2),Er1kson(3)その他多数の研究者達によって明らかにされている。著者達

の研究室で以前から使用している糸状菌脇60r ro肌舳狐 も,好気的条件下で細胞内に多量

の脂質を蓄積することはすでに前報(4)において述べた。これら細胞内に蓄積された脂肪酸の

種類と炭素源として利用度の高い脂肪酸の種類とはどのような関係にあるかをしらべ,また生

長阻害効果を持つ脂肪酸の作用機作の一端にふれることを試みたのがこの報告である。

                 材料および方法

 材 料

 糸状菌として, ”κorヅα4エ{α伽3IMA6130,

戸〃o〃加刎6伽加㈱IMA7316の3種を使用した。

 培 養 基

 (1)YPG培地    Precu1tureに使用した。

〃κor3が脇6伽 IMA6071および

*鳥取大学医学部薬理学教室

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   酵母エキス組 ペプトン

成  グルコース

   蒸溜水

西上一義・天野泰子

 39 109 2091000〃

 (2)YPF 培地

 上記YPG培地のクルコースの代りに脂肪酸を加える。脂肪酸としては,for肌1c ac1d,n-

butyr1c ac1d,n一,1so一∀a1er1c ac1d,Iaur1c ac1d,myr1st1c ac1d。,Pa1m1t1c ac1d o1e1c ac1dを

使用した。

 培養条件

 静置培養および振塗培養をおこない,培養時間は54時間,温度は30oC。

 生長量測定

 300〃三角フラスコに培養液50〃を入れて培養し,培養後の菌体は熱蒸溜水で充分に洗って

菌体表面に附着する脂肪酸を落した。

 生長量は1フラスコあたりの乾燥量でしめした。

 ガス代謝測定にはワールブルグ検圧計を使用した。

実  験  結  果

 糸状菌め脂肪酸利用比較

 8種類の脂肪酸を炭素源とし,それそれの脂肪酸を4段階の濃度にしてあたえた。その結果

高級脂肪酸の利用度はよいが,低級脂肪酸は生長阻害をする場合もあることがわかった(第1

表)。3種類の菌にみられる傾向はだいたい似ている。しかしR6伽加舳は1auric acidに

よって著しい生長阻害を受けることが注目すべき特徴である。

 2%o1e1c ac1dを炭素源としてあたえられたMブo肌脇郷の生長をYPGの場合と比較

した結果,48時間までは炭素源としてg1ucoseがまさり,それ以後は脂肪酸が非常に有利だ

ということがわかった(第2表)。この両条件のもとに培養した菌の呼吸活性をしらべた(第3

表)。その結果,9c02/902値の比較では,g1ucoseで培養した菌のほうが大きた値をしめし

た。

〃ブo鮒吻舳5に対するn-butyr1c ac1dの影響

Mブo〃〃α舳∫の生長を阻害するn-butyr1c ac1dがその呼吸能にどのような影響をあたえて

いるかをしらべた(第4表)。極めて低い濃度(025%)では酸素吸収および二酸化炭素の排

出を促進するが,0.75%ではやや阻害効果が認められ,特に酸素吸収のほうに影響が大きく,

9c02/902値が増加した。

 myristic acid,1auric acid,Ya1eric acidの呼吸に対する影響

 3種の糸状菌に対して炭素源としての意味を持たない∀a1er1c ac1dは〃ブo肌zα舳およ

びPα炉吻舳の呼吸と発酵に大きな阻害効果を持ち,1aur1C aC1dもPα姉〃㈱の呼吸と

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糸状菌の生長における脂肪酸の利用 103

Tab1e1. Growth of Fi1a㎜entous Fung1m YPF Med1um*

dry wt. (mg)

olo M. rouxianus M. spinescens P. citrinum

Control (YP) O

80 . 1 71 . 3 79 .4

0.2 68 . 8 58.4 84 . 1

Formic Acid (C I ) 1.0 65 . 3 1.1 24 .8

2.0 l,8 . 4 0.1 26 .4

4.0 0.1 62 . 6 30 .4

0.2 83 . 3 79 . 7 102 .o

Acetic Acid (C 2 ) l.O 123 . 7 114 . O ll6 . 9

2.0 174 . 9 154 . 2 l 85 .1

4.0 79.2 192 . 3 181 .4

0.2 103 ・ 1 98 . 6 68 . 5

n-Butyric Acid (C4) l .O 135 . 6 o

O .5

2.0 0.3 o

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4.0 0.3 0.4 o

0.2 ' 59 . 7 95 . 9 119 .2

n-Valeric Acid (C 5 ) l .O 0.2 0.2 o

2.0 0.7 0.3 O. 1

4.0 0.7 0.2 O. 1

0.2 114 . 8 127 ・ 6 1 .7

Lauric Acid (C12) 1 .O 333 . 7 397 ・ l O

.9

2.0 389 . 1 464 . 6 O

4.0 325 . 6 45 . o o

0.2 126 ・ 8 122 . 2 75 .o

Myristic Acid (C14) 1.0 243 . 9 331 . 5 237 .4 2.0 442 . 1 408 . l 154 .o

4.0 451 . O 506 . 4 244 .2

0.2 lu09 . O 133 : 4 137 . 1

Palmitic Acid (C16) 1 .O 356 . 7 308 . 4 328 . 7

2.0 459 . 7 378 . 9 193 .7

4.0 341 . 7 415 ・ O l 70 .9

0.2 74.2 63 . o 74. 6

Stearic Acid (C18) 1 .O 146 . 4 162 . 4 39 .6

2.0 195 . 7 253 . 4 275 .2

4.0 194 . 4 400 . 2- 453 . 1

 *In these exper1ments,ce11s of three spec1es of fungus grown aerob1ca11y m YPF m-ed1um

were harvested一,washed by hot d1st111ed water and dr1ed

発酵に対して顕著な阻害効果をしめした(第1図,第2図)。

 1aur1c ac1d,myr1st1c ac1d,Pa1m1t1c ac1d,∀a1enc ac1dによる糸状菌の形態的変化

 myr1st1c ac1dおよびPa1m1t1c ac1dは濃度1%において3種の糸状菌にあまり顕著な形態

変化をあたえなかった。1aunc ac1dは同じ濃度で菌糸の生長を非常に悪くした。va1er1c ac1d

はほとんど生長を抑制し,02%の場合にはYP培養基(炭素源次除)よりわずかに生長促進

が認められる程度であった(第3図)。またiso-ya1eric acidに比してn-va1eric acidが著し

い生長阻害をすることがわかった。

 M.ブ0肌伽鮒の形態変化

 M ro〃伽舳はYP培養基で好気的に生長した場合,いわゆるYeast-11ke ce11を作った。

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1 04

Table 2. Comparison of Growth of M. rouxianus in YPG* and

YPO** Medium

dry weight culture time

YPG YPO hrs mg mg 12 5.0 0.6

24 165 . 7 22 . 3

36 283 . 7 299 . 3

48 380 . 8 vQ04 . 6

60 380 . 8 437 . o

72 302 . -ou 419 . 9

84 344 . 6 5400 . 4

96 314- . 2 515 . 7

1 08 284 . 5 494 . 9

* Sole carbon source is glucose.

** Sole carbon source is oleic acid.

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Fig. 1. Effects of lauric acid and myristic acid on oxygen uptake and carbon .dioxide

output by three species of fungus

Cells of three specres of organism grown in YPG medium were harvested, washed and transferred to Warburg flasks. Cells of M. 1-0uxianus were added at 31.8 mg dry

wt. /2.0 ml to Warburg flasks. Cells of M, spinescens were added at 37.8 mg dry wt

/3.0 ml. Cells of P. citrinmn were added at 31.3 mg dry wt. 12.0 ml

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