Diarrea microorganismos mas frecuentes

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Cátedra de Microbiología e Inmunología Microbiología gastrointestinal “Microorganismos causantes de diarrea” Integrantes: Waldemar Cabrera. Hugo Colmán. Sandra Díaz. Natalia Giménez.

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Cátedra de Microbiología e Inmunología

Microbiología gastrointestinal “Microorganismos causantes de diarrea”

Integrantes:

Waldemar Cabrera.

Hugo Colmán.

Sandra Díaz.

Natalia Giménez.

Estudio coproparasitologico

Es un estudio de materia fecal, indicado en sospechas de infestaciones por parásitos, utilizando diferentes técnicas y posterior observación microscópica, se pueden observar formas parasitarias de quistes o huevos.

Para ello se debe recolectar muestras de materia fecal de 3 a 5 días consecutivos en dos frascos:

* 1 frasco de boca ancha con formol al 5%.* 1 frasco sin conservantes (muestras en fresco) para detectar la presencia de protozoarios. Por Ej. Giardias y Coccidios.

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Coprocultivo

El coprocultivo o examen coproparasitoscópico consiste en el cultivo de materia fecal. Es un método de diagnóstico microbiológico que permite identificar diferentes organismos causantes de enfermedades gastrointestinales.

Es indicado para el diagnóstico de ciertas infecciones del aparato gastrointestinal, especialmente aquellas infecciones provocadas por bacterias. Se lo utiliza para estudiar casos de diarrea severa, persistente o recurrente sin causas conocidas, y en caso de diarreas

asociadas al consumo de antibióticos.

La muestra emitida espontáneamente es la muestra óptima para el examen coprológico.

También se pueden usar muestras obtenidas mediante:RectoscopíaTacto rectalAspirado rectal

Obtención de la muestra fecal

Muestras inadecuadas:

• Las que se han mantenido por más de un día a temperatura ambiente.

• Las obtenidas después de un estudio radiográfico del tubo digestivo en el que se utilizó bario.

• Las que presentan gran cantidad de algunas sustancias que se han ingerido con fines terapéuticos (v.gr. Aceite o bario tras una radiografia contrastada.

A) REFRIGERACION ; -el frasco debe colocarse en el refrigerador a 4ºC -Cuando la conservación debe hacerse unas horas o un día -método mas sencillo y practico

B) PREPARACIÓN SELLADA EN PORTA OBJETOS -vaselina o barniz de uñas (aplicar en el borde del cubre objetos -Método de doble laminilla ( cubrir la muestra con una laminilla pequeña la cual se aplico bálsamo)

C )FORMOL -aplicar en 3g de materia fecal 10 ml de formol diluido 5 a 10 %(utilidad; evita la descomposición , disminuye el olor y fija los parásitos )

D)REACTIVO DE MIF (merthiolate, iodo,formol,)-doble utilidad (fija parásitos y los colorea)-conservación en frasco o en porta objetos (se coloca 1g de heces frescas en un frasco y 10ml de MIF ,se mezcla con un aplicador .este puede preservarse por un año .

E) REACTIVO DE PVA( ALCOHOL POLIVINILICO) -nombres comerciales ELVANOL o GELVATOL -bueno para preservar trofozoítos y quistes (conservan su morfología por mucho tiempo)

Métodos de concentración

Técnica de Ritchie o centrifugación con formol - éter

• Concentra quistes de protozoos, huevos y larvas de helmintos

• Ventajas del uso de eter y formol

• Utiliza medio liquido mas pesado que los parásitos

• Concentra quistes, huevos y larvas

• Desventaja: poco eficaz para Taenia spp., F. hepatica y óvulos de A. lumricoides

Técnica de flotación de Faust o de flotación con sulfato de zinc

• NaCl• Para huevos de

uncinaria e Hymenolepsis

• Separa, concentra y recobra ooquistes de Isospora, Cryptosporidium y Cyclospora.

• Solución densa de azúcar

Técnica de Willis MolloyTécnica de flotación de Sheater

Técnica de Kato-Katz: Para el examen directo, como para el recuento de los huevos de helmintos en heces. Colocar 100 mg de heces sobre una lámina limpia de 30x40 mm, haciendo un extendido grueso a lo largo de la misma. Cubrir con una tira de celofán de 22x30 mm, previamente humedecida en solución glicerinada de verde de malaquita al 3%, o colocar unas gotas de esta solución sobre el extendido y luego cubrir con celofán. Dejar en reposo por 1 hora a Tº ambiente, ó por 30 minutos a 37ºC. Examinar la lámina al microscopio (100x, 400x) (1,2,3)

Método de Baermann: Consiste en colocar 3 gramos de heces dentro de una tela metálica o gasa que se deposita luego en un embudo el que se introduce en un pequeño tubo centrifuga que contiene agua suficiente como para mojar el tubo, luego de una hora se retira el embudo y se centrifuga el tubo para búsqueda de larvas.

Se utiliza para la detección de Strongyloides stercoralis.

Técnica de Graham: Se usan para detectar huevos de Enterobius vermicularis, también con este proceso se ven ocasionalmente los huevos de Ascaris lumbricoides, Trichuris trichura y Taenia usando para ello cinta adhesiva transparente que se aplica en la región peri anal. El paciente no debe higienizarse durante toda la noche y concurrir de la misma manera para la extracción del material . La cinta retirada se coloca sobre una lamina portaobjeto, a la que puede agregarse gotas de tulol o xilol y se observa al microscopio

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Harada Mori: para el cultivo de huevos de uncinarias ; consiste en estirar 3 a 4 gr. De heces sobre una tira de papel de filto de 15mm de ancho por 20 cm de largo, dejando 5 cm libre en cada uno de los extremos. Uno de los extremos se introduce en un tubo de ensayo conteniendo 5-7ml de agua o solucion buffer debil. El nivel de agua no debe alcanzar la materia fecal, sino quedar 15mm de ella pero mojando la punta libre interna del papel de filtro. El tubo se tapa con una torunda de algodón ; hacia los 14 a 21 dias se centrifuga el agua del tubo y se examina el cedimento, en donde deben observarse las larvas rabditoides y filariformes

Las biopsias del intestino delgado, grueso y recto son útiles para el diagnostico de los agentes de patologías intestinales como Entamoeba histolytica, Giardia lamblia y Crystosporidium spp

Análisis de contenido duodenal

• Método de la cápsula de Beal.

• Aspirado duodenal.

• Método de la cápsula de Beal.

• Aspirado duodenal.

• Se consigue bajo el nombre comercial de Entero-Test .

• Consiste en una cápsula de gelatina con un hilo, donde uno de sus extremos se fija a la mejilla del paciente, y el otro arrollado en la cápsula, se traga, se deja dos o tres horas y luego se retira.

• Se consigue bajo el nombre comercial de Entero-Test .

• Consiste en una cápsula de gelatina con un hilo, donde uno de sus extremos se fija a la mejilla del paciente, y el otro arrollado en la cápsula, se traga, se deja dos o tres horas y luego se retira.

Método de la cápsula de Beal.

CONSIDERACIONES IMPORTANTES• Técnica especifica para cada parásito. Importante

proporcionar información acerca del paciente (origen geográfico, signos clínicos esenciales, resultados de otros exámenes y tratamientos recientes).

• Toma de muestra ideal en laboratorio (protozoarios).

• Realización sistemática de 3 exámenes de días no consecutivos.

Diarrea - definición

• Es la expulsión de heces no formadas o líquidas, con aumento en la frecuencia de defecación , más de 200 gr/día.

• Diferenciarla de las pseudodiarreas y la incontinencia fecal.

• Según el tiempo de duración se dividen en:

-diarrea aguda: menos de 2 semanas

-diarrea persistente: 2-4 semanas

-diarrea crónica: más de 4 semanas.

Virus causantes de diarrea

Menos frecuentes:• Herpes virus• Citomegalovirus

Rotavirus

Norvovirus

• Calcivirus• Virus entéricos pequeños redondos Small round

structured viruses (SRSV)• 2 géneros asociados a diarrea • Sapporo virus• Norovirus/ Norwalk-virus(Norwalk, Ohio)

• No crece en cultivos, no hay modelos animales para su estudio

Cuadro clinico

• Gastroenteritis viral epidémica en adultos• Incubación : 24-48 horas• Inicio rápido, corta duración (12-60 horas)• Diarrea, nauseas, vómitos fiebre leve calambres

abdominales, cefalea y malestar general

Otro virus que se busca más en inmunodeprimidos son el herpes virus y el CMV, que produce diarrea por inflamación.

Diarrea Bacteriana

Cuadros clínicos típicos

Estafilococo aureus Enterotoxinas : A, es l amas frecuente en intoxicaciones alimentarias, Resistente a t 100°c y al jugo gástrico, produce diarreas agudas , frecuentemente tras la ingestion de derivados lacteos

Clostridium sp Produce desde cuadros diarreicos venignos , diarreas agudas hasta graves colitis seudomembranosas

Escherichia coli ECEI. ECEH ECEP. ECDA, ECEA. ECET

Vibrio cholerae 1 semana de incubacion diarreas abundante en agua de arroz , nauseas bomitos ,

Salmonella sp Toxiinfección alimenticia, gastroenteritis y cuadros septicémico, puede quedar como residuo en la vesícula biliar.

Shigella sp Fase primaria que afecta al intestino delgado, diarreas acuosas, al 3°dia afecta al colon, volumen fecal disminuye , aparece moco, sangre y microscópicamente pus

Campylobacter sp Gastroenteritis y septicemia, C. jejuni y C. upsaliensis aislado en Síndrome de Guillem Barré

Yersinia sp Y. Enterocolitica: enterocolitis y rara ves en septicemia

E. Coli entero invasiva

Afecta al colon, se presenta heces sanguinolentas , diarrea acuosa

E. coli entero hemorrágica

Afecta al intestino grueso, ocasiona colitis hemorrágica , síndrome hemolítico urémico, poseen el antígeno “shiga”

E. coli entero patógena

agente de diarrea infantil, afecta al intestino delgado

E . coli difusamente adherente

Involucra a niños menores afecta al intestino delgado, produce diarrea acuosa acompañada de vómitos

E. coli entero agregativo

Lesiona con preferencia al intestino delgado produciendo nauseas y vómitos, diarrea acuosa febrícula y deshidratación

E. coli entero toxigenica

Ocasiona la diarrea del viajero síntomas, desequilibrio electrolítico, fiebre , deshidratación , dolor abdominal

Razas de E. coli causante de diarreas

PARÁSITOS:

Microorganismos que requieren un huésped para vivir.•Causan el 15% de las enfermedades diarreicas.•Presentes en aguas contaminadas y alimentos.Los principales: Cryptosporidum, Giardia lamblia, Entamoeba histolytica, Taenia solium (cisticercosis).

Diarreas Parasitaria

Cuadros Clínicos Frecuentes

Entamoeba histolytica

Amebiasis intestinal, con formación de ulceras a nivel del siego y colon, disentería amebiana , amebeas del colon

Giardia lamblia Dolores abdominales , 4 a 10 deposiciones diarias, anorexia, adelgazamiento meteorismo y síndrome de mala absorción

Cryptosporidium Cuadros diarreicos, ligados a procesos inmunodepresivos

Isospora belli Infecciones del intestino delgado, vómitos, diarrea meteorismo caída del peso corporal y avece fiebre

Balantidium coli Cuadros disentéricos; disentería balantidiana

Blastocystis hominis Se lo encuentra asociado con cuadros de anorexias , nauseas vomito dolor abdominal, flatulencia

Strongyloides stercolaris

Dolor epigástrico o abdominal generalizado anorexia nauseas , vómitos, diarrea, síndrome de mala absorción y cuadros desenteriformes

Diarrea por hongos

Las diarreas hongos son extremadamente raras y se ven principalmente en inmunocomprometidos, lo más frecuente es Candida albicans.

Candida albicans

Puede ser aislado en individuos normales a partir de la mucosa oral o intestinal y a veces de la piel, por lo que la infeccion endogena es la mas frecuente.

Favorecen la diseminacion y la implantacion del hongo la existencias de enfermedades debilitantes como la diabetes, procesos neoplasicos, administracion de corticoides o el tratamiento prolongado con antibioticos de amplio espectro o con drogas citostaticas

Cuadros clinicos en el sistema digestivo: a) Mucosa bucal, mas frecuente en recien nacidos y en ansíanos deshidratados , la lecion esta formada por un velo blanquecino o nuguet que puede tomar la cavidad bucal o la lengua que es facilmente arrastrado con un hisopo en el momento de tomar la muestra

b) Mucosa intestinal: suele ser motivada esta localizacion por el uso exesivo y prolongado de antibioticos de amplio espectro. Ocasiona cuados de diarrea, espasmos colicos intestinales y aveces meteorismo

Caso Clínico Hombre de 38 años de edad, el cual presenta una

diarrea intermitente de varias semanas de evolución. Se realiza la historia clínica del paciente descubriendo antecedentes familiares y personales. Se elabora un diagnóstico y se le designa un tratamiento. Las molestias se vuelven a presentar después de varios meses y es necesario realizar una segunda evaluación médica que permita llegar a un diagnóstico certero. Luego de la toma de muestra de las heces, al microscopio se observan quistes tetra nucleados con cariosomas centrales y cromatina periferica. El diagnóstico indica una amebiasis por Entamoeba histolytica. Le es asignado el tratamiento con Metronidazol por 5 dias y se le indica la necesidad de un seguimiento por parte de su médico.

Bibliografía

Canese, A. - Manual de Microbiología y Parasitología Médica - 7ma edición – Eduna – Asunción – 2012.

Murray, P. - Microbiología Médica - 6ta edición - Elveiser – Barcelona - 2009.

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