Bioquímica

Determinación de pH.

Buffer. Acción

amortiguadora

La determinación del pH (potencial de iones

Hidronios) es importante dentro del ámbito del

laboratorio clínico, pues una pequeña variación del

pH en un sistema determinará la manifestación de

una patología. Por tal motivo se hace necesario el

aprendizaje del manejo de potenciómetros y la

utilización de indicadores para determinar el pH de

una solución.

Instituto Superior

Daniel Alcides Carrión

Laboratorio Clínico

3ML41

Alumno:

Granados Cirilo Andrés

El pH es una medida de acidez o alcalinidad de una disolución. El pH indica la concentración de

iones hidronio [H3O]+presentes en determinadas disoluciones.

El término "pH" se ha utilizado universalmente por lo práctico que resulta para evitar el

manejo de cifras largas y complejas. En disoluciones diluidas, en lugar de utilizar la actividad

del ion hidrógeno, se le puede aproximar empleando la concentración molar del ion

hidrógeno.

Por ejemplo, una concentración de [H3O+] = 1 × 10−7 M (0,0000001) es simplemente un pH de

7, ya que pH = –log [10−7] = 7

En disolución acuosa, la escala de pH varía, típicamente, de 0 a 14. Son ácidas las disoluciones

con pH menores que 7 (el valor del exponente de la concentración es mayor, porque hay más

iones en la disolución) y alcalinas las de pH superiores a 7. Si el disolvente es agua, el pH = 7

indica neutralidad de la disolución.

En productos de aseo y limpieza se suele usar la expresión "pH neutro". En este caso la

neutralidad hace referencia a un nivel de pH 5,5. Debido a las características de la piel humana,

cuyo pH es 5,5[cita requerida], se indica neutralidad de pH en este tipo de productos que están

destinados a entrar en contacto con la piel para destacar su no agresividad. Si se aplicaran

productos de pH 7 a la piel se produciría una variación del pH cutáneo con posibles

consecuencias negativas.

Determinación de pH de algunas muestras cualitativamente. Uso de

indicadores.

Aprender método de calibración del pH-metro.

Determinación del pH de algunas sustancias cuantitativamente. Uso del pH-

metro.

Naranja de metilo

MEDICION DEL PH

PH-METRO. Es un sensor utilizado en el método electroquímico para medir el eh de

una disolución. PH es el potencial que se desarrolla a través de una fina membrana de

vidrio que se sepa dos soluciones con diferentes concentraciones de protones.

Buffer son las disoluciones reguladoras de pH conocido.

Un potencio metro necesita (para hacer los cálculos) de unas pequeñas cositas

llamadas CELDAS, estas son sumergidas en la disolución del pH que necesitamos. Lo

que también necesita un pH-metro es un electrolito, son sustancias que en solución

acuosa dan lugar a la formación y conducen la corriente eléctrica.

Electrolitos fuertes: totalmente ionizados

Electrolitos débiles: parcialmente ionizados representación de la disociación del

agua.

METODOS PARA DETERMINAR EL pH.

A. METODOS VISUALES:

1. Indicadores. Son sustancias que pueden utilizarse en formas de solución o

impregnadas en papeles especiales y que cambian de color según el carácter del

pH.

2. Papel Tornasol. El papel tornasol es un indicador de pH que se colorea de rojo

sumergido en un ácido o la base, más intenso será el color del indicador.

B. METODOS ELECTROMETRICOS:

La actividad de iones H+ se puede determinar potencio métricamente para ello se

introduce una célula electroquímica con un electrodo indicador y otro de

referencia, sumergidos en la solución a la cual se le quiere determinar el pH, para

generar una diferencia Potencial, que es registrada por el sistema de medición

donde se transforma a la escala de pH.

El medidor de pH-metro consiste en:

Electrodo de referencia

Electrodo indicador

Sistema de medición.

Los electrodos, indicador y de referencia, pueden presentarse separados o bien en

una misma unidad, llamándose en este caso electrodos de pH combinados.

Solución buffer es una solución compuesta por ácidos débiles y sus sales o de bases

débiles sus sales.

MANTENIMIENTO.

Un electrodo es de vidrio necesita ser inmune las interferencia del color,

turbieza, material coloidal, oxidante y reductor.

El electrodo no da una buena medida cuando está sucio con grasa o material

orgánico insoluble en agua.

El electrodo tiene que ser enjuagados con agua destilada, este no se seca con

un trapo, solo se coloca en un papel para que se seque.

Tienden a ser calibrados periódicamente para asegurar la precisión.

PRECAUSIONES.

El electrodo siempre tiene que estar húmedo.

No guardarlos o dejarlos todo el tiempo en agua destilada, ya que este

resbalaría a los iones con el bulbo de vidrio y el electrodo se volverá inútil.

No son medidas presos, todo depende del sentido de la vista de cada uno.

Existen diferentes tipos de pH-metros

CALIBRACIÓN.

Para verificar la calibración en el intervalo de pH 4.00 a 10.00, se conectó el calibrador

HAN NA y se seleccionaron los pH 4.00, 5.5, 7.00, 8.5 y 10.00 y se registraron en el pH-

metro los valores de potencial correspondientes en mili voltios a una temperatura

ajustada a 25 °C. Una vez verificado el buen funcionamiento, se conectaron los

electrodos de vidrio y de referencia, se sumergió en una solución de pH 7.00 termos

atizada a 25ºC con una precisión de ± 0.1º, y se realiza lectura en mili voltios. Luego se

introdujeron electrodos en las soluciones de referencias de pH 4.00 y 10.00 y se

realizaron las lecturas correspondientes en mili voltios. Se hicieron 5 lecturas en mili

voltios para cada valor de pH. Para verificar la calibración se realizaron las lecturas de

las soluciones de referencia en el modo pH, se obtuvo el modelo de calibración y se

evaluaron la pendiente y el intercepto es importante que recuerde tener suma

responsabilidad con este tipo de material, mas con las cosas más pequeñas, por

ejemplo las celdas de vidrio.

PH-METRO

CALIBRACION DEL PH-METRO

1. Encender el sistema

2. Luego el medidor dará el pase para ingresar a la medición.

3. Presionar CALL. Dará el menú de calibración.

4. Introducir en la solución Buffer de pH 7 el electrodo de pH y temperatura.

Agitar y esperar a que se apague.

5. Cuando aparezca en la pantalla la sigla SFM (CFM), presionar en el teclado SFM.

Automáticamente el calibrador pedirá una segunda solución Buffer que puede

ser de pH 4 ó pH 10.

6. Enjuagar con agua destilada, sumergir el electrodo en el nuevo Buffer que pidió

el potenciómetro.

7. El medidor reconocerá el Buffer automáticamente y dará el valor

correspondiente.

8. Esperar hasta que el símbolo se apague y presionar nuevamente SFM para

confirmar el segundo punto de pH.

9. El medidor regresará a la forma de medición manual, saque el electrodo y

enjuague con agua abundante.

MEDICION DEL PH

1. Introducir el electrodo en la muestra, agitar brevemente y esperar que la

lectura se establezca.

2. La pantalla mostrará la lectura del pH equilibrado con temperatura, saque el

electrodo de la muestra y lave con agua destilada antes de realizar la lectura de

una segunda muestra.

PAPEL TORNASOL

1. Sumergir el papel tornasol dentro de la

muestra.

2. Apreciar el cambio de color.

INDICADORES

A. NARANJA DE METILO:

1. Agregar dos gotas de naranja de metilo a cada muestra.

2. Observar resultados.

B. FENOFTALEINA:

3. Agregar dos gotas de fenolftaleína a cada muestra.

4. Observar resultados.

ACCIÓN ANTIÁCIDA

1. Medir el pH de diferentes sustancias (agua, coca cola y Sprite) y anotarlas.

2. Agregar una cucharada de bicarbonato a cada una de las sustancias.

3. Nuevamente medir el pH de las sustancias y anotarlas.

4. Comparar los pH medidos antes y después de agregar el bicarbonato y anotar

discusiones.

Naranja de metilo

DETERMINACION DE PH DE AGUA CUANTITATIVAMENTE (PH-METRO)

Cuadro de Resultados de pH Agua

Tipo de agua pH Amortiguador Acción Amortiguadora (pH)

Agua hervida 7 Bicarbonato 7.86

Agua San Luis 7.56 Bicarbonato 8.19

Agua de Pozo 7.04 Bicarbonato 8.04

Agua San Mateo 7.03 Bicarbonato 7.79

Agua Cielo 7.11 Bicarbonato 8.02

DISCUSIÓN DE RESULTADOS: Una de las evaluaciones que deben cumplir todos los

alimentos embotellados son los análisis fisicoquímicos, entre otros como

microbiológicos, etc. Una de las evaluaciones fisicoquímicas es la medición de pH que,

según la norma guiada por los métodos APHA 2005 Métodos Normalizados para el

Análisis de Aguas Potables y Residuales E.E.U.U., debe estar entre 6.5 a 8.5. Como se

observó en los resultados todos los valores de las aguas analizadas están dentro del

límite establecido. Sin embargo no quiere decir esto que sean aptas para el consumo

humano, además de los análisis fisicoquímicos se deben realizar análisis

microbiológicos de aguas para determinar m. o. que podrían estar contaminando dicha

agua. Al agregar el bicarbonato se observó el incremento de pH lo que demuestra que

esta sustancia es un buen antiácido, que podría ser usado en nuestra dieta, pero de

forma controlada.

DETERMINACION DE PH DE DIFERENTES SUSTANCIAS CUANTITATIVAMENTE

(PH-METRO)

Cuadro de Resultados de pH de diferentes muestras

# Muestra pH Amortiguador Acción Amortiguadora (pH)

pH Bibliografía

1 CH2COOH - Bicarbonato - Varia

2 NaOH - Bicarbonato - Varia

3 HCl - Bicarbonato - Varía

4 Leche de Vaca 7.27 Bicarbonato - 6.2-6.8

5 Lejía 12.45 Bicarbonato - 12.4

6 Shampoo 8.16 Bicarbonato - 8.5

7 Vino 3.77 Bicarbonato - 2.9 – 4.2

8 Café 4.94 Bicarbonato - 5.0

9 Leche magnesia 9.75 Bicarbonato - 10

10 Jugo de Tómate 4.45 Bicarbonato - 4.2 – 4.5

11 Limón 2.16 Bicarbonato - 2.4

12 Agua de Azahar 8.35 Bicarbonato - 5 - 7.9

13 Sprite 3.43 Bicarbonato 7.04 2.5

14 Coca Cola 2.57 Bicarbonato 6.61 2.5

DETERMINACION DE PH DE DIFERENTES SUSTANCIAS CUALITATIVAMENTE

(PAPEL TORNASOL)

# Muestra pH Tornasol azul Tornasol Rosado

1 CH2COOH - Rosado No viró

2 NaOH - No viró Azul

3 HCl - Rosado No Viró

4 Leche de Vaca 7.27 Rosado No viró

5 Lejía 12.45 No viró Azul

6 Shampoo 8.16 Rosado No viró

7 Vino 3.77 Rosado No viró

8 Café 4.94 Rosado No viró

9 Leche magnesia 9.75 No viró Azul

DETERMINACION DE PH DE DIFERENTES SUSTANCIAS CUALITATIVAMENTE

(TIRA DE MEDICION DE PH)

Leche Magnesia pH = 10

Café pH = 5

DETERMINACION DE PH DE DIFERENTES SUSTANCIAS CUALITATIVAMENTE

INDICADORES DE PH

Grupo 1

Indicadores Muestras

# NaOH HCL CH2COOH 1 Naranja de Metilo Amarillo Rojo Naranaja 2 Fenolftaleína Rosella Incoloro incoloro

Naranja de metilo

Grupo 2

Grupo 3

Indicadores Muestras

# Shampoo Limón 1 Naranja de Metilo Amarillo Rosado 2 Fenolftaleína incoloro Incoloro

Indicadores Muestras

# Sprite Vino 1 Naranja de Metilo Naranja oscuro Rojo claro 2 Fenolftaleína incoloro Ligeramente

incoloro

Grupo 4

http://tesis.unjbg.edu.pe:8080/bitstream/handle/unjbg/135/29_Zavalaga_Talledo_EN

_FACI_Biologia_Microbiologia_2012_Resumen.pdf?sequence=2

es.wikipedia.org/wiki/PH-metro

Indicadores Muestras

# Coca cola Leche 1 Naranja de Metilo Rojo oscuro Incoloro 2 Fenolftaleína incoloro Incoloro