Cribado de cromosomopatías mediante el estudio de ADN ... · Dennis Lo El contenido de ADN fetal...

Cribado de cromosomopatías

mediante el estudio de ADN fetal en

sangre materna

Javier Suela

Congreso Nacional del Laboratorio Clínico 2017

DE DONDE VENIMOS Congreso Nacional del Laboratorio Clínico 2017

Semana 8 Semana 12 Semana 20 Semana 32 Semana 4 Parto

Eco confirmación

TRIPLE

CRIBADO:

PAPP-A, bHCG

TEST

EMBARAZO

Eco del triple cribado: Estado general

Transucencia nucal Mediciones sec. de Down: nariz, ductus, tricúspide…

Eco alta resolución:

Revisión estado general.

Evaluación cardíaca Evaluación todos los

órganos (puede haber eco

semana 16 en caso de sospecha previa de cardiopatía u otros)

Estudio RHD

Vacuna RHD

Semana 14: fin ILE libre Semana 22: fin ILE

malformación no letal

Eco tardía de malformaciones Revisión estado general.

Evaluación cardíaca Evaluación todos los órganos

ECOGRAFIA

BIOQUÍMICA


“Microquimerismo”

Transferencia materno/fetal Congreso Nacional del Laboratorio Clínico 2017

Trofoblasto trisómico sangre materna

Determinación por sexo (XY)

Separación por MACS (eritroblastos)

(técnica alternativa)

También se propuso citometría

Rendimiento MUY pobre (<1 cel / 100000)

Céls. fetales en sangre materna Congreso Nacional del Laboratorio Clínico 2017

¿Qué es el ADN libre en plasma?

El ADN libre circulante (cfDNA) son

restos celulares apoptóticos que se

degradan y excretan por nuestro

cuerpo

Varios usos de interés:

- Biopsia líquida (tumor)

- Presencia fetal en sangre materna


ADN libre en plasma (cfDNA)

Estudios oncológicos:

Un 30% de los pacientes con cáncer presentaban

cfDNA con la tecnología de detección del momento


Dennis Lo

El contenido de ADN fetal libre en plasma materno es 970

veces mayor que el nivel de ADN contenido en células fetales

en sangre materna.

La cantidad de ADN fetal libre en plasma materno crece

durante el embarazo, y puede detectarse en plasma materno a

partir de la 5ª semana de gestación.

El ADN fetal libre en plasma desaparece extremadamente

rápido tras el nacimiento. La vida media de este ADN es de

16.3 minutos, siendo prácticamente indetectable en 2 horas.

cfDNA fetal en sangre materna

El cfDNA fetal es PLACENTARIO


Análisis Trisomía 21: 753 embarazadas Sensibilidad: 100% Especificidad: 97.9%

BMJ 2011;342:c7401

Dennis Lo

Jun Wang

Kypros Nicolaides

Aplicación del cfDNA fetal Congreso Nacional del Laboratorio Clínico 2017

DÓNDE ESTAMOS Congreso Nacional del Laboratorio Clínico 2017

Metaanálisis para NIPT Congreso Nacional del Laboratorio Clínico 2017

Nuestra experiencia (2015-2016)

- En sintonía con la mayoría de estudios publicados

- T18 y T13 podrían tener menor VPP por causa de CPM


El NIPT es un CRIBADO. NO SUSTITUYE A LA TÉCNICA INVASIVA En embarazos con patología fetal la técnica de primer orden es la INVASIVA La embarazada debe conocer los pros y contras de la técnica antes de elegir, así como los datos de contingencia (sensibilidad, especificidad, VPP, VPN…)

Se debe ofrecer la confirmación de un ALTO RIESGO Se debe recomendar un estudio con medición de fracción fetal (rec >4%) Se debe hacer consentimiento, consejo pre y post test No es un análisis de TODO el genoma (no es infalible)

¿Cómo trabajar con NIPT? Congreso Nacional del Laboratorio Clínico 2017

El NIPT es un CRIBADO. EL NIPT DETECTA cfDNA, Y POR TANTO ES SENSIBLE A SU MODIFICACIÓN: - Mosaicismos de confinamiento placentario o exclusivamente fetal - Madre portadora de patología a testar - Gemelo evanescente - Cualquier contaminación de cfDNA (exógena o endógena) UN RESULTADO NO INFORMATIVO (FF<4%) PUEDE SER RELEVANTE

¿Qué limitaciones tiene el NIPT? Congreso Nacional del Laboratorio Clínico 2017

Mosaicismo feto/placenta (CFM, CPM)

NIPT

Biopsia coriónica

L.Amniót ico

Concordancia

ALTO RIESGO ALTO RIESGO BAJO RIESGO

POSITIVO POSITIVO NEGATIVO

NEGATIVO POSITIVO POSITIVO


Nuestra experiencia: 1 caso con cariograma complejo (CCR tipo IVa posteriori)

Presencia de DNA materno tumoral

El ADN plasmático tumoral

materno podría ser detectable por

NIPT (retrospectivo)

7 casos de cáncer / 125426

Isocromosoma 8p

Monosomía 9

Duplicación 11q24qter

Deleción 17p

Monosomía 19

Duplicación 20q

Deleción Xq intersticial


Seguimiento no informativos

Otros estudios informan, además, de posibles aneuploidías


Guía de recomendaciones de la ACMG acerca de:

- Qué tecnología usar

- Qué informar

- Qué parámetros epidemiológicos son relevantes (S, ESP, VPP, VPN…)

- Qué consejo dar a las pacientes

Guías clínicas y consensos Congreso Nacional del Laboratorio Clínico 2017

Guías clínicas y consensos

NIPT como test contingente


Implantación del NIPT en el SNS (globalizado)

2015

Uso contigente de NIPT en el SNS 2016 2017 HOY

En proceso / en proyecto

Sin datos (uso esporádico)


HACIA DONDE VAMOS Congreso Nacional del Laboratorio Clínico 2017

Dos preguntas de futuro

- ¿DEBE DEMOCRATIZARSE EL USO DEL NIPT?

¿DEBE SER UN CRIBADO DE POBLACIÓN GENERAL?

¿DEBE SUSTITUIR AL CRIBADO COMBINADO ACTUAL?

¿QUÉ SITUACIONES HAY QUE ANALIZAR?

- ¿DEBE AMPLIARSE LA CAPACIDAD DE DETECCIÓN DE LA TÉCNICA?

¿DEBEN ANALIZARSE OTRAS ANEUPLOIDÍAS?

¿MICRODELECIONES?

¿HASTA DÓNDE PODEMOS LLEGAR?


¿Debe democratizarse su uso?

¿CRIBADO GENERAL DE ANEUPLOIDÍAS DE INTERÉS?

Utilización de las técnicas actuales de manera más generalizada

PROS:

Reducción técnicas invasivas

Simplificación protocolos

Detección de falsos negativos

CONTRAS:

Evaluación real de las aneuploidías a cribar

Podría aparecer otra cohorte de falsos negativos

NO DEJA DE HABER RESULTADOS DISCREPANTES


Análisis de otras regiones - actual

Es posible ver otras regiones del genoma

No hay base de datos estadística

Profundidad baja (>10Mb)

Debe tratarse como sospecha

(no hay series suficientes de VPP y VPN)

Importante conocer indicación caso

Nuestro conocimiento es residual:

Pallister Killian (tetra12p)

Caso trisomía 14 placentario

(UPD materna por rescate cromosómico)

del10q11q22 de novo

Del16q11q22 de novo

Trisomía 22 en mosaico fetal

Pero también algún caso

exclusivamente placentario


Las técnicas de NGS cada vez son más potentes y precisas: WGS

¿Y si incrementamos el número de lecturas?

Análisis de otras regiones - futuro Congreso Nacional del Laboratorio Clínico 2017

¿ARRAY-CGH EN SANGRE MATERNA?

En casos con patología fetal (o de manera general?). Sería una CVS no invasiva

PROS:

Reducción técnicas invasivas

NIPT para todos los estudios, con o sin malformación

CONTRAS:

Generalizar este estudio incrementaría test invasivos

(variantes sólo placentarias rescatadas)

La madre podría seguir generando problemas (cromosoma X, etc.)

Análisis de otras regiones - futuro Congreso Nacional del Laboratorio Clínico 2017

El NIPT es un CRIBADO. NO SUSTITUYE A LA TÉCNICA INVASIVA Hoy por hoy es una técnica muy útil para descartar el FP del cribado bioquímico Cada vez más utilizado en clínica diaria

La tecnología permite analizar cada vez más información, pero todo debe estudiarse desde un correcto consejo genético, pre y post test A nivel futuro, se plantea como: 1. Un cribado para población general 2. Un array-CGH en sangre materna (limitaciones como biopsia coriónica)

Conclusiones Congreso Nacional del Laboratorio Clínico 2017

GRACIAS A: LABORATORIO

TRISONIM

AL RESTO DEL EQUIPO NIMGENETICS, COLABORADORES, PACIENTES

Y A VOSOTROS POR ESCUCHARME


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