Cap 4 5 Primrose

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En este tipo de plásmido, el cebador para la replicación del ADN es una molécula de ribonucleótido 555-base llamada ARN II que forma un híbrido ADN-ARN en el origen de replicación. RNA II sólo puede actuar como un cebador si es escindida por la ARNasa H para dejar un grup 3'hydoxyl libre. A menos ARN II es procesada de esta manera, no va a funcionar como un primer y la replicación no podrá ocurrir. Control de la replicación es mediada por otro (108-base) molécula de ARN pequeño llamado ARN I, que está codificada por la misma región de ADN como de ARN II, pero por lass hebra complementaria. Por lo tanto RNA I y RNA II son complementarias entre sí y pueden hibridar para formar una hélice de doble cadena de ARN.

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La formación de este duplex interfiere con el procesamiento de ARN II por la RNasa H y por lo tanto no se produce la replicación. Desde ARN es codificada por el plásmido, más de lo mismo se puede sintetizar cuando el número de copias del plásmido es alta. Como la célula huésped crece y se divide, por lo que la concentración de ARN que va a caer y el plásmido comenzará a replicar de nuevo.

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Además de ARNI, una proteína codificada por plásmidos llamada Rop ayuda a mantener el número de copias. Esta proteína, que forma un dímero mejora el emparejamiento entre RNAI y el ARN II de modo que el procesamiento del primer se puede inhibir incluso en concentraciones relativamente bajas de RNA I. Deleciones en el gen Rop o mutaciones en RNA I, dan como srsultado un incremento en el número de copias.

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En el plásmido pSC101 y muchos de los plásmidos con un rango amplio de hospedero, la región ori contiene de 3 a siete copias de una secuencia de iterón que es de 17 a 22 pb de longitud. Cerca de la región ori hay un gen, llamado Rep A en pSC101, que codifica una proteína Rep A. Esta proteína, wich es la única proteína codificada por plásmidos requerida para la replicación, se une a los iterones e inicia la síntesis de ADN. El control en el número se ejerce por dos mecanismos superpuestos. Primero: Rep Una proteína reprime su propia síntesis mediante la unión a su propia región promotora y el bloqueo de la transcripción de su propio gen.

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