BUKU PENUNTUN PRAKTIKUM HEMATOLOGI
Transcript of BUKU PENUNTUN PRAKTIKUM HEMATOLOGI
PS. SKed
BUKU PENUNTUN PRAKTIKUM HEMATOLOGI
LABORATORIUM PATOLOGI KLINIK
( TAHUN AKADEMIK 2018/2019 )
DISUSUN OLEH :
dr. Novi Khila Firani, M.Kes., Sp.PK dr. Dian Sukma H., Sp.PK., M.Biomed
dr. Siti Fatonah, Sp.PK dr. I Putu Adi Santosa, Sp.PK
dr. Singgih Pudjo Wahono, Sp.PK Dr. dr. Hani Susianti, Sp.PK(K)
Prof. Dr. dr. Kusworini, M.Kes. Sp.PK dr. Indah Adhita Wulanda, Sp.PK, M.Biomed dr. Catur Suci Sutrisnani, M.Biomed, Sp.PK
NAMA MAHASISWA : ...............................................
NIM : ................................................
KELOMPOK :.................................................
LABORATORIUM PATOLOGI KLINIK
FAKULTAS KEDOKTERAN UNIVERSITAS BRAWIJAYA M A L A N G
2019
PS. SKed
i
KATA PENGANTAR
Puji syukur kami panjatkan kehadirat Allah SWT, karena atas perkenan-Nya buku
Penuntun Praktikum Patologi Klinik untuk mata kuliah Hematologi Program Studi
Kedokteran Tahun Ajaran 2018 / 2019 dapat terselesaikan.
Buku penuntun praktikum ini merupakan salah satu unsur penunjang dalam
proses pembelajaran mahasiswa pendidikan sarjana kedokteran untuk mencapai
kompetensinya, khususnya untuk lebih memahami dasar-dasar pemeriksaan
laboratorium di bidang hematologi. Tim Penyusun berharap buku ini dapat
dimanfaatkan dengan sebaik-baiknya oleh mahasiswa selama proses belajar.
Kami mengucapkan terimakasih kepada semua staf Laboratorium Patologi Klinik
Fakultas Kedokteran Universitas Brawijaya, yang terlibat baik langsung maupun tidak
langsung dalam penyusunan buku penuntun praktikum ini.
Penyusun mohon maaf apabila masih banyak kekurangan dalam penyusunan
buku ini. Saran dan kritik kami butuhkan untuk perbaikan dan peningkatan mutu buku
penuntun praktikum ini. Semoga di masa yang akan datang penyusunan buku ini dapat
menjadi lebih baik. Semoga buku penuntun praktikum ini bermanfaat bagi mahasiwa,
staf pengajar, serta seluruh komponen yang terlibat pada proses pembelajaran
pendidikan sarjana kedokteran.
Malang, 2 Januari 2019
Tim Penyusun
PS. SKed
ii
DAFTAR ISI
LABORATORIUM PATOLOGI KLINIK .................................................................................................. i
KATA PENGANTAR .................................................................................................................................... i
TIM PENYUSUN .......................................................................................................................................... v
TATA TERTIB PESERTA PRAKTIKUM .............................................................................................. vi
PEMERIKSAAN KADAR HEMOGLOBIN ............................................................................................. 1
PENDAHULUAN ..................................................................................................................................... 1
TUJUAN ..................................................................................................................................................... 1
PRAKTIKUM PENGUKURAN KADAR Hb DENGAN METODE SAHLI.................................. 2
Prinsip : ................................................................................................................................................ 2
Alat dan Bahan : ................................................................................................................................ 2
Pelaksanaan : ..................................................................................................................................... 2
Interpretasi ......................................................................................................................................... 4
LAPORAN HASIL PRAKTIKUM ......................................................................................................... 5
PEMERIKSAAN HEMATOKRIT ............................................................................................................. 6
PENDAHULUAN ..................................................................................................................................... 6
TUJUAN ..................................................................................................................................................... 6
PRAKTIKUM PEMERIKSAAN HEMATOKRIT (Metode Wintrobe cara Makro) ............. 6
Prinsip : ................................................................................................................................................ 6
Alat dan Bahan : ................................................................................................................................ 6
Pelaksanaan : ..................................................................................................................................... 7
Interpretasi ......................................................................................................................................... 7
LAPORAN HASIL PRAKTIKUM ......................................................................................................... 8
PEMERIKSAAN LAJU ENDAP DARAH ................................................................................................ 9
PENDAHULUAN ..................................................................................................................................... 9
TUJUAN ..................................................................................................................................................... 9
PRAKTIKUM PEMERIKSAAN LED (Metode Westergren) ..................................................... 9
Prinsip : ................................................................................................................................................ 9
Alat dan Bahan : ................................................................................................................................ 9
Pelaksanaan : .................................................................................................................................. 10
Interpretasi ...................................................................................................................................... 10
LAPORAN HASIL PRAKTIKUM ...................................................................................................... 11
PEMERIKSAAN HAPUSAN DARAH TEPI DAN HITUNG JENIS LEUKOSIT ......................... 12
PENDAHULUAN .................................................................................................................................. 12
TUJUAN .................................................................................................................................................. 12
PS. SKed
iii
PRAKTIKUM PEMERIKSAAN HAPUSAN DARAH TEPI DAN HITUNG JENIS LEUKOSIT .............................................................................................................................................. 12
Prinsip : ............................................................................................................................................. 12
Alat dan Bahan : ............................................................................................................................. 12
Pelaksanaan : .................................................................................................................................. 13
A. Membuat sediaan hapusan darah .......................................................................... 13
B. Membuat pewarnaan Wright pada sediaan hapusan darah ........................ 14
C. Pemeriksaan mikroskopik sediaan hapusan darah ........................................ 15
D. Pemeriksaan hitung jenis leukosit pada sediaan hapusan darah .............. 15
Interpretasi ...................................................................................................................................... 16
LAPORAN HASIL PRAKTIKUM ...................................................................................................... 18
PEMERIKSAAN DARAH LENGKAP DENGAN ALAT HEMATOLOGY AUTOANALYZER DAN INTERPRETASINYA ..................................................................................................................... 19
PENDAHULUAN .................................................................................................................................. 19
TUJUAN .................................................................................................................................................. 19
PRAKTIKUM PEMERIKSAAN DARAH LENGKAP DENGAN ALAT HEMATOLOGY AUTOANALYZER .................................................................................................................................. 19
Prinsip : ............................................................................................................................................. 19
Alat dan Bahan : ............................................................................................................................. 19
Pelaksanaan : .................................................................................................................................. 20
Interpretasi ...................................................................................................................................... 21
LAPORAN HASIL PRAKTIKUM ...................................................................................................... 22
PEMERIKSAAN MASA PERDARAHAN (BLEEDING TIME) ....................................................... 23
PENDAHULUAN .................................................................................................................................. 23
TUJUAN .................................................................................................................................................. 23
PRAKTIKUM PENGUKURAN MASA PERDARAHAN (METODE DUKE) .......................... 24
Alat dan Bahan : ............................................................................................................................ 24
Prosedur : ......................................................................................................................................... 24
Interpretasi ...................................................................................................................................... 24
LAPORAN HASIL PRAKTIKUM ...................................................................................................... 25
PEMERIKSAAN MASA PEMBEKUAN (CLOTTING TIME) .......................................................... 26
PENDAHULUAN .................................................................................................................................. 26
TUJUAN .................................................................................................................................................. 26
PRAKTIKUM PENGUKURAN MASA PEMBEKUAN (Cara Modifikasi LEE & WHITE) 27
Prinsip : ............................................................................................................................................. 27
Alat dan Bahan: .............................................................................................................................. 27
Prosedur : ......................................................................................................................................... 27
PS. SKed
iv
Interpretasi ...................................................................................................................................... 27
LAPORAN HASIL PRAKTIKUM ...................................................................................................... 28
PEMERIKSAAN TRANSFUSI DARAH ............................................................................................... 29
PENDAHULUAN .................................................................................................................................. 29
TUJUAN .................................................................................................................................................. 30
PRAKTIKUM PEMERIKSAAN GOLONGAN DARAH CARA SLIDE ..................................... 30
Prinsip : ............................................................................................................................................. 30
Alat dan Bahan: .............................................................................................................................. 30
Prosedur : ......................................................................................................................................... 31
Interpretasi ...................................................................................................................................... 31
PRAKTIKUM PEMERIKSAAN REAKSI SILANG ........................................................................ 31
Prinsip ................................................................................................................................................ 31
Alat dan Bahan: .............................................................................................................................. 32
Prosedur: .......................................................................................................................................... 32
Interpretasi: ..................................................................................................................................... 33
LAPORAN HASIL PRAKTIKUM ...................................................................................................... 34
DAFTAR PUSTAKA ................................................................................................................................. 35
PS. SKed
v
TIM PENYUSUN
1. Ketua : dr. Novi Khila Firani, MKes, SpPK
2. Anggota :
1. dr. Dian Sukma H., Sp.PK., M.Biomed
2. dr. Siti Fatonah, Sp.PK
3. dr. I Putu Adi Santosa, Sp.PK
4. dr. Singgih Pudjo Wahono, Sp.PK
5. Dr. dr. Hani Susianti, Sp.PK(K)
6. Prof. Dr. dr. Kusworini, M.Kes. Sp.PK
7. dr. Indah Adhita Wulanda, Sp.PK, M.Biomed
8. dr. Catur Suci Sutrisnani, M.Biomed, Sp.PK
3. Analis : Widi Astuti, A.Md
4. Administrasi : Saiful Aripin, S.Si
PS. SKed
vi
TATA TERTIB PESERTA PRAKTIKUM
1. Setiap mahasiswa peserta praktikum (praktikan) wajib hadir paling lambat 15
menit sebelum praktikum dimulai.
2. Praktikan sudah mempelajari materi praktikum yang akan dilaksanakan pada
hari itu.
3. Praktikan wajib mengikuti seluruh materi praktikum yang telah dijadwalkan.
4. Praktikan wajib menandatangani presensi kehadiran.
5. Sebelum praktikum akan diadakan pre-test. Praktikan yang terlambat
mengikuti pre-test, tidak diberikan waktu tambahan.
6. Setiap praktikan wajib membawa:
Jas Laboratorium (sudah dipakai dengan benar dan rapi sebelum
memasuki ruangan laboratorium)
Buku Penuntun Praktikum
Alat tulis
Sarung tangan (handscoen)
7. Selama praktikum, praktikan tidak diperkenankan makan, minum dan
melakukan kegiatan di luar kegiatan praktikum.
8. Setelah melakukan praktikum, praktikan diwajibkan membersihkan alat-alat
yang dipakai dan mengembalikan pada tempat semula dalam keadaan
bersih. Praktikan wajib menjaga kebersihan laboratorium.
9. Setiap kelompok atau praktikan wajib mengganti alat yang rusak atau hilang
selama praktikum.
10. Laporan hasil praktikum dikumpulkan setelah praktikum.
11. Praktikan wajib mengikuti praktikum dengan tertib.
PS. SKed
1
PEMERIKSAAN KADAR HEMOGLOBIN
PENDAHULUAN
Hemoglobin (Hb) terkandung di dalam sel darah merah, yang berperan
penting sebagai pengangkut oksigen dari paru-paru keseluruh tubuh. Hemoglobin
merupakan senyawa kompleks antara metalloporfirin (heme) dan protein
(globin). Sintesis Hb membutuhkan berbagai nutrisi, antara lain asam amino
untuk sintesis globin maupun porfirin, mineral (zat besi) dalam bentuk ion Fe2+
yang bertindak sebagai pengikat oksigen (O2), dan vitamin B12 serta asam folat
yang penting untuk maturasi sel darah merah.
Kelainan akibat kadar hemoglobin dalam darah yang lebih rendah dari
harga normal disebut anemia. Penyebab anemia bermacam-macam, antara lain
anemia akibat defisiensi fe, defisiensi asam folat, defisiensi vitamin B12, anemia
hemolitik, anemia karena penyakit kronis ataupun perdarahan. Mengingat
pentingnya fungsi hemoglobin diatas, maka bila kadarnya kurang akan
mengganggu transportasi oksigen, sehingga berpengaruh pada kinerja sel-sel
tubuh.
Metode pengukuran kadar hemoglobin pada prinsipnya adalah
menggunakan sifat hemoglobin sebagai pigmen berwarna. Adapun metode
pemeriksaan hemoglobin antara lain metode fotometri dengan mengukur
Cyanmethemoglobin, dan metode manual lain yang sederhana yaitu
menggunakan alat hemoglobinometer dengan metode Sahli. Meskipun cara
penetapan kadar hemoglobin dalam darah yang dianjurkan bukanlah memakai
hemoglobinometer menurut Sahli, namun metode yang sederhana ini masih
berguna dalam laboratorium kecil. Pada praktikum ini menggunakan metode Sahli
untuk pengukuran kadar Hb.
TUJUAN
Mahasiswa diharapkan dapat :
1. Memahami cara pengukuran kadar Hb
2. Melakukan pengukuran Hb dengan metode Sahli
3. Melakukan interpretasi terhadap hasil pengukuran kadar Hb dengan
metode Sahli
PS. SKed
2
PRAKTIKUM PENGUKURAN KADAR Hb DENGAN METODE SAHLI
Prinsip : Hemoglobin bereaksi dengan larutan HCl 0,1N menjadi asam hematin.
Warna yang terjadi dibandingkan secara visual dengan warna batang standar
pada alat hemometer Sahli.
Alat dan Bahan : Hemometer Sahli
Tabung Sahli dan pengaduk gelas
Pipet Sahli
Pipet Pasteur
Kertas tissue
HCl 0,1 N
Aquades
Sampel darah EDTA
Gambar alat dan bahan pemeriksaan Hb Sahli
Pelaksanaan : 1. Masukkan HCl 0,1 N ke dalam tabung Sahli sampai tanda angka 2 g%
(sekitar 5 tetes).
2. Hisap darah dengan pipet Sahli sampai dengan tanda batas 20μL.
3. Hapuslah darah yang melekat pada sebelah luar ujung pipet dengan kertas
tissue.
4. Kelebihan darah dalam pipet dikeluarkan dengan cara menyentuh ujung
pipet dengan memakai kertas tissue
PS. SKed
3
5. Segera alirkan darah dari pipet ke dalam dasar tabung pengencer dengan
jalan meniupnya, tetapi jangan sampai terjadi gelembung udara
6. Pipet dibilas dengan cara menghisap dan meniup larutan HCI 2 atau 3 kali.
7. Kocoklah tabung aqar darah dan HCl bereaksi membentuk asam hematin
yang berwarna coklat tua
8. Encerkan dengan aquades tetes demi tetes sambil diaduk dengan
pengaduk gelas, sambil dibandingkan dengan warna standar pada alat
hemometer Sahli.
9. Persamaan warna campuran dengan warna standar harus dicapai dalam
waktu 3-5 menit setelah saat darah dan HCI dicampur.
10. Bacalah kadar hemoglobin dengan satuan gram/dL
Keuntungan dari metode Sahli yaitu murah, praktis dan mudah dilakukan.
Namun kekurangan metode Sahli untuk pengukuran kadar Hb yaitu kurang teliti.
Kesalahan-kesalahan yang bisa terjadi pada penetapan kadar hemoglobin cara
Sahli yaitu :
1. Tidak tepat mengambil 20 ul darah.
2. Sisa darah yang menempel pada pipet Sahli tidak dihapus
3. Darah dalam pipet tidak sempurna dikeluarkan semua ke dalam larutan HCl
, dan tidak dibilas.
4. Tidak sempurna saat mengaduk campuran darah dan HCl.
5. Tidak memperhatikan waktu yang seharusnya berlalu saat melakukan
pembandingan warna.
6. Ada gelembung udara di permukaan pada waktu membaca.
7. Membandingkan warna pada cahaya yang kurang terang.
PS. SKed
4
Gambar Prosedur pemeriksaan Hb Sahli
Interpretasi Kadar Hb normal : Pria dewasa : 14-18 g/dL
Wanita dewasa : 12-16 g/dL
HCL
1
1
1
PS. SKed
5
LAPORAN HASIL PRAKTIKUM
Hari, Tanggal : ……………………………………………………..
Hasil Pemeriksaan Kadar Hb :
Kesimpulan :
Dosen Pembimbing Mahasiswa
________________________ _______________________
PS. SKed
6
PEMERIKSAAN HEMATOKRIT
PENDAHULUAN
Hematokrit (Hct) adalah prosentase endapan eritrosit terhadap volume
darah semula.
TUJUAN
Mahasiswa diharapkan dapat :
1. Memahami cara pengukuran hematokrit
2. Melakukan pengukuran hematokrit dengan metode Wintrobe (cara
makro)
3. Melakukan interpretasi terhadap hasil pengukuran hematokrit
PRAKTIKUM PEMERIKSAAN HEMATOKRIT (Metode Wintrobe cara Makro)
Prinsip : darah-EDTA dalam tabung tertentu diputar dengan kecepatan tertentu dan dalam
waktu tertentu, akan terjadi endapan eritrosit.
Alat dan Bahan : Tabung Wintrobe (panjang 100 mm)
Centrifuge
Sampel darah EDTA
Gambar alat dan bahan pemeriksaan hematokrit
PS. SKed
7
Pelaksanaan : 1. Darah EDTA dimasukkan kedalam tabung Wintrobe sampai tanda 100.
2. Tabung Wintrobe yang sudah berisi darah EDTA disentrifus/ dipusingkan
dengan kecepatan 3000 rpm selama. 30 menit.
3. Amatilah pada tabung Wintrobe :
a. Warna plasma yang di bagian atas.
b. Tebalnya lapisan putih diatas eritrosit (buffycoat), yang terdiri atas
lekosit dan trombosit, bila tebalnya 1 mm sesuai dengan 10.000
lekosit/mm3 .
c. Volume sel-sel eritrosit.
4. Bacalah nilai hematokrit dengan melihat volume eritrosit dan hasilnya
dilaporkan dalam satuan %.
Interpretasi Hematokrit normal : Pria : 40-48 %
Wanita : 37-43 %
PS. SKed
8
LAPORAN HASIL PRAKTIKUM
Hari, Tanggal : ……………………………………………………..
Hasil Pemeriksaan Hct metode Wintrobe (makro) :
Kesimpulan :
Dosen Pembimbing Mahasiswa
________________________ _______________________
PS. SKed
9
PEMERIKSAAN LAJU ENDAP DARAH
PENDAHULUAN
Laju endap darah (LED) atau erithrocyte sedimentation rate (ESR) adalah
kecepatan sedimentasi eritrosit dalam darah yang belum membeku, dengan
satuan mm/jam. Pada orang sehat pengendapan eritrosit ini berlangsung secara
konstan. Kecepatan laju endap darah dipengaruhi kadar albumin, globulin dan
fibrinogen.
LED dijumpai meningkat selama proses inflamasi akut, infeksi akut dan
kronis, kerusakan jaringan (nekrosis), penyakit kolagen, rheumatoid, malignansi,
dan kondisi stress fisiologis (misalnya kehamilan). Sebagian ahli hematologi
beranggapan LED tidak handal karena merupakan uji yang tidak spesifik, dan
dipengaruhi oleh faktor fisiologis yang menyebabkan temuan tidak akurat.
Namun, beberapa dokter masih mengharuskan uji LED bila ingin membuat
penilaian kasar mengenai proses penyakit, dan bermanfaat untuk mengikuti
perjalanan penyakit.
TUJUAN
Mahasiswa diharapkan dapat :
1. Memahami cara pengukuran laju endap darah
2. Melakukan pengukuran laju endap darah dengan metode Westergren
3. Melakukan interpretasi terhadap hasil pengukuran laju endap darah
dengan metode Westergren
PRAKTIKUM PEMERIKSAAN LED (Metode Westergren)
Prinsip : Bila darah dengan antikoagulan diletakkan dalam tabung dalam posisi vertikal
pada waktu tertentu, maka sel-sel eritrosit akan mengendap dan plasma akan
terletak diatas.
Alat dan Bahan : Tabung Westergren
Rak tabung Westergren
Bola Hisap
Larutan NaCl 0,9%
Sampel darah EDTA
PS. SKed
10
Gambar Alat dan bahan pemeriksaan LED
Pelaksanaan : 1. Darah EDTA dilakukan pengenceran terlebih dahulu dengan larutan NaCl
0,9%, yaitu 1 volume NaCl 0,9% untuk 4 volume darah EDTA.
2. Hisaplah darah ke dalam tabung Westergren hingga garis tanda 0 mm.
3. Letakkan tabung Westergreen pada rak tabung Westergren secara vertikal
/ tegak lurus
4. Bacalah laju endap darah dengan mengamati mengamati penurunan
meniskus eritrosit selama 1 jam
5. Hasil pemeriksaan laju endap darah dilaporkan dalam mm/ 1 jam.
Interpretasi LED normal : Pria : kurang dari 10 mm/1 jam
Wanita : kurang dari 15 mm/1 jam
PS. SKed
11
LAPORAN HASIL PRAKTIKUM
Hari, Tanggal : ……………………………………………………..
Hasil Pemeriksaan LED metode Westergren :
Kesimpulan :
Dosen Pembimbing Mahasiswa
________________________ _______________________
PS. SKed
12
PEMERIKSAAN HAPUSAN DARAH TEPI DAN HITUNG JENIS LEUKOSIT
PENDAHULUAN
Leukosit (sel darah putih) merupakan salah satu jenis sel darah. Fungsinya
sebagai pertahanan tubuh, yaitu membunuh benda asing / patogen yang masuk
ke dalam tubuh. Ada beberapa jenis sel lekosit yang normal berada di darah tepi,
yaitu eosinofil, basofil, netrofil stab, netrofil segmen, limfosit, dan monosit.
Pemeriksaan evaluasi hapusan darah tepi bermanfaat untuk mengetahui
morfologi sel-sel darah, yaitu eritrosit, leukosit, dan trombosit. Selain itu juga
dapat digunakan untuk menaksir jumlah leukosit dan trombosit. Abnormalitas
jumlah sel leukosit maupun hitung jenis leukosit dapat menggambarkan kelainan
atau proses penyakit dalam tubuh, antara lain infeksi, inflamasi, alergi, maupun
keganasan. Sehingga melalui pemeriksaan hapusan darah tepi maupun hitung
jenis leukosit dapat diketahui penyakit pada tubuh seorang pasien.
TUJUAN
Mahasiswa diharapkan dapat :
1. Mahasiswa mampu membuat sediaan hapusan darah tepi
2. Mahasiswa mampu melakukan pewarnaan Wright
3. Mahasiswa mampu melakukan pemeriksaan evaluasi hapusan darah tepi
menggunakan mikroskop
4. Mahasiswa mampu melakukan hitung jenis leukosit
PRAKTIKUM PEMERIKSAAN HAPUSAN DARAH TEPI DAN HITUNG JENIS LEUKOSIT
Prinsip : Pembuatan hapusan darah tepi dan pengecatan Wright yang memenuhi syarat
untuk dilakukan evaluasi hapusan darah tepi dan hitung jenis leukosit.
Penghitungan jenis sel leukosit pada sediaan hapusan darah dengan
menggunakan mikroskop sampai ditemukan 100 sel dari 10 lapang pandang atau
lebih.
Alat dan Bahan : Gelas objek
Kaca penggeser
PS. SKed
13
Rak pewarnaan
Pipet
Mikroskop
Minyak emersi
Pewarna Wright
Larutan buffer pH 6,4
Sampel darah EDTA
Pelaksanaan :
A. Membuat sediaan hapusan darah Cara kerja:
1. Letakkan gelas objek dengan posisi mendatar diatas meja/permukaan yang
datar
2. Kocoklah sampel darah EDTA, ambil 1 tetes darah dan letakkan di sisi kanan
gelas objek
3. Kaca penggeser dipegang dengan tangan kanan, diletakkan di sebelah kiri
tetes darah tadi pada posisi miring, dengan sudut antara 25º-30º, dan
digerakkan ke kanan hingga mengenai tetes darah, ditunggu hingga tetes
darah menyebar pada sudut kaca penggeser
4. Setelah tetes darah menyebar pada sudut kaca penggeser, maka segera
dorong kaca penggeser ke arah kiri hingga terbentuk hapusan darah. Sediaan
hapusan darah yang baik adalah sediaan rata, tidak berlubang-lubang,
panjang ½ hingga 2/3 panjang gelas objek, ada bagian yang cukup tipis
sebagai “counting area” (eritrosit tidak bertumpukan dan leukosit tersebar
merata).
5. Sediaan hapusan darah dibiarkan kering di udara
6. Pada bagian sediaan yang tebal ditulis identitas menggunakan pensil.
PS. SKed
14
Gambar sediaan hapusan darah
B. Membuat pewarnaan Wright pada sediaan hapusan darah Cara kerja:
7. Letakkan gelas objek berisi sediaan hapusan darah yang sudah kering diatas
rak pengecatan.
8. Sediaan hapusan darah ditetesi dengan cat Wright 12 tetes menggunakan
pipet dan biarkan selama 2 menit.
9. Dilanjutkan dengan larutan buffer sama banyak, dicampurkan dengan cara
ditiup-tiup sampai muncul warna metalik, kemudian dibiarkan selama 20
menit.
10. Bilas larutan pewarna tadi dengan menyiram air ke gelas objek dengan posisi
gelas objek mendatar (jangan sampai miring).
11. Sediaan hapusan darah dikeringkan di udara.
PS. SKed
15
C. Pemeriksaan mikroskopik sediaan hapusan darah Cara kerja:
1. Pemeriksaan dengan lensa objektif 10 kali, untuk mengamati :
- Kualitas sediaan hapusan darah. Sediaan hapusan darah yang baik tidak
mengandung endapan cat, terdapat “counting area” yang cukup luas,
eritrosit dan leukosit terwarnai dengan baik
- Menaksir jumlah leukosit :
Bila terdapat 20-30 leukosit per lapangan pandang sesuai dengan jumlah
leukosit 5.000/mm3
Bila terdapat 40-50 leukosit per lapangan pandang sesuai dengan jumlah
leukosit 10.000/mm3
2. Pemeriksaan dengan lensa objektif 100 kali (menggunakan satu tetes minyak
emersi), untuk mengamati :
- Keadaan eritrosit : ukuran (mikrositik, normositik, makrositik, anisositosis)
bentuk (sel pensil, sel sigar, fragmentosit, sel target, sferosit, poikilositosis)
kromasi (hipokrom, normokrom)
- Keadaan leukosit : kesan jumlah leukosit, dan hitung jenis lekosit
- Keadaan trombosit : kesan jumlah trombosit dan ukuran
D. Pemeriksaan hitung jenis leukosit pada sediaan hapusan darah Cara kerja:
1. Pemeriksaan dengan pembesaran lensa objektif 100 X dengan minyak
emersi
2. Mulailah menghitung pada pinggir atas sediaan dan berpindahlah ke arah
pinggir bawah dengan menggunakan mikromanipulator mikroskop.
3. Pada pinggir bawah geserlah lapangan ke kanan agak iebih banyak dari
lebarnya lapangan imersi, kemudian ke arah pinggir atas lagi.
4. Sesampai di pinggir atas geserlah ke kanan lagi dan kemudian ke arah pinggir
bawah.
5. Lakukanlah pekerjaan itu terus-menerus sampai 100 sel leukosit dihitung
menurut jenisnya.
6. Melaporkan hasil hitung jenis hendaknya mengikuti urutan yang pasti;
mulai dengan sel eosinofil, kemudian basofil, neutrofil (stab dan segmen),
limfosit dan terakhir monosit.
PS. SKed
16
7. Buatlah tabel seperti contoh
8. Setiap kali menemukan jenis sel tertentu, buat turusnya pada tiap-tiap baris
tabel tersebut; kalau sudah tercapai 10 turus pada sebuah baris, lanjutkan ke
baris berikutnya. Jadi, kalau kesepuluh baris sudah terisi, berarti sudah
memeriksa 100 leukosit. Selanjutnya, hitung jumlah turus total per kolom.
Tabel hitung jenis leukosit
Eosinofi
l
Basofi
l
Sta
b
Segme
n
Limfosi
t
Monosi
t
Jumla
h
1 I IIIII I II II 10
2 IIIII III II 10
3 IIIII
IIIII 10
4 IIIII
III I II 10
5 dst dst
6
7
8
9
10
Jumla
h
(%)
1 0 0 70 25 4
Total 100
Interpretasi Nilai normal:
Eosinofil / Basofil / stab / segmen / limfosit / monosit
1- 3% / 0 - 1% / 2 - 6% / 50 - 70% / 20 - 40% / 2 - 8%
PS. SKed
17
Gambar jenis-jenis leukosit
Eosinofil Basofil
Neutrofil Segmen
Neutrofil Stab
Limfosit Monosit
PS. SKed
18
LAPORAN HASIL PRAKTIKUM
Hari, Tanggal : ……………………………………………………..
Hasil Pemeriksaan :
A. Evaluasi hapusan darah tepi :
1. Eritrosit :
2. Leukosit :
3. Trombosit :
B. Hitung Jenis :
Kesimpulan :
Dosen Pembimbing Mahasiswa
________________________ _______________________
PS. SKed
19
PEMERIKSAAN DARAH LENGKAP DENGAN ALAT HEMATOLOGY AUTOANALYZER DAN INTERPRETASINYA
PENDAHULUAN
Untuk mendapatkan hasil pemeriksaan darah lengkap yang akurat dan
mendapatkan hasil pemeriksaan yang cepat dan tepat dapat menggunakan alat
hematology autoanalyzer. Penggunaan alat analisis darah secara otomatis
(hematology autoanalyzer) dapat mengukur beberapa parameter hematologi,
antara lain hemoglobin, hematokrit, lekosit, trombosit, hitung jenis lekosit dan
indeks eritrosit.
TUJUAN
Mahasiswa diharapkan dapat :
1. Memahami cara pemeriksaan Darah Lengkap menggunakan alat
hematology autoanalyzer
2. Melakukan pemeriksaan Darah Lengkap menggunakan alat hematology
autoanalyzer
3. Melakukan interpretasi terhadap hasil pengukuran darah lengkap
menggunakan alat hematology autoanalyzer
PRAKTIKUM PEMERIKSAAN DARAH LENGKAP DENGAN ALAT HEMATOLOGY AUTOANALYZER
Prinsip : Pemeriksaan parameter sel-sel darah dengan prinsip flowsitometri dengan
impedansi elektrik dan spektrofotometri
Measurements and Computation
Impedance change for WBC, RBC, PLT
Spectrophotometry for HGB
Impedance change for LYM%, MON%, GRA%
Computation from stored Data that was directly measured for MCV, MCH,
MCHC, RDW, MPV, LYM#, MON#, GRA#
Alat dan Bahan : Alat hematology autoanalyzer
Sampel darah EDTA
PS. SKed
20
Pelaksanaan : 1. Siapkan sampel darah EDTA
2. Nyalakan alat hematology autoanalyzer
3. Jalankan sampel :
a. Masukkan identitas pasien
b. Tekan tombol “save”
c. Ketik nomor sampel
d. Tekan tombol “OK”
e. Sampel darah EDTA dihomogenkan terlebih dahulu dengan
membolak-balik vacutainer / tabung penampung sampel darah
f. Buka tutup tabung penampung sampel darah, masukkan sampel
yang telah dihomogenisasi ke dalam “sampel probe”
g. Tekan START
h. Proses analisis dimulai
4. Bacalah hasil cetakan pemeriksaan darah dengan alat hematology
autoanalyzer
Gambar Panel alat hematology autoanalyzer ABX Micros 60
PS. SKed
21
Gambar Hasil cetakan dari alat hematology autoanalyzer ABX Micros 60
Interpretasi
Parameter Reference
Hb P: 13,4 – 17,7 g/dL W: 11, 4 – 15,1 g/dL
Eritrosit P: 4,0-5,5 x 106/µL W: 4,0-5,0 x 106/µL
Lekosit P: 4,3 – 10,3 x 103/µL W: 4,7 – 11,3 x 103/µL
Trombosit 142-424 x 103/µL
MCV 80-93 fL
MCH 27-31 pg
MCHC 32-36 g/dL
RDW 11,5-14,5 %
Hct 38 – 42 %
Diff. count Eo: 0-4% Baso: 0-1% Stab: 0-5% Segmen: 50-70% Limfosit: 20-40% Monosit: 1-6%
PS. SKed
22
LAPORAN HASIL PRAKTIKUM
Hari, Tanggal : ……………………………………………………..
Hasil Pemeriksaan:
Parameter Kadar
Hb
Eritrosit
Lekosit
Trombosit
MCV
MCH
MCHC
RDW
Hct
Kesimpulan :
Dosen Pembimbing Mahasiswa
________________________ _______________________
PS. SKed
23
PEMERIKSAAN MASA PERDARAHAN (BLEEDING TIME)
PENDAHULUAN
Hemostasis adalah proses tubuh secara fisiologis untuk menghentikan
perdarahan dari tempat yang cedera, dan sekaligus mempertahankan darah
dalam keadaan cair di dalam kompartemen vaskular. Pada proses hemostasis
terdapat beberapa komponen yang berperanan, yaitu sistem pembuluh darah,
trombosit, sistem koagulasi, serta sistem fibrinolysis.
Pemeriksaan masa perdarahan merupakan salah satu pemeriksaan fungsi
hemostasis. Pemeriksaan ini bertujuan untuk mengetahui fungsi kapiler serta
fungsi trombosit.
Kelainan berupa pemanjangan masa perdarahanan dapat terjadi pada
beberapa kondisi, antara lain penurunan jumlah trombosit (trombositopenia),
kelainan fungsi trombosit, setelah minum aspirin, penyakit Von Willebrand, dan
penyakit hati yang berat.
Ada 2 metode pengukuran masa perdarahan, yaitu metode Duke dan metode
Ivy. Pada praktikum ini dilakukan pengukuran masa perdarahan dengan
menggunakan metode Duke.
TUJUAN
Mahasiswa diharapkan dapat :
1. Memahami cara pengukuran masa perdarahan
2. Melakukan pengukuran masa perdarahan dengan Duke
3. Melakukan interpretasi terhadap hasil pengukuran masa perdarahan
dengan metode Duke
4. Menjelaskan macam-macam penyebab pemanjangan masa perdarahan
PS. SKed
24
PRAKTIKUM PENGUKURAN MASA PERDARAHAN (METODE DUKE)
Alat dan Bahan : 1. Pencatat waktu (Stop watch)
2. Blood lancet steril
3. Kapas alkohol
4. Kertas saring
Prosedur : 1. Desinfeksi anak daun telinga dengan alkohol 70%
2. Pegang anak daun telinga dengan ibu jari dan jari telunjuk
3. Tusuk pinggir anak daun telinga dengan lancet sedalam ±2 mm
4. Bila terlihat darah keluar, mulai tekan Stop Watch.
5. Isaplah darah yang keluar dengan kertas saring, setiap 30 detik. Hindari
jangan sampai kertas saring kontak/menekan luka.
6. Tes berakhir bilamana tidak nampak lagi darah yang terisap.
7. Tekan Stop Watch, catat menit saat itu.
8. Bersihkan luka, tutup dengan kasa steril/plester.
Interpretasi Nilai Normal : 1-3 menit
PS. SKed
25
LAPORAN HASIL PRAKTIKUM
Hari, Tanggal : ……………………………………………………..
Hasil pemeriksaan masa perdarahan :
Kesimpulan :
Dosen Pembimbing Mahasiswa
________________________ _______________________
PS. SKed
26
PEMERIKSAAN MASA PEMBEKUAN (CLOTTING TIME)
PENDAHULUAN
Hemostasis adalah proses tubuh secara fisiologis untuk menghentikan
perdarahan dari tempat yang cedera, dan sekaligus mempertahankan darah
dalam keadaan cair di dalam kompartemen vaskular. Pada proses hemostasis
terdapat beberapa komponen yang berperanan, yaitu sistem pembuluh darah,
trombosit, sistem koagulasi, serta sistem fibrinolysis.
Pemeriksaan masa pembekuan merupakan salah satu pemeriksaan fungsi
hemostasis. Pemeriksaan ini bertujuan untuk menentukan lamanya waktu yang
diperlukan darah untuk membeku sebagai ukuran aktifitas faktor-faktor
koagulasi darah terutama faktor-faktor yang membentuk tromboplastin dan
faktor yang berasal dari trombosit. Pemeriksaan masa pembekuan juga dapat
digunakan untuk memantau penderita yang mendapat terapi dengan heparin.
Bermacam-macam kesalahan teknik cenderung memperpendek masa
pembekuan, antara lain percampuran darah dengan tromboplastin jaringan,
pungsi vena yang tidak segera berhasil baik, terjadinya busa dalam semprit atau
dalam tabung, menggoyang-goyangkan tabung yang tidak sedang diperiksa,
semprit dan tabung kotor, dan sebagainya. Selain itu, diameter tabung yang
dipakai juga berpengaruh pula terhadap hasil pemeriksaan masa pembekuan,
semakin lebar tabung semakin lama masa pembekuan
Kelainan berupa pemanjangan masa pembekuan dapat terjadi pada
beberapa kondisi, antara lain penurunan jumlah trombosit (trombositopenia),
kelainan fungsi trombosit, setelah minum aspirin, penyakit Von Willebrand, dan
penyakit hati yang berat.
TUJUAN
Mahasiswa diharapkan dapat :
1. Memahami cara pengukuran masa pembekuan
2. Melakukan pengukuran masa pembekuan
3. Melakukan interpretasi terhadap hasil pengukuran masa pembekuan
4. Menjelaskan macam-macam penyebab pemanjangan masa pembekuan
PS. SKed
27
PRAKTIKUM PENGUKURAN MASA PEMBEKUAN (Cara Modifikasi LEE & WHITE)
Prinsip : Mengukur waktu pembekuan darah, dimulai saat darah masuk spuit sampai
darah membeku.
Alat dan Bahan: 1. Tabung berdiameter 8 mm sebanyak 3 buah
2. Spuit 5 cc
3. Stop watch
4. Kapas alkohol
Prosedur : 1. Lakukan pungsi vena
2. Segera setelah darah masuk dalam semprit, catat waktu atau tekan Stop
Watch. Angkatlah jarum semprit, kemudian alirkan perlahan 1 ml darah ke
dalam tabung dalam posisi miring, dimana darah mengalir lewat dinding
tabung. Lakukan pada ke-3 tabung.
3. Tabung 1 tiap 30 detik diangkat dari rak, dimiringkan, lihat adanya bekuan.
4. Setelah darah dalam tabung 1 beku, baru periksa tabung 2 demikian juga tiap
30 detik. Sampai ada pembekuan, baru saat ini “catat waktunya”
5. Tindakan sama untuk tabung 3.
Interpretasi Normal : darah membeku dalam 5-15 menit
PS. SKed
28
LAPORAN HASIL PRAKTIKUM
Hari, Tanggal : ……………………………………………………..
Hasil pemeriksaan masa pembekuan :
Kesimpulan :
Dosen Pembimbing Mahasiswa
________________________ _______________________
PS. SKed
29
PEMERIKSAAN TRANSFUSI DARAH
PENDAHULUAN
Transfusi darah adalah salah satu terapi medik yang berpotensi
menimbulkan penyulit terbesar terhadap resipien, baik dalam jangka pendek
seperti reaksi transfusi, jangka menengah berupa penularan penyakit dan dalam
jangka panjang seperti reaksi imunologis. Oleh karena itu sebelum transfusi
dilaksanakan harus dipertimbangkan bahwa manfaatnya jauh lebih besar
daripada risikonya, apalagi jika masih ada cara lain untuk menaikkan komponen
darah maka sebaiknya tidak diberiksan transfusi.
Pada anemia, transfusi baru layak diberikan jika pasien menunjukkan
tanda kekurangan oksigen seperti rasa sesak, mata berkunang, berdebar
(palpitasi), pusing, gelisah atau kadar Hb < 6 g/dl.
Jenis golongan darah tergantung jenis antigen yang terdapat pada dinding
eritrosit. Telah diketemukan 25 jenis golongan darah seperti ABO, Rhesus, Kell,
Duffy, Lewis, MNS, Lutheran, Diego, P, I, dan lain-lain, tetapi yang paling penting
dalam transfusi darah adalah golongan darah ABO dan Rh karena
imunogenitas/antigenitas keduanya yang paling kuat.
Tabel 2. Frekuensi golongan darah ABO
Genotip
Diaglutinasi oleh
Aglutinin dalam serum
Golongan darah
Insiden %
A1A1, A1O A2A2, A2O BB, BO A1B A 2B OO
anti-A,anti-A1 anti-A anti-B anti-A, anti-A1 anti-B anti-A, anti-B None
anti-B anti-B anti-A --- --- anti-A anti-A1 anti-B
A1 A2 B A1B A2B O
35 } } 45 10 } 8 2,5 } } 3 0,5 } 44
PS. SKed
30
Sebelum pelaksanaan transfusi darah reaksi silang mutlak harus
dikerjakan antara darah donor dan darah resipien yang telah sesuai golongan
darah ABO dan Rh nya.
Pemeriksaan ini bertujuan untuk :
1) Konfirmasi apakah golongan darah donor dan resipien telah sesuai.
2) Memberi keyakinan akan manfaat transfusi yang maksimal bagi
penderita
3) Mencegah kejadian reaksi transfusi hemolitik
Reaksi silang terdiri atas:
A. Reaksi silang mayor (Eridonor + serumresipien)
B. Reaksi silang minor (serumdonor + eriresipien)
Reaksi silang mayor memeriksa ada tidaknya antibodi resipien yang dapat
merusak eritrosit donor pada pelaksanaan transfusi. Sedangkan reaksi silang
minor memeriksa ada tidaknya antibodi donor yang dapat merusak eritrosit
resipien.
TUJUAN
Mahasiswa diharapkan dapat :
1. Memahami cara pemeriksaan golongan darah dan reaksi silang
2. Melakukan pemeriksaan golongan darah dan reaksi silang
3. Melakukan interpretasi terhadap hasil pemeriksaan golongan darah dan
reaksi silang
PRAKTIKUM PEMERIKSAAN GOLONGAN DARAH CARA SLIDE
Prinsip : Memeriksa antigen pada sel eritrosit yang disebut Cell-Grouping atau memeriksa
antibodi didalam serum / plasma yang disebut Serum-Grouping.
Alat dan Bahan: 1. Antisera anti-A,anti-B,anti-AB, dan anti D.
2. Suspensi 10% sel uji A, B dan O
3. Larutan NaCl 0,9% (Saline)
4. Sampel darah resipien.
5. Kaca objek atau porselen putih
6. Pengaduk dan pipet Pasteur
PS. SKed
31
Prosedur : 1. Pada kaca objek / porselen teteskan secara terpisah 1 tetes antisera anti-
A, anti-B, anti-Ab, dan anti D.
2. Dengan pipet Pasteur teteskan kepada masing-masing antisera 1 tetes
suspensi 10% darah sampel.
3. Aduklah masing-masing campuran dengan ujung pengaduk yang berbeda,
sehingga campuran melingkar pipih berdiameter 2 cm.
4. Sambil menggoyang-goyangkan kaca objek perhatikan reaksi yang terjadi.
Bila belum tampak reaksi (negatip) diamati sampai 5 menit.
5. Reaksi disebut positip bila ada aglutinasi atau hemolisis, dan reaksi disebut
negatip bila tidak menunjukkan adanya aglutinasi atau hemolisis.
6. Sambil menggoyang-goyangkan kaca objek perhatikan reaksi yang terjadi.
Bila belum tampak reaksi (negatip) diamati sampai 5 menit.
7. Reaksi disebut positip bila ada aglutinasi atau hemolisis, dan reaksi disebut
negatip bila tidak menunjukkan adanya aglutinasi atau hemolisis.
Interpretasi Bila reaksi positip, harus dinilai dan dicatat derajad aglutinasinya sebagai berikut:
4+ : Semua sel darah tampah menggumpal menyatu, sehingga cairannya
tampak jernih.
3+ : Semua sel darah menggumpal tetapi tidak menyatu, disekitarnya tampak
cairan jernih.
2+ : Gumpalan agak kasar tetapi tidak semua sel darah beraglutinasi,
disekitarnya tampak cairan keruh.
1+ : Gumpalan-gumpalan halus dan lebih banyak sel-sel darah yang bebas,
disekitarnya tampak cairan keruh.
Auto-control (campuran serum dengan selnya sendiri) pada serum grouping baik
cara kaca objek maupun cara tabung dalam keadaan normal akan selalu negatip.
PRAKTIKUM PEMERIKSAAN REAKSI SILANG
Prinsip Reaksi silang mayor memeriksa ada tidaknya antibodi resipien yang dapat
merusak eritrosit donor pada pelaksanaan transfusi. Sedangkan reaksi silang
minor memeriksa ada tidaknya antibodi donor yang dapat merusak eritrosit
resipien.
PS. SKed
32
Alat dan Bahan: 1. Bovin albumin 22%
2. Reagen Coombs
3. Sel Eritrosit Uji Coombs
4. Lar. NaCl 0,9% (saline)
5. Sampel darah resipien
6. Sampel darah donor
7. Tabung reaksi ukuran 10/12 x 75 mm.
8. Rak tabung
9. Pipet Pasteur
10. Kaca objek
11. Inkubator
12. Centrifuge
13. Mikroskop
14. Pengukur waktu (Timer)
Prosedur: 1. Siapkan serum/plasma dan suspensi 5% eritrosit resipien dalam saline
2. Siapkan serum/plasma dan suspensi 5% eritrosit donor dalam saline.
3. Sediakan 2 tabung reaksi, beri tanda I untuk Mayor dan tanda II untuk
Minor.
4. Dengan pipet Pasteur teteskan 2 tetes serum resipien dan 1 tetes suspensi
5% eritrosit donor kedalam tabung I (Reaksi silang mayor).
5. Dengan pipet Pasteur teteskan 2 tetes serum/plasma donor dan 1 tetes
suspensi 5% eritrosit resipien kedalam tabung II (Reaksi silang minor).
6. Kocok kedua tabung agar isinya tercampur rata.
7. Putar kedua tabung 3000 rpm selama 15 detik atau 1000 rpm selama 1
menit
8. Amatilah reaksi pada kedua tabung secara makroskopik, apakah ada reaksi
aglutinasi atau hemolisis.
9. Bila ada reaksi aglutinasi atau hemolisis, berarti darah donor dan resipien
inkompatibel (tidak cocok).
PS. SKed
33
10. Bila tidak ada reaksi aglutinasi atau hemolisis, kedalam kedua tabung
tambahkan 2 tetes Bovine albumin 22%, kocoklah agar isinya tercampur
rata.
11. Inkubasi kedua tabung pada suhu 370 C selama 15 menit. Kemudian
putarlah kedua tabung 3400 rpm selama 15 detik atau 1000 rpm selama 1
menit.
12. Amatilah reaksi pada kedua tabung secara makroskopik.
13. Bila tidak ada aglutinasi atau hemolisis, cucilah eritrosit dalam kedua
tabung denga saline 3 kali.
14. Tiap kali pencucian, supernatan dibuang sebanyak-banyaknya derngan
jalan membalik tabung.
15. Tambahkan 2 tetes serum Coombs pada sedimen eritrosit dalam masing-
masing kedua tabung, kocoklah kemudian kedua tabung diputar 3000 rpm
selama 15 detik atau 1000 rpm selama 1 menit.
Interpretasi: Amatilah secara makroskopik apakah ada reaksi aglutinasi.
1. Bila aglutinasi tidak jelas terlihat, tuangkan isi tabung pada kaca objek dan
lihatlah dibawah mikroskop.
2. Bila tampak aglutinasi berarti darah donor dengan resipien inkompatibel
PS. SKed
34
LAPORAN HASIL PRAKTIKUM
Hari, Tanggal : ……………………………………………………..
Hasil pemeriksaan golongan darah :
Hasil pemeriksaan reaksi silang :
Kesimpulan :
Dosen Pembimbing Mahasiswa
________________________ _______________________
PS. SKed
35
DAFTAR PUSTAKA
1. ABX Micros 60 Hematology Analyzer. User Manual Procedure. 2015.
2. McPherson & Pincus. Henry's Clinical Diagnosis and Management by
Laboratory Methods, 21st ed. W.B. Saunders Company. 2006.
3. Gandasoebrata, R. Penuntun Laboratorium Klinik. Dian Rakyat. Jakarta.
1984
4. Standarisasi Umum Usaha Transfusi Darah Palang Merah Indonesia, 1990
5. Manual DiaMed-ID Micro Typing System.
6. Technical Manual of the American Association of Blood Banks, 8Ed .
Washington DC. 1981.
7. Rowley M, Milkins C , 2006 Laboratory aspects of blood transfusion, in
Lewis SM, Bain BJ, Bates I Edit. : Dacie and Lewis Practical Hematology, 10
th Ed, Churchill Livingstone, Philadelphia.