BQ. María Cristina MartínezSección Microbiología de Alimentos y Aguas

Subdepartamento de Alimentos y Nutrición

Detección de Vibrio cholerae en muestras ambientales. Rol del Departamento Salud Ambiental.

Es el laboratorio nacional y de referencia en los campos de la microbiología, inmunología, bromatología, farmacología, imagenología, radioterapia, bancos de sangre, laboratorio clínico, contaminación ambiental y salud ocupacional. Como Institución pública, también realiza funciones de control, supervisión, e investigación.

(Ley de Autoridad Sanitaria Nº 19.937, Art. 35)

INSTITUTO DE SALUD PÚBLICA DE CHILE

INSTITUTO DE SALUD PÚBLICA DE CHILE

Departamento Control Nacional

Departamento Laboratorio Biomédico Nacional

Departamento de Salud Ambiental

Departamento Salud Ocupacional

Departamento Administración y Finanzas

Realizar análisis químicos, microbiológicos, toxicológicos y otros de muestras de alimentos, aguas y otras sustancias, así como de elementos contaminantes.

DEPARTAMENTO SALUD AMBIENTAL

Efectuar investigación aplicada en técnicas relativas a las materias de su competencia, para su perfeccionamiento y difusión.

Realizar actividades de apoyo a la vigilancia epidemiológica y a programas ministeriales

DEPARTAMENTO SALUD AMBIENTAL

Referencia, normalizador y supervisor de la Red de Laboratorios de Salud Pública reconocidos, públicos y privados, en materia de alimentos y medio ambiente.

DEPARTAMENTO SALUD AMBIENTAL

JEFATURA DEPTOSALUD AMBIENTAL

Coordinador de Gestión

Coordinador de Calidad

U. de Plaguicidas y Desinfectantes

SecretariaU. Fiscalización de Lab. Ambientales

U. Coordinación de Lab. Ambientales

Subdepto. Producción

Subdepto. Alimentos y

Nutrición

Subdepto. Metrología y Desarrollo Tecnológico

Subdepto. del Ambiente

Sección Aguas

Secc. Química de Alimentos y Nutrición

Secc. Microbiología de Alimentos

Secc. Metrología de Ambiente y Alimentos

Secc. Química Ambiental

Sección CPAL Secc.

Biotecnología

Dpto. Salud Ambiental

• Actualización de métodos para la detección de microorganismos patógenos e indicadores de higiene en alimentos y aguas.

• Transferencia tecnológica a la red pública de laboratorios ambientales

SECCION MICROBIOLOGÍA ALIMENTOS Y AGUAS

Arica Arica

Iquique Iquique

Antofagasta Antofagasta

Atacama Copiapó

Coquimbo Coquimbo

Metropolitana Santiago

Valparaíso Valparaíso, Viña del Mar, San Felipe

O´Higgins Rancagua

Maule Talca

Bio Bio Concepción, Chillán , Los Angeles

Araucanía Temuco

Los Ríos Valdivia

Los Lagos Puerto Montt, Osorno

Aysen Aysen

Magallanes Punta Arenas

TOTAL 20

Red pública de Laboratorios del Ambiente

VIGILANCIA AMBIENTAL

RED DE LABORATORIOS PUBLICOS

• De los 20 laboratorios, 19 tienen implementado el método de detección de Vibrio cholerae, 13 realizan análisis de muestras para la vigilancia de cólera en forma rutinaria.

• En promedio tienen una capacidad analítica de 3-5 muestras semanales.

• Se encuentran en distintas etapas de implementación de la NCh 17025

• De acuerdo al Plan nacional de preparación para un eventual brote de cólera, se destinaron recursos para la compra de insumo y equipamiento, con el objeto de retomar la vigilancia ambiental de cólera en todos los laboratorios.

VIGILANCIA AMBIENTALMETODOS DE ANALISIS DE Vibrio cholerae

1. Aguas Servidas (altamente contaminadas):

Detección de Vibrio cholerae por Tórula de Moore

2.- Aguas Claras sin mayor turbiedad o sedimentos (agua de mar, agua de riego, agua consumo humano)

Método de Filtración por Membrana

3.- Alimentos (moluscos bivalvos, verduras):

Detección de Vibrio cholerae en 25 g

Referencias: CDC; BAM FDA; Standard Methods

http://www.ispch.cl/

Exposición 24-48 horas

Muestras Agua Servida

Altamente contaminada

TRASLADO < 6 HORAS AL LABORATORIO

Enriquecimiento

Agua Peptonada Alcalina

(ph 8.5)

METODO TORULA MOORE

crítico

Filtrar por 0.22-0.45

200-300 ml

Muestras agua sin mayor turbiedad o sedimento

TRASLADO < 6 HORAS AL LABORATORIO

Enriquecimiento

Agua Peptonada Alcalina (ph 8.5)

METODO FILTRACION POR MEMBRANA

crítico

Enriquecimiento

Agua Peptonada Alcalina (ph 8.5)

25 g alimentos, moluscos, verduras

TRASLADO < 24 HORAS AL LABORATORIO

DETECCION EN ALIMENTOS

PROCESO ANALÍTICO

(-)(+)

(-)(+)

EnriquecimientoAgua Peptonada Alcalina (ph 8.5)

6-8 HORAS

AISLAMIENTO AGAR SELECTIVO TCBSColonias amarillas con bordes lisos, 2-3 mm

ligeramente aplanadas en el centro

PRUEBAS BIOQUIMICASAusencia

Vibrio cholerae

Serología

Vibrio cholerae NO O1

PresuntivoVibrio cholerae O1

Envío laboratorio de referencia

crítico

AISLAMIENTO DE TORULA MOORE

VIGILANCIA AMBIENTAL COLERA RM-2010

TIPO MUESTRA CANT.

Torula Moore: Planta tratamiento aguas aeropuerto AMB 14

Torula Moore: La Farfana 4

Tórula Moore: El Trebal 4

Canales de regadío (10) 20

Mariscos terminal pesquero 110

Hortalizas predios agrícolas 23

TOTAL 175

Fuente: SEREMI Salud Región Metropolitana

Resultados: Ausencia Vibrio cholerae O1

VIGILANCIA AMBIENTAL

BASE DE DATOS COLERA

Se creó base de datos on line para ingreso de muestras y resultados del monitoreo ambiental, que realicen los Laboratorios Ambientales de las SEREMIs de Salud.

OBJETIVO: Estandarizar la información de puntos de muestreo y resultados de análisis a nivel nacional y regional.

DESARROLLO TECNOLOGICO

METODOS DE DETECCION MOLECULARES

1. Agua: Implementación Método FDA, NMP en aguas concentradas para Detección de gen toxigénico de Vibrio cholerae en los tubos del enriquecido, directamente.

2.- Moluscos bivalvos: BAX Vibrio (qPCR tiempo real). Muestreo de 5 muestras 2 veces al mes, desde Diciembre 2010 a Marzo 2011, para detección de Vibrio cholerae, (Puerto Montt).

COMENTARIO FINAL

El desafío propuesto es coordinar esfuerzos para establecer una red de laboratorios públicos y privados que permita compartir conocimiento y tecnología y enfrentar, de manera conjunta, eventuales emergencias sanitarias en nuestro país.

GRACIAS

mmartinez@ispch.cl