Asistensi Pewarnaan Gram BTA
-
Upload
pendidikan-dokter-uns-2009 -
Category
Documents
-
view
262 -
download
0
Transcript of Asistensi Pewarnaan Gram BTA
8/9/2019 Asistensi Pewarnaan Gram BTA
http://slidepdf.com/reader/full/asistensi-pewarnaan-gram-bta 1/26
TATA TERTIB
1. Mendaftarkan diri untuk mendapatkan kartupraktikum
2. Kartu selalu dibawa tiap praktikum dan responsi
3. Menulis rencana kerja praktikum pada buku BRK,dikumpul sebelum praktikum dimulai
BRK disampul seragam tiap kelompok
4. Datang tepat waktu
5. Tertib didalam laboratorium, bicara seperlunya
6. Meja praktikum ditinggalkan dalam keadaan bersihdan rapi
7. Laporan praktikum dikumpulkan paling lambat 3(tiga) hari setelah praktikum
8/9/2019 Asistensi Pewarnaan Gram BTA
http://slidepdf.com/reader/full/asistensi-pewarnaan-gram-bta 2/26
PERLENGKAPAN
TIAP MAHASISWA :
Jas paraktikum
Sandal jepit baru
bernama Buku Rencana Kerja
Pensil Warna
Masker
Sarung tangan
TIAP KELOMPOK :
Pena marker
Selotip bening
Korek api Pinset
Label/stiker nama
Tissue gulung
Dimasukkan dalambox alat
8/9/2019 Asistensi Pewarnaan Gram BTA
http://slidepdf.com/reader/full/asistensi-pewarnaan-gram-bta 3/26
PEWARNAAN
KUMAN
LAB. MIKROBIOLOGI
F. KEDOKTERAN UNS
8/9/2019 Asistensi Pewarnaan Gram BTA
http://slidepdf.com/reader/full/asistensi-pewarnaan-gram-bta 4/26
PEWARNAAN
Mikroorganisme dapat dilihat dengan alat
bantu : MIKROSKOP
Teknik pewarnaan mikroorganisme dilakukan
untuk membantu mempelajari MORFOLOGI
mikroorganisme berbeda dengan latar
belakang/artefak/benda-benda sekelilingnya
8/9/2019 Asistensi Pewarnaan Gram BTA
http://slidepdf.com/reader/full/asistensi-pewarnaan-gram-bta 5/26
FIKSASI
Adalah upaya melekatkan spesimen pada
gelas obyek agar tidak lepas saat proses
pewarnaan
Metode :
Fisis Pemanasan
Kimiawi
Methyl alkohol (metanol)
8/9/2019 Asistensi Pewarnaan Gram BTA
http://slidepdf.com/reader/full/asistensi-pewarnaan-gram-bta 6/26
SPESIMEN/SAMPEL
Cair/Larutan Langsung dibuat preparat
Padat dilarutkan dulu baru dibuat
preparat
Apusan yang baik :
Tipis
Rata
8/9/2019 Asistensi Pewarnaan Gram BTA
http://slidepdf.com/reader/full/asistensi-pewarnaan-gram-bta 7/26
PEWARNAAN SEDERHANA
Menggunakan satu zat warna
Warna bakteri & sekitarnya sama
Warna bakteri lebih dens/jelas Dapat digunakan untuk melihat
MORFOLOGI kuman
Macam : Safranin, Fuchsin basis,
Kristal Violet, Methylen Blue
8/9/2019 Asistensi Pewarnaan Gram BTA
http://slidepdf.com/reader/full/asistensi-pewarnaan-gram-bta 8/26
PRAKTIKUM
Tujuan : Melihat morfologi kuman dengan satu macam
pewarna
Dasar : Dengan pewarnaan kuman terlihat lebih jelas
dibanding sekitarnya
Cara kerja :
8/9/2019 Asistensi Pewarnaan Gram BTA
http://slidepdf.com/reader/full/asistensi-pewarnaan-gram-bta 9/26
HASIL PEWARNAAN
Safranin
Fuchsin
Methylen Blue
Kristal violet
8/9/2019 Asistensi Pewarnaan Gram BTA
http://slidepdf.com/reader/full/asistensi-pewarnaan-gram-bta 10/26
PEWARNAAN GRAM
Menggunakan dua macam pewarna
Menggunakan peluntur diantara dua zat pewarna tsb
Dapat digunakan untuk membedakan struktur dinding
sel bakteri menurut reaksi pewarnaan Bakteri yang tahan terhadap peluntur akan menyerap
pewarna pertama Reaksi +
Bakteri yang tidak tahan terhadap peluntur akanmenyerap pewarna kedua Reaksi -
8/9/2019 Asistensi Pewarnaan Gram BTA
http://slidepdf.com/reader/full/asistensi-pewarnaan-gram-bta 11/26
GRAM
Pewarna Pertama : Kristal violet (A)
Intensifier : Kalium Yodida (B)
Peluntur : Alkohol (C)
Pewarna Kedua : Safranin (D)
8/9/2019 Asistensi Pewarnaan Gram BTA
http://slidepdf.com/reader/full/asistensi-pewarnaan-gram-bta 12/26
DINDING BAKTERI
GRAM POSITIF
Lapisan peptidoglikan
tebal
Tanpa selaput Luar
Membr sitoplasma
Sitoplasma
GRAM NEGATIF
Lapisan peptidoglikan
tipis
Mempunyai selaputluar
Membr sitoplasma
Sitoplasma
8/9/2019 Asistensi Pewarnaan Gram BTA
http://slidepdf.com/reader/full/asistensi-pewarnaan-gram-bta 13/26
PRAKTIKUM
Tujuan : Membedakan bakteri Gram + dan Gram -
Dasar : Gram + mempertahankan pewarna I,
Gram ± Tidak dapat mempertahankan
pewarna I, luntur oleh alkohol, shg
menyerap pewarna II Cara kerja :
8/9/2019 Asistensi Pewarnaan Gram BTA
http://slidepdf.com/reader/full/asistensi-pewarnaan-gram-bta 14/26
HASIL PEWARNAAN
Clostridium tetani Escherechia coli
Gafkyia Nisseria gonococcus
8/9/2019 Asistensi Pewarnaan Gram BTA
http://slidepdf.com/reader/full/asistensi-pewarnaan-gram-bta 15/26
PEWARNAAN TAHAN ASAM
PRINSIP PEWARNAAN = PEWARNAAN MAJEMUK
Dinding sel bakteri tahan asam mengandung lipidtinggi sukar diwarnai
Mewarnai bakteri tahan asam
menghilangkanlapisan lipid pada dinding sel : pemanasan (ZN),deterjen (KG)
Macam : Ziehl Nielsen, Kinjoun, Kinjoun Gabbet,Tan Thiam Hok dll
8/9/2019 Asistensi Pewarnaan Gram BTA
http://slidepdf.com/reader/full/asistensi-pewarnaan-gram-bta 16/26
ZIEHL NIELSEN
Pewarna pertama : Fuchsin basis
Peluntur : Alkohol dan
HCl
Pewarna kedua : Methylen Blue
Menghilangkan lipid : pemanasan
8/9/2019 Asistensi Pewarnaan Gram BTA
http://slidepdf.com/reader/full/asistensi-pewarnaan-gram-bta 17/26
PRAKTIKUM
Tujuan : Membedakan bakteri tahan asam & tidak
tahan asam
Dasar : Bakteri tahan asam sukar diwarnai, namun
bila telah menyerap pewarna akan sukar
dilunturkan sekalipun dengan asam kuat Cara kerja :
8/9/2019 Asistensi Pewarnaan Gram BTA
http://slidepdf.com/reader/full/asistensi-pewarnaan-gram-bta 18/26
HASIL PEWARNAAN
BTA + BTA -
8/9/2019 Asistensi Pewarnaan Gram BTA
http://slidepdf.com/reader/full/asistensi-pewarnaan-gram-bta 19/26
PEWARNAAN KHUSUS
Digunakan untuk melihat organella accessories
(tambahan) Spora, Flagel, Kapsul, Granula
Organella tambahan Sukar diwarnai Spora : struktur kompleks berlapis-lapis sukar
ditembus zat warna
Kapsula : polisakarida yang tidak menyerap zat warna
Granula : polimer fosfat, tidak nampak dg pewarnaan
biasa
Flagel :sangat rapuh, mudah tanggal pada proses
pewarnaan
8/9/2019 Asistensi Pewarnaan Gram BTA
http://slidepdf.com/reader/full/asistensi-pewarnaan-gram-bta 20/26
METODE PEWARNAAN
KAPSULA : Burri, Hiss, Gins, Flu, Muis,
Raebiger
SPORA : Klein Vedder, Sceffer Fulton,Darner
FLAGELLA : Gray
GRANULA : Neisser
8/9/2019 Asistensi Pewarnaan Gram BTA
http://slidepdf.com/reader/full/asistensi-pewarnaan-gram-bta 21/26
PEWARNAAN KAPSULA
Metode yang digunakan : Burri
Menggunakan kombinasi pewarnaan negatif
dan pewarnaan sederhana
Latar belakang dibuat gelap (pewarnaan
negatif), kuman dicat methylen blue
(pewarnaan sederhana) Kapsul terlihat
sebagai µhallo¶ disekitar masa biru (kuman)
8/9/2019 Asistensi Pewarnaan Gram BTA
http://slidepdf.com/reader/full/asistensi-pewarnaan-gram-bta 22/26
PRAKTIKUM
Tujuan : melihat kapsul bakteri dengan kombinasi
negatif sataining & simple staining
Dasar : Kapsula bakteri tidak menyerap zat warna,
kapsula dapat dilihat dengan menggelapkan
medan penglihatan, kapsul nampak sebagaihallo yang mengelilingi kuman.
Cara kerja :
8/9/2019 Asistensi Pewarnaan Gram BTA
http://slidepdf.com/reader/full/asistensi-pewarnaan-gram-bta 23/26
HASIL PEWARNAAN
Diplococcus pneumoniae
Pewarnaan Gram Pewarnaan Burri
8/9/2019 Asistensi Pewarnaan Gram BTA
http://slidepdf.com/reader/full/asistensi-pewarnaan-gram-bta 24/26
PEWARNAAN SPORA
Metode yang digunakan : Klein Vedder
Menggunakan prinsip pemanasan dan pewarnaanmajemuk tahan asam
Pemanasan membengkakkan dan memecah sporashg pewarna dapat masuk dalam spora
Setelah spora terwarnai, tidak mudah dilunturkanwalau dengan asam kuat sekalipun
Spora mengikat warna I
Tubuh bakteri mengikat warna II
8/9/2019 Asistensi Pewarnaan Gram BTA
http://slidepdf.com/reader/full/asistensi-pewarnaan-gram-bta 25/26
PRAKTIKUM
Tujuan :Melihat bentuk dan letak spora bakteri.
Dasar : Spora dapat menyerap zat warna setelah
dipanaskan, spora mempertahankan warna
dengan kuat terhadap peluntur asam, badan
kuman tidak tahan terhadap peluntur asam
Cara kerja :
8/9/2019 Asistensi Pewarnaan Gram BTA
http://slidepdf.com/reader/full/asistensi-pewarnaan-gram-bta 26/26
HASIL PEWARNAAN
Clostridium sp
SPORA
TUBUH
KUMAN
Pewarnaan Gram Pewarnaan Klein Vedder