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“Identificación morfológica y molecular de aletas de tiburón en el comercio de Chile,
Costa Rica y Perú”
Sebastián Hernández
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Pesquerías de tiburones a nivel global
Stevens et al. 2000
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Pesquerías de tiburones a nivel global
Davidson et al. 2015
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Isurus oxyrhinchus
Xiphias gladius
Paci
fic O
cean
EEZ
Pesquería de tiburones en Chile
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Paci
fic O
cean
Xiphias gladius
EEZ
Pesquería de tiburones en Chile
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Caldera Coquimbo
aletas troncos
Pesquería y comercialización
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Regulación del finning
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Fiscalización - SERNAPESCA
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Isurus oxyrhinchus Alopias vulpinus
Lanma nasus Sphyrna zygaena
Prionace glauca Alopias superciliosus
Especies de tiburones capturados
Lamilla et al. 2005
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Isurus oxyrhinchus
Prionace glauca
Alopias vulpinus Fins
XTrunks
Registros de desembarque
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Isurus oxyrhinchus
Prionace glauca
Alopias vulpinus Aletas
X
Registros de desembarque
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ALETAS TRONCOS
FILETESMEDALLONES
Productos exportados derivados de tiburones
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0
20
40
60
80
100
120
1997 1998 1999 2000 2001 2002 2003 2004 2005
Year
Tonn
es
107 106
34
Variación exportaciones de aletas
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10050
Total (608.174 tonnes)
China (415.813 tonnes)
Hong Kong (96.708 tonnes)
Spain
Singapore
Indonesia
Other countries
Percentages in weight
Importadores de aletas desde Chile
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“Tollo”
Mustelus mento
Squalus acanthias
Mustelus whitneyi
Galeorhinus galeus
Registros de desembarque y exportaciones agrupa algunas especies dentro de una misma categorías - no especies biológicas
Bases de datos con registros no especificados a nivel de especies
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Lamnidae AlopiidaeL. nasus
A. superciliosus
A. vulpinus
Es dificultoso identificar las especies de aletas
I. oxyrhinchus
L. nasus
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La composicion de especies de tiburones comercializados es desconocida
¿Cuales son las especies de tiburones comercializadas en Chile?
Se necesitan herramientas que nos permitan identificar especies a partir de una aleta:
Marcadores Moleculares
Morfometría
Análisis Digital de Imágenes
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1) Identificar las especies de tiburones que son comercializados como aletas en la zona centro-norte, a partir de marcadores moleculares especie-específicos
2) Determinar la relación entre el nombre del mercado y la identidad genética de la especie, a partir de las aletas
3) Evaluar la capacidad de los comerciantes para reconocer aletas, mediante la apariencia de éstas
Manuscrito I
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Secaderos Quebrada seca
Calibre
Proceso de secado de las aletas
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Tipo de aleta
Secaderos Quebrada seca
Proceso de secado de las aletas
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Especie
Secaderos Quebrada seca
Proceso de secado de las aletas
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Proceso de secado de las aletas
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Proceso de secado de las aletas
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Almacenaje de aletas
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Secadero “Panul” Secadero “Placilla”
652 muestras de aletas secas
Colección de muestras de las aletas
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Extracción de ADN y Reacción en cadena de la polimerasa
Primers species-specific
5´-AGAAGTGGAGCGACTGTCTTCGCC-3´
5´-AGGTGCCTGTAGTGCTGGTAGACACA-3´
5´-GTCGTCGGCGCCAGCCTTCTAAC-3´
5´-AGTGCTTGACCATTCGGTGTGCGT-3´
DNA?ITS2
nuclear DNA sequence
Kit Qiagen Inc. T
3-4 hrs.
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ITS2
TTCGCCAAGCGG
Fish5.8SF
ATACGCCTATGCGG
TGCGATCACGCTAG
Fish28SR
5´-AGAAGTGGAGCGACTGTCTTCGCC-3´
Amplicón diagnóstico 929 pb
Amplicón diagnóstico 1350 pb
Diseño partidores especie-específicos
5.8SADNr
28SADNr
Marcadores Moleculares
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ITS2
TTCGCCAAGCGG
Fish5.8SF
ATACGCCTATGCGG
TGCGATCACGCTAG
Fish28SR
5´-AGAAGTGGAGCGACTGTCTTCGCC-3´
Amplicón diagnóstico 929 pb
Amplicón diagnóstico 1350 pb
Diseño partidores especie-específicos
5.8SADNr
28SADNr
Marcadores Moleculares
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GACACACTGTGT
ITS2
Fish5.8SF
ATACGCCTATGCGG
TGCGATCACGCTAG
Fish28SR
Amplicón diagnóstico 771 pb
Amplicón diagnóstico 1350 pb
5.8SADNr
28SADNr
Diseño partidores especie-específicos
5´-AGGTGCCTGTAGTGCTGGTAGACACA-3´
Marcadores Moleculares
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TCTAACAGATTG
ITS2
Fish5.8SF
ATACGCCTATGCGG
TGCGATCACGCTAG
Fish28SR
Amplicón diagnóstico 556 pb
Amplicón diagnóstico 1350 pb
5.8SADNr
28SADNr
Diseño partidores especie-específicos
5´-GTCGTCGGCGCCAGCCTTCTAAC-3´
Marcadores Moleculares
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M M1 2 43 65 7 98 N
929 pb771 pb
1000 pb
554 pb
Especies de tiburones pelágicos comercializadas en Chile
Resultados
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89.3%
13.6%
1.7%
I. oxyrhinchus
L. nasus
P. glauca
A. superciliosus
0.2%
Proporción de especies (secaderos)
Especies no identificadas
N = 652
Resultados
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Bodegas: “Caldera” and “Paico”
Un total de 252 aletas secas fueron muestreadas
Objetivo 2.- Determinar la relación entre el nombre de la aleta identificada por el comerciante y la especies
Paci
fic O
cean
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Bodega “Caldera”
Nombre del mercado Identificación genética
Azulejo (N = 50) P. glauca (100%)
Tiburón (N = 50) I. oxyrinchus (94%)
L. nasus (6%)
Tintorera (N = 50) L. nasus (98%I. oxyrinchus (2%)
Cola de zorro (N = 4) A. superciliosus (100%)
Tollo amarillo (N = 1) no identificado
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Nombre mercado Identificación genéticaMartillo (N = 22) S. zygaena (86%)
no identificado (14%)
Carcharhinus (N = 25) G. galeus (56%)
S. zygaena (20%)
Carcharhinido (12%)
C. obscurus (8%)
I. paucus (4%)
Cola de zorro (N = 5) A. superciliosus (100%)
No clasificada A (N = 22) A. vulpinus (100%)
No clasificada B (N = 22) S. zygaena (41%)
G. galeus (56%)
S. lewini (14%)
Carcharhinido (13%)
Bodega “Paico”
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Objetivo 3: Evaluar la capacidad de los comerciantes para reconocer aletas
9 comerciantes y/o exportadores
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Resultados bodega “Caldera”
I. oxyrinchus
L. nasus
Resultados
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I. oxyrinchus
L. nasus
Resultados bodega “Caldera”
Resultados
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A. superciliosus
A. vulpinus
S. lewini
S. zygaena
G. galeus
P. glauca
C. obscurus
I. oxyrinchus
I. paucus
L. nasus
Comercio de aletas de tiburón en Chile Conclusión
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Concordancia entre el nombre en el mercado -especie
Tiburón (I. oxyrinchus)
Azulejo (P. glauca)
Tintorera (L. nasus)
Cola de zorro (A. superciliosus)
Martillo (S. zygaena)
Monitoreo del volumen del comercio
Aproximaciones razonables a los desembarques
Conclusión
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Evaluar la utilidad de métodos diagnósticos morfométricos y morfológicos (color y forma), para la discriminación aletas
Manuscrito II & III
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Análisis morfométrico
D1A
D1PD1H
D1L
D1I
D1B
P1A
P1P
P1H
P1I
P1B
CDM CTR
CST
CTL
CPUCFL
CPLCPV
CFW
Bodega “Paico”
Análisis morfométrico
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Objetivo: Reducir muchas variables a un número más pequeño de variables que resumen la información de las variables originales(pueden ser usados para posteriores análisis)
Análisis multivariado (PCA)
P1A
P1P
P1H
P1I
P1B
Análisis morfométrico
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Aletas húmedas
P < 0.0001
Resultados análisis discriminante (PCA)
P < 0.0001
Aletas secas
Análisis morfométrico
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Análisis de imagen
Bodega “Paico”
Análisis digital imagen
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Técnica de correlación digital invariante
Análisis digital imagen
posición escala rotación
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imagen problema filtro compuesto especie-específico
Patrón de difracción
Técnica de correlación digital invariante
Análisis digital imagen
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imagen problema filtro compuesto especie-específico
Análisis digital imagen
Técnica de correlación digital invariante
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OSPPG: outer side pectoral P. glauca
imagen problema filtro compuesto especie-específico
+
Análisis de imagenAnálisis digital imagen
Resultados
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OSPPG: outer side pectoral I. oxyrhinchus
imagen problema filtro compuesto especie-específico
+
Análisis de imagenAnálisis digital imagen
Resultados
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OSPPG: outer side pectoral L. nasus
Resultados
imagen problema filtro compuesto especie-específico
+
Análisis de imagenAnálisis digital imagen
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P. glauca I. oxyrinchus L. nasus
análisis de imagen
Sinergia de ambas metodologías
análisis genético
Identificación de especies
Conclusión
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P. glauca I. oxyrinchus L. nasus
análisis de imagen
Sinergia de ambas metodologías
análisis genético
Identificación de especies
Conclusión
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P. glaucaI. oxyrinchus L. nasus
análisis de imagen
Sinergia de ambas metodologías
análisis genético
Identificación de especies
Conclusión
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Taller interinstitucional IV (Junio 2014):
1 ONG2 academias10 instituciones gubernamentales(~ 25 personas)
Identificación morfológica y molecular de especies de tiburones
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1 2
3 4
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Decomiso de aletas UPS – Aeropuerto Juan Santamaría(Noviembre 2014)
Saco de 40 kilos, solo se revisaron 3 sacos
- 230 aletas pectorales de tiburón sedoso(Carcharhinus falciformis)
- 6 aletas pectorales de tiburón martillo (Sphyrna sygaena)
- 4 aletas pectorales de tiburón punta blanca oceánico (Carcharhinus longimanus)
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Decomiso de aletas UPS – Aeropuerto Juan Santamaría
Punta blanca oceánico (Carcharhinus longimanus)
(Noviembre 2014)
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ITS2
Fish5.8SF
Fish28SR
Amplicón diagnóstico 782 pb
Amplicón diagnóstico 1350 pb
5.8SADNr
28SADNr
S. mokarram
Amplicón diagnóstico 445 pb
S. lewini S. zygaena
Amplicón diagnóstico 249 pb
Partidores especie-especificos para identificar tiburones martillo y threshers
DNA?
Marcadores Moleculares
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Nombre del mercado Morfological identification Genetic ID
1th sac labelled “Blue” Prionace glauca ---------
2th sac labelled “Thesher” Alopias pelagicus ---------
3th sac “Unlabelled” Sphyrna zygaena S. zygaena
Carcharhinus limbatus ---------
C. longimanus ---------
Decomiso de aletas UPS – Aeropuerto Juan Santamaría
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1) El 24 de Diciembre del 2014, Costa Rica exportó 411 kilos de aletas de tiburón martillo
2) El 20 de Febrero Costa Rica exportó 490 kilos más de aletas de tiburón martillo
No se cumplen regulaciones internacionales CITES!!!!!!!!!!!!
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Worshop of Shark Biology – Universidad Científica
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Desembarque de tiburones en Pucusana
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Identificación morfológica de especies de tiburones
Diamante = Isurus oxyrhinchus
Perú
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Identificación morfológica de especies de tiburones
Zorro = Alopias pelagicus
Perú
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Identificación morfológica de especies de tiburones
Sedoso = Carcharhinus falsciformis
Perú
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Identificación morfológica de especies de tiburonesPerú
Azul = Prionace glauca
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Identificación morfológica de especies de tiburones
Martillo = Sphyrna lewini?
& S. zygaena
Perú
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Identificación morfológica de especies de tiburones
Mantequero = Carcharhinusbrachyurus
Perú
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Sebastián Hernández
“Identificación morfológica y molecular de aletas de tiburón en el comercio de Chile,
Costa Rica y Perú”
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Establecer la fiscalización visual de la ID de las aletas
(comercializadas/exportadas)
Guía de identi f i cación de las aletas (CITES I I )
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Terminología de las aletas de tiburón
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Paso 1: Encontrar la primera aleta dorsal
¿Es la aleta del mismo color en ambos lados?
SI…….Posible aleta dorsalNo…….Aleta pectoral
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¿Existe una fila de cartílago en la base, con cada pieza de cartílago cercanos al adjacente?
Si……. = aleta dorsal (es muy probable que se observe el borde libre de la dorsal)
No…….Solo material esponjoso, En algunos casos se observa partes de cartílago= lóbulo inferior aleta caudal
Paso 1 : Encontrar la primera aleta dorsal
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Sardinero, tintorera, porbeagle - Lamna nasus
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Perro, punta blanca oceánico - Carcharhinus longimanus
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Primera aleta dorsal del tiburón martillo son altas!!!!!!
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Cornuda cruz(Sphyrna zygaena)
Cachuda, Cornuda, Martillo – Sphyrna zygaena
Los aletas dorsales de los tiburones martillos son largas en altura(en proporción más largas que anchas < 2.5). Coloración gris y/ocafé con base delgada con filas de pequeñas piezas de cartílago.
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Hammerhead sharks (3 large species, all CITES App II)
Key Feature: High aspect ratio (i.e., fin is tall and narrow)Fin is light grey or brown, without other markings
Fin base is narrow and has row of small, oval car
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Diamante, maco, marrajo – Isurus oxyrhinchus
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El tiburón cola de zorro (Alopias) tieneuna base delgada de la aleta dorsal,donde las piezas de cartílago son deforma irregular.
Otras aletas “alta” (en proporción más largas que anchas < 2.5) son gris oscuras con una base delgada
Tiburón zorro(Alopias superciliosus)
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El tiburón cola de zorro (Alopias) tieneuna base delgada de la aleta dorsal,donde las piezas de cartílago son deforma irregular.
Comparación morfologia externa entre aleta fresca y humedade la primera dorsal del un ejemplar de Alopias pelacicus
A. pelagicus A. pelagicus
Aleta fresca Aleta seca
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Comparación corte basal del lóbulo inferior de la aleta caudal fresca y húmeda de Alopias pelagicus
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Aletas de Zorros fresca: Alopias pelagicus
A. pelagicus
Vi sta dorsal
Vi sta ventral
Vi sta t l
Vi sta dorsal
Alopias spp.
Alopias spp.
Vi sta dorsal
Vi sta ventral
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Aletas pectorales secas de Alopias superciliosus
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Aletas pectorales húmedas de Alopias vulpinus
Vista dorsal
Vi sta dorsal
Vi sta ventral
Vi sta ventral
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Guía de identificacíon de los apéndicesprebranquiales (placas de las branquias)
de especies de Móbulas para la aplicaciónde medidas para el comercio (CITES II)
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Las Mantarayas son especies relativamente cercanasa las Móbulas. De éstas últimas se han identificado 9 especies en la actualidad, las cuales pertenecen a la familia Mobulidae y son conocidas como “Móbulas”.
Oceanic Manta Ray – Manta birostris
El género Manta inclute especies tales como la manta oceánica (Manta birostris) y la manta de arrecife (Manta alfredi). Estas especies fueronincluidas en el Apéndice II en la 16th Conferencia de las Partes de la Convención Internacional del Comercio de Especies en Peligro de Extinciónde la Fauna y Flora (CITES).
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IUCN Classification:
Vulnerable global ly
Manta oceánica (Manta birostris)
Manta de arrecife (Manta alfredi)
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Apéndices PrebranquialesTodas las especies de Móbulas son filtradores, los cuales utilizan su bocay sus modificados filamentos branquiales para succionar y retener elplancton y peces pequeños. Cada individuo tiene 5 pares de hendidurasbranquiales, las cuáles estan internamente sostenidas por un placabranquial formadar por filamentos branquiales conocidos como apéndicesprebranquiales, los cuales retienen el alimento.
Hendiduras branquiales Apéndi ces prebranquiales que rodean lashendiduras branquiales internamente en la boca
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Pesquería de Móbulas y Mantas
Las placas branquiales de lasMantas y Móbulas son usadas en elMercado Asiático con finesdemanda de estos productos haincremedo las pesquerías de estasespecies.
Cuando las placas branquiales sonremovidas de los individuoscapturados. Los pescadores cortanpor la mitad las placas y éstas sonsecadas para posteriormente sercomercial i zadas.
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Características morfológicasEn general, las Mobulas son mas pequeñas que las Mantas y pueden ser identificadas
por sus diferencias morfológicas de su boca.
MANTA: Boca posición terminal MOBULA:
Boca ventral
SI NO
La boca, esta distribuida en
posición terminal?
Las Mobulas tiene la mandíbula inferior (cartílago de Meckel) en forma de una línea la cual se ubicamuy cerca al borde de la mandíbula inferior, de esta manera cuando la boca esta cerrada, los bordesde la mandíbula inferior se encuentran más atrás que ventral (como es el caso de las Mantas(terminal).
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Identificación de las placas branquiales
Hay tres caractéres importantes que pueden serutilizados rápidamente para identificar cada tipo deplaca branquial:
- Tamaño placa branquial- Color placa branquial- Bordes de los filamentos branquial
30cm regla
1. Tamaño: medición de la longitud total de la placa branquialcomercializada
2. Color: bi-color (abajo) o uniforme (arriba)
30cm regla
3. Bordes de los filamentos: suaves (arriba) o separados/bristled (abajo)
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Clave para la identificación de las placas branquialesde Móbulas comercializadas
Pregunta 1:La placa branquial, es mas larga que 30cm y su coloración es uniforme (café oscuro/negruzca)?
SI = MantaNO = Ir a pregunta 2
Manta
Pregunta 2:Tienen las placas branquiales un borde central de coloración blanca y/o con separados filamentos branquiales?
SI = MobulaNO = Manta
Móbula
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Placas branquiales de Mantarayas -Manta birostris & M. alfredi
30cm regla
1. Tamaño placas branquiales = Largas2. Coloración placas branquiales = uniforme café oscuro/negro3. Filamentos branquiales = Suaves
Borde filamentosPlacas branquiales café/negro y borde de los filamentos suaves