10|Jurnal Sangkareang Mataram ISSNNo.2355-929

Volume 4, No. 3, September 2018 http://www.untb.ac.id/September-2018/

ANTIMICROBIAL RESISTANCE OF ESCHERICHIA COLI THAT ISOLATED FROM FECALSAMPLES OF BALI CATTLE AT LOCAL FARM ON LOMBOK ISLAND

Oleh :

Gunawan, Seli Nurmayani, Jayanti Mandrasari, Kunti Tirtasari, KholikFakultas Kedokteran Hewan, Universitas Nusa Tenggara Barat

Abstract: Lombok Province has Earth of Million Cattle Program. Antibiotic resistance that caused bymiss antibiotic used is a major problem in the world. The aim of this study was to the isolation ofEscherichia coli and their resistance of Antibiotic from fecal samples of Bali cattle of the Local farm onLombok Island to prevent an economic loss that caused by ineffective of treatment and to antibioticresistance in cattle and human. An observational survey with explorative laboratory was conducted in thisstudy. Fecal samples were collected during July 2018. A fecal sample was taken by rectal exploration.Thus fecal sample was put into Brain Infusion Heart tube media by cotton swabs and they were incubatedat 37℃ for 24 h to produce colony growth. The bacterial colonies were streaked on Petri dishes containingEosin Methylene Blue Agar and then incubated for 24 h at 37°C. The purified bacterial cultures were doneusing Gram staining and biochemical test. The E. coli isolated were performed by a standard NationalCommittee for Clinical Laboratory Standards (NCCLS) disk diffusion method. The result of this studyshowed that 94.4% E. coli isolates were resistance of Erythromycin, 61.1% were resistance ofErythromycin of Tetracycline, and 16.7% were resistance of Ciprofloxacin of 20 E.coli were isolated.

Keywords: Escherichia coli, resistance, Bali cattle, Lombok island

PENDAHULUAN

Target swasembada pangan pada tahun 2017telah dicanangkan presiden Jokowi. Provinsi NusaTenggara Barat (NTB) telah diakui sebagai daerahutama produksi ternak sapi dengan program ”BumiSejuta Sapi” (BSS) (JICA, 2010). Timbulnyaresistensi antibiotik akibat penggunaan antibiotikyang kurang bijaksana telah menjadi fenomenauntuk saat ini. Pengukuran tingkat resistensiterhadap antibiotik pada Escherichia coli (E. coli)dipandang sebagai indikator yang baik untukmelihat cara penggunaan antibiotik dan masalahresistensinya (Erfianto, 2014).

Data penelitian menyatakan bahwa hampir 50% antibakteri (antibiotik) yang digunakan padamanusia juga digunakan untuk hewan. E. colisebagai indikator terhadap kasus resistensiantibiotik karena E. coli umumnya mudahditemukan dalam feses dan telah dinyatakan bahwaE. coli yang memiliki gen resisten terhadapantibiotik dapat menyebarkan gen tersebut secarahorisontal ke bakteri zoonotik dan bakteri lain(EFSA dan ECDC, 2013). Hasil penelitian padasapi potong yang diimpor dari Western Australiadan Queensland pada periode 1 Januari sampai 15November 2013, menunjukkan bahwa isolatEscherichia coli yang berasal dari feses telahresisten terhadap eritromisin 49 (81.7%), cefalotin

22 (36.7%), ampisillin 15 (25%), streptomisin 2(3.3%), tetrasiklin 2 (3.3%), enrofloksasin 1(1.7%), dan trimetoprim-sulfametoksasol 1 (1.7%)(Erfianto, 2014). .

Dampak resistensi antibiotik pada bakteri E.coli dan bakteri pencernaan yang lain telah terlihatpada kesehatan hewan dan manusia. Dampakresistensi antibiotik pada hewan telah dinyatakandapat mengurangi efektivitas pengobatan padahewan yang sakit dan berpengaruh terhadapproduksinya (Cerniglia and Kotarski, 2005).Dampak resistensi juga dapat mengakibatkankegagalan pengobatan terhadap suatu penyakitpada manusia. Resistensi E. coli tersebut yangberasal dari peternakan dapat menginfeksimanusia melalui makanan dan mengkontaminasilingkungan. WHO juga telah menyatakan bahwapengobatan pada pasein yang resisten antibiotiktertentu akan lebih lama kesembuhannya padapasien yang tidak resisten antibiotik tertentu. WHOmencatat bahwa manusia dengan MRSA(methicillin-resistant Staphylococcus aureus)diestimasikan 64% mengalami kematian dibandingdengan yang tidak resisten Staphylococcus aureussaat terjadinya infeksi bakteri tersebut (WHO,2016).

ISSNNo.2355-9292 JurnalSangkareangMataram|11

http://www.untb.ac.id/September-2018/ Volume 4, No. 3, September 2018

Sebelum dampak akibat resistensi antibiotikitu terjadi pada lingkungan peternakan di Prov.NTB, khususnya Pulau Lombok sebagai lumbungternak dan kaya akan Kelompok Tani Ternak,maka deteksi E. coli yang resisten terhadapantibiotic yang sering digunakan untuk mengobatisapi Bali seperti erithromisin tetrasiklin, danciprofloksasin dari feses Sapi Bali sangatdiperlukan sebagai data dasar yang dapat dijadikandasar dalam acuan pengobatan dan penanggulanganresistensi antibiotik terhadap E.coli pada Sapi

MATERI DAN METODE

Jenis penelitian ini adalah epidemiologideskriptif dengan rancangan survei observasionalyang dilanjutkan dengan ekspolasi laboratoriumuntuk mengetahui resistensi antibiotic pada E.coliyang diisolasi dari feses sapai Bali.

Penelitian telah dilakukan pada bulan Juli2018. Target populasi dalam pengambilan sampelpada penelitian ini adalah populasi Sapi Bali yangberada dalam kandang Kelompok Tani TernakMenemeng (KT2M) yang berkapasitas 200 ekorsapi. Jumlah sampel adalah 20 sampel feses dari 20ekor sapi yang ditentukan dengan rumus metodedetect diseases oleh Martin et al. (1987).

Sampel feses Sapi Bali diambil melaluirectum, kemudian sampel diusap menggunakancotton swab steril kemudian dimasukkan dalammedia Brain Heart Infusion (BHI). Sampel fesesdalam BHI kemudian diinkubasi selama 24 jamdalam incubator pada suhu 37 °C. Kemudiansampel ditanam dalam Eosin Methylen Blue Agar(EMBA) dan diinkubasi selama 24 jam. E. coliyang tumbuh akan dilanjutkan dengan uji biokimia(Holt et al, 1994).

Uji resistensi E. coli terhadapa antibiotic(erithromisin tetrasiklin, dan ciprofloksasin)dilakukan dengan metode metode Kirby-Bauer. E.coli dari stock bakteri diambil 4-5 koloni bakteridengan ose bulat diinokulasikan kedalam 1 ml BHIdan diinkubasi selama 4-8 jam pada suhu 37° C. E.coli dalam BHI ditambah aquades steril sampaikekeruhannya sama dengan kekeruhan standartMcFarland (108 CFU/ml) kemudian diencerkan lagidengan 10 ml NaCl 0,9% fisiologis steril sampaikonsentrasi bakteri 106 CFU/ml. Kapas lidi sterildicelupkan ke dalam suspensi bakteri, kemudiandioleskan pada permukaan Media Agar MuellerHinton hingga rata. Disc antibiotik eritromisin,tetrasiklin dan ciproflokasin diletakkan di atasnya,diinkubasi pada suhu 370 C selama 18-24 jam.Kepekaan terhadap antibiotic tersebut dilakukandengan mengukur diameter zona hambat yangterbentuk. Penentuan sensitif (S), intermediet (I),dan resisten (R) ditentukan melalui ukuran zonahambat yang terbentuk berdasarkan rekomendasi

standar CLSI dan interpretasi hasil mengacu padaClinical and Laboratory Standards Institute (CLSI,2012). Kontrol positif yang dipergunakan dalampengujian resistensi ini menggunakan isolat E. colidari American Type Culture Colection (ATCC) tipe25922.

Data hasil penelitian akan disajikan secaradeskriptif hasil uji biokimia dan uji resistensi E.coliyang terisolasi terhadap antibiotic (erithromisintetrasiklin, dan ciprofloksasin) tdari feses Sapi Balidi Kelompok Tani Ternak Menemeng (KT2M).

HASIL DAN PEMBAHASAN

Penelitian ini berhasil mengisolasi 18 (90%)isolat E.coli dari 20 sampel feses. Morfologi kolonidari 18 isolat Escherichia coli, dapat dilihat padaGambar 1

Gambar 1. Morfologi E.coli pada EMBAKeterangan: a= sampel Escherichia coli positif,

b= control E.coli (ATCC25922)

Gambar 1 menunjukkan bahwa pada EosinMethylen Blue Agar (EMBA), E. coli yang tumbuhberwarna hijau metalik, berbentuk mukoid denganpusat warna gelap. Morfologi E. coli tersebutsesuai dengan penelitian yang menyatakan bahwakoloni E.coli yang diisolasi dari liter ayam padamedia EMBA berwarnya hijau metalik (Islam et al,2014). Hasil uji biokimia dari Escherichia colidapat dilihat pada Tabel 1

Tabel 1. Hasil Uji Biokimia dari E. coli

Uji Biokimia HasilGlukosaSukrosaAlkali FosfatSimon citrate AgarSulfide indole motilityTSIAUrea

+++-- + +A/A Gas +-

Hasil uji biokimia dari tabel 1 menyatakanbahwa E.coli yang terisolasi memfermentasiGlukosa, sukrosa, idol positif dan tidakmemproduksi urea. Hasil uji biokimia tersebutsesuai dengan Buxton and Fraser (1977) yangmenyatakan bahwa E. coli mempermentasiGlukosa dan sukrosa, serta idol positif .

a b

12|Jurnal Sangkareang Mataram ISSNNo.2355-929

Volume 4, No. 3, September 2018 http://www.untb.ac.id/September-2018/

Hasil isolasi yang dilanjutkan dengan ujibiokimia dari E. coli yang disisolasi bisadisimpulkan bahwa bakteri E. coli telah terisolasidari feses Sapi Bali di Kelompok Tani TernakMenemeng (KT2M), Lombok Tengah.

Hasil uji resistensi antibiotic dari bakteri E.coli yang tersisolasi dapat dilihat pada Tabel 2

Tabel 2. Hasil Uji Resistensi E. coli yang terisolasi

AntibioticSusceptibl

eIntermeda

teResistant

n % n % n %

Erythromycin

0 0.0 1 5,6 17 94,4

Tetracycline

4 22,2 3 16,7 11 61,1

ciprofloxacin

14 77,8 1 5,5 3 16,7

Hasil di atas menunjukan bahwa, dari 18isolat E. coli yang berhasil diisolasi menunjukkan94,4% E. coli yang telah diisolasi resisten terhadapErythromycin, 61.1% resisten terhadapTetracycline, and 16.7% resisten terhadapCiprofloxacin. Hasil penelitian ini hasilnya lebihtinggi dari penelitian yang menyatakan bahwa sapipotong yang diimpor oleh Indonesia dari WesternAustralia dan Queensland pada periode 1 Januarisampai 15 November 2013, menunjukkan bahwaisolat Escherichia coli yang berasal dari feses telahresisten terhadap eritromisin sebesar 81.7% dantetrasiklin sebesar 3.3% (Erfianto, 2014). Hal initerjadi mungkin disebabkan oleh penggunaanantibiotic pada sapi di pulau Lombok lebih seringdari Australia.

Hasil uji tersebut menunjukkan bahwa E. colidari feses sapi telah resisten terhadap antibioticyang sering digunakan dalam pengobatan, apabilapengobatan menggunakan antibiotic erithromisin,tetrasiklin, dan ciprofloksasin akan tidak berhasil.E. coli pada feses apabila mengkontaminasimakanan manusia akan mengakibatkan sulitnyamengobati penyakit yang timbul dari E. colitersebut.

PENUTUP

Penelitian ini telah mengisolasi 18 (90%)isolat Escherichia coli dari 20 sampel feses SapiBali pada Kelompok Tani Ternak Menemeng(KT2M) dan isolate E. coli tersebut telah resistenterhadap antibiotic Erythromycin, Tetracycline, danCiprofloxacin.

Berdasarkan hasil penelitian dalampengobatan penyakit pada sapi Bali di LombokTengah disarankan tidak menggunakan antibiotikErythromycin, Tetracycline, dan Ciprofloxacin.

UCAPAN TERIMAKASIH

Peneliti mengucapakan terima kasih kepadaKementrian Riset Teknologi dan PendidikanTinggi Republik Indonesia (KEMENRISTEKDIKTI) yang telah membiayai penelitian ini. Timpeneliti juga menyampaikan banyak terimakasihkepada badan kesatuan bangsa dan politik dalamnegeri (BANGKESPOLDAGRI) Provinsi NusaTenggara Barat yang telah member izin penelitianini, terimakasih kepada Balai LaboratoriumKesehatan Pengujian dan Kalibrasi (BLK-PK)Nusa Tenggara Barat yang telah memberikan iizinmelakukan pengujian dan terimakasih kepadaKelompok Tani Ternak Menemeng (KT2M) yangtelah meemberikan izin pengambilan sampel.

DAFTAR PUSTAKA

Buxton, A and Fraser, G. 1977. AnimalMicrobiology. Vol. 1. Blackwell ScientificPublications, Oxford, London, Edinburg.Melbourne. pp. 103-115.

Cerniglia, C. E., Kotarski, S. 2005. Approaches inthe safety evaluations of veterinaryantimicrobial agents in food to determine theeffects on the human intestinal microflora. J.Vet. Pharmacol. Therap. 28:3–20

Clinical and Laboratory Standards Institute (CLSI).2012. Performance Standards for AntimicrobialSusceptibility Testing; Twenty-SecondInformational Supplement. West Valley (US):Clinical and Laboratory Standards Institute.

(EFSA and ECDC) European Food SafetyAuthority dan European Centre for DiseasePrevention and Control. 2013. The EuropeanUnion summary report on antimicrobialresistance in zoonotic and indicator bacteriafrom humans, animals and food in 2011.JEFSA 11(5):3196-3359.

Erfianto, G.I. 2014. Escherichia coli yang Resistenterhadap Antibiotik yang Diisolasi dari SapiPotong yang Diimpor melalui PelabuhanTanjung Priok Jakarta (Thesis). InstitutPertanian Bogor, Bogor.

Holt, J.G., Krieg, N.R., Sneath, P., Staley, L.T andWilliams, S.T. 1994. FamilyEnterobacteriaceae; in Bergey's manual ofdeterminative bacteriology (9th edition.),edited by W.R. Hensyl (Lippincott Williams& Wilkins, Baltimore, Maryland, pp. 175-194.

Islam, M.M., Islam, M.N., Sharifuzzaman,Fakhruzzaman., M. 2014. Isolation andidentification of Escherichia coli andSalmonella from poultry litter and feed.

ISSNNo.2355-9292 JurnalSangkareangMataram|13

http://www.untb.ac.id/September-2018/ Volume 4, No. 3, September 2018

International Journal of Natural and SocialSciences 1: 1-7

JICA, 2010. Pengembangan NTB sebagai “BumiSejuta Sapi” ; JICA Mendukung StudiRencana Aksi untuk Program Sapi Potong.Japan International Cooperation Agency(JICA) Indonesia Office.

Martin, S.W., Meek, A.H., Willeberg, P. 1987.Veterinary Epidemiology: Principles andMethods. Iowa (US): Iowa State UniversityPr..

(WHO) World Health Organization. 2016Antimicrobial resistance.http://www.who.int/mediacentre/factsheets/fs194/en/